本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防受試者的菌群失調(diào)的組合物，其中該組合物包含乳鐵蛋白和硫酸化多糖。特別地，本發(fā)明涉及用于治療和/或預(yù)防受試者的陰道微生物群的菌群失調(diào)的組合物。

背景技術(shù)：

1、通常與人體相關(guān)的微生物群對(duì)人類發(fā)育、生理、免疫和營養(yǎng)具有重要影響。絕大多數(shù)的土著微生物群與其人類宿主存在共生關(guān)系，而少數(shù)微生物群則是能夠引起慢性感染和危及生命的疾病的機(jī)會(huì)病原體。這些微生物群落被認(rèn)為通過競(jìng)爭性地排除引起疾病的侵入性非土著生物，構(gòu)成了對(duì)抗感染的第一道防線。

2、陰道內(nèi)的土著微生物在防止宿主被潛在致病生物定殖中起到保護(hù)作用，所述潛在致病生物包含導(dǎo)致有癥狀的細(xì)菌性陰道病、酵母菌感染、性傳播感染(sti)和尿路感染的那些。

3、乳桿菌(lactobacilli)物種被認(rèn)為是某些種族的育齡婦女陰道微生物群的關(guān)鍵菌種。最豐富的乳桿菌物種為惰性乳桿菌(lactobacillus?iners)、卷曲乳桿菌(l.crispatus)和格氏乳桿菌(l.gasseri)。在一些女性體內(nèi)還發(fā)現(xiàn)了其他物種，例如詹氏乳桿菌(l.jensenii)、雞乳桿菌(l.gallinarum)和陰道粘液乳桿菌(l.vaginalis)。

4、乳桿菌發(fā)揮的保護(hù)作用來自多種機(jī)制：競(jìng)爭營養(yǎng)和組織粘附，將陰道ph降低至～3.5-～4.5，調(diào)節(jié)免疫力以及產(chǎn)生生物活性化合物。在宮頸陰道粘膜的生物活性因子中，乳鐵蛋白(一種鐵結(jié)合陽離子糖蛋白)是一種具有抗細(xì)菌、抗真菌、抗病毒和抗寄生蟲活性的多功能糖蛋白。

5、當(dāng)陰道環(huán)境中主要的乳桿菌菌叢降低時(shí)，非土著細(xì)菌可以開始定殖。

6、陰道微生物群的慢性或急性紊亂(即所謂的菌群失調(diào))可以是由于使用抗生素、與月經(jīng)、妊娠、母乳喂養(yǎng)和避孕藥相關(guān)的激素水平波動(dòng)、免疫系統(tǒng)減弱、性活動(dòng)、年齡、生活方式、陰道潤滑劑和沖洗導(dǎo)致的。

7、乳桿菌的降低可以導(dǎo)致諸如早產(chǎn)、性傳播感染和盆腔炎性疾病的不良狀況。此外，乳桿菌屬的減少可以導(dǎo)致細(xì)菌性陰道病(bv)，這種疾病的特性在于由陰道加特納菌(gardnerella?vaginalis)、陰道阿托波氏菌(atopobium?vaginae)、巨球形菌屬(megasphaera)和許多其它厭氧菌或兼性厭氧菌物種表征的陰道微生物群更加多樣化。

8、otsuki等人的研究(2014)表明陰道乳鐵蛋白的使用能夠在陰道菌群水平上增加乳桿菌的存在，這表明了乳鐵蛋白作為益生元的作用。

9、雖然已經(jīng)嘗試開發(fā)利用乳鐵蛋白來預(yù)防和/或治療陰道微生物群的菌群失調(diào)的產(chǎn)品，但是仍然需要改善的組合物，其促進(jìn)現(xiàn)有的陰道共生菌群(例如陰道乳桿菌菌株)的生長，同時(shí)不促進(jìn)不期望的生物體(例如加特納菌、念珠菌和其它機(jī)會(huì)病原體)的生長。

10、幾乎所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞的質(zhì)膜都含有帶負(fù)電荷的高分子量碳水化合物受體，例如硫酸肝素糖胺聚糖。許多不同病原體最初附著到宿主細(xì)胞，都涉及與這些碳水化合物受體對(duì)接。結(jié)合后，病原體能夠通過經(jīng)由細(xì)胞膜侵入而感染細(xì)胞。

11、硫酸肝素蛋白多糖(hspg)是由與一個(gè)或多個(gè)線性硫酸肝素(hs)鏈相連的核心蛋白組成的糖蛋白。這些鏈由交替的d-葡糖胺和糖醛酸(d-葡萄糖醛酸和l-艾杜糖醛酸)組成，它們能夠進(jìn)行可變的n-硫酸化和o-硫酸化。在hs中的特定位置上存在硫酸鹽基團(tuán)賦予整體高負(fù)電荷，并且它們?cè)阪溕系亩虆^(qū)段中的排列創(chuàng)造針對(duì)hs結(jié)合蛋白的結(jié)合位點(diǎn)。

12、hspg呈現(xiàn)負(fù)電荷，其可以與病原體表達(dá)的hs結(jié)合蛋白(例如與病毒表面蛋白的堿性氨基酸部分)發(fā)生靜電相互作用。這種相互作用促進(jìn)病原體附著在宿主細(xì)胞，介導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入并增加感染性。因此，硫酸乙酰肝素糖胺聚糖可以被視為充當(dāng)初始的低親和力共受體，其將病原體集中在細(xì)胞表面并促進(jìn)與刺激感染的次級(jí)受體的結(jié)合。

13、因此，破壞哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面上的hs與病原體上的hs結(jié)合蛋白之間的相互作用是預(yù)防感染的可行治療選擇。

14、一些合適的治療選擇是基于通過帶正電荷的聚合物與hs的競(jìng)爭性結(jié)合來破壞病原體表達(dá)的hs結(jié)合蛋白與hs的結(jié)合。合適的帶正電荷的聚合物包括卡拉膠和殼聚糖。這些聚合物依賴于其帶正電荷的官能團(tuán)與hs的高陰離子硫酸鹽和羧酸鹽部分之間的靜電相互作用。

15、其他有望用作治療的化合物是基于使用作為競(jìng)爭性抑制劑的外源性hspg模擬化合物。實(shí)例包括但不限于硫酸化多糖，其能夠通過物理化學(xué)模擬細(xì)胞表面結(jié)合的硫酸乙酰肝素來阻斷病毒感染，從而與初始病毒粒子與細(xì)胞表面的附著進(jìn)行競(jìng)爭。

16、需要既抑制致病微生物的定殖，又考慮到天然共生陰道微生物群的適用于陰道用途的組合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)乳鐵蛋白與硫酸化多糖的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)影響和維持健康的陰道微生物群具有有益的作用。

2、根據(jù)第一方面，提供了用于預(yù)防和/或治療受試者體內(nèi)菌群失調(diào)的包含乳鐵蛋白和硫酸化多糖的組合物。

3、在一些實(shí)施方式中，硫酸化多糖由選自以下化合物的組的均勻或不同的單體單元組成或包括選自以下化合物的組的均勻或不同的單體單元：木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、巖藻糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、乳糖、果糖、葡糖胺、半乳糖胺、甘露糖胺、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、甘露糖醛酸、卡拉膠、瓊脂(agaran)、石莼聚糖(ulvan)、巖藻類(fucoids)、昆布多糖(laminaran)、海藻酸鹽、香菇多糖、普魯蘭(pluran)、木聚糖、葡聚糖、肝素、硫酸角質(zhì)素、4-硫酸軟骨素、6-硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、透明質(zhì)酸、糖醛酸磷壁酸(teichuronic?acid)，以及淀粉、纖維素、糖原、幾丁質(zhì)或果膠的部分水解產(chǎn)物。

4、在一些實(shí)施方式中，硫酸化多糖來源于海藻。

5、卡拉膠可以選自kappa-(κ)卡拉膠，iota-(ι)卡拉膠和lambda-(λ)卡拉膠。優(yōu)選地，卡拉膠是kappa-(κ)卡拉膠。

6、在一些實(shí)施方式中，該組合物含有約5μg/ml至約50μg/ml的乳鐵蛋白。

7、在一些實(shí)施方式中，該組合物含有約5μg/ml至約50μg/ml的卡拉膠。

8、在一些實(shí)施方式中，該組合物包含約10μg/ml至約30μg/ml的乳鐵蛋白和約10μg/ml至約30μg/ml的卡拉膠。

9、在一些實(shí)施方式中，該組合物適于陰道施用，優(yōu)選地，組合物是陰道潤滑劑和/或陰道保濕劑。

10、在一些實(shí)施方式中，該組合物用于預(yù)防生理性陰道微生物群的定性-定量型改變，其中該改變能夠引起感染和炎性過程。

11、在一些實(shí)施方式中，該組合物是用于治療陰道和宮頸-陰道感染的藥物組合物。感染可以由細(xì)菌、真菌或病毒引起的。例如，感染可以選自由陰道炎(vaginitis)、陰道病(vaginosis)、單純皰疹、乳頭瘤病毒(hpv)、鵝口瘡組成的組。

12、根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供了用于預(yù)防和/或治療由陰道微生物群的菌群失調(diào)引起的陰道和宮頸-陰道感染的裝置，其中該裝置包含第一方面的組合物。

13、在一些實(shí)施方式中，該裝置涂覆或浸漬有第一方面的組合物。在一些實(shí)施方式中，該裝置是陰道子宮托、陰道栓劑、棉條、避孕用具(contraceptive)、刮刀(spatula)或私密玩具。

14、例如，該裝置可以是預(yù)先涂覆有包含第一方面的組合物的潤滑劑的避孕套。

15、根據(jù)第三方面，提供了一種預(yù)防和/或治療陰道菌群失調(diào)的方法，該方法包括向受試者施用包含乳鐵蛋白和硫酸化多糖的組合物的步驟。更具體地，該方法可以用于預(yù)防和/或治療由陰道微生物群的菌群失調(diào)引起的陰道和宮頸-陰道炎癥和感染。

16、可以使用本發(fā)明組合物治療的陰道和宮頸-陰道炎癥和感染的非限制性實(shí)例包括由加特納菌(gardnerella)引起的細(xì)菌性陰道炎、由沙眼衣原體(chlamydia?trachomatis)引起的衣原體病、由單純皰疹病毒(hsv)引起的生殖器皰疹、由人乳頭瘤病毒(hpv)引起的生殖器疣、淋病、由念珠菌(candida)引起的鵝口瘡(念珠菌病感染)。