專利名稱：：注射用生脈制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明技術(shù)屬于中藥制藥領(lǐng)域，具體涉及一種中藥天然藥物提取物制成注射制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
：生脈散方(人參、麥冬、五味子)來(lái)源于《內(nèi)外傷辯惑論卷之中暑傷胃氣論》，中醫(yī)傳統(tǒng)中生脈散用于危重病人，有益氣固脫，強(qiáng)心作用，臨床應(yīng)用效果較好。生脈注射液根據(jù)傳統(tǒng)古方生脈散經(jīng)過(guò)劑型改革制成的一種靜脈注射液。具有益氣養(yǎng)陰、復(fù)脈固脫之功效，用于氣陰兩虧、脈虛欲脫的心悸、氣短、四肢厥冷、汗出、脈欲絕及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等。生脈注射液由紅參、麥冬、五味子三味中藥組成，其中主料人參，歷來(lái)廣泛應(yīng)用于臨床，尤其近代研究發(fā)現(xiàn)有抑制癌細(xì)胞的作用，故有廣闊的應(yīng)用前途。人參的商品名紅參、白參、曬參、高麗參、山參、糖參等，藥用其干燥根。紅參的有效成分為人參皂苷，具有強(qiáng)心、調(diào)整血壓、改善循環(huán)、促進(jìn)物質(zhì)代謝和蛋白質(zhì)合成等功效；麥冬的有效成分為麥冬皂苷，具有改善心肌收縮力及心臟泵血功能、保護(hù)心肌、抗心律失常、耐缺氧、降血糖和抗菌等功效；五味子的有效成分為五味子素，具有增強(qiáng)肝臟解毒功能，促進(jìn)肝臟蛋白質(zhì)和糖原的生物合成等功效。生脈注射液的功效是由三種藥物相互作用、相互協(xié)調(diào)而共同體現(xiàn)出來(lái)的。經(jīng)研究證實(shí)，生脈注射液的藥理作用主要有增強(qiáng)心肌收縮力、擴(kuò)張冠脈血管、消除自由基、改善微循環(huán)、抗炎等作用。因此，其臨床適應(yīng)癥主要包括如下病癥1)各種類型的休克如失血性休克、心源性休克、感染性休克、創(chuàng)傷性休克、過(guò)敏性休克；2)心臟疾病如充血性心力衰竭、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、肺心病、病毒性心肌炎、心律失常、微循環(huán)障礙疾?。?)腦血管疾病如腦血栓、腦栓塞、腦溢血等；4)放療、化療病人和腫瘤患者的輔助治療。其在臨床上長(zhǎng)期使用，經(jīng)血尿常規(guī)、肝腎功能、心電圖檢查、出凝血時(shí)間測(cè)定等未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)。臨床反應(yīng)，少數(shù)中藥注射液存在質(zhì)量不穩(wěn)定、有過(guò)敏反應(yīng)等問(wèn)題，這是因?yàn)樽⑸湟阂话阒皇墙?jīng)過(guò)提取、簡(jiǎn)單精制后配液灌封滅菌而得，中藥中草藥提取物含有大量的雜質(zhì)如鞣酸、色素、細(xì)菌熱源等，是目前制約提高中藥質(zhì)量、穩(wěn)定性的關(guān)鍵問(wèn)題，直接影響到產(chǎn)品的質(zhì)量和臨床療效。許多發(fā)明人及制藥企業(yè)做了大量的研究工作，如專利申請(qǐng)?zhí)枮?00510047834.9中，公開(kāi)了一種生脈大容量注射液及其制備方法，該方法中未公開(kāi)有效的提取、純化方法，難以保證產(chǎn)品質(zhì)量，且大生產(chǎn)中難以實(shí)現(xiàn)；專利申請(qǐng)?zhí)枮?00810101610.5中，公開(kāi)了一種三味生脈注射液及其制備方法，該方法中雖然采用了超濾技術(shù)，但沒(méi)有提出超濾技術(shù)的關(guān)鍵控制指標(biāo)，大生產(chǎn)中難以操作，且在紅參提取中應(yīng)用了大孔樹(shù)脂吸附技術(shù)，雖然大孔樹(shù)脂是富集有效成分、去除雜質(zhì)的一種有效純化精制方法，但是其致孔劑和降解物有毒性，2000年11月28日，國(guó)家藥品審評(píng)中心召開(kāi)了"大孔吸附樹(shù)脂分離純化技術(shù)專題討論會(huì)"，會(huì)議指出，中藥注射劑釆用大孔樹(shù)脂純化應(yīng)慎用，需要提供充足的依據(jù)，所以該法在實(shí)驗(yàn)室可操作，但實(shí)際注射劑工業(yè)化大生產(chǎn)中應(yīng)用極少。鑒于這種情況，急需一種操作簡(jiǎn)便、安全可靠、工藝合理可行、質(zhì)量更加穩(wěn)定的注射用生脈制劑及制備方法，更適合企業(yè)大生產(chǎn)要求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種質(zhì)量更加穩(wěn)定，提取工藝更便捷、有效提取更完全，制備工藝簡(jiǎn)單、成本低廉，適合工業(yè)化大生產(chǎn)的注射用生脈制劑及其制備方法。為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，提供如下技術(shù)方案。一種注射用生脈制劑，按照重量組分計(jì)算它包括紅參1-15份、麥冬3-25份、五味子l-16份制成，其特征在于制劑中以人參皂苷Rg^十不少于0.lmg/ml，人參皂苷Re計(jì)不少于0.05mg/ml,包括下列制備方法1)紅參提取液制備紅參乙醇回流提取，回流液過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值6.0-7.0,加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g,低溫靜置，過(guò)濾，調(diào)pH值6.0-7.0，即得紅參提取液A;2)麥冬提取液制備麥冬水提，合并水提液，過(guò)濾，減壓濃縮后，加入乙醇進(jìn)行醇沉，低溫5靜置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每mt含生藥量O.5-1.5g,過(guò)濾，即得麥冬提取液B;3)五味子蒸馕液制備五味子水蒸氣蒸餾，收集，得到五味子蒸餾液C;4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣水提，合并水提液，過(guò)濾，減壓濃縮后，加入乙醇進(jìn)行醇沉，低溫靜置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量O.5-1.5g,過(guò)濾，即得五味子提取液D;5)A、B、C、D混勾，超濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，按常規(guī)方法制成不同注射制劑。上述制備方法，紅參提取液中以人參皂苷Rg,計(jì)不少于1.25mg/ml，人參皂苷Re計(jì)不少于O.65mg/ral;紅參1-15份、麥冬3-25份、五味子l-16份制成任何醫(yī)學(xué)上允許的制劑，包括口服制劑和注射制劑，如片劑、顆粒劑、膠嚢劑、軟膠囊劑、注射劑、粉針劑、糖漿劑等。所述的注射用制劑，包括水針劑、輸液劑、粉針劑。上述優(yōu)選的制備方法為1)紅參提取液制備紅參用85%-95%的乙醇，回流提取4-5次，每次卜2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值6.0-7.0，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml.含生藥量0.5-1.5g,在-rC-4。C靜置12-48小時(shí)，冷藏液過(guò)濾至澄清，調(diào)pH值6.0-7.0,即得紅參提取液A;2)麥冬提取液制備麥冬用水煎煮3次，第一、二次分別l小時(shí)，第三次30分鐘，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.6-0.8倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)70%-80%,在-rC-4。C靜置12-48小時(shí)，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至生藥量的0.4-0.5倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)75%-85%，在-rC-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g，加入活性炭煮沸20-30分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得麥冬提取液B;3)五味子蒸餾液制備將五味子用水蒸氣蒸餾法蒸餾2-3次，每次1-1.5小時(shí)收集后得到五味子蒸餾液C;4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣加水煎煮2-3次，每次1-1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.4-0.5倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)70/-80%，在-1°C-4匸靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.3-0.4倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)75°/-85°/,在-rC-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g,加入活性炭煮沸20-30分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得五味子提取液D;5)A、B、C、D混勻，加入注射用水，用中空纖維膜超濾，調(diào)節(jié)pH值6.0-7.0,用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌封，滅菌，即得生脈水針劑。6)A、B、C、D、氯化鈉，混勻，加入注射用水，用中空纖維膜超濾，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5,用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌封，滅菌，即得生脈輸液。7)A、B、C、D、賦形劑，混勻，加入注射用水，用中空纖維膜超濾，并通入惰性氣體，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5,用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，干燥，即得生脈粉針劑。上述超濾的操作條件為超濾進(jìn)液口壓力為0.2-0.5Mpa,超濾出液口壓力比進(jìn)液口壓力低0.2-0.4Mpa，料液溫度為25-5(TC;超濾過(guò)程中可間歇地通入高壓惰性氣體，0.5-1小時(shí)通氣一次，每次1-2分鐘；所用中空纖維膜的分子截留量為10000-100000，優(yōu)選為10000-30000。上述方法中，通入的惰性氣體為符合注射藥用標(biāo)準(zhǔn)的氮?dú)饣蝻柡投趸細(xì)怏w，優(yōu)逸為氮?dú)?。上述制劑中所用輔料按重量份計(jì)，氯化鈉39-44份，粉針劑賦形劑39-44份；粉針劑賦形劑為符合藥用標(biāo)準(zhǔn)的甘露醇、乳糖、蔗糖等。中空纖維超濾膜是以高分子材料(聚砜或聚丙烯)釆用特殊工藝制成的非對(duì)稱半透膜，濾膜呈中空毛細(xì)管狀，管壁密布微孔，孔徑分布均勻，可有效截留給定分子量的大分子，截留范圍為5000-100000，它以壓力為驅(qū)動(dòng)力。原液在毛細(xì)管內(nèi)(內(nèi)壓式)或毛細(xì)管外(外壓式)流動(dòng)，其中溶劑或小分子物質(zhì)透過(guò)中空纖維超濾膜成為超濾液，而原液中的大分子物質(zhì)、膠體粒子、細(xì)菌等則被阻于膜表面，被循環(huán)流動(dòng)的原液帶走而成為濃縮液，實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離、濃縮和提純。作為一種膜分離技術(shù)，超濾能明顯提高中草藥注射劑的質(zhì)量，中草藥中有效成份多屬于小分子物質(zhì)，能不被超濾膜截留而濾過(guò)，大分子物質(zhì)如鞣質(zhì)、樹(shù)脂、蛋白質(zhì)、熱源等大分子物質(zhì)均能被除去。本發(fā)明采用的超濾膜孔徑在10萬(wàn)以下，經(jīng)采用中空纖維超濾膜超濾后的注射用生脈制劑，不但脫色好，而且能有效去除熱源，產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定，療效得到保證，并可符合各種注射途徑的要求。7本發(fā)明制備注射用生脈制劑時(shí)可加入符合注射要求的藥用輔料，如助溶劑、增溶劑等。以下通過(guò)試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明制備方法的有益效果本發(fā)明各組制劑溶血實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)藥物生脈注射液(巿售)本發(fā)明注射制劑(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)生理鹽水(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)實(shí)驗(yàn)方法取去纖維蛋白兔全血，加生理鹽水，搖勻，離心，傾去上清液，反復(fù)清滌至不成紅色為止，量取紅細(xì)胞，加生理鹽水稀釋成2%的混懸液，取生脈注射液、本發(fā)明各制劑各2ml(將本發(fā)明各組制劑處理與巿售生脈注射液濃度相同的溶液)，加入2《紅細(xì)胞混懸液2.5ml，補(bǔ)加生理鹽水至5ml，輕輕搖勾，置37。C恒溫水洛中，觀察3小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)溶血情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。表l各組制劑的溶血情況組別3小時(shí)4小時(shí)6小時(shí)生脈注射液本發(fā)明水針劑本發(fā)明輸液劑本發(fā)明粉針劑+_+_+注+表示溶血，-表示不溶血，+—表示有溶血現(xiàn);泉但不完全結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的各組制劑有效的克服了溶血這種不良反應(yīng)，使該制劑在臨床應(yīng)用中更安全。對(duì)大鼠急性心肌缺血保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)藥物生脈注射液(巿售)本發(fā)明注射制劑(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)生理鹽水(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物wister大白鼠50只，雄性，體重(300±20)g，分5組，每組10只。實(shí)驗(yàn)方法結(jié)扎大鼠的左冠狀動(dòng)脈前降支造成急性心肌缺血模型。各組進(jìn)行尾靜脈給藥(1.5g/kg給藥)，20%烏拉坦(lg/kg,ip)麻醉，分離頸總動(dòng)脈，并行氣管插管術(shù)，連接動(dòng)物呼吸肌。左側(cè)第四肋間開(kāi)胸，剪開(kāi)心包，分離左冠狀動(dòng)脈前降支，平右心耳作結(jié)扎部位。取出心臟稱重，-l(TC冰凍30-60min,在心臟結(jié)扎線下平行冠狀溝將心室橫切成5片，生理鹽水沖洗后，置于pH值8.O磷酸緩沖溶液配制的濃度為1%的氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中，在38。C恒溫水洛中染色lOmin,正常心肌染色成暗紅色，梗死心肌染成灰黃色，剪去心肌片被染色的部分，把來(lái)被染色的缺血梗死區(qū)心肌稱重，計(jì)算缺血范圍(缺血梗死面積占全心重的百分比，結(jié)果見(jiàn)表2)。_表2各組制劑對(duì)大鼠急性心肌缺血保護(hù)作用_心臟重(g)心臟梗死重(g)心臟梗死百分率(％)與生理鹽水組比較"P〈0.01，與陽(yáng)性對(duì)照組比較[']P〈0.05。對(duì)小鼠的促醒作用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠，昆明種身體強(qiáng)壯小白鼠50只，體重18-22g，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)藥物生脈注射液(巿售)本發(fā)明注射制劑(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)生理鹽水(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司)實(shí)驗(yàn)方法取小鼠50只，隨機(jī)分成5組，每組10只，分別尾靜脈注射給生理鹽水溶液、生脈注射液與本發(fā)明各組制劑(給藥量為1.5g生藥/kg給藥)，每天一次，連續(xù)給2天，末次給藥后15min,小鼠每20g體重腹腔注射戊巴比妥鈉生理鹽水溶液(3mg/ml)，記錄小鼠翻正反射消失至恢復(fù)的時(shí)間，計(jì)算各組均值與標(biāo)準(zhǔn)差，進(jìn)行t檢驗(yàn)，與空白對(duì)照組比較差異顯著性，結(jié)果見(jiàn)表3。表3各組制劑對(duì)小鼠促醒作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>結(jié)論通過(guò)藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明各組制劑具有更好的藥理作用。釆用本發(fā)明的制備方法制得注射用生脈制劑，經(jīng)過(guò)37-40°C，RH75±5%，放置3個(gè)月進(jìn)行穩(wěn)定性加速試驗(yàn)(見(jiàn)表4)。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從上表所列的結(jié)果顯示，本發(fā)明的注射用生脈制劑具有良好的質(zhì)量穩(wěn)定性，其在加速試驗(yàn)條件下放置3個(gè)月后，各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯變化，產(chǎn)品符合肌肉及靜脈注射要求。本發(fā)明藥物用于臨床觀察的情況1、一般資料收治門診患者共240例，其中男性128例，女性112例。年齡18-30歲28例，31-40歲32例，41-50歲44例，51-70歲16例。其中職業(yè)干部40人，教師28人，工人32人，司機(jī)12人，農(nóng)民、學(xué)生各4人。2、診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)勞累性心絞痛特征是由于運(yùn)動(dòng)或其他增加心肌需氧量的情況所誘發(fā)的短暫胸痛發(fā)作，休息或舌下含服硝酸甘油后，疼痛?？裳杆傧А７€(wěn)定型勞累性心絞痛指勞累性心絞痛發(fā)作的性質(zhì)在1~3個(gè)月內(nèi)并無(wú)改變，即每曰和每周疼痛發(fā)作次數(shù)大致相同，誘發(fā)疼痛的勞累和情緒激動(dòng)程度相同，每次發(fā)作疼痛的性質(zhì)和部位無(wú)改變，疼痛時(shí)限相仿(3-5min),用硝酸甘油后，也在相同時(shí)間內(nèi)發(fā)生療效。加拿大心臟病學(xué)會(huì)的勞累性心絞痛分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)(CCSC)I級(jí)一般日常活動(dòng)例如走路、登樓不引起心絞痛，心絞痛發(fā)生在劇烈、速度快或長(zhǎng)時(shí)間的體力活動(dòng)或運(yùn)動(dòng)時(shí)。II級(jí)日?；顒?dòng)輕度受限。心絞痛發(fā)生在快步行走、登樓、餐后行走、冷空氣中行走、逆風(fēng)行走或情緒波動(dòng)后活動(dòng)。III級(jí)日?；顒?dòng)明顯受限，心絞痛發(fā)生在平路一般速度行走時(shí)。IV級(jí)輕微活動(dòng)即可誘發(fā)心絞痛，患者不能作任何體力活動(dòng)，但休息時(shí)無(wú)心絞痛發(fā)作。(2)中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)心血瘀阻證主證胸部刺痛、絞痛，固定不移，痛引肩背或臂內(nèi)側(cè)，入夜加重次證胸悶，心悸不寧，時(shí)作時(shí)止，日久不愈舌脈唇舌紫暗，脈細(xì)澀氣陰兩虛證主證胸悶隱痛，時(shí)作時(shí)止次證心悸氣短，倦怠懶言，頭暈，失眠多夢(mèng)舌脈舌紅少苔，脈弱而細(xì)數(shù)(3)治療方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明注射用生脈制劑肌內(nèi)注射一次2-4ml，一日l(shuí)-2次。靜脈滴注一次20-60ml，用5%葡萄糖注射液250ml-500ml稀釋后使用，或遵醫(yī)囑，一日1次。連續(xù)用藥14天為一個(gè)療程，觀察時(shí)間為一個(gè)療程。(4)療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)①綜合療效判定畫(huà)顯效心絞痛等主要癥狀消失或達(dá)到顯效標(biāo)準(zhǔn)，心電圖恢復(fù)至正常心大致正常(即正常范圍心電圖)。B有效心絞痛等主要癥狀減輕或達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)，心電圖改善達(dá)到有效。B無(wú)效心絞痛等主要癥狀無(wú)改善，心電圖基本與治療前相同。畫(huà)加重心紋痛絞痛等主要癥狀與心電圖較試驗(yàn)前加重。在綜合療效判斷時(shí)，若心絞痛等主要癥狀療效與心電圖療效兩者不一致時(shí)低的結(jié)果為綜合療效。②中醫(yī)癥候療效判定標(biāo)準(zhǔn)(根據(jù)積分法判定中醫(yī)證侯總療效)療效指麵)=療前積t:f積分，0%療目u積分麗顯效原有癥狀基本消失，總積分減少>70%;B有效原有癥狀明顯減輕，總積分減少>30%,<70%;國(guó)無(wú)效原有癥狀無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，總積分減少<30%;B加重原有癥狀治療后加重，總積分較治療前增加10%以上。③主要癥狀療效判定標(biāo)準(zhǔn)輕度畫(huà)顯效癥狀消失或基本消失。謹(jǐn)有效疼痛發(fā)作次數(shù)、程度及持續(xù)時(shí)間有明顯減輕。B無(wú)效癥狀基本與治療前相同翻加重疼痛發(fā)作次數(shù)、程度及持續(xù)時(shí)間有所加重(或達(dá)到"中度"、"重度"的標(biāo)準(zhǔn))中度B顯效癥狀消失或基本消失。國(guó)有效癥狀減輕到"輕度"的標(biāo)準(zhǔn)國(guó)無(wú)效癥狀基本與治療前相同翻加重疼痛發(fā)作次數(shù)、程度及持續(xù)時(shí)間有所加重(或達(dá)到"重度"的標(biāo)準(zhǔn))重度翻顯效癥狀基本消失或減輕到"輕度"的標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)有效癥狀減輕到"中度"的標(biāo)準(zhǔn)。固無(wú)效癥狀基本與治療前相同。匿加重疼痛發(fā)作次數(shù)、程度及持續(xù)時(shí)間有所加重。④心電圖療效判定標(biāo)準(zhǔn)國(guó)顯效心電圖恢復(fù)至"大致正常"(即"正常范圍")或達(dá)到"正常心電圖"。畫(huà)有效S—T段的降低，以治療后回升O.05mv以上，但未正常水平，在主要導(dǎo)聯(lián)倒置T波改變變淺(達(dá)25y。以上者)或T波由平坦變?yōu)橹绷?，房室或室?nèi)傳導(dǎo)阻滯改善者。國(guó)無(wú)效心電圖基本與治療前相同。國(guó)加重S—T段較治療前降低0.05mV以上，在主要導(dǎo)聯(lián)倒置T波加深(達(dá)25。/。以上)或直立T波變平坦，平坦T波變倒置，以及出現(xiàn)異位心律、房室傳導(dǎo)阻滯或室內(nèi)傳導(dǎo)阻滯。(5)療效分析表5經(jīng)過(guò)一個(gè)療程治療后療效觀察<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>從上表所列的結(jié)果顯示，P<0.05,試驗(yàn)組優(yōu)于對(duì)照組，本發(fā)明的注射用生脈制劑具有良好的治療效果。質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究(1)對(duì)紅參、麥冬和五味子進(jìn)行薄層鑒別紅參的薄層鑒別方法取本品約10ml,置水洛上蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb卜Re、Rg,對(duì)照品，加乙醇制成每lml各含2mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2-4/al，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(75:20:2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105匸加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈(365皿)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。麥冬的薄層鑒別方法取本品40ml，加鹽酸3ml，置水洛中加熱l小時(shí)，放冷，加乙醚30ml振搖提取，乙醚液蒸干，殘?jiān)勇确耹ml使溶解，作為供試品溶液。另取麥冬對(duì)照藥材2g,加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約40ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-10nl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮(4:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。五味子薄層鑒別方法取本品50ml，置水洛上濃縮至約25ml，用正己烷振搖提取3次，每次10ml,分別濾過(guò)，合并濾液，蒸干，殘?jiān)勇确耹ml使溶解，作為供試品溶液。另取取五味子對(duì)照藥材2g,加水煎煮30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約40ml，用正己烷振搖提取3次，每次10ml,分別濾過(guò)，合并濾液，蒸干，殘?jiān)勇确耹ml使溶解，作為供試品溶液。再取五味子醇甲對(duì)照品，加氯仿制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液4-5pl、對(duì)照品和對(duì)照藥材溶液各l2jal，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(30~60°C)-甲酸乙酯-甲酸(14:5:l)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2)無(wú)菌試驗(yàn)依法檢查，應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XIIB)。(3)熱原取本品，依法檢查，應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XI1B)。(4)異常毒性取本品，依法檢査，按靜脈注射給藥，應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XVIIIB異常毒性檢查法)。(5)降壓物質(zhì)取本品，依法檢查,應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XVIIIB降壓物質(zhì)檢査法)。(6)過(guò)敏反應(yīng)取本品，依法檢查，應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XVIIIB過(guò)敏反應(yīng)檢查法)。(7)溶血與凝聚取本品，依法檢查，應(yīng)符合規(guī)定(《中國(guó)藥典》現(xiàn)行版附錄XVIIIB溶血與凝聚檢查法)。(8)指紋圖譜高效液相色譜法。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)同含量測(cè)定項(xiàng)下。理論板數(shù)按人參皂苷Rb,峰計(jì)算應(yīng)不低于2000000。參照物溶液的制備精密稱取人參皂苷R仏對(duì)照品適量，力P5%甲醇制成每lml含O.2tng的溶液，即得。測(cè)定法分別精密吸取參照物溶液和本品各lOjul，注入液相色譜儀，測(cè)定。供試品指紋圖譜與所附的對(duì)照指紋圖譜經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度軟件計(jì)算，相似度應(yīng)不小于0.80。含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；以乙腈-水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為203mn。理論板數(shù)按人參皂苷Re峰計(jì)算應(yīng)不低于300000;人參皂苷Rg,和人參皂苷Re的分離度不得低于1.8。對(duì)照品溶液的制備:精密稱取人參皂苷Rg"人參皂苷Re和五味子醇甲對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml分別含0.lmg、0.08mg和0.02mg的混合溶液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與本品各10^1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。本品每lml含人參皂苷Rg,不得少于90nig,含人參皂苷Re不得少于55jdg，含五味子醇甲不得少于3.5pg。本發(fā)明制備的注射用生脈制劑質(zhì)量穩(wěn)定，更好地滿足臨床需求，克服了現(xiàn)有注射液質(zhì)量不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，為中藥現(xiàn)代化制劑生產(chǎn)，提供一種更加安全有效、更加適合中藥注射劑規(guī)模大產(chǎn)生的制備方法。以下通過(guò)實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明注射用生脈制劑的制備方法。具體實(shí)施例方式所有原料均為巿售，且符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。紅參為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品經(jīng)蒸制后的干燥根及根莖；麥冬為百合科植物麥冬OphiopogonJaponicus(Thunb.)Ker-Gawl.的干燥塊根；五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果實(shí)，習(xí)稱"北五味子"。所用惰性氣體，符合藥用標(biāo)準(zhǔn)，純度99.99%;含塵量0;微生物0;熱原0。實(shí)施例1:本發(fā)明原料藥材配比重量份為紅參100g、麥冬312g、五味子156g本發(fā)明輔料配比重量份為氯化鈉390g、甘露醇390g1)紅參提取液制備將紅參用95%的乙醇，回流提取5次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值7.0，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ral含生藥量1.5g,在-1'C-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾至澄清，調(diào)pH值7.0,即得紅參提取液A;(紅參提取液A以人參皂苷Rg!計(jì)2.5mg/ml，人參皂苷Re計(jì)1.3mg/ml)2)麥冬提取液制備將麥冬用水煎煮3次，第一、二次分別l小時(shí)，第三次30分鐘，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.8倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)80%,放置，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至生藥量的0.5倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)85%，放置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量1.5g，加入重量百分比為1.0%的活性炭煮沸30分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得麥冬提取液B;3)五味子蒸餾液制備將五味子用水蒸氣蒸餾法蒸餾3次，每次1.5小時(shí)收集后得到五味子蒸餾液C;4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣加水煎煮3次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.5倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)80。/。，放置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.4倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)85%,放置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量1.5g，加入重量百分比為0.3%的活性炭煮沸30分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得五味子提取液D;5)A、B、C、D混勻，加入注射用水至1000ml,用分子截留量為100000中空纖維膜超濾l次，再用分子截留量為10000中空纖維膜超濾l次，調(diào)節(jié)pH值6.5，用0.22nm微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)饬飨鹿嘌b，滅菌，即得生脈水針劑。(以人參皂苷Rgi計(jì)0.20mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.11mg/ml)6)A、B、C、D與氯化鈉390g,混勻，加入注射用水至1000ml，用分子截留量為IOOOOO用中空纖維膜超濾I次，再用分子截留量為10000中空纖維膜超濾l次，調(diào)節(jié)pH值6.5，用0.22jum微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)饬飨鹿嘌b，滅菌，即得生脈輸液。(以人參皂苷Rg3十0.20mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.11mg/ml)7)A、B、C、D與甘露醇390g,混勻，加入注射用水至lOO(kl，用分子截留量為100000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量為10000中空纖維膜超濾1次，并間歇地通入氮?dú)猓?小時(shí)通氣一次，每次2分鐘，調(diào)節(jié)pH值6.5,用0.22微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)鈿怏w流下灌裝，干燥，即得生脈粉針劑。(以人參皂苷Rg3十0.20mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.11mg/ml)實(shí)施例2:本發(fā)明原料藥材配比重量份為紅參80g、麥冬250g、五味子80g本發(fā)明輔料配比重量份為氯化鈉420g、乳糖420g1)紅參提取液制備將紅參用85%的乙醇，回流提取4次，每次l小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值6.0,加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5g，在-1。C-4X:靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾至澄清，調(diào)pH值6.0，即得紅參提取液A;(紅參提取液A以人參皂苷Rg!計(jì)1.25mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.65mg/ml)2)麥冬提取液制備將麥冬用水煎煮3次，第一、二次分別l小時(shí)，第三次30分鐘，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.6倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)70%,在-1X:-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.4倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)75%,在-rC-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5g,加入重量百分比為0.8%的活性炭煮沸20分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得麥冬提取液B;3)五味子蒸餾液制備將五味子用水蒸氣蒸餾法蒸餾2次，每次1小時(shí)收集后得到五味子蒸餾液C;4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣加水煎煮2次，每次l小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.4倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)70%，在-1'04"C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.3倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)75%，在-rC-4匸靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5g,加入重量百分比為0.1%的活性炭煮沸20分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得五味子提取液D;5)A、B、C、D混勻，加入注射用水至1000ml,用分子截留量為50000中空纖維膜超濾l次，再用分子截留量為20000中空纖維膜超濾l次，調(diào)節(jié)pH值6.0,用0.45pm微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)鈿怏w流下灌裝，滅菌，即得生脈水針劑。(以人參皂苷Rgi計(jì)0.lOmg/ml,人參皂苷Re計(jì)0.05mg/ml)6)A、B、C、D與氯化鈉420g,混勾，加入注射用水至1000ml，用分子截留量為50000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量為20000中空纖維膜超濾1次，調(diào)節(jié)pH值6.0，用0.45pm微孔濾膜過(guò)濾，濾液在飽和二氧化碳?xì)怏w流下灌裝，滅菌，即得生脈輸液。(以人參皂苷Rg3十0.10mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.05mg/ml)7)A、B、C、D與乳糖420g,混勻，加入注射用水至1000ml,用分子截留量為50000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量為20000中空纖維膜超濾l次，并間歇地通入飽和二氧化碳?xì)怏w，30分鐘通氣一次，每次l分鐘，調(diào)節(jié)pH值6.0，用0.45微孔濾膜過(guò)濾，濾液在飽和二氧化碳?xì)怏w流下灌裝，干燥，即得生脈粉針劑。(以人參皂苷Rg,計(jì)0.10mg/ml,人參皂苷Re計(jì)0.05mg/ml)實(shí)施例3:本發(fā)明原料藥材配比重量份為紅參150g、麥冬320g、五味子160g本發(fā)明輔料配比重量份為氯化鈉440g、蔗糖440g1)紅參提取液制備將紅參用90%的乙醇，回流提取5次，每次l小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值6.5,加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量lg,在-rC-4X:靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾至澄清，調(diào)pH值6.5,即得紅參提取液A;(紅參提取液A以人參皂苷Rgl計(jì)2.55mg/ml，人參皂苷Re計(jì)1.35mg/ml)2)麥冬提取液制備將麥冬用水煎煮3次，第一、二次分別l小時(shí)，第三次30分鐘，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.7倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)80%，在-l。C-4。C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.3倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)85%,在-rC-4"C靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量lg,加入重量百分比為0.8%的活性炭煮沸30分鐘，稍冷，過(guò)濾至澄清，即得麥冬提取液B;3)五味子蒸餾液制備:將五味子用水蒸氣蒸餾法蒸餾2次，每次1.5小時(shí)收集后得到五味子蒸4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣加水煎煮2次，每次1.5小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至生藥量的0.5倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)80%,在-rc-rc靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至生藥量的0.4倍量，加入乙醇至含醇量達(dá)85%,在-rc-4X:靜置12-48小時(shí)，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加純化水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量lg,加入重量百分比為0.3%的活性炭煮沸30分鐘，稍冷,過(guò)濾至澄清，即得五味子提取液D;5)A、B、C、D混勻，加入注射用水至1000ml，用分子截留量為30000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量為10000中空纖維膜超濾1次，調(diào)節(jié)pH值6.0，用0.22jam微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)饬飨鹿嘌b，滅菌，即得生脈水針劑。(以人參皂苷Rg3十0.22mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.15mg/ml)6)A、B、C、D與氯化鈉440g,混勻，加入注射用水至1000ml,用分子截留量30000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量10000中空纖維膜超濾1次，調(diào)節(jié)pH值6.0,用0.22nm微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)鈿怏w流下灌裝，滅菌，即得生脈輸液；(以人參皂苷Rg,計(jì)0.22mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.15mg/ml)7)A、B、C、D與蔗糖440g，混勻，加入注射用水至1000ml，用分子截留量30000中空纖維膜超濾1次，再用分子截留量10000中空纖維膜超濾1次，并間歇地通入氮?dú)猓?0分鐘通氣1次，每次1分鐘，，調(diào)節(jié)pH值6.0，用0.22微孔濾膜過(guò)濾，濾液在氮?dú)鈿怏w流下灌裝，干燥，即得生脈粉針劑。(以人參皂苷Rgi十0.22mg/ml，人參皂苷Re計(jì)0.15mg/ml)19權(quán)利要求1、一種注射用生脈制劑，按照重量組分計(jì)算它包括紅參1-15份、麥冬3-25份、五味子1-16份制成，其特征在于制劑中以人參皂苷Rg1計(jì)不少于0.1mg/ml，人參皂苷Re計(jì)不少于0.05mg/ml，包括下列制備方法1)紅參提取液制備紅參乙醇回流提取，回流液過(guò)濾，合并濾液回收乙醇至盡，調(diào)pH值6.0-7.0，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g，低溫靜置，過(guò)濾，調(diào)pH值6.0-7.0，即得紅參提取液A；2)麥冬提取液制備麥冬水提，合并水提液，過(guò)濾，減壓濃縮后，加入乙醇進(jìn)行醇沉，低溫靜置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g，過(guò)濾，即得麥冬提取液B；3)五味子蒸餾液制備五味子水蒸氣蒸餾，收集，得到五味子蒸餾液C；4)五味子提取液制備將步驟3)得到的藥渣水提，合并水提液，過(guò)濾，減壓濃縮后，加入乙醇進(jìn)行醇沉，低溫靜置，過(guò)濾，回收乙醇至盡，加水調(diào)節(jié)藥液量使每ml含生藥量0.5-1.5g，過(guò)濾，即得五味子提取液D；5)A、B、C、D混勻，超濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，按照常規(guī)方法制成不同注射制劑。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用生脈制劑，其特征在于紅參提取液A中以人參皂苷Rg3十不少于1.25mg/ml，人參皂苷Re計(jì)不少于0.65mg/ml。3、根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用生脈制劑，其特征在于所用的超濾膜為中空纖維膜，分子截留量為10000-100000。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的注射用生脈制劑，其特征在于所用中空纖維膜分子截留量為10000-30000。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用生脈制劑，其特征在于惰性氣體為氮?dú)饣蝻柡投趸細(xì)怏w。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的注射用生脈制劑，其特征在于惰性氣體為氮今。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用生脈制劑，其特征在于A、B、C、D混勻，加入注射用水，超濾，調(diào)節(jié)pH值6.0-7.0,用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，滅菌，即得生脈水針劑。8、根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用生脈制劑，其特征在于A、B、C、D、氯化鈉，混勻，加入注射用水，超濾，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5,用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，滅菌，即得生脈輸液。9、根據(jù)權(quán)利要求l所述的注射用生脈制劑，其特征在于A、B、C、D、賦形劑，混勻，加入注射用水，超濾，并通入惰性氣體，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5，用微孔濾膜過(guò)濾，濾液在惰性氣體流下灌裝，干燥，即得生脈粉針劑。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的注射用生脈制劑，其特征在于超濾過(guò)程中間歇地通入惰性氣體，0.5-1小時(shí)通氣一次，每次1-2分鐘。全文摘要本發(fā)明涉及一種注射用生脈制劑及其制備方法，它由紅參、麥冬、五味子組成，主要用于氣陰兩虧、脈虛欲脫的心悸、氣短、四肢厥冷、汗出、脈欲絕及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克的治療；本發(fā)明制劑質(zhì)量更加穩(wěn)定，制備工藝操作簡(jiǎn)便、安全可靠，為中藥注射制劑規(guī)模大生產(chǎn)提供合理、實(shí)際可行的制備方法。文檔編號(hào)A61K36/88GK101623437SQ20091018471公開(kāi)日2010年1月13日申請(qǐng)日期2009年8月4日優(yōu)先權(quán)日2009年8月4日發(fā)明者周九蘭,唐仁茂,徐柏頤,戴德玲,閔文林申請(qǐng)人:江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司