專利名稱：雜環(huán)取代的苯甲胺衍生物的制作方法
在美國專利4，246，429號中介紹了一些可以用來作為制備植物藥用化合物中間體的苯乙酰胺和硫代酰胺。出乎意料的是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，某些類似的雜環(huán)化合物能有效地抑制人類免疫缺陷性病毒(HIV)的復制，從而可以用來治療被HIV、特別是被HIV-1感染的個體。
本發(fā)明涉及下式(Ⅰ)的化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構體形式，式(Ⅰ)為
式中R1和R2各自是鹵素或甲基;
R3是氫，鹵素，硝基或三氟甲基;
R4是氰基，三氟甲基或甲基羰基;或是基團-C(＝X)-NR5R6，其中X是O或S，R5和R6各自是氫或C1-4烷基;或是基團-A1K-R7，其中A1K是C1-4鏈烷二基，R7是氫或羥基;
Het是下列的雜環(huán)基團
式中R8是C1-4烷基或氫;
R9和R10各自是氫，C1-4烷基羰基，C1-4烷基，鹵素或硝基;
R11是氫，硝基，鹵素或C1-4烷基;
R12是氫，C1-4烷基或C1-4烷基羰基;
R13是氫或羥基;
R14是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基;
R15是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基;或者R14和R15一起形成C3-4鏈烷二基;
R16是氫，C1-4烷基羰基，硝基或鹵素;和在式(a)、(c)、(d)或(e)的雜環(huán)基團中，氮原子可任意地被氧化。
其中R5和R6至少一個是氫或者R13是羥基的式(Ⅰ)化合物也可存在互變異構體形式。所述形式雖然上面沒有明確指出，但是卻包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
在上述定義中，鹵素定義為氟、氯、溴和碘;C1-4烷基定義為有1到4個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如，甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、和1，1-二甲基乙基;C1-4鏈烷二基定義為含有1到4個碳原子的二價直鏈或支鏈烴基，例如，1，2-乙二基、1，3-丙二基、1，4-丁二基和它們的支鏈異構體;C3-4鏈烷二基定義為含有3或4個碳原子的那些C1-4鏈烷二基，例如1，3-丙二基或1，4-丁二基;C1-4烷氧基定義為直鏈和支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基等;C1-6烷氧基定義為上述的C1-4烷氧基和其更高級的含5或6個碳原子的同系物，例如戊氧基和己氧基;C1-4烷基羰基定義為直鏈和支鏈?；?，例如甲基羰基、乙基羰基、丙基羰基和丁基羰基等。
上述的藥學上可接受的酸加成鹽包括式(Ⅰ)化合物能夠形成的有治療活性的無毒酸的加成鹽。
這些鹽可以方便地用適當?shù)乃崽幚硎?Ⅰ)化合物的堿式化合物而得到。酸的實例包括無機酸，例如氫鹵酸，如鹽酸、氫溴酸及類似的酸，硫酸，硝酸，磷酸等;或有機酸，例如乙酸，丙酸，羥基乙酸，2-羥基丙酸，2-氧代-丙酸，丙二酸，丁二酸，順-2-丁烯二酸，反-2-丁烯二酸，2-羥基丁二酸，2，3-二羥基丁二酸，2-羥基-1，2，3-丙烷-三羧酸，甲磺酸，苯磺酸，4-甲基苯磺酸，環(huán)己烷氨基磺酸，2-羥基苯甲酸，4-氨基-2-羥基苯甲酸及類似的酸。反之，鹽形式可以用堿處理轉化成游離堿的形式?！八峒映甥}”一詞還包括式(Ⅰ)化合物能夠形成的水合物和溶劑加成物形式。這些形式的實例有水合物、醇化物等。
上面使用的術語“立體化學異構體形式”定義為式(Ⅰ)化合物可以具有的所有可能的異構體形式。除非另外說明或指出，化合物的化學名稱代表所有可能的立體化學異構體形式的混合物，所述的混合物包括基本分子結構的所有非對映體和/或對映體。式(Ⅰ)化合物的所有的立體化學異構體形式顯然都包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
有意義的一組化合物是下述的式(Ⅰ)化合物，即其中R1和R2是鹵素;R3是氫或鹵素;R4是基團-C(＝O)-NR5R6或基團-A1K-R7，其中R7是氫。
更有意義的化合物是上述的那些有意義化合物，其中Het是下述的雜環(huán)基團-式(a)的雜環(huán)基團，其中R8是C1-4烷基，R9和R10各自是C1-4烷基或硝基;
-式(c)的雜環(huán)基團，其中R12是C1-4烷基羰基;
-式(d)的雜環(huán)基團，其中R13是氫或羥基，R14是氫，硝基，氰基，C1-4烷基羰基，R15是氫，或者R14和R15一起形成C3-4鏈烷二基;
-式(e)的雜環(huán)基團，其中R16是C1-4烷基羰基。
特別有意義的化合物是上述的更有意義的化合物，其中R4是基團C(＝O)NH2或甲基，Het是3-氰基-2-吡啶基、3-硝基-2-吡啶基、2-乙基-5-甲基-4-硝基-2H-吡唑-3-基、2-硝基-3-噻吩基、3-乙?；?5，6，7，8-四氫-4-喹啉基、3-乙?；?2-吡啶基、3-乙?；?2-吡嗪基、1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基。
優(yōu)選化合物是2，6-二氯-α-[(3-氰基-2-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;
2，6-二氯-α-[(3-硝基-2-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;
2，6-二氯-α[(2-乙基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)氨基]苯乙酰胺;
1-[2-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-3-吡啶基]乙酮;
N-[1-(2，6-二氯苯基)乙基]-3-硝基-2-吡啶胺;
2，6-二氯-α-[(1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;
α-[(3-乙?；?2-吡嗪基)氨基]-2，6-二氯苯乙酰胺;
1-[3-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-2-吡嗪基]乙酮;
及上述化合物的藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構體形式。
將式(Ⅱ)的中間體與式(Ⅲ)的適宜的雜環(huán)衍生物反應可制得式(Ⅰ)化合物
式(Ⅲ)中，W1代表活性離去基團，例如鹵素，優(yōu)選氯或溴;C1-5烷氧基;芳氧基;磺酰氧基，例如甲磺酰氧基，4-甲基苯磺酰氧基等;或C1-5烷硫基。反應可按本專業(yè)已知的方法進行，優(yōu)選在升溫條件下，特別是在反應混合物的回流溫度下進行。其中一種反應物可過量作為溶劑;也可采用適宜的溶劑，例如水，偶極質(zhì)子隋性溶劑(例如N，N-二甲基乙酰胺)，醚類(如四氫呋喃)，醇類(如乙醇)，芳香溶劑(如甲基苯)等和上述溶劑的混合物。也可采用適宜的堿以中和反應期間形成的酸，所述堿的實例是例如堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫氧化物、烷醇鹽、氫化物或酰胺;或有機堿，例如胺類，如N，N-二乙基乙胺、N-(1-甲基乙基)-2-丙胺、吡啶等。此外在隋性氣氛(例如無氧的氬氣或氮氣)中進行上述的反應更有利。上述反應中也可采用相轉移催化條件。
在上述和下述的制備中，可從反應混合物中分離反應產(chǎn)物;必要時可按本專業(yè)公知的方法進一步純化，例如提取、蒸餾、結晶、研制和色譜法。
按照本專業(yè)已知的N-烷基化方法，用式(Ⅳ)的烷基化試劑將式(Ⅴ)的適宜的雜環(huán)衍生物烷基化，也可制得式(Ⅰ)化合物。在式(Ⅳ)中，W2代表活性離去基團，例如鹵素(如氯、溴或磺)、磺酰氧基(如甲磺酰氧基，4-甲基苯磺酰氧基)等活性離去基團。
上述的N-烷基化反應，按本專業(yè)已知方法，將反應物在適宜的溶劑中，也可在用堿的混和物中攪拌，可方便地進行。
在適宜條件下，將式(Ⅵ)的腈與試劑H2X(Ⅶ)(即水或硫化氫)反應，可制得R4是基團-C(＝X)-NR5R6(其中X是O或S，R5和R6是氫)的式(Ⅰ)化合物。所述的化合物，當X是O時用式(Ⅰ-a)表示，當X是S時用式(Ⅰ-b)表示。
按本專業(yè)已知的方法很容易將腈(Ⅵ)水解成相應的酰胺(Ⅰ-a)。所述的水解最好是在室溫和低溫(例如0℃至室溫)下，在濃的強酸(例如濃硫酸、鹽酸、氫溴酸等)中進行，也可在少量水存在下進行反應?；蛘甙聪路ㄋ馐?Ⅵ)的腈在過氧化氫和適宜堿(如堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉)存在下，將其在適宜的溶劑(例如醇類如乙醇)中攪拌。
在適宜堿例如胺(如N，N-二乙基乙胺，N-甲基嗎啉，N-(1-甲基乙基)-1-甲基乙胺等)存在下，通過與硫化氫在適宜的溶劑(例如吡啶，一、二或在三甲基化吡啶等)中反應，可方便地將腈(Ⅵ)轉變成硫代酰胺(Ⅰ-b)。上述的后一反應可方便地在室溫下進行，某些情況下在低溫(例如0℃至室溫)下進行。式(Ⅰ-b)的硫代酰胺化合物在水中，也可在具有對反應惰性的有機共溶劑的混合物中與氧化劑(例如過氧化氫)反應，可方便地轉變成相應的式(Ⅰ-a)的酰胺。
將適宜的胺(Ⅸ)與式(Ⅷ)的氨基酸或其衍生物(其中L代表離去基團，例如羥基，C1-5烷氧基，1-H-咪唑基，C1-5烷氧基羰基，苯氧基羰基或鹵素)反應，可制得R4是基團-C(＝O)-NR5R6，其中R5和R6各自是氫或C1-4烷基的式(Ⅰ)化合物，所述化合物用式(Ⅰ-c)表示。
按照本專業(yè)已知的酰胺化和轉酰氨基反應可方便地進行上述的式(Ⅰ-c)酰胺的制備。例如，在能夠促進酰胺化反應的試劑存在下，將適宜的羧酸(L是OH)與胺(Ⅺ)反應，可制得所述的酰胺。所述試劑的典型實例是例如二環(huán)己基碳化二亞胺、碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓、五氧化二磷，1，1-羰基＝[1H-咪唑]、1，1′-磺?；絒1H-咪唑]等。
類似地，在與式(Ⅸ)的胺反應之前，上述的羧酸也可轉變成它的適宜的反應在活性衍生物，例如酰鹵、對稱的或混合的酸酐、酯、酰胺、?；B氮化物和類似的衍生物。所述的反應活性衍生物可以按本專業(yè)已知的方法制備，例如，將羧酸與鹵化劑(例如亞硫酰氯，三氯氧磷，多亞磷酸，磷酰氯，草酰氯等)反應;或者將所述的羧酸與酰鹵(例如乙酰氯，氯甲酸乙酯等)反應。
按本專業(yè)已知的官能團轉化反應可將式(Ⅰ)化合物互相間轉化。于是，某些式(Ⅰ)化合物也可用作其它式(Ⅰ)化合物的前體。
例如，用適宜的有機或無機過氧化物(例如過氧化氫、過苯甲酸、3-氯過苯甲酸和叔丁基化過氧氫等)，通過N-氧化反應，可制得式(Ⅰ)化合物的N-氧化形式。所述N-氧化反應的適宜溶劑是例如水，醇類(例如甲醇，乙醇等)，鹵代烴類(如二氯甲烷，三氯甲烷等)。通過本專業(yè)已知的方法可將其中R5和R6是氫的式(Ⅰ)化合物轉變成R5和/或R6是C1-4烷基的式(Ⅰ)化合物。
本發(fā)明的化合物在其結構中至少有一個不對稱的碳原子，即帶有R4基團的那個碳原子，該手性中心和可能存在的任何其它手性中心可以用立體化學符號R和S標明。
式(Ⅰ)化合物的純立體化學異構體形式可以應用本專業(yè)已知的方法得到。非對映異構體可以用物理方法分離，例如用選擇性結晶和色譜技術，如反流分布液體色譜等。純立體化學異構體形式也可以從相應的純立體化學異構體形式的合適原料衍生得到，只要反應是立體選擇性的即可。如果要求的是某個特定的立體異構體，最好是用立體選擇性的制備方法合成該化合物。這些方法最好是使用純的對映體原料。式(Ⅰ)化合物的立體化學異構體形式顯然包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
按上述方法制備的式(Ⅰ)化合物一般是對映體的外消旋化合物，它們可以按照本專業(yè)已知的拆分方法彼此分離。具有足夠堿性的式(Ⅰ)的外消旋化合物可以通過與適當?shù)氖中运岱磻D化成相應的非對映異構體的鹽形式。這種非對映異構體的鹽形式隨后用選擇性結晶或分步結晶的方法分離，對映體則利用堿或酸水解從中游離出來。
一種有意義的分離式(Ⅰ)化合物對映體形式的方法涉及用手性固定相的液相色譜，例如用適當衍生的纖維素，如三(二甲基氨基甲?；?纖維素(Chiracel OD
)以及類似的手性固定相。
作為對于式(Ⅰ)化合物上述拆分方法的替代方法，還應該提到消旋的中間體的拆分。就此而言，最適用的中間體是式(Ⅷ)的氨基酸衍生物，其中的L為羥基，所述化合物用式(Ⅷ-a)表示。
式(Ⅷ-a)的氨基酸可以方便地通過與適當?shù)氖中詨A反應，例如α-甲基芐胺、辛可寧及其它生物堿反應，形成相應的非對映體鹽形式進行拆分。顯然，這些氨基酸也可以利用液相色譜法采用適當?shù)氖中怨潭ㄏ噙M行拆分。
式(Ⅷ-a)的氨基酸的對映體形式，按照前述將式(Ⅷ)中間體轉化成式(Ⅰ)化合物的步驟被轉化成式(Ⅰ-a)化合物的對映體形式。
在上述制備中使用的一些中間體和起始原料是已知的化合物，它們可以按照本專業(yè)已知的制備該化合物或類似化合物的方法來制備。某些中間體不太常見或是新型的。因此下面將對一些制備方法詳細介紹。
在上述的形成式(Ⅰ-a)和(Ⅰ-b)化合物的適宜條件下，將式(Ⅹ)的相應的腈與試劑H2Ⅹ(Ⅶ)(即水或硫化氫反應，可制得式(Ⅱ)的中間體，其中R4是基團-C(＝X)-NR5R6，X是O或S，R5和R6是氫;當X是O時，所述化合物用式(Ⅱ-a)表示，當X是S時用式(Ⅱ-b)表示。
式(Ⅹ)的腈可按下法制備將式(Ⅺ)的苯甲醛與氰化物鹽反應，得到式(Ⅻ)的氰醇，然后將其與氨反應，生成式(Ⅹ)的中間體。作為氰化物鹽的實例，可以提及的是堿金屬和堿土金屬氰化物，例如氰化鈉和氰化鉀。適宜的溶劑包括例如水，醇類(如甲醇，乙醇等)，羧酸(如乙酸，特別是冰醋酸，丙酸等);或者是上述溶劑的混合物。中間體氰醇(Ⅻ)可以分離;反應程序可以作為一步法進行，例如將式(Ⅺ)的苯甲醛與氰化銨反應。
在氰化物鹽和適宜溶劑存在下，將適宜的苯甲醛(Ⅺ)與式(Ⅴ)的雜環(huán)氨基衍生物反應，可制得式(Ⅵ)的中間體。
作為氰化物鹽的實例，可以提到的是堿金屬和堿土金屬氰化物，例如氰化鈉和氰化鉀。合適的溶劑包括水、醇類(例如甲醇、乙醇等)、羧酸(如乙酸，特別是冰乙酸，丙酸等)或這些溶劑的混合物。該反應適宜在室溫下攪拌進行，如有必要，將反應物略微加熱，例如在40℃和60℃之間加熱，特別是約50℃。在某些情形下，如Chem.Ber.98，3902(1965)中所述，反應最好是在諸如無水氯化鋅等金屬鹽存在下于無水溶劑中進行，尤其是在冰乙酸中進行。
形成化合物(Ⅵ)的后一方法的一個有意義的變異方法是將式(Ⅸ)的苯甲醛與式(Ⅴ)的胺縮合，形成中間體亞胺，然后在適宜溶劑中，例如在鹵代烴(如三氯甲烷，二氯甲烷等)中，用三甲基硅氰化物處理上述的亞胺，后處理時產(chǎn)生中間體(Ⅵ)。
式(Ⅰ)化合物顯示出抗逆轉錄病毒的性質(zhì)，特別是抗人類免疫缺陷性病毒(HIV)，該病毒也稱作LAV、HTLV-Ⅲ或ARV，它是人類艾滋病的病原。HIV病毒優(yōu)先感染人類的T-4細胞，摧毀這些細胞或改變其正常功能，特別是免疫系統(tǒng)的協(xié)調(diào)。結果，被感染的患者的T-4細胞不斷減少，而且其行為反常。因此，免疫防御系統(tǒng)不能對抗感染和贅生物，感染HIV的患者常常由于機會感染(例如肺炎)或癌癥而死亡。與感染HIV有關的其它疾病包括血小板減少癥，卡潑濟腫瘤和以進行性脫髓鞘為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，結果造成癡呆和諸如進行性構語障礙、運動失調(diào)和定向力障礙等癥狀。HIV感染還進一步造成末梢神經(jīng)病、逐漸擴散性淋巴結病(PGL)和與艾滋病有關的綜合癥(ARC)。
由于它們的抗逆轉錄病毒的性能，特別是抗HIV、尤其是抗HIV-1的性能，式(Ⅰ)化合物和它們的藥學上可接受的鹽及其立體化學異構體，可用于治療感染了HIV的個體和用于個體的預防。一般來說，本發(fā)明的化合物可用于治療感染了某些病毒的溫血動物，這些病毒的存在受控于或者取決于逆轉錄酶。用本發(fā)明的化合物可以防治的病癥，特別是與HIV和其它致病的逆轉錄病毒有關的病癥包括艾滋病、與艾滋病有關的綜合癥(ARC)、逐漸擴散型淋巴結病(PGL)以及由逆轉錄病毒引起的慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如由HIV傳播的癡呆癥和多發(fā)性硬化癥。
另外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，式(Ⅵ)中間體也顯示出抗逆轉錄病毒性能，特別是抗HIV、尤其是抗HIV-1的性能。
標題化合物可以配制成供給藥的各種藥物形式。作為合適的組合物，可以列舉的包括常用的全身給藥或局部給藥的所有組合物。為了制備本發(fā)明的藥用組合物，將作為活性成分的有效量的特定化合物(也可以采用其酸加成鹽的形式)與一種藥學上可接受的載體結合成均勻的混合物，該載體可以采取許多種形式，這取決于希望給藥的制劑形式。這些藥物組合物最好是適合經(jīng)口、直腸、皮膚或非腸道給藥。例如，在制備口服劑量形式的組合物時，可以使用任何常用的藥物介質(zhì)，在口服液體制劑的情形下，例如懸浮液、糖漿;酏劑和溶液，可以使用水、甘醇、油、醇等物質(zhì);在粉劑、丸劑、膠囊和片劑的情形下，可以使用固體載體，例如淀粉、糖、高嶺土、潤滑劑、粘結劑、崩解劑等。因為易于給藥，片劑和膠囊代表了最方便的口服劑量單位形式，在這種情形下顯然使用固體藥物載體。對于非腸道給藥的組合物而言，載體通常包括滅菌的水，至少是占大部分，但是可以含有其它組分，例如促進溶解的組分。例如，可以配制可注射的溶液，其中的載體包括鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水與葡萄糖的混合溶液。也可以配制可注射的懸浮液，在這種情形下可以使用合適的液體載體、懸浮劑及類似物質(zhì)。還包括打算在使用時轉化成液體形式的固體制劑。在適合經(jīng)皮膚施用的組合物中，載體可含有增強滲透的試劑和/或合適的潤濕劑，并可與少量任何性質(zhì)的合適添加劑結合，這些添加劑對皮膚不產(chǎn)生明顯的有害作用。
作為合適的局部施用的組合物包括通常用于局部給藥的所有組合物，例如，乳膏、凝膠、敷料、洗發(fā)劑、酊劑、糊劑、軟膏、油膏、粉劑等。所述的組合物的應用形式可以是氣溶膠(例如用噴射劑，如氮、二氧化碳、氟利昂，或是不用噴射劑，例如泵噴)，滴液，洗劑，或是一種半固體，例如一種可以用藥簽施用的增稠的組合物。在具體的組合物中，諸如油膏、乳膏、凝膠、軟膏等半固體組合物會便于使用。
最好將上述的藥物組合物配制成易于給藥和劑量均勻的劑量單位形式。這里所用的劑量單位形式是指適合作為單元劑量的物理上分離的單元，每個單元含有按計算能產(chǎn)生所希望的治療效果的預定數(shù)量的活性成分以及所需的藥物載體。這種劑量單位形式的實例是片劑(包括作標記的或包衣的片劑)、膠囊、丸劑、粉末袋、糯米紙囊劑、可注射的溶液或混懸液等，以及它們的分離的復合體。
對于治療HIV感染熟悉的人員很容易由這里列出的試驗結果確定有效的日劑量。一般來說，有效的日劑量為每千克體重從0.01毫克到50毫克，最好是每千克體重0.1毫克至10毫克。在全天的適當間隔內(nèi)將所需的劑量分成二、三、四或更多的分劑量給藥是恰當?shù)?。所述的分劑量可以配制成單位劑量形式，例如，每單位劑量形式含?到1000毫克，特別是5到200毫克的活性成分。
顯然，根據(jù)治療對象的反應和/或開出本發(fā)明化合物配方的醫(yī)生的估價，上述的有效日劑量可以減少或增加。因此，上面提到的有效日劑量的范圍只是指導原則，并不意味著對本發(fā)明的范圍和應用構成任何程度的限制。
以下實施例是用來說明本發(fā)明，并非限制本發(fā)明范圍。
A.中間體的制備實施例1a)向攪拌著的和冷卻的2，6-二氯苯甲醛(438g)和冰醋酸(2000g)的混懸液中滴入氰化鉀(203g)的水(350g)溶液，溫度保持在25℃以下。室溫下攪拌過夜，濃縮反應混合物，殘余物冷卻時固化，濾出殘余物，干燥，得438g(±)-2，6-二氯-α-羥基苯乙腈，m.p.90℃(中間體1)。
b)將38g中間體(1)加入冷卻(冰浴)的400g用氨氣飽和的甲醇中，回流溫度下攪拌4小時，放置過夜以冷卻至室溫，將反應混合物干燥，過濾并蒸發(fā)。殘余物在乙醚中通過加入HCl飽和的2-丙醇轉變成鹽酸鹽，倒去溶劑，油狀殘余物相繼在乙醚和2-丙醇中攪拌，濾出結晶產(chǎn)物，干燥，得24.3g(±)-α-氨基-2，6-二氯苯乙腈-鹽酸鹽，mp＞300℃(中間體2)。
c)將23g中間體(2)加入攪拌著的和冷卻的450g濃硫酸中，室溫下攪拌過夜，將反應混合物倒入2000g冰/水中，用氨堿化，用三氯甲烷提取產(chǎn)物，提取液干燥、過濾并蒸發(fā)，殘余物于240g2-丙醇中于-20℃結晶，濾出產(chǎn)物，用2-丙醇和石油醚洗，干燥，得13.5g(±)-α-氨基-2，6-二氯苯乙酰胺，mp.166.3℃(中間體3)。
實施例2將2，6-二氯苯甲醛(0.012mol)、3-氨基吡啶酮(0.01mol)和乙酸(50ml)的混合物在室溫下攪拌30分鐘，加入氰化鉀(0.012mol)，室溫下攪拌反應混合物8小時，倒入500ml水中，濾出生成的沉淀，用水洗，于乙腈中重結晶，濾出結晶，干燥，得1.1g(±)-2，6-二氯-α-[(1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基)氨基]苯乙腈(37.9%)，mp.213.3℃(中間體4)。
B.最終化合物的制備實施例3將2g中間體(3)、1.74g2-氯-3-硝基吡啶和幾滴N，N-二甲基乙酰胺在120℃攪拌半小時，冷卻，反應混合物經(jīng)柱色譜純化[硅膠;CH2Cl2/CH3OH(NH3)97∶3]。蒸發(fā)含產(chǎn)物餾分的洗脫液，殘余物于乙腈中結晶，濾出產(chǎn)物，干燥，得0.8g(25.5%)(±)-2，6-二氯-α-(3-硝基-2-吡啶基)氨基]苯乙酰胺，mp.207.2℃(化合物1)。
實施例4將中間體(4)(0.007mol)溶于乙醇(40ml)和2N氫氧化鈉溶液(10ml)的混合物中，于5℃滴入由過氧化氫溶液(30%，3.5ml)和乙醇(5ml)構成的溶液，室溫下攪拌1小時，用CH2Cl2提取反應混合物3次，分出有機層，用MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)，90/10)，收集含純產(chǎn)物餾分，蒸發(fā)溶劑，殘余物于2-丙醇中結晶，過濾，干燥，得1.1g(±)-2，6-二氯-α-[(1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基)氨基]苯乙酰胺(27.5%)。將其于CH3OH中重結晶，濾出，干燥，得0.24g(±)-2，6-二氯-α-[(1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基)氨基]苯乙酰胺(11%)(化合物8)。
實施例5將2，6-二氯-α-甲基苯甲胺(0.03mol)、2-氯--3-吡啶腈(0.03mol)和N，N-二甲基乙酰胺(幾滴)的混合物于90℃攪拌20小時，冷卻，倒入氨水中，用CH2Cl2提取2次，分離出有機層，用MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液CH2Cl2/己烷，50/50)，收集含純產(chǎn)物餾分，蒸發(fā)溶劑得3.6g(±)-2-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-3-吡啶腈(41.4%);mp84.4℃(化合物9)。
實施例6在高壓釜中于150℃下，將2，6-二氯-α-甲基苯甲胺(0.01mol)和1-(2-氯-3-吡啶基)乙酮(0.01mol)于乙醇和水(1∶1;60ml)混合物中攪拌18小時，冷卻，用水稀釋，用CH2Cl2提取混合物2次，分出有機層，用水洗，用MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜純化(洗脫液CH2Cl2/己烷，50∶50)，收集含純產(chǎn)物餾分，蒸發(fā)溶劑，殘余物(0.5g)于異丙醚中結晶，濾出結晶，干燥，得0.28g(±)-1-[2-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-3-吡啶基]乙酮(9%)，mp136.2℃(化合物11)。
制備了下述化合物表 1
C.藥學實施例實施例7采用一種快速、靈敏的自動分析方法進行抗HIV劑的體外評價。前人已表明(Koyanagi等，Int.J.Cancer，1985年36卷445-451頁)HIV-1轉形變異的T4-細胞系MT-4能受納HIV-1感染并且極其敏感，以它作為靶細胞系。對HIV誘發(fā)的細胞病作用的抑制被用來作為終點。HIV感染的和模擬感染的細胞成活力是通過3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)的原位減少進行分光光度分析測定的。50%細胞毒性劑量(CD50，微克/毫克)定義為將模擬感染的對照樣品的吸收率降低50%的化合物濃度?；衔镌诟腥綡IV的細胞中達到的保護百分數(shù)按以下公式計算((ODT)HIV -(ODC)HIV)/((ODc)MOCK -(ODc)HIV) ，用%表示式中，(ODT)HIV是用給定濃度的試驗化合物在感染HIV的細胞中測得的光密度;(ODC)HIV是對于對照的末處理的感染HIV的細胞測得的光密度;(ODC)MOCK是對于對照的末處理的模擬感染細胞測得的光密度;所有的光密度值均在540納米下測量。根據(jù)以上公式達到50%保護的劑量定義為50%有效劑量(ED50，微克/毫升)。CD50對ED50的比例定義為選擇性指數(shù)(SI)。下面的表3列出了具體數(shù)值。
表 3
D.組合物實施例“在所有這些實施例中使用的活性成分(A.I)一詞，是指式(Ⅰ)的化合物、它的藥學上可接受的酸加成酸鹽、或是它的立體化學異構體形式?！睂嵤├?口服滴劑將500克活性成分溶在60～80℃的0.5升2-羥基丙酸和1.5升聚乙二醇中。在冷卻到30～40℃之后，加入35升聚乙二醇，將混合物充分攪拌。然后加入1750克糖精鈉和25升純化水構成的溶液，在攪拌的同時，加入2.5升可可香味劑和適量的聚乙二醇至體積為50升，形成每毫升含10毫克活性成分的口服滴液。將形成的溶液裝入合適的容器。
實施例9口服溶液將9克4-羥基苯甲酸甲酯和1克4-羥基苯甲酸丙酯溶解在4升沸騰的純化水中。在3升這樣的溶液中先溶入10克2，3-二羥基丁二酸，然后再溶入20克活性成分。將此溶液與前一溶液的剩余部分合并，向其中加入12升1，2，3-丙三醇和3升70%的山梨糖醇溶液。將40克糖精鈉溶在0.5升水中，加入覆盆子香精和鵝莓香精各2毫升。將后一溶液與前一溶液合并，加入適量的水至體積為20升，得到每荼匙(5毫升)含活性成分5毫克的口服溶液。將形成溶液裝入合適的容器。
實施例10膠囊將20克活性成分、6克十二烷基硫酸鈉、56克淀粉、56克乳糖、0.8克膠體二氧化硅和1.2克硬脂酸鎂一起激烈地攪拌。隨后將形成的混合物裝入1000個合適的硬化明膠膠囊中，每個中含20毫克活性成分。
實施例11涂膜的片劑片心的制備將100克活性成分、570克乳糖和200克淀粉的混合物充分混合，然后用5克十二烷基硫酸鈉和10克聚乙烯吡咯烷酮在約200毫升水中形成的溶液將上述混合物潤濕。將濕的粉末混合物過篩，干燥，再過篩。然后加入100克微晶纖維素和15克氫化植物油。將它們一起充分混合，壓制成片，制得10，000片，每片含10毫克活性成分。
涂膜向10克甲基纖維素在75毫升變性乙醇中構成的溶液中加入5克乙基纖維素在150毫升二氯甲烷中的溶液。然后加入75毫升二氯甲烷和2.5毫升1，2，3-丙三醇。將10克聚乙二醇熔化，溶解在75毫升二氯甲烷中。將后一溶液加到前一溶液中，然后加入2.5克硬脂酸鎂、5克聚乙烯吡咯烷酮和30毫升濃的色素懸浮液，將整個混合物均化。用這樣得到的混合物在涂布裝置中涂敷片心。
實施例12注射用溶液將1.8克4-羥基苯甲酸甲酯和0.2克4-羥基苯甲酸丙酯溶在0.5升用于注射的沸水中。在冷卻到約50℃之后，在攪拌下加入4克乳酸、0.05克丙二醇和4克活性成分。將溶液冷卻到室溫，補加適量的注射用水至1升，得到每毫升含4毫克活性成分的溶液。用過濾法將溶液滅菌(美國藥典ⅩⅤⅡ第811頁)，注入消過毒的容器中。
實施例13栓劑將3克活性成分溶在3克2，3-二羥基丁二酸和25毫升聚乙二醇400構成的溶液中。向12克表面活性劑(SPAN
)中加入適量的甘油三酯(Witepsol 555
)至300克，將其一起熔化。將后一混合物與前一溶液充分混合。將這樣得到的混合物倒入37-38℃的模具中，形成100只栓劑，各含30毫克/毫升的活性成分。
實施例14注射用溶液將60克活性成分和12克苯甲醇充分混合，加入適量的芝麻油至1升，形成每毫升含60毫克活性成分的溶液。將溶液滅菌，裝入消毒的容器中。
實施例152%乳膏將75毫克硬脂醇、20毫克鯨蠟醇、20毫克失水山梨醇單硬脂酸酯和10毫克肉豆蔻酸異丙酯加入到一個雙壁帶夾套容器中，加熱到混合物完全熔化。將此混合物加到分別配制的另一混合物中。該混合物由純化水、200毫克丙二醇和15毫克Polysorbate 60(即吐溫60)構成，溫度為70至75℃。使用供液體用的均化器將兩混合物混合。將形成的乳狀液冷卻到低于25℃，同時繼續(xù)混合。接著在繼續(xù)攪拌下向乳狀液中加入由20毫克式(I)的活性成分、1毫克Polysorbate 80(即吐溫80)和637毫克純化水構成的溶液和2毫克無水硫化鈉在純化水中形成的溶液。將乳膏均化處理，注入合適的管中。
實施例16氣溶膠a)向2.5毫克活性成分在0.7毫升蒸餾水中形成的溶液中加入730毫克0.1N鹽酸溶液。在室溫下攪拌10分鐘后，加入0.1N的氫氧化鈉溶液，將這樣得到的溶液調(diào)節(jié)到pH5.5。然后順序加入4毫克氯化鈉和0.15毫克乙酸苯汞鹽，將所有物質(zhì)一起攪拌，使之完全溶解。然后加入蒸餾水至體積為1.0毫升。將溶液裝入用機械泵密封的玻璃瓶中，給藥時每噴一次放出0.1毫升。
b)向2毫克活性成分和0.7毫升蒸餾水構成的溶液中加入600毫克0.1N鹽酸溶液。在室溫下攪拌10分鐘之后，在混合物中溶入10毫克聚乙烯醇，加入0.1N的氫氧化鈉溶液將這樣得到的溶液調(diào)節(jié)到pH5.5。然后順序加入4毫克氯化鈉和2毫克苯乙醇，將整個混合物攪拌，形成完全的溶液。加入蒸餾水使體積達1.0毫升，裝入機械泵密封的玻璃瓶中，施藥時每噴一次放出0.1毫升。
權利要求
1.式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽形式和立體化學異構體形式
式中R1和R2各自是鹵素或甲基；R3是氫，鹵素，硝基或三氟甲基；R4是氰基，三氟甲基或甲基羰基；或是基團-C(=X)-NR5R6，其中X是O或S，R5和R6各自是氫或C1-4烷基；或是基團-A1K-R7，其中A1K是C1-4鏈烷二基，R7是氫或羥基；Het是下列的雜環(huán)基團
式中R8是C1-4烷基或氫；R9和R10各自是氫，C1-4烷基羰基，C1-4烷基，鹵素或硝基；R11是氫，硝基，鹵素或C1-4烷基；R12是氫，C1-4烷基或C1-4烷基羰基；R13是氫或羥基；R14是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基；R15是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基；或者R14和R15一起形成C3-4鏈烷二基；R16是氫，C1-4烷基羰基，硝基或鹵素；和在式(a)、(c)、(d)或(e)的雜環(huán)基團中，氮原子可任意地被氧化。
2.按照權利要求1的化合物，其中R1和R2是鹵素;R3是氫或鹵素;R4是基團-C(＝O)-NR5R6或基團-A1K-R7，其中R7是氫。
3.按權利要求2的化合物其中Het是下述的雜環(huán)基團-式(a)的雜環(huán)基團，其中R8是C1-4烷基，R9和R10各自是C1-4烷基或硝基;-式(c)的雜環(huán)基團，其中R12是C1-4烷基羰基;-式(d)的雜環(huán)基團，其中R13是氫或羥基，R14是氫，硝基，氰基，C1-4烷基羰基，R15是氫，或者R14和R15一起形成C3-4鏈烷二基;或-式(e)的雜環(huán)基團，其中R16是C1-4烷基羰基。
4.按權利要求3的化合物，其中R4是基團C(＝O)NH2或甲基，Het是3-氰基-2-吡啶基、3-硝基-2-吡啶基、2-乙基-5-甲基-4-硝基-2H-吡唑-3-基、2-硝基-3-噻吩基、3-乙?；?5，6，7，8-四氫-4-喹啉基、3-乙?；?2-吡啶基、3-乙?；?2-吡嗪基、1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基。
5.按權利要求4的化合物，其中所述化合物是下述化合物2，6-二氯-α-[(3-氰基-2-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;2，6-二氯-α-[(3-硝基-2-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;2，6-二氯-α-[(2-乙基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)氨基]苯乙酰胺;1-[2-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-3-吡啶基]乙酮;N-[1-(2，6-二氯苯基)乙基]-3-硝基-2-吡啶胺;2，6-二氯-α-[(1，2-二氫-2-氧代-3-吡啶基)氨基]苯乙酰胺;α-[(3-乙酰基-2-吡嗪基)氨基]-2，6-二氯苯乙酰胺;1-[3-[[1-(2，6-二氯苯基)乙基]氨基]-2-吡嗪基]乙酮;及上述化合物的藥學上可接受的酸加成鹽和立體化學異構體形式。
6.一種藥用組合物，它包括藥學上可接受的載體和治療有效量的權利要求1至5中任一權項定義的化合物作為活性成分。
7.制備權利要求6中要求授權的藥用組合物的方法，其特征在于將治療有效量的權利要求1至6中任一權項定義的化合物與藥用載體充分混和。
8.權利要求1至5中任一權項定義的化合物用作藥物。
9.下式的化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽形式和立體化學異構體形式
式中R1和R2各自是鹵素或甲基;R3是氫，鹵素，硝基或三氟甲基;Het是下列的雜環(huán)基團
式中R8是C1-4烷基或氫;R9和R10各自是氫，C1-4烷基羰基，C1-4烷基，鹵素或硝基;R11是氫，硝基，鹵素或C1-4烷基;R12是氫，C1-4烷基或C1-4烷基羰基;R13是氫或羥基;R14是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基;R15是氫，硝基，氰基，鹵素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷基羰基;或者R14和R15一起形成C3-4鏈烷二基;R16是氫，C1-4烷基羰基，硝基或鹵素;和在式(a)、(c)、(d)或(e)的雜環(huán)基團中，氮原子可任意地被氧化。
10.制備權利要求1至5中任一權項定義的化合物的方法，其特征在于a)在堿存在下于反應惰性溶劑中將式(Ⅱ)的胺與式(Ⅲ)的雜環(huán)衍生物反應，其中W1代表活性離去基團;
b)在堿存在下于反應惰性溶劑中，將式(Ⅳ)的衍生物，其中W2代表活性離去基團，與式(Ⅴ)的胺反應;
c)將式(Ⅵ)的腈于濃的強酸中，也可在少量水存在下反應，產(chǎn)生式(Ⅰ-a)化合物;
d)在堿存在下于適宜溶劑中，將式(Ⅵ)的腈與硫化氫反應，生成式(Ⅰ-b)化合物;
e)將式(Ⅷ)的氨基酸或其衍生物，其中L代表羥基、C1-6烷氧基、1H-咪唑基、C1-6烷氧羰基、苯氧基羰基或鹵素，與式R5R6NH(Ⅸ)的胺反應，形成式(Ⅰ-c)化合物;
f)通過拆分式(Ⅰ)的外消旋化合物，制備式(Ⅰ)化合物的對映體純形式;和按照官能團轉化反應，任意地將式(Ⅰ)化合物相互轉化;和必要時，用酸處理式(Ⅰ)化合物將其轉變成有治療活性的元毒酸加成鹽;相反，也可用堿將酸加成鹽轉變成游離堿;和/或制備其立體化學異構體形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及抗逆轉錄病毒(即抗-HIV-1)的式(I)化合物和含有式(I)化合物的藥用組合物及它們的制備方法。式中R
文檔編號A61K31/4406GK1073942SQ9211515
公開日1993年7月7日 申請日期1992年12月29日 優(yōu)先權日1991年12月30日
發(fā)明者M·A·C·揚森, G·H·P·范戴勒, J·-P·R·M·A·波斯曼斯, M·G·C·弗唐克, P·A·J·揚森 申請人:詹森藥業(yè)有限公司