專利名稱：治療肝臟腫瘤的方法和其中所用的藥學(xué)組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療腫瘤的方法，并特別涉及治療肝臟中的腫瘤的方法。本發(fā)明還涉及適于這類治療的組合物。
肝細(xì)胞癌(原發(fā)性肝癌)世界上癌癥死亡的最常見原因之一，估計(jì)每年全世界發(fā)病率為100萬(Lencioni R & Bartolozzi C，癌癥雜志，第10卷，1—6頁)。盡管現(xiàn)在在西方這種病變得越來越引人注意，但在亞洲國家它是最常見的，而且各國發(fā)病率也很不一樣。目前尚無有效治療方法可供選擇。若不經(jīng)治療，這種情況下的平均存活期為3個(gè)月。肝切除也許能讓近40％的病例擁有5年存活期，但幾乎沒有病人具備進(jìn)行這種治療所需的條件。全身化療對原發(fā)性肝癌的治療效果很有限，而目前還不斷有人在嘗試采用經(jīng)動(dòng)脈化學(xué)成栓技術(shù)(TAE)直接將具有藥物學(xué)活性的試劑運(yùn)送至肝臟。TAE將試劑經(jīng)肝動(dòng)脈向肝腫瘤的選擇性運(yùn)送和因此而在腫瘤中的濃縮與腫瘤的栓塞形成和因此而由局部缺血所致壞死結(jié)合在一起。很多化療劑通過這種方式運(yùn)送，包括阿霉素、表阿霉素和順式鉑氨(Choi，癌癥控制雜志，卷3，407-413頁，1996)?；焺┏Ｓ迷煊皠┑庥?一種碘標(biāo)記的罌粟籽油脂肪酸乙酯)乳化或溶解。腫瘤對碘化油的吸收被認(rèn)為將延長化療劑與腫瘤接觸的時(shí)間，而介質(zhì)的不透射線特點(diǎn)使得有可能以放射照相術(shù)監(jiān)控灌注的進(jìn)展。
維生素D是由活化的5—碳單位組成的一種類異戊二烯。維生素D的最常見形式是維生素D3、或膽鈣化固醇。維生素D3在膽固醇生在肝臟中物合成的中間產(chǎn)物7—脫氫膽固醇的生物合成中產(chǎn)生。維生素D3在肝臟中經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化成血液循環(huán)中維生素D的主要形式25—羥膽鈣化固醇[25(OH)D3]。25(OH)D3經(jīng)腎臟轉(zhuǎn)化產(chǎn)生兩種主要的二羥化代謝產(chǎn)物，即1，25-二羥膽鈣化固醇[1，25(OH)2D3]和24，25-二羥膽鈣化固醇[24R，25(OH)2D3]。
1，25(OH)2D3是維生素D3的生物學(xué)活性最強(qiáng)的天然形式，它經(jīng)血流轉(zhuǎn)運(yùn)至其位于腸粘膜細(xì)胞中的主要作用位點(diǎn)，也是鈣吸收的受刺激處。因此維生素D3可看成一種激素原，因?yàn)樗鼘⑥D(zhuǎn)化成作用類似于類固醇激素的一種代謝物。它尤其在骨的無機(jī)質(zhì)合成中調(diào)節(jié)鈣和磷酸的代謝。
1，25(OH)2D3和維生素D3的其它一些類似物在治療時(shí)用于抵消維生素D膳食性缺乏(佝僂病)的有害效應(yīng)，或用于治療以維生素D的合成或應(yīng)答異常為特征的疾病如血磷酸鹽過少性抗維生素D佝僂病和腎性骨營養(yǎng)不良癥(腎病性佝僂病)。另一項(xiàng)在鈣化相關(guān)性疾病骨質(zhì)疏松癥中的應(yīng)用與確信的維生素D營養(yǎng)充足截然不同。此時(shí)的基本原則是直接抑制甲狀旁腺的功能并減少骨質(zhì)更新(Goodman & Gilman，治療的藥理學(xué)原理，1992年出版，TheMcGraw Hill Companies Inc.)。最后，一項(xiàng)維生素D3的最新應(yīng)用是治療皮膚病牛皮癬。
實(shí)驗(yàn)性研究顯示維生素D3受體出現(xiàn)在多種細(xì)胞類型上，因此認(rèn)為維生素D內(nèi)分泌系統(tǒng)參與對很多并非直接涉及內(nèi)環(huán)境鈣平衡的基礎(chǔ)性細(xì)胞加工的調(diào)節(jié)(Pols，HAP等，類固醇生物化學(xué)雜志，卷37，873-876頁，1990)。在攜帶維生素D3受體的細(xì)胞中很多是惡性腫瘤組織或衍生自腫瘤的細(xì)胞系。一些癌細(xì)胞上受體的出現(xiàn)在很多病例中顯示有功能性意義，而且文獻(xiàn)中包含關(guān)于維生素D3及其類似物能抑制黑色素瘤、骨肉瘤和乳腺癌細(xì)胞(Deluca HF &Ostrem V，實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)和生物學(xué)進(jìn)展，卷206，413-429頁，1986)、結(jié)腸腺癌細(xì)胞(Cross HS等營養(yǎng)學(xué)雜志，卷127增刊，2004-2008頁，1995)和肝腫瘤細(xì)胞(Tanaka Y等，生化藥理學(xué)，卷38，449-453頁，1989)增殖的報(bào)道。
這一體外效應(yīng)使人對維生素D3及其類似物在癌癥治療中的應(yīng)用產(chǎn)生希望。維生素D3化合物被列歸“非傳統(tǒng)性癌癥療法”(BritishColumbia Cancer Agency publication；600 West 10th Ave，溫哥華，BC，加拿大)，已有人嘗試臨床試驗(yàn)以顯示效應(yīng)。不幸的是，應(yīng)用維生素D3的天然類似物如1，25(OH)2D3的嘗試與癌癥的成功治療無關(guān)，而且事實(shí)上很少有人嘗試。這主要是由于發(fā)現(xiàn)由維生素D3引起的癌癥細(xì)胞生長的減少必需前生理學(xué)(supraphysiological)濃縮(Pols等一出處同上)。這樣做的結(jié)果是在維生素D3表達(dá)其治療的抗腫瘤特性之前，它在體內(nèi)鈣平衡中的效應(yīng)將過量表達(dá)并達(dá)到危險(xiǎn)水平，導(dǎo)致高鈣血癥，有危及生命的毒性。
在一項(xiàng)為克服此問題，并將維生素D3的高鈣血癥效應(yīng)從其對細(xì)胞分化的作用中分離而進(jìn)行的嘗試中，制藥業(yè)作出很大的努力尋找可避免鈣代謝效應(yīng)并可能因此而有用于癌癥或其它疾病治療的合成類似物。這一嘗試已取得一些有限的成功。例如，包含一個(gè)22-23雙鍵、一個(gè)24(S)-羥基功能性基團(tuán)、而且碳25-27已摻入環(huán)丙烷的環(huán)中的類似物鈣泊三醇已經(jīng)合成。該化合物具有與1，25(OH)2D3相似的受體親和力，但其調(diào)節(jié)鈣代謝的活性不足1，25(OH)2D3的1％。鈣泊三醇作為牛皮癬的潛在治療劑已進(jìn)行了深入研究(Goodman & Gilman，治療的藥理學(xué)原理，McGraw Hill出版，1992)。盡管鈣泊三醇在鈣代謝中的效應(yīng)已減小，它仍然主要用于避免全身性高鈣血癥。聲稱對鈣代謝的效應(yīng)減小、可用于腫瘤治療的合成性維生素D類似物實(shí)例也已經(jīng)公開(美國專利第4,891,364號(hào)，1990年1月2日)。也有人嘗試局部治療某些癌癥。Bower M等主要用鈣泊三醇治療乳腺癌(柳葉刀，卷3378743期，701-702頁)。所治療的19例病人中，只有3例顯示有明顯應(yīng)答，1例有微弱應(yīng)答。而且，盡管這種合成類似物對鈣代謝的效應(yīng)大大減小，又盡管治療僅限于乳腺癌損傷部位的周圍皮膚，19例病人中仍有2例在治療期間出現(xiàn)高鈣血癥。
因此，盡管基礎(chǔ)研究者有令人感興趣的發(fā)現(xiàn)，制藥業(yè)也付出了極大的努力，維生素D化合物在癌癥治療中的應(yīng)用仍未成功。使維生素D3的應(yīng)用如此困難的關(guān)鍵限制可以是活性的固有缺陷，也可以是較低的治療指數(shù)(有效劑量對毒性劑量之比)。
我們驚訝地發(fā)現(xiàn)，向肝臟區(qū)域性運(yùn)送維生素D化合物如維生素D3或其前體、代謝物或類似物，即使該維生素D化合物為高劑量也可避免高鈣血癥的產(chǎn)生。例如，不顧這樣一個(gè)事實(shí)口服和靜脈施與1，25(OH)2D3治療的劑量通常在0.5至3mcg/天(正處于有發(fā)生高鈣血癥的明顯危險(xiǎn)的水平之時(shí)或之外)，我們顯示(實(shí)施例2)以至少10mcg/天的劑量經(jīng)動(dòng)脈向肝臟給藥未發(fā)現(xiàn)任何全身毒性。
這一發(fā)現(xiàn)的一個(gè)合理性結(jié)論是施與如此高劑量的維生素D化合物后避免了高鈣血癥歸因于維生素D化合物在肝臟中的停留時(shí)間延長，或在肝臟中降解(首過效應(yīng))。但這些現(xiàn)象因以下原因無一能進(jìn)行預(yù)測所提供的劑量遠(yuǎn)高于生理水平，并因此，盡管動(dòng)脈輸入可使維生素D化合物與攜帶維生素D受體的細(xì)胞接觸，也不能指望它們能抓住所有維生素D化合物。關(guān)于降解作用，肝臟的主要代謝活性適于經(jīng)肝門途徑進(jìn)入的化合物，不適于肝動(dòng)脈。而且，如上所述，肝臟是活化維生素D的部位之一，不必指望它能從血液中清除維生素D化合物。維生素D化合物在肝動(dòng)脈運(yùn)送后誘導(dǎo)較低高鈣血癥的確切原因尚不清楚。
向肝臟區(qū)域性運(yùn)送維生素D3不僅顯示安全，而且在7例病人中有4例至少對治療產(chǎn)生了有限的應(yīng)答，就如他們的腫瘤標(biāo)志物增長率所指示的那樣。
因此，我們不僅證實(shí)了以區(qū)域性運(yùn)送的方式向肝臟施與大劑量維生素D化合物的令人驚訝的能力，還獲得了對疾病進(jìn)展的有利影響的指征。
相應(yīng)地，本發(fā)明的第一方面在于治療受試者肝臟中腫瘤的方法，包括向受試者施與藥學(xué)有效量的選自由維生素D、維生素D的前體、或其代謝物或類似物組成之組合的至少一種維生素D化合物，其中該維生素D化合物向肝臟區(qū)域性運(yùn)送。
維生素D化合物的區(qū)域性運(yùn)送可通過動(dòng)脈運(yùn)送或經(jīng)肝門靜脈的運(yùn)送實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選維生素D化合物經(jīng)動(dòng)脈運(yùn)送。尤其優(yōu)選維生素D化合物經(jīng)肝動(dòng)脈的動(dòng)脈內(nèi)灌注運(yùn)送。
本發(fā)明的治療方法可用于治療原發(fā)性或繼發(fā)性肝臟癌癥。本發(fā)明的方法尤其適用于治療受試者體內(nèi)的肝細(xì)胞癌(原發(fā)性肝癌)。本發(fā)明的方法還可用于治療肝臟中轉(zhuǎn)移形式的繼發(fā)性肝癌，例如，結(jié)直腸癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌或腎癌的轉(zhuǎn)移。繼發(fā)性癌可能是肉瘤。本發(fā)明的方法可用于治療肝臟中的原發(fā)性或繼發(fā)性肝癌。
盡管維生素D化合物可為維生素D3的類似物，但優(yōu)選為維生素D3或其前體或代謝物。
維生素D類似物化合物可選擇任意適當(dāng)?shù)念愃莆?，?，25(OH)2D3(1-25-二羥膽鈣化固醇)、OCT(22-Oxacalcitirol)、MC903(鈣泊三醇)、或EB1089(1α.25(OH)222.24二烯24.26.27trihomo D3)。
維生素D的代謝物可以是維生素D或它的類似物的羥化或其它產(chǎn)物。
維生素D化合物對腫瘤的效應(yīng)很大程度上依賴于藥物劑量，因此向腫瘤運(yùn)送高濃度維生素D化合物將十分有利。但維生素D化合物在傳統(tǒng)載體如水性介質(zhì)中的有限溶解使得可向腫瘤運(yùn)送的化合物的量有上限。
我們發(fā)現(xiàn)很高濃度的維生素D化合物如1，25(OH)2D3可通過將化合物溶解在制藥可接受的油中而獲得。例如1，25(OH)2D32mg易溶于碘油1ml中。這種高溶解性可以使向腫瘤運(yùn)送的維生素D化合物具有非常高的濃度。用油做維生素D化合物的載體的另一好處是一些油在某些腫瘤中濃縮，從而可使維生素D化合物的腫瘤濃度達(dá)到非常高。而且，獲得高濃度的另一好處是，一些低濃度無活性的維生素D化合物當(dāng)用油溶解時(shí)獲得較高濃度而變得有活性。
相應(yīng)地，本發(fā)明的第二方面在于第一方面的治療方法，其中維生素D以溶于藥學(xué)可接受之油中的維生素D化合物溶液形式運(yùn)送。
油可以是碘化油如碘油，盡管顯然碘的存在可能使灌注便于用放射照相術(shù)監(jiān)控，但它并非油劑的必需特征。而且油劑只需(1)摻入大量維生素D化合物和(2)，若有必要，被所治療的腫瘤吸收。因此，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，載體也可包括其它油和制藥業(yè)中用到的經(jīng)化學(xué)修飾的油如Cremophor(聚氧乙基化[polyoxyethylate]蓖麻油)。用于動(dòng)脈內(nèi)腫瘤治療的油的實(shí)例公布于美國專利第4,578,391號(hào)，但該專利只涉及適用于灌注的保守性油可溶或水可溶抗腫瘤藥物的溶解。已知用于靜脈注射的制劑(由Abbot實(shí)驗(yàn)室出售的Calcijexcalditriol注射液，述于醫(yī)師實(shí)用指南，出處同上，以及在美國專利第4,308,264號(hào)中所公布的制劑)均為水溶液，它們在癌癥治療中的應(yīng)用尚未見報(bào)道。而且，它們的低鈣三醇含量將使它們特別不適于經(jīng)動(dòng)脈向肝臟施用。更合適的載體包括能合并諸如脂質(zhì)體和微乳劑(microemulsion)這樣的親脂物質(zhì)的多組分系統(tǒng)。
三苯氧胺(一種雌激素受體拮抗物)已顯示能顯著但溫和地改進(jìn)人類肝癌的存活。它還顯示能增加維生素D受體在乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)。我們相信三苯氧胺對肝癌的作用可歸因于它對維生素D受體表達(dá)的影響，使腫瘤對內(nèi)源性維生素D更加敏感。故我們希望三苯氧胺和雌激素或雌激素樣化合物能顯著性增強(qiáng)對諸如肝癌這樣的癌癥的維生素D治療效果并在使用低劑量維生素D化合物的同時(shí)顯著性增強(qiáng)應(yīng)答反應(yīng)，從而避免高鈣血癥和其它并發(fā)癥。
相應(yīng)地在第三方面，本發(fā)明在于與本發(fā)明第一和第二方面一致的治療方法，該方法進(jìn)一步包括施用能增強(qiáng)維生素D受體表達(dá)的化合物。
可增強(qiáng)維生素D受體表達(dá)的化合物可能是三苯氧胺或其它雌激素或雌激素樣化合物。
可增強(qiáng)維生素D受體表達(dá)的化合物可在施用維生素D化合物之前、之時(shí)或之后施用。
本發(fā)明的第四方面在于適于治療肝臟中腫瘤的組合物，該組合物包括藥學(xué)有效量的、選自下組的、溶于藥學(xué)可接受的油中的維生素D化合物，該組合為維生素D、維生素D的前體、或其代謝物或類似物。
藥學(xué)可接受的油為某種碘化油如碘化罌粟籽油。藥學(xué)可接受的油可能是非碘化油，如罌粟籽油。
在圖中

圖1顯示1，25二羥維生素D3體外對肝癌HepG2細(xì)胞生長的影響。
圖2顯示1，25二羥維生素D3體外對人類結(jié)腸癌細(xì)胞LoVo處理10天后對其生長的影響。
圖3-7顯示按本發(fā)明的方法進(jìn)行治療期間病人血清鈣水平之圖。
圖8-9顯示按本發(fā)明進(jìn)行治療期間病人CEA水平之圖。
圖10-11顯示第一和第二只豬分別經(jīng)靜脈和肝動(dòng)脈灌注的鈣水平。
圖12顯示3H維生素D3在水和碘油中的溶解度。
為使本發(fā)明更易于理解，我們提供以下非限制性實(shí)施例。
實(shí)施例1—對人類肝癌細(xì)胞系體外生長的影響對一定濃度范圍的1，25(OH)2維生素D3對人類肝癌細(xì)胞系HepG2體外生長的影響進(jìn)行了研究。生長抑制作用被肝癌細(xì)胞對胸苷吸收的減少所證實(shí)(見圖1)。這里所報(bào)道的抑制作用之大小令人驚奇，觀察到對生長產(chǎn)生95％的抑制作用，盡管是劑量依賴型的(10-11M濃度則有效性明顯減少)。雖然維生素D類似物已顯示能抑制其它類型的癌癥，但這是首次證實(shí)在肝癌中的作用。
我們發(fā)現(xiàn)對其它癌癥抑制作用的大小，如對結(jié)直腸癌生長的50-60％抑制作用已算是較好應(yīng)答(見圖2)。1，25(OH)2D3對結(jié)直腸癌的作用比對比實(shí)驗(yàn)中所用類似物(EB1089)小，如下表所示。
1，25(OH)2D3和EB1089對人類結(jié)直腸癌細(xì)胞LoVo和人類肝癌HepG2細(xì)胞的作用。結(jié)果表示為相應(yīng)于對照的百分?jǐn)?shù)±SEM
用D3或EB1089處理LoVo細(xì)胞10天，處理HepG2細(xì)胞5天。維生素D3類似物EB1089對其它肝癌細(xì)胞系的作用見下表。
所用實(shí)驗(yàn)均在5％活性炭處理的培養(yǎng)基中進(jìn)行。均為5天。每一細(xì)胞系的系列結(jié)果為重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果)作用速度也很不同，肝癌中在24小時(shí)測得抑制作用而結(jié)直腸癌中的作用較緩和，在5天時(shí)測得并且通常只到第10天便清除。
維生素D3和其類似物在肝癌中所獲效應(yīng)比其它癌癥大如此之多的機(jī)制，我們相信是由于肝癌細(xì)胞產(chǎn)生了活性代謝物。
實(shí)施例2—測定1，25(OH)2D3的首過效應(yīng)已知象calcitrolic acid和其它種種偶聯(lián)化合物的主要排泄途徑是在膽汁中。我們假設(shè)如果限制1，25(OH)2D3以免達(dá)到較高的全身濃度并因此造成高鈣血癥，肝臟中的這一分解代謝將導(dǎo)致首過效應(yīng)。
進(jìn)行了兩項(xiàng)試驗(yàn)以測定這種首過效應(yīng)是否存在，以及在臨床上是否有用。試驗(yàn)是這樣的1.進(jìn)行一期臨床試驗(yàn)觀察肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3的效果。
2.建立豬動(dòng)物模型比較1，25(OH)2D3靜脈施與與靜脈灌注的效果。
這些試驗(yàn)的方法和結(jié)果概述如下一期臨床試驗(yàn)進(jìn)行了肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3給藥的一期臨床試驗(yàn)。
動(dòng)物1.確立1，25(OH)2D3肝動(dòng)脈灌注治療肝臟癌癥的安全性，尤其是它對血清鈣水平的影響。
2.通過監(jiān)控腫瘤標(biāo)志物水平及其上升率調(diào)查這種灌注對肝臟癌癥的影響。
受試者有肝癌或有結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移、對目前化療方案不能應(yīng)答的病人共7例。
受試者的詳細(xì)情況見下表
治療概述見下表
方法每例病人經(jīng)肝動(dòng)脈導(dǎo)管灌注1，25(OH)D3一周或連續(xù)四周。定期分析LFT、UEC、鈣和磷酸鹽水平、AFP或CEA水平。
病人1和2首先給予1，25(OH)2D30.2mcg/天或4天，然后0.5mcg/天又3天，均通過臨時(shí)肝動(dòng)脈導(dǎo)管給予。
病人3、5和6首先給予2mcg/天，再5mcg/天持續(xù)4周。休息4周使受到誘導(dǎo)的任何肝臟酶類均減少后，重新開始以10mcg/天的劑量進(jìn)行治療，并迅速將劑量提高到15mcg/天。
病人4由于在治療前有paraneoplastic現(xiàn)象而發(fā)生高鈣血癥，因此給予較低劑量。始于0.5mcg/天，迅速增加到2mcg/天，然后增加到5mcg/天。
病人7開始實(shí)行與病人3、5和6一樣的劑量方案，但在開始10mcg/天的劑量治療之前因病情惡化而終止試驗(yàn)。
結(jié)果測量鈣水平—反映高鈣血癥的進(jìn)展CEA或AFP水平—反映腫瘤對治療產(chǎn)生應(yīng)答的證據(jù)UEC和LFT—反映對肝功能和腎功能的不期望的影響。
結(jié)果7例病人完成了全部試驗(yàn)。無一例病人對灌注出現(xiàn)任何不期望的不利反應(yīng)或副作用。也無一例病人出現(xiàn)肝功能和腎功能的紊亂。
病人1或2均未在低劑量治療期間出現(xiàn)高鈣血癥(結(jié)果未顯示)。
圖3中帶點(diǎn)的線表示血清鈣的正常范圍。受試者1和2于0—7天接受治療。受試者3—7于0—28天接受治療。
圖3和4證實(shí)以5mcg/天肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3不會(huì)導(dǎo)致高鈣血癥。正如圖3所證實(shí)，治療前已有高鈣血癥的病人治療時(shí)鈣水平并未升高。
圖5、6和7證實(shí)高達(dá)10mcg/天的劑量可通過該途徑給予而不會(huì)產(chǎn)生高鈣血癥。這些圖還顯示3例接受1，25(OH)2D315mcg/天的病人中有2例發(fā)生高鈣血癥。
圖8和9具體描述了所有7例病人的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)答。正如圖7所見，病人1的標(biāo)志物水平在治療開始時(shí)戲劇性地上升，但隨后又戲劇性地以相同方式回落。病人2的標(biāo)志物水平?jīng)]有下降但上升率隨時(shí)間變得平穩(wěn)。病人3的標(biāo)志物水平先戲劇性回落，但隨后重新上升。這次上升發(fā)生在出現(xiàn)肝外疾病的同時(shí)。圖9顯示，病人5和6就CEA水平上升率而言地治療未發(fā)生任何應(yīng)答，但病人7的CEA水平上升率在某種程度上可能指示有應(yīng)答。
討論和結(jié)論我們證實(shí)經(jīng)肝動(dòng)脈灌注施與1，25(OH)2D3很安全且無不期望的副作用?？山o予高達(dá)10mcg/天的1，25(OH)2D3而不會(huì)產(chǎn)生高鈣血癥。這一點(diǎn)可比以前的一次試驗(yàn)，那次試驗(yàn)中，口服給予2mcg/天的鈣三醇，結(jié)果50％的病人出現(xiàn)高鈣血癥。
腫瘤標(biāo)志物數(shù)據(jù)更難解釋，因?yàn)樗羞@些病人均有不同程度但非常嚴(yán)重的肝病和肝外疾病，但似乎7例受治病人中有4例至少對治療產(chǎn)生了有限的應(yīng)答，證據(jù)是他們的腫瘤標(biāo)志物水平上升率隨時(shí)間下降。
實(shí)施例3—豬動(dòng)物模型比較1，25(OH)2D3靜脈給予與靜脈灌注的效果目的通過比較肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3對血清鈣水平的影響與以相同劑量靜脈灌注的影響，調(diào)查這種灌注是否存在首過效應(yīng)。
受試者體重15—50kg的雌性Landrace豬(極少疾病)。
方法每只動(dòng)物麻醉后肝動(dòng)脈或靜脈插管，并與埋植的、可連續(xù)灌注1，25(OH)2D3的“Infusaid”泵連接。持續(xù)灌注一或兩周，然后讓動(dòng)物休息4周以減少任何誘導(dǎo)出的肝臟酶類。再將動(dòng)物“交換”那些第一次灌注是通過肝動(dòng)脈的動(dòng)物將他們的泵與靜脈內(nèi)插管連接，反之另一組動(dòng)物亦然。
定期取血分析有害的鈣水平、LFT和UEC。
結(jié)果3只豬取得了數(shù)據(jù)并完成了試驗(yàn)。1號(hào)豬和2號(hào)豬均進(jìn)行了靜脈和肝動(dòng)脈灌注。3號(hào)豬很不幸對三氟氯溴甲烷麻醉起反應(yīng)—嚴(yán)重高燒并死于手術(shù)。無一只豬對經(jīng)任一種途徑灌注的1，25(OH)2D3產(chǎn)生不期望的反應(yīng)，全過程中所有動(dòng)物的LFT和UEC保持正常。
圖10表示靜脈和肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3導(dǎo)致的鈣水平。很明顯靜脈途徑運(yùn)送導(dǎo)致高鈣血癥而相似劑量經(jīng)肝動(dòng)脈運(yùn)送時(shí)不影響鈣水平。
圖11證實(shí)在2號(hào)豬中有與1號(hào)豬相似的結(jié)果。
討論和結(jié)論此試驗(yàn)證實(shí)經(jīng)肝動(dòng)脈灌注1，25(OH)2D3不產(chǎn)生當(dāng)以相似劑量靜脈運(yùn)送時(shí)可見的高鈣血癥。這說明存在與肝動(dòng)脈1，25(OH)2D3灌注相關(guān)的首過效應(yīng)。
實(shí)施例4—測定維生素D3在碘油中的溶解度為闡明維生素D化合物在碘油中的溶解度，將放射性標(biāo)記的維生素D3以不同量溶于碘油中并與放射性標(biāo)記的維生素D3的溶解度比較。結(jié)果見圖2，證實(shí)維生素D3在碘油中比在水性基質(zhì)中更易溶解。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解可對本發(fā)明進(jìn)行很多改變和修飾(如特定實(shí)施例所示)而不偏離本發(fā)明所廣泛描述的精神或范圍。例如，本發(fā)明的治療方法可與一或多種傳統(tǒng)抗癌療法如放療或化療聯(lián)用。因此這些實(shí)施方案應(yīng)被看作對所有各方面的舉例說明而非限制。
權(quán)利要求
1.一種治療受試者肝臟中腫瘤的方法，包括向該受試者施用藥學(xué)有效量的選自維生素D、維生素D的前體、或其代謝物或類似物之組合的至少一種維生素D化合物，其中維生素D化合物向肝臟局部運(yùn)送。
2.權(quán)利要求1的方法，其中維生素D化合物經(jīng)動(dòng)脈或肝門靜脈運(yùn)送。
3.權(quán)利要求2的方法，其中維生素D化合物經(jīng)肝動(dòng)脈灌注運(yùn)送。
4.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中維生素D化合物以含藥學(xué)可接受之油的組合物形式運(yùn)送。
5.權(quán)利要求4的方法，其中藥學(xué)可接受之油為一種碘化油。
6.權(quán)利要求5的方法，其中該碘化油為碘油。
7.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中該腫瘤為原發(fā)性肝癌。
8.權(quán)利要求7的方法，其中該癌癥為肝細(xì)胞癌。
9.權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)的方法，其中該腫瘤為繼發(fā)性肝癌。
10. 權(quán)利要求9的方法，其中該癌癥為選自下組之癌癥的轉(zhuǎn)移癌結(jié)直腸癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌或腎癌。
11.權(quán)利要求9的方法，其中該繼發(fā)性癌癥為肉瘤。
12.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中該維生素D化合物為1，25(OH)2D3。
13.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中該維生素D化合物與能增強(qiáng)維生素D受體表達(dá)的化合物一起施用。
14.權(quán)利要求13的方法，其中能增強(qiáng)維生素D受體表達(dá)的化合物為雌激素受體拮抗物。
15.權(quán)利要求14的方法，其中該化合物為三苯氧胺。
16.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，進(jìn)一步包括一項(xiàng)或多項(xiàng)其它抗癌治療。
17.權(quán)利要求16的方法，其中其它抗癌治療選自放療或化療。
18.一種適于治療肝臟中腫瘤的組合物，該組合物包含藥學(xué)有效量的溶于藥學(xué)可接受之油中的維生素D化合物，該維生素D化合物選自由維生素D、維生素D的前體、或其代謝物或類似物組成的組合。
19.權(quán)利要求18的組合物，其中該藥學(xué)可接受之油為碘化油。
20.權(quán)利要求19的組合物，其中該碘化油為碘油。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療受試者肝臟中腫瘤的方法。此方法涉及向肝臟區(qū)域性運(yùn)送維生素D化合物,例如經(jīng)肝動(dòng)脈進(jìn)行動(dòng)脈灌注。本發(fā)明還涉及適于這類治療的組合物。
文檔編號(hào)A61P1/16GK1261800SQ98806760
公開日2000年8月2日 申請日期1998年6月10日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月10日
發(fā)明者戴維·勞森·莫利斯 申請人:尤尼瑟馳有限公司