一種保肝制品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種保肝制品。所述保肝制品至少包括芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01－0.01：1。本發(fā)明還提供了所述保肝制品的制備方法。本發(fā)明提供的保肝制品可以較全面地預(yù)防由酒精或四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)引起的肝臟組織損傷，提高肝臟抵御化學(xué)損傷的能力。
【專利說明】—種保肝制品
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生物制品，尤其涉及一種保肝制品。
【背景技術(shù)】
[0002]肝臟是人體重要的排毒器官，經(jīng)人體腸道等消化系統(tǒng)所吸收的有毒物質(zhì)，通過肝臟解毒后變?yōu)闊o毒物質(zhì)，再經(jīng)過膽汁或尿液排出體外。肝臟功能損傷會(huì)直接威脅者人體健康，在諸多引起肝臟損傷的因素中，化學(xué)物質(zhì)造成的肝臟損傷越來越引起人們的關(guān)注。可引起肝損傷的化學(xué)物質(zhì)包括酒精、環(huán)境中的化學(xué)毒物等。
[0003]研究發(fā)現(xiàn)，酒精對(duì)肝臟的損傷是由于過量酒精進(jìn)入人體后，在代謝過程產(chǎn)生大量的NADH (煙堿酰胺腺嘌呤二核苷酸)和NADP+ (煙堿酰胺腺嘌呤二核苷磷酸鹽)，而NADH的增加促進(jìn)脂質(zhì)的合成，從而導(dǎo)致脂肪肝；同時(shí)，酒精代謝過程中還會(huì)產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物乙醛，為了消除乙醛的毒副作用，需要消耗大量的谷胱甘肽(GSH)，造成抗氧化物質(zhì)谷胱甘肽(GSH)含量的下降，最終破壞細(xì)胞內(nèi)氧化還原穩(wěn)態(tài)并誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，產(chǎn)生大量不能有效去除的活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS),包括超氧陰離子(02_)、輕自由基(OH)和過氧化氫(H2O2)等，這些氧化應(yīng)激可能會(huì)引起線粒體功能障礙、脂質(zhì)過氧化以及蛋白質(zhì)改性，從而進(jìn)一步導(dǎo)致肝細(xì)胞的死亡、炎癥反應(yīng)的發(fā)生、以及星形細(xì)胞的活化等。
[0004]環(huán)境中的化學(xué)毒物，如四氯化碳，在人體內(nèi)代謝會(huì)產(chǎn)生一種氧化能力很強(qiáng)的中間產(chǎn)物，導(dǎo)致生物膜上的脂質(zhì)過氧化，破壞膜的磷脂，改變細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能，并干擾脂蛋白的合成與轉(zhuǎn)運(yùn)，形成脂肪肝。由四氯化碳引起的急性肝功能損害患者的血清ALT、AST活性會(huì)明顯升高，患者的肝臟嚴(yán)重受損時(shí)，其血清膽紅素、凝血酶原時(shí)間也會(huì)明顯升高，血清白蛋白含量則明顯降低。
[0005]多種天然提取物經(jīng)研究證實(shí)對(duì)消除或減輕上述化學(xué)性肝損傷有益，例如:芝麻提取物和水飛薊提取物等。芝麻提`取物:包括芝麻素，表芝麻素、芝麻林素、芝麻酚和芝麻酚林等，可有效減輕酒精對(duì)肝臟的損傷和促進(jìn)肝臟脂肪代謝，減少肝臟脂肪堆積，例如:抑制血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)移酶(AST)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)，以及提高乙醛脫氫酶(ADHL)的活性，減輕酒精對(duì)肝臟的損傷；還可促進(jìn)乙醛脫氫酶(ADHL)的基因表達(dá)，增加乙醇與乙醛的代謝，減輕乙醛的毒性，緩解酒精中毒；另外還可以降低血清中的三酸甘油酯(這是造成脂肪肝的主要脂肪來源)水平，并能通過提高乙酰輔酶A氧化酶的活性，抑制多不飽和脂肪酸的增加，促進(jìn)脂肪氧化，降低肝臟脂肪的蓄積。此外，還可增加肝臟谷胱甘肽(GSH)含量，降低肝臟丙二醛(MDA)含量。水飛薊提取物:包括水飛薊素(包括水飛薊賓(silybin)、異水飛薊賓(isosilybin)、水飛薊寧(siIidianin)和水飛薊丁(silihristin))可有效消除氧自由基，促進(jìn)肝臟內(nèi)蛋白質(zhì)的生物合成減輕氧化應(yīng)激引起的肝損傷，例如:通過消除氧自由基、抗脂質(zhì)過氧化和刺激肝細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的生物合成，促進(jìn)受損肝細(xì)胞的復(fù)元；穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，保護(hù)肝細(xì)胞不受損害。此外，水飛薊賓通過增進(jìn)蛋白質(zhì)合成促進(jìn)肝的再生、可抑制肝損傷時(shí)生成白細(xì)胞三烯(Ieukotriene)和引起炎癥反應(yīng)的前列腺素的生成，具有抗氧化作用、以及預(yù)防谷胱甘肽的缺乏等作用。[0006]但是，現(xiàn)有的研究表明單獨(dú)使用上述兩種提取物均不能較全面地預(yù)防由酒精或四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)造成的肝臟功能損傷，尤其是不能較全面防止肝臟的組織學(xué)特征惡化，因此如何提供一種能較全面地預(yù)防肝臟功能損傷，尤其是能較全面防止肝臟的組織學(xué)特征惡化的保肝制品成為有待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種保肝制品，通過使用特定比例的芝麻提取物和水飛薊提取物作為活性成分，能較全面預(yù)防肝臟功能由于酒精或四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)的損傷，尤其是能較全面防止肝臟組織學(xué)特征的惡化。
[0008]本發(fā)明提供的一種保肝制品，至少包括芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01 — 0.01:1。
[0009]在本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】中，所述的芝麻提取物可以是專利200610089321.9中所述方法獲得的芝麻素。本發(fā)明的芝麻提取物也可以是以芝麻素為主要成分，進(jìn)一步還可含有表芝麻素、芝麻林素、芝麻酹和芝麻酹林中的一種或多種。
[0010]所述水飛薊提取物可以是專利200910238368.0中所述方法獲得的水飛薊素。本發(fā)明的水飛薊提取物也可以是以水飛薊素(包括水飛薊賓和異水飛薊賓)主要成分，進(jìn)一步還可含有水飛薊亭、水飛薊寧、水飛薊賓葡甲胺鹽和水飛薊賓二偏琥珀酸酯鈉中的一種或多種。
[0011]在本發(fā)明方案中，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總重占所述保肝制品0.lwt%-25wt%o
[0012]進(jìn)一步的，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總量占所述保肝制品5wt%_25wt%。
[0013]進(jìn)一步的，所述保肝制`品還包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種。所述五味子提取物為五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲或五味子酯乙。所述五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物均可通過商購獲得，或者通過水浸提取獲得，水浸提取的條件一般可以是:溫度90°C，浸提時(shí)間為3小時(shí)，浸提過程的液固質(zhì)量比為15:1。
[0014]在本發(fā)明的方案中，所述芝麻提取物、水飛薊提取物、五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種均可用作本發(fā)明保肝制品的活性成分(即有效成分)。
[0015]進(jìn)一步的，本發(fā)明提供的保肝制品可以保肝藥品或保肝食品。
[0016]進(jìn)一步的，所述保肝藥品還包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的賦形劑。更進(jìn)一步的，所述保肝藥品的制劑形式可以為硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、粉劑、懸浮液、糖漿、口服液或注射液。進(jìn)一步的，所述片劑可以為普通片劑、分散片或泡騰片。
[0017]在本發(fā)明的一個(gè)【具體實(shí)施方式】中，本發(fā)明的保肝藥品的有效成分包括芝麻提取物和水飛薊提取物的組合，該保肝藥品的每日劑量取決于多種因素:例如根據(jù)個(gè)體攝入的酒精或接觸的四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)的量，可以每天向個(gè)體施用含有治療有效量(有效成分的總量)為10-5000mg的保肝藥物，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)需要確定保肝藥物的劑量，只要能較全面地預(yù)防由酒精或四氯化碳引起的肝損傷，尤其是能較全面防止肝臟的組織學(xué)特征惡化即可。[0018]所述保肝藥品的每日劑量當(dāng)然也可以根據(jù)個(gè)體已經(jīng)產(chǎn)生的肝臟損傷(由酒精或四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)引起)的程度(例如:脂肪肝的嚴(yán)重性)、個(gè)體的年齡、身體條件、并發(fā)癥等進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。通常可以每天向肝臟損傷個(gè)體施用含有治療有效量為10-5000mg的保肝藥物。進(jìn)一步的，對(duì)于輕度肝臟損傷個(gè)體施用含有治療有效量為10-400mg的保肝藥物。對(duì)于中度肝臟損傷的個(gè)體施用含有治療有效量為500-2000mg的保肝藥物。對(duì)于重度肝臟損傷個(gè)體施用含有治療有效量為2500-5000mg的保肝藥物。以實(shí)現(xiàn)緩解或預(yù)防酒精或四氯化碳引起的肝損傷，提高肝臟抵御化學(xué)損傷的能力。
[0019]進(jìn)一步的，所述保肝藥品可以是單位制劑。所述單位制劑為滿足一次給藥所需有效成分的制劑，常見的單位制劑如一單位(片)片劑、一單位(針)針劑或粉針劑等。所述單位制劑中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。進(jìn)一步的，所述單位制劑中含有10-400mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。更進(jìn)一步的，所述單位制劑中含有500-2000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。更進(jìn)一步的，所述單位制劑中含有2500-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。
[0020]在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，以注射方式施用含有治療有效量的所述保肝藥品。更好地是對(duì)患者以單位制劑的劑量給藥，所述單位制劑為滿足一次給藥所需有效成分的制劑，常見的單位制劑如一單位(片)片劑、一單位(針)針劑或粉針劑等?；颊咭淮问┯盟璧乃幬锏牧靠梢苑奖愕赝ㄟ^計(jì)算患者的體重和該患者一次用藥所需單位體重劑量的乘積得到。例如，在制備藥物的過程中，一般認(rèn)為成人體重為50-90kg，可以最初可以通過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人的單位體重劑量之間的等效劑量換算關(guān)系來確定用藥量。例如，可以根據(jù)FDA、SFDA等藥品管理機(jī)構(gòu)提出的指導(dǎo)意見，也可參考(黃繼漢等，“藥理試驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人體間的等效劑量換算”，《中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)》，2004S印;9 (9):1069-1072)來確定。在本發(fā)明的實(shí)施方式中，可以使用按照人和大鼠的體表面積折算系數(shù)0.018來換算人和大鼠的劑量。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方式，所述保肝藥品中的芝麻提取物和水飛薊提取物每次以5-200mg/kg大鼠劑量施用至大鼠時(shí)治療效果較好，當(dāng)以10-100mg/kg大鼠劑量，例如100mg/kg、50mg/kg,以及10mg/kg大鼠劑量施用至大鼠時(shí)治療效果更佳。制藥商可以根據(jù)上述換算方法得到用于人的單位制劑中的有效成分含量，用以應(yīng)用于其制藥過程中。
[0021]在本發(fā)明的技術(shù)方案中，根據(jù)等效劑量換算關(guān)系以及人的常規(guī)體重，并且綜合用藥安全、成本和藥效，優(yōu)選的，所述單位制劑中含有20-800mg的所述芝麻提取物和水飛薊提取物，更優(yōu)選含有40-450mg的所述芝麻提取物和水飛薊提取物。
[0022]進(jìn)一步的，所述保肝食品中還可以含有果糖和/或奶制品。
[0023]所述果糖可通過添加含有果糖成分的果葡糖漿、結(jié)晶果糖、蜂蜜等方式實(shí)現(xiàn)，添加量可以為根據(jù)保肝食品的口感以及風(fēng)味的需要適當(dāng)選擇。在所述保肝食品中加入果糖除了可以改善保肝食品的風(fēng)味外，還可以加快乙醇的代謝，有防醉、解酒和保護(hù)肝臟的作用。
[0024]所述奶制品可以鮮奶、酸奶或奶酪。所述酸奶可以由長(zhǎng)雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌中的一種或多種發(fā)酵獲得的酸奶。所使用到的各種益生菌均為可商購獲得的益生菌，發(fā)酵方法采用本領(lǐng)域常規(guī)的發(fā)酵方法。
[0025]進(jìn)一步的，本發(fā)明提供的所述保肝食品包括:含有上述活性成分的糖果、口香糖、奶含片、奶球、奶條或奶提子等產(chǎn)品。這些產(chǎn)品采用本領(lǐng)域已知的工藝進(jìn)行制備。所述保肝食品還可以是保肝飲料，包括固體飲料和液體飲料。
[0026]本發(fā)明提供的保肝食品中活性成分(包括芝麻提取物和水飛薊提取物)的量可以視目的(預(yù)防或健康促進(jìn))而定適當(dāng)?shù)卮_定。通常，可以將芝麻提取物和水飛薊提取物(芝麻提取物與水飛薊提取物的重量百分比為1:0.01 - 0.01:1)以0.lwt%-25wt%、優(yōu)選5wt%-25wt%的總量添加到所述保肝食品中。
[0027]本發(fā)明還提供了上述保肝制品的制備方法，包括在制備過程添加重量百分比為1:0.01 - 0.01:1芝麻提取和水飛薊提取物。
[0028]本發(fā)明提供的保肝制品和其制備方法的具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0029]1、本發(fā)明的保肝制品具有突出的抑制酒精或四氯化碳引起的膽管增生、肝臟炎癥肝損傷的作用，以及抑制肝臟中丙二醛含量的升高的作用，可以較全面防止由于酒精或四氯化碳等化學(xué)物質(zhì)引起的肝臟功能損傷，尤其是能預(yù)防肝臟的組織學(xué)特征的惡化。
[0030]2、本發(fā)明的保肝制品可以含有酸奶，酸奶能在胃腸黏膜表層形成一層生物活性保護(hù)膜(酒精防護(hù)墻)，把酒精和胃腸黏膜隔離開來，有效減少人體對(duì)酒精的吸收，有效地保護(hù)腸胃不受乙醇的直接刺激，并激活腸胃的自我防御修復(fù)系統(tǒng)，使有害物質(zhì)對(duì)器官的傷害降至最低；另外，酸奶中益生菌所產(chǎn)生的乙醇脫氫酶(ADH)和乙醛脫氫酶(ADHL)，可促進(jìn)酒精分解，減輕對(duì)肝臟的毒害；并且益生菌產(chǎn)生的VB1、VB2、VB6、VB12等對(duì)解酒有利；同時(shí)益生菌發(fā)酵后產(chǎn)生的乳酸可有效地提高鈣的利用率，也有利于解酒，并提高腎臟細(xì)胞的活力和功能，快速排除體內(nèi)的酒精及其衍生物和其它有毒物質(zhì)。
[0031]3、本發(fā)明的保肝制品可以含有果糖，除了可以改善制品的風(fēng)味外，還可以加快乙醇的代謝，有防醉、解酒和保護(hù)肝臟的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0032]下文，本發(fā)明將通過實(shí)例來更詳細(xì)地描述。然而，以下實(shí)例僅用于理解本發(fā)明且其并不限制本發(fā)明。以下實(shí)施例中如無特別說明，所述的芝麻提取物為專利200610089321.9中所述方法獲得的芝麻素，所述水飛薊提取物為專利200910238368.0中所述方法獲得的水飛薊素。
[0033]實(shí)施例1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
[0034]一.實(shí)驗(yàn)材料
[0035]1、動(dòng)物:購自內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心的60只雄性大鼠(SD種)(平均體重=120-130g)。
[0036]2、藥物、試劑及儀器:
[0037]陽性藥物1:芝麻提取物；陽性藥物2:水飛薊提取物。
[0038]橄欖油和CCL4均商購獲得。
[0039]3、分組及藥物劑量
[0040]將上述60只大鼠隨機(jī)分為6組，大鼠每組10只，分別為:
[0041]I)空白對(duì)照組(施用橄欖油)；2)模型組(施用橄欖油和CCL4)；
[0042]3)陽性藥物組I (施用橄欖油和CCL4,以及表1-3中相應(yīng)劑量的芝麻提取物)；陽性藥物組2 (施用橄欖油和CCL4,以及表1-3中相應(yīng)劑量的水飛薊提取物組)；
[0043]4)高劑量組、5)中劑量組、6)低劑量組(施用橄欖油和CCL4,以及表1_3中相應(yīng)治療有效量的保肝藥品)。
[0044]二、實(shí)驗(yàn)過程
[0045]實(shí)驗(yàn)第I天，空白對(duì)照組腹腔注射0.75ml/kg大鼠體重的橄欖油，每周一次，共8周。其余各組大鼠:模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，陽性藥物組，分別腹腔注射CCL4與橄欖油的混合物，施用量為0.75ml/kg大鼠體重，該混合物中CCL4占40% (體積)，每周一次，共8周。在上述對(duì)除空白對(duì)照組以外的各組大鼠進(jìn)行腹腔注射CCL4與橄欖油的混合物的同一天，對(duì)高、中、低劑量組分別施用相應(yīng)劑量的保肝制品一次，對(duì)陽性藥物組1，2分別施用相應(yīng)的陽性藥物一次。
[0046]最后一次給藥結(jié)束后，對(duì)空白對(duì)照組，模型組，高、中、低劑量組，以及陽性藥物組的大鼠停止供食12小時(shí)，然后分別腹腔注射10%水合氯醛進(jìn)行麻醉，取血收集血清，根據(jù)試劑盒的操作要求檢測(cè)血清中AST和ALT值。
[0047]收集完血清后，將大鼠肝使用冰生理鹽水清洗組織表面，濾紙吸干，制備肝組織勻漿:取左葉肝組織10%勻漿，以3000rpm離心10分鐘，取上清液，根據(jù)試劑盒的操作要求檢測(cè)肝組織中SOD、GPX、GSH、MDA水平。
[0048]將剩余的肝組織置于10%中性福爾馬林溶液中固定24小時(shí)，常規(guī)石蠟包埋，4μ m切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行肝臟的組織學(xué)特征檢查，包括:檢查肝臟膽管增生、肝臟炎癥、肝臟脂肪細(xì)胞變性、肝臟細(xì)胞壞死以及肝臟纖維化的情況等。由輕到重的程度分別標(biāo)記為I分，2分，3分，4分，無明顯病變?yōu)镺分，極輕度病變?yōu)?.5分，累加所有分?jǐn)?shù)，并計(jì)算出每組每只動(dòng)物的均分(土SD)，分值越高提示病變程度越重。對(duì)病變?cè)u(píng)分結(jié)果進(jìn)行兩個(gè)樣本比較的秩和檢驗(yàn)，與模型組進(jìn)行比較。
[0049]三、數(shù)據(jù)處理:對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，對(duì)病理學(xué)評(píng)分采用秩和檢驗(yàn)，其他數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)，并統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。`
[0050]四、結(jié)果如表1-3所示
【權(quán)利要求】
1.一種保肝制品，其特征在于，至少包括活性成分芝麻提取物和水飛薊提取物，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的重量為1:0.0l — 0.0l:1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保肝制品，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總重占所述保肝制品 0.lwt%-25wt%o
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保肝制品，所述芝麻提取物和水飛薊提取物的總量占所述保肝制品 5wt%-25wt%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保肝制品，還包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的保肝制品，所述保肝制品為保肝藥品或保肝食品。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的保肝制品，所述保肝藥品還包括醫(yī)藥學(xué)上可接受的賦形劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的保肝制品，所述保肝藥品的制劑形式為硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、粉劑、口服液或注射液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的保肝制品，所述保肝藥品為單位制劑，所述單位制劑中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飛薊提取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的保肝制品，所述保肝食品中還含有果糖和/或奶制品。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的保肝`制品，所述奶制品為鮮奶、酸奶或奶酪。
【文檔編號(hào)】A61K31/357GK103446212SQ201310411115
【公開日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2013年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月11日
【發(fā)明者】王鼎, 趙永強(qiáng), 孫立, 廖小雪 申請(qǐng)人:白心亮