專利名稱：含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含氧化苦參堿的組合物用途，特別是涉及含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
哮喘是由多種細(xì)胞包括氣道的炎性細(xì)胞和結(jié)構(gòu)細(xì)胞(如嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等)和細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病。最新研究表明，哮喘的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢，但是哮喘相關(guān)性住院率及死亡率均有明顯減少，主要由于隨著哮喘發(fā)病機(jī)制的深入研究，哮喘治療無論是藥物還是非藥物上都取得了很大的進(jìn)展和突破。美國研究人員發(fā)現(xiàn)老鼠肺部存在一種“味覺感受器”，能夠有效緩解哮喘癥狀。這一發(fā)現(xiàn)將有助于研究人員開發(fā)新藥物治療哮喘病。美國馬里蘭大學(xué)研究人員利用老鼠做實(shí)驗(yàn)，讓老鼠呼吸道組織接觸苦味物質(zhì)，然后暴露于哮喘過敏原。研究人員發(fā)現(xiàn)，這時(shí)老鼠的呼吸道組織發(fā)生保護(hù)反應(yīng)。研究人員實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，老鼠肺部味覺感受器受到苦味物質(zhì)刺激， 幫助呼吸道擴(kuò)張，從而緩解呼吸困難。馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)與生理學(xué)教授、心肺基因組計(jì)劃主任斯蒂芬·利格特表示，它們從深處打開了氣管，比用于治療哮喘或慢性障礙性肺病(COPD)的任何藥物打開得都深。這一發(fā)現(xiàn)可能帶來全新的治療方法，開發(fā)出治療哮喘、 肺氣腫或慢性支氣管炎的新藥，或提高目前所用藥物療效(D^pak A Deshpandel,ffayne C H Wang,Elizabeth L Mcllmoyle,Kathryn S Robinett, Rachel M Schillinger,Steven S An, James S K Sham & Stephen B Liggett, Bitter taste receptors on airway smooth muscle bronchodilate by localized calcium signaling and reverse obstruction. Nature medicine, 2010,16 (11) :1299-1307)。但目前，世界上還沒有苦味受體激動(dòng)劑作為藥物上市，亦沒有氧化苦參堿吸入性制劑上市，更沒有高純度、單劑量的氧化苦參堿吸入性制劑上市?？鄥⑹俏覈膫鹘y(tǒng)藥物之一。在我國據(jù)文字記載已有兩千多年的歷史，《本草綱目》記載苦參，苦寒、無毒，主治心、腹結(jié)氣，癥癌積聚、黃疽、溺有余浙、逐水，補(bǔ)中明目，養(yǎng)肝膽氣，并具有清熱解毒、祛風(fēng)燥濕，殺蟲、治蟲、治皮肌煩躁生瘡?？鄥A(matrine)、氧化苦參堿(oxymatrine)是豆科槐屬植物苦參的活性成分。氧化苦參堿分子式為C15H24N202。氧化苦參堿氧化苦參堿在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)，抗病毒、抗炎、免疫及抗腫瘤等方面均具有重要的藥理活性和應(yīng)用前景，各類制劑的研究開發(fā)已被廣泛用于臨床。研究發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿等苦豆子生物堿對白三烯具有明顯的抑制作用，并呈良好的量效關(guān)系。有文獻(xiàn)顯示采用氧化苦參堿注射液霧化吸入輔佐治療小兒哮喘急性發(fā)作88例，并與西藥治療組對照， 取得了滿意療效。(劉燕，韓花磊.氧化苦參堿注射液霧化吸入輔佐治療小兒哮喘療效觀察與護(hù)理.時(shí)珍國藥，1999，10 (9) 76)目前市場上的氧化苦參堿注射液又稱為苦參素注射液是從中藥苦參中提取分離純化的混合生物堿，其主要成分為氧化苦參堿?？鄥⑺鼐哂兄苯涌挂倚透窝撞《咀饔煤椭委煱准?xì)胞減少癥的功能。在臨床上廣泛用于治療慢性乙型肝炎和腫瘤放療、化療引起的白細(xì)胞低下和其他原因引起的白細(xì)胞減少癥等，苦參素注射液的國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定的方法為化學(xué)滴定法測定總生物堿含量，因此該產(chǎn)品為混合物。(李曉燕，唐敬亮.高效液相色譜法測定苦參素注射液含量的研究，湖南中醫(yī)雜志，2006,22(3) :93-94)。我們研究發(fā)現(xiàn)高純度的氧化苦參堿可以作用于肺的苦味受體，幫助呼吸道擴(kuò)張，從而緩解呼吸困難，更有效地緩解哮喘。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，所述吸入式藥物的劑型為吸入性溶液劑或吸入性粉霧劑，所述吸入性溶液劑由0. 01-6質(zhì)量份氧化苦參堿和94-99. 99質(zhì)量份藥用輔料制成；所述吸入性粉霧劑由0.01-50質(zhì)量份氧化苦參堿和 50-99. 99質(zhì)量份藥用輔料制成，所述氧化苦參堿的純度大于90 %，所述藥用輔料為溶劑、 潛溶劑、表面活性劑、矯味劑或載體的任一種或多種。優(yōu)選的是氧化苦參堿的純度等于或大于98%。優(yōu)選的是吸入性粉霧劑中所述氧化苦參堿的粒徑為< 10 μ m的顆粒。優(yōu)選的是吸入性粉霧劑中所述氧化苦參堿的粒徑或所述吸入性粉霧劑的粒徑為納米顆粒。優(yōu)選的是溶劑為水或乙醇。優(yōu)選的是潛溶劑為丙二醇或聚乙二醇400、或聚乙二醇600。
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優(yōu)選的是表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫_80，司盤-20、司盤-40、司盤-60或磷脂。優(yōu)選的是載體為乳糖、甘露醇、聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚乙二醇4000、聚乙二醇 6000、阿拉伯膠、亮氨酸或泊洛沙姆。優(yōu)選的是矯味劑為冰片或薄荷腦或薄荷醇。我們研究發(fā)現(xiàn)高純度的氧化苦參堿可以作用于肺的苦味受體，幫助呼吸道擴(kuò)張， 從而緩解呼吸困難，更有效地緩解哮喘。含氧化苦參堿的組合物所制備的粉霧劑可用任何已知干粉吸入器給藥，例如該吸入器可以是單劑量或多劑量吸入器，還可以是一種呼吸驅(qū)動(dòng)干粉吸入器。本發(fā)明所涉及的粉霧劑的粒徑，有利于藥物在肺部的分布和吸收。本發(fā)明涉及的吸入式溶液劑，不含有其他大多數(shù)同類制劑所用的防腐劑，可減輕對患者呼吸道的刺激，亦不含有能干擾影響氧化苦參堿苦味的甜味輔料，如葡萄糖，甘油等，根據(jù)藥物作用機(jī)制，此類成分影響氧化苦參堿藥效發(fā)揮。本發(fā)明與氧化苦參堿注射液進(jìn)行比較氧化苦參堿注射液又稱為苦參素注射液是從中藥苦參中提取分離純化的混合生物堿，其主要成分為氧化苦參堿，同時(shí)含有其他成分的雜質(zhì)，本發(fā)明的氧化苦參堿為單體成分，純度含量等于或大于90 %，最好是大于98 %，這種組合物針對哮喘的病癥特點(diǎn)，尤其是靶向呼吸道的苦味受體，具有藥物吸入后，直接進(jìn)入呼吸道和肺部，從而迅速吸收，緩解患者哮喘癥狀，增強(qiáng)藥效，改善患者用藥的順應(yīng)性。具有更高的藥效、更低的副作用。氧化苦參堿注射液用于治療肝病，在劑量、純度、配方上不能直接吸入用藥。含氧化苦參堿的組合物制備吸入式平喘藥物是含氧化苦參堿的組合物平喘的專用新用途、新制劑。無毒，價(jià)格便宜，成本低廉，市場前景廣闊。


圖1為豚鼠肺和氣管的α -味導(dǎo)素檢測。圖2為豚鼠肺的石蠟切片。
具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。本發(fā)明目標(biāo)藥物活性選擇原則是根據(jù)依據(jù)哮喘的病癥特點(diǎn)有針對性的設(shè)計(jì)藥物。本發(fā)明中所用的氧化苦參堿有市售或可按照已知的方法及文獻(xiàn)中描述來制備 (純化苦參堿的提取工藝研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立，亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2009，5 (4) 13-15 ；臧晉， 李杰，李慧星.氧化苦參堿提取工藝的研究，云南中醫(yī)中藥雜志，2009，30 (6) :55-56)。所購氧化苦參堿在乙醇中反復(fù)重結(jié)晶使純度達(dá)到90%以上或等于、大于98%以上。吸入粉霧劑吸入粉霧劑Gnhalation Powder)也稱為干粉末吸入劑(Dry Power Inhalers, DPI)，通常是將藥物粉末包封于單劑量硬膠囊或多劑量貯庫中，以一定的簡易DPI吸入裝置給藥，不含拋射劑，靠患者自主呼吸產(chǎn)生的氣流使藥物粉末霧化，進(jìn)而將藥物粉末同步運(yùn)送至肺部，具有應(yīng)用方便、給藥劑量容易控制和刺激性小等優(yōu)點(diǎn)。
氧化苦參堿微粉的制備1.吸入性粉霧劑中氧化苦參堿微粉的制備將氧化苦參堿在行星式球磨機(jī)中進(jìn)行球磨粉碎。球磨機(jī)使用不銹鋼罐、內(nèi)置瑪瑙球，轉(zhuǎn)速400r/min，粉碎，后過篩備用，得微粉化物，其粒度小于< 10 μ m。或用噴霧干燥法，冷凍干燥法，噴霧冷凍干燥法，超臨界流體技術(shù)制備，得微粉化物，其粒度小于< 10 μ m。2.吸入性粉霧劑中氧化苦參堿納米微粉的制備采用噴霧干燥或冷凍干燥與高壓均質(zhì)法結(jié)合制備氧化苦參堿的納米粉。實(shí)施例1含氧化苦參堿的組合物的吸入式粉霧劑處方氧化苦參堿15g(氧化苦參堿的純度為91% )乳糖IOg亮氨酸 5g制備方法將氧化苦參堿微粉化，選用粒徑為0. 5-5 μ m乳糖和亮氨酸做載體，加適量50% (w/w)乙醇水溶液制粒，置于旋振篩中，振蕩50min，烘干即得，粒徑為0. 5_5 μ m。 以每粒膠囊含主藥30mg，采用等量倍增稀釋法混合，經(jīng)中間分析和含量測定后，裝填入膠囊，借助膠囊型螺旋槳式干粉吸入器使用。實(shí)施例2含氧化苦參堿的組合物的吸入式粉霧劑處方氧化苦參堿15g(氧化苦參堿的純度為98% )乳糖6Og泊洛沙姆 0. 03g制備方法將上述處方中各組分均勻混合后，加入95% (ν/ν)乙醇水溶液適量，呈溶液，用噴霧干燥法微粉化使之平均粒度達(dá)1-5 μ m，過篩100目篩，裝膠囊。經(jīng)中間分析和含量測定后，裝填入膠囊，借助膠囊型螺旋槳式干粉吸入器使用。實(shí)施例3含氧化苦參堿的組合物的吸入式粉霧劑處方氧化苦參堿0. Olg (氧化苦參堿的純度為91% )甘露醇 98g薄荷醇 Ig制備方法氧化苦參堿經(jīng)噴霧干燥，然后用高壓均質(zhì)法制備納米粉，粒度 100-900nm;將甘露醇、薄荷醇制成大約150 μ m微粉，將氧化苦參堿納米粉與甘露醇、薄荷醇制成大約150 μ m微粉混勻，過100目篩，裝膠囊。經(jīng)中間分析和含量測定后，裝填入膠囊， 借助膠囊型螺旋槳式干粉吸入器使用。本實(shí)施例中的甘露醇，也可以用聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚乙二醇4000、聚乙二醇 6000或阿拉伯膠替代，制備吸入式粉霧劑。
實(shí)施例4含氧化苦參堿的組合物的吸入式溶液劑處方氧化苦參堿Ig (氧化苦參堿的純度為98% )乙醇IOml吐溫-80 Iml滅菌蒸餾水加至IOOml制備方法將氧化苦參堿、吐溫-80溶于乙醇中，待其完全溶解，再補(bǔ)充余量滅菌蒸餾水至全量，用垂熔玻璃濾球過濾，灌裝。本實(shí)施例中的吐溫-80，也可以用吐溫-20、吐溫-40、吐溫_60、司盤-20、司盤-40、司盤-60或磷脂替代，制備吸入式溶液劑。實(shí)施例5含氧化苦參堿的組合物的吸入式溶液劑處方氧化苦參堿2g(氧化苦參堿的純度為98% )乙醇IOml冰片0.2g滅菌蒸餾水加至100ml。制備方法將氧化苦參堿、矯味劑冰片溶于乙醇中，待其完全溶解，再補(bǔ)充余量滅菌蒸餾水至全量，用垂熔玻璃濾球過濾，灌裝。實(shí)施例6處方氧化苦參堿6g(氧化苦參堿的純度為91% )乙醇IOml
吐溫-80Iml
薄荷腦0. 5g滅菌蒸餾水加至100ml。制備方法將氧化苦參堿、矯味劑薄荷腦溶于乙醇中，待其完全溶解，加入吐溫-80，再補(bǔ)充余量滅菌蒸餾水至全量，用垂熔玻璃濾球過濾，灌裝。實(shí)施例7處方氧化苦參堿0. 012g(氧化苦參堿的純度為98. 5% )丙二醇 IOml乙醇5ml吐溫-800. 5g薄荷腦0. 5g滅菌蒸餾水加至100ml。制備方法將氧化苦參堿、矯味劑薄荷腦溶于乙醇中，待其完全溶解，加入丙二醇、 吐溫-80，再補(bǔ)充余量滅菌蒸餾水至全量，用垂熔玻璃濾球過濾，灌裝。
實(shí)驗(yàn)例動(dòng)物平喘實(shí)驗(yàn)1實(shí)施例4藥理學(xué)研究實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)對象選擇普通級Hartley豚鼠，體重150 200g，維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。供試品為實(shí)施例4吸入式溶液劑。布地奈德霧化液，阿斯利康制藥有限公司生產(chǎn)，國產(chǎn)YUYUE-403型醫(yī)用霧化器。4L干燥器。(1).動(dòng)物哮喘模型的建立和篩選，采用藥物引喘法(噴霧致喘法)。將豚鼠放入密閉的玻璃鐘罩內(nèi)，用定量霧化器噴入2%磷酸組胺和0.4%氯化乙酰膽堿O 1)混合液25s，噴霧停止后豚鼠引起呼吸急促、喘息，甚至窒息，從而出現(xiàn)抽搐或跌倒等，即為動(dòng)物性豚鼠哮喘模型建立成功。從噴霧開始到抽搐、跌倒的時(shí)間，稱為引喘潛伏期。實(shí)驗(yàn)前一天進(jìn)行誘喘實(shí)驗(yàn)，若引喘潛伏期> 120s 則為不敏感而落選。(2).隨機(jī)分組實(shí)驗(yàn)挑選合格豚鼠隨機(jī)分組、每組動(dòng)物各10只。各組間的動(dòng)物體重分配均衡。各組動(dòng)物用定量霧化器分別給藥1次，對照組給予同體積的生理鹽水，藥劑量見表1。IOmin后置密閉的4L玻璃鐘罩內(nèi)，用定量霧化器按預(yù)選時(shí)的同樣條件噴入2%磷酸組胺和0. 4%氯化乙酰膽堿0 1)混合液25s，觀察并記錄引喘潛伏期及發(fā)生跌倒的動(dòng)物數(shù)。(3).統(tǒng)計(jì)方法所有計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示。(4).結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。表1氧化苦參堿對磷酸組胺和氯化乙酰膽堿誘導(dǎo)豚鼠哮喘的潛伏期和跌倒次數(shù)得影響
組別N 劑量(氧化苦引喘潛伏期X±s，s 跌倒的動(dòng)物數(shù)
參堿)mg
生理鹽水組10061.8 士 12. 310實(shí)施例4 低劑量組 1010105. 4 士 19. 5*5 實(shí)施例4中劑量組 1020146. 7 士 31. 6**4 實(shí)施例4高劑量組 1030176. 8 士 29. 2**2 地奈德霧化劑 100.2169. 2 士 21.9**2*P < 0. 05 *P < 0. 01與生理鹽水組比較結(jié)果表明實(shí)施例4對乙酰膽堿和組胺混合液誘發(fā)的豚鼠哮喘均有明顯緩解作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。2.實(shí)施例5藥理學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法見實(shí)施例4，霧化吸入液配方見實(shí)施例5 ；布地奈德混懸液(普米克，批號 LL1875) lmg/mL·實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表2霧化吸入液對磷酸組胺和氯化乙酰膽堿誘導(dǎo)豚鼠哮喘的潛伏期和跌倒次數(shù)得影響
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權(quán)利要求
1.含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述吸入式藥物的劑型為吸入性溶液劑或吸入性粉霧劑，所述吸入性溶液劑由0. 01-6質(zhì)量份氧化苦參堿和94-99. 99質(zhì)量份藥用輔料制成；所述吸入性粉霧劑由0. 01-50質(zhì)量份氧化苦參堿和 50-99. 99質(zhì)量份藥用輔料制成，所述氧化苦參堿的純度大于90%，所述藥用輔料為溶劑、 潛溶劑、表面活性劑、矯味劑或載體的任一種或多種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述氧化苦參堿的純度等于或大于98%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述吸入性粉霧劑中所述氧化苦參堿的粒徑為< 10 μ m的顆粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述吸入性粉霧劑中所述氧化苦參堿的粒徑或所述吸入性粉霧劑的粒徑為納米顆粒。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述溶劑為水或乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述潛溶劑為丙二醇或聚乙二醇400、或聚乙二醇600。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫-80，司盤-20、司盤-40、司盤-60 或磷脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述載體為乳糖、甘露醇、聚乳酸/乙醇酸共聚物、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、阿拉伯膠、亮氨酸或泊洛沙姆。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，其特征是所述矯味劑為冰片或薄荷腦或薄荷醇。
全文摘要
本發(fā)明公開了含氧化苦參堿的組合物在制備吸入式平喘藥物的應(yīng)用，所述吸入式藥物的劑型為吸入性溶液劑或吸入性粉霧劑，氧化苦參堿的純度大于90％，藥用輔料為溶劑、潛溶劑、表面活性劑、矯味劑或載體的任一種或多種。本發(fā)明的氧化苦參堿為單體成分，純度高，針對哮喘的病癥特點(diǎn)，尤其是靶向呼吸道的苦味受體，具有藥物吸入后，直接進(jìn)入呼吸道和肺部，從而迅速吸收，緩解患者哮喘癥狀，增強(qiáng)藥效，改善患者用藥的順應(yīng)性。具有更高的藥效、更低的副作用。含氧化苦參堿的組合物制備吸入式平喘藥物是含氧化苦參堿的組合物平喘的專用新用途、新制劑。無毒，價(jià)格便宜，成本低廉，市場前景廣闊。
文檔編號A61K9/72GK102225057SQ20111010781
公開日2011年10月26日 申請日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者曹波, 李覃, 王發(fā)強(qiáng), 白淑芳, 陳若蕓, 陳虹, 高穎 申請人:中國人民武裝警察部隊(duì)醫(yī)學(xué)院