專利名稱：包含冷凍干燥的蛋白組合物、給藥體積小于0.5ml的單劑量注射器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及單劑量注射器，其中包含裝有冷凍干燥組合物的第一個隔室，和裝有注射體積小于0．5ml的再配制水溶液的第二個隔室，所述組合物包含小于1．4mg的蛋白質(zhì)、氨基酸和穩(wěn)定劑，其中蛋白與氨基酸對穩(wěn)定劑的重量比小于1．5，并且在第一個隔室中，干燥成分的重量與結(jié)塊體積之比大于12mg／ml。
當(dāng)制備裝有一定治療量蛋白質(zhì)的注射器時，重要標(biāo)準(zhǔn)是-在再配制前，粉末具有可接受的穩(wěn)定性。制劑的質(zhì)量至少應(yīng)當(dāng)與市售冷凍干燥產(chǎn)品一樣好。干燥產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)能在隔室溫保存，至少應(yīng)當(dāng)保存一定時間。-當(dāng)用于患者時，沒有任何疼痛，例如通過使用等滲溶液和小量注射體積來防止疼痛。-具有可接受的再配制時間。US4968299描述了制備易于降解的物質(zhì)的注射液的裝置，該裝置的商品名為KabiPen。由于有了KabiPen，患者獲得了相當(dāng)易于操作的裝置。該裝置包含雙-隔室安瓿Genomix，其中一個隔室包含作為冷凍干燥粉末的hGH(人生長激素)，另一個隔室包含再配制溶液?；颊咴谑褂们霸倥渲圃摦a(chǎn)品。當(dāng)在2-8℃貯存時，該再配制產(chǎn)品能穩(wěn)定地保存3周。該裝置是多劑量注射器。
在市場上也有用于生長激素的單劑量裝置，KabiQuick，其注射體積為0．5ml或0．5ml以上。
在專利申請WO 89／09614中，Genentech公開了一種穩(wěn)定的hGh制劑，其中包含甘油、甘露糖醇和緩沖劑，在優(yōu)選實(shí)施方案中，還加入了非離子表面活性劑例如吐溫80。磷酸鈉被建議用作緩沖劑。在冷凍干燥制劑中和再配制時，制劑的穩(wěn)定性增加了。組分的最終比例是用凝膠過濾柱通過緩沖交換獲得的。
沒有提及對患者的注射體積，也沒有提及該蛋白的量。
在專利申請WO 91／18621(GENENTECH)中，甘露糖醇被提及用作穩(wěn)定GH和IGF的載體。
專利申請WO 94／03198(GENENTECH)公開了一種含水制劑，其中含有GH、緩沖劑、表面活性劑和甘露糖醇。
人們需要具有下述特征的單劑量注射器注射體積小于0．5ml，每劑中含少量蛋白，可通過冷凍干燥制得而沒有制備問題。
我們注意到，當(dāng)制備出含少量蛋白并且注射體積很小的單劑量注射器時，在把第一個隔室中的溶液冷凍干燥時會產(chǎn)生問題。
冷凍干燥結(jié)塊的基層是非粘附的，并且令人驚奇地產(chǎn)生散裂作用。結(jié)塊在隔室中破裂，因此蛋白將丟失。這不能令人接受，不僅出于制備原因，而且當(dāng)制備包含昂貴蛋白的藥物時還出于成本原因。因此必須找到解決該問題的方法。
當(dāng)制備KabiQuick或其它冷凍干燥蛋白產(chǎn)品時，不會發(fā)生這種問題。我們注意到這些產(chǎn)品都具有高含量蛋白和氨基酸?，F(xiàn)在對于每劑量中含有少量蛋白所產(chǎn)生的問題可通過本發(fā)明來解決。
發(fā)明詳述我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，制備具有低含量蛋白和小注射體積的所需單劑量注射器的一種可能方法是，采用如權(quán)利要求所述的生長激素的量、干燥組分含量、和蛋白含量與其它組分的比例。
本發(fā)明因此涉及單劑量注射器，其中包含裝有冷凍干燥組合物的第一個隔室，和裝有注射體積小于0．5ml的再配制水溶液的第二個隔室，所述組合物包含小于1．4mg的蛋白質(zhì)、氨基酸和穩(wěn)定劑，其中蛋白與氨基酸對穩(wěn)定劑的重量比小于1．5，并且在第一個隔室中，干燥成分的重量與結(jié)塊體積之比大于12mg／ml。
本發(fā)明具有新組合物的新裝置可簡單地制得，并且具有良好的貯存穩(wěn)定性。
蛋白和氨基酸對穩(wěn)定劑的比例優(yōu)選等于或小于1．3。再配制水溶液的體積優(yōu)選小于0．3ml。該溶液可含有防腐劑和緩沖劑。
穩(wěn)定劑是指膨脹劑、基層構(gòu)建劑和／或結(jié)塊形成劑例如甘露糖醇，但不是氨基酸，優(yōu)選使用的氨基酸是甘氨酸，但是也可以使用其它氨基酸例如丙氨酸。
等滲劑是指使注射液達(dá)到適當(dāng)滲透壓的物質(zhì)。
蛋白優(yōu)選為重組或天然生長激素，即可以是人也可以是動物生長激素例如人生長激素(hGH)、牛生長激素(bGH)和豬生長激素(pGH)。
HGH是由具有191個氨基酸的單鏈構(gòu)成的蛋白。該分子是通過兩個二硫橋交聯(lián)的，并且單體形式的分子量是22kDa。
有兩類市售的治療用重組hGH制劑真正的重組hGH制劑，例如Genotropin，Pharmacia & Upjohn AB，和在N-末端有附加蛋氨酸殘基的類似物，例如Somatonorm。
hGH在患有垂體機(jī)能減退性侏儒癥或特納綜合征的病人中被用于刺激線性生長，但是也提出了其它適應(yīng)征。
在下述實(shí)施例中，使用重組制得的hGH(GH)。
用于填充的hGH溶液是由本體溶液純化過程中最后的凝膠過濾步驟獲得的。加入緩沖劑以調(diào)節(jié)最終的賦形劑濃度，之后用緩沖劑將溶液稀釋至適當(dāng)?shù)鞍诐舛取?br> 結(jié)塊體積是指冷凍干燥前的調(diào)劑體積。所用溶劑是水。
實(shí)施例F、I和K是依據(jù)本發(fā)明的。

制劑A和B導(dǎo)致散裂。
為了避免散裂問題，通過加入甘露糖醇來增加重量／結(jié)塊調(diào)節(jié)比例，見下表。

然而，仍然存在散裂問題。制劑C、D和E都導(dǎo)致散裂。通過降低結(jié)塊體積來增加重量／結(jié)塊體積比例。

結(jié)果是，體積越小，結(jié)塊外觀就越好。結(jié)論是，對于小量生長激素，必須通過降低填充體積來增加重量／結(jié)塊體積比例。通過增加甘露糖醇的量來增加重量／結(jié)塊體積比例不成功。
在下兩個實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這些結(jié)果，見下表。

結(jié)論實(shí)驗(yàn)證實(shí)了通過降低結(jié)塊體積來增加重量／結(jié)塊體積比例的觀察。體積越小，結(jié)塊外觀就越好。因此，對于小量生長激素，必須通過降低填充體積來增加重量／結(jié)塊體積比例。通過增加甘露糖醇的量來增加重量／結(jié)決體積比例不成功。
其中蛋白和氨基酸對穩(wěn)定劑的比例小于1．5的制劑是有效的。
權(quán)利要求
1．單劑量注射器，其中包含ⅰ)裝有冷凍干燥組合物的第一個隔室，所述組合物包含小于1．4mg的蛋白質(zhì)、氨基酸和穩(wěn)定劑，其中蛋白與氨基酸對穩(wěn)定劑的重量比小于1．5，并且干燥成分的重量與結(jié)塊體積之比大于12mg／ml；ⅱ)裝有注射體積小于0．5ml的再配制水溶液的第二個隔室。
2．權(quán)利要求1的注射器，其中在第一個隔室中的干燥成分的重量與結(jié)塊體積之比大于15mg／ml。
3．權(quán)利要求1或2的注射器，其中所述蛋白質(zhì)是生長激素，優(yōu)選為人生長激素。
4．權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的注射器，其中所述氨基酸是甘氨酸。
5．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的注射器，其中所述穩(wěn)定劑是甘露糖醇。
6．權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的注射器，其中第一個隔室包含緩沖劑，例如磷酸鈉。
7．權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的注射器，其中第二個隔室包含等滲劑。
8．權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的注射器，其中第一個隔室包含甘露糖醇和緩沖劑如磷酸鈉。
全文摘要
本發(fā)明涉及單劑量注射器,其中包含裝有冷凍干燥組合物的第一個隔室,和裝有注射體積小于0.5ml的再配制水溶液的第二個隔室,所述組合物包含小于1.4mg的蛋白質(zhì)、氨基酸和穩(wěn)定劑,其中蛋白與氨基酸對穩(wěn)定劑的重量比小于1.5,并且在第一個隔室中,干燥成分的重量與結(jié)塊體積之比大于12mg/ml。
文檔編號A61M5/19GK1280511SQ9881159
公開日2001年1月17日 申請日期1998年11月19日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月28日
發(fā)明者K·里姆萊爾, E·弗洛林－羅伯森, E·霍克比, U·尼爾森, A·斯特羅姆 申請人:法瑪西雅和厄普約翰公司