專利名稱：用于治療癌癥或癌前病癥的交錯(cuò)方法
用于治療癌癥或癌前病癥的交錯(cuò)方法
背景技術(shù)：
常規(guī)的癌癥治療鮮有治愈性的，并且可能具有顯著的副作用。這部分是由于多數(shù)化療藥物的細(xì)胞周期特異性作用機(jī)理，這使它們對(duì)于代表所有細(xì)胞周期的細(xì)胞的群體不那么有效。細(xì)胞周期是發(fā)生于細(xì)胞中的一系列事件，其引起細(xì)胞分裂和復(fù)制。在真核細(xì)胞中， 周期可以分為兩個(gè)階段間期和有絲分裂期。細(xì)胞周期的這兩個(gè)階段之間的跨越被稱作進(jìn)展或增殖。在間期，細(xì)胞生長(zhǎng)、積累有絲分裂所需的營(yíng)養(yǎng)物并復(fù)制其DNA。在有絲分裂期，細(xì)胞自己分裂為兩個(gè)不同子代細(xì)胞。間期包括3個(gè)不同階段Gap I(G1)期、S期和Gap 2 (G2) 期，而有絲分裂期包括兩個(gè)階段。G1期包括細(xì)胞尺寸增大，細(xì)胞的生物合成活性增大和后續(xù)步驟中的DNA復(fù)制所需的酶的合成。S期包括DNA合成的開始和所有的染色體的復(fù)制。(；2 期持續(xù)至細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期并包括蛋白合成，包括產(chǎn)生用于有絲分裂的微管。有絲分裂期包括“細(xì)胞的染色體在兩個(gè)子代細(xì)胞之間分配”的過(guò)程和“原始細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)分裂形成兩個(gè)不同子代細(xì)胞”的胞質(zhì)分裂過(guò)程。細(xì)胞周期還包括靜止期，通常被稱作(V各個(gè)時(shí)期之間的界限，例如G1與S期之間的界限被稱作細(xì)胞周期檢查點(diǎn)(checkpoint)。細(xì)胞周期的進(jìn)程可以被抑制，從而特定的細(xì)胞在進(jìn)入下一個(gè)階段之前，周期停止在某個(gè)點(diǎn)——細(xì)胞檢查點(diǎn)。細(xì)胞周期檢查點(diǎn)位于細(xì)胞周期的不同階段，兩個(gè)檢查點(diǎn)在G1與 S期之間交界處(G1A)和 與M期交界處。細(xì)胞周期抑制劑能夠停止細(xì)胞進(jìn)入下一個(gè)階段的進(jìn)程，例如，細(xì)胞可以在A/S細(xì)胞周期檢查點(diǎn)被抑制，這迫使細(xì)胞保持在G1期直至該抑制劑被消除。在個(gè)體中的任何特定癌細(xì)胞群體或腫瘤中，細(xì)胞周期的長(zhǎng)度是可變的。該可變性是由于在G1或所花的時(shí)間段是不同的，而從S期開端至M期末尾的時(shí)間長(zhǎng)度是相對(duì)恒定的。常規(guī)的化療處理僅打亂細(xì)胞周期的S或M期中的事件，處于細(xì)胞周期的其它階段的細(xì)胞保持相對(duì)未受傷害。例如，烷基化劑將作用于S期，而微管穩(wěn)定性或破壞性藥物則作用于M期。不幸的是，某特定的細(xì)胞在特定的時(shí)間可能不在細(xì)胞周期的S或M期。為了補(bǔ)償這一點(diǎn)，必須在長(zhǎng)時(shí)間段內(nèi)重復(fù)施用化療藥物，以增加到達(dá)處于特定細(xì)胞周期階段的細(xì)胞的機(jī)會(huì)。這種重復(fù)施用導(dǎo)致受試者內(nèi)的較大劑量的有害藥物和增加的毒性。理想的是使臨床相關(guān)的份數(shù)的細(xì)胞停滯在A/S細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，從而可以增強(qiáng)化療的功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了用于治療哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥的方法，其包括以下步驟施用治療上有效量的T型鈣通道抑制劑以有效減緩或停止真核細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的Sj2和M期的進(jìn)程，以增加處于G1期的真核細(xì)胞的比例，停止施用所述T型鈣通道抑制劑一個(gè)時(shí)間段， 和施用選自由至少一種化療劑的劑量、放射劑量及其組合組成的組的劑量以殺死在停止施用所述T型鈣通道抑制劑之后進(jìn)展越過(guò)細(xì)胞周期的G1期的真核細(xì)胞的比例。


圖1是細(xì)胞周期的示意圖。外圓圈包括間期(I)和有絲分裂(M)期，其中夸大了有絲分裂期的持續(xù)時(shí)間相對(duì)于其它階段。內(nèi)圓圈包括Gapl (G1)、Gap 2 (G2)和合成( 期。 沒(méi)有顯示Gap O(G0)或靜止期。圖2顯示了幾種化學(xué)試劑抑制鈣流入的能力與相同的化學(xué)試劑抑制細(xì)胞增殖的能力的對(duì)比。圖3是細(xì)胞周期的示意圖以及幾種鈣通道阻斷劑對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)程的影響。圖4是在交錯(cuò)治療中測(cè)定的數(shù)據(jù)的代表性圖示。圖5是在交錯(cuò)治療中測(cè)定的數(shù)據(jù)的代表性圖示。定義在描述和要求保護(hù)本發(fā)明時(shí)，將根據(jù)下文給出的定義使用下列術(shù)語(yǔ)。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“治療”包括施用療法以預(yù)防、治愈、緩解、減少、抑制或減輕/ 防止與特定病癥、疾病、損失或病癥相關(guān)的癥狀。例如，治療癌癥包括腫瘤的抑制或完全停止生長(zhǎng)，腫瘤細(xì)胞數(shù)目的減少，腫瘤尺寸的減小，腫瘤細(xì)胞向外周器官/組織浸潤(rùn)的抑制， 轉(zhuǎn)移的抑制，以及與病癥相關(guān)的一種或多種癥狀的一定程度上的減輕。癌癥的治療也包括施用直接減少腫瘤細(xì)胞的病理或使腫瘤細(xì)胞對(duì)其它治療劑、例如放療和/或化療更易感的治療劑。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“治療”包括特定病癥或病癥的預(yù)防，或與特定病癥或病癥相關(guān)的癥狀的減輕和/或預(yù)防或消除所述癥狀。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體、介質(zhì)或稀釋劑”包括任何標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)載體，諸如磷酸鹽緩沖的鹽溶液，水，乳液諸如油/水或水/油乳液，以及多種類型的潤(rùn)濕劑。 該術(shù)語(yǔ)還包括美國(guó)聯(lián)邦政府的管理部門批準(zhǔn)的或美國(guó)藥典中所列的用于動(dòng)物包括人的任何試劑。術(shù)語(yǔ)“治療上有效量”意思是本發(fā)明的化合物的緩解、減弱、減少或消除特定疾病或病癥或預(yù)防或延緩特定疾病或病癥的發(fā)作的量?！安溉閯?dòng)物”意指所有哺乳動(dòng)物，包括，例如，靈長(zhǎng)類，例如人和猴子。并且本文中包括的其它哺乳動(dòng)物的實(shí)例是兔子、狗、貓、牛、山羊、綿羊、小鼠、大鼠和馬。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物是女人或男人。表述“癌前病癥”是指非惡性但如果不治療可能變?yōu)閻盒缘纳L(zhǎng)?！鞍┣安“Y”也被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員稱作“惡病變前病癥”。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解“T型鈣通道阻抑劑”也被稱作“Τ型鈣通道抑制劑”。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞周期抑制劑”是指能夠減緩或停止細(xì)胞進(jìn)程，或細(xì)胞停在細(xì)胞周期的一個(gè)階段、不進(jìn)入細(xì)胞周期的下一階段的化合物。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞毒素”是指能夠引起被該化合物影響的細(xì)胞壞死或凋亡的化合物。
具體實(shí)施例方式細(xì)胞周期的可變長(zhǎng)度主要是由G1期所花的時(shí)間決定的。因此，群體中的任何特定細(xì)胞將停留在G1 —段時(shí)間，然后細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期的S期。為了使細(xì)胞停止而不繼續(xù)通過(guò)細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，可以施用細(xì)胞周期抑制劑，包括T型鈣通道抑制劑。首先將治療有效量的細(xì)胞周期抑制劑施用至哺乳動(dòng)物以有效減緩或停止真核細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的S、G2和M期的進(jìn)程，從而增加處于G1期與S期之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn) (G/S)的真核細(xì)胞的比例。哺乳動(dòng)物可以是人。該方法可用于治療哺乳動(dòng)物中的癌癥和癌前病癥，以及癌性和癌前腫瘤。細(xì)胞周期抑制劑的施用引起細(xì)胞群體中的異步性進(jìn)展或增殖的癌細(xì)胞隨著它們通過(guò)細(xì)胞周期而在G/S積累，因?yàn)樗鼈冞M(jìn)入S期的能力被細(xì)胞周期抑制劑阻抑。對(duì)于從G1 期經(jīng)由細(xì)胞周期檢查點(diǎn)進(jìn)入S期的細(xì)胞，該細(xì)胞需要細(xì)胞外鈣的流入，以激發(fā)進(jìn)程所需的生物化學(xué)級(jí)聯(lián)。從細(xì)胞外介質(zhì)中除掉鈣會(huì)阻斷每個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)。這種阻斷可以通過(guò)施用T型鈣通道抑制劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。適宜的T型鈣通道抑制劑包括米貝拉地爾(mibefradil)、 依福地平(efonidipine)、乙琥胺(ethosuxamide)、舒替尼(sutinib)、TTL_1177 (專利化合物，描述于下列參考文獻(xiàn):Gray, L. S. , Perez-Reyes, Ε. , Gomora, J. C. , Haverstick, D. Μ., Shattock, Μ. , McLatchie, L. , Harper, J. , Brooks, G. , Heady, Τ.禾口 MacDonald, Τ. L. (2004) Cell Calcium(細(xì)胞鈣)36,489-497)和鎳等等。因此，每個(gè)細(xì)胞保持在G1期，只要存在細(xì)胞外的鈣，但當(dāng)在沒(méi)有鈣的情況下到達(dá)A/S時(shí)，細(xì)胞將被鎖定不動(dòng)，從而使細(xì)胞同步于G1/ S。鈣流入進(jìn)細(xì)胞對(duì)于通過(guò)細(xì)胞周期的進(jìn)展和跨越是必需的。在以下實(shí)施例1中進(jìn)一步描述了這一點(diǎn)°細(xì)胞周期抑制劑的施用增加了處于A/S的細(xì)胞的百分率。在該施用之后，施用至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量，所述劑量靶向殺死處于細(xì)胞周期的S期的細(xì)胞?；焺┛梢允前┌Y化療劑，細(xì)胞毒素或其組合。細(xì)胞毒素可以是烷基化劑。癌癥化療劑可以是抗代謝物或抗有絲分裂劑，并且可以選自下列實(shí)例替莫唑胺[temozolamide (Temo) ]、5_氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、博來(lái)霉素(bleomycin)、卡鉬 (carboplatin)、Jl質(zhì) 白(cisplatin)、: +EL P秦(dacarbazine)、多 $ 比 M (doxorubicin) > 表柔比星(印irubicin)、依托泊苷(etoposide)、羥基脲(hydroxyurea)、異環(huán)磷酰胺 (ifosfamide)、伊立替康(irinotecan)、拓?fù)涮婵?topotecan)、氨甲蝶呤(metotrexate)、 米托蒽醌(mitoxantrone)、奧沙利鉬(oxaliplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉酉享(doocetaxol)、長(zhǎng)春花堿(vinblastine)、長(zhǎng)春新堿(vincristine)、長(zhǎng)春瑞濱 (vinorelbine)、長(zhǎng)春地辛(vindesine)、絲裂霉素C及其組合。至少一種化療劑的劑量可以在放射的劑量之前、之后或之中施用。放射的劑量可以在至少一種化療劑的劑量之前、之后或之中施用。首先施用細(xì)胞周期抑制劑和細(xì)胞毒素之間的時(shí)間段，允許細(xì)胞積累于細(xì)胞周期的G/S。該方法增加了處于S或M期的細(xì)胞的百分率，從而增加了至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量的效力，并且隨后降低了殺死預(yù)先確定數(shù)量的真核細(xì)胞所需的毒素載量。可以在施用至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量之后，第二次施用細(xì)胞周期抑制劑，以減緩靶向的細(xì)胞或腫瘤的再生長(zhǎng)，從而可以視需要提供進(jìn)一步的劑量施用。細(xì)胞周期抑制劑的第二次施用將使一定百分率的細(xì)胞群體再次同步于G/S。細(xì)胞周期抑制劑可以通過(guò)數(shù)種途徑施用，包括胃腸外、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、栓劑、透皮、表面或口服。細(xì)胞周期抑制劑的口服施用是最優(yōu)選的?？诜o藥可以以劑量單元的形式施用，通常是藥丸或膠囊連同藥學(xué)上可接受的載體。
T型鈣通道抑制劑限制細(xì)胞外鈣流入進(jìn)細(xì)胞，這對(duì)于多個(gè)關(guān)鍵的細(xì)胞過(guò)程是關(guān)鍵性的。這些過(guò)程所需的鈣經(jīng)由通過(guò)鈣通道的流入而來(lái)自細(xì)胞外環(huán)境。基于序列分析、生物物理特性和藥理學(xué)敏感性，鈣通道被歸類為幾個(gè)家族。這些鈣通道被指牽涉于血壓的調(diào)節(jié)、 心律和細(xì)胞增殖。研究也指出，T型鈣通道可能在年齡相關(guān)黃斑變性中具有重要作用。至少一種藥理學(xué)試劑，米貝拉地爾，已經(jīng)被證明是臨床上有效的，因?yàn)槠湟种芓通道的功能。鈣進(jìn)入的抑制劑對(duì)于治療高血壓、心律不齊和臨床上有害的細(xì)胞增殖是有用的。T型鈣通道存在于細(xì)胞、細(xì)胞系、尤其是癌細(xì)胞系中。具體地，T型鈣通道的Cav3. 2 同種型已經(jīng)被證明在日本婦女的乳腺癌組織中相對(duì)于正常的鄰近乳腺組織中異常表達(dá)，如下列參考文獻(xiàn)中所討論:Asaga, S.，Ueda, M.，Jinno, H.，Kikuchi, K.，Itano, 0.，Ikeda, T.禾口 Kitajima，M. (2006) Anticancer Res (抗癌研究)26，35—42。細(xì)胞周期抑制劑有效停止或減緩真核細(xì)胞在細(xì)胞周期檢查點(diǎn)、包括A/S的進(jìn)展， 其在下文實(shí)施例2中進(jìn)一步解釋。此外，細(xì)胞周期抑制劑的施用有效減緩疾病或病癥的生長(zhǎng)或增值，如下文實(shí)施例3所解釋的。在施用細(xì)胞周期抑制劑之后，有一個(gè)不添加細(xì)胞周期抑制劑的時(shí)間段。該時(shí)間段可以是大約O小時(shí)至大約336小時(shí)的范圍。該時(shí)間段允許積累于G/S的細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期的S期。通過(guò)施用細(xì)胞周期抑制劑，大約5%至大約25%的細(xì)胞將積累于^廣。處于S 期的細(xì)胞數(shù)目的增加使所施用的至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量更加有效，因?yàn)楦甙俜致实募?xì)胞將被每個(gè)劑量影響?！坝绊憽币庵笟⑺阑蛭礆⑺馈Ｔ诓惶砑蛹?xì)胞周期抑制劑的時(shí)間段之后，施用至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量以殺死處于S期的細(xì)胞?！皻⑺馈币庵讣?xì)胞進(jìn)行凋亡或壞死。至少一種化療劑的具體劑量、放射的劑量或二者的劑量將由本領(lǐng)域技術(shù)人員的臨床經(jīng)驗(yàn)確定，其中不同的疾病由不同的劑量和不同的試劑治療。僅為舉例的目的而言，可以使用下列化療劑的劑量來(lái)治療下列疾病。在治療成膠質(zhì)細(xì)胞瘤時(shí)，可以使用細(xì)胞毒素替莫唑胺(temozolamide)。 在治療黑素瘤時(shí)，可以使用細(xì)胞毒素美法侖(melphalan)或替莫唑胺。在治療胰腺癌時(shí)，可以使用細(xì)胞毒素吉西他濱(gemcitabine)。在治療乳腺癌時(shí)，可以使用細(xì)胞毒素吉西他濱。 在治療結(jié)腸癌時(shí)，可以使用細(xì)胞毒素伊立替康(irinotecan)或5-氟尿嘧啶。這種交錯(cuò)治療，S卩，施用細(xì)胞周期抑制劑，然后施用至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量，可用于降低疾病或病癥的進(jìn)展、增殖或生長(zhǎng)，如下文實(shí)施例4和5中更詳細(xì)地解釋。在使用該交錯(cuò)治療時(shí)，相比于單獨(dú)使用的化療或放射劑量，等量的至少一種化療劑的劑量、放射的劑量或二者的劑量更加有效。實(shí)施例1為了測(cè)定鈣流入的抑制與進(jìn)展或增殖之間的對(duì)應(yīng)性，將數(shù)種化學(xué)試劑的抑制鈣流入的能力針對(duì)這些試劑的抑制增殖的能力作圖，如以下圖2中可見。這些試劑是在維吉尼亞大學(xué)合成的專利化的化學(xué)實(shí)體。獲得了斜率為0. 98,R2值為0. 92的最小乘方相關(guān)曲線。 按照慣例，相關(guān)性不能用于推斷因果關(guān)系，但在本例中，貝葉斯(Bayesian)方法是符合的， 因?yàn)殁}流入對(duì)于增殖必然是由因及果的，所以阻斷鈣進(jìn)入將相應(yīng)地阻斷增殖。具有非常接近1的斜率的回歸線表示變量中幾乎所有的差異都由其它中的差異促成，意味著除了抑制鈣進(jìn)入之外，這些試劑對(duì)于增殖沒(méi)有作用。實(shí)施例2
6
使用流式細(xì)胞術(shù)和BUdR染色進(jìn)行了細(xì)胞周期分析。在圖3中，“Con”代表未經(jīng)處理的對(duì)照細(xì)胞。所有其它細(xì)胞培養(yǎng)物都經(jīng)過(guò)諾考達(dá)唑(nocodazole)處理，其干擾微管的聚合并在M期阻斷細(xì)胞周期。僅以諾考達(dá)唑處理AlO細(xì)胞阻斷了通過(guò)M期的細(xì)胞周期跨越， 如流式細(xì)胞術(shù)所確定的。因?yàn)锳lO細(xì)胞主要停留在與G1之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)(見圖 3中的“Con”)，所以，評(píng)價(jià)藥理學(xué)試劑抑制該階段之外的跨越的可能性并不比確定在其它細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的阻斷更直接。因此，以T型鈣通道阻斷劑米貝拉地爾(mib)、鎳(Ni)或 TTL-1177(由受讓人Tau Therapeutics擁有的專利化合物)處理細(xì)胞培養(yǎng)物M小時(shí)，然后加入諾考達(dá)唑。在不存在T通道阻斷劑的效應(yīng)時(shí)，細(xì)胞將被諾考達(dá)唑鎖定在&與M之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，如同單獨(dú)使用它處理細(xì)胞時(shí)發(fā)生的情況一樣。相反，以T型鈣通道阻斷劑的處理使細(xì)胞停留在之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，并阻止了如果不這樣的話將由諾考達(dá)唑引起的在&與M之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的積累。這證明T型鈣通道阻斷劑使周期中的細(xì)胞停止在h/S。實(shí)施例3將從患者切除的胰腺癌立即移植進(jìn)入裸鼠的腰窩并通過(guò)連續(xù)體內(nèi)傳代維持。移植的腫瘤以大約IOOmm3的體積移植，并允許生長(zhǎng)至200至300mm3，然后啟動(dòng)治療。攜帶PANC 219腫瘤的小鼠保持不予處理或以米貝拉地爾以65mg/kg p. ο. b. i. d.處理(每組n= 10)。 將腫瘤生長(zhǎng)就處理開始時(shí)所測(cè)量的的尺寸進(jìn)行校正。這些結(jié)果顯示于圖4中。處理組中的 1只小鼠在第9天(D9)死亡，如圖4中的箭頭所示。與常規(guī)的化療藥物不同，以T型鈣通道抑制劑處理未引起腫瘤消退。相反，處理通過(guò)使腫瘤細(xì)胞停止于G/S而控制了腫瘤生長(zhǎng)。實(shí)施例4使用M4細(xì)胞系在鼠異種移植模型中進(jìn)行了人成膠質(zhì)細(xì)胞瘤的交錯(cuò)治療的研究。 使攜帶DM腫瘤的皮下移植物的小鼠，其被允許建立大約IOOmm3的體積，以米貝拉地爾以 40mg/kg p. ο. q. i. d.處理7天或不予處理。在第7天，所有的動(dòng)物接受劑量為L(zhǎng)Dltl的25% 的S期細(xì)胞毒素替莫唑胺，持續(xù)5天。在2天無(wú)處理之后，在最初以米貝拉地爾處理的小鼠組中再次啟動(dòng)米貝拉地爾，劑量為35mg/kgp. ο. q. i. d.。在第20天，僅接受替莫唑胺組的小鼠中的平均腫瘤體積是173mm3，與此對(duì)比，替莫唑胺+米貝拉地爾組小鼠中的平均腫瘤體積是102mm3 (p = 0. 0485 ；η = 10/組ftudent，s匯集，雙尾t_檢驗(yàn))。在所有7個(gè)腫瘤體積測(cè)定值上進(jìn)行的匯集的、雙尾Mudent’ s t-檢驗(yàn)產(chǎn)生ρ = 0.03四。在每個(gè)組中沒(méi)有動(dòng)物由于腫瘤尺寸而被施以安樂(lè)死。沒(méi)有接受干預(yù)的對(duì)照組中的平均體積是1214mm3，有3 只動(dòng)物由于腫瘤尺寸而被施以安樂(lè)死。實(shí)施例5使用M4細(xì)胞系在鼠異種移植模型中進(jìn)行了人成膠質(zhì)細(xì)胞瘤的交錯(cuò)治療的進(jìn)一步研究。使攜帶DM腫瘤的皮下移植物的小鼠被允許建立，以米貝拉地爾以40mg/kg p. ο. q. i. d.處理7天或不予處理。在第7天，所有的動(dòng)物接受劑量為L(zhǎng)Dltl的25%的S期細(xì)胞毒素替莫唑胺，持續(xù)5天。在2天無(wú)處理之后，在最初以米貝拉地爾處理的小鼠組中再次啟動(dòng)米貝拉地爾，劑量為35mg/kg p.o.q. i.d.。在米貝拉地爾處理5天之后，再次施用替莫唑胺，持續(xù)5天，但劑量為L(zhǎng)Dltl的10%，因?yàn)樵诘谝惠喖?xì)胞毒素處理之后，細(xì)胞毒素已經(jīng)使20只小鼠中的6只的腫瘤變得太小以致于不能測(cè)定。結(jié)果顯示于下文圖5中。僅以替莫唑胺處理的小鼠具有156士65mm3的平均體積，而以替莫唑胺和米貝拉地爾處理的動(dòng)物的腫瘤體積為70士 19mm3。體積的差異表明以交錯(cuò)治療的小鼠具有的腫瘤比僅以細(xì)胞毒素治療的小鼠在30天的時(shí)間里大約更小55%。在第35天，交錯(cuò)組中的所有小鼠的癌癥都觸摸不到了。對(duì)于第30天和第35天的雙尾t檢驗(yàn)，ρ < 0.0001。在第35天，非參數(shù)Wilcoxon 符號(hào)秩檢驗(yàn)給出相同的P值0. 00010。這部分反映了下列事實(shí)交錯(cuò)組中的所有腫瘤都消退至不可觸到的尺寸。
權(quán)利要求
1.用于治療哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥的方法，其包括以下步驟(a)施用治療上有效量的T型鈣通道抑制劑以有效減緩或停止真核細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的S、G2和M期的進(jìn)程，以增加處于G1期的真核細(xì)胞的比例；(b)停止施用所述T型鈣通道抑制劑一個(gè)時(shí)間段；和(c)施用選自由至少一種化療劑的劑量、放射劑量及其組合組成的組的劑量以殺死在停止施用所述T型鈣通道抑制劑之后進(jìn)展越過(guò)細(xì)胞周期的G1期的比例的真核細(xì)胞。
2.權(quán)利要求1的方法，還包括步驟(d)在施用選自由至少一種化療劑的劑量、放射劑量及其組合組成的組的劑量之后，施用治療上有效量的T型鈣通道抑制劑以有效停止或減緩真核細(xì)胞通過(guò)Gl與S期之間的檢查點(diǎn)的進(jìn)程。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病或病癥選自由癌癥和癌前病癥組成的組。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述疾病或病癥是腫瘤。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述腫瘤是癌性或癌前腫瘤。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述T型鈣通道抑制劑包括米貝拉地爾、依福地平、乙琥胺、 舒替尼、TTL-1177和鎳。
8.權(quán)利要求1的方法，其中大約5%至大約25%的真核細(xì)胞具有停止在Gl與S期之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的進(jìn)程。
9.權(quán)利要求1的方法，還包括通過(guò)重復(fù)步驟(a)至(c)一次或多次的延伸治療方法。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述疾病或病癥是腫瘤。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述腫瘤是癌性或癌前腫瘤。
12.權(quán)利要求11的方法，其中所述癌性腫瘤在30天內(nèi)相比于僅以細(xì)胞毒素治療的腫瘤其尺寸減小大約55%。
13.權(quán)利要求1的方法，其中所述時(shí)間段是大約0小時(shí)至大約336小時(shí)。
14.權(quán)利要求9的方法，其中所述時(shí)間段是大約0小時(shí)至大約336小時(shí)。
15.權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病或病癥選自由成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、黑素瘤、胰腺癌、乳腺癌和結(jié)腸癌組成的組。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述疾病或病癥是腫瘤。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述腫瘤是癌性或癌前腫瘤。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述治療劑量是癌癥化療劑。
19.權(quán)利要求18的方法，其中癌癥化療劑是細(xì)胞毒素。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述細(xì)胞毒素包括烷基化劑。
21.權(quán)利要求19的方法，其中所述癌癥化療劑選自由抗代謝物和抗有絲分裂劑組成的組。
22.權(quán)利要求19的方法，其中所述癌癥化療劑選自由以下各項(xiàng)組成的組替莫唑胺、 5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤、博來(lái)霉素、卡鉬、順鉬、達(dá)卡巴嗪、多柔比星、表柔比星、依托泊苷、羥基脲、異環(huán)磷酰胺、伊立替康、拓?fù)涮婵?、氨甲蝶呤、米托蒽醌、奧沙利鉬、紫杉醇、多西紫杉醇、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春瑞濱、長(zhǎng)春地辛、絲裂霉素C及其組合。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于治療哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥的方法，其包括以下步驟施用治療上有效量的T型鈣通道抑制劑以有效減緩或停止真核細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞周期的S、G2和M期的進(jìn)程，以增加處于G1期的真核細(xì)胞的比例；停止施用所述T型鈣通道抑制劑一個(gè)時(shí)間段，和施用選自由至少一種化療劑的劑量、放射劑量及其組合組成的組的劑量以殺死在停止施用所述T型鈣通道抑制劑之后進(jìn)展越過(guò)細(xì)胞周期的G1期的真核細(xì)胞的比例。
文檔編號(hào)A61K31/70GK102458416SQ201080024757
公開日2012年5月16日 申請(qǐng)日期2010年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月5日
發(fā)明者喬伊爾·林登, 勞埃德·S·格雷, 安德魯·J·克勞斯, 蒂莫西·麥克唐納 申請(qǐng)人:陶制藥有限責(zé)任公司