本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種大棗復(fù)合多糖組合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
據(jù)世界衛(wèi)生組織的網(wǎng)站(http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs297/zh/)2015年2月癌癥實(shí)況報(bào)道第297號顯示：癌癥是全球發(fā)病和死亡的主要原因。在184個(gè)國家和地區(qū)中，中國惡性腫瘤發(fā)病率總體而言位居中等偏上水平，發(fā)病人數(shù)約占全球的21.8％。隨著人口老齡化加劇和社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展，工業(yè)化、城市化進(jìn)程加快，環(huán)境因素、生活方式不斷改變，我國腫瘤防控形勢嚴(yán)峻。
近年來，隨著生物技術(shù)的發(fā)展，腫瘤免疫療法成為繼腫瘤手術(shù)，放療，化療，靶向治療后的最有希望能成功治愈癌癥的手段，這幾年更是取得了重大進(jìn)展，目前，以靶向pd-1/pd-l1的抗體治療，在黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、肝癌、膀胱癌以及淋巴瘤等多種惡性腫瘤都展示出很好的療效。science、nature都將惡性腫瘤免疫治療作為突破性進(jìn)展給予報(bào)道。
腫瘤化療過程中容易引起白細(xì)胞減少，臨床目前常用促白細(xì)胞藥物，如利血生、鯊肝醇等，作用緩慢，效果不顯著。而注射類藥物g-csf等雖升白作用顯著，但存在反跳現(xiàn)象，大劑量應(yīng)用時(shí)會出現(xiàn)骨痛、發(fā)熱等副反應(yīng)，且價(jià)格相對昂貴。故急切需求療效確切、質(zhì)優(yōu)價(jià)廉、副作用小的藥物。
中醫(yī)從恢復(fù)機(jī)體陰陽平衡的角度去治療疾病(包括腫瘤)的傳統(tǒng)理念，與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)腫瘤免疫療法從調(diào)節(jié)人體免疫功能來實(shí)現(xiàn)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的思路有異曲同工之妙。中醫(yī)認(rèn)為“邪之所湊，其氣必虛”，病邪之所以能侵犯人體大部分是因?yàn)槿俗陨淼年庩柺д{(diào)，免疫力下降。通過藥物來糾正陰陽、扶正固本才是治病的根本。人參、黃芪、靈芝等很多富含多糖的補(bǔ)益類中藥廣泛應(yīng)用于包括腫瘤在內(nèi)的各種疾病。
多糖廣泛存在于動物、植物和微生物中。作為生命物質(zhì)的組成成分之一，它廣泛參與了細(xì)胞的各種生命現(xiàn)象及生理過程的調(diào)節(jié)，如免疫細(xì)胞間信息的傳遞與感受，細(xì)胞的轉(zhuǎn)化、分裂及再生等活動。多糖具有抗病毒、抗感染、抗腫瘤、抗氧化、抗輻射、降血糖、保肝、調(diào)節(jié)免疫等生理活性。大量藥理及臨床研究表明，多糖是一種免疫調(diào)節(jié)劑，它能激活免疫受體，提高機(jī)體的免疫功能，實(shí)現(xiàn)抗腫瘤的功能。
專利申請?zhí)枮?01210532229.0的發(fā)明專利公開了提供一種有助于增強(qiáng)免疫力的養(yǎng)生保健食品配方及其制備方法。它包括下列重量份數(shù)比的原料：枸杞子1000份、黃精1000份、茯苓1000份、山藥1500份、桑葚1000份、大棗1000份、阿膠600份、銀耳600份。該發(fā)明制備工藝采用傳統(tǒng)水煎提取方法，功能單一，在提高免疫力方面效果不明顯。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供本發(fā)明一種大棗復(fù)合多糖組合物及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明分別用大棗、銀耳子實(shí)體、枸杞子、三七，三七為提取過三七總皂苷的廢渣，提取大棗多糖、銀耳多糖、枸杞多糖、中性三七多糖，收率分別為6.5-6.9％、12.0-21.0％、2.8-4.4％、0.32-0.42％，硫酸-蒽酮法測定多糖含量分別為48-58％、37-41％、28-34％、80-94％。本配方有助于免疫力低下者及腫瘤患者增強(qiáng)免疫力，改善精神萎靡、體虛乏力、食欲降低、惡心嘔吐、便溏泄瀉、煩躁失眠等癥狀，有效減輕放化療及手術(shù)對腫瘤病人的危害。
本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
一種大棗復(fù)合多糖組合物，采用多種原料提取物混合制作而成，包括大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物和銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物。
優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物0.5-5份、枸杞多糖提取物0.5-5份、銀耳多糖提取物0.5-5份、中性三七多糖提取物0-5份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物4.5份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物4.5份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物4.5份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物4.5份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物2份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物2份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物2份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物2份、中性三七多糖提取物2份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物2份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物2份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物3份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物3份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物4份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物4份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物2份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物2份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物3份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物3份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物4份、銀耳多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物4份、銀耳多糖提取物1份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物2份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物2份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物3份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物3份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物4份。
上述任一方案優(yōu)選的是，包括以下重量份的提取物:大棗多糖提取物1份、枸杞多糖提取物1份、銀耳多糖提取物4份、中性三七多糖提取物1份。
上述任一方案優(yōu)選的是，還包括藥用輔料。藥用輔料包括蔗糖、淀粉、麥芽糊精、蜂蜜、苯甲酸酸鈉、羥苯乙酯、硬脂酸鎂、蛋白糖等。
上述任一方案優(yōu)選的是，其劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑或口服液中的任意一種。
本發(fā)明還提供上述大棗復(fù)合多糖組合物的制備方法，包括以下步驟：
(1)大棗多糖的提??；
(2)枸杞多糖的提取；
(3)銀耳多糖的提取；
(4)中性三七多糖的提??；
(5)按照重量配比混合上述提取物，分裝。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述步驟(1)中大棗多糖的提取具體方法為：大棗粉碎，加入多倍量水浸泡，多次回流提取，棄去濾渣合并濾液，濃縮，加入乙醇醇沉，抽去上清液得到沉淀并干燥，得干燥粉末。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述醇沉的具體方法為：分離過濾的濾液，濃縮至1.06，加入3倍95％乙醇至含醇量75％，醇沉?xí)r間為24h。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述多次回流提取的具體方法為：加入8-10倍量的水，初次回流提取5-8h，濾除溶液，再加入5-10倍量的二次水回流提取2-4h，濾除溶液，再加入4-6倍量的三次水回流提取2-4h，棄去濾渣合并濾液。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述步驟(2)中枸杞多糖的提取具體方法為：枸杞加入多倍量水浸泡，多次回流提取，合并濾液，濃縮，分離過濾溶液，濃縮后加入乙醇醇沉，抽去上清液得到沉淀并干燥，得干燥粉末。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述多次回流提取的具體方法為：初次加入9-11倍量水浸泡12小時(shí)，初次回流提取5-8h，濾除溶液，再加入4-10倍量的水回流提取2-4h，二次濾除溶液，之后再加入3-5倍量的水三次回流提取2-4h，棄去濾渣合并濾液。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述步驟(3)中銀耳多糖的提取具體方法為：銀耳加入多倍量水浸泡，多次回流提取，合并濾液，濃縮，加入乙醇醇沉，抽去上清液得到沉淀并干燥，得干燥粉末。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述多次回流提取的具體方法為：初次加入48-52倍量水浸泡12小時(shí)，初次回流提取5-8h，濾除溶液，再加入30-40倍量的水回流提取3-5h，二次濾除溶液，合并濾液。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述步驟(4)中中性三七多糖是由提取過三七總皂苷的廢渣，經(jīng)水提醇沉，deaesepharosefastflow陰離子交換層析純化后所得。
上述任一方案優(yōu)選的是，所述步驟(5)中分裝之前還包括向混合提取物中加入麥芽糊精，混勻之后，加入95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，分裝。分裝時(shí)可以直接分裝也可以壓片后再分裝。
本發(fā)明還提供上述大棗復(fù)合多糖組合物在提高免疫力，改善精神萎靡、體虛乏力、食欲降低、惡心嘔吐、便溏泄瀉、煩躁失眠中的應(yīng)用。
本發(fā)明還提供上述大棗復(fù)合多糖組合物應(yīng)用于保健食品。
本發(fā)明還提供上述大棗復(fù)合多糖組合物應(yīng)用于化妝品。
本發(fā)明還提供上述大棗復(fù)合多糖組合物應(yīng)用于日化用品。本配方中的大棗為鼠李科植物棗的成熟果實(shí)。中醫(yī)中藥理論認(rèn)為，大棗具有補(bǔ)虛益氣、養(yǎng)血安神、健脾和胃等作用，是脾胃虛弱、氣血不足、倦怠無力、失眠多夢等患者良好的保健營養(yǎng)品。大棗多糖具有多種藥理活性，大棗多糖是大棗補(bǔ)氣生血的主要活性成分，大棗多糖對人體內(nèi)的各種活性氧均具有抗氧化作、修復(fù)肝損傷、抗疲勞作用、免疫活性、改善腸道、抑制腫瘤細(xì)胞及促進(jìn)鈣的吸收。
枸杞，是我國傳統(tǒng)名貴中藥材，素有“紅寶”美稱，富含植物多糖、蛋白質(zhì)、維生素等營養(yǎng)成分。枸杞多糖是從枸杞中提取而得的一種水溶性多糖。已明確該多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6種單糖成分組成。具有促進(jìn)t、b、ctl、nk和巨噬細(xì)胞等免疫功能，促進(jìn)il-2、il-3和tnfβ等細(xì)胞因子產(chǎn)生。增強(qiáng)荷瘤、化療與輻射損傷小鼠免疫功能及調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)(nim)網(wǎng)絡(luò)的作用。
銀耳(tremellafuciformisberk)，俗稱白木耳，子實(shí)體中得到銀耳多(tremellam)是一種酸性雜多糖，其主鏈結(jié)構(gòu)是由α-(1→3)糖苷鍵連接的甘露聚糖，支鏈由葡萄糖醛酸和木糖組成。為擔(dān)子菌多糖類免疫增強(qiáng)劑，具有改善機(jī)體免疫功能及提升白細(xì)胞的作用?？娠@著提高實(shí)驗(yàn)動物網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞的吞噬功能，有促進(jìn)非特異性免疫作用，提高免疫球蛋白、血清總補(bǔ)體的水平?？深A(yù)防和治療由放射與抗腫瘤藥物(如ctx)引起的骨髓抑制，也能促進(jìn)肝臟內(nèi)蛋白質(zhì)的合成。
本發(fā)明以生產(chǎn)中提取過三七皂苷的三七廢渣為原料，采用水提醇沉法，得到中性三七粗粗多糖，采用deaesepharosefastflow陰離子交換層析純化三七粗多糖，得到中性三七多糖pnpsi，研究其對人牙周膜干細(xì)胞的影響，證明中性三七多糖pnpsi促進(jìn)牙周膜干細(xì)胞的作用較為明顯，在提高人體免疫力方面作用突出。
本發(fā)明提供一種大棗復(fù)合多糖組合物及其制備方法和應(yīng)用，分別用大棗、銀耳子實(shí)體、枸杞子、三七，三七為提取過三七總皂苷的廢渣，提取大棗多糖、銀耳多糖、枸杞多糖、中性三七多糖，收率分別為6.5-6.9％、12.0-21.0％、2.8-4.4％、0.32-0.42％，硫酸-蒽酮法測定多糖含量分別為48-58％、37-41％、28-34％、80-94％。本配方有助于免疫力低下者及腫瘤患者增強(qiáng)免疫力，改善精神萎靡、體虛乏力、食欲降低、惡心嘔吐、便溏泄瀉、煩躁失眠等癥狀，有效減輕放化療及手術(shù)對腫瘤病人的危害。
附圖說明
圖1為中性三七多糖pnpsi的高效凝膠滲透色譜圖。
具體實(shí)施方式
為了進(jìn)一步了解本發(fā)明的技術(shù)特征，下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地闡述。實(shí)施例只對本發(fā)明具有示例性的作用，而不具有任何限制性的作用，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的基礎(chǔ)上做出的任何非實(shí)質(zhì)性的修改，都應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1
本發(fā)明由下述原料制成，大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物及藥學(xué)上可接受的藥用輔料組成。藥用輔料包括蔗糖、淀粉、麥芽糊精、蜂蜜、苯甲酸酸鈉、羥苯乙酯、硬脂酸鎂、蛋白糖等。
本發(fā)明的大棗復(fù)合多糖組合物，包括大棗多糖提取物0.5-5kg、枸杞多糖提取物0.5-5kg和銀耳多糖提取物0.5-5kg、中性三七多糖提取物0-5kg，加入適宜藥用輔料，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，分裝成1000袋。分裝制備成顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液等口服劑型。
本發(fā)明1袋大棗復(fù)合多糖組合物中，成人推薦用量為：一天2-3次，一次1-2袋。
本發(fā)明大棗復(fù)合多糖組合物的制備方法，包括如下的步驟：
(1)大棗多糖提取物的提取及含量測定
稱取大棗400公斤，粉碎，加入8倍量水浸泡12小時(shí)，回流提取8h，濾除溶液，藥材再加入5倍量的水回流提取4h，濾除溶液，藥材再加入4倍量的水回流提取4h，棄去濾渣合并濾液，濃縮至1.06，加入3倍95％乙醇至含醇量75％，醇沉?xí)r間為24h，抽去上清液得沉淀并干燥，得干燥粉末27.60公斤，得率為6.90％。精密稱取粉末適量，硫酸-蒽酮法測定大棗多糖含量為57.17％。
(2)枸杞多糖提取物的提取及含量測定
稱取枸杞400公斤，加入10倍量水浸泡12小時(shí)，回流提取8h，濾除溶液，藥材再加入5倍量的水回流提取4h，濾除溶液，藥材再加入4倍量的水回流提取4h，棄去濾渣合并濾液，濃縮至密度至1.06，加入3倍95％乙醇至乙醇量為75％，醇沉?xí)r間為24h，抽去上清液得沉淀并干燥，得干燥粉末11.20公斤，得率為2.80％。精密稱取粉末適量，硫酸-蒽酮法測定枸杞多糖含量為33.50％。
(3)銀耳多糖提取物的提取及含量測定
稱取銀耳400公斤，加入50倍量水浸泡12小時(shí)，回流提取8h，濾除溶液，藥材再加入30倍量的水回流提取4h，濾除溶液，合并濾液，濃縮至密度至1.06，加入3倍95％乙醇至乙醇量為75％，醇沉?xí)r間為24h，抽去上清液得沉淀并干燥，得干燥粉末47.84公斤，得率為11.96％。精密稱取粉末適量，硫酸-蒽酮法測定銀耳多糖含量為37.00％。
(4)中性三七多糖的提取及含量測定
(4.1)三七粗多糖的提?。悍Q取提取過三七總皂苷的廢渣1kg，第一次加入10倍量水，沸水浴煮8h，收集濾液，第二次加入5倍量水，沸水浴8h。合并兩次濾液，4500rpm離心5min，取上清。80℃旋轉(zhuǎn)濃縮至原體積的1/8，靜置24h，離心，棄沉淀，緩慢加入三倍無水乙醇，邊加邊攪拌，4℃放置12h，抽濾得沉淀。75％乙醇洗滌沉淀數(shù)次，將乙醇揮發(fā)干后用適量水溶解，離心，收集上清，加入三倍無水乙醇，4℃放置12h，抽濾得沉淀，75％乙醇洗滌沉淀，50℃烘箱烘干，即得三七粗多糖。
(4.2)deaesepharosefastflow陰離子交換層析純化粗多糖
(4.2.1)裝柱：濕法裝柱，柱子塞入棉花，柱內(nèi)加入蒸餾水并保持一小段液位，玻璃棒按壓棉花祛除氣泡。用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿柱內(nèi)壁緩慢倒入柱內(nèi)，不能產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，用水清洗層析柱邊沿。裝柱時(shí)不能有斷層，然后用蒸餾水平衡，柱規(guī)格為2.4×40cm。
(4.2.2)上樣：三七粗多糖溶于少量蒸餾水中，配制成30mg/ml，4500rpm離心10min，上清液0.45μm濾頭過濾，上樣。上樣時(shí)，將層析柱出液口打開，待蒸餾水下移至柱床表面時(shí)，關(guān)閉出液口，用滴管沿柱內(nèi)壁加入三七多糖溶液，打開出液口，讓樣品液全部流入柱子內(nèi)部，并用少量蒸餾水沖洗柱內(nèi)壁，然后行洗脫。
(4.2.3)洗脫：用水洗脫，洗脫約5倍柱體積，流速為0.8ml/min，每管接2ml，減壓濃縮至1/10的體積。
(4.2.4)透析：把透析袋剪成每段約10cm，放于蒸餾水中煮沸30min，洗三遍后再煮沸10min，蒸餾水洗干凈。透析袋可以使用三次，第二次用2％nahco3和1mmol/ledta煮沸后清洗。分別將濃縮后的洗脫液裝于分子量14000的透析袋中，約1/2體積，用透析夾夾緊透析袋兩端，放于蒸餾水中透析36h，每4h換一次水。
(4.2.5)冷凍干燥：將洗脫液收集于50ml離心管，裝約16ml，-40℃預(yù)凍12h，放于冷凍干燥機(jī)36h，取出后加入約1ml蒸餾水溶解，搖勻。-40℃預(yù)凍12h，放于冷凍干燥機(jī)24h。取出后封口于干燥器中保存。蒽酮-硫酸法測定中性三七多糖pnpsi，pnpsi(中性三七多糖)含量93.6％，得率28.9％，數(shù)均分子量為11170，重均分子量為31590，多分散性系數(shù)d(mw/mn)為2.828，中性三七多糖pnpsi的高效凝膠滲透色譜圖如圖1所示。
(4.3)mtt法測定中性三七多糖對人牙周膜干細(xì)胞體外增殖的影響
采用常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)法培養(yǎng)細(xì)胞。取7代對數(shù)生長期的人牙周膜干細(xì)胞，計(jì)數(shù)后調(diào)細(xì)胞濃度，接種于96孔板，100個(gè)/孔，每孔90μl，co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)12小時(shí)后分別加中性三七多糖(pnpsi)以及三七粗多糖溶液各10μl，使作用于細(xì)胞的終濃度為6.72mg/ml、4.48mg/ml、2.24mg/ml、1.12mg/ml、560ug/ml、280ug/ml、140ug/ml、70ug/ml，每個(gè)濃度設(shè)6個(gè)平行孔，陰性對照為等體積mem-alpha培養(yǎng)液，加生理鹽水10μl。48小時(shí)后，加mtt溶液(5mg/ml)20μl每孔，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)，每孔加入150μldmso充分溶解，用酶標(biāo)儀測定各孔的a570值。計(jì)算不同濃度的a570的od值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1：
表1三七多糖對人牙周膜干細(xì)胞體外增殖的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n＝6)
注：*p<0.05；**p<0.01
由表1中數(shù)據(jù)可知，中性三七多糖pnpsⅰ在濃度35～1120ug/ml，對人牙周膜干細(xì)胞具有明顯的增殖促進(jìn)作用；相對于三七粗多糖，中性三七多糖pnpsⅰ對人牙周膜干細(xì)胞的增殖促進(jìn)作用更為顯著。
實(shí)施例2大棗復(fù)合多糖顆粒劑
加麥芽糊精適量，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，分裝成1000袋。
本實(shí)施例中的大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物的制備方法均和實(shí)施例1相同。
實(shí)施例3大棗復(fù)合多糖片劑
加麥芽糊精適量，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，壓片，包薄膜衣，分裝。
本實(shí)施例中的大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物的制備方法均和實(shí)施例1相同。
實(shí)施例4大棗復(fù)合多糖片劑
加麥芽糊精適量，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，壓片，包薄膜衣，分裝。
本實(shí)施例中的大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物的制備方法均和實(shí)施例1相同。
實(shí)施例5大棗復(fù)合多糖顆粒劑
加麥芽糊精適量，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，分裝成1000袋。
本實(shí)施例中的大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物的制備方法均和實(shí)施例1相同。
實(shí)施例6大棗復(fù)合多糖顆粒劑
加麥芽糊精適量，混勻，加95％的乙醇適量，過14目篩網(wǎng)制粒，烘干，過20目篩網(wǎng)整理，分裝成1000袋。
本實(shí)施例中的大棗多糖提取物、枸杞多糖提取物、銀耳多糖提取物、中性三七多糖提取物的制備方法均和實(shí)施例1相同。
實(shí)施例7
大棗復(fù)合多糖組合物治療惡性腫瘤化療后白細(xì)胞減少的療效觀察
7.1資料與方法
7.1.1資料
選取2015年6月～2016年6月惡性腫瘤化療后引起的白細(xì)胞減少患者(均由病理證實(shí))，排除使用其他升白藥物者，kps評分均≥60分，共計(jì)50例納入本次研究。隨機(jī)分為觀察和對照組各10例，觀察組中男4例，女6例，平均年齡(54.2±7.3)歲，乳腺癌4例、宮頸癌2例、大腸癌2例、肺癌2例。
對照組a中男5例，女5例，平均年齡為(53.9±10.6)歲，乳腺癌2例、肝癌3例、大腸癌1例、肺癌3例、胃癌1例。對照組b中男6例，女4例，平均年齡為(54.1±9.3)歲，乳腺癌2例、肝癌3例、大腸癌1例、肺癌2例、胃癌2例。對照組c中男5例，女5例，平均年齡為(53.6±10.9)歲，乳腺癌1例、肝癌3例、大腸癌2例、肺癌4例。對照組d中男6例，女4例，平均年齡為(53.7±10.8)歲，乳腺癌3例、肝癌4例、胃癌3例。
四組在性別組成、平均年齡、kps評分、腫瘤類別均無顯著性差異(p>0.05)，具有可比性。
7.1.2治療方法
觀察組予實(shí)施例2中制備的大棗復(fù)合多糖組合物(大棗多糖4.5g、枸杞多糖1.0g、銀耳多糖0.5g、中性三七多糖0.5g)早晚各1次，一次兩袋，連服3周。
對照組a予鯊肝醇100mg，利血生20mg，3次/d，連服3周。治療期間嚴(yán)密觀察各種并發(fā)癥的發(fā)生。
對照組b服用專利申請?zhí)枮?01210532229.0的發(fā)明專利實(shí)施例1制備的產(chǎn)品，每日兩次，連服三周。
對照組c服用實(shí)施例5制備的大棗復(fù)合多糖顆粒劑，每日兩次，連服三周。
對照組d服用實(shí)施例6制備的大棗復(fù)合多糖顆粒劑，每日兩次，連服三周。
7.1.3觀察指標(biāo)及療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
治療期間每周2次檢查外周血常規(guī)。據(jù)衛(wèi)生部《藥物臨床研究指導(dǎo)原則》中制定的升高白細(xì)胞療效標(biāo)準(zhǔn)，顯效：wbc總數(shù)>4.0×109/l，能維持療效至停藥1周，臨床癥狀顯著減輕或消失；有效：wbc總數(shù)<4.0×109/l，比治療前上升(0.5-1.0)×109/l，能維持療效至停藥1周，臨床癥狀好轉(zhuǎn)；無效：wbc總數(shù)增高<0.5×109/l，臨床癥狀無好轉(zhuǎn)。
7.2治療結(jié)果
治療后數(shù)據(jù)結(jié)果見表2，觀察組相對對照組a、對照組b、對照組c、對照組d的治療效果更為顯著。觀察組無不良反應(yīng)發(fā)生。
表2治療后效果數(shù)據(jù)
臨床目前常用促白細(xì)胞藥物，如利血生、鯊肝醇等，作用緩慢，效果不顯著。而注射類藥物g-csf等雖升白作用顯著，但存在反跳現(xiàn)象，大劑量應(yīng)用時(shí)會出現(xiàn)骨痛、發(fā)熱等副反應(yīng)，且價(jià)格相對昂貴。故急切需求療效確切、質(zhì)優(yōu)價(jià)廉、副作用小的藥物。
由表2中的數(shù)據(jù)可知，化療后出現(xiàn)白細(xì)胞降低的患者，應(yīng)用實(shí)施例2制備的大棗復(fù)合多糖組合物后，腰膝酸軟、頭暈眼花、神疲乏力、食少納呆等脾腎虧虛癥狀有明顯改善，kps評分較用藥前有明顯提高。對照組a、對照組b和對照組c、對照組d治療后的效果不明顯。
上述結(jié)果表明大棗復(fù)合多糖組合物能在一定程度上治療腫瘤化療引起的白細(xì)胞減少，從而保證化療的正常進(jìn)行，延長患者生存期。