冬凌草提取物脫色除雜的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種冬凌草提取物脫色除雜的方法，將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂或20-200目的柱層析硅膠樹脂吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界CO2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力8-30MPa，溫度35-60℃，分離溫度為35-55℃、分離壓力為4-10MPa、流體流量5-20L·h-1，萃取時間為0.5-3小時。本發(fā)明處理得到的冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低95%以上，同時很好的保留了有效成分。
【專利說明】冬凌草提取物脫色除雜的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種超臨界萃取方法，特別涉及一種使用超臨界萃取方法對冬凌草提取物脫色除雜。

【背景技術(shù)】
[0002]冬凌草(Rabdosia rebescens ( Hemsl ) Hara)系唇形科香茶菜屬多年生草本植物的干燥地上部分，主產(chǎn)于我國江西、江蘇、安徽、河南太行山南麓濟源、焦作、鶴壁等地。醫(yī)書記載:冬凌草味甘苦，性微寒，具清熱解毒、消炎止痛、健胃及抗腫瘤之功效。臨床實驗證明冬凌草對食管癌、賁門癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌等有一定療效，對食管上皮增生有顯著療效。藥學(xué)界專家普遍認為，冬凌草的抗菌作用主要與迷迭香酸有關(guān)，而另2種成分一一冬凌草甲素與冬凌草乙素則具有抗癌作用，其中冬凌草甲素是冬凌草主要的抗癌活性成分。冬凌草甲素(Oridonin)為四環(huán)二萜類化合物，對多種癌細胞具有很強的殺滅抑制作用，這種作用可能是通過誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡引起的?；诙璨莸亩浦饕煞荻璨菁姿匮邪l(fā)的抗白血病用藥即將進入臨床試驗，該化合物將來極有可能成為一種抗腫瘤的臨床用藥。
[0003]對于冬凌草中有效成分的提取，廣泛使用的是采用一定濃度的乙醇為溶劑進行回流或滲漉提取，然后將提取液真空薄膜濃縮。提取液濃縮到一定程度后由于含有大量脂溶性色素等雜質(zhì)，若繼續(xù)濃縮將會結(jié)成黑綠色粘塊，無法進行后續(xù)分離純化，因此必須采用一定的方法除去色素、油脂等雜質(zhì)。目前脫色除雜的法一般有以下幾種:
1.大孔吸附樹脂吸附法。將冬凌草濃縮液吸附于大孔吸附樹脂上，然后用一定濃度的乙醇進行梯度洗脫，洗脫液分別真空濃縮得到有效成分，而色素則被樹脂牢固吸附。利用此法雖能達到脫色除雜目的，但此時需用溶劑將色素全部洗脫下來，然后用稀酸、稀堿及水處理使樹脂再生。工藝較復(fù)雜，操作麻煩，同時存在費時、費工、費溶劑等缺點。
[0004]2.石油醚萃取法。將冬凌草濃縮液減壓濃縮至不含醇的水溶液，然后用石油醚多次萃取去除色素和脂溶性雜質(zhì)。此法需要對大量萃取液減壓回收，存在費時、費溶劑和消耗大量能源的不足。
[0005]3.醇提水沉法。將冬凌草濃縮液加等量水，攪拌后低溫放置，也可將色素、油脂類沉淀除去。但由于冬凌草中的有效成分在水中溶解度很小，采用此法在除去色素的同時，冬凌草甲素也會隨色素一起被除去，故此法冬凌草甲素收率很低。
[0006]4.活性炭回流法?；钚蕴棵撋浅ブ苄陨爻Ｓ玫姆椒ㄖ?，但由于此法使?jié)饪s液在較高溫度下加熱，冬凌草甲素受熱后破壞較嚴重。若在常溫下浸泡脫色需要很長時間，且脫色效果也不佳。
[0007]超臨界流體(Supercritical Fluid，簡稱SCF)就是物質(zhì)處于其臨界溫度(Tc)和臨界壓力(PC)以上的一種物質(zhì)狀態(tài)。對該狀態(tài)的流體加壓，流體不會液化，僅密度增大，此狀態(tài)流體既具有液態(tài)性質(zhì)，同時保留有氣體性能，這種狀態(tài)的流體表現(xiàn)出若干特殊性質(zhì)。超臨界CO2具有密度大，溶解能力強，傳質(zhì)速率高；以及臨界壓力、臨界溫度適中(臨界壓力7.37MPa、臨界溫度31.05? )，分離過程可在接近室溫條件下進行，特別適用于熱敏性天然產(chǎn)物的分離；二氧化碳作為一種非極性溶劑對色素等脂溶性的化合物具有很好的溶解性，同時二氧化碳具有無毒、惰性以及極易從萃取產(chǎn)物中分離出來等一系列優(yōu)點，不需要溶劑回收設(shè)備，與傳統(tǒng)分離工藝流程相比不但流程簡化，而且節(jié)省能耗。超臨界0)2萃取技術(shù)能夠有效的解決因較高的溫度和使用溶劑而帶來的一些問題。它采用的溫度較低，使用的唯一溶劑二氧化碳在萃取后會完全散逸掉，無論從成本和提取的產(chǎn)品質(zhì)量都比其他方法優(yōu)越，因此超臨界流體萃取是一項極具潛力的應(yīng)用技術(shù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是:在超臨界體系中，用大孔吸附樹脂或柱層析硅膠樹脂吸附冬凌草甲素等有效成分，而將色素等脂溶性雜質(zhì)直接從冬凌草提取物中分離脫去。
[0009]本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種冬凌草提取物脫色除雜的方法:將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂或20-200目的柱層析硅膠樹脂吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界CO2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力8-30MPa，溫度35_60°C，分離溫度為35_55°C、分離壓力為4-10MPa、流體流量5-20L.1Γ1，萃取時間為0.5-3小時。
[0010]所述冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上。
[0011]所述大孔吸附樹脂的型號為AB-8、HP-20、DlOl。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:在超臨界體系中，用大孔吸附樹脂或柱層析硅膠樹脂吸附冬凌草甲素等有效成分，而將色素等脂溶性雜質(zhì)直接從冬凌草提取物中分離脫去，處理后冬凌草提取物的顏色由深棕綠色變?yōu)槌壬?，脫色效果明顯。
[0013]本發(fā)明是在超臨界體系中一次完成，不需要其他的設(shè)備及裝置；不使用溶劑作為夾帶劑可以降低成本，既避免使用了有機溶劑和酸堿溶液污染環(huán)境，而且吸附劑可以重復(fù)使用，節(jié)約資源，簡化工藝，同時減少“三廢”排放，對環(huán)境友好；本發(fā)明將色素等雜質(zhì)洗脫下來，有效成分還保留在大孔吸附樹脂或柱層析硅膠樹脂中，因為中草藥中的有效成分主要是一些大分子的極性化合物，而色素和脂物化合物等是非極性化合物，超臨界0)2流體是非極性的，所以用超臨界CO2萃取可以洗脫色素等雜質(zhì)，使用夾帶劑乙醇則改變了超臨界CO2流體的極性，使它由非極性變?yōu)闃O性，就可以洗脫下來一些極性的化合物；本發(fā)明處理得到的冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低95%以上，同時很好的保留了有效成分，為下一步的精制純化創(chuàng)造了條件。

【具體實施方式】
[0014]實施例1
稱取濃縮后的冬凌草提取物50g用200g的大孔吸附樹脂AB-8吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力lOMPa，溫度401，分離溫度為35°〇、分離壓力為5MPa、流體流量5L ,萃取時間為0.5小時。處理后冬凌草提取物的顏色由深棕綠色變?yōu)槌燃t色，冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低90%，脫色效果明顯。
[0015]實施例2
稱取濃縮后的冬凌草提取物50g用200g的大孔吸附樹脂HP-20吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力20MPa，溫度50°C，分離溫度為40°C、分離壓力為7MPa、流體流量1L.h—1，萃取時間為I小時。處理后冬凌草提取物的顏色由深棕綠色變?yōu)槌燃t色，冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低95%，脫色效果明顯。
[0016]實施例3
稱取濃縮后的冬凌草提取物50g用200g 40目的柱層析硅膠吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力15MPa，溫度45°C，分離溫度為45°C、分離壓力為4MPa、流體流量8L.h—1，萃取時間為2小時。處理后冬凌草提取物的顏色由深棕綠色變?yōu)槌燃t色，冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低98%，脫色效果明顯。
[0017]實施例4
稱取濃縮后的冬凌草提取物50g用200g 100目的柱層析硅膠吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力25MPa，溫度50°C，分離溫度為50°C、分離壓力為8MPa、流體流量15L.h—1，萃取時間為1.5小時。處理后冬凌草提取物的顏色由深棕綠色變?yōu)槌燃t色，冬凌草提取物中的色素等脂溶性雜質(zhì)的含量降低97%，脫色效果明顯O
[0018]實施例5
I公斤冬凌草干葉用95%乙醇浸提濃縮后得到58克的冬凌草提取物，冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上，將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂AB-8吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界CO2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力8MPa，溫度35°C，分離溫度為35°C、分離壓力為4 MPa、流體流量5 L.h—1，萃取時間為0.5小時。
[0019]實施例6
I公斤冬凌草干葉用95%乙醇浸提濃縮后得到58克的冬凌草提取物，冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上，將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂DlOl吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界CO2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力30MPa，溫度60°C，分離溫度為55°C、分離壓力為lOMPa、流體流量20L.h—1，萃取時間為3小時。
[0020]實施例7
I公斤冬凌草干葉用95%乙醇浸提濃縮后得到58克的冬凌草提取物，冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上，將濃縮后的冬凌草提取物用20目的柱層析硅膠樹脂吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力lOMPa，溫度50°C，分離溫度為50°C、分離壓力為6MPa、流體流量1L.h—1，萃取時間為2小時。
[0021]實施例8
I公斤冬凌草干葉用95%乙醇浸提濃縮后得到58克的冬凌草提取物，冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上，將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂用200目的柱層析硅膠樹脂吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界0)2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力20MPa，溫度55 °C，分離溫度為50 °C、分離壓力為8 MPa、流體流量15 L.h—1，萃取時間為2小時。
【權(quán)利要求】
1.一種冬凌草提取物脫色除雜的方法，其特征在于:將濃縮后的冬凌草提取物用大孔吸附樹脂或20-200目的柱層析硅膠樹脂吸附后裝入超臨界萃取釜中，然后沖入超臨界CO2流體并加壓循環(huán)，萃取壓力8-30 MPa，溫度35-60 °C，分離溫度為35-55 V、分離壓力為4-10 MPa、流體流量5-20 L.1Γ1，萃取時間為0.5-3小時。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬凌草提取物脫色除雜的方法，其特征在于:所述冬凌草提取物中冬凌草甲素含量為6.54%以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬凌草提取物脫色除雜的方法，其特征在于:所述大孔吸附樹脂的型號為AB-8、HP-20、DlOl。
【文檔編號】A61K36/53GK104474011SQ201410671186
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】楊靖, 李瑞麗, 時國慶, 劉春奎, 白冰, 張改紅 申請人:鄭州輕工業(yè)學(xué)院