本發(fā)明涉及生物藥品制劑領(lǐng)域，具體涉及一種重組人促紅細(xì)胞生成素制劑。
背景技術(shù)：
：紅細(xì)胞生成素(EPO)是腎臟分泌的一種糖蛋白，由165個氨基酸殘基組成，其主要生理作用是刺激骨髓中紅細(xì)胞的生成。重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)由中國倉鼠卵巢細(xì)胞表達(dá)、分泌，其與天然紅細(xì)胞生成素有相同的結(jié)構(gòu)及生理作用。目前，rhEPO已被用于治療慢性腎功能衰竭引起的貧血、腫瘤化療引起的貧血、外科圍手術(shù)期的紅細(xì)胞動員等。目前，已上市的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液仍主要采用人血白蛋白為穩(wěn)定劑。但人血白蛋白存在潛在的病毒污染及部分患者對人血白蛋白過敏，而且rhEPO容易吸附到容器內(nèi)壁，導(dǎo)致藥量降低，不能準(zhǔn)確給藥。因此需開發(fā)一種穩(wěn)定且不含人血白蛋白的rhEPO制劑。專利CN1802171A公開了一種不包含血清白蛋白的人紅細(xì)胞生成素的穩(wěn)定水溶液，制劑中含有非離子表面活性劑、多元醇、中性氨基酸、糖醇、等滲劑和緩沖試劑，其中丙二醇、甘氨酸、丙二醇和甘露糖醇對制劑的穩(wěn)定性非常重要。該專利使用的輔料種類多，增加了制劑工藝的復(fù)雜性。專利CN1519021A公開了一種穩(wěn)定的重組人紅細(xì)胞生成素制劑，采用甘露醇為保護劑，氯化鈉為等滲劑，在4℃下保存2年活性和純度均無明顯下降，但37℃貯存3個月活性明顯下降。專利CN1977969A公開了一種重組人促紅細(xì)胞生成素的藥物注射劑，采用聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯的衍生物做穩(wěn)定劑，氯化鈉為滲透壓調(diào)節(jié)劑，3000IU/ml制劑在2～8℃條件下，2年內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定，但未提供樣品的純度穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，同時未進行高濃度制劑的穩(wěn)定性試驗，且未對制劑進行加速試驗。專利CN104189891A公開了一種不含人血清蛋白的重組人促紅素制劑，組分有氨基酸及其鹽類衍生物、非離子表面活性劑、等滲劑(甘露醇或氯化鈉)，具有較好的常溫穩(wěn)定性和高溫穩(wěn)定性(45℃保存14天活性基本不變)，但較高濃度的制劑需兩種氨基酸與兩種氨基酸鹽類衍生物，輔料種類多，增加了制劑工藝的復(fù)雜性。上述專利，在制劑的穩(wěn)定性研究過程中，均未對EPO含量進行統(tǒng)計分析。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種重組人促紅細(xì)胞生成素制劑。該制劑配方工藝簡單，可操作性強，增加了重組人促紅細(xì)胞生成素的穩(wěn)定性，而且不含人血白蛋白，杜絕了潛在的病毒污染和過敏的風(fēng)險，同時降低了藥品的生產(chǎn)成本。本發(fā)明可保證重組人促紅細(xì)胞生成素制劑的安全性、有效性和質(zhì)量可控性。本發(fā)明的重組人促紅細(xì)胞生成素制劑，其由如下組分組成：(1)pH緩沖溶液10mM～50mM，pH范圍為6.0～8.0；(2)非離子表面活性劑0.01mg/ml～0.1mg/ml；(3)氯化鈉10mM～150mM；(4)甘露醇0.5％～5.0％(W/V)；(5)藥用量的重組人促紅細(xì)胞生成素；(6)注射用水。優(yōu)選地，pH緩沖溶液選自枸櫞酸鹽緩沖溶液、磷酸鹽緩沖溶液。優(yōu)選地，非離子表面活性劑選自聚山梨酯80。優(yōu)選地，重組人紅細(xì)胞生成素藥用量為2000～40000IU/ml。優(yōu)選地，制劑是注射劑。優(yōu)選地，重組人促紅細(xì)胞生成素制劑由如下組分組成：或者，重組人促紅細(xì)胞生成素制劑由如下組分組成：本發(fā)明的重組人促紅細(xì)胞生成素制劑在制備紅細(xì)胞生成素藥物中應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點在于，本重組人促紅細(xì)胞生成素制劑不含人血白蛋白，以非離子表面活性劑、氯化鈉、甘露醇為穩(wěn)定劑，工藝簡單，可操作性強，增加了重組人促紅細(xì)胞生成素生物學(xué)活性的穩(wěn)定性，保證了制劑的安全性、有效性和質(zhì)量可控性。具體實施方式下面通過具體的實施例對本發(fā)明進行詳細(xì)說明，但這些例舉性的實施方式的用途和目的僅用來例舉本發(fā)明，并非對本發(fā)明的實際保護范圍構(gòu)成任何形式的任何限定，更非將本發(fā)明的保護范圍局限于此。實施例一配制1000支10000IU/1.0ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液1、配方：物料濃度枸椽酸鈉5.88mg/ml枸椽酸0.06mg/ml聚山梨酯800.04mg/ml氯化鈉5.84mg/ml20％甘露醇注射液1％(W/V)rhEPO原液10000IU/ml注射用水補至1000ml2、分別準(zhǔn)確稱取枸椽酸鈉，枸椽酸，氯化鈉于2000ml燒杯中，加入800ml注射用水，磁力攪拌充分混合溶解；量取聚山梨酯80母液(4mg/ml，現(xiàn)用現(xiàn)配)，量取20％甘露醇注射液，充分混合溶解；混合液中加入藥用量的rhEPO原液，混勻；注射用水定容至1000ml，混勻。測定溶液pH，應(yīng)為6.9±0.2。3、將配制好的溶液無菌過濾到滅菌容器中，然后分裝至中性硼硅玻璃管制注射劑瓶中，制成10000IU/1.0ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液。比較例一不含聚山梨酯80的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液本比較例一與實施例一的區(qū)別在于，不含聚山梨酯80。比較例二不含甘露醇的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液本比較例二與實施例一的區(qū)別在于，不含甘露醇。比較例三含氨基酸的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液本比較例三與實施例一的區(qū)別在于，添加了甘氨酸，濃度為0.2％。分別對上述制劑配方進行40℃加速試驗，同時，以本公司的人血白蛋白處方產(chǎn)品(10000IU/1.0ml/支)為對照組。通過體積排阻色譜法(SEC-HPLC)檢測樣品純度，EPO峰面積相比于其初始值的EPO峰面積表示為EPO峰穩(wěn)定性(％)(面積/初始面積)％。表1：40℃試驗結(jié)果與陽性對照相比，實施例一與比較例三均能保證EPO的生物學(xué)活性。在比較例一、比較例二所述的制劑中分別不含聚山梨酯80、甘露醇，與實施例一相比，蛋白的純度、含量和生物學(xué)活性隨著加速時間的延長，逐漸降低，且比較例二降低的更多。聚山梨酯80、甘露醇在降低EPO吸附到容器內(nèi)壁，維持EPO生物活性中起著重要的作用。比較例三與實施例一相同，說明本發(fā)明制劑組分在不含氨基酸組分情況下就可以保證EPO的穩(wěn)定性，工藝簡單，操作性強。實施例二配制1000支2000IU/1.0ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液1、配方：2、分別準(zhǔn)確稱取枸椽酸鈉，枸椽酸，氯化鈉于2000ml燒杯中，加入800ml注射用水，磁力攪拌充分混合溶解；量取聚山梨酯80母液(4mg/ml，現(xiàn)用現(xiàn)配)，量取20％甘露醇注射液，充分混合溶解；混合液中加入藥用量的rhEPO原液，混勻；注射用水定容至1000ml，混勻。測定溶液pH，應(yīng)為6.9±0.2。3、將配制好的溶液無菌過濾到滅菌容器中，然后分裝至中性硼硅玻璃管制注射劑瓶中，制成2000IU/1.0ml/支的重組人促紅細(xì)胞生成素注射液。對實施例一、實施例二制劑配方進行5℃±3℃長期穩(wěn)定性試驗、25℃±2℃加速穩(wěn)定性試驗及；對重點考察項目進行檢測。結(jié)果如下。表2-表3：5℃±3℃長期穩(wěn)定性試驗結(jié)果(30個月)表2：表3：表4-表5：25℃±2℃加速穩(wěn)定性試驗結(jié)果(6個月)表4：表5：表2-表5中的數(shù)據(jù)可看出，在5℃±3℃長期穩(wěn)定性試驗30個月、25℃±2℃加速穩(wěn)定性試驗6個月中，低濃度、高濃度的rhEPO均在本發(fā)明制劑配方中保持良好的穩(wěn)定性。上文所列出的一系列的詳細(xì)說明僅僅是針對本發(fā)明的可行性實施例的具體說明，它們并非用以限制本發(fā)明的保護范圍，凡未脫離本發(fā)明技藝精神所作的等效實施例或變更均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3