本發(fā)明涉及一種中西復(fù)合型消毒劑及其制備方法，尤其是指一種能用于處理動物造成的外傷傷口清洗的消毒劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

隨著寵物的越來越普及，各種動物造成的外傷越來越多，比如抓傷，咬傷，撓傷等等。這種傷口極易感染各種動物病毒。

狂犬病是一種人畜共患疾?。ㄓ蓜游飩鞑サ饺祟惖募膊。?，由一種病毒引起?？袢「腥炯倚蠛鸵吧鷦游?，然后經(jīng)過與傳染性物質(zhì)（通常是唾液）密切接觸，通過咬傷或抓傷傳播至人。

除南極洲以外，其他各洲都存在狂犬病，但95%以上的人類死亡病例發(fā)生在亞洲和非洲。一旦出現(xiàn)狂犬病癥狀，幾乎總會致命。貧窮和脆弱人群的死亡情況鮮有報告，狂犬病是這類人群中受到忽視的疾病。這一疾病主要發(fā)生在邊遠(yuǎn)的農(nóng)村地區(qū)，在這些地方預(yù)防狗與人傳播的措施并沒有得到落實(shí)?？袢〉穆﹫笄闆r也妨礙了從國際社會動員資源，消除由狗作為媒介的人類狂犬病。

癥狀：

狂犬病潛伏期通常為1至3個月，短則不到一周，長則一年以上。狂犬病最初癥狀是發(fā)熱，傷口部位常有疼痛或有異?；蛟虿幻鞯念澩础⒋掏椿蜃仆锤校ǜ杏X異常）。

隨著病毒在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的擴(kuò)散，發(fā)展為可致命的進(jìn)行性腦脊髓炎癥。

然后可能出現(xiàn)以下兩種情況?？裨晷钥袢』颊叩陌Y狀是機(jī)能亢進(jìn)，躁動，恐水，有時還怕風(fēng)。數(shù)日后患者因心肺衰竭而死亡。

早癱性狂犬病約占人類死亡病例總數(shù)的30%。與狂躁性狂犬病相比，其病程不那么劇烈，且通常較長。從咬傷或抓傷部位開始，肌肉逐漸麻痹。然后患者漸漸陷入昏迷，最后死亡。早癱性狂犬病往往會有誤診，造成狂犬病的漏報現(xiàn)象。

診斷：

目前尚無檢測手段可在出現(xiàn)臨床癥狀前診斷人是否感染狂犬病，而且若不出現(xiàn)恐水、怕風(fēng)等特異性的狂犬病體征，也很難做出臨床診斷。人類狂犬病可通過各類診斷技術(shù)對活體和尸體做出確認(rèn)，這些技術(shù)旨在檢測受到感染組織（大腦、皮膚、尿液或唾液）的全病毒、病毒抗原或氨基酸。

傳播：

人類通常在被已受感染的動物深度咬傷或抓傷后染上狂犬病。犬類是狂犬病的主要宿主和傳播者，是造成亞洲和非洲每年大約5.5萬例人類狂犬病所有死亡病例的感染源。

在美國，蝙蝠是造成人類狂犬病多數(shù)死亡病例的原因。蝙蝠狂犬病最近已成為澳大利亞和西歐的一項公共衛(wèi)生威脅。人類由于接觸狐貍、浣熊、臭鼬、豺、貓鼬以及其他食肉性野生宿主后出現(xiàn)的死亡情況極為罕見。

該病也可通過感染性物質(zhì)（通常為唾液）直接接觸人體粘膜或新近皮膚破損處傳染。因咬傷而出現(xiàn)人傳人的情況雖有理論上的可能性，但從未得到證實(shí)。吸入含有病毒顆粒的氣溶膠或通過移植已感染病毒的器官有可能感染狂犬病，但很罕見。攝入已感染狂犬病的動物的生肉或其他組織不是人類感染源。

接觸后預(yù)防包括：

發(fā)生接觸后，盡快對傷口進(jìn)行局部處理

利用可滿足世衛(wèi)組織推薦標(biāo)準(zhǔn)的有效力和有效果的狂犬病疫苗接種一個療程。

如有指征，可注射狂犬病免疫球蛋白。

在接觸狂犬病后很快進(jìn)行有效治療可以防止出現(xiàn)癥狀和死亡。

對傷口的局部處理：

以化學(xué)或物理手段清除感染處狂犬病毒是有效的防護(hù)措施。因此，迅速對可能已感染狂犬病毒的所有咬傷處和抓傷處進(jìn)行局部處理很重要。建議采用的急救程序包括立即用肥皂和水、洗滌劑、聚維酮碘消毒劑或可殺死狂犬病毒的其他溶液徹底沖洗和清洗傷口15分鐘以上。

接觸后預(yù)防取決于人們與疑患狂犬病動物的接觸方式，基本需要立即接種疫苗并對傷口進(jìn)行局部處理。

在實(shí)際生活中，由于醫(yī)院沒有專門處理犬咬傷的設(shè)備和藥液/消毒劑，基本無法做到用肥皂和水、洗滌劑、聚維酮碘消毒劑或可殺死狂犬病毒的其他溶液徹底沖洗和清洗傷口15分鐘以上。

聚維酮碘溶液（PVP-碘）為消毒防腐劑，用于化膿性皮炎、皮膚真菌感染、小面積輕度燒燙傷，也用于小面積皮膚、黏膜創(chuàng)口的消毒。其作用機(jī)制是本品接觸創(chuàng)面或患處后，能解聚釋放出所含碘發(fā)揮殺菌作用。特點(diǎn)是對組織刺激性小，適用于皮膚、黏膜感染。本品為消毒防腐劑，對多種細(xì)菌、芽胞、病毒、真菌等有殺滅作用。其作用機(jī)制是接觸創(chuàng)面或患處后，能解聚釋放出游離碘發(fā)揮殺菌作用。特點(diǎn)是對組織刺激性小，適用于皮膚、黏膜感染。可用于小面積皮膚、黏膜創(chuàng)口的消毒。聚維酮碘消毒劑外用可引起皮膚過敏反應(yīng)，對皮膚和黏膜有一定刺激性。

中草藥具有清熱解毒、殺菌消毒和消腫的作用。因此，對動物咬傷的傷口清洗處理上有一定的作用。單純的處理動物咬傷的復(fù)合型消毒劑可能消毒的效果沒有西藥迅速。

因此，為了符合世界衛(wèi)生組織對動物造成的外傷傷口處理的要求，特別是用消毒溶液徹底沖洗和清洗傷口15分鐘以上的要求，需要開發(fā)出一種復(fù)合型消毒劑來符合世界衛(wèi)生組織的處理標(biāo)準(zhǔn)并達(dá)到更好的效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于創(chuàng)面特別是動物造成的外傷傷口的清洗的消毒劑及其制備方法，針對現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，能有效地抗病毒、抗菌消炎，并無毒無刺激，安全性高。

聚維酮碘溶液為消毒防腐劑，用于小面積皮膚、黏膜創(chuàng)口的消毒效果。但單獨(dú)使用聚維酮碘消毒劑的效果并不十分理想。

許多有香味的中藥具有避臭殺菌的作用，如野菊花具有清熱解毒，消腫作用，對各種病毒，金黃色葡萄球菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、蒺疾桿菌、流感病毒均有抑制作用。金銀花具有清熱解毒，消散癰腫作用，有抑菌、抗炎、解毒等作用。薄荷具有清香升散、疏風(fēng)散熱，清頭目，在表皮上有清涼舒緩的效果。加入這幾味中藥對聚維酮碘消毒劑的抗病毒和殺菌消炎效果有加強(qiáng)作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由如下組份制備而成：

濃度為0.05-10%的聚維酮碘溶液0.8-1.5%、野菊花9-15%，金銀花6-15%，薄荷10-20%，增溶劑0.05-1%，防腐劑0.02-0.2%，助溶劑0.05-1%，余量為蒸餾水。

優(yōu)選的，所述聚維酮碘溶液的濃度為0.5%。

根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施方式，所述增溶劑選自土溫20、土溫80、甘油和丙二醇中的一種或幾種的組合。

根據(jù)本發(fā)明的另一個實(shí)施方式，所述防腐劑選自苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀和丙酸鈣的一種或幾種的組合。

根據(jù)本發(fā)明的另一個實(shí)施方式，所述助溶劑選自乙酸、2－丙醇、乙酸丁酯和乙酸丙酯的一種或幾種的組合。

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑的制備方法包括以下步驟：

1）按質(zhì)量百分比為9-15%的野菊花、6-15%的金銀花和10-20%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用；

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用；

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，過濾，濾液與步驟（2）所得水溶液合并，濃縮，離心，過濾，濾液備用；

4）將0.05-1 %的增溶劑加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.02-0.2%的防腐劑，與步驟（3）所得濾液合并，混勻；

5）將0.8-1.5%的濃度為0.05-10%的聚維酮碘溶液和0.05-1%助溶劑加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑及其制備方法，與現(xiàn)有的單純的聚維酮碘消毒劑相比，由中草藥經(jīng)過浸泡、蒸餾、煎煮后加聚維酮碘溶液攪拌混勻制成，由于采用了天然中草藥作為原料，加強(qiáng)了聚維酮碘溶液抗病毒、殺菌消炎的效果并且具有芳香氣味，無毒無刺激，安全性高，成本較低，效果明顯，能更好地實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由如下組份制備而成：

濃度為0.05-10%的聚維酮碘溶液0.8-1.5%、野菊花9-15%，金銀花6-15%，薄荷10-20%，增溶劑0.05-1%，防腐劑0.02-0.2%，助溶劑0.05-1%，余量為蒸餾水。

優(yōu)選的，所述聚維酮碘溶液的濃度為0.5%。

在本發(fā)明中，所述增溶劑選自土溫20、土溫80、甘油和丙二醇中的一種或幾種的組合。

所述防腐劑選自苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀和丙酸鈣的一種或幾種的組合。

所述助溶劑選自乙酸、2－丙醇、乙酸丁酯和乙酸丙酯的一種或幾種的組合。

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑的制備方法包括以下步驟：

1）按質(zhì)量百分比為9-15%的野菊花、6-15%的金銀花和10-20%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用；

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用；

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，過濾，濾液與步驟（2）所得水溶液合并，濃縮，離心，過濾，濾液備用；

4）將0.05-1 %的增溶劑加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.02-0.2%的防腐劑，與步驟（3）所得濾液合并，混勻；

5）將0.8-1.5%的濃度為0.05-10%的聚維酮碘溶液和0.05-1%助溶劑加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

實(shí)施例1

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由以下組分和方法制備而成：

1）按質(zhì)量百分比為9%的野菊花、6%的金銀花和10%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用。

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用。

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液與步驟（2）所得水溶液合并，濃縮，離心，濾過，濾液備用。

4）將0.05%的吐溫-80加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.02%的山梨酸鉀，與步驟（3）所得濾液合并，混勻。

5）將濃度為0.5%的聚維酮碘溶液0.8%和0.05%的乙酸加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

實(shí)施例2

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由以下組分和方法制備而成：

1）按質(zhì)量百分比為15%的野菊花、15%的金銀花和20%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用。

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用。

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液與步驟（2）所得水溶液合并，濃縮，離心，濾過，濾液備用。

4）將0.1%的吐溫-20加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.2%的苯甲酸鈉，與步驟（3）所得濾液合并，混勻。

5）將濃度為10%的聚維酮碘溶液0.15%和1%的2－丙醇加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

實(shí)施例3

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由以下組分和方法制備而成：

1）按質(zhì)量百分比為12%的野菊花、10%的金銀花和15%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用。

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用。

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液與步驟（2）項所得水溶液合并，濃縮，離心，濾過，濾液備用。

4）將0.03%的丙二醇加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.12%的山梨酸，與步驟（3）所得濾液合并，混勻。

5）將濃度為5%的聚維酮碘溶液1%和1%的乙酸丁酯加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

實(shí)施例4

本發(fā)明的復(fù)合型消毒劑由以下組分和方法制備而成：

1）按質(zhì)量百分比為10%的野菊花、8%的金銀花和18%的薄荷，加水適量，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行蒸餾，收集蒸餾液，備用。

2）將蒸餾后的水溶液濾過，另器保存，備用。

3）藥渣再加水煎煮2次，合并煎液，濾過，濾液與步驟（2）項所得水溶液合并，濃縮，離心，濾過，濾液備用。

4）將0.04%的甘油加入步驟（1）所得蒸餾液中，混勻，然后加入0.18%的丙酸鈣，與步驟（3）所得濾液合并，混勻。

5）將濃度為2%的聚維酮碘溶液1.2%和0.5%的乙酸丙酯加入步驟（4）所得的溶液中，攪拌，加蒸餾水至全量，混勻即得。

實(shí)施例5

將本發(fā)明實(shí)施例所制備的復(fù)合型消毒劑進(jìn)行體外抗偽狂犬病毒效果試驗(yàn)。

1、材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1樣品溶液

本發(fā)明實(shí)施例所制備的復(fù)合型消毒劑，加無菌去離子水稀釋至所需濃度。

1.1.2病毒和細(xì)胞

偽狂犬病毒PRV（Min-A標(biāo)準(zhǔn)株）和豬腎細(xì)胞PK-15，均由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室保存并提供。

1.1.3 試劑

RPMI1640培養(yǎng)基（GIB-CO公司產(chǎn)品）、新生小牛血清（NBCS，鄭州伯安生物工程有限公司）、細(xì)胞生長液（含10%NBCS）、細(xì)胞維持液（含2%NBCS）、胰蛋白酶（0.25%）、雙抗（青霉素、鏈霉素各100μg/ml）等。

1.1.4儀器

二氧化碳培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1PRV毒價測定

按常規(guī)方法將PK-15細(xì)胞進(jìn)行傳代，細(xì)胞數(shù)調(diào)整至1×105CFU/ml后，加至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔100μl，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，待細(xì)胞長成單層后，倒掉原培養(yǎng)液，分別接種10倍遞比稀釋的病毒液，每孔100μl，每個稀釋度接種4孔，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)96h，用含5%新生小牛血清細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行對照，每24h觀察記錄細(xì)胞病變效應(yīng)及生長情況，計算出病毒的TCID50。重復(fù)2次，求平均值。

1.2.2本發(fā)明消毒劑樣品溶液對PK-15細(xì)胞的最大安全濃度（最大無毒劑量）的測定

將本發(fā)明實(shí)施例所制備的消毒劑樣品溶液分別用細(xì)胞維持液按1:100、1:200、1:300、1:400、1:500、1:700、1:800稀釋，然后加到長成單層PK-15細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，每孔100μl，每個稀釋度接種4孔，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)96h后觀察，記錄細(xì)胞病變效應(yīng)及生長情況,以4孔均不出現(xiàn)病變的濃度為最大安全濃度（最大無毒劑量）。

1.2.3本發(fā)明消毒劑樣品溶液對PRV病毒的殺滅率實(shí)驗(yàn)

將各稀釋度的樣品溶液，分別與等體積PRV病毒液混合，37℃作用2h，加到接種至長成單層PK-15細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，每孔100μl，每個稀釋度重復(fù)4孔，另設(shè)細(xì)胞對照和病毒對照。37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)96h，觀察細(xì)胞的病變效應(yīng)及生長情況。

2、試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1病毒毒價的測定

利用PRV病毒對PK-15細(xì)胞造成細(xì)胞病變效應(yīng)的觀察結(jié)果，根據(jù)Reed-Muench法計算出PRV病毒的TCID50為1x10-8.5/0.1 mL。

2.1.2本發(fā)明消毒劑樣品溶液對PK-15細(xì)胞的最大安全濃度（最大無毒劑量）的測定

將本發(fā)明消毒劑樣品溶液分別用細(xì)胞維持液稀釋后接種細(xì)胞，通過實(shí)驗(yàn)觀察，結(jié)果表明，本發(fā)明消毒劑1:200以上稀釋后樣品溶液對所接種的細(xì)胞已無毒性作用，即本發(fā)明消毒劑對細(xì)胞的最大無毒劑量為1:200。

2.1.3本發(fā)明消毒劑樣品溶液對PRV的殺滅率實(shí)驗(yàn)

通過觀察不同稀釋度的本發(fā)明消毒劑樣品溶液與108.5 TCID50PRV 病毒液混合作用2h后的實(shí)驗(yàn)效果，結(jié)果表明達(dá)到對PRV100%殺滅率的消毒劑的稀釋度為500倍稀釋，600倍稀釋后殺毒率為90%。

2.2結(jié)果分析

從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得知，本發(fā)明消毒劑200倍以上稀釋后樣品溶液對所接種的細(xì)胞已無毒性作用，在使用上的安全性較高；500倍稀釋時對PRV殺滅率為100%，600倍稀釋后殺毒率為90%，殺毒效果良好。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明要求的保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等同物界定。