專利名稱：治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分及其應(yīng)用以及其提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種仙鶴草的活性組分，特別涉及一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分及其應(yīng)用以及其提取方法。
背景技術(shù)：
胰島素抵抗是指胰島素促進(jìn)葡萄糖攝取和利用的效率降低，表現(xiàn)為外周組織尤其是肌肉、脂肪組織對葡萄糖的利用障礙，自始至終貫穿于2型糖尿病發(fā)生、發(fā)展的全過程。特別是1995年Stern提出了聞名的“共同土壤”學(xué)說，豐富了 IR的內(nèi)涵，S卩肥胖、高血壓、高脂血癥、動脈粥樣硬化、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、2型糖尿病、腦卒中等均具有共同的病理基礎(chǔ)——胰島素抵 抗。目前臨床應(yīng)用于改善和治療胰島素抵抗的藥物主要是胰島素增敏劑噻唑烷二酮類藥物(TZDs)(如吡格列酮和羅格列酮)，其通過激活PPAR Y，進(jìn)一步選擇性的促進(jìn)下游基因的轉(zhuǎn)錄，可以募集前脂肪細(xì)胞，促進(jìn)其分化及在胞內(nèi)積聚更多的脂質(zhì)。所以此類藥物往往伴隨著體重增加，肥胖的副作用，也加重了心血管的危險，同時低血糖、全身性浮腫、心臟負(fù)荷、骨質(zhì)疏松、癌癥等也是較明顯的副作用。因此，開發(fā)新型的PPAR激活劑則具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會價值，而中藥具多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)、且相對安全特點(diǎn)，尋找和開發(fā)PPARy的選擇性或不完全激活劑，可以在降低胰島素抵抗的同時，降低因脂肪過度積累而導(dǎo)致的心血管疾病風(fēng)險等副作用。調(diào)控前脂肪細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子主要為:PPARy、ADDl/SREBP-1和C/ΕΒΡ-α。PPARy可以調(diào)控C/ΕΒΡ-α、脂質(zhì)代謝關(guān)鍵酶、脂肪分泌蛋白、脂肪活性因子的表達(dá)從而參與脂肪細(xì)胞分化進(jìn)程。AP2可調(diào)控細(xì)胞內(nèi)脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)和合成，是外周胰島素敏感和糖脂代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)器。PPARy是AP2基因表達(dá)的重要調(diào)節(jié)因子，通過調(diào)節(jié)其基因啟動子中的PPAR反應(yīng)元件(PPRE)，增加脂肪細(xì)胞中AP2的表達(dá)，從而促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化，但同時增加了胞內(nèi)脂質(zhì)的累積。因此AP2過量表達(dá)，可造成正常的脂肪代謝平衡的紊亂。研究表明，使用AP2的抑制劑和PPAR Y的激動劑均可以使外周胰島素增敏。仙鶴草為薔薇科多年生草本植物龍牙草(Agrimonia Pilosa Ledeb)的全草，中醫(yī)主要用于治療治咯血、吐血、便血，崩漏帶下，勞傷脫力，癰腫，創(chuàng)傷出血等。目前對仙鶴草的化學(xué)成分的研究表明，其含有多酚、黃酮及黃酮糖苷類化合物、三萜類化合物和仙鶴草內(nèi)酯等。而目前尚未有仙鶴草活性組分用于治療和改善胰島素抵抗的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明主要針對仙鶴草活性組分對胰島素抵抗的干預(yù)，發(fā)現(xiàn)仙鶴草活性組分不僅對PPAR Y的激活作用與陽性對照藥物吡格列酮無顯著差異，可顯著促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的分化；而且在激活PPARy表達(dá)的同時不像陽性對照藥物吡格列酮樣誘導(dǎo)AP2的過度表達(dá)，表明仙鶴草活性組分具有改善和治療胰島素抵抗的作用。本發(fā)明的一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，該活性組分包括仙鶴草中黃酮組分或仙鶴草三萜組分或仙鶴草黃酮組分和仙鶴草三萜組分的組合物。
進(jìn)一步，所述黃酮組分及三萜組分的組合物中黃酮組分與三萜組分的質(zhì)量比為4:11: 4。進(jìn)一步，所述仙鶴草黃酮組分與仙鶴草三萜組分的質(zhì)量比為4:1 ；進(jìn)一步，所述仙鶴草黃酮組分總黃酮的質(zhì)量百分比含量不低于30%，仙鶴草三萜組分總?cè)频馁|(zhì)量百分比含量不低于40% ；進(jìn)一步，所述仙鶴草為薔薇科龍牙草屬植物，包括牙草、黃龍尾、疏毛龍牙草、東北朝鮮龍牙草、東北的鈍齒龍、東北大興安嶺的多齒龍牙草、小花龍牙草、大花龍牙草、托葉龍牙草和歐洲的龍牙草。本發(fā)明還公開一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分在制備治療和改善胰島素抵抗藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還公開一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分的提取方法，其特征在于:包括以下步驟:a.取仙鶴草全草在溫度為105-115°C下干燥至恒重并粉碎至35_45目，然后加入95%乙醇在溫度為85-95°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏；

b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后以樣品:硅膠=1:30上硅膠柱，依次用乙酸乙酯:石油醚=1:1，乙酸乙酯:石油醚=5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)；C.將洗脫液(II)和洗脫液(ΠΙ)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分；d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分；進(jìn)一步，步驟a中取仙鶴草全草在溫度為110°C下干燥至恒重并粉碎至40目，然后加入95%乙醇在溫度為90°C回流提取3次后過濾；進(jìn)一步，步驟b中，將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解，然后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液。本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分及其應(yīng)用以及其提取方法，仙鶴草的活性物質(zhì)群為黃酮組分和三萜組分。通過HPLC分析得知:仙鶴草的黃酮組分中主要含有牡荊苷、異牡荊苷和木犀草素-7-0-葡萄糖苷、槲皮苷、銀椴苷；仙鶴草三萜組分中主要含有熊果酸、4-羥基熊果酸、科羅索酸和齊墩果酸。針對仙鶴草活性組分對胰島素抵抗的干預(yù)，發(fā)現(xiàn)仙鶴草活性組分不僅對PPAR Y的激活作用與陽性對照藥物吡格列酮無顯著差異，可顯著促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的分化；而且在激活PPAR Y表達(dá)的同時不像陽性對照藥物吡格列酮樣誘導(dǎo)AP2的過度表達(dá)，表明仙鶴草活性組分具有改善和治療胰島素抵抗的作用，可以制備成相應(yīng)的劑型進(jìn)行預(yù)防或治療胰島素抵抗。


圖1為仙鶴草黃酮組分(FC)的HPLC色譜圖:1、牡荊苷2、異牡荊苷3、金絲桃苷4、木犀草素-7-0-葡萄糖苷5、槲皮苷8、槲皮素
9、銀椴苷10、木犀草素11、蘆丁 12、芹菜素13、山奈酚15、花旗松素16、兒茶素化合物6、7、14-待定；圖2為仙鶴草三萜組分(TC)的HPLC色譜圖:4號化合物:4_羥基熊果酸，6號化合物:馬斯里酸，7號化合物:科羅羧酸，9號化合物:齊墩果酸，10號化合物:熊果酸，化合物 1、2、3、5、8 待定；圖3為濃度梯度仙鶴草黃酮組分(FC)處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化第7天顯微鏡圖(x200)；圖4濃度梯度仙鶴草三萜組分(TC)處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化第7天顯微鏡圖(x200)；圖5濃度梯度仙鶴草黃酮組分(FC)處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化第7天油紅染色圖(x200)；圖6濃度梯度仙鶴草三萜組分( TC)處理3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化第7天油紅染色圖(x200)；圖7仙鶴草兩個活性組分以及兩個組分的不同配比組分對前脂肪細(xì)胞分化過程中三酰甘油積累的影響；圖8仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)對前脂肪細(xì)胞分化主要轉(zhuǎn)錄因子的基因表達(dá)的調(diào)控；圖9仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)不同配比組分對前脂肪細(xì)胞分化主要轉(zhuǎn)錄因子基因表達(dá)的調(diào)控；圖10仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)對前脂肪細(xì)胞分化AP2表達(dá)的調(diào)控；圖11仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)不同配比組分對前脂肪細(xì)胞AP2表達(dá)的調(diào)控。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一a.取仙鶴草全草1.0kg,在溫度為110°C下干燥至恒重并粉碎至40目，然后加入95%乙醇在溫度為90°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏140g ；b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后上硅膠柱(樣品:硅膠=1:30)，依次用乙酸乙酯:石油醚=1: 1，5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)；C.將洗脫液(II)和洗脫液(III)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分；
d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分。分光光度法測得仙鶴草黃酮組分(FC)的總黃酮含量為316.53±6.37mg/g，仙鶴草三萜組分(TC)的總?cè)坪繛?15.96±5.15mg/g。將制得的仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)以質(zhì)量比為4:1常規(guī)制粒，制成膠囊、片劑或顆粒劑等。實(shí)施例二a.取仙鶴草全草1.0kg,在溫度為105°C下干燥至恒重并粉碎至35目，然后加入95%乙醇在溫度為85°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏；b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入5%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后上硅膠柱(樣品:硅膠=1:30)，依次用乙酸乙酯:石油醚=1:1，5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)；C.將洗脫液(II )和洗脫液(III)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢 測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分；d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分。分光光度法測得仙鶴草黃酮組分(FC)的總黃酮含量為316.53±6.37mg/g，仙鶴草三萜組分(TC)的總?cè)坪繛?15.96±5.15mg/g。將制得的仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)以質(zhì)量比為3:2常規(guī)制粒，制成膠囊、片劑、顆粒劑等。實(shí)施例三a.取仙鶴草全草1.0kg,在溫度為115°C下干燥至恒重并粉碎至45目，然后加入95%乙醇在溫度為90°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏；b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入15%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后上硅膠柱(樣品:硅膠=1:30)，依次用乙酸乙酯:石油醚=1: 1，5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)；C.將洗脫液(II)和洗脫液(ΠΙ)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分；d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分。分光光度法測得仙鶴草黃酮組分(FC)的總黃酮含量為316.53±6.37mg/g，仙鶴草三萜組分(TC)的總?cè)坪繛?15.96±5.15mg/g。將制得的仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)以質(zhì)量比為2:3常規(guī)制粒，制成膠囊或片劑等。實(shí)施例四a.取仙鶴草全草1.0kg,在溫度為110°C下干燥至恒重并粉碎至45目，然后加入95%乙醇在溫度為85°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏；b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后上硅膠柱(樣品:硅膠=1:30)，依次用乙酸乙酯:石油醚=1: 1，5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)；C.將洗脫液(II )和洗脫液(III)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分；

d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分。分光光度法測得仙鶴草黃酮組分(FC)的總黃酮含量為316.53±6.37mg/g，仙鶴草三萜組分(TC)的總?cè)坪繛?15.96±5.15mg/g。將制得的仙鶴草黃酮組分(FC)和仙鶴草三萜組分(TC)以質(zhì)量比為1:4常規(guī)制粒，制成膠囊或劑等。實(shí)施例五仙鶴草黃酮組分(FC)和三萜組分(TC)的HPLC物質(zhì)表征1.實(shí)驗(yàn)材料方法1.1試劑與儀器1.1.1 試劑①對照品:槲皮苷、熊果酸、山奈酹、銀鍛苷、槲皮素、木犀草素、療菜素、木犀草苷、杜荊苷、異杜荊苷、花旗松素、蘆丁、科羅羧酸、齊墩果酸、4-羥基熊果酸和馬斯里酸購自中檢所
②乙腈、甲醇為進(jìn)口色譜純③其它試劑均為國產(chǎn)分析純1.1.2 儀器①精密電子天平FA2004型，上海精密科學(xué)儀器有限公司②高效液相色譜儀Agilentl200，安捷倫科技有限公司I.I.3樣品及對照品溶液的配制①精確稱取仙鶴草黃酮組分(FC) 10.0mg,甲醇溶解定溶于IOmL容量瓶，待測。②精確稱取仙鶴草三萜組分(FC) 10.0mg,甲醇溶解定溶于IOmL容量瓶，待測。③槲皮苷、熊果酸、山奈酹、銀鍛苷、槲皮素、木犀草素、芳:菜素、木犀草苷、杜荊苷、異杜荊苷、花旗松素、蘆丁、科羅羧酸、齊墩果酸、4-羥基熊果酸和馬斯里酸對照品各自用甲醇溶解配制成0.5mg/mL的溶液待用。1.2 方法1.2.1仙鶴草黃酮組分的HPLC物質(zhì)表征色譜柱:WelchMaterials Ultimate XB-C184.6x250mm, 5 μ m ;流動相:流動相 A為0.1%磷酸水溶液，流動相B:乙腈；檢測波長:350nm，柱溫:35°C，流速:1.0mL/min，進(jìn)樣量:20μ L梯度洗脫條件如表1:表I仙鶴草黃酮組分(FC)的HPLC流動相梯度表
權(quán)利要求
1.一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，其特征在于:該活性組分包括仙鶴草中黃酮組分或仙鶴草三萜組分或仙鶴草黃酮組分和仙鶴草三萜組分的組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，其特征在于: 所述黃酮組分及三萜組分的組合物中黃酮組分與三萜組分的質(zhì)量比為4:1-1:4。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，其特征在于:所述仙鶴草黃酮組分與仙鶴草三萜組分的質(zhì)量比為4:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，其特征在于:所述仙鶴草黃酮組分總黃酮的質(zhì)量百分比含量不低于30%，仙鶴草三萜組分總?cè)频馁|(zhì)量百分比含量不低于40%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一權(quán)利要求所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，其特征在于:所述仙鶴草為薔薇科龍牙草屬植物，包括牙草、黃龍尾、疏毛龍牙草、東北朝鮮龍牙草、東北的鈍齒龍、東北大興安嶺的多齒龍牙草、小花龍牙草、大花龍牙草、托葉龍牙草和歐洲的龍牙草。
6.一種權(quán)利要求1所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分在制備治療和改善胰島素抵抗藥物中的應(yīng)用。
7.—種權(quán)利要求1所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分的提取方法，其特征在于:包括以下步驟: a.取仙鶴草全草在溫度為105-115°C下干燥至恒重并粉碎至35-45目，然后加入95%乙醇在溫度為85-95°C回流提取3次后過濾，每次提取2小時，濾過，收集濾液和濾渣，將收集的濾液減壓濃縮制得浸膏； b.將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液，將所收集的濾液濃縮后以樣品:娃I父=1:30上娃I父柱,依次用乙酸乙酷:石油醚=1:1，乙酸乙酯:石油醚=5:1及純乙酸乙酯洗脫，各洗脫5個柱體積，分別收集得洗脫液(I )，洗脫液(II)，洗脫液(III)。
C.將洗脫液(II)和洗脫液(III)溶于體積比為氯仿:甲醇=1:1的混合液，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析法檢測分析，得到仙鶴草三萜組分和黃酮組分； d.將步驟a中的濾渣用50%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取液濃縮后用60%的乙醇分散溶解，調(diào)節(jié)PH為5.0，然后緩慢加入5.0%的明膠溶液至不再產(chǎn)生沉淀為止，過濾除去鞣酸蛋白后再加入95%的乙醇至乙醇濃度為85%時除去過量的明膠和提取物中的蛋白及多糖，然后過濾并將濾液濃縮，制得浸膏；將該浸膏溶于80%的甲醇，上LH-20凝膠柱，經(jīng)薄層層析檢測分析，得到黃酮組分。
e.合并步驟c和步驟d中的黃酮組分。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分的提取方法，其特征在于:步驟a中取仙鶴草全草在溫度為110°C下干燥至恒重并粉碎至40目，然后加入95%乙醇在溫度為90°C回流提取3次后過濾。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分的提取方法，其特征在于:步驟b中，將步驟a中的浸膏用95%乙醇分散溶解，然后加入10%浸膏重量的活性炭回流2小時后過濾并收集濾液。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分及其應(yīng)用以及其提取方法，治療和改善胰島素抵抗的仙鶴草活性組分，包括仙鶴草黃酮組分和仙鶴草三萜組分，所述仙鶴草黃酮組分與仙鶴草三萜組分的質(zhì)量比為4:1-1:4；通過HPLC分析得知仙鶴草的黃酮組分中主要含有牡荊苷、異牡荊苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷、槲皮苷、銀椴苷；仙鶴草三萜組分中主要含有熊果酸、4-羥基熊果酸、科羅索酸和齊墩果酸。針對仙鶴草活性組分對胰島素抵抗的干預(yù)，發(fā)現(xiàn)仙鶴草活性組分不僅對PPARγ的激活作用與陽性對照藥物吡格列酮無顯著差異，可顯著促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的分化；而且在激活PPARγ表達(dá)的同時不像陽性對照藥物吡格列酮樣誘導(dǎo)AP2的過度表達(dá)，表明仙鶴草活性組分具有改善和治療胰島素抵抗的作用，可以制備成相應(yīng)的劑型進(jìn)行預(yù)防或治療胰島素抵抗。
文檔編號A61P5/50GK103202897SQ201210535219
公開日2013年7月17日 申請日期2012年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月12日
發(fā)明者祝連彩, 王伯初, 郭廷旺, 周雪梅, 譚君, 劉曦 申請人:重慶大學(xué)