專利名稱：：一種注射用前列地爾亞微乳及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種注射用前列地爾亞微乳及制備方法。
背景技術(shù)：
：前列地爾，又稱前列腺素E1(PGE1)，是一種活性極強(qiáng)的生理活性物質(zhì)，具有抑制血小板聚集、血栓素A2生成、動脈粥樣脂質(zhì)斑塊形成及免疫復(fù)合物的作用，并能擴(kuò)張外周和冠脈血管的藥理作用，主要用于治療慢性動脈閉塞癥(血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥等)引起的四肢潰瘍及微小血管循環(huán)障礙引起的四肢靜息疼痛，改善心腦血管微循環(huán)障礙以及慢性肝炎的輔助治療。目前上市的品種為前列地爾粉針(環(huán)糊精包合物)和前列地爾注射液，前列地爾粉針在臨床使用過程中，不良反應(yīng)發(fā)生率高，病人依從性差。游離的前列地爾在臨床使用過程中存在較大的刺激性，如引起局部疼痛、腫脹感、嚴(yán)重的出現(xiàn)發(fā)紅和沿靜脈走向出現(xiàn)紅線。前列地爾注射液最先在日本上市，采用了脂微球(LipidMicrosphere)載藥技術(shù)。脂微球是一種以脂肪油為軟基質(zhì)而被磷脂膜包封的微粒體分散體系，其制備方法是將藥物溶于脂肪油中，以精致卵磷脂為乳化劑，經(jīng)高壓均質(zhì)制成0/W型載藥脂肪乳，乳粒平均粒徑200nm，脂微球也稱脂質(zhì)乳劑(LipidEmulsion)，屬于亞微乳(Submicroemulsion)的一種。前列地爾注射液采用脂微球的載藥方式，將藥物包封于油相中，大大減少了刺激性的發(fā)生。其具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)靶向性對炎癥部位血管壁的親和力更高，能在動脈粥樣硬化血管、高血壓血管壁上沉積，針對病變部位發(fā)揮療效，而對正常血管的影響很少，大大降低副反應(yīng)發(fā)生率，被譽(yù)為“藥物導(dǎo)彈”。(2)長效性前列地爾普通粉針劑的體內(nèi)半衰期僅35分鐘，將其制成脂微球后，可以維持1224小時釋放藥物，發(fā)揮藥效。(3)高效安全性前列地爾脂微球臨床用量僅為傳統(tǒng)粉針制劑的1/51/10，即可達(dá)到更好的治療效果；前列地爾不良反應(yīng)發(fā)生率僅為傳統(tǒng)粉針制劑的1/10。由于前列地爾注射液以乳液的形式存在，仍有一部分藥物會遇水而發(fā)生降解，產(chǎn)生以下質(zhì)量問題(1)前列地爾注射液的降解產(chǎn)物PGA1的含量高達(dá)60%(國家標(biāo)準(zhǔn)WSl-(X-041)-2002Z-2008)；(2)有效期短，只有12個月(05°C)。為此，將前列地爾注射液做了進(jìn)一步的改進(jìn)，將其改劑型制成無菌凍干制劑一注射用前列地爾亞微乳，減少了藥物與水的接觸，增加其穩(wěn)定性。對于凍干前列地爾亞微乳而言，最重要的因素之一是凍干保護(hù)劑的選擇。凍干保護(hù)劑的形態(tài)和數(shù)量決定了凍干亞微乳的外觀和重分散性。根據(jù)文獻(xiàn)報道(王鴻，楊綱，梁文權(quán)。鹽酸布比卡因凍干乳劑的制備。海峽藥學(xué)，2004，16(4):21。陳永法，龔明濤，張鈞壽等。紫杉醇凍干納米乳的制備及理化性質(zhì)。中國天然藥物，2005，3(4):235237)甘露醇對乳劑凍干前后的形態(tài)，粒徑和電位的影響不大，其原因解釋為甘露醇的結(jié)晶為羽毛狀，乳滴分散在結(jié)晶的片層之間，因此得到較好的凍干制品。也有其他報道葡萄糖，右旋糖酐，果糖，乳糖，蔗糖，麥芽糖，海藻糖等應(yīng)用于凍干保護(hù)劑。專利文獻(xiàn)CN1903206公開了一種前列地爾凍干乳劑及其制備方法，每1000毫升乳劑中藥用輔料的重量百分比為，注射用油0.011%，乳化劑0.015%、穩(wěn)定劑16%、凍干保護(hù)劑20%;pH范圍49(實(shí)施例中pH范圍4.215.43)。其制備方法為，分解乳化劑；前列地爾形成油相；準(zhǔn)備水相；油相和水相乳化；調(diào)節(jié)PH值；均質(zhì)壓力調(diào)節(jié)；形成干燥前列地爾凍干乳劑。公開的乳化及均質(zhì)溫度溫度為2060°C，公開了均質(zhì)壓力，第一次為450650kg/cm2，第二步為100140kg/cm2。其研究發(fā)現(xiàn)前列地爾乳液的穩(wěn)定性非常差，不僅糖類物質(zhì)不能保證在生產(chǎn)過程中不破乳，同時，糖類凍干保護(hù)劑的復(fù)乳效果未達(dá)到微乳注射劑的要求。其采用人血白蛋白與糖類物質(zhì)合用解決了凍干乳劑的制備，所制備的凍干乳劑粒徑范圍50600nm。人血白蛋白盡管可以解決凍干保護(hù)的問題，但其來源有限，價格昂貴，不適于該產(chǎn)品的臨床廣泛應(yīng)用。專利文獻(xiàn)CN1562041公開了一種凍干前列地爾乳劑及其制備方法，其含有前列地爾，注射用油，乳化劑，穩(wěn)定劑，甘油，防腐劑，其PH范圍為49，制備步驟為(1)在配置設(shè)備中，將前列地爾溶解于注射用油中；(2)將乳化劑加入適量注射用水中，并加入穩(wěn)定劑；(3)將步驟(2)在攪拌的條件下加入步驟(1)中，或步驟(1)在攪拌的條件下加入步驟(2)中，在2060°C時攪拌、通過均質(zhì)儀，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的溶液；(4)加入適量凍干保護(hù)劑，經(jīng)冷凍干燥去除水分，得干燥的前列地爾凍干乳劑。其制備的產(chǎn)品粒徑大小為50lOOOnm。該專利文獻(xiàn)公開的是前列地爾凍干乳劑，其除了使用磷脂之外，還使用非離子表面活性劑，泊洛沙姆，吐溫之類的表面活性劑，所制備的產(chǎn)品與本產(chǎn)品不完全一致，因此其公開的制備方法也無法替代本產(chǎn)品的制備方法(1)從制得產(chǎn)品的質(zhì)量上看亞微乳的關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)之一是粒徑，而上述現(xiàn)有技術(shù)的共同缺點(diǎn)是制備的產(chǎn)品粒徑范圍較寬，實(shí)施例中的粒徑范圍從92nm962nm不等(說明書第4頁表1)。產(chǎn)品的質(zhì)量與產(chǎn)品的制備工藝密切相關(guān)，產(chǎn)品質(zhì)量差異大，說明制備工藝波動大，容易導(dǎo)致批次之間的差異較大。(2)上述現(xiàn)有技術(shù)中因加入了多種乳化劑，本品是用于靜脈注射給藥，現(xiàn)有技術(shù)中添加了多種乳化劑，如吐溫之類的表面活性劑會產(chǎn)生刺激性等不良反應(yīng)，難免帶來安全性急^^ο(3)上述現(xiàn)有技術(shù)制備溫度范圍過寬，并不適合注射用前列地爾亞微乳的制備，因此有必要對制備溫度參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，從而保證產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供一種注射用前列地爾亞微乳及制備方法，在不增加乳化劑的前提下，通過優(yōu)化制備工藝，使得制備的產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性更好，同時保證復(fù)溶后產(chǎn)品的關(guān)鍵指標(biāo)(如粒徑)與前列地爾注射液一致，從而保證臨床使用等效。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種注射用前列地爾亞微乳，包含前列地爾，注射用油，乳化劑，穩(wěn)定劑，凍干保護(hù)劑，凍干前溶液中注射用用油的重容百分比為510%(w/v)，乳化劑的重容百分比為0.62.0%(w/v)，穩(wěn)定劑的重容百分比為0.080.3%(w/v)，凍干保護(hù)劑的重容百分比為420%(w/v)，所述的凍干保護(hù)劑為蔗糖或海藻糖。所述亞微乳凍干前和復(fù)溶后溶液pH值為6.07.5，優(yōu)選為6.57.5。亞微乳的平均粒徑范圍為120280nm。所述的注射用油為精制大豆油、花生油、紅花油、棉籽油、橄欖油、椰子油、麻油、魚油、中鏈甘油單酯、中鏈甘油雙酯、中鏈甘油三酯、油酸乙酯、乙?；瘑胃视王?、丙二醇雙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一種或一種以上。所述的注射用油為精制大豆油和中鏈甘油三酯，兩者重量比為11。所述的乳化劑為大豆磷脂或蛋黃卵磷脂，其中磷脂酰膽堿的含量為80%以上。所述的穩(wěn)定劑為油酸或其鹽、膽酸或其鹽、脫氧膽酸或其鹽中的一種或一種以上本發(fā)明提供一種注射用前列地爾亞微乳的制備方法，包括以下步驟(1)油相的制備注射用油中分別加入乳化劑，穩(wěn)定劑和前列地爾，攪拌使其溶解，作為油相；(2)水相的制備將凍干保護(hù)劑加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(3)初乳的制備將步驟(1)油相加入步驟(2)水相中，高速剪切分散，形成初乳；(4)高壓勻化將步驟(3)初乳調(diào)pH至6.07.5，高壓勻化，得精乳；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm濾膜初濾；(6)無菌灌裝將步驟(5)精乳經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封至西林瓶中；(7)冷凍干燥將步驟(5)西林瓶中樣品真空冷凍干燥，即得；(8)步驟(1)至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。步驟(3)所述的高速剪切分散時間為1060分鐘，剪切速度為3000lOOOOrpm，溫度5570°C；步驟(4)所述的高壓勻化壓力為6002000bar，勻化次數(shù)36次，溫度1530°C。步驟(7)所述的真空冷凍干燥為，采用反復(fù)預(yù)凍的方法，將樣品快速冷凍至溫度-50-45°C，升溫至-35-30°C，維持0.51小時，如此反復(fù)36次；一次干燥溫度-35-30°C，一次干燥時間1020小時；二次干燥溫度-100°C，二次次干燥時間510小時；三次干燥溫度2540°C，三次干燥時間48小時。本發(fā)明通過對凍干保護(hù)劑進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)，蔗糖和海藻糖的效果明顯優(yōu)于其他凍干保護(hù)劑，不僅凍干過程中保證了乳劑的穩(wěn)定性，而且取得了預(yù)料不到的凍干效果，蔗糖和海藻糖凍干后藥物比其他凍干保護(hù)劑具有更高的包封率。凍干過程中，亞微乳乳粒之間的“液體橋”已經(jīng)被充盈的周圍的凍干保護(hù)劑凍成“固體橋”，亞微乳乳粒之間的相對位置已經(jīng)被固定下來，并且亞微乳乳粒之間不存在氣液界面張力。隨著水分不斷升華，亞微乳乳粒均勻分布其中，避免了粒子間相互間融合變大，減少了貯藏過程中的粒徑變化，注射用前列地爾亞微乳復(fù)溶后的性狀及粒徑分布等各項(xiàng)指標(biāo)同前列地爾注射液完全一致，從而保證了給藥后的體內(nèi)代謝途徑一致；同時凍干后避免了與水的接觸，藥物更加穩(wěn)定，所用的輔料均達(dá)到注射級別要求，保證了安全性。同時，本發(fā)明還有一額外發(fā)現(xiàn)，那就是pH值對前列地爾亞微乳凍干前后，粒徑變化影響顯著。對于前列地爾本身而言，其在PH5條件下最穩(wěn)定，因此，市售的前列地爾注射液(脂微球)的PH值范圍一般在4.55.5范圍內(nèi)，說明在此條件下，前列地爾注射液穩(wěn)定性最好。而本研究意外發(fā)現(xiàn)，對于凍干的前列地爾亞微乳而言，PH對前列地爾的穩(wěn)定性影響是次要的，PH4.57.5范圍藥物的含量沒有顯著差異。而PH對于凍干前后，亞微乳粒徑變化影響很大，通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PH在6.O7.5范圍內(nèi)，凍干前后粒徑變化明顯小于pH4.55.5范圍內(nèi)。本發(fā)明所制備的注射用前列地爾亞微乳很好的解決了現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，并獲得了國家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的臨床研究批件(2009L10303，2009L10302)(1)注射用前列地爾亞微乳將降解產(chǎn)物PGA1的限度降低到10%，僅為原劑型的1/6；(2)樣品經(jīng)加速試驗(yàn)6個月，長期試驗(yàn)30個月，各項(xiàng)指標(biāo)均符合規(guī)定，因此確定本品的有效期為24個月。(3)已經(jīng)上市的前列地爾注射液(脂微球)平均粒徑約為200nm，本發(fā)明的制備方法所制備的產(chǎn)品復(fù)溶后的平均粒徑在200nm，從而保證復(fù)溶后的產(chǎn)品與原劑型的臨床等效性，同時還保證了批次之間產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定。具體實(shí)施例實(shí)施例1凍干保護(hù)劑選擇1、處方前列地爾(PGE1)5mg精制大豆油IOOg蛋黃卵磷脂18g油酸2.4g凍干保護(hù)劑IOOgpH調(diào)節(jié)劑適量_注射用水加至IOOOml2、工藝過程(1)水相的制備將凍干保護(hù)劑加入水中溶解，加熱至5570°C，備用；(2)油相的制備將精制大豆油加熱至5570°C，分別加入蛋黃卵磷脂，油酸溶解，加入前列地爾，攪拌使其溶解；(3)初乳的制備將步驟(2)油相加入步驟⑴水相中，溫度5570°C，高速剪切分散，剪切速度8000rpm，時間15分鐘，形成初乳(4)高壓勻化將步驟⑶初乳調(diào)pH6.O7.5，經(jīng)微射流儀高壓勻化3次，壓力6001200bar，溫度控制15°C；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm濾膜初濾；(6)無菌過濾將步驟(5)制得乳劑經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封(7)冷凍干燥將步驟(6)所得樣品真空冷凍干燥，采用反復(fù)預(yù)凍快速冷凍至溫度_50°C，升溫至_35°C，維持1小時，如此反復(fù)3次；一次干燥溫度_35°C，一次干燥時間20小時；二次干燥溫度-10°C，二次干燥時間10小時；三次干燥溫度25°C，三次干燥時間8小時。即得注射用前列地爾亞微乳；(8)步驟(1)至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。3、評價指標(biāo)(1)外觀評價以維持原體積，不塌陷，不皺縮，表面光潔，可整塊脫落但不散碎為佳。色澤評價以色澤均勻，無花斑，質(zhì)地細(xì)膩者為佳。(2)再分散性評價取各處方凍干品，加入注射用水lmL，振搖分散。振搖后能很快分散得到均勻的溶液液者為佳。振搖次數(shù)越少，再分散性越好。(3)包封率測定采用低溫超速離心法測定包封率①藥物在水相中的含量測定采用二步離心法，取本品置于低溫超速離心機(jī)中，設(shè)定溫度為25°C，第一次調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速至5000rpm，分別置于IOmL離心管中高速離心3h，取出，小心吸取下層溶液(稀薄乳液)適量，分別置于低溫超速離心機(jī)中，第二次調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為SOOOrpm，繼續(xù)離心lh，至下層為澄清水溶液，同上述操作，分別吸取下層澄清水溶液，以0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，照含量測定項(xiàng)下方法，測定藥物在水相中的含量。②藥物總含量的測定照含量測定項(xiàng)下的測定法測定，結(jié)果即為本品的藥物總含量。③包封率的測定由于藥物在油、油水界面的含量難以測定，因此本品的包封率如下式計(jì)算即得。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>4、結(jié)果見表1。表1凍干保護(hù)劑的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例2:pH對乳粒粒徑及藥物穩(wěn)定性的影響以蔗糖為凍干保護(hù)劑，考察了不同pH值對凍干前后乳粒粒徑的影響，以平均粒徑、前列腺素E1和降解產(chǎn)物前列腺素A1的含量為指標(biāo)。結(jié)果見下表2。1、處方前列地爾(PGE1)5mg精制大豆油IOOg蛋黃卵磷脂18g油酸2.4g蔗糖120gpH調(diào)節(jié)劑適量_注射用水加至IOOOml2、工藝過程(1)水相的制備將凍干保護(hù)劑加入水中溶解，加熱至5570°C，備用；(2)油相的制備將精制大豆油加熱至5570°C，分別加入蛋黃卵磷脂，油酸溶解，加入前列地爾，攪拌使其溶解；(3)初乳的制備將步驟(2)油相加入步驟⑴水相中，溫度5570°C，高速剪切分散，剪切速度8000rpm，時間15分鐘，形成初乳。(4)高壓勻化將步驟(3)初乳調(diào)ρΗ4·58.0，經(jīng)微射流儀高壓勻化3次，壓力6001200bar，溫度控制15°C；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm濾膜初濾；(6)無菌過濾將步驟(5)制得乳劑經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封(7)冷凍干燥將步驟(6)所得樣品真空冷凍干燥，采用反復(fù)預(yù)凍快速冷凍至溫度_50°C，升溫至_35°C，維持1小時，如此反復(fù)3次；一次干燥溫度_35°C，一次干燥時間20小時；二次干燥溫度-10°C，二次干燥時間10小時；三次干燥溫度25°C，三次干燥時間8小時。即得注射用前列地爾亞微乳；(8)步驟(1)至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。3、粒徑變化分別測定凍干前后乳粒粒徑變化，變化越小，說明效果越好。粒徑分布測定方法取樣品，用純化水(經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過)，分別稀釋至5000倍，混勻，作為供試品溶液，用動態(tài)激光散射粒徑儀測定。4、結(jié)果見表2表2pH的考察(制成IOOmL)^^^於個凍干前/凍干后平均粒徑nmΓΙΤΓ~~"piT^^g^(粒徑_包封$(%)4.5185/240(29.7%)94.35.0190/241(26.8%)95.25.5188/228(21.3%)94.76.0185/211(14.1%)93.96.5189/204(8.1%)94.17.0174/182(4.6%)94.07.5176/187(6.3%)93.58.0188/205(9.0%)91.5實(shí)施例3凍干工藝的比較注射用前列地爾亞微乳為難度很大的凍干體系，由于其還有液態(tài)油、磷脂、油酸等，成分比較復(fù)雜，溶液比較黏稠，對凍干條件的要求異常苛刻，控制不好，難以凍干甚至將導(dǎo)致破乳油析，更經(jīng)常導(dǎo)致復(fù)溶后乳粒粒徑的變大，超出限度。采用常規(guī)的凍干方法進(jìn)行凍干于_40°C_20°C進(jìn)行2小時預(yù)凍，在O10°C的減壓條件下進(jìn)行一次干燥，然后，在1525°C的減壓條件下二次干燥。結(jié)果在一次干燥過程中出現(xiàn)油析，說明該方法并不適合注射用前列地爾亞微乳的凍干，經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)，采取如下的凍干工藝，可以得到粒徑均一穩(wěn)定的亞微乳。采用反復(fù)預(yù)凍的方法快速冷凍至溫度-50-45°C，升溫至-35-30°C，維持0.51小時，如此反復(fù)36次；一次干燥溫度-35-30°C，一次干燥時間1020小時；二次干燥溫度-100°C，二次干燥時間510小時；三次干燥溫度2540°C，三次干燥時間48小時。實(shí)施例4處方前列地爾(PGE1)5mg精制大豆油50g蛋黃卵磷脂6g油酸0.8g蔗糖40gpH調(diào)節(jié)劑適量_注射用水加至IOOOml工藝過程；(1)油相的制備將精制大豆油加熱至55°C，分別加入蛋黃卵磷脂，油酸溶解，力口入前列地爾，攪拌使其溶解；(2)水相的制備將蔗糖加入水中溶解，加熱至55°C；(3)初乳的制備將步驟(1)油相加入步驟(2)水相中，溫度55°C，高速剪切分散，剪切速度lOOOOrpm，時間10分鐘，形成初乳，快速降溫至1530°C，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值6.07.0；；(4)高壓勻化將步驟(3)初乳經(jīng)微射流儀高壓勻化3次，壓力6001200bar，溫度控制15°C；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm無機(jī)陶瓷膜初濾；(6)無菌過濾將步驟(5)制得乳劑經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封(7)冷凍干燥將步驟(6)所得樣品真空冷凍干燥，采用反復(fù)預(yù)凍快速冷凍至溫度_50°C，升溫至_35°C，維持1小時，如此反復(fù)3次；一次干燥溫度_35°C，一次干燥時間20小時；二次干燥溫度-10°C，二次干燥時間10小時；三次干燥溫度25°C，三次干燥時間8小時。即得注射用前列地爾亞微乳；(8)步驟⑴至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。實(shí)施例5處方前列地爾5mg精制大豆油35g中鏈甘油三酯35g蛋黃卵磷脂12g油酸2.Og蔗糖IOOgpH調(diào)節(jié)劑適量_注射用水加至IOOOml工藝過程；(1)油相的制備將精制大豆油，中鏈甘油三酯加熱至70°C，分別加入蛋黃卵磷月旨，油酸溶解，加入前列地爾，攪拌使其溶解；(2)水相的制備將蔗糖糖加入水中溶解，加熱至70°C；(3)初乳的制備將步驟(1)油相加入步驟(2)水相中，溫度70°C，高速剪切分散，剪切速度3000rpm，時間60分鐘，形成初乳，快速降溫至1530°C，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值6.07.0；；(4)高壓勻化將步驟(3)初乳經(jīng)微射流儀高壓勻化6次，壓力6001200bar，溫度控制30°C；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm無機(jī)陶瓷膜初濾；(6)無菌過濾將步驟(5)制得乳劑經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封(7)冷凍干燥將步驟(6)所得樣品真空冷凍干燥，采用反復(fù)預(yù)凍快速冷凍至溫度-45°C，升溫至_30°C，維持0.5小時，如此反復(fù)6次；一次干燥溫度_30°C，一次干燥時間10小時；二次干燥溫度0°C，二次干燥時間5小時；三次干燥溫度40°C，三次干燥時間4小時。即得注射用前列地爾亞微乳；(8)步驟⑴至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。實(shí)施例6處方前列地爾IOmg精制大豆油IOOg大豆卵磷脂18g油酸2.4g蔗糖200gpH調(diào)節(jié)劑適量_注射用水加至IOOOml工藝過程；(1)油相的制備將精制大豆油加熱至60°C，分別加入蛋黃卵磷脂，油酸溶解，力口入前列地爾，攪拌使其溶解；(2)水相的制備將蔗糖加入水中溶解，加熱至60°C；(3)初乳的制備將步驟(1)油相加入步驟(2)水相中，溫度60°C，高速剪切分散，剪切速度6000rpm，時間30分鐘，形成初乳，快速降溫至1530°C，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值6·O7·O；；(4)高壓勻化將步驟(3)初乳經(jīng)微射流儀高壓勻化4次，壓力6001200bar，溫度控制30°C；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45μm無機(jī)陶瓷膜初濾；(6)無菌過濾將步驟(5)制得乳劑經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封(7)冷凍干燥將步驟(6)所得樣品真空冷凍干燥，采用反復(fù)預(yù)凍快速冷凍至溫度_45°C，升溫至-30°C，維持1小時，再將溫度降至-45°C，如此反復(fù)4次；一次干燥溫度_35°C，一次干燥時間15小時，二次干燥溫度_5°C，二次干燥時間8小時，三次干燥溫度30°C，三次干燥時間8小時。即得注射用前列地爾亞微乳；(8)步驟(1)至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。實(shí)施例7凍干前后粒徑變化采用動態(tài)激光散射法測定粒徑表3凍干前后粒徑變化平均粒徑(nm)實(shí)施例4實(shí)施⑥實(shí)施例6凍干前176172180凍干后189188196實(shí)施例8長期穩(wěn)定性試驗(yàn)表4長期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果(涼暗處)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權(quán)利要求一種注射用前列地爾亞微乳，包含前列地爾，注射用油，乳化劑，穩(wěn)定劑，凍干保護(hù)劑，其特征在于，凍干前溶液中注射用用油的重容百分比為5～10％(w/v)，乳化劑的重容百分比為0.6～2.0％(w/v)，穩(wěn)定劑的重容百分比為0.08～0.3％(w/v)，凍干保護(hù)劑的重容百分比為4～20％(w/v)，所述的凍干保護(hù)劑為蔗糖或海藻糖。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用前列地爾亞微乳，其特征在于，凍干前和復(fù)溶后溶液pH值為6.07.5。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的注射用前列地爾亞微乳，其特征在于，該亞微乳的平均粒徑范圍為120280nm。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一所述的注射用前列地爾亞微乳，所述的注射用油為精制大豆油、花生油、紅花油、棉籽油、橄欖油、椰子油、麻油、魚油、中鏈甘油單酯、中鏈甘油雙酯、中鏈甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化單甘油酯、丙二醇雙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯中的一種或一種以上。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用前列地爾亞微乳，其特征在于，所述的注射用油為精制大豆油和中鏈甘油三酯，兩者重量比為11。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用前列地爾亞微乳，其特征在于，所述的乳化劑為大豆磷脂或蛋黃卵磷脂，其中磷脂酰膽堿的含量為80%以上。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用前列地爾亞微乳，其特征在于，所述的穩(wěn)定劑為油酸或其鹽、膽酸或其鹽、脫氧膽酸或其鹽中的一種或一種以上8.—種權(quán)利要求17任一所述注射用前列地爾亞微乳的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)油相的制備注射用油中分別加入乳化劑，穩(wěn)定劑和前列地爾，攪拌使其溶解，作為油相；(2)水相的制備將凍干保護(hù)劑加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(3)初乳的制備將步驟(1)油相加入步驟(2)水相中，高速剪切分散，形成初乳；(4)高壓勻化將步驟(3)初乳調(diào)pH至6.07.5，高壓勻化，得精乳；(5)初濾將步驟(4)精乳經(jīng)0.45um濾膜初濾；(6)無菌灌裝將步驟(5)精乳經(jīng)0.22ym微孔濾膜過濾除菌，無菌灌封至西林瓶中；(7)冷凍干燥將步驟(5)西林瓶中樣品真空冷凍干燥，即得；(8)步驟(1)至(6)均在氮?dú)獗Ｗo(hù)下操作。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的注射用前列地爾亞微乳的制備方法，其特征在于，步驟(7)所述的真空冷凍干燥為，采用反復(fù)預(yù)凍的方法，將樣品快速冷凍至溫度-50-45°C，升溫至-35-30°C，維持0.51小時，如此反復(fù)36次；一次干燥溫度-35_30°C，一次干燥時間1020小時；二次干燥溫度-100°C，二次次干燥時間510小時；三次干燥溫度2540°C，三次干燥時間48小時。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的注射用前列地爾亞微乳的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述的高速剪切分散時間為1060分鐘，剪切速度為3000lOOOOrpm，溫度5570°C；步驟(4)所述的高壓勻化壓力為6002000bar，勻化次數(shù)36次，溫度1530°C。全文摘要本發(fā)明涉及注射用前列地爾亞微乳及制備方法，由前列地爾，注射用油，乳化劑，穩(wěn)定劑，凍干保護(hù)劑制成，包括以下步驟1)油相的制備；(2)水相的制備；(3)初乳的制備；(4)高壓勻化；(5)初濾；(6)無菌灌裝；(7)冷凍干燥。所制備的注射用前列地爾亞微乳粒徑均一穩(wěn)定，降解產(chǎn)物降至10％，有效期延長至24個月。文檔編號A61P1/16GK101829054SQ201010171208公開日2010年9月15日申請日期2010年5月13日優(yōu)先權(quán)日2010年5月13日發(fā)明者劉啟悅,宋華先,張占軍,程宇,馬紅萍,黃海申請人:北京中海康醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司