專利名稱：表鬼臼毒素阿卓糖苷衍生物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及4′-脫甲基表鬼臼毒素糖苷，它們作為抗腫瘤劑的應(yīng)用，以及含有這些化合物的藥用組合物。
式Ⅰ4′-脫甲基表鬼臼毒素糖苷是由天然存在的木質(zhì)素，鬼臼毒素Ⅱ衍生的抗腫瘤劑，
授予Keller-Juslen等人的美國專利3，524，844介紹了它們的合成方法。在式Ⅰ化合物中，已證實鬼臼乙叉苷(Ⅰa)和鬼臼噻吩苷(Ⅰb)可用作臨床抗腫瘤劑，用于治療下述各種腫瘤小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、睪丸癌、乳腺癌、膀胱癌、腦癌、非淋巴細(xì)胞白血病以及何杰金氏病。
已經(jīng)制得了許多鬼臼乙叉苷和鬼臼噻吩苷的同系物、類似物和衍生物，并研究了它們的抗腫瘤活性。除個別幾個化合物外，上述化合物均以帶有D-葡萄糖部分為特征。
在J.Med.Chem.1971(10)936-40中報導(dǎo)了三個D-吡喃半乳糖苷，而在Chem.Lett.，1987，799-802中介紹了幾個L-吡喃葡萄糖苷。
美國專利4，547，567和4，716，211中介紹了其中一個糖羥基被氨基或烷氨基置換的鬼臼乙叉苷的類似物。
日本公開特許63-192793中介紹了鬼臼乙叉苷的水溶性藥物前體，鬼臼乙叉苷4′-磷酸酯。
系列號為240971的未審定普通登記專利申請介紹了(并要求保護(hù))表鬼臼毒素糖苷，其中一個或兩個糖羥基被氟置換。
已經(jīng)報導(dǎo)了其中將葡萄糖部分的羥基?；⒈Ｗo(hù)酚基的4′-脫甲基表鬼臼毒素糖苷，這類化合物用作為制備相應(yīng)的4′-脫甲基表鬼臼毒素例如式Ⅰ化合物的中間體。
加拿大專利956，939公開了式Ⅲ的化合物，
式中R1是C1-5烷基;R2是乙?；蚣柞；?和R3是苯基或取代苯基;該專利提及但未給出實施例的可能的取代苯基是對硝基苯基和對甲氧基苯基。
美國專利4，564，675公開了式(Ⅳ)的化合物
式中R是-C(O)CH2X，X是鹵原子。
歐洲專利申請162，701公開了式(Ⅴ)的化合物，
式中R1和R2可以相同或不同，并各自代表-C(O)CHX2或-C(O)CX3，其中X是鹵原子。
日本公開特許58-225，096(Derwent Abst.No84-0324268/06)和58-219，196(Derwent Abst.No.84-027495/05)分別公開了式(Ⅵ)和式(Ⅶ)的化合物
式中A代表-CO2-CH2-C(H)m(X)n，其中X是鹵原子，m是0至2，n是1至3，m+n＝3，Ac是酰基。
歐洲專利申請226，202公開了用于合成式(Ⅷ)鬼臼乙叉苷的中間體，
式中A代表乙酰基。
J.Pharm.Biomed.Anal.，1987 5(1)11-20中報道了式Ⅸ鬼臼乙叉苷的單-半琥珀酸酯衍生物
式中R1和R2之一是H，另一個是-CO(CH2)2CO2H。這些化合物可以用作為將鬼臼乙叉苷與牛血清清蛋白結(jié)合的一種物質(zhì)。
本發(fā)明提供了下式Ⅹ的抗腫瘤化合物
式中R3選自(C1-C10)烷基，苯基，呋喃基，和2-噻吩基;式中R4和R5之一選自羥基，C1-5烷氧基和C1-5酰氧基;而另一個則選自H，羥基，C1-5烷氧基，C1-5酰氧基，F(xiàn)，疊氮基和氨基;或者R4和R5之一是F，而另一個則選自疊氮基和氨基;R6選自氫，P(O)(OH)2及其堿金屬或堿土金屬鹽。


圖1至圖6說明了本發(fā)明化合物的合成，其中，圖2中的R相當(dāng)于式Ⅹ中的R4，圖6中的R1相當(dāng)于式Ⅹ中的R5。
本發(fā)明化合物的主要特征是用阿卓糖置換了鬼臼乙叉苷的葡萄糖部分。
正如圖1所示，該合成通過化合物4，芐基2，3-脫水-4，6-O-亞乙基-α-D-別吡喃糖苷來完成，該化合物可由芐基α-D-吡喃葡糖苷或相應(yīng)的(C1-C10)烷基、苯基、呋喃基或2-噻吩基化合物制得，方法是先進(jìn)行乙縮醛反應(yīng)然后進(jìn)行甲苯磺?；僭诘图壨榇既軇┲信c堿金屬低級醇鹽反應(yīng)形成環(huán)氧化物4，而所有原料均為已知化合物，或者可通過已知反應(yīng)制得。
可將圖1中的化合物1至7看作起始原料。圖2中的化合物既屬于本發(fā)明的范圍，也可以是用于制備這類化合物的新中間體。
如圖中所示，用于合成本發(fā)明化合物的起始化合物是已知化合物芐基α-D-吡喃葡糖苷，它在酸性催化劑存在下用乙醛進(jìn)行亞乙基化反應(yīng)。該反應(yīng)在下列反應(yīng)惰性有機溶劑中進(jìn)行;例如二氯甲烷、二氯乙烷、乙腈、四氫呋喃或它們的混合物。合適的酸性催化劑包括鹽酸、硫酸、甲苯磺酸或路易斯酸，例如氯化鋅。反應(yīng)溫度可為約10℃至50℃，最好是室溫，反應(yīng)時間約為1至4天。
可以通過在無水有機溶劑中，在用于中和所生成的HCl的含氮堿存在下與對甲苯磺酰氯反應(yīng)進(jìn)行甲苯磺?；Ｔ摲磻?yīng)最好在約20℃至40℃(合適的是在環(huán)境溫度)下在無水吡啶中進(jìn)行約3至7天。
通過在低級烷醇中與堿金屬醇鹽反應(yīng)，最好是在甲醇或乙醇中與甲醇或乙醇鈉或鉀反應(yīng)，將經(jīng)過甲苯磺?；幕衔镛D(zhuǎn)化為化合物4?？墒褂梅磻?yīng)惰性的有機溶劑例如酯或醚。另外，要使用過量的烷醇。反應(yīng)時間是約16至30小時，反應(yīng)溫度是約20℃至40℃。
通過反應(yīng)惰性的有機溶劑(最好是醚例如四氫呋喃或二噁烷)中，在約60℃至120℃下加熱約1至3天，將環(huán)氧環(huán)打開，形成2′-羥基化合物。
在含氮堿存在下用?；瘎?最好是酸酐例如乙酐)進(jìn)行?；磻?yīng)，形成例如6a類化合物。無水吡啶是優(yōu)選的堿，一般過量使用該無水吡啶以使它也用作溶劑。反應(yīng)溫度約為20℃至40℃，最好是環(huán)境溫度。反應(yīng)時間是約30分鐘至3小時。
一般在鈀催化劑(最好是載于碳或硫酸鋇上的鈀)存在下，用氫進(jìn)行氫解反應(yīng)。一般采用包含低級烷醇和低級羧酸的混合溶劑。優(yōu)選者是與乙酸混合的甲醇或乙醇。盡管可以采用加壓，但是一般在常壓下進(jìn)行該反應(yīng)，反應(yīng)溫度約為20℃至40℃，反應(yīng)時間約為1至3天。采用這一方法可以制得圖1中所示的化合物7a，b和d。
按照Wright等人在J.Org.Chem.，34，2632(1969)中介紹的方法，通過將普通中間體4與堿金屬氫氟酸鹽反應(yīng)，可以制得氟化物5b?？稍谀栠^量的氟化鉀存在下，在高沸點反應(yīng)惰性的有機溶劑(最好是有機多元醇，例如乙二醇)中進(jìn)行該反應(yīng)。反應(yīng)時間約為1.5至3小時，反應(yīng)溫度是約175℃至300℃，優(yōu)選的反應(yīng)時間是約30分鐘至1小時。
按前述方法將經(jīng)過氟化的化合物5b?；纬?b，然后通過在鈀-炭存在下用例如氫進(jìn)行氫化而脫去芐基，形成異構(gòu)體7b的混合物。
在反應(yīng)惰性的無水有機溶劑(例如二甲基甲酰胺、二甲亞砜或四氫呋喃)中與堿金屬疊氮化物(最好是疊氮化鈉)反應(yīng)，可以將化合物4轉(zhuǎn)化為疊氮化物5c，反應(yīng)溫度是約90℃至125℃，反應(yīng)時間是約1至3天。
按前述方法將該化合物?；?，形成化合物6c。
顯然，將6c通過氫化的脫芐基不能得到純產(chǎn)物。因此，采用Tetrahedron Letters，28，3505(1987)中所述的Rashimoto方法制備3-O-乙?；?2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基α和β-D-阿卓吡喃糖，7c。
在該方法中，已脫芐基的化合物先在鹵代有機溶劑(如四氯化碳或氯仿或它們的混合物)中與摩爾過量的N-溴代琥珀酰亞胺和1，2-環(huán)氧丙烷反應(yīng)，反應(yīng)時間是約1至3小時，反應(yīng)溫度是約75℃至100℃。然后，在與水混溶的反應(yīng)惰性的充氧的有機溶劑(最好是含水丙酮)中，使所得產(chǎn)物與摩爾過量的Hg(ON)2反應(yīng)，反應(yīng)溫度是約20℃至40℃，反應(yīng)時間是約30分鐘至2小時。
通過在無水有機溶劑(如醚、二噁烷或四氫呋喃)中例如用硼氫化鈉或氫化鋁鋰還原化合物4，可以制得化合物5d，反應(yīng)溫度是約30℃至75℃，反應(yīng)時間是1至3小時。
通過5d與乙酐的乙?；磻?yīng)，可以制得?；漠a(chǎn)物6d，然后再采用前述方法進(jìn)行氫化，形成化合物7d。
分離出的所有阿卓糖衍生物(7a至7d)均為α和β端基異構(gòu)體的混合物。
將選出的阿卓糖衍生物7a至7d(按前述方法制得)與4′-芐氧羰基-4′-脫甲基表鬼臼毒素，化合物8，或者與其中保護(hù)了酚基的類似化合物縮合，制得本發(fā)明的表鬼臼毒素。
在反應(yīng)惰性的有機溶劑(如二氯甲烷或二氯乙烷)中于0℃以下，在催化劑(如三氟化硼-乙醚配合物)存在下進(jìn)行該縮合反應(yīng)，該反應(yīng)時間約為10分鐘至5小時，最好是約30分鐘至1.5小時。通過在反應(yīng)混合物中加入叔胺(如吡啶或三乙胺)可以使與三氟化硼-乙醚配合物進(jìn)行的該反應(yīng)驟停。選擇何種酚基保護(hù)基并不受到具體的限制，可以包括形成?；苌铮珲ヮ?、以及碳酸酯類、醚類、縮醛等。采用常用的去保護(hù)法可除去這些保護(hù)基，所選擇的方法取決于所采用的保護(hù)基的性質(zhì)?？梢蕴峒暗囊话惴椒ò浠峄驂A催化的水解，在金屬催化劑如鋅粉或乙酸鋅存在下的醇解。
在圖2所示的方法中，苯酚保護(hù)基是芐氧羰基。通過采用前述方法的氫化作用，最好是采用鈀-炭催化由氫進(jìn)行的氫化反應(yīng)除去該保護(hù)基。
顯而易見的是將阿卓糖衍生物7a至7d的端基異構(gòu)體的混合物苷化，所得到的主要是β-端基異構(gòu)體。據(jù)認(rèn)為這一高度的立體選擇性是與3-乙酰氧基和1-羥基間的1，3-雙軸向立體化學(xué)作用有關(guān)的，這一作用妨礙了α-異構(gòu)體的苷化，而不影響β-異構(gòu)體。
在熱乙醇中用乙酸鋅使化合物10a脫乙酰基，得到起始化合物的混合物，即，2″-O-乙?；苌?3、3″-O-乙?；苌?2和完全脫乙酰基的化合物11a，該混合物可經(jīng)硅膠層析進(jìn)行分離。
由化合物10b至10d在烷醇中與乙酸鋅反應(yīng)，可以同樣制得化合物11b至11d。
疊氮化合物10c和11c經(jīng)長時間和/或在乙酸中的催化還原將2″-疊氮基轉(zhuǎn)化為氨基，并分別得到化合物10e，4′-脫甲基-4-O-(3-乙酰基-2-氨基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素，和14，4′-脫甲基-4-O-(2-氨基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素。按前述方法在鈀-炭催化下用氫進(jìn)行氫化反應(yīng)。
通過將脫保護(hù)基的苯酚與磷?；瘎?如三氯氧化磷或焦磷酸，最好是前者)反應(yīng)，形成本發(fā)明的4″-磷酰化的化合物。與氯氧化物的反應(yīng)類似于甲苯磺酰化反應(yīng)。在含氮堿(用于中和所產(chǎn)生的酸)存在下，于反應(yīng)惰性的有機溶劑中進(jìn)行上述反應(yīng)。所采用的叔胺最好包括吡啶、二烷基芳胺和三烷基胺。圖3說明了將化合物11b轉(zhuǎn)化為化合物15，磷酸二鈉鹽。
在約0℃至20℃進(jìn)行該反應(yīng)，反應(yīng)時間約為5至30分鐘，如果需要，可以分離酸，但是，最好不經(jīng)分離就地直接將它轉(zhuǎn)化為鹽，方法是加入金屬堿，合適的是加入堿金屬碳酸鹽，碳酸氫鹽或氫氧化物。最好是碳酸氫鹽。
按圖4所示，制得鬼臼乙叉苷的2″和/或3″-O-烷基類似物，例如，甲基類似物，化合物22、23和24。
在第一步合成反應(yīng)中，于環(huán)境溫度(即約25～40℃)下，在極性溶劑〔如二甲亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)〕中，采用堿金屬氫氧化物(如氫氧化鈉)和烷基碘(如甲基碘)的混合物，將化合物5a，芐基4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷烷基化。反應(yīng)時間是約15至60分鐘?？墒褂蒙阅栠^量的氫氧化物和碘化物，但是一般等摩爾量就足夠了。
如果采用甲基碘，得到下述異構(gòu)體的混合物芐基-2，3-二-O-甲基-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物16;芐基4，6-O-亞乙基-2-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物17;和芐基4，6-O-亞乙基-3-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷，化合物18。這些異構(gòu)體可按實施例所述方法進(jìn)行層析分離。
按前文所述實施例中說明和圖4所示方法，先將化合物16還原，然后與4′-脫甲基-4′-芐氧羰基表鬼臼毒素縮合，再進(jìn)行第二次還原，即可將化合物16轉(zhuǎn)化為化合物22，4′-脫甲基-4-O-(2，3-二-O-甲基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素。
按照圖4所示方法，即，乙?；?、還原、縮合、還原和與乙酸鋅反應(yīng)，制得化合物23，4′-脫甲基-4-O-(4，6-O-亞乙基-2-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖)表鬼臼毒素。上文和實施例中介紹和說明了所有的方法。
按照圖4所示的系列反應(yīng)，由化合物18制得了化合物24，4′-脫甲基-4-O-(2-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-3-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素。前文和實施例中介紹和說明了該反應(yīng)。它們包括乙?；?、還原、縮合、還原和最后一步與乙酸鋅反應(yīng)。
圖5描述了本發(fā)明的另外兩個活性化合物的制備方法，即，4′-脫甲基-4-O-(3-疊氮基-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素和4′-脫甲基-4-O-(3-氨基-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素。
由已知化合物3-疊氮基-2，3-二脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖制得了上述化合物。參見S.Castillon，等人的J.Org.Chem.，50，4913(1985)。附圖和實施例中介紹了這些反應(yīng)。除將化合物28還原成化合物30外，一般按前述方法進(jìn)行上述反應(yīng)。
對于制備化合物30，用于氫化反應(yīng)的催化劑是氧化鉑而不是鈀-炭。一般在環(huán)境溫度(即20℃至45℃)下，采用摩爾過量的氫在酸性溶劑(如乙酸∶水)中進(jìn)行該還原反應(yīng)。
從附圖及實施例中可以看出，采用氧化鉑催化劑還原化合物28時，不僅能將疊氮基還原，而且還可以除去芐氧羰基。
圖6的順序類似于圖1所示的順序〔它表示將圖1中的化合物4轉(zhuǎn)化為化合物5(a-d)、6(a-d)和7(a-d)〕，其不同點是在圖6中，化合物4被芐基2，3-脫水-α-吡喃甘露糖苷-4，6-O-環(huán)縮醛所代替，該化合物按Robertson，G.J.等人(J.Chem.Soc.，1935 1193-1201)的方法制得。相應(yīng)的(C1-10)烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基化合物是已知的或者可采用已知反應(yīng)方法制得。
除按類似于圖4所述的方法進(jìn)行甲基化反應(yīng)外，采用類似于圖1反應(yīng)的方法進(jìn)行圖6的反應(yīng)。按圖2和前述方法進(jìn)行制備本發(fā)明產(chǎn)物的后續(xù)反應(yīng)。
采用類似于圖2、3和4所述的方法，由圖6的化合物制備本發(fā)明的其他產(chǎn)物。實施例均對這些化合物作了說明。
采用本技術(shù)領(lǐng)域熟知的方法中的任一方法分離和純化按上述方法制得的化合物，所述分離和純化方法包括例如提取、沉淀、結(jié)晶和層析，實施例中對這些方法及其他一些方法均有描述。
根據(jù)對鼠移植P388白細(xì)胞的對抗作用，評價了有代表性的本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性。給五周齡雌性CDF1鼠腹膜內(nèi)接種0.4毫升含有106淋巴白細(xì)胞P388的稀釋腹水流體。以1天單一劑量腹膜內(nèi)給藥試驗化合物，觀察動物45天。經(jīng)試驗得知，受治動物平均存活時間(MST)的增長百分率高于未經(jīng)處理的對照動物，并以%T/C表示。%T/C值為125或大于125的化合物即被認(rèn)為具有明顯的抗腫瘤活性。表Ⅰ給出了體內(nèi)評價結(jié)果，即，最大%T/C(在括號內(nèi)同時列出獲得最大效應(yīng)的劑量)，和最小有效劑量(MED)，后者表示獲得%T/C為125或大于125的最小劑量。
表Ⅰ.對P388白細(xì)胞的抗腫瘤活性化合物 MST的最大%T/C(劑量，mg/kg/天) MED(mg/kg/天)鬼臼乙叉苷 288(120) 0.310a 170(120) 3010b 152(60) 1010c 150(120) 3010d 135(120) 12011a 220(30) 0.311b 181(60) 311c 139(120) 6011d 145(120) 3012 190(30) 0.313 160(120) 1014 176(10) 0.315 185(120) 3022 160(120) 1023 170(120) 3024 180(60) 129 133(30) 3030 152(30) 30
因此，本發(fā)明提供了抑制哺乳動物腫瘤的方法，該方法包括給患腫瘤的宿主服用抑制腫瘤有效量的式Ⅲ抗腫瘤化合物。為此目的，采用慣用途徑服用該藥物，所謂慣用途徑包括(但不限于)靜脈給藥、肌肉給藥、腫瘤內(nèi)給藥、動脈給藥、淋巴內(nèi)給藥和口服給藥。
本發(fā)明的另一方面提供了包含式Ⅲ化合物和可藥用載體的藥用組合物。該抗腫瘤組合物可以采用適用于所需給藥途徑的任何藥物劑型。這些組合物的實例包括用于口服的固體組合物，例如片劑、膠囊劑、丸劑、粉劑和顆粒劑，用于口服的液體組合物，例如溶液、懸浮液、糖漿或酏劑，以及用于胃腸道外給藥的制劑，例如無菌溶液、懸浮液或乳液。也可以將它們制成無菌固體組合物，在使用前可將該組合物即刻溶解在無菌水、生理鹽水或某些其他無菌注射用介質(zhì)中。
本技術(shù)領(lǐng)域技術(shù)熟練人員可很容易確定給一定的哺乳動物宿主服藥的最佳劑量和給藥方案。當(dāng)然，一般所采用的成人劑量應(yīng)根據(jù)下述因素變化所配制的具體組合物、所使用的具體化合物、施用方式以及所治療的具體部位、宿主和疾病。應(yīng)當(dāng)加以考慮的可修正藥物作用并為本領(lǐng)域技術(shù)熟練的人員所熟知的許多因素包括年齡、體重、性別、飲食、給藥時間、給藥途徑、排泄速率、患者癥狀、藥物配伍、反應(yīng)敏感性和疾病的嚴(yán)重程度。
下列實施例僅對本發(fā)明作進(jìn)一步解釋而不對本發(fā)明范圍構(gòu)成任何限制，附屬于本申請書的權(quán)利要求書對本發(fā)明的范圍作了限定。
起始原料的制備芐基4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃葡糖苷(2)將2滴濃硫酸加到芐基α-D-吡喃葡糖苷(1)(22g，0.0815mol)和乙醛(20ml)于無水二氯甲烷(250ml)中的懸浮液中，該混合物于室溫下劇烈攪拌3天。該反應(yīng)混合物依次用碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，將油狀殘留物在硅膠柱(Wako gel C-200，250g)上進(jìn)行層析。該柱先用氯仿，再用氯仿-甲醇(50∶1-25∶1)洗脫。收集含有所需產(chǎn)物的級分，蒸發(fā)至干，得到油狀殘留物，用異丙醚研制，得到19.22g(80%)題目化合物(2)。
MP 110-118℃.IRνmax(KBr)cm-11173，1160，1150，1127.1H NMR(CDCl3)δ1.37(3H，d，J＝5.13Hz，CH-CH3)，4.72(1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3)，4.98(1H，d，J＝4.03 Hz，H-1).
元素分析計算值 C15H20O6C60.80，H6.80實驗值C60.90，H6.92.
芐基2，3-二(O-對甲苯磺?；?-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃葡糖苷(3)將對甲苯磺酰氯(76g，0.4mol)加到化合物2(29g，0.1mol)和4-二甲氨基吡啶(24.4g，0.2mol)的無水吡啶(300ml)溶液中，將該混合物于室溫下攪拌3天。在該混合物中再加入38g(0.2mol)對甲苯磺酰氯，并將該混合物再攪拌4天。減壓除去大部分溶劑。將殘留物倒入1升水中，用1升二氯甲烷提取該混合物。該提取液依次用500ml 2N硫酸、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。真空蒸發(fā)該干燥的提取液，油狀殘留物用500ml乙醚研制，得到11.9g題目化合物(3)。將濾液濃縮，濃縮物經(jīng)硅膠柱(Wako gel D-200，300g)層析純化。該柱用氯仿和氯仿-甲醇(50∶1-10∶1)洗脫。收集含有(3)的級分，并蒸發(fā)至干，得到7.7g化合物3(第二批)，(3)的總產(chǎn)量是19.6g(32.5%)，MP 140-42℃.IRνmax(KBr)cm-11600，1366，1347，1183，1178.1H NMR(CDCl3)δ0.98(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，2.40(3H，s，CH3Ph)，2.44(3H，s，CH3Ph)，4.39(1H，dd，J＝9.52 & 3.66 Hz，H-2)，4.40(1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.98(1H，dd，J＝9.89 & 9.52 Hz H-3)，5.20(1H，d，J＝3.66Hz，H-1).
元素分析計算值 C29H32O10S2C57.60;H5.33.S10.60.
實驗值C57.52，H5.31，S10.60.
芐基2，3-脫水-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿洛糖苷(4)將28%甲醇鈉的甲醇溶液(20ml，0.1mol)加到化合物3(15.3g，0.0253mol)的乙酸乙酯(300ml)溶液中，將該混合物于室溫下攪拌24小時。該反應(yīng)混合物依次用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。蒸發(fā)至干后，用乙醚-正己烷研制殘留物，得到4.31g題目化合物(4)。將濾液蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(Kiesel gel 60，40g)層析純化。該柱用甲苯/乙酸乙酯(10∶1)進(jìn)行洗脫，收集所需的組分，蒸發(fā)至干，得到1.45g化合物4，4的總產(chǎn)量為5.76g(82%)，MP 132-134℃.IRνmax(KBr)cm-11170，1153，1119，1055，1034.1H NMR(CDCl3)δ1.38(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，3.37(1H，d，J＝4.40 Hz，H-3)，3.46(1H，dd，J＝4.40 & 1.10 Hz，H-2)，4.79(1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3)，5.04(1H，d，J＝1.10 Hz，H-1).
元素分析計算值 C15H18O5C64.74，H6.52實驗值C64.51，H6.50芐基4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(5a和32a)將1N氫氧化鈉(100ml，100mmol)加到化合物4(3.06g，11mmol)的二噁烷(100ml)溶液中，將該混合物攪拌回流2天。將該反應(yīng)混合物濃縮至100ml，用300ml氯仿提取濃縮液。提取液依次用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，油狀殘留物經(jīng)硅膠狀(kiesel gel 60，50g)層析純化。該柱用甲苯/乙酸乙酯(10∶1-1∶1)洗脫，收集所需的用甲苯-乙酸乙酯(1∶1)洗脫的級分，蒸發(fā)至干，得到2.53g(78%)題目化合物(5a)，MP 116-118℃.IRνmax(KBr)cm-13450，3300，1412，1132.1H NMR(CDCl3)δ1.38(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.83(1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.81(1H，br.s，H-1).
元素分析計算值 C15H20O6C60.80，H6.80.
實驗值C60.53，H6.81按類似的方法，由芐基2，3-脫水-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃甘露糖苷(圖6中的化合物31)制得了化合物32a。芐基2，3-二-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(6a)將化合物5a(2.5g，8.4mmol)和4-二甲氨基吡啶(250mg)于無水吡啶(25ml)和乙酐(10ml)中的混合物在室溫下攪拌1小時。將10ml甲醇加到該反應(yīng)混合物中，并將該溶液在室溫下攪拌30分鐘。將該混合物減壓濃縮，用100ml乙酸乙酯稀釋殘留物，依次用5%硫酸、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，40g)層析。該柱用甲苯-乙酸乙酯(10∶1)洗脫，收集所需級分，蒸發(fā)至干，得到2.55g(80%)題目化合物(6a)。
MP 94-96℃.IRνmax(KBr)cm-11746，1733，1240，1221，1136.1H NMR(CDCl3)δ1.34(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，2.05(3H，s，OCOCH3)，2.07(3H，s，OCOCH3)，4.78(1H，d，J＝1.10 Hz，H-1)，4.79(1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，5.09(1H，dd，J＝2.93 & 1.10 Hz，H-2)，5.11(1H，t，J＝2.93 Hz，H-3).
元素分析計算值 C19H24O8C59.99，H6.36.
實驗值C60.03，H6.43.
2，3-二-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-吡喃阿卓糖(7a和34a)將化合物6a(1.14g，3mmol)和10%鈀-炭(1g)于乙酸(50ml)和乙醇(5ml)中的混合物在1個大氣壓下氫化2天。濾除催化劑，并用甲醇洗滌。將濾液和洗液蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，40g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(10∶1-1∶1)洗脫，收集所需的由甲苯-乙酸乙酯(1∶1)洗脫的級分，并蒸發(fā)至干，得到800mg(92%)7a，它是α和β-異構(gòu)體的混合物。
MP ca.55℃.IRνmax(KBr)cm-11752，1374，1229.1H NMR(CDCl3)δ5.04(1H，d，J＝6.60 Hz，H-1 of α-異構(gòu)體)，5.16(1H，dd，J＝8.80 & 1.46 Hz，H-1 of β-異構(gòu)體).
元素分析計算值 C12H18O8C49.65，H6.25.
實驗值C49.43，H6.46.
該化合物與按相同方法制得的圖6中的化合物34a相同。芐基2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷(15b)將化合物4(10g，0.036mol)和氫氟酸鉀(25g，0.32mol)于乙二醇(200ml)中的混合物在200℃攪拌加熱45分鐘。冷卻至室溫后，用500ml氯仿提取該反應(yīng)混合物，提取液用NaHCO3水溶液洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液濃縮至200ml。將乙醛縮二甲醇(19ml，0.18mol)和對甲苯磺酸(200mg)加到該濃縮液中，并將該混合物在室溫下攪拌2小時。該反應(yīng)混合物依次用NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，將油狀殘留物進(jìn)行硅膠柱(kiesel gel 60，130g)層析。該柱用甲苯-乙酸乙酯(10∶1)洗脫，收集所需的第一批級分，蒸發(fā)至干，得到3g(28%)題目化合物(5b)，為油狀物。將第二批級分蒸干，得到1.03g(9.6%)芐基3-脫氧-4，6-O-亞乙基-3-氟-α-D-吡喃葡糖苷。IRνmax(液體)cm-13500，1500，1460，1420，1220，1160，1140.1H NMR(CDCl3)δ
1.38(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.22(1H，dt，J＝6.60 & 2.93 Hz，H-3)，4.67(1H，ddd，J＝43.97，3.30 & 1.10 Hz，H-2)，4.83(1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.95(1H，d，J＝10.26 Hz，H-1).
按類似的方法由化合物31制得了化合物32b芐基3-O-乙?；?2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷(6b)將乙酸酐(10ml)加到化合物5b(2.5g，8.39mmol)和4-二甲氨基吡啶(250mg)于無水吡啶(25ml)中的混合物中，該混合物在室溫下攪拌30分鐘。將20ml甲醇加到該混合物中，該混合物在室溫下攪拌30分鐘，并蒸發(fā)至干，殘留物用150ml乙酸乙酯稀釋，依次用5%硫酸、水、NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸發(fā)至干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，40g)層析。該柱用甲苯-乙酸乙酯(20∶1)洗脫，收集所需的級分，并蒸發(fā)至干，得到2.57g(90%)題目化合物6b，為油狀物。
IRνmax(液體)cm-11750，1500，1410，1380.1H NMR(CDCl3)δ1.35(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，2.05(3H，s，OCOCH3)，4.75(1H，ddd，J＝43.23，3.30 & 1.10 Hz，H-2)，4.80(1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.94(1H，d，J＝10.99 Hz，H-1)，5.27(1H，dt，J＝6.23 & 3.30 Hz，H-3).
按類似的方法，由化合物32b制得了相應(yīng)的3-氟化合物。3-O-乙?；?2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-α和β-D-吡喃阿卓糖(7b)
將化合物6b(2.5g，7.35mmol)和10%鈀-炭(2.5g)于乙酸(50ml)中的混合物在室溫以及一個大氣壓下氫化24小時。濾除催化劑，用甲醇洗滌，將濾液和洗液蒸發(fā)至干。將殘留物溶于200ml氯仿中，該溶液依次用NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(keesel gel 60，60g)層析純化。該柱用氯仿和氯仿-甲醇(50∶1)洗脫。收集由氯仿-甲醇洗脫的第一批級分，并蒸發(fā)至干，得到800mg(32%)回收的起始物(6b)為油狀物。收集第二批級分，并蒸發(fā)至干，得到910mg(49.5%)題目化合物(7b)，為油狀物。
IRνmax(液體)cm-13450，1750，1420，1380.1H NMR(CDCl3)δ1.33 & 1.34(each 3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，2.15(6H，s，OCOCH3)，4.75 and 4.79(each 1H，q，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，4.69(1H，ddd，J＝43.2，3.30 & 1.10 Hz，H-2，α)，4.57(1H，ddd，J＝45.43，3.66 & 0.73 Hz，H-2，β)，5.21(1H，dd，J＝10.63 & 6.23 Hz，H-1，α)，4.99(1H，dd，J＝20.52 & 11.73 Hz，H-1，β)，5.38(1H，dd，J＝5.50 & 3.30 Hz，H-3，α)，5.51(1H，dd，J＝7.33 & 3.30 Hz，H-3，β).
按類似的方法，由前面制備的3-氟化合物制得了相應(yīng)的化合物34b。
芐基2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(5c)將化合物4(11.12g，0.04mol)和疊氮化鈉(26g，0.4mol)于無水DMF(200ml)中的混合物在100℃加熱攪拌2天。將該反應(yīng)混合物濃縮至50ml，用800ml氯仿提取濃縮液。提取液用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，130g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(20∶1)洗脫，收集所需的級分，并蒸發(fā)至干，得到10g(78%)粗產(chǎn)物5c，它無需進(jìn)一步純化直接用于下一步乙?；磻?yīng)。IRνmax(液體)cm-12100。
按類似的方法，由化合物31制得了化合物32c。
芐基3-O-乙?；?2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(6c)向化合物5c粗品(10g，0.03mol)于含有4-二甲氨基吡啶(1g)的無水吡啶(100ml)中的溶液中加入乙酸酐(50ml)，將該溶液在室溫下攪拌30分鐘。冷卻下滴加甲醇(50ml)，將該混合物于室溫下攪拌30分鐘并蒸發(fā)至干。用500ml乙酸乙酯提取該殘留物，提取液依次用5%H2SO4、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，將油狀殘留物進(jìn)行硅膠柱(kiesel gel 60，100g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(50∶1-10∶1)洗脫。收集含有6c的級分，在硅膠柱上重復(fù)層析4次，用相同的溶劑洗脫。收集第一批級分，并蒸發(fā)至干，得到2.16g(19%)葡萄糖衍生物，后者經(jīng)靜置結(jié)晶。
MP 76-80℃.IRνmax(KBr)cm-12106，1747.
元素分析計算值 C17H19N3O6C56.51，H5.30，N11.63實驗值C56.21，H5.83，N11.65.
按同樣的方法收集第二批級分，蒸干，得到7.35g(65%)阿卓糖衍生物(6c)，后者用正己烷結(jié)晶。
MP 56-57℃.IRνmax(KBr)cm-12109，1736.1H NMR(CDCl3)δ1.35(3H，d，J＝5.1 Hz，8-H)2.03(3H，s，OCOCH3)，3.55(1H，t，J＝10.3 Hz，6-Hax)，3.77(1H，dd，J＝2.9 & 9.5 Hz，4-H)，4.05(1H，dd，J＝0.7 & 2.9 Hz，2-H)，4.11(1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6-Heq)，4.20(1H，ddd，J＝5.5，9.9 & 10.3 Hz，5-H)，4.46 & 4.74(2H，each d，CH2Ph)，4.78(1H，q，J＝5.1 Hz，7-H)，4.83(1H，brs，1-H)，5.07(1H，t，J＝2.9 Hz，3-H).
元素分析計算值 C17H19N3O6C56.51，H5.30，N11.63.
實驗值C56.12，H5.81，N11.65.
按類似的方法，由化合物32c制得了相應(yīng)的3-疊氮基化合物。
3-O-乙?；?2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α和β-D-吡喃阿卓糖(7c)將化合物(6c)(1.27g，3.5mmol)、N-溴琥珀酰胺(1.88g，10.6mmol)和1，2-環(huán)氧丙烷(7ml)于四氯化碳(30ml)和氯仿(30ml)中的混合物回流1.5小時。將該反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，將殘留物溶于40ml丙酮中。向該溶液中加入氰化汞(1.76g，7.6mmol)于水(20ml)中的溶液，將該混合物在室溫下攪拌1小時，并濃縮至20ml。用100ml氯仿提取該濃縮液，用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，將干燥過的提取液蒸發(fā)至干。油狀殘留物進(jìn)行硅膠柱(kiesel gel 60，50g)層析。該柱用甲苯-乙酸乙酯(10∶1-2∶1)進(jìn)行梯度洗脫。收集用甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫的所需級分，蒸發(fā)至干，得到710mg(67.5%)7c，為油狀物。IRνmax(Neat)cm-13300-3500，2110，1410，1220，1090，1070.
1HNMR未見芐基質(zhì)子峰。
按類似的方法，由前面制備的3-疊氮基化合物制得了相應(yīng)的3-疊氮基化合物，化合物34c。
芐基2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(5d)在回流溫度下，向氫化鋁鋰(5g，0.132mol)無水乙醚(200ml)中的攪拌的懸浮液中，滴加化合物4(3.17g，11.4mmol)于200ml無水乙醚中的溶液，將該混合物回流1.5小時，并冷卻至0℃。依次將50ml乙酸乙酯、50ml水和150ml 2N硫酸滴加到該反應(yīng)混合物中。分離出有機層，用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸發(fā)至干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，80g)層析純化，該柱用甲苯/乙酸乙酯(2∶1)洗脫。收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，并蒸發(fā)至干，得到3.13g(98%)5d。MP 74-76℃.IRνmax(KBr)cm-13550，1165，1149，1125，1100，1056，1034，1026.
1H NMR(CDCl3)δ1.39(3H，d，J＝5.1 Hz，H-8)，4.81(1H，q，J＝5.1 Hz，H-7)，4.95(1H，d，J＝3.8 H，H-1).
按類似的方法，由化合物31制得了化合物32d。
芐基3-O-乙酰基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(6d)
將化合物5d(3g，0.0107mol)和4-N，N-二甲氨基吡啶(0.3g)于吡啶(60ml)和乙酐(30ml)中的溶液在室溫下攪拌1小時。將60ml甲醇滴加到該反應(yīng)溶液中，將該混合物蒸發(fā)至干。殘留物用200ml乙酸乙酯提取，依次用2N硫酸、水、鹽水洗滌，用MgSO4干燥，除去溶劑后，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，100g)層析純化，該柱用甲苯-乙酸乙酯(10∶1-5∶1)進(jìn)行梯度洗脫。收集所需級分，并蒸發(fā)至干，得到2.65g(77%)6d，為油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ1.35(3H，d，J＝5.1Hz，8-H)，1.96(1H，ddd，J＝3.0，4.3 & 15.4 Hz，2-Hax)，2.04(3H，s，OCOCH3)，2.36(1H，ddd，J＝0.9，3.0 & 15.4 Hz，2-Heq)，3.49(1H，dd，J＝3.0 & 9.8 Hz，4-H)，3.50(1H，t，J＝10.3 Hz，6-Hax)，4.09(1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6-Heq)，4.24(1H，ddd，J＝5.1，9.8 & 10.3 Hz，5-H)，4.42 & 4.73(2H，each，d，CH2Ph)，4.77(1H，q，J＝5.1 Hz，7-H)，4.90(1H，d，J＝4.3 Hz，1-H).
按類似的方法，由化合物32d制得了相應(yīng)的2-O-乙?；?3-脫氧化合物。
3-O-乙?；?2-脫氧-4，6-O-亞乙基-α和β-D-吡喃阿卓糖(7d)將化合物6d(2.47g，7.67mmol)和10%鈀-炭(1g)于乙酸(50ml)和乙醇(10ml)中的混合物在一大氣壓氫化20小時。濾除催化劑，用50ml乙醇將催化劑洗滌兩次。合并濾液和洗滌液并蒸發(fā)至干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，100g)層析純化，該柱用甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗滌。收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，蒸發(fā)至干，得到1.32g(74%)7d，為油狀物，1H NMR譜表明，組成為α-和β-異構(gòu)體的1∶2混合物。
按類似的方法，由前述制備的化合物制得了相應(yīng)的2-O-乙?；?3-脫氧化合物，化合物34d。
實施例14′-芐氧羰基-4′-脫甲基-4-O-(2，3-二-O-乙?；?4，6-O亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(9a)在-18℃下，向4′-芐氧羰基-4′-脫甲基表鬼臼毒素(8，226mg，0.4mmol)和7a(232mg，0.8mmol)于20ml無水1，2-二氯乙烷中的冷卻和攪拌的混合物中，加入0.15ml(1.2mmol)三氟化硼-醚配合物，將該混合物在-18℃攪拌45分鐘。將0.3ml無水吡啶加到該混合物中，將該混合物在-18℃攪拌10分鐘。用100ml氯仿提取該混合物，提取液依次用水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸發(fā)，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel，gel 60，30g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫。收集通過TLC(甲苯-乙酸乙酯＝1∶1)監(jiān)測的所需級分，蒸發(fā)至干，用乙醚研制，得到250mg(75%)題目化合物9a。MP 135-140℃.IRνmax(KBr)cm-11767，1600，1507，1486，1234，1218，1165，1132，1099，1072，1038.UVλmax(MeOH)nm(ε)292(3000).
由HPLC預(yù)測的純度為90%;(75% MeOH-緩沖液(pH 7)).
元素分析計算值 C43H42O7H2OC60.84，H5.22.
實驗值C60.56，H5.24
實施例24′-脫甲基-4-O-(2，3-二-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(10a)將220mg(0.265mmol)化合物9a和100mg 10%鈀-炭于20ml乙醇和20ml丙酮中的混合物在一大氣壓下氫化1.5小時，濾除催化劑，用丙酮洗滌。合并濾液和洗滌液，并蒸發(fā)至干。殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，15g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(1∶1)洗脫，收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，并蒸發(fā)至干。殘留物用乙醚研制，得到155mg(90%)題目化合物10a。
MP 205-210℃(分解).IRνmax(KBr)cm-13400，1762，1610，1507，1485，1373，1230，1190，1113，1098，1072，1039.UVλmax(MeOH)nm(ε)235(sh)(12，000)，285(2，900).1H NMR(CDCl3)δ1.34(3H，d，J＝5.13 Hz，CH-CH3)，2.11(3H，s，OAc)，2.13(3H，s，OAc)，4.79(1H，q，J＝5.13Hz，CH-CH3)，4.97(1H，d，J＝3.30 Hz，AG-H-4)，5.00(1H，d，J＝1.10 Hz，糖-H-1)，5.02(1H，dd，J＝3.30 & 1.10 Hz，糖-H-2)，5.29(1H，t，J＝3.30 Hz，糖-H-3).
元素分析計算值 C33H36O15C58.93，H5.40實驗值C58.70，H5.4110a的脫乙酰化4′-脫甲基-4-O-(4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(11a)、4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(12)和4′-脫甲基-4-O-(2-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(13)的制備將1.1g(1.6mmol)化合物10a和3.52g(16mmol)乙酸鋅二水合物于50ml乙醇和50ml二噁烷中的混合物在攪拌下回流16小時，并將該混合物蒸發(fā)至干。用含有1ml乙酸的氯仿提取殘留物，依次用NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌該提取液，用MgSO4干燥。將提取液蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，50g)層析。該柱用氯仿-甲醇(100∶1)洗脫。
將第一批級分蒸發(fā)至干得到142mg(9%)起始原料(10a)。將第二批級分蒸發(fā)至干得到334mg(32%)2-O-乙?；苌?13)。將第三批級分蒸發(fā)至干，并經(jīng)制備HPLC純化，得到77mg(8%)3-O-乙?；苌?12)。收集第四批級分，并將其蒸發(fā)至干，用乙醚研制，得到145mg(15%)完全脫去乙?；幕衔?11)。
11a的數(shù)據(jù)MP約280℃(逐漸分解)由HPLC預(yù)測的純度＞95%(55%甲醇-緩沖系;滯留時間4分鐘)IRνmax(KBr)cm-11767，1730，1610，1518，1507，1486，1231，1164，1111.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh)(12，000)，285(4，000).
元素分析計算值 C29H32O131/2H2OC58.29，H5.57.
實驗值C58.50，H5.57.
12的數(shù)據(jù)MP 160-165℃(分解)。由HPLC預(yù)測的純度90%(55%甲醇-緩沖系pH7;滯留時間7.7分鐘)。
IRνmax(KBr)cm-13426，1777，1754，1612，1512，1505，1485，1234，1117，1039.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh)(12，000)，286(3，900).
元素分析計算值 C31H34O141/2H2OC58.21，H5.52實驗值C58.13，H5.76.
13的數(shù)據(jù)MP 180-190℃(分解)由HPLC預(yù)測的純度＞95%(55%甲醇-緩沖系;滯留時間6.7分鐘)IRνmax(KBr)cm-13470，1777，1754，1613，1513，1505，1484，1230，1160，1090.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh)(12，000)，284(3，900).
元素分析計算值 C31H34O14H2OC57.40，H5.59實驗值C57.86，H5.56實施例34′-芐氧羰基-4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙酰基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(9b)在-18℃下，向4′-芐氧羰基-4′-脫甲基表鬼臼毒素(8，830mg，1.47mmol)和化合物7b(550mg，2.2mmol)于無水1，2-二氯乙烷(50ml)冷卻和攪拌的混合物中，加入三氟化硼-醚配合物(0.55ml，4.4mmol)，將該混合物在-18℃攪拌1小時。在該混合物中加入1ml吡啶，將該混合物在-18℃攪拌5分鐘。該混合物用100ml氯仿稀釋，依次用水、飽和NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液濃縮至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，30g)層析純化，該柱用甲苯-乙酸乙酯(4∶1)洗脫。收集第一批級分，蒸發(fā)至干，得到27mg(2.4%)題目化合物的α異構(gòu)體〔經(jīng)NMR(400MHz)確定其結(jié)構(gòu)〕，為次要產(chǎn)物。收集第二批級分，蒸發(fā)至干，得到959mg(85%)所需化合物(9b)。
MP約145℃(逐漸分解)。預(yù)測純度80%HPLC(80%MeOH-pH7緩沖系)。IRνmax(KBr)cm-11772，1600，1507，1486.UVλmax(MeOH)nm(ε)290.5(3900).
元素分析計算值 C39H39O15FC61.09，H5.13.
實驗值C60.86，H5.13.
按類似的方法，用8將醇(7c和7d)苷化，分別制得了化合物(9c和9d)。
按類似的方法制得了所有的相應(yīng)的3-氟化合物。
4′-芐氧羰基-4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(9c)MP 120-130℃。由HPLC預(yù)測純度85%。
IRνmax(KBr)cm-12109，1772，1602，1507，1485.UVλmax(MeOH)nm(ε)291(4100).
元素分析計算值 C39H39N3O15C59.31，H4.98，N5.32.
實驗值C59.28，H5.02，N5.334′-芐氧羰基-4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(9d)MP150℃。由HPLC預(yù)測純度80%。IRνmax(KBr)cm-11772，1746，1600，1485.UVλmax(MeOH)nm(ε)291(2700).
元素分析計算值 C31H40O15.H2OC61.09，H5.52實驗值C61.25，H5.31按類似的方法，由適宜的起始化合物制得了相應(yīng)的3-疊氮基和2-O-乙?；衔铩?br> 實施例44′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(10b)將化合物9b(825mg，1.077mmol)和10%鈀-炭(100mg)于乙醇(50ml)和丙酮(50ml)中的混合物在一大氣壓下氫化1小時。濾除催化劑，并用甲醇洗滌。將濾液和洗液蒸發(fā)至干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，60g)層析，該柱用甲苯-乙酸乙酯(3∶1-2∶1)洗脫，收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，蒸干，得到620mg(91%)題目化合物(10b)，MP 209-212℃.IRνmax(KBr)cm-11762，1610，1484.UVλmax(MeOH)nm(ε)235(sh)(13，000)，284.5(4，000).
元素分析計算值 C31H38O13FC58.86，H5.26.
實驗值C58.67，H5.21.
按類似的方法將9c和9d氫解，分別得到4′-酚;10c和10d。
按類似的方法，由適宜的起始化合物制得了相應(yīng)的3-氟化合物。
4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(10c)MP150-160℃。由HPLC預(yù)測純度95%。
IRνmax(KBr)cm-13438，2107，1615，1502.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh，12，800)，285(4，100).
元素分析計算值 C31H33N3O13.1/4 tolueneC57.96，H5.20，N6.19.
實驗值C57.67，H5.21，N6.08.
4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙酰基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(10d)。
MP185-188℃。由HPLC預(yù)測純度95%。
IRνmax(KBr)cm-11759，1610，1484，1230，1217.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，12，000)，285(3，900).
元素分析計算值 C31H34O13C60.58，H5.58實驗值C60.58，H5.60按類似的方法，由適宜的起始化合物制得了相應(yīng)的3-疊氮基和2-O-乙?；衔?′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?2-氨基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素鹽酸鹽(10e)在與將9c還原成10c不同的條件(溶劑，反應(yīng)時間等)下將9c氫化，制得了該化合物。
將900mg(1.1mmol)化合物9c和500mg 10%鈀-炭于40ml乙酸和8ml乙醇中的混合物在室溫和一大氣壓下氫化4小時。濾除催化劑，用20ml甲醇洗滌兩次。合并濾液和洗滌液，將該混合物蒸干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，20g)層析純化。該柱先用氯仿然后再用氯仿-甲醇(25∶1)洗脫。收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，蒸干，用乙醚研制殘留物，得到452mg(63%)題目化合物(35)的游離胺，MP 245-250℃(分解)。IRνmax(KBr)cm-1
1770，1740，1600，1480，1230，1110，1040;UVλ(MeOH)maxnm(ε)285(4100)，292(4000).
將該游離胺(308mg，0.5mmol)懸浮于5ml甲醇中。將1ml(2.7mmol)10%的鹽酸甲醇溶液加到該懸浮液中，得到澄清液。用100ml乙醚稀釋該溶液，過濾收集所得固體，用乙醚洗滌，得到300mg(92%)題目化合物(10e)，MP約215℃(分解)IRνmax(KBr)cm-11750，1610，1480，1230，1100，1030;UVλ(MeOH)maxnm(ε)285(3，500);由HPLC預(yù)測的純度為(95%，60%MeOH緩沖液;4.7分鐘);MS FAB(+)，m/z630(M+1)+;1H NMR(400 MHz，D2O)δ5.42(1H，d，J＝1.83 Hz，H-1)，3.66(1H，m，H-2)，5.50(1H，t，J＝2.93 Hz，H-3)，5.00(1H，q，J＝5.13Hz，H-7)， .36(1H，d，J＝5.13 Hz，H-8)，2.20(3H，s，OAc).
實施例54′-脫甲基-4-O-(2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(11b)將化合物10b(520mg，0.8mmol)和乙酸鋅二水化合物(530mg，2.4mmol)于甲醇(100ml)中的混合物在攪拌下回流16小時，將該混合物蒸發(fā)至干。用100ml含0.4ml乙酸的氯仿提取殘留物，用水和鹽水洗滌提取液，用MgSO4干燥。除去溶劑后，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，該柱用氯仿-甲醇(100∶1)洗脫，收集通過TLC監(jiān)測的所需級分，蒸干。用乙醚研制殘留物，得到468mg(79%)11b。MP 277-279℃(分解).IRνmax(KBr)cm-11764，1610，1484.UVλmax(MeOH)nm(ε)235(sh)(14，000)，284(4，300)，元素分析計算值 C29H31O12FC58.98，H5.29實驗值C58.98，H5.30.
將10c和10d脫乙?；謩e得到11c和11d。
按照類似的方法，由適宜的起始化合物制得了相應(yīng)的3-氟化合物。
4′-脫甲基-4-O-(2-疊氮基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(11c)MP.283-285℃，由HPLC預(yù)測純度95%IRνmax(KBr)cm-13438，2107，1767，1615，1517.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh，12，000)，286(4，000).
元素分析計算值 C29H31N3O12Et2OC57.63，H6.01，N6.11.
實驗值C57.21，H5.89，M6.08.
4′-脫甲基-4-O-(2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(11d)MP 288-292℃。由HPLC預(yù)測純度95%。IRνmax(KBr)cm-13300，1762，1610，1484.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，12，000)，286(4，000)，291(3，900).
元素分析計算值 C29H32O12C60.83，H5.63實驗值C60.76，H5.76按類似的方法，由適宜的起始化合物制得了相應(yīng)的3-疊氮基化合物和2-脫氧表異構(gòu)體。
實施例64′-脫甲基-4-O-(2-氨基-2-脫氧-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼的毒素(14)將11c(203mg，0.33mmol)和10%鈀-炭(200mg)于乙酸(15ml)和乙醇(5ml)中的混合物在一大氣壓下氫化4小時。濾除催化劑，用50ml甲醇洗滌。合并濾液和洗滌液，蒸干。殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，20g)層析，該柱用氯仿-甲醇(50∶1-25∶1)洗脫，收集由氯仿-甲醇(25∶1)洗脫出的所需級分，蒸干，用乙醚研制，得到98mg(50.5%)14，為游離胺。MP 285-288℃(分解)。由HPLC預(yù)測純度95% IRνmax(KBr)cm-13380，1765，1610，1461，1230，1137，1089，1034.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(sh，13，000)，285(4，200).
元素分析計算值 C29H33NO12C59.28，H5.66，N2.38實驗值C59.10，H5.87，N2.24
將該游離胺(60mg，0.1mmol)溶解在4ml二噁烷中，在該溶液中加入0.1ml(0.27mmol)10%氯化氫的甲醇溶液，在30℃以下將該混合物濃縮至2毫升。將該濃縮液凍干，得到62mg(100%)14的鹽酸鹽。IRνmax(KBr)cm-11770，1610，1507，1458.UVλmax(MeOH)nm(ε)238(11，000)，285(3，700).
按類似的方法制得了相應(yīng)的3-氨基-3-脫氧化合物。
實施例74′-脫甲基-4-O-(2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素-4′-脫氧-4′-磷酸二鈉鹽(15)在5℃下，向11b(118mg，0.2mmol)和N，N-二異丙基乙胺(0.52ml，3mmol)于無水乙腈(10ml)中的冷卻和攪拌的溶液中，加入磷酰氯(122mg，0.8mmol)無無水乙腈(0.5ml)中的溶液，將該混合物在5℃攪拌10分鐘。在該反應(yīng)混合液中加入1ml水，在30℃以下濃縮至2ml。將濃縮液溶解在10ml含有300mg NaHCO3的水中，用30ml乙醚洗滌該溶液。將水層載于裝有50ml制備PAK-C18柱填料(Waters)的柱上。該柱用水洗滌，然后依次用20%甲醇和30%甲醇洗脫。收集由20%甲醇洗脫的所需級分，濃縮至5ml，凍干，得到50mg15。收集由20%甲醇和30%甲醇洗脫的粗級分，濃縮至10ml，凍干，得到50mg粗產(chǎn)品，后者經(jīng)制備HPLC純化，得到17mg15。15的總產(chǎn)量是67mg(49%)。MP.190-195℃(分解)。由HPLC預(yù)測純度＞95%。
IRνmax(KBr)cm-11772，1600，1506，1486，1235.UVλmax(MeOH)nm(ε)289.5(3，500).
按類似的方法，制得了相應(yīng)的3-氟化合物。
實施例8下述化合物的O-甲基化芐基4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(5a);芐基2，3-二-O-甲基-4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(16);芐基4，6-O-亞乙基-2-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷(17)和芐基4，6-O-亞乙基-3-O-甲基-α-D-吡喃阿卓糖苷(18)向2.23g(7.5mmol)芐基4，6-O-亞乙基-α-D-吡喃阿卓糖苷(5a)于15ml DMSO中的溶液中，加入360mg(7.5mmol)50%的氫化鈉-油分散體，將該混合物在室溫攪拌30分鐘。在該混合物中加入10ml甲基碘，將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。用150ml氯仿提取該反應(yīng)混合物，依次用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，50g)層析，該柱用甲苯-乙酸乙酯(5∶1-2∶1)洗脫。收集由甲苯-乙酸乙酯(5∶1)洗脫出的第一批級分，蒸干，得到920mg(38%)16。1H NMR(CDCL3)δ3.40和3.55(各為3H，s，OCH3)，4.79(1H，br-s，H-1).
收集由甲苯-乙酸乙酯(5∶1)洗脫的第二批級分，蒸干，得到250mg(10%)17，
1H NMR(CDCL3)δ3.42(3H，s，OCH3)，4.89(1H，br-s，H-1).
收集由甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫出的第三批級分，蒸干，得到780mg(33.5%)18，1H NMR(CDCl3)δ3.55(3H，s，OCH3)，4.71(1H，br-s，H-1).
收集由甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫出的最后的級分，蒸干，得到400mg(18%)起始原料5a。
實施例92，3-二-O-甲基-4，6-O-亞乙基-D-吡喃阿卓糖(19(19)將920mg(2.84mmol)化合物16和500mg10%鈀-炭于10ml乙酸和2ml乙醇中的混合物在室溫和一大氣壓下氫化20小時。濾除催化劑，用20ml乙醇洗滌兩次。合并濾液和洗滌液，將該混合物蒸干。油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，30g)層析純化，該柱用甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫。在TLC監(jiān)測下收集所需級分，蒸干，得到650mg(98%)題目化合物19，為油狀物，其NMR(400MHz)譜表明它是α和β端基異構(gòu)體的混合物。1H NMR(CDCl3)δ3.53 & 3.54(各為3H，s，OCH3，α-端基異構(gòu)體)，3.45 & 3.61(各為3H，s，OCH3，β-端基異構(gòu)體)，.99(1H，br-s，H-1α)5.00(1H，br-s，H-1β).
實施例103-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-2-O-甲基-D-吡喃阿卓糖(20)將乙酸酐(2.5ml)加到250mg(0.8mmol)化合物17和25mg N，N-二甲氨基吡啶于5ml無水吡啶中的溶液中，將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。在該混合物中加入5ml甲醇，將該溶液蒸干。殘留物用50ml乙酸乙酯提取，依次用2N硫酸、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將提取液蒸干，油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，15g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(5∶1)洗脫，在TLC監(jiān)測下收集所需級分，蒸干，得到290mg(＞100%)3-O-乙?；幕衔?，為油狀物。1H NMR(CDCl3)δ2.03(3H，s，OCOCH3)，3.48(3H，s，OCH3)，4.84(1H，br-s，H-1).
將280mg(0.795mmol)3-O-乙?；衔锖?80mg 10%鈀-炭于5ml乙酸和1ml乙醇中的混合物在室溫和一大氣壓下氫化3天。濾除催化劑，用10ml甲醇洗滌兩次。合并濾液和洗滌液，將該溶液蒸干。油狀殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，20g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸甲酯(5∶1-2∶1)洗脫，收集由甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫的所需級分，蒸干，得到160mg(77%)題目化合物20，為油狀物。1H NMR(400MHz)譜表明該產(chǎn)物是α-和β端基異構(gòu)體的混合物。1H NMR(CDCl3)δ4.95(1H，d，J＝1.3Hz，H-1，H-1α)，5.09(1H，br-s，H-1β)，5.33(1H，t，J＝3.3Hz，H-3β)，5.47(1H，t，3.3Hz，H-3α).
實施例112-O-乙?；?4，6-O-亞乙基-3-O-甲基-D-吡喃阿卓糖(21)按類似于前述制備3-O-乙?；苌?20)的方法制得了2-O-乙?；苌?21)。因此，用乙酸酐將18(780mg，2.5mmol)O-乙?；?，得到860mg(98%)中間體，芐基2-O-乙?；拎⒆刻擒?，為油狀物。1H NMR(CDCl3)δ2.09(3H，s，OCOCH3)，3.57(3H，s，OCH3)，4.71(1H，br-s，H-1)5.18(dd，J＝3.00 & 0.85Hz，H-2).
在10%鈀-炭(500mg)存在下，在乙酸和乙醇中將上述2-O-乙酰基化合物(850mg，2.4mmol)氫化，得到580mg(92%)21，為油狀物。NMR(400MHz)譜表明它是α-和β-端基異構(gòu)體的混合物。
1H NMR(CDCl3)δ4.92(1H，br-s，H-1α)，5.03(1H，dd，J＝3.9 & 1.3 Hz，H-2α)，5.16(1H，br-s，H-1β)，5.04(1H，dd，J＝4.7 & 1.7 Hz，H-2β).
實施例124′-脫甲基-4-O-(2，3-二-O-甲基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(22)在-18℃下，向320mg(0.6mmol)4′-脫甲基-4′-芐氧羰基表鬼臼毒素(8)和170mg(0.726mmol)化合物19于20ml無水1，2-二氯乙烷中的冷卻和攪拌的溶液中，加入0.25ml(2mmol)三氟化硼-醚配合物，將該混合物于-18℃攪拌30分鐘，在該混合物中加入0.25ml吡啶，在同一溫度下將其攪拌5分鐘。用100ml氯仿提取該混合物，依次用NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。除去溶劑后，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，20g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(3∶1)洗脫，在TLC監(jiān)測下收集所需級分，蒸干，用醚-正己烷研制，得到145mg(32%)22的4′-O-芐氧羰基衍生物。MP 125-132℃(分解)max(KBr)cm-11772，1602，1484，1235，1109，1044.UVλmax(MeOH)nm(ε)292(4700).1H NMR(CDCl3)δ3.49 & 3.51(各為3H，s，OCH3)，4.94(1H，d，J＝0.36Hz，H-1″).
將135mg(0.18mmol)上述O-芐氧羰基衍生物和50mg 10%鈀-炭于10ml乙醇和10ml丙酮中的混合物在室溫和一個大氣壓下氫化5分鐘。濾除催化劑，用10ml丙酮洗滌兩次，合并濾液和洗液，將該溶液蒸干。殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，15g)層析純化。該柱用甲苯-乙酸乙酯(2∶1)洗脫。在TLC(甲苯-乙酸乙酯＝1∶1)監(jiān)測下收集所需級分，蒸干，用乙醚研制殘留物，得到76mg(68.5%)題目化合物22。
MP 140-150℃(分解).IRνmax(KBr)cm-11774，1751，1616，1485，1230，1111，1040.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，10，000)，284(3，300).1H NMR(CDCl3)δ4.94(1H，d，J＝0.85 Hz，H-1″)，3.37(1H，dd，J＝3.42 & 0.85 Hz，H-2″)，4.71(1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″)，1.37(3H，d，J＝5.13，H-8″)，3.49 & 3.50(各為3H，s，OCH3).
元素分析計算值 C31H36O13·2.5H2OC56.23，H6.25實驗值C56.39，H6.61
實施例134′-脫甲基-4-O-(4，6-O-亞乙基-2-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(23)按類似于制備22的方法，用20將8苷化，然后進(jìn)行脫芐氧羰基反應(yīng)。這樣，用20(150mg，0.57mmol)將8苷化，得到230mg(59%)粉末狀苷化的產(chǎn)物。MP 132-134℃(分解)。
IRνmax(KBr)cm-11772，1602，1485，1235，1109，1040.UVλmax(MeOH)nm(ε)291(4，300).1H NMR(CDCl3)δ4.91(1H，d，J＝0.85 Hz，H-1″)，3.35(1H，dd，J＝3.84 & 1.28 Hz，H-2″)，5.34(1H，dd，J＝3.42 & 2.66 Hz，H-3″)，4.76(1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″)，1.34(3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″)3.51(3H，s，OCH3)，2.12(3H，s，OAc).
在10%鈀-炭存在下，將上述苷化的產(chǎn)物(220mg，0.8mmol)氫化，得到210mg(約100%)23的3″-O-乙?；苌铩P 140-150℃(分解)。
IRνmax(KBr)cm-11779，1751，1617，1486，1232，1110，1037.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，13，000)，284(3，900).1H NMR(CDCl3)δ4.91(1H，d，J＝0.86 Hz，H-1″)，3.35(1H，dd，J＝3.42 & 0.86 Hz，H-2″)，5.34(1H，t，J＝3.42 Hz，H-3″)，4.75(1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″)，1.34(3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″)，3.51(3H，s，OMe)，2.12(3H，s，OAc).
將200mg(0.3mmol)上述3″-O-乙?；衔锖?60mg(3mmol)乙酸鋅二水合物于30ml無水甲醇中的混合物攪拌回流6小時，將該混合物蒸干。殘留物用含0.5ml乙酸的100ml氯仿提取，用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將干燥過的提取液蒸干，殘留物經(jīng)硅膠柱(kiesel gel 60，20g)層析純化，該柱用氯仿-甲醇(100∶1)洗脫。收集所需級分，蒸干，用乙醚研制，得到94mg(52%)題目化合物23。MP 173-180℃(分解)。IRνmax(KBr)cm-13445，1772，1615，1518，1507，1485，1286，1190，1116，1037.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，12，000)，284(3，800).1H NMR(CDCl3)δ5.03(1H，d，J＝1.10 Hz，H-1″)，3.89(1H，dd，J＝3.66 & 1.10 Hz，H-2″)，4.16(1H，t，J＝3.30 Hz，H-3″)，4.82(1H，q，J＝5.13 Hz，H-7″)，1.36(3H，d，J＝5.13 Hz，H-8″).3.50(3H，s，OCH3).
元素分析計算值 C30H34O13.(C2H5)2OC60.35，H6.55實驗值C60.33，H6.604′-脫甲基-4-O-(4，6-O亞乙基-3-O-甲基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(24)按前述方法，用21將8苷化，然后進(jìn)行氫解和脫乙?；磻?yīng)，得到最終化合物24(1)在該苷化反應(yīng)中，可以分離出α-和β-糖苷產(chǎn)物。這樣，用21(530mg，2mmol)將8(801mg，1.5mmol)苷化，得到α-和β-端基異構(gòu)體的粗品混合物，經(jīng)硅膠柱層析(甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1)分離，得到400mg(34%)β-D-吡喃阿卓糖基衍生物，和570mg(49%)它的α-端基異構(gòu)體。它們的光譜數(shù)據(jù)如下苷化產(chǎn)物(β-端基異構(gòu)體)
MP 130-135℃(分解)。IRνmax(KBr)cm-11772，1602，1485，1235，1108，1042.UVλmax(MeOH)nm(ε)291(4，100).1H NMR(CDCl3)δ4.80(1H，br-s，H-1″)，5.07(1H，d，J＝2.56 Hz，H-2″)，3.61(1H，t，J＝2.93 Hz，H-3″).
(2)在一個大氣壓下，在10%鈀-炭的存在下將上述β-端基異構(gòu)體(345mg，0.44mmol)在丙酮-乙醇中氫化，得到280mg(98%)2″-O-乙?；?4′-羥基衍生物，為無色粉末。
2″-O-乙?；?4′-羥基衍生物MP約150℃(分解).IRνmax(KBr)cm-11779，1751，1617，1486，1229，1111，1039.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，13，000)，285(3，900).1H NMR(CDCl3)δ5.03(1H，d，J＝1.46 Hz，H-1″)，5.05(1H，dd，J＝3.30 & 1.46 Hz，H-2″)，3.64(1H，t，J＝3.66 Hz，H-3″).
(3)用乙酸鋅二水合物將上述2″-O-乙?；苌?270mg，0.42mmol)脫去乙?；?，得到163mg(59%)24，為無色粉末。
化合物24
MP 205-210℃(分解).IRνmax(KBr)cm-13475，1772，1751，1617，1485，1232，1193，1162，1110，1039.UVλmax(MeOH)nm(ε)240(11，000)，286(3，500).1H NMR(CDCl3)δ5.00(1H，d，J＝1.10 Hz，H-1″)，3.86(1H，dd，J＝3.66 & 1.10 Hz，H-2″)，3.74(1H，t，J＝3.30 Hz，H-3″)，4.73(1H，q，J＝4.76 Hz，H-7″)，1.38(3H，d，J＝4.76 Hz，H-8″)，3.53(3H，s，OMe).
元素分析計算值 C30H34O13C59.80，H5.68實驗值C59.70，H5.82實施例143-疊氮基-2，3-二脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖(27)將對甲苯磺酰(10mg，0.05mmol)加到芐基3-疊氮基-4，6-O-亞芐基-2，3-二脫氧-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷(420mg，1.09mmol)的乙醇-水(4∶1，5ml)溶液中，使該混合物回流5小時。將該反應(yīng)混合物濃縮，用二氯甲烷稀釋，用水洗滌，用MgSO4干燥。將有機層濃縮，得到380mg固體粗產(chǎn)物，后者經(jīng)硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)，得到274mg(85%)芐基3-疊氮基-2，3-二脫氧-2-氟-α-D-吡喃阿卓糖苷。在上述二醇(274mg，0.92mmol)于二氯甲烷(4ml)中的攪拌的溶液中加入乙醛縮二甲醇(0.3ml)和對甲苯磺酸(10mg)，將該混合物在室溫下攪拌6小時。用NaHCO3水溶液使該反應(yīng)驟停，然后用水洗滌，用MgSO4干燥。將有機層濃縮，得到289mg無色油狀物，后者經(jīng)硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)，得到250mg(84%)4，6-O-亞乙基衍生物。
將NBS(243mg)加到4，6-O-亞乙基衍生物(250mg，0.77mmol)的CCl4(8ml)溶液中，將該混合物回流1小時，并濃縮。用丙酮-水(4∶1，5ml)稀釋該殘留物，然后加入Hg(CN)2，將該混合物在室溫下攪拌4小時。按標(biāo)準(zhǔn)方法處理后，將所得粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱層析，得到118mg題目化合物(27)，為純油狀物。
1H NMR(CDCl3)δ5.40-4.56(2H，m)，4.56-3.23(7H，m)，1.37(3H，d，J＝5Hz).
實施例154′-芐氧羰基-4′-脫甲基-4-O-(3-疊氮基-2，3-二脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(28)。
在-10℃下，向4′-芐氧羰基-4′-脫甲基表鬼臼毒素(8，220mg，0.41mmol)和化合物27(118mg，0.53mmol)于二氯乙烷(6ml)中的溶液中，加入BF3·Et2O(104μl)，將該混合物在-10℃至-5℃攪拌1小時。然后將該反應(yīng)混合物與三乙胺(0.1ml)混合并在室溫下攪拌1小時。按標(biāo)準(zhǔn)方法處理后，將所得粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱層析，得到227mg(75%)28，為無色粉末。
IRνmax(KBr)cm-12114，1771，1602.UVλmax(MeOH)nm(ε)292(3，140).
元素分析計算值 C37H36N3O13F.3H2OC55.29，H5.27，N5.23.
實驗值C55.33，H4.53，N5.25.
實施例164′-脫甲基-4-O-(3-疊氮基-2，3-二脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡嘧阿卓糖基)表鬼臼毒素(29)將化合物28(87mg，0.12mmol)于乙醇-乙酸乙酯(4∶1，5ml)中的攪拌的溶液，在10%Pd-C存在下，在一個大氣壓下氫化20分鐘，濾除催化劑。將濾液濃縮，得到固體粗產(chǎn)物(75mg)，后者經(jīng)硅膠柱層析純化，得到53mg(73%)29，為無色粉末，MP 132-134℃。由HPLC(SSC-ODS-262，65% MeOH-pH 7緩沖液預(yù)測的純度80%。
IRνmax(KBr)cm-12120，1777，1616.UVλmax(MeOH)nm(ε)240(sh，11，960)，285(3，850).1H NMR(CDCl3)δ4.90(1H，d，J＝20.6 Hz，1″-H)，4.80(1H，q，J＝4.8 Hz，7″-H)，4.44(1H，dd，J＝4 & 47 Hz，2″-H)，3.65(1H，t，J＝10 Hz，6″ax-H)，1.40(3H，d，J＝4.8 Hz，8″-CH3).
元素分析計算值 C29H30N3O11F.1/2H2OC55.77，H5.00，N6.73實驗值C55.55，H5.09，N6.25實施例174′-脫甲基-4-O-(3-氨基-2，3-二脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素(30)在PtO2(50mg)存在下，于55psi的壓力下，將化合物28(100mg，0.14mmol)于乙酸-水(1∶1，10ml)中的搖振的懸浮液氫化過夜。濾除催化劑，濃縮濾液，得到120mg淡黃色油狀粗產(chǎn)物，后者經(jīng)硅膠柱層析純化，得到61mg(77%)30，為無色粉末。MP 169-172℃。預(yù)測純度80%(HPLC)。
IRνmax(KBr)cm-11775，1610.UVλmax(MeOH)nm(ε)237(sh，12，050)，285(3，700).1H NMR(DMSO-d6)δ5.34(1H，d，J＝22.2 Hz，1″-H)，4.85(1H，q，J＝5.1 Hz，7″-H)，4.43(1H，dd，J＝3.5 & 47 Hz，2″-H)，4.10(1H，dd，J＝5.1 & 10.3 Hz，6″eq-H)，3.93(1H，dt，J＝5 & 10 Hz，5″-H)，3.66(1H，m，4″-H)，3.56(1H，t，J＝10.3 Hz，6″ax-H)，3.51(1H，m，3″-H)，1.24(3H，d，J＝5.1 Hz，8″-CH3).
元素分析計算值 C29H32NO11F.3H2OC54.12，H5.95，N2.18.
實驗值C54.32，H5.21，N2.24實施例18膠囊劑以干燥態(tài)混合下述物質(zhì)，然后裝入硬質(zhì)明膠膠囊中，填充重量為0.345g。
100g4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙?；?2-脫氧-4，6-O-亞乙基-2-氟-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素，2.0g硬脂酸鎂，30.0g微晶纖維素(Avicel pH 102)，10.5g淀粉，這一批料足以裝1000粒口服用膠囊。
實施例19栓劑由下述成分制得了一批100粒適于口服給藥的栓劑的批料154.8g硬質(zhì)脆性低羥基脂肪類栓劑基質(zhì)，例如Witepsol H-15(Dynamit-Nobel)12g 4′-脫甲基-4-O-(4，6-O-亞乙基)-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素。
在50-60℃將脂肪類基質(zhì)料熔化，然后在溫和攪拌下將該基料冷卻至其熔點(35℃)以上。然后將活性化合物散布在經(jīng)過熔化的基質(zhì)表面，在15分鐘內(nèi)將所有活性成分散布完畢。連續(xù)攪拌1小時，然后將該混合物倒入預(yù)熱的栓劑模具中。然后將模具和內(nèi)含物冷卻至22-26℃，取出栓粒，包裝。每粒栓劑含有100mg抗腫瘤劑。
實施例20口服組合物將下述成分混合，得到每5ml組合物含有100mg活性化合物的口服液體組合物。
100mg4′-脫甲基-4-O-(3-O-乙酰基-4，6-O-亞乙基-β-D-吡喃阿卓糖基)表鬼臼毒素，10mg無水檸檬酸，150mg芐醇，400mg多乙氧基醚-80，經(jīng)過純化3.25g聚乙二醇3005.12g無水乙醇實施例21胃腸道外給藥組合物用0.9%注射用氯化鈉或5%右旋糖將實施例18的組合物稀釋20至50倍，然后緩慢地靜脈輸入。
權(quán)利要求
1.制備下式化合物的方法
式中R3選自(C1-C10)烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基；R4和R5之一選自C1-5烷氧基和C1-5酰氧基，而另一個則選自H、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基、F和疊氮基；或者R4和R5之一是F，而另一個則是疊氮基；R6是H或PO3H2或其可藥用的鹽；該方法包括下述步驟A.在三氟化硼一醚配合物存在下將下式化合物
與下式化合物反應(yīng)，
式中R3，R4和R5的定義如前；B.將步驟A產(chǎn)物氫化，除去酚保護(hù)基；C.任意地將該酚磷?；?，得到其中R6是PO3H2的產(chǎn)物或其鹽。
2.制備下式化合物的方法，
式中R3選自(C1-C10)烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基;R4和R5之一是OH，而另一個則選自H、OH、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基、F和疊氮基;R6是H、或PO2H2或其可藥用的鹽;該方法包括將其中R4和R5之一是C1-5酰氧基而不是OH，而另一個基團(tuán)定義如前的上式化合物與鋅試劑反應(yīng)。
3.制備下式化合物的方法，
式中R3選自(C1-C10)烷基、苯基、呋喃基和2-噻吩基;R4和R5之一是氨基，而另一個則選自羥基、C1-5烷氧基、C1-5酰氧基和氟;R6是H或PO2H2或其可藥用的鹽;該方法包括在催化劑存在下將其中R4和R5之一是疊氯基而不是氨基，另一個基團(tuán)定義同前的上式化合物氫化。
全文摘要
本發(fā)明提供了抗腫瘤劑4′-脫甲基表鬼臼毒素糖苷，其特征在于該糖苷部分是阿卓糖。
文檔編號A61K31/7042GK1050719SQ9010739
公開日1991年4月17日 申請日期1990年8月31日 優(yōu)先權(quán)日1989年9月1日
發(fā)明者大沼毅, 星英秋, 龜井英夫, 內(nèi)藤隆之 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司