專(zhuān)利名稱(chēng)：低聚物-三環(huán)共軛物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明包括(除其他之外)化學(xué)改性的三環(huán)化合物，它們具有某些優(yōu)于缺少化學(xué) 改性的三環(huán)化合物的優(yōu)點(diǎn)。在此所描述的化學(xué)改性的三環(huán)化合物涉及和/或具有在藥物發(fā) 現(xiàn)、藥物療法、生理學(xué)、有機(jī)化學(xué)以及聚合物化學(xué)領(lǐng)域(除其他之外)的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
臨床抑郁癥(還稱(chēng)為嚴(yán)重抑郁性紊亂或單相性精神障礙)是一種通常的精神性障 礙，其特征是一種持續(xù)性情緒低落、對(duì)慣常活動(dòng)喪失興趣以及減少的體驗(yàn)快樂(lè)的能力。盡管術(shù)語(yǔ)“抑郁”通常用來(lái)描述當(dāng)一個(gè)人感到“心情沮喪”時(shí)的一種暫時(shí)性的情緒 低落，但臨床抑郁癥卻是一種嚴(yán)重的疾病，它涉及身體、情緒以及思想，并且不能簡(jiǎn)單地在 意愿上或愿望性地消失。它經(jīng)常是一種致殘的疾病，該疾病影響一個(gè)人的工作、家庭以及學(xué) 校生活，睡眠以及飲食習(xí)慣，總體健康狀況以及享受生活的能力。臨床抑郁癥的病程廣泛地 不同抑郁可以是一生中一次的事件或有多次復(fù)發(fā)，它可以逐漸地或突然地發(fā)生，并且持續(xù) 幾個(gè)月或者是一種一生的障礙。患有抑郁癥是自殺的一個(gè)主要的危險(xiǎn)度因素，此外，患有抑 郁癥的人比其他原因遭受更高的死亡率。臨床抑郁癥通常通過(guò)心理療法、抗抑郁藥或兩者 的組合來(lái)進(jìn)行處理。神經(jīng)病變是一種或多種末梢神經(jīng)的一種疾病。神經(jīng)損傷的四種主要形式是多發(fā)性 神經(jīng)病、自主神經(jīng)病變、單一神經(jīng)病變、以及多發(fā)性單神經(jīng)炎。一種更常見(jiàn)的形式是末稍多 發(fā)性神經(jīng)病變，它主要影響腳和腿。還存在其他不太常見(jiàn)的神經(jīng)病變形式，例如腸的神經(jīng)病變。除了糖尿病(即，糖尿病性神經(jīng)病變)之外，神經(jīng)病變的常見(jiàn)原因是帶狀皰疹感 染、HIV-AIDS、毒素、酒精中毒、慢性創(chuàng)傷(例如重復(fù)性運(yùn)動(dòng)紊亂)或急性創(chuàng)傷(包括手術(shù))、 神經(jīng)毒性以及自身免疫病癥，例如乳糜瀉。神經(jīng)性疼痛在癌癥中作為一種癌癥在外周神經(jīng) (例如受腫瘤壓縮)的直接結(jié)果、作為許多化療藥物的副作用、作為電擊傷的結(jié)果是常見(jiàn) 的。在許多情況下，神經(jīng)病變是“自發(fā)性的”，意味著未找到原因。神經(jīng)性的疼痛通常理解為一種穩(wěn)定的灼燒和/或“針扎和針刺”和/或“電休克” 的感覺(jué)和/或撩癢。差別是由于以下事實(shí)“普通”的疼痛僅僅刺激疼痛神經(jīng)，而神經(jīng)病變 經(jīng)常導(dǎo)致在同一區(qū)域的疼痛以及非疼痛(接觸、溫暖、冷卻)感覺(jué)神經(jīng)的刺激，從而產(chǎn)生了 脊髓以及腦不會(huì)正常預(yù)期接收的信號(hào)。神經(jīng)性疼痛可能難以治療。一個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)的系統(tǒng)性評(píng)論發(fā)現(xiàn)，最好的治療物 是三環(huán)化合物類(lèi)、抗驚厥藥、以及辣椒辣素。三環(huán)的抗抑郁藥用在眾多應(yīng)用中，主要是指用 于治療臨床抑郁癥、神經(jīng)病性疼痛、夜尿癥以及ADHD，但是它們還成功地用于頭痛(包括偏頭痛)、焦慮、失眠、戒煙、神經(jīng)性貪食癥、過(guò)敏性腸綜合癥、昏睡病、病理性哭笑、持續(xù)性打 嗝、間質(zhì)性膀胱炎以及食肉毒魚(yú)類(lèi)中毒以及作為精神分裂癥的一種輔助劑?？傮w上認(rèn)為三環(huán)的抗抑郁藥通過(guò)抑制神經(jīng)遞質(zhì)、去甲腎上腺素、多巴胺或5-羥色 胺的再吸收或通過(guò)神經(jīng)細(xì)胞起作用。三環(huán)化合物還對(duì)毒蕈堿的以及組胺HI至H4受體具有 不同程度的親和性。雖然去甲腎上腺素和多巴胺總體上認(rèn)為是刺激性的神經(jīng)遞質(zhì)、三環(huán)的 抗抑郁藥還增加了對(duì)HI組胺的作用并且因此大多數(shù)具有鎮(zhèn)靜作用并且還可以作為抗組胺 的化合物有用。抗抑郁藥以及抗驚厥藥的應(yīng)用一直受對(duì)于中央神經(jīng)系統(tǒng)潛在的不利作用所影響， 例如惡夢(mèng)、困倦、視力模糊、胃腸蠕動(dòng)和分泌的減少、排尿困難、體溫過(guò)高以及口干。作為結(jié) 果，若與它們的使用有關(guān)的這些和/或其他副作用可以減少的話(huà)，則使用三環(huán)化合物的藥 物療法將得以改進(jìn)。因此，對(duì)于發(fā)展新穎的三環(huán)的化合物仍存在著一個(gè)很大的未滿(mǎn)足的需要。本發(fā)明尋求著手解決本領(lǐng)域中的這些以及其他需要。

發(fā)明內(nèi)容
在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基。本發(fā)明的示例性的化合物包括具有以下結(jié)構(gòu)的那些 其中D 是 C 或 N;Y 是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-、-CH2CH2-、_CH = CH_，-CH2_S_、CH2_0_、CH2-nh-、-s-ch2-、-o-ch2、-nh-ch2、-hn-、-o-、-n = c-、-c = N-、和-s-，它們是未取代的或任選 地取代的；X是一個(gè)間隔部分；并且P0LY是一種水溶性、非肽的低聚物?！叭h(huán)殘基”是具有一種三環(huán)化合物的結(jié)構(gòu)的一種化合物，它通過(guò)一個(gè)或多個(gè)鍵的 存在進(jìn)行改變，這些鍵起到附接(直接地或間接地)一個(gè)或多個(gè)水溶性、非肽的低聚物的作 用。示例性的三環(huán)化合物具有包括在此定義為化學(xué)式I的結(jié)構(gòu)中的至少之一的一個(gè)結(jié)構(gòu)
化學(xué)式I其中D和R1作為整體是選自下組，其構(gòu)成為-HC-R^-C = R1JP -HN-R1 ；R1是選自下組，其構(gòu)成為烷基、氨基、酰基氨基、酰基、酰氨基、芳氧基、烷氨基、具 有約2到4個(gè)(包括端值)碳原子的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷基、N-(低級(jí)烷基)-2-哌 啶基、嗎啉基、1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、4-(羥基-低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、和 4-(甲氧基-低級(jí)烷基)-1_哌嗪基，它們是未取代的或任選地取代的；Y 是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-, -CH2CH2-, -CH = CH-, -CH2-S-, CH2-O-, CH2-NH-、-S-CH2-、-O-CH2、-NH-CH2、-HN-、-0-、-N = C_、_C = N-、和-S-，它們是未取代的或任選 地取代的；并且R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9中的一個(gè)或多個(gè)各自獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為零、氫、
鹵素、氰基、羥基、羧基、酮基、硫酮基、氨基、?；被?、?；Ⅴ０被?、芳氧基、烷基、鏈烯基、 炔基、雜烷基、商烷基、烷氧基、二氧基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、以及雜環(huán)烷基，它們是未取代 的或任選地取代的。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了包括一種化合物的一種組合物，該化 合物包括一個(gè)三環(huán)殘基，以及任選地一種藥學(xué)上可接受的賦形劑，該殘基通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的 或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了包括一種化合物的一種劑型，該化合 物包括一個(gè)三環(huán)殘基，該殘基通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、 非肽的低聚物上，其中該化合物是以一種劑型存在。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種方法，該方法包括將一個(gè)水溶性、 非肽的低聚物共價(jià)地附接到一種三環(huán)的化合物上。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種方法，該方法包括給予一種化合 物，該化合物包括通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚 物上的一個(gè)三環(huán)的殘基。當(dāng)結(jié)合以下詳細(xì)描述來(lái)閱讀時(shí)，本發(fā)明的其他目的、方面、實(shí)施方案以及特征對(duì)于 本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將是非常明顯的。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1示出了卡馬西平以及其共軛物對(duì)鈉電流在0. IHz (A)對(duì)比在3Hz⑶下在分離 的人體心房肌細(xì)胞中的阻斷作用。數(shù)據(jù)是平均士SEM。圖2示出了卡馬西平以及其共軛物對(duì)鈉電流在0. IHz (A)對(duì)比在3Hz⑶下在分離 的大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中的阻斷作用。數(shù)據(jù)是平均士SEM。圖3示出了對(duì)于卡馬西平以及其共軛物以100 μ M在0. IHz (A)和3Hz (B)下在分離的心臟以及神經(jīng)元細(xì)胞中的鈉電流阻斷的平均百分比(士SEM)。圖4示出了地昔帕明及其共軛物對(duì)大鼠前腦薄膜中的去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白特 異性結(jié)&的平均(士SEM)百分比。圖5示出了試驗(yàn)化合物對(duì)抗標(biāo)準(zhǔn)的鎮(zhèn)痛劑嗎啡的鎮(zhèn)痛活性。發(fā)明詳細(xì)描述如在本說(shuō)明書(shū)中所使用的，單數(shù)形式“一個(gè)”、“一種”以及“該”除非另外在上下文 中清楚地說(shuō)明，否則包括復(fù)數(shù)個(gè)指代物。在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說(shuō)明并且提出權(quán)利要求時(shí)，以下術(shù)語(yǔ)根據(jù)以下描述的定義使用?！八苄浴⒎请牡牡途畚铩笔侵敢环N低聚物，它在水中在室溫下是至少35% (按重 量計(jì))可溶的，優(yōu)選大于70% (按重量計(jì))并且更優(yōu)選大于95% (按重量計(jì))是可溶的。 典型地，一種“水溶性的”低聚物的未過(guò)濾的水性制劑透射光的量是過(guò)濾后同一溶液透射量 的至少75%、更優(yōu)選至少95%。然而最優(yōu)選地，水溶性的低聚物在水中是至少95% (按重 量計(jì))可溶的或在水中時(shí)完全可溶的。對(duì)于“非肽的”，當(dāng)一種低聚物具有小于35% (按重 量計(jì))的氨基酸殘基時(shí)，則它是非肽的。術(shù)語(yǔ)“單體”、“單體亞單元”以及“單體單元”在此互換地使用并且是指一種聚合物 或低聚物的基本結(jié)構(gòu)單元的一種。在一種均低聚物的情況下，一個(gè)單一的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元形 成了低聚物。在一種共低聚物的情況下，兩種或多種結(jié)構(gòu)單元進(jìn)行重復(fù)(以一種模式或者 是隨機(jī)地)以形成低聚物。與本發(fā)明相關(guān)而使用的優(yōu)選的低聚物是均-低聚物。該水溶性、 非肽的低聚物典型地包括一種或多種連續(xù)相連的單體以形成一個(gè)單體鏈。該低聚物可以自 一種單一的單體類(lèi)型(即，是均聚_低聚物)或兩種或三種單體類(lèi)型(即，共-低聚物)形 成?！暗途畚铩笔蔷哂袕募s1至約30個(gè)單體的分子。用于本發(fā)明的具體的低聚物包括 在以下更詳細(xì)說(shuō)明的具有多種幾何形狀(例如直鏈、支鏈或叉狀的)的那些。如在此所使用的“PEG”或“聚乙二醇”意思是包括任何水溶性的聚(氧化乙烯)。 除非另外說(shuō)明，一種“PEG低聚物”一種低聚乙二醇是一種其中基本上所有(優(yōu)選所有)單體 的亞單元是氧化乙烯亞單元的物質(zhì)，盡管該低聚物可以包括明顯的封端部分或官能團(tuán)(例 如用于共軛)。用于本發(fā)明的PEG低聚物包括以下兩種結(jié)構(gòu)中的一種，“-(CH2CH20)n-”或 “-(O^O^C^Ma^CHf”，這取決于這個(gè)或這些末端氧是否被取代，例如在合成轉(zhuǎn)化過(guò)程中。 如以上所說(shuō)明的，對(duì)于PEG低聚物，變量“n”在從約1至30的范圍，優(yōu)選從約2至約30，并 且這些端基以及整個(gè)PEG的結(jié)構(gòu)可以變化。當(dāng)PEG進(jìn)一步包括一個(gè)官能團(tuán)A用于連接至例 如一種小分子藥物時(shí)，該官能團(tuán)當(dāng)共價(jià)地附接到一種PEG低聚物上時(shí)不會(huì)導(dǎo)致形成(i) 一 個(gè)氧_氧鍵(-0-0-，一種過(guò)氧化物連接)或(ii) 一個(gè)氮-氧鍵(N-0、0-N)。在此使用的“封端的”以及“末端帽化的”可以互換使用來(lái)指具有一個(gè)封端的部分 的一種聚合物的末端或端點(diǎn)。典型地，盡管不是必須的，該封端部分包括一個(gè)羥基或C^ 烷氧基，更優(yōu)選一個(gè)Ci,烷氧基，并且仍然更優(yōu)選一個(gè)Ci_5烷氧基。因此，封端部分的例 子包括烷氧基(例如，甲氧基、乙氧基以及芐氧基)，連同芳基、雜芳基、環(huán)、雜環(huán)，以及類(lèi)似 物。應(yīng)記住的是，在聚合物中該封端的部分可以包括一或多個(gè)末端單體的原子[例如在 CH3O (CH2CH2O)n-和CH3 (OCH2CH2)n-中的封端部分“甲氧基”]。此外，可以設(shè)想到以上物質(zhì)各 自的飽和、不飽和、取代以及未取代的形式。此外，該封端基團(tuán)還可以是一種硅烷。該封端基團(tuán)還可以有利地包括一個(gè)可檢出的標(biāo)記物。當(dāng)該聚合物具有包括一個(gè)可檢出標(biāo)記物的封 端基團(tuán)時(shí)，該聚合物所偶聯(lián)至的聚合物和/或部分(例如活化劑)的量或位置可以使用合 適的檢測(cè)器來(lái)確定。此類(lèi)標(biāo)記物包括，但不限于熒光增光劑、化學(xué)發(fā)光劑、在酶標(biāo)記中所使 用的部分、比色物(例如染料)、金屬離子、放射性部分、金顆粒、量子點(diǎn)以及類(lèi)似物。合適的 檢測(cè)器包括光度計(jì)、膜、分光計(jì)以及類(lèi)似物。該封端基團(tuán)還可以有利地包括一種磷脂。當(dāng)該 聚合物具有一個(gè)包括一種磷脂的封端的基團(tuán)時(shí)，賦予了該聚合物以及產(chǎn)生的共軛物多種獨(dú) 特的特性。示例性的磷脂包括但不限于選自稱(chēng)為磷脂酰膽堿的磷脂類(lèi)別中的那些。具體的 磷脂包括但不限于選自下組的那些，該組的構(gòu)成為二月桂酰磷脂酰膽堿、二油烯基磷脂酰 膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、山崳酰基磷脂酰膽堿、花生酰基磷脂酰 膽堿以及卵磷脂。在此使用術(shù)語(yǔ)“靶向部分”來(lái)指幫助本發(fā)明的共軛物定位于一個(gè)靶向區(qū)域的一種 分子結(jié)構(gòu)，例如幫助進(jìn)入、滲透或穿透一個(gè)細(xì)胞或結(jié)合一個(gè)受體。優(yōu)選地，該靶向部分包括 維生素、輔因子、抗體、抗原、受體、DNA、RNA、唾液酸化Lewis X抗原、透明質(zhì)酸、糖類(lèi)、細(xì)胞專(zhuān) 一性凝集素、類(lèi)固醇或類(lèi)固醇衍生物、RGD肽、細(xì)胞滲透或細(xì)胞靶向部分、細(xì)胞表面受體的配 體、血清組分、或針對(duì)不同細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外受體的組合的分子。該靶向部分還可以包括一種 類(lèi)脂或一種磷脂。示例性的磷脂包括但不限于磷脂酰膽堿類(lèi)、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、 磷脂酰甘油以及磷脂酰乙醇胺。這些類(lèi)脂可以處于微膠粒或脂質(zhì)體以及類(lèi)似物。該靶向部 分可以包括一個(gè)可檢出的標(biāo)記物或替代地一個(gè)可檢出的標(biāo)記物可以作為一個(gè)靶向部分起 作用。當(dāng)該共軛物具有包括一個(gè)可檢出標(biāo)記物的靶向基團(tuán)時(shí)，該聚合物所偶聯(lián)的聚合物和/ 或部分(例如活化劑)的量和/或分布/位置可以使用合適的檢測(cè)器來(lái)確定。此類(lèi)標(biāo)記物 包括，但不限于熒光增光劑、化學(xué)發(fā)光劑、在酶標(biāo)記中所使用的部分、比色物(例如染料)、 金屬離子、放射性部分、金顆粒、量子點(diǎn)以及類(lèi)似物。提到一種低聚物的幾何形狀或總體結(jié)構(gòu)，“支化的”是指從一個(gè)分枝點(diǎn)上具有兩個(gè) 或多個(gè)聚合物“臂”的低聚物。對(duì)于一種低聚物的幾何形狀或總體結(jié)構(gòu)“叉狀的”是指具有兩個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)從 一個(gè)分枝點(diǎn)上延伸(典型地通過(guò)一個(gè)或多個(gè)原子)的低聚物。一個(gè)“分支點(diǎn)”是指包括一個(gè)或多個(gè)原子的一個(gè)分叉點(diǎn)，在該點(diǎn)上一種低聚物從一 個(gè)直鏈結(jié)構(gòu)上分枝或分叉成一個(gè)或多個(gè)另外的臂。術(shù)語(yǔ)“反應(yīng)性的”或“活化的”是指一種官能團(tuán)，它容易地或以一個(gè)實(shí)際的速度在 常規(guī)的有機(jī)合成的條件下進(jìn)行反應(yīng)。這與不反應(yīng)或要求強(qiáng)催化劑或不實(shí)際的反應(yīng)條件下而 進(jìn)行反應(yīng)(即，“不反應(yīng)的”或“惰性的”基團(tuán))的那些基團(tuán)不同。對(duì)于在一個(gè)反應(yīng)混合物中存在的一種官能團(tuán)，“不迅速反應(yīng)的”表示該基團(tuán)在對(duì)于 在該反應(yīng)混合物中產(chǎn)生一種所希望的反應(yīng)有效的條件下仍然是大部分完整的?！氨Ｗo(hù)基”是防止或阻止分子中一個(gè)具體的化學(xué)反應(yīng)性官能團(tuán)在某一反應(yīng)條件下 的反應(yīng)的一個(gè)部分。該保護(hù)基可以取決于受保護(hù)的化學(xué)反應(yīng)基團(tuán)的類(lèi)型連同有待使用的反 應(yīng)條件以及在分子中存在的另外的反應(yīng)性的或保護(hù)性基團(tuán)而改變?？梢允鼙Ｗo(hù)的官能團(tuán)包 括，作為舉例羧酸基團(tuán)、氨基基團(tuán)、羥基基團(tuán)、硫醇基團(tuán)、羰基基團(tuán)以及類(lèi)似物。針對(duì)羧酸的 代表性保護(hù)基包括酯類(lèi)(例如一種對(duì)甲氧基芐基酯)、酰胺類(lèi)以及酰胼類(lèi)；對(duì)于氨基基團(tuán)是 氨基甲酸酯(例如叔丁氧基羰基)以及酰胺；對(duì)于羥基基團(tuán)是醚類(lèi)以及酯類(lèi)；對(duì)于硫醇基團(tuán)是硫醚類(lèi)以及硫酯類(lèi)；對(duì)于羰基基團(tuán)是縮醛類(lèi)以及縮酮類(lèi)；以及類(lèi)似物。此類(lèi)保護(hù)基對(duì) 于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的并且描述于，例如T. W. Greene和G. M. ffuts,Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York，1999 中，并且通過(guò)引用結(jié)合在 此。處于“保護(hù)形式”的官能團(tuán)是指帶有一個(gè)保護(hù)基團(tuán)的一個(gè)官能團(tuán)。如在此使用的， 術(shù)語(yǔ)“官能團(tuán)”或它們的任何同義詞包括它們的受保護(hù)的形式。一個(gè)“生理學(xué)上可切割的”或“可水解的”或“可降解的”鍵是與水在生理學(xué)條件下 進(jìn)行反應(yīng)(即，被水解)的一個(gè)相對(duì)不穩(wěn)定的鍵。一個(gè)鍵在水中水解的傾向可以不僅取決 于連接兩個(gè)中心原子的連接的一般類(lèi)型而且還取決于附接到這些中心原子上的取代基。適 當(dāng)?shù)乃獠环€(wěn)定的或弱的連接包括但不限于羧酸酯、磷酸酯、酸酐、縮醛類(lèi)、縮酮類(lèi)、酰氧基 烷基醚、亞胺類(lèi)、原酸酯類(lèi)、肽類(lèi)、寡核苷酸類(lèi)、硫代酯類(lèi)、硫醚類(lèi)以及碳酸酯類(lèi)?！獋€(gè)“酶可降解的連接”是指經(jīng)受一種或多種酶降解的一個(gè)連接。一個(gè)“穩(wěn)定的”連接或鍵是指在水中基本上穩(wěn)定的一個(gè)鍵，典型地是一個(gè)共價(jià)鍵， 也就是說(shuō)，經(jīng)一個(gè)延長(zhǎng)的時(shí)間段在生理學(xué)條件下不會(huì)經(jīng)歷任何可觀程度的水解。水解穩(wěn)定 的連接的實(shí)例包括但不限于以下各項(xiàng)碳-碳鍵(例如在一個(gè)脂肪鏈中)、醚類(lèi)、酰胺類(lèi)、氨 基甲酸酯類(lèi)、胺類(lèi)以及類(lèi)似物?？偟膩?lái)說(shuō)，一個(gè)穩(wěn)定的連接是在生理學(xué)條件下呈現(xiàn)出小于約
至2% /天的水解速率的一種連接。代表性的化學(xué)鍵的水解速率可以在大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)的化 學(xué)教科書(shū)中找到?！盎旧稀被颉皩?shí)質(zhì)上”意思是幾乎全部地或完全地，例如95%或更高，更優(yōu)選97% 或更高，仍然更優(yōu)選98 %或更高，甚至更優(yōu)選99 %或更高，還仍然更優(yōu)選99. 9 %或更高，其 中99. 99%或更高是所給出的一些量中最優(yōu)選的?！皢畏稚ⅰ笔侵敢环N低聚物組合物，其中基本上該組合物中所有的低聚物都具有良 好定義的單一的分子量以及定義的單體數(shù)目，如由色譜法或質(zhì)譜法所確定的。單分散低聚 物組合物在某種意義上是純的，即，基本上具有一個(gè)單個(gè)的或可定義的數(shù)目(作為一個(gè)整 數(shù))的單體而不是一個(gè)大的分布。一種單分散低聚物組合物具有1.0005或更少的一個(gè)MW/ Mn值，并且更優(yōu)選1. 0000的MW/Mn。引申開(kāi)來(lái)，包括單分散共軛物的一個(gè)組合物是指在組合 物的所有共軛物中基本上所有低聚物都具有一個(gè)單一的并且可定義的數(shù)目(作為一個(gè)整 數(shù))的單體而不是一個(gè)大的分布并且具有的MW/Mn為1.0005并且更優(yōu)選MW/Mn為1.0000， (如果該低聚物沒(méi)有附接到從一種小分子藥物中衍生的部分)。然而包括單分散共軛物的 一種組合物可以包括一種或多種不共軛的物質(zhì)，例如溶劑、試劑、賦形劑等等。對(duì)于一種低聚物組合物，“雙峰的”是指一種低聚物組合物，其中該組合物中基本 上所有的低聚物都具有一種或兩種可定義的并且不同數(shù)目(作為整數(shù))的單體而不是一個(gè) 大的分布，并且其分子量分布當(dāng)作為對(duì)于分子量的分?jǐn)?shù)作圖時(shí)，顯示出兩個(gè)分開(kāi)的可辨識(shí) 的峰。優(yōu)選地，對(duì)于在此描述的一種雙峰低聚物組合物，每個(gè)峰總體上是對(duì)于其平均值對(duì)稱(chēng) 的，盡管這兩個(gè)峰的大小可以不同。理想地，在雙峰分布中每個(gè)峰的多分散性指數(shù)Mw/Mn是 1.01或更小，更優(yōu)選1. 001或更小，并且甚至更優(yōu)選1. 0005或更小，并且最優(yōu)選MW/Mn值為 1. 0000。引申開(kāi)來(lái)，包括雙峰共軛物的一個(gè)組合物的意思是基本上在組合物中的所有共軛 物的所有低聚物具有一個(gè)或兩個(gè)可定義并且不同數(shù)目(作為一個(gè)整數(shù))的單體而不是一個(gè) 大的分布并且具有1. 01或更小的MW/Mn值并且更優(yōu)選1. 001或更小的MW/Mn，并且甚至更優(yōu)選1. 0005或更少，并且最優(yōu)選1. 0000的MW/Mn值(如果該低聚物未被附接到衍生自一 種小分子藥物的部分)。然而包括雙峰共軛物的一種組合物可以包括一種或多種不共軛的 物質(zhì)，例如溶劑、試劑、賦形劑等等。一種“三環(huán)化合物”是指一種有機(jī)、無(wú)機(jī)或有機(jī)金屬化合物，典型 地具有小于約 1000道爾頓的一個(gè)分子量并且具有如在此描述的三環(huán)治療劑的某種程度的活性。一種“生物膜”是由作為對(duì)至少某些外來(lái)實(shí)體或另外地所不希望的材料的屏障起 作用的細(xì)胞或組織組成的任何膜。如在此使用的，一種“雙峰膜”包括與生理學(xué)保護(hù)屏障相 連的那些膜，這些屏障包括例如血腦屏障(BBB)、血-腦脊液屏障、血-胎盤(pán)屏障、血-乳 屏障、血-睪丸屏障、以及粘膜屏障(包括陰道粘膜、尿道粘膜、肛門(mén)粘膜、口腔粘膜、舌下粘 膜以及直腸粘膜)。_除非上下文中另外清楚地表述，否則術(shù)語(yǔ)“生物膜”不包括與中央胃 腸道(例如胃以及小腸)相連的那些膜。一種“生物膜跨過(guò)速度”提供了 一種化合物跨過(guò)一種生物膜(例如血腦屏障 (BBB))的能力的一個(gè)量度?？梢允褂枚喾N方法來(lái)評(píng)定一種分子跨過(guò)任何給定的生物膜的 運(yùn)輸。評(píng)定與任何給定的生物屏障相關(guān)的生物膜跨過(guò)速度的方法(例如，血-腦脊液屏障、 血_胎盤(pán)屏障、血_乳屏障、腸內(nèi)屏障以及類(lèi)似物)描述于此和/或在相關(guān)文獻(xiàn)中和/或可 以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員確定。對(duì)于本發(fā)明，一種“降低的代謝速度”是指一種水溶性的低聚物小分子藥物共軛物 的代謝速度相對(duì)于沒(méi)有附接到水溶性低聚物(即，該小分子藥物本身)或一個(gè)參比標(biāo)準(zhǔn)材 料上的小分子藥物的代謝速度的可測(cè)量的降低。在“降低的首過(guò)代謝速度”的具體情況下， 要求同樣的“降低的代謝速度”，除小分子藥物(或參比標(biāo)準(zhǔn)材料)以及對(duì)應(yīng)的共軛物是可 口服之外。口服給藥的藥物通過(guò)胃腸道吸收到門(mén)脈循環(huán)中并且可以在達(dá)到大循環(huán)之前通過(guò) 肝臟。因?yàn)楦闻K是藥物代謝或生物轉(zhuǎn)化的主要位置，一個(gè)基本量的藥物可以在其達(dá)到大循 環(huán)之前進(jìn)行代謝。首過(guò)代謝的程度，以及因此它們的任何降低，可以通過(guò)多種不同的方法進(jìn) 行測(cè)量。例如，動(dòng)物血液樣品可以按定時(shí)的間隔來(lái)收集并且通過(guò)液相色譜法/質(zhì)譜法對(duì)血 漿或血清分析代謝物水平。其他用于測(cè)量與首過(guò)代謝相關(guān)的“降低的代謝速度”的技術(shù)以 及其他代謝過(guò)程是已知的，描述在此和/或相關(guān)的文獻(xiàn)中，和/或可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人 員測(cè)定。優(yōu)選地，本發(fā)明的一種共軛物可以提供代謝降低的降低的速度，該速率滿(mǎn)足以下以 下值中的至少一個(gè)至少約30% ；至少約40% ；至少約50% ；至少約60% ；至少約70% ；至 少約80%;以及至少約90%?！翱诜锟衫玫摹币环N化合物(例如一種小分子藥物或它 的共軛物)是優(yōu)選地當(dāng)口服時(shí)具有大于25%并且更優(yōu)選大于70%的生物利用率的一種化 合物，其中一種化合物的生物利用率是以未代謝的形式達(dá)到大循環(huán)的所服用藥物的分?jǐn)?shù)?！巴榛笔侵冈陂L(zhǎng)度上具有范圍從約1至20個(gè)原子的烴鏈。此類(lèi)烴鏈優(yōu)選但并非 必須是飽和的并且可以是支鏈的或直鏈的，盡管典型地直鏈?zhǔn)莾?yōu)選的。示例性的烷基基團(tuán) 包括甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、2-甲基丁基、2-乙基丙基、3-甲基戊基以及類(lèi)似物。如在 此使用的，當(dāng)涉及三個(gè)或多個(gè)碳原子時(shí)，“烷基”包括環(huán)烷基?！暗图?jí)烷基”是指包括從1至6個(gè)碳原子的烷基基團(tuán)，并且可以是直鏈或支鏈的，如 以下例子甲基、乙基、正丁基、異丁基、叔丁基?！胺歉蓴_性取代基”是當(dāng)在分子中存在時(shí)，與其他包含在該分子中的官能團(tuán)是典型 地非反應(yīng)性的那些基團(tuán)。
“烷氧基”是指一個(gè)-0-R基團(tuán)，其中R是烷基或取代的烷基，優(yōu)選烷基(例 如甲氧基、乙氧基、丙氧基等)，優(yōu)選Q-Q烷基?！八帉W(xué)上可接受的賦形劑，，或“藥學(xué)上可接受的載體，，是指可以在本發(fā)明的組合物 中包括而不會(huì)引起對(duì)患者的顯著不利的毒性作用的組分。術(shù)語(yǔ)“芳基”是指具有高達(dá)14個(gè)碳原子的芳香族基團(tuán)。芳基包括苯基、萘基、聯(lián)苯 基、菲基、萘基以及類(lèi)似物?！叭〈谋交币约啊叭〈姆蓟北硎疽粋€(gè)苯基基團(tuán)以及芳基 基團(tuán)，它們相應(yīng)地用一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或五個(gè)((例如，1-2，1-3或1-4)取代基來(lái)取代， 這些取代基是選自鹵素(F、Cl、Br、I)、羥基、氰基、硝基、烷基(例如(V6烷基)、烷氧基(例 如Cm烷氧基)、芐氧基、羧基、芳基等等。對(duì)化學(xué)部分(chemical moieties)進(jìn)行了定義并且貫穿全文主要是指單價(jià)的化學(xué) 部分(例如烷基、芳基等)。盡管如此，此類(lèi)術(shù)語(yǔ)在本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員清楚的適當(dāng)?shù)慕Y(jié) 構(gòu)情形下還用來(lái)傳達(dá)對(duì)應(yīng)的多價(jià)的部分。例如，盡管一個(gè)“烷基”部分總體上是指一個(gè)單價(jià) 基團(tuán)(例如，CH3-CH2-)，在某些情形下，一個(gè)二價(jià)的連接部分可以是“烷基”，在這種情況下， 本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員會(huì)理解到，該烷基是一個(gè)二價(jià)基團(tuán)(例如-CH2-CH2-)，它等效于術(shù)語(yǔ) “亞烷基”。(類(lèi)似地，在其中要求一個(gè)二價(jià)部分并且作為“芳基”而說(shuō)明的情形下，本領(lǐng)域的 普通技術(shù)人員會(huì)理解到，術(shù)語(yǔ)“芳基”是指對(duì)應(yīng)的多價(jià)部分，亞芳基)。所有原子都應(yīng)理解為 對(duì)于鍵的形成具有它們正常的化合價(jià)數(shù)(即，對(duì)于H為1，對(duì)于碳為4，對(duì)于N為3，對(duì)于0為 2、并且對(duì)于S為2、4或6，這取決于S的氧化態(tài))?！八幚韺W(xué)上有效的量”、“生理學(xué)上有效的量”以及“治療上有效的量”在此互換地使 用，來(lái)指在血液或在靶組織中提供一個(gè)所希望水平的活性試劑和/或共軛物所需要的在一 種組合物中存在的水溶性低聚物小分子藥物共軛物的量。精確的量可以取決于多個(gè)因素， 例如具體的活性試劑、組合物的組分以及物理特征、既定的患者群、患者的考慮因素，并且 可以容易地由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員基于在此提供的以及在相關(guān)文獻(xiàn)中可得的信息來(lái)確 定。一種“雙官能的”低聚物是其中(典型地在其端位)包括兩個(gè)官能團(tuán)的一種低聚 物。當(dāng)這些官能團(tuán)相同時(shí)，則認(rèn)為該低聚物是同雙官能的。當(dāng)這些官能團(tuán)不同時(shí)，認(rèn)為該低 聚物是雜雙官能的。在此描述的一種堿性反應(yīng)物或一種酸性反應(yīng)物包括中性的、帶電荷的以及它們的 任何對(duì)應(yīng)的鹽的形式。術(shù)語(yǔ)“患者”是指一位患有一種可以通過(guò)給予在此描述的一種共軛物來(lái)防止或治 療的病癥或有該病癥的傾向的一個(gè)活生物體，并且包括人和動(dòng)物兩者?！叭芜x的”或“任選地”意思是隨后描述的情形可以但是并非必須發(fā)生，這樣該說(shuō)明 包括其中該情形發(fā)生的情況以及該情形不發(fā)生的情況?！傲恪北硎救笔б粋€(gè)取代基。因此，當(dāng)一個(gè)基團(tuán)是零時(shí)，該取代基作為在所得結(jié)構(gòu)中 的一個(gè)化學(xué)鍵或氫在該結(jié)構(gòu)中存在。如以上所說(shuō)明的，本發(fā)明是針對(duì)(除其他之外)一種化合物，該化合物包括通過(guò)一 個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)殘基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其中該三環(huán)化合物具有以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)
其中D和R1作為整體是選自下組，其構(gòu)成為-HC-R^-C = R1、禾P -HN-R1R1是選自下組，其構(gòu)成為烷基、氨基、?；被?、酰基、酰氨基、芳氧基、烷氨基、具 有2到4個(gè)碳原子(包括端值)的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷基、N-(低級(jí)烷基)-2-哌啶基、 嗎啉基、1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、4-(羥基-低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、和4-(甲 氧基_低級(jí)烷基)-1-哌嗪基，它們是未取代的或任選地取代的；Y 是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-、-CH2CH2-、_CH = CH_，-CH2-S-、CH2-0-、CH2-NH-、-S_CH2_、_0_CH2、_NH_CH2、_HN_、-0-、-N = C-、-C = N-、 和-S-，它們是未取代的或任選地取代的；并且R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9中的一個(gè)或多個(gè)各自獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為零、氫、
鹵素、氰基、羥基、羧基、酮基、硫酮基、氨基、?；被?、酰基、酰氨基、芳氧基、烷基、鏈烯基、 炔基、雜烷基、商烷基、烷氧基、二氧基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、以及雜環(huán)烷基，它們是未取代 的或任選地取代的。具體的三環(huán)化合物的實(shí)例包括選自下組的那些，該組的構(gòu)成為安咪奈丁、阿米替 林、氧阿米替林、阿莫沙平、布替林、氯米帕明(clomiprimine)、地美替林、地昔帕明、二苯西 平、二甲他林、度琉平、多塞平、氟西嗪、丙米嗪、N-氧化丙米嗪、洛非帕明、美利曲辛、美他 帕明、去甲替林、奧匹哌醇、丙吡西平、普羅替林、奎紐帕明、噻奈普汀、曲米帕明以及卡馬西 平。所相信的是，本發(fā)明的化合物的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是它們保持某種程度的三環(huán)化合物活性 而同時(shí)呈現(xiàn)出代謝降低的能力。盡管不希望受理論的限制，所相信的是在此描述的含三環(huán) 殘基以及低聚物的化合物(與無(wú)低聚物的“初始的”三環(huán)結(jié)構(gòu)相比)是不那么迅速代謝的， 因?yàn)榈途畚镒鳛榻档突衔锱c可以代謝三環(huán)化合物的物質(zhì)的總體親和性而起作用。此外 (并且再次地，不希望受理論的限制)，由該低聚物引入的額外的大小，與無(wú)低聚物的“初 始”三環(huán)結(jié)構(gòu)相比，降低了該化合物跨過(guò)血腦屏障的能力。盡管在該三環(huán)化合物的殘基與該 低聚物之間的連接是可降解的，該化合物仍然提供了多個(gè)優(yōu)點(diǎn)(例如避免初始吸收時(shí)的首 過(guò)代謝)。使用不連續(xù)的低聚物(例如與相對(duì)不純的組合物不同，來(lái)自低聚物的單分散或雙 峰組合物)來(lái)形成含低聚物的化合物可以有利地改變與對(duì)應(yīng)的小分子藥物相關(guān)的某些特 性。例如，本發(fā)明的一種化合物當(dāng)通過(guò)合適的給藥途徑(如腸胃外、口服、經(jīng)皮的、口腔的、 肺部的或鼻的途徑)給藥時(shí)呈現(xiàn)出降低的跨過(guò)血腦屏障的滲透。優(yōu)選的是本發(fā)明的化合物呈現(xiàn)出減緩的、最小的或?qū)嶋H上沒(méi)有跨過(guò)該血腦屏障，而仍然跨過(guò)了胃腸(GI)的壁并且進(jìn) 入大循環(huán)中(若既定的是口服遞送的話(huà))。此外，本發(fā)明的化合物與不含所有低聚物的化合 物的生物活性以及生物利用率相比，保持了一定程度的生物活性連同生物利用率。對(duì)于血腦屏障(“BBB”)，該屏障限制了藥物自血液到腦的運(yùn)輸。該屏障由通過(guò)緊 密連接而結(jié)合的獨(dú)特的內(nèi)皮細(xì)胞的一個(gè)連續(xù)層構(gòu)成。包括大于BBB總表面積的95%的腦微 血管代表大多數(shù)的溶質(zhì)和藥物進(jìn)入中央神經(jīng)系統(tǒng)的主要途徑。對(duì)于其跨過(guò)血腦屏障能力的程度不是現(xiàn)成已知的化合物，此種能力可以使用一種 合適的動(dòng)物模型(例如在此描述的原位大鼠腦灌注(“RBP”)模式)來(lái)確定。簡(jiǎn)單地說(shuō)， RBP技術(shù)涉及頸動(dòng)脈套管插入術(shù)，隨后用一種化合物溶液在受控的條件下進(jìn)行灌注，隨后是 一個(gè)洗滌階段來(lái)除去在血管中余下的化合物。(此類(lèi)分析可以例如由合同研究組織例如 Absorption Systems，Exton，PA進(jìn)行)。在RBP模式的一個(gè)實(shí)例中，將一個(gè)套管置于左側(cè)頸 動(dòng)脈并且將側(cè)枝進(jìn)行結(jié)扎。在一個(gè)單向灌注實(shí)驗(yàn)中，將含有被分析物(典型地但是并非必 須以5微摩爾的濃度水平)的一個(gè)生理緩沖液以約10mL/分鐘的流速進(jìn)行灌注。30秒之 后，灌注停止并且將腦血管內(nèi)含物用不含化合物的緩沖液洗掉，再持續(xù)30秒。然后將腦組 織除去并且通過(guò)液相色譜法與串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)來(lái)分析化合物濃度(LC/MS/MS)。替代地，血 腦屏障滲透性可以基于化合物的分子極性表面積(“PSA”)的計(jì)算來(lái)估計(jì)，它被定義為在一 個(gè)分子中極性原子(通常是氧、氮以及附接的氫)的表面貢獻(xiàn)的總數(shù)。PSA已經(jīng)顯示出與 化合物傳輸特性(例如血腦屏障傳輸)相關(guān)。確定化合物的PSA的方法可以在例如Ertl， P.，et al.，J. Med. Chem. 2000，43，3714-3717 ；and Kelder、J.，et al.，Pharm. Res. 1999， 16，1514-1519 中找到。對(duì)于血腦屏障，水溶性的非肽低聚物小分子藥物共軛物呈現(xiàn)出一個(gè)血腦屏障跨過(guò) 速度，該速度與沒(méi)有附接到該水溶性的非肽低聚物上的小分子藥物的跨過(guò)速度相比有所降 低。當(dāng)與沒(méi)有附接到水溶性低聚物上的小分子藥物的血腦屏障跨過(guò)速度相比時(shí)，對(duì)于在此 描述的化合物的血腦屏障跨過(guò)速度中的示例性的降低包括以下降低至少約5% ；至少約 10% ；至少約25% ；至少約30% ；至少約40% ；至少約50% ；至少約60% ；至少約70% ；至 少約80%;或至少約90%。對(duì)于本發(fā)明的共軛物的優(yōu)選的血腦屏障跨過(guò)速度降低是至少約 20%。如以上所說(shuō)明的，本發(fā)明的化合物包括一個(gè)三環(huán)殘基。確定一種所給出的化合物 (不管該化合物是否包括一種水溶性的非肽的低聚物)是否可以作為一種抗抑郁劑、抗驚 厥藥或作為一種鎮(zhèn)痛劑起作用的測(cè)定在以下進(jìn)行描述。對(duì)于在以下段落中所使用的關(guān)于化學(xué)式的變量、符號(hào)以及標(biāo)號(hào)與其他段落不相 關(guān)。因此，在每個(gè)段落中的符號(hào)以及標(biāo)號(hào)的定義通常僅限于該段落并且除非另外說(shuō)明，不應(yīng) 該用來(lái)解釋其他段落。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中A是選自以下基團(tuán)的一個(gè)橋_(CH丄_、和-CH = CH_，其中m是從1至3 (包括端值)的一個(gè)整數(shù)，X和Y是選自下組，其構(gòu)成為氫以及鹵素，該鹵素選自氟、氯以及溴；R和R'是選自下組，其構(gòu)成為氫以及具有從一至五個(gè)(包括端值)碳原子的低 級(jí)烷基；并且n是從1至12 (包括端值)的一個(gè)整數(shù)，在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)(3' -二甲氨基亞丙基)_ 二苯并 (a, d)_環(huán)庚并-1，4_ 二烯N-氧化物和或它們的鹽酸加成鹽。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)選自下組的一個(gè)化學(xué)式，該組的構(gòu) 成為2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f)[l，4]氧-氮雜萆、2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯 并(b，f) [1,4]氧-氮雜革鹽酸鹽、2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f) [1,4]氧-氮雜萆富 馬酸鹽、2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f) [1，4]氧-氮雜革硫酸鹽、和2-氯-11-(1-哌 嗪基)二苯并(b，f)[l，4]氧-氮雜萆二庚酸鹽。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)5-(3' -二甲氨基-2'-甲基丙 基)二苯并[a，d][l，4]_環(huán)庚二烯。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)選自下組的一個(gè)化學(xué)式，該組的構(gòu)
成為3_氯二甲基氨基-丙基)_亞氨基二芐、3-氯二甲基氨基-丙 基)_亞氨基二芐的一種藥學(xué)上可接受的酸加成鹽、和3-氯二甲基氨基-丙 基)_亞氨基二芐鹽酸鹽。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)選自下組的一個(gè)化學(xué)式，該組的構(gòu) 成為
其中X代表具有2和3之間(包括端值)的碳原子的亞烷基；Y是構(gòu)成如下的類(lèi) 別中的一員具有2和4之間(包括端值)的碳原子的二烷氨基、吡咯烷基、哌啶基、以及嗎 啉基氓和R2可互換地代表構(gòu)成如下的類(lèi)別中的一員氫、甲基、以及乙基；并且R3和R4可 互換地代表構(gòu)成如下的類(lèi)別中的一員氧、氯、甲基、乙基、甲氧基、以及乙氧基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)殘基選自具有以下化學(xué)式的化合物所構(gòu)成的組 在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)選自下組的一個(gè)化學(xué)式，該組的構(gòu) 成為5- ( Y _甲氨基-丙基)_亞氨基二芐以及它的無(wú)毒的加成鹽類(lèi)，N- (3-甲氨基丙基)-亞 氨基二芐，以及N-(3-甲氨基丙基)_亞氨基二芐鹽酸鹽。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了 一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物是選自下組的一種化合物，該組的構(gòu)成為具有以下化學(xué)式的10-(堿性取 代的)-10，11-二氫-5H-二苯并[b，e][l，4] 二氮雜革 其中亞烷基具有2至4個(gè)(包括端值)碳，并且至少兩個(gè)碳將X與該雜環(huán)的核分 開(kāi)；X是選自下組，其構(gòu)成為2至4個(gè)碳的二烷氨基、吡咯烷基、哌啶基以及嗎啉基；并且每 個(gè)Y獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為氫、氯、甲基、甲氧基以及乙氧基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了 一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基: 其中該三環(huán)化合物是選自下組的一種化合物，該組的構(gòu)成為具有以下化學(xué)式的取代的 5H-二苯并[b，e] [1,4] 二氮雜革衍生物 其中禮是選自由氫、甲基以及乙基構(gòu)成的類(lèi)別；-X-Y是一個(gè)堿性基團(tuán)，其中X是含 有2和3之間(包括端值)的碳原子的烴鏈，并且Y是選自以下類(lèi)別，其構(gòu)成為具有2和 4之間(包括端值)的碳原子的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷基、N-(低級(jí)烷基)-2_哌啶基、嗎 啉基、1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、4-(羥基-低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、和4-(甲氧 基_低級(jí)烷基)-1-哌嗪基并且R2和R3是選自以下類(lèi)別，其構(gòu)成為氫、氯、甲基、乙基、甲氧 基、乙氧基、三氟甲基、甲基巰基、以及乙基巰基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中R是選自CH3和C2H5構(gòu)成的組的一員，并且R1是選自下組的一員，該組的構(gòu)成 為 Cl、CH3、CF3JP C2H5。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中R是選自CH3和C2H5構(gòu)成的組的一員，并且R1是選自下組的一員，該組的構(gòu)成 為 H、Cl、CH3λ CF3JfI C2H50在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)11-(3_ 二甲氨基亞丙基)-6，11_ 二 氫-二苯并_(b，e)噻庚英。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 隊(duì)是選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫以及鹵素并且A是羥乙基-哌啶基)。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中n是從0至1的整數(shù)并且禮是具有從1至4個(gè)碳原子的烷基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中X和Y各自獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為氫、具有從1至4個(gè)碳原子的烷基、具 有從1至4個(gè)碳原子的烷氧基、具有從1至4個(gè)碳原子的硫代烷氧基、氯、復(fù)、三氟甲基、具 有從1至4個(gè)碳原子的?；约熬哂袕?至8個(gè)碳原子的二烷基亞磺酰氨基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其
中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中&和民各自是選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫、氟、氯、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧 基、低級(jí)烷硫基、以及三氟甲基并且Z是一個(gè)二 -低級(jí)-烷氨基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)-
穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到-中該三環(huán)化合物是選自下組，其構(gòu)成為 有以下化學(xué)式
-種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 一種游離堿以及其水溶性酸加成鹽，所述游離堿具
亞縫-Am 其中亞烷基代表具有2-3個(gè)碳原子的一個(gè)亞烷基鏈并且Am代表選自下組的-
-員，環(huán)的殘基其
該組的構(gòu)成為一個(gè)低分子二烷氨基基團(tuán)、N-哌啶基-、N-嗎啉基-、和N-吡咯烷基的基團(tuán),在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)-穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的-中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) Y是選自下組，其構(gòu)成為CH2-CH2和CH = CH ；R1是選自下組，其構(gòu)成為H和CH3;R2代表具有最大4個(gè)碳原子的一個(gè)烷基基團(tuán)；n是選自下組，其構(gòu)成為1、2、和3 ；R3是選自下組，其構(gòu)成為苯基以及被最多三個(gè)取代基取代的苯基，這些取代基選 自下組，其構(gòu)成為F、C1、0H、CF3，連同含有最多4個(gè)碳原子的烷基和烷氧基；以及在3，4_位 上具有一個(gè)取代基的一個(gè)苯基基團(tuán)，該取代基選自下組，其構(gòu)成為亞烷基二氧基(具有最 多6個(gè)碳原子)、環(huán)烷基二氧基(具有最多6個(gè)碳原子)以及乙二氧基；R4 是選自下組，其構(gòu)成為:H、F、Cl、0CH3、CF3jnS02N(CH3)2。
在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu)
R2其中R1和R2各自是一個(gè)低級(jí)烷基基團(tuán)；X是選自下組，其構(gòu)成為氫、鹵素、低級(jí)烷 基以及低級(jí)烷氧基；Y是選自下組，其構(gòu)成為氫和鹵素；并且 是選自下組，其構(gòu)成為二 _低級(jí)_烷氨基、芐基_低級(jí)_烷氨基、以及雜環(huán)胺的基 團(tuán)，所述雜環(huán)胺是選自下組，其構(gòu)成為吡咯烷、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、N1-低級(jí)-烷基哌嗪、 以及上述各項(xiàng)的C-低級(jí)烷基衍生物。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有由以下化學(xué)式所包括的一種結(jié)構(gòu) 其中R1和R2各自是一個(gè)低級(jí)烷基基團(tuán)；X是選自下組，其構(gòu)成為氫、鹵素、低級(jí)烷 基以及低級(jí)烷氧基；Y是選自下組，其構(gòu)成為氫和鹵素；并且 是選自下組，其構(gòu)成為二 _低級(jí)_烷氨基、芐基_低級(jí)_烷氨基、以及具有一個(gè)飽 和的五元環(huán)的一個(gè)雜環(huán)胺的基團(tuán)，具有一個(gè)飽和的六元環(huán)的一個(gè)雜環(huán)胺的基團(tuán)，所述雜環(huán) 胺是選自下組，其構(gòu)成為吡咯烷、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、N1-低級(jí)烷基哌嗪、以及上述各項(xiàng) 的C-低級(jí)烷基衍生物。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有以下化學(xué)式 其中R和R'是相同或不同的并且各自代表氫或具有一至五個(gè)碳原子的烷基，并 且隊(duì)是氫、具有一至五個(gè)碳原子的烷基、或芐基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有以下化學(xué)式 其中R是選自下組，其構(gòu)成為氫、低級(jí)烷基、苯基以及芐基。在本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案中，提供了 一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè) 穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)的殘基其 中該三環(huán)化合物具有以下化學(xué)式 其中X和Y各自代表選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫以及鹵素。在一些例子中，三環(huán)化合物可以自商業(yè)來(lái)源獲得。此外，三環(huán)化合物可以通過(guò)化 學(xué)合成得到。三環(huán)化合物的實(shí)例連同用于制備三環(huán)化合物的方法描述于以下文獻(xiàn)中，并且 在例如 DE2030492A1、DE2030492A、DE2030492B2、DE2030492C3、GB1191800A、US2554736、 US2948718、US3177209、US3205264、US3244748、US3271451、US3299139、US3312689、 US3409640、US3419547、US3438981、US3442949、US3454554、US3467650、US3527766、 US3574852、US3622565、US3637660、US3663696、US3758528、US3963778 中。這些(以及其 他)三環(huán)化合物各自可以共價(jià)地附接到(或者直接地或者通過(guò)一個(gè)或多個(gè)原子)一種水溶 性的并且非肽的低聚物上。小分子藥物的示例性的分子量包括以下分子量小于約950 ；小于約900 ；小于 約850 ；小于約800 ；小于約750 ；小于約700 ；小于約650 ；小于約600 ；小于約550 ；小于約 500 ；小于約450 ；小于約400 ；小于約350 ；以及小于約300。在本發(fā)明中使用的小分子藥物若是手性的話(huà)可以是處于一種消旋混合物或任選 地活化的形式，例如一種單旋光的對(duì)映異構(gòu)體或任何組合或比率的對(duì)映異構(gòu)體(即，非消 旋(scalemic)混合物)。此外，該小分子藥物可以具有一種或多種幾何異構(gòu)體。關(guān)于幾何 異構(gòu)體，一種組合物可以包括一種單幾何異構(gòu)體或兩種或多種幾何異構(gòu)體的一種混合物。 用在本發(fā)明中的一種小分子藥物可以處于常規(guī)的活性形式或可以具有某種程度的改性。例 如，一種小分子藥物可以在共價(jià)地附接到一種低聚物上之前或之后具有附接到其上的一種 靶向劑、標(biāo)簽或轉(zhuǎn)載蛋白。作為替代方案，該小分子藥物可以具有附接到其上的一個(gè)親脂 性部分，例如一個(gè)磷脂(例如，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或“DSPE”、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺或 “DPPE”，等等)或一種小的脂肪酸。然而，在某些情況下，優(yōu)選的是該小分子藥物部分不包 括到一個(gè)親脂性部分上的附接。偶聯(lián)到一種水溶性、非肽的低聚物上的三環(huán)化合物具有適 合于共價(jià)地附接到低聚物上的一個(gè)游離的羥基、羧基、硫、氨基的基團(tuán)、或類(lèi)似物(即，“手 柄”)。此外，該三環(huán)化合物可以通過(guò)引入一個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)進(jìn)行改性，優(yōu)選地通過(guò)將其所存在 的官能團(tuán)中的一個(gè)轉(zhuǎn)化成一個(gè)適合于在該低聚物和該藥物之間形成穩(wěn)定的共價(jià)連接的官 能團(tuán)。兩種方法均在實(shí)驗(yàn)部分進(jìn)行說(shuō)明。因此，每種低聚物包括高達(dá)三種不同的單體類(lèi)型，這些類(lèi)型選自下組，其構(gòu)成為 氧化烯，例如氧化乙烯或氧化丙烯；烯醇，例如乙烯醇、1-丙烯醇或2-丙烯醇；乙烯基吡咯 烷酮，羥烷基甲基丙烯酰胺或甲基丙烯酸羥烷酯，其中烷基優(yōu)選是甲基、a-羥酸，例如乳酸 或乙醇酸；磷腈、噁唑啉、氨基酸、碳水化合物類(lèi)，如單糖、糖醇，如甘露醇；以及N-丙烯酰嗎 啉。優(yōu)選的單體類(lèi)型包括氧化烯、烯醇、羥烷基甲基丙烯酰胺或甲基丙烯酸酯、N-丙烯酰嗎 啉以及a-羥酸。優(yōu)選地，每種低聚物獨(dú)立地是兩種選自該組的單體類(lèi)型的一個(gè)共低聚物， 或更優(yōu)選是選自該組的單體類(lèi)型的一種均-低聚物。
在一個(gè)共-低聚物中的兩種單體類(lèi)型可以是相同的單體類(lèi)型，例如兩種氧化烯， 例如氧化乙烯和氧化丙烯。優(yōu)選地，該低聚物是氧化乙烯的一種共-低聚物。通常，盡管并 非是必須的，沒(méi)有共價(jià)地附接到一種小分子上的低聚物的這個(gè)或這些末端被帽化以使其呈 非反應(yīng)性的。作為替代方案，該末端可以包括一個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)。當(dāng)該末端是一個(gè)反應(yīng)性基 團(tuán)時(shí)，該反應(yīng)性基團(tuán)被選擇為使得它在最終低聚物形成的條件下或在該低聚物共價(jià)地附接 到小分子藥物上的過(guò)程中是非反應(yīng)性的，或者必要時(shí)將它加以保護(hù)。一種常見(jiàn)的端基官能 團(tuán)是羥基或_0H(特別是對(duì)于低聚氧化烯而言)。該水溶性、非肽的低聚物(例如在此提供的處于不同結(jié)構(gòu)的“P0LY”)可以具有任 何數(shù)目的不同幾何形狀。例如，該水溶性、非肽的低聚物可以是直鏈的、支鏈的或叉狀的。最 典型地，該水溶性、非肽的低聚物是直鏈的或是支鏈的，例如具有一個(gè)分枝點(diǎn)。盡管在此多 數(shù)討論是集中于聚(氧化烯)作為一種例證性的低聚物，但是在此呈現(xiàn)的討論和結(jié)構(gòu)可以 容易地延伸到包括以上描述的任何水溶性、非肽的低聚物。該水溶性、非肽的低聚物的分子量(排除連接物部分)總體上是相對(duì)低的。該 水溶性聚合物的分子量的示例性值包括低于約1500 ；低于約1450 ；低于約1400 ；低于約 1350 ；低于約1300 ；低于約1250 ；低于約1200 ；低于約1150 ；低于約1100 ；低于約1050 ；低 于約1000 ；低于約950 ；低于約900 ；低于約850 ；低于約800 ；低于約750 ；低于約700 ；低于 約650 ；低于約600 ；低于約550 ；低于約500 ；低于約450 ；低于約400 ；低于約350 ；低于約 300 ；低于約250 ；低于約200 ；以及低于約100道爾頓。水溶性、非肽的低聚物(排除連接物)的分子量的示例性范圍包括從約100至約 1400道爾頓；從約100至約1200道爾頓；從約100至約800道爾頓；從約100至約500道 爾頓；從約100至約400道爾頓；從約200至約500道爾頓；從約200至約400道爾頓；從 約75至1000道爾頓；以及從約75至約750道爾頓。優(yōu)選地，在水溶性、非肽的低聚物中的單體的數(shù)目落入以下范圍中的一個(gè)或多個(gè) 之內(nèi)在約1和約30之間(包括端值)；在約1和約25之間；在約1和約20之間；在約1 和約15之間；在約1和約12之間；在約1和約10之間。在某些情況下，在該低聚物(以及 對(duì)應(yīng)的共軛物)中的串聯(lián)的單體數(shù)目是1、2、3、4、5、6、7、或8之一。在另外的實(shí)施方案中， 該低聚物(以及對(duì)應(yīng)的共軛物)包括9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、或20個(gè)單體。 在還有另外的實(shí)施方案中，該低聚物(以及對(duì)應(yīng)的共軛物)具有21、22、23、24、25、26、27、 28,29或30個(gè)串聯(lián)的單體。因此，例如當(dāng)該水溶性的并且非肽的聚合物包括CH3-(0CH2CH2) n-時(shí)，“n” 是一個(gè)整數(shù)，它可以是 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30，并且可以落入以下一個(gè)或多個(gè)范圍之內(nèi)在約1禾口 約25之間；在約1和約20之間；在約1和約15之間；在約1和約12之間；在約1和約10 之間。當(dāng)該水溶性、非肽的低聚物具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10個(gè)單體時(shí)，它們的值對(duì) 應(yīng)一個(gè)甲氧基封端的低聚(氧化烯)，它們分別具有約75、119、163、207、251、295、339、383、 427、和471道爾頓的分子量。當(dāng)該低聚物具有11、12、13、14、or 15個(gè)單體時(shí)，這些值所對(duì) 應(yīng)的甲氧基封端的低聚(氧化烯)具有對(duì)應(yīng)于約515、559、603、647、和691道爾頓的分子
Mo當(dāng)該水溶性、非肽的低聚物附接到該三環(huán)化合物(與分步加入一種或多種以在該三環(huán)化合物上有效地使低聚物“生長(zhǎng)”不同)，優(yōu)選的是該含有一種被活化的形式的水溶性、 非肽的低聚物的組合物是單分散的。然而在那些情況下，其中在使用一種雙峰組合物時(shí)， 該組合物會(huì)具有以任何兩個(gè)以上數(shù)目的單體為中心的一個(gè)雙峰分布。例如，一種雙峰低聚 物可以具有以下示例性的單體亞單元組合中的任何一種1_2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7、1-8、
1-9、1-10、等等；2-3、2-4、2-5、2-6、2-7、2-8、2-9、2-10、等等；3-4、3-5、3-6、3-7、3-8、3_9、 3-10、等等；4-5、4-6、4-7、4-8、4-9、4-10、等等；5-6、5-7、5-8、5-9、5_10、等等；6_7、6_8、 6-9、6-10、等等；7-8、7-9、7-10、等等；以及 8_9、8_10，等等。在一些情況下，包括一種活化形式的水溶性、非肽的低聚物的組合物是三峰或者 甚至是四峰的，具有如上所描述的一系列單體單元。具有良好定義的低聚物混合物的低聚 物組合物(即，雙峰的、三峰的、四峰的，等等)可以通過(guò)混合純化的單分散低聚來(lái)制備以 獲得所希望特征曲線的低聚物(僅在單體數(shù)目上不同的兩種低聚物的一個(gè)混合物是雙峰 的；僅在單體數(shù)目上不同的三種低聚物的一個(gè)混合物是三峰的；僅在單體數(shù)目上不同的四 種低聚物的一個(gè)混合物是四峰的)或替代地，可以從一種多分散低聚物的柱色譜法通過(guò)回 收“中間部分”來(lái)獲得，以便以一個(gè)所希望的并且定義的分子量范圍獲得低聚物的一個(gè)混合 物。優(yōu)選的是該水溶性、非肽的低聚物從優(yōu)選是單分子或單分散的一種組合物中獲 得。即，在該組合物中的低聚物具有同樣不連續(xù)的分子量的值而不是分子量的分布。一些 單分散低聚物可以從商業(yè)來(lái)源購(gòu)買(mǎi)，例如自Sigma-Aldrich可得的那些，或者可替代地，可 以直接從可商購(gòu)的起始材料例如Sigma-Aldrich制備。水溶性、非肽的低聚物可以如以下 描述的來(lái)制備Chen Y.，Baker, G. L.，J. Org. Chem.，6870-6873 (1999)，W0 02/098949，and U. S. Patent Application Publication2005/0136031。當(dāng)存在時(shí)，該間隔基部分(通過(guò)它將水溶性的、非肽聚合物附接到三環(huán)化合物上) 可以是一個(gè)單鍵、一個(gè)單個(gè)原子，例如一個(gè)氧原子或一個(gè)硫原子，兩個(gè)原子或多個(gè)原子。一 個(gè)間隔基部分在性質(zhì)上典型地但是并非必須是直鏈的。該間隔基部分“X”是水解穩(wěn)定的， 并且還優(yōu)選地是酶穩(wěn)定的。優(yōu)選地，該間隔基“X”是具有的鏈長(zhǎng)度小于約12個(gè)原子，優(yōu)選 小于約10個(gè)原子，并且甚至更優(yōu)選小于約8個(gè)原子并且甚至更優(yōu)選小于約5個(gè)原子的一個(gè) 部分，其中長(zhǎng)度是指在一個(gè)單鏈中原子的數(shù)目，不計(jì)算取代基。例如，一個(gè)脲連接例如R<sir ft-NH-(C = 0)-NH-R' ! ，被認(rèn)為是具有3個(gè)原子的鏈長(zhǎng)(-NH-C(0)-NH-)。在所選擇的實(shí) 施方案中，該連接不包括另外的間隔基。在一些情況下，該間隔基部分“X”包括醚、酰胺、氨基甲酸酯、酰胺、硫醚、脲或一個(gè) 碳碳鍵。典型地使用如以下所討論和說(shuō)明的那些官能團(tuán)來(lái)形成這些連接。該間隔基部分還 可以較為不優(yōu)選地包括其他原子(或是與其鄰近的或是在其側(cè)面)，如另外在以下所描述。更確切地說(shuō)，在所選擇的實(shí)施方案中，本發(fā)明的間隔基部分X可以是以下各項(xiàng) 中的任何一個(gè)“_”(即，在該三環(huán)的殘基以及該水溶性、非肽的低聚物之間的一個(gè)共價(jià) 鍵，它可以是穩(wěn)定的或可降解的)、-0-、-NH-、-s-、-c(0)-、-c(0)0-、-oc(o)-、_CH2_C(0) 0-、-CH2-0C (0) -、-c (0) 0-CH2-、-oc (0) -CH2-、C (0) -NH、NH-C (0) -NH、0_C (0) -NH、_C (S) -、-CH
2->-ch2-ch2-, -ch2-ch2-ch2-, -ch2-ch2-ch2-ch2-, -o-ch2-, -ch2-o-, -o-ch2-ch2-, -ch2-o-ch2-, -c h2-ch2-o-、-o-ch2-ch2-ch2-、-ch2-o-ch2-ch2-、-ch2-ch2-o-ch2-、-ch2-ch2-ch2-o-、-o-ch2-ch2 -ch2-ch2-、-ch2-o-ch2-ch2-ch2-、-ch2-ch2-o-ch2-ch2-、-ch2-ch2-ch2-o-ch2-、-ch2-ch2-ch2-ch2-0-、-c (0) -NH-CH2-、-c (0) -NH-CH2-CH2-、-CH2-C (0) -NH-CH2-、-CH2-CH2-C (0) -NH-、-c (0) -NH-C h2-ch2-ch2-、-ch2-c (o) -nh-ch2-ch2-、-ch2-ch2-c (0) -nh-ch2-、-ch2-ch2-ch2-c (0) -NH-、-C (o)-nh-ch2-ch2-ch2-ch2-、-ch2-c (o) -nh-ch2-ch2-ch2-、-ch2-ch2-c (o) -nh-ch2-ch2-、-ch2-ch2-ch
2-C (0) -NH-CH2-、-CH2-CH2-CH2-C (0) -NH-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-C (0) -NH-、-NH-C (0) -CH
2-、-ch2-nh-c (o) -ch2-、-ch2-ch2-nh-c (o) -ch2-、-nh-c (o) -ch2-ch2-、-ch2-nh-c (0) -ch2-ch2、-c h2-ch2-nh-c (o) -ch2-ch2、-c (0) -nh-ch2-、-c (o) -nh-ch2-ch2-、-o-c (0) -nh-ch2-、-o-c (0) -NH -ch2-ch2-、-nh-ch2-、-nh-ch2-ch2-、-ch2-nh-ch2-、-ch2-ch2-nh-ch2-、-c (o) -ch2-、-c (o) -ch2-ch 2-、-ch2-c (o) -ch2-、-ch2-ch2-c (o) -ch2-、-ch2-ch2-c (o) -ch2-ch2-、-ch2-ch2-c (o) -、-ch2-ch2--ch2-c (o) -nh-ch2-ch2-nh-、-ch2-ch2-ch2-c (0) -nh-ch2-ch2-nh-c (0) -、-ch2-ch2-ch2-c (0) -NH
-CH2-CH2-NH-C (0) -CH2-、二價(jià)的環(huán)烷基、-N (R6) -，R6是H或一個(gè)有機(jī)基團(tuán)，該基團(tuán)選自下組， 其構(gòu)成為烷基、取代的烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、炔基、取代的炔基、芳基以及取代的芳 基。另外的間隔基部分包括?；被?、?；?、芳氧基、含有在1和5之間(包括端值)的碳原 子的亞烷基橋、烷氨基、具有約2至4個(gè)(包括端值)的碳原子的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷 基、N-(低級(jí)烷基)-2-哌啶基、嗎啉基、1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1-哌嗪基、4-(羥基-低 級(jí)烷基)-1-哌嗪基、和4-(甲氧基-低級(jí)烷基)-1-哌嗪基。然而為了本發(fā)明的目的，一個(gè)原子團(tuán)當(dāng)它直接與一個(gè)低聚物區(qū)段相鄰時(shí)不應(yīng)認(rèn)為 是一個(gè)連接，并且該原子團(tuán)是與該低聚物的一個(gè)單體相同的，這樣該基團(tuán)將僅僅代表該低 聚物鏈的一個(gè)延伸。在該水溶性、非肽的低聚物與該小分子之間的連接“X”典型地是通過(guò)在該低聚物 的末端的一個(gè)官能團(tuán)(或當(dāng)希望該低聚物“生長(zhǎng)到”該三環(huán)化合物上時(shí)新生的低聚物)與在 該三環(huán)化合物中的一個(gè)對(duì)應(yīng)的官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)而形成的。說(shuō)明性的反應(yīng)簡(jiǎn)要地描述如下。 例如，低聚物上的一個(gè)氨基基團(tuán)可以與小分子上的一個(gè)羧酸或一個(gè)活化的羧酸衍生物(或 者反之亦然)進(jìn)行反應(yīng)來(lái)產(chǎn)生一個(gè)酰胺連接?？商娲?，在低聚物上的一種胺與藥物上的 一個(gè)活化的碳酸酯(例如琥珀酰亞胺基或苯并三唑基的碳酸酯)或反之亦然的反應(yīng)形成了 一種氨基甲酸酯連接。低聚物上的一個(gè)胺與藥物上的一個(gè)異氰酸酯(R-N = C = 0)的反應(yīng) (或反之亦然)形成了一個(gè)脲連接(R-NH-(C = 0)-NH-R')。此外，低聚物上的一個(gè)醇(烷 氧化物)與藥物中的一個(gè)烷基鹵或鹵化物基團(tuán)(反之亦然)的反應(yīng)形成了一個(gè)醚連接。在 又另一個(gè)偶聯(lián)方法中，具有醛官能團(tuán)的一個(gè)小分子通過(guò)還原胺化作用偶聯(lián)到一個(gè)低聚物氨 基基團(tuán)上，從而導(dǎo)致了在該低聚物和小分子之間形成一個(gè)仲胺連接。一種特別優(yōu)選的水溶性、非肽的低聚物是帶有醛官能團(tuán)的一種低聚物。在此方面， 該低聚物具有以下結(jié)構(gòu)CH30-(CH2-CH2-0)n-(CH2)p-C(0)H 其中(n)是 1、2、3、4、5、6、7、8、9 和10之一并且(p)是1、2、3、4、5、6和7之一。優(yōu)選的(n)值包括3、5和7并且優(yōu)選的(p) 值是2、3和4。將不帶有官能團(tuán)的水溶性、非肽的低聚物的端位進(jìn)行封端以便使它為非活性的。 當(dāng)該低聚物在端位包括一個(gè)另外的官能團(tuán)而并非旨在用于形成一個(gè)共軛物時(shí)，該基團(tuán)被選 擇為使得它在形成該連接“X”的條件下是非活性的，或者在形成“X”連接的過(guò)程中將其進(jìn) 行保護(hù)。如以上所說(shuō)明的，該水溶性、非肽的低聚物在共軛之前包括至少一個(gè)官能團(tuán)。該官 能團(tuán)典型地包括一個(gè)親電子的或親核的基團(tuán)用于共價(jià)地附接到一種小分子上，這取決于包含在或引入到該小分子中的反應(yīng)性基團(tuán)。在該低聚物中或小分子中可以存在的親核基團(tuán)的 實(shí)例包括羥基、胺、胼(-NHNH2)、酰胼(-C(O)NHNH2)以及硫醇。優(yōu)選的親核體包括胺、胼、酰 胼、以及硫醇，特別是胺。共價(jià)地附接到一種低聚物上的大多數(shù)的小分子藥物將具有一個(gè)游 離的羥基、氨基、硫、醛、酮、或羧基的基團(tuán)。在該低聚物或該小分子中可以存在的親電子的官能團(tuán)的實(shí)例包括羧酸、羧酸酯、 特別是酰亞胺酯類(lèi)、原酸酯、碳酸鹽、異氰酸酯、異硫氰酸酯、醛、酮、硫酮、鏈烯基、丙烯酸 酯、甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、砜、馬來(lái)酰亞胺、二硫化物、碘、環(huán)氧、磺酸酯、硫代磺酸酯、硅 烷、烷氧基硅烷以及鹵代硅烷。這些基團(tuán)的更確切的實(shí)例包括琥珀酰亞胺基酯或碳酸酯， 咪唑基酯或碳酸酯、苯并三唑酯或碳酸酯、乙烯基砜、氯乙基砜、乙烯基吡啶、吡啶基二硫化 物、碘乙酰胺、乙二醛、二酮、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、以及三氟乙磺酸酯(2，2，2-三氟乙磺 酸酯)。還包括在內(nèi)的是這些基團(tuán)的硫類(lèi)似物，例如硫酮、硫酮水合物、硫縮酮、2-噻唑烷 硫酮等，連同以上部分中任何一個(gè)的水合物或受保護(hù)的衍生物(例如，醛水合物、半縮醛、 乙縮醛、酮水合物、半縮酮、縮酮、硫縮酮、硫縮醛)。一種羧酸的“活化的”衍生物是指容易與親核體反應(yīng)的一種羧酸衍生物，它總體上 比未衍生的羧酸容易得多。活化的羧酸包括例如?；u(例如?；?、酸酐、碳酸酯以及 酯類(lèi)。此類(lèi)酯包括具有通用形式-(CO)0-N[ (CO)-]2的酰亞胺酯；例如N-羥基琥珀酰亞胺基 (NHS)酯或N-羥基鄰苯二甲酰亞胺基酯。還優(yōu)選的是咪唑基酯類(lèi)以及苯并三唑酯類(lèi)。特別 優(yōu)選的是活化的丙酸或丁酸的酯類(lèi)，如在共有的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，672，662中所描述的。這些 包括形式為_(kāi)(CH2)2_3C( = 0)0-Q的基團(tuán)，其中Q優(yōu)先選自N-琥珀酰亞胺、N-硫代琥珀酰亞 胺、N-鄰苯二甲酰亞胺、N-戊二酰亞胺、N-四氫鄰苯二甲酰亞胺、N-降冰片烯-2，3- 二羧 酰亞胺、苯并三唑、7-氮雜苯并三唑、以及咪唑。其他優(yōu)選的親電子的基團(tuán)包括琥珀酰亞胺碳酸酯、馬來(lái)酰亞胺、苯并三唑碳酸酯、 縮水甘油醚、咪唑基碳酸酯、對(duì)硝基苯基碳酸酯、丙烯酸酯、三氟乙磺酸酯、醛、以及正吡啶 二硫化物。這些親電子的基團(tuán)與親核體(例如，羥基、硫或氨基的基團(tuán))進(jìn)行反應(yīng)以產(chǎn)生不同 的鍵類(lèi)型。優(yōu)選用于本發(fā)明的是有利于形成一種水解穩(wěn)定的連接的反應(yīng)。例如，羧酸類(lèi)以及 它們的活化的衍生物(它們包括原酸酯類(lèi)、琥珀酰亞胺基酯類(lèi)、咪唑基酯類(lèi)、以及苯并三唑 酯類(lèi))與以上類(lèi)型的親核體進(jìn)行反應(yīng)來(lái)對(duì)應(yīng)地形成酯類(lèi)、硫代酯類(lèi)以及酰胺類(lèi)，其中酰胺 是最水解穩(wěn)定的。碳酸酯類(lèi)，包括琥珀酰亞胺基、咪唑基、以及苯并三唑的碳酸酯類(lèi)與氨基 進(jìn)行反應(yīng)形成氨基甲酸酯。異氰酸酯(R-N = C = 0)與羥基或氨基的基團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)而分別 形成氨基甲酸酯(RNH-C(O)-OR')或脲(RNH-C(O)-NHR')的連接。醛、酮、乙二醛、二酮 以及它們的水合物或醇加合物(即，醛水合物、半縮醛、縮醛、酮水合物、半縮酮、以及縮酮) 優(yōu)選地與酰胺進(jìn)行反應(yīng)，隨后將產(chǎn)生的亞胺進(jìn)行還原(如果希望的話(huà))來(lái)提供一個(gè)胺連接 (還原胺化)。一些親電子的官能團(tuán)包括親電子的雙鍵，親核基團(tuán)(例如硫醇)可以加成到這些 雙鍵上以形成(例如)硫醚鍵。這些基團(tuán)包括馬來(lái)酰亞胺、乙烯基砜類(lèi)、乙烯基吡啶、丙烯 酸酯類(lèi)、甲基丙烯酸酯類(lèi)以及丙烯酰胺類(lèi)。其他基團(tuán)包括可以被一個(gè)親核體代換的離去基 團(tuán)；這些包括氯乙基砜，吡啶基二硫化物(它包括一個(gè)可切割的S-S鍵)、碘乙酰胺、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、硫代磺酸酯以及三氟乙磺酸酯。環(huán)氧化物通過(guò)用一個(gè)親核體的開(kāi)環(huán)反應(yīng)進(jìn) 行反應(yīng)以形成(例如)一個(gè)醚或胺的鍵。涉及補(bǔ)充性反應(yīng)基團(tuán)(例如對(duì)以上低聚物所注意 到的那些)和小分子的反應(yīng)被用來(lái)制備本發(fā)明的共軛物。在一些情況下，該三環(huán)化合物可以不具有適合于共軛的一個(gè)官能團(tuán)。在這種情況 下，有可能對(duì)“初始的”三環(huán)化合物進(jìn)行改性(或“官能化”)這樣，它確實(shí)具有了適合于共 軛的一個(gè)官能團(tuán)。例如，如果該三環(huán)化合物具有一個(gè)酰胺基團(tuán)，但是所希望的是一個(gè)胺基 團(tuán)，則有可能將該酰胺基團(tuán)通過(guò)霍夫曼重排、克爾蒂斯重排(一旦酰胺被轉(zhuǎn)化成一種疊氮 化物)、或羅森重排(一旦酰胺被轉(zhuǎn)化成羥基酰胺，隨后使用甲苯-2-磺酰氯/堿進(jìn)行處理) 改性成一個(gè)胺基團(tuán)。有可能制備帶有一個(gè)羧基基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的一種共軛物，其中將帶有羧 基基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物偶聯(lián)到一個(gè)氨基封端的低聚乙二醇上，以提供一個(gè)共軛物，該 共軛物具有將該小分子三環(huán)化合物共價(jià)地連接到該低聚物上的一個(gè)酰胺基團(tuán)。這可以例如 將帶有羧基的小分子三環(huán)化合物與氨基封端的低聚乙二醇在一種偶聯(lián)劑(例如二環(huán)己基 碳二亞胺或“DCC”)的存在下在一種無(wú)水有機(jī)溶劑中結(jié)合來(lái)進(jìn)行。此外，有可能制備帶有一個(gè)羥基基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的一種共軛物，其中該 帶有羥基基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物被偶聯(lián)至一種低聚乙二醇鹵化物來(lái)產(chǎn)生一個(gè)醚(-0-) 連接的小分子共軛物。這可以例如通過(guò)使用氫化鈉使該羥基基團(tuán)去質(zhì)子、隨后與鹵化物封 端的低聚乙二醇進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。此外，有可能制備帶有一個(gè)羥基基團(tuán)的小分子三環(huán)部分的一種共軛物(例如像， 具有在化學(xué)式I中所包括的結(jié)構(gòu)的三環(huán)部分)，其中該帶有羥基基團(tuán)的小分子三環(huán)部分被 偶聯(lián)到帶有一個(gè)商代甲酸酯基團(tuán)[例如，CH3(0CH2CH2)n0C(0)-商素，其中該商素是氯、溴、 碘]的一種低聚乙二醇上，以產(chǎn)生一種碳酸酯[-o-c(o)-o-]連接的小分子共軛物。這可以 例如通過(guò)將一個(gè)三環(huán)部分與帶有一個(gè)鹵代甲酸酯基團(tuán)的一種低聚乙二醇在一種親核體催 化劑(例如4-二甲基氨基吡啶或“DMAP”)的存在下進(jìn)行結(jié)合來(lái)進(jìn)行，以便從而產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的 碳酸酯連接的共軛物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，有可能通過(guò)首先將該酮基團(tuán)進(jìn)行還原以形成相應(yīng)的羥基來(lái) 制備一種帶有一個(gè)酮基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的一種共軛物。因此，現(xiàn)在帶有羥基的小分 子三環(huán)化合物可以如在此所描述進(jìn)行偶聯(lián)。在仍有另一種情況下，有可能制備帶有一個(gè)胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的一種共 軛物。在一種方法中，將帶有一個(gè)胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物以及一種帶有醛的低聚物溶 解在適當(dāng)?shù)木彌_溶液中，在這之后加入一種合適的還原劑(例如NaCNBH3)。還原之后，結(jié)果 是形成了在帶有胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的胺基團(tuán)和帶有醛的低聚物的羰基碳之間的 一個(gè)胺連接。在用于制備帶有一個(gè)胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的一種共軛物的另一種方法中， 將一種帶有羧酸的低聚物與帶有胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物典型地在一種偶聯(lián)劑(例如， DCC)的存在下進(jìn)行結(jié)合。結(jié)果是形成了在帶有胺基團(tuán)的小分子三環(huán)化合物的胺基團(tuán)和帶有 羧酸的低聚物的羰基之間的一個(gè)酰胺連接。本發(fā)明的示例性的化合物包括具有以下結(jié)構(gòu)的那些 其中D 是 C 或 N;Y 是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-、-CH2CH2-、-CH = CH_，-CH2-S-、CH2-0-、CH2-NH-、-S-CH2-、-0-CH2、-NH-CH2、-HN-、-0-、-N = C-、-C = N-、 和-S-，它們是未取代的或任選地取代的；X是一個(gè)間隔部分；并且P0LY是一種水溶性、非肽的低聚物。本發(fā)明的共軛物可以呈現(xiàn)出一種降低的血腦屏障跨過(guò)速度。此外，這些共軛物保 持了至少約5 %、10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %、或更高的未改性的母體小分子藥 物的生物活性。雖然認(rèn)為所有范圍的在此披露的共軛物的行為均如所描述的，可以按如下鑒定一 個(gè)最佳大小的低聚物。首先，將自一個(gè)單分散或雙峰的水溶性低聚物獲得的一種低聚物共軛到該小分子 藥物上。優(yōu)選地，該藥物是口服可生物利用的，并且其本身呈現(xiàn)出了一個(gè)不可忽略的血腦屏 障跨過(guò)速度。接著，使用一種合適的模式確定該共軛物跨過(guò)血腦屏障的能力并且與未改性 的母體藥物的這一能力進(jìn)行比較。如果結(jié)果是有利的，也就是說(shuō)如果(例如)跨過(guò)速度顯 著地降低，則之后進(jìn)一步評(píng)估該共軛物的生物活性。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的化合物相對(duì)于該 母體藥物維持了顯著程度的生物活性，即，大于母體藥物的生物活性的約30%，或甚至更優(yōu) 選大于母體藥物的生物活性的約50%。以上步驟使用具有相同的單體類(lèi)型但是具有不同的亞單元數(shù)目的低聚物重復(fù)一 次或多次并且將結(jié)果進(jìn)行比較。然后對(duì)于每一種其跨過(guò)血腦屏障的能力與不共軛的小分子藥物相比降低的共軛 物，對(duì)其口服的生物利用率進(jìn)行評(píng)估?；谶@些結(jié)果，也就是說(shuō)，基于具有不同大小的低聚 物的共軛物與在該小分子內(nèi)的一個(gè)給定的位置或位點(diǎn)的一個(gè)給定的小分子進(jìn)行比較，有可 能確定該低聚物最有效地提供一種共軛物的大小，該共軛物在生物膜跨過(guò)、口服生物利用 率以及生物活性之間具有一個(gè)最佳的平衡。該低聚物的小尺寸使得此種篩余物能實(shí)行并且 允許人們有效地為所得共軛物的特性進(jìn)行定制。通過(guò)在低聚物的大小上進(jìn)行小的、增加的 改變并且使用一種實(shí)驗(yàn)性設(shè)計(jì)方法，人們可以有效地識(shí)別在生物膜跨過(guò)速度降低、生物活 性和口服生物利用率上具有一種有利的平衡的一種共軛物。在一些情況下，在此所描述的 一種低聚物的附接是對(duì)實(shí)際地增加藥物的口服生物利用率有效的。例如，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)可以確定一個(gè)最合適的分子大小以及 連接來(lái)改進(jìn)口服生物利用率，這是通過(guò)首先制備一系列的具有不同重量和官能團(tuán)的低聚物并且然后通過(guò)將該共軛物給予一位患者并且周期性地進(jìn)行血和/或尿樣的取樣來(lái)獲得必 要的清除特征曲線。對(duì)于每種受試的共軛物，一旦得到了一系列的清除特征曲線，就可以識(shí) 別出一種合適的共軛物。動(dòng)物模型(嚙齒類(lèi)以及犬類(lèi))也可以用來(lái)研究口服藥物的輸送。此外，非體內(nèi)的 方法包括嚙齒動(dòng)物腸外翻離體組織以及Caco-2細(xì)胞單層組織培養(yǎng)模型。這些模型對(duì)于預(yù) 測(cè)口服藥物生物利用率有用。為了確定該三環(huán)化合物或一種三環(huán)化合物與一種水溶性的、非肽聚合物的共軛物 是否具有作為一種三環(huán)化合物治療物的活性，有可能對(duì)此種化合物進(jìn)行試驗(yàn)。這些三環(huán)化 合物在哺乳動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)中具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗焦慮、鎮(zhèn)定、抗驚厥以及肌肉弛緩的作用。它們 在哺乳動(dòng)物中還表現(xiàn)出抗抑郁以及鎮(zhèn)痛作用。使用不同的細(xì)胞系對(duì)受體的體外結(jié)合研究在醫(yī)藥工業(yè)已經(jīng)成為慣例。鎮(zhèn)靜作用煙囪試驗(yàn)該試驗(yàn)確定了小鼠在30秒內(nèi)倒退并且從一個(gè)垂直玻璃圓筒 中出來(lái)的能力。以一個(gè)有效的劑量，50%的小鼠將不能做出該活動(dòng)(ED5Q)。盤(pán)子試驗(yàn)當(dāng)沒(méi)有處理時(shí)，在Petri培養(yǎng)皿中(10cm直徑，5cm高，部分地嵌入木刨 花中)的小鼠在非常短的時(shí)間爬出來(lái)。在該盤(pán)子中保持了大于3分鐘的小鼠表明是鎮(zhèn)靜的。 ED50等于處于50%的小鼠仍然在盤(pán)子中時(shí)的試驗(yàn)化合物的劑量。軸架試驗(yàn)未經(jīng)處理的小鼠在小于1分鐘內(nèi)離開(kāi)軸架爬到標(biāo)準(zhǔn)鼠箱的地板上。經(jīng) 鎮(zhèn)靜的小鼠會(huì)在該軸架上停留超過(guò)1分鐘。ED5Q(腹膜內(nèi)給藥)通過(guò)鑒定引起50%的小鼠 停留在軸架上的化合物的量來(lái)確定。尼古丁拮抗作用試驗(yàn)對(duì)6個(gè)一組的小鼠注射試驗(yàn)化合物。三十分鐘之后，對(duì)包括 對(duì)照小鼠(未處理的)的小鼠注射尼古丁水楊酸鹽(2mg/kg)。對(duì)照小鼠顯示出過(guò)度刺激， 即，(1)奔跑驚厥，接著(2)強(qiáng)直性伸肌發(fā)作，接著(3)死亡。ED5(I(腹膜內(nèi)給藥)通過(guò)鑒定 引起50%的小鼠不顯示過(guò)度刺激的化合物的量來(lái)確定。對(duì)士的寧(作為硫酸鹽)的拮抗作用該試驗(yàn)包括將該試驗(yàn)化合物口服給予小鼠， 并且30分鐘之后向腹膜內(nèi)給予3mg/kg 士的寧硫酸鹽。4小時(shí)之后的幸存者反應(yīng)了該化合 物作為肌肉弛緩物以及鎮(zhèn)痙藥的活性。一種抗抑郁劑的主要作用是使抑郁的人恢復(fù)到正常狀態(tài)。這應(yīng)該與精神興奮劑 (例如在正常人中產(chǎn)生過(guò)度刺激的安非他明)仔細(xì)區(qū)分。有多種不同的方法一直被并且仍在被用來(lái)評(píng)估抗抑郁劑的活性。總體來(lái)說(shuō)這些 方法涉及對(duì)一種鎮(zhèn)靜劑例如利血平或丁苯那嗪的拮抗作用或某種化合物(即，育亨賓或3， 4-二羥基苯丙氨酸)毒性的一種協(xié)同增加以及新的化合物的藥物作用與其他已知的抗抑 郁藥的比較。單一的試驗(yàn)不能獨(dú)自地確定一種新的化合物是否是一種抗抑郁劑，但是不同 試驗(yàn)證實(shí)的特征曲線將確立該抗抑郁劑的作用(如果存在的話(huà))。以下描述了多種此類(lèi)的 試驗(yàn)。使用氧化震顫素的降溫試驗(yàn)[1-(4-吡咯烷基-2- 丁炔基)_2_吡咯烷酮]。氧 化震顫素(連同阿撲嗎啡以及丁苯那嗪)在小鼠中產(chǎn)生了降溫反應(yīng)。這種反應(yīng)分別受抗膽 堿能的以及抗抑郁藥例如阿托品以及丙米嗪的阻擋。對(duì)小鼠向腹膜內(nèi)注射lmg的氧化震顫 素。在服藥之前以及服藥30分鐘之后經(jīng)直腸使用一個(gè)電子溫度計(jì)對(duì)體溫的降低進(jìn)行測(cè)量。 對(duì)照小鼠(僅氧化震顫素)以及處理的小鼠(氧化震顫素以及試驗(yàn)化合物)之間約四攝氏
37度的差異被用來(lái)表明試驗(yàn)化合物的拮抗作用。育亨賓聚集毒性的增強(qiáng)對(duì)小鼠注射抗抑郁藥并且30分鐘之后注射在含鹽溶液 中的30mg的鹽酸育亨賓。兩個(gè)小時(shí)之后，確定LD5Q。正常情況下沒(méi)有小鼠被30mg的育亨 賓殺死。如果育亨賓是在一種抗抑郁藥的存在下給藥的話(huà)，則觀察到了育亨賓毒性的增加。 確定試驗(yàn)化合物的ED5(1值。阿撲嗎啡咬嚙感的增強(qiáng)在經(jīng)皮下注射鹽酸阿撲嗎啡10mg/kg之前一小時(shí)，對(duì)小 鼠向腹膜內(nèi)給予試驗(yàn)化合物。然后將小鼠置于在底部襯有一種玻璃紙背襯的吸水紙的一個(gè) 塑料盒(6〃 xl 1" x5〃)中。30min結(jié)束時(shí)對(duì)紙的破壞程度從零至4進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分3和 4表示該化合物在本試驗(yàn)中是阿撲嗎啡的增效劑。為了確定該三環(huán)衍生物本身或三環(huán)的或其衍生物的共軛物是否具有活性(例 如鎮(zhèn)痛活性)，有可能對(duì)此種化合物進(jìn)行試驗(yàn)。例如，可以典型地將感興趣的化合物給予 一只小鼠并且對(duì)鎮(zhèn)痛進(jìn)行評(píng)估，如描述于Kolesnikov et al. (1999) J. Pharmacol. Exp. Ther.290 :247-252。簡(jiǎn)言之，將尾(2-3cm)的末梢部分浸入一種含有所感興趣的化合物的 DMS0溶液中持續(xù)指定的時(shí)間，典型地是兩分鐘。測(cè)試在浸入該處理溶液的尾的部分上進(jìn)行， 因?yàn)橐赃@種方式所給予的試劑的鎮(zhèn)痛作用受到暴露的尾的部分所限制。抗傷害或鎮(zhèn)痛被定 義為對(duì)于一種單個(gè)動(dòng)物的甩尾潛伏期是其基準(zhǔn)潛伏期的兩倍或更大?；鶞?zhǔn)潛伏期典型地是 在從2. 5至3. 0秒的范圍內(nèi)，其中最大中斷潛伏期為10秒，以使鎮(zhèn)痛的動(dòng)物中的組織損傷 最小?？梢源_定ED5(1值。在用于評(píng)估該三環(huán)的衍生物本身或三環(huán)化合物與一種它的衍生物的共軛物 的鎮(zhèn)痛活性的另一種方法中，可以進(jìn)行一個(gè)“扭體試驗(yàn)”。簡(jiǎn)言之，對(duì)于一個(gè)小鼠給予 (i. P-)0. 7%的乙酸溶液并且記錄十分鐘內(nèi)的扭體反應(yīng)的數(shù)目。此后，將待試驗(yàn)的化合物給 予[例如通過(guò)注射(例如皮下注射)]該小鼠并且使用以下公式作為抑制百分比對(duì)抗傷害 進(jìn)行定量％抑制=[(對(duì)照反應(yīng)-試驗(yàn)反應(yīng))/對(duì)照反應(yīng)]xlOO。本發(fā)明還包括在此提供的一個(gè)共軛物與一種藥物賦形劑相組合的藥物制劑?？偟?來(lái)說(shuō)，該共軛物本身將處于一種固體形成(例如，沉淀物)，它能與可以處于固體或液體形 式的合適的藥物賦形劑相結(jié)合。示例性的賦形劑包括但不限于來(lái)自下組的那些，該組的構(gòu)成為碳水化合物、無(wú)機(jī) 鹽類(lèi)、抗微生物劑、抗氧化劑類(lèi)、表面活性劑類(lèi)、緩沖液類(lèi)、酸類(lèi)、堿類(lèi)以及它們的組合。一種碳水化合物，例如糖、一種衍生的糖(例如糖醇、醛糖酸)、一種酯化的糖、和/ 或一種糖聚合物可以作為一種賦形劑存在。具體的碳水化合物賦形劑包括，例如單糖類(lèi)， 例如果糖、麥芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖以及類(lèi)似物；二糖類(lèi)，例如乳糖、蔗 糖、海藻糖、纖維二糖、以及類(lèi)似物；多糖類(lèi)，例如棉白糖、松三糖、麥芽糊精、葡聚糖、淀粉、 以及類(lèi)似物；以及糖醇類(lèi)，例如甘露醇、麥芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇、肌醇、以及類(lèi) 似物。該賦形劑還可以包括無(wú)機(jī)鹽或緩沖液，例如檸檬酸、氯化鈉、氯化鉀、硫酸鈉、硝酸 鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、以及它們的組合。該制劑還可以包括一種抗微生物劑用于防止或阻止微生物生長(zhǎng)。適合于本發(fā)明的 抗微生物劑的非限制性的例子包括氯化芐烷銨、芐索氯銨、苯甲醇、西吡氯銨、三氯叔丁醇、 苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、硫柳汞(thimersol)、以及它們的組合。
在該制劑中還可以存在一種抗氧化劑?？寡趸瘎╊?lèi)被用來(lái)防止氧化反應(yīng)，由此防 止該共軛物或該制劑的其他組分的退化。用于本發(fā)明的合適的抗氧化劑包括例如抗壞血酸 棕櫚酸酯、丁羥茴醚、丁羥甲苯、次磷酸、單硫代甘油、沒(méi)食子酸丙酯、亞硫酸氫鈉、甲醛次硫 酸鈉、焦亞硫酸鈉、以及它們的組合?！N表面活性劑可以作為一種賦形劑存在。示例性的表面活性劑包括聚山梨醇 酯類(lèi)，例如“吐溫20”和“吐溫80”以及普流尼克例如F68和F88 (兩者均是自BASF、Mount 01ive、NJ可得的)；山梨聚糖酯類(lèi)；類(lèi)脂，例如磷脂，例如卵磷脂以及其他磷脂酰膽堿酶，磷 脂酰乙醇胺，脂肪酸以及脂肪酸酯；類(lèi)固醇，例如膽固醇；以及螯合劑，例如EDTA、鋅以及其 他此類(lèi)合適的陽(yáng)離子。
藥學(xué)上可接受的酸或堿可以作為一種賦形劑在本發(fā)明的制劑中存在。可以在本發(fā) 明中使用的酸的非限制性實(shí)例包括選自下組的那些酸，該組的構(gòu)成為鹽酸、乙酸、磷酸、檸 檬酸、馬來(lái)酸、乳酸、甲酸、三氯乙酸、硝酸、高氯酸、磷酸、硫酸、富馬酸、以及它們的組合。合 適的堿的例子包括但不限于選自下組的堿，該組的構(gòu)成為氫氧化鈉、乙酸鈉、氫氧化銨、氫 氧化鉀、乙酸銨、乙酸鉀、磷酸鈉、磷酸鉀、檸檬酸鈉、富馬酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、富馬酸鉀， 以及它們的組合。在該組合物中的共軛物的量將取決于多個(gè)因素而改變，但是當(dāng)該組合物在一個(gè)單 位劑量的容器中存儲(chǔ)時(shí)它最佳地將是一個(gè)治療上有效的劑量。治療上有效的劑量可以通過(guò) 重復(fù)地給予漸增量的共軛物實(shí)驗(yàn)性地進(jìn)行確定以便確定哪一個(gè)量產(chǎn)生臨床上所希望的終 點(diǎn)ο在組合物中任何單獨(dú)的賦形劑的量都將取決于該賦形劑的活性以及該組合物的 具體需要而改變。典型地，任何單獨(dú)的賦形劑的最佳量都是通過(guò)常規(guī)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，即通過(guò)制 備含有不同量的賦形劑(范圍是從低至高)的組合物、檢查穩(wěn)定性以及其他參數(shù)、并且然后 確定獲得最佳的性能而沒(méi)有顯著不良作用時(shí)所處的范圍。然而，總的來(lái)說(shuō)，賦形劑將在該組合物中以按重量計(jì)約至約99%、優(yōu)選按重量 計(jì)從約5% -98%，更優(yōu)選按重量計(jì)從約15% -95%的賦形劑的量存在，其中濃度最優(yōu)選是 小于按重量計(jì)30%。這些上述的藥物賦形劑連同其他賦形劑以及有關(guān)藥物組合物的總體傳授內(nèi)容 描述于“Remington :The Science & Practice ofPharmacy"，19th ed.、Williams & Williams，(1995)，the" Physician' sDesk Reference"，52nd ed. ,Medical Economics， Montvale，NJ(1998), and Kibbe，A. H.，Handbook of Pharmaceutical Excipients， 3rdEdition，American Pharmaceutical Association，Washington、D.C. ，2000。這些藥物組合物可以采取任何數(shù)目的形式并且本發(fā)明在此方面不受限制。示例 性的制劑最優(yōu)選地是處于適合于口服給藥的形式，例如片劑、膠囊形片劑、膠囊、軟膠囊、含 片、分散體、懸浮體、溶液、酏劑、糖漿、錠劑、經(jīng)皮貼劑、噴霧劑、栓劑以及粉末?？诜┬螌?duì)于經(jīng)口是活性的那些共軛物是優(yōu)選的，并且包括片劑、膠囊形片劑、膠 囊、軟膠囊、懸浮體、溶液、酏劑、以及糖漿，并且還可以包括任選膠囊化的多種顆粒、珠粒、 粉末或丸劑。此種劑型是使用藥物配方的領(lǐng)域中已知的常規(guī)方法來(lái)制備的并且描述于相關(guān) 的文件中。片劑和膠囊形片劑，例如，可以使用標(biāo)準(zhǔn)的片劑處理程序和設(shè)備來(lái)生產(chǎn)。當(dāng)制備含有在此描述的共軛物的片劑或膠囊形片劑時(shí)，直接的壓縮以及造粒技術(shù)是優(yōu)選的。除了共 軛物之外，這些片劑以及膠囊形片劑總體上包括非活性的藥學(xué)上可接受的載體材料，例如 粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、填充劑、穩(wěn)定劑、表面穩(wěn)定劑、著色劑、流平劑以及類(lèi)似物。粘合劑 被用來(lái)賦予一個(gè)片劑粘合的性質(zhì)并且以此確保該片劑仍是完整的。合適的粘合劑材料包括 但不限于淀粉(包括玉米淀粉以及預(yù)膠凝淀粉)、明膠、糖類(lèi)(包括蔗糖、葡萄糖、右旋糖、 以及乳糖)、聚乙二醇、蠟類(lèi)、以及天然的以及合成的膠質(zhì)，例如阿拉伯膠海藻酸鈉、聚乙烯 吡咯酮、纖維素聚合物(包括羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、 乙基纖維素、羥乙基纖維素、以及類(lèi)似物)以及硅酸鎂鋁。潤(rùn)滑劑被用來(lái)促進(jìn)片劑的制造， 從而促進(jìn)粉末流動(dòng)并且當(dāng)防止排壓時(shí)顆粒加帽(即，顆粒破損)。有用的潤(rùn)滑劑是硬脂酸 鎂、硬脂酸鈣以及硬脂酸。崩解劑被用來(lái)促進(jìn)片劑的崩解，并且總體上是淀粉、粘土、纖維 素、褐藻膠、膠質(zhì)或交聯(lián)的聚合物。填充劑包括(例如)材料類(lèi)，例如二氧化硅、二氧化鈦、 氧化鋁、滑石、高嶺土、粉狀纖維素、以及微晶纖維素，連同水溶性的材料類(lèi)，例如甘露醇、尿 素、蔗糖、乳糖、右旋糖、氯化鈉以及山梨糖醇。正如在本領(lǐng)域中所熟知的，穩(wěn)定劑被用來(lái)抑 制或延緩藥物的分解反應(yīng)(包括例如氧化反應(yīng))。膠囊也是優(yōu)選的口服劑型，在這種情況下該含共軛物的組合物可以被包膠囊成一種液體或凝膠的形式(例如在軟膠囊的情況下)或固體的形式(包括顆粒，例如粒料、珠 粒、粉末或球粒)。合適的膠囊包括硬和軟膠囊，并且總體上由明膠、淀粉或一種纖維材料制 成。兩片的硬質(zhì)明膠膠囊優(yōu)選是被密封，例如使用明膠的帶子或類(lèi)似物。包括處于基本干燥的形式的腸胃外的配方(典型地作為一種凍干物或沉淀物，它 可以處于一種粉末或餅的形式)連同用于注射的配制品，它們典型地是液體并且要求有將 該干燥形式的腸胃外的配制品進(jìn)行復(fù)水的步驟。用于將固體組合物在注射之前進(jìn)行復(fù)水的 合適的稀釋劑的實(shí)例包括抑菌性注射用水、在水中的5%的右旋糖、磷酸鹽緩沖鹽水、林格 氏溶液、鹽水、無(wú)菌水、去離子水以及它們的組合。在一些情況下，旨在用于腸胃外給藥的組合物可以采取非水溶液、懸浮液、或乳液 的形式，各自典型地是無(wú)菌的。無(wú)水溶劑或載體的例子是丙二醇、聚乙二醇、植物油，例如橄 欖油以及玉米油、明膠、以及可注射的有機(jī)酯類(lèi)，例如油酸乙酯。在此描述的腸胃外的配方還可以包括輔助劑類(lèi)，例如保存、濕潤(rùn)、乳化以及分散的 試劑。通過(guò)摻入一種殺菌劑、過(guò)濾通過(guò)一個(gè)細(xì)菌不通過(guò)的濾器、輻射或加熱將這些配制品滅菌。該共軛物還可以通過(guò)皮膚使用常規(guī)的經(jīng)皮貼劑或其他經(jīng)皮遞送系統(tǒng)來(lái)給藥，其中 該共軛物包含在一個(gè)層疊的結(jié)構(gòu)中，該結(jié)構(gòu)作為藥物遞送的裝置貼附在皮膚上。在這樣一 種結(jié)構(gòu)中，該共軛物包含在位于上背襯層之下的一個(gè)層(或“存儲(chǔ)體”)中。該層疊的結(jié)構(gòu) 可以包含一個(gè)單個(gè)的存儲(chǔ)體，或者它可以包含多個(gè)存儲(chǔ)體。該共軛物還可以被配制成一種栓劑用于直腸給藥。就栓劑而言，該共軛物與一種 栓劑基體材料相混合，該材料是(例如一種在室溫下仍為固體但是在體溫下軟化、熔融或 溶解的賦形劑)例如可可黃油(可可豆油)、聚乙二醇、甘油化的明膠、脂肪酸、以及它們的 組合。栓劑可以(例如)進(jìn)行以下步驟(不必為所示出的順序)來(lái)進(jìn)行制備將該栓劑基 體材料熔融以形成一種熔體；合并入該共軛物(在該栓劑基體材料熔融之前或之后)；將該 熔體倒入一個(gè)模具中；冷卻該熔體(例如將含熔體的模具放置在室溫環(huán)境中)以便由此形成栓劑；并且從該模具中移除這些栓劑。本發(fā)明還提供了將如在此提供的共軛物給予患有對(duì)使用共軛物進(jìn)行治療有響應(yīng) 的一種病的一位患者的方法。該方法包括總體上經(jīng)口給予一種治療有效量的共軛物(優(yōu)選 作為一種藥物制劑的部分來(lái)提供)。還考慮了其他給藥模式，例如肺部、鼻、口腔、直腸、舌 下、經(jīng)皮、以及腸胃外。如在此所使用的，術(shù)語(yǔ)“腸胃外”包括皮下、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、 心內(nèi)、鞘內(nèi)、以及肌內(nèi)注射，連同輸注注射。
在其中使用腸胃外給藥的情況下，可能必須的是使用比以上描述的那些多少更 大的低聚物，其中分子量的范圍是從約500至30K道爾頓(例如具有的分子量約為500、 1000、2000、2500、3000、5000、7500、10000、15000、20000、25000、30000 或甚至更高)給藥的方法可以用來(lái)治療通過(guò)給予具體的共軛物可以得到治療或防止的任何病 癥。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員理解一種具體的共軛物可以有效地治療的那些病癥。待給予的 實(shí)際劑量可以改變，這取決于受試者的年齡、重量以及總體病癥，連同待處理的病癥的嚴(yán)重 程度，健康專(zhuān)家的判斷、以及有待給予的共軛物。治療有效的量對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是 已知的和/或描述于相關(guān)的文件和文獻(xiàn)中?？傮w來(lái)說(shuō)，一個(gè)治療上有效的量的范圍是從約 0. OOlmg至lOOOmg，優(yōu)選它的劑量是從0. Olmg/天至750mg/天，并且更優(yōu)選它的劑量是從 0. IOmg/ 天至 500mg/天。任何給出的共軛物的單位計(jì)量(再次，優(yōu)選地作為一種藥物制劑的一部分來(lái)提 供)可以按不同的給藥方案來(lái)確定，這取決于臨床醫(yī)生的判斷、患者的需要，等等。具體的 劑量方案對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是已知的或可以使用常規(guī)的方法在實(shí)驗(yàn)上進(jìn)行確定。示 例性的劑量方案包括但不限于一天給藥五次、一天四次、一天三次、一天兩次或一天一次、 一周三次、一周兩次、一周一次、一個(gè)月兩次、一個(gè)月一次、以及它們的任何組合。一旦達(dá)到 臨床終點(diǎn)，則停止該組合物的給藥。給予本發(fā)明的共軛物的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于可以實(shí)現(xiàn)相對(duì)于母體藥物的首過(guò)代謝的降 低。這樣一個(gè)結(jié)果對(duì)于許多口服給藥的藥物是有利的，這些藥物基本上是通過(guò)穿越腸而代 謝的。以這種方式，共軛物的清除可以通過(guò)選擇低聚物分子大小、連接、以及提供所希望的 清除特性的共價(jià)附接的位置來(lái)調(diào)整。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以基于在此的傳授內(nèi)容確定 低聚物的理想的分子大小。對(duì)于一個(gè)共軛物，與對(duì)應(yīng)的非共軛的小藥物分子相比，優(yōu)選的首 過(guò)代謝的降低包括至少約10%、至少約20%、至少約30、至少約40、至少約50%、至少約 60%、至少約70%、至少約80%、以及至少約90%。因此，本發(fā)明提供了用于降低一種活化劑的代謝的一種方法。該方法包括以下步 驟提供單分散或雙峰的共軛物，每種共軛物包括一個(gè)部分，該部分衍生自通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的 連接共價(jià)地附接到一種水溶性的低聚物上的一種小分子藥物，其中所述共軛物與沒(méi)有連接 到該水溶性的低聚物上的小分子的代謝速度相比，顯示出降低速度的代謝；并且將該共軛 物給予一位患者。典型地，給藥是通過(guò)一種給藥類(lèi)型進(jìn)行，該類(lèi)型選自構(gòu)成如下的組口服 給藥、經(jīng)皮給藥、口腔給藥、轉(zhuǎn)化粘液質(zhì)給藥、經(jīng)陰道給藥、直腸給藥、腸胃外給藥、以及肺部 給藥。雖然對(duì)于降低多種類(lèi)型的代謝(包括階段I以及階段II的代謝都可以被降低) 是有用的，但是當(dāng)小分子藥物是通過(guò)肝酶(例如一種或多種細(xì)胞色素P450同種型)和/或 一種或多種腸酶代謝時(shí)，這些共軛物是特別有用的。
在此引用的所有文章、書(shū)籍、專(zhuān)利、專(zhuān)利公布、以及其他的出版物均通過(guò)引用以其 整體結(jié)合在此。在本說(shuō)明書(shū)的傳授內(nèi)容與通過(guò)引用而結(jié)合的技術(shù)不一致的情況下，本說(shuō)明 書(shū)中的傳授內(nèi)容應(yīng)優(yōu)先。實(shí)驗(yàn)
應(yīng)理解的是，雖然已經(jīng)對(duì)本發(fā)明連同某些優(yōu)選的并且具體的實(shí)施方案進(jìn)行了描 述，以上的說(shuō)明連同以下實(shí)例旨在說(shuō)明而非限制本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明的范圍之內(nèi)的其 他方面、優(yōu)點(diǎn)以及變更對(duì)于本發(fā)明所涉及的本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言將是清楚的。在所附的實(shí)例中涉及的所有非-PEG的化學(xué)試劑，除非另外說(shuō)明，否則都是可商購(gòu) 的。PEG-鏈節(jié)的制備描述于例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2005/0136031中。所有的1H NMR(核磁共振)數(shù)據(jù)均是通過(guò)NMR光譜儀產(chǎn)生。某些化合物連同這些化合物的來(lái)源的清單在以下提供。實(shí)例1地昔帕明小PEG共軛衍生物 地昔帕明、亞氨基二芐、氫化鈉(NaH)、溴_3_氯丙烷、氨基鋰(LiNH2)自 Sigma-Aldrich (St Louis,Μ0)購(gòu)買(mǎi)。DCM 是從 CaH2 蒸餾而得。DMF(無(wú)水)、甲苯(無(wú)水)、 以及其他有機(jī)溶劑按它們購(gòu)買(mǎi)的樣子來(lái)使用。將地昔帕明(2. 00g、6. 60mmol)溶解在甲醇(40mL)以及飽和NaHCO3(80mL)中。 將反應(yīng)在室溫下保持30分鐘并且溶液？!1是> 10。在減壓下除去甲醇之后，將該水溶液用 DCM(50mL+25mLx2)萃取。將合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥、過(guò)濾、并且在減壓下除去溶劑。將 產(chǎn)生的殘余物通過(guò)真空干燥固化過(guò)夜并且獲得一種淡黃色樣品(1.79g，> 100%產(chǎn)率)。將以上游離的地昔帕明(170mg、0. 64mmol)溶解在DMF(3. 2mL)中。加入NaH(46mg、 1. 92mmol、3eq)并且將反應(yīng)在室溫下保持5分鐘。加入HiPEG3-Br (283 μ L、1. 28mmol、2eq)并 且允許將反應(yīng)攪拌過(guò)夜(16h)。一旦獲得澄清的溶液，則將該反應(yīng)用NH4Cl (50mL)淬滅并且 用DCM(15mLx3)萃取。將有機(jī)相合并，并且用Na2SO4干燥。過(guò)濾之后，將DCM蒸發(fā)掉并且將 DMF在高真空下旋蒸。將產(chǎn)生的殘余物裝入一個(gè)Biotage 12M柱中并且用DCM中2-20%的 甲醇在15CV之內(nèi)進(jìn)行純化。在254nm下對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行監(jiān)控并且收集(194. 7mg、74%產(chǎn)率)。 還收集了產(chǎn)物與起始材料的一個(gè)混合物并且將其保存。HiPEG5-Br和HiPEG8-Br被用于使用類(lèi)似程序的其他的地昔帕明衍生物的合成。產(chǎn) 品的質(zhì)量使用NMR、分析-HPLC進(jìn)行表征并且用LC-MS/MALDI識(shí)別。地昔帕明(5)=1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 77 (2Η, q, J = 6. 9Hz)，2· 37 (3H，s)，2.61 (2H, t, J = 6. 9Hz)，3. 16 (3H, s)，3. 79 (2H，t, J = 6. 9Hz)，6. 91 (2H，dt, J = 2. 1， 7. 5Hz)，7· 07-7. 12 (6H, m)。mPEG3-地昔帕明(6a) (η = 3) :Rf = 0· 36 (DCM MeOH=IO 1) ,RP-HPLC(betasil C18,0. 5mL/min, 10-80% ACN in 10min)6. 49min,MALDI (MH+) 413. 3 ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 73 (2H, bs)，2. 19 (3H, bs)，2. 44 (2H, bs)，2. 51 (2H, bs)，3. 15 (4H, s)，3. 37 (3H, s)，
3.51-3. 66 (10H, m)，3. 76 (2H, t, J = 6. 6Hz)，6. 90 (2H, dt, J = 1. 2,7. 5Hz)，7. 06-7. 15 (6H, m)。mPEG5-地昔帕明(6b) (n = 5) :Rf = 0. 34(DCM MeOH= 10 1) ,RP-HPLC(betasil C18，0. 5mL/min，10-80 % ACN in IOmin) 8. 3Imin，MALDI (MNa+) 523. 3 ; 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 74 (2Η, bs)，2. 18 (3Η, bs)，2. 43 (2H, bs)，2. 50 (2H, bs)，3. 15 (4H, s)，3. 38 (3H, s) , 3. 49-3. 66 (18H, m) ,3. 76 (2H, t, J = 6. 6Hz) ,6. 90 (2H, dt, J=L 2,7. 5Hz)， 7. 06-7. 15 (6H, m)。mPEG8-地昔帕明(6C) (n = 8) :Rf = 0. 32 (DCM MeOH= 10 1) ,RP-HPLC (betasil C18，0. 5mL/min，10-80 % ACN in 10min)8. 35min, MALDI (MNa+) 655. 5 ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 74 (2H, bs)，2. 18 (3H, bs)，2. 43 (2H, bs) ,2. 51 (2H, bs)，3. 15 (4H, s)，3. 37 (3H, s)，3. 38(3H，s)，3· 52-3. 66(30H，m)，3. 76(2H，t，J = 6. 6Hz)，6· 90(2H，dt，J = 1. 2,7. 5Hz)， 7. 06-7. 15 (6H, m)。仲胺衍生物的總體合成 在一個(gè)MCE微波反應(yīng)管中，將亞氨基二芐(1. 95gU0mmol)懸浮在甲苯(IOmL)中。 在N2下將該溶液進(jìn)行保護(hù)。加入1-溴-3-氯丙烷(1. 48mL、15mmol)之后，該溶液在室溫下 變澄清。然后加入LiNH2 (276mg、12mmol)并且將試管密封。微波反應(yīng)在120°C下進(jìn)行18hrs。 反應(yīng)使用飽和的NaHCO3水溶液淬滅并且用EtOAc (50mLx2)萃取。將合并的有機(jī)相用MgSO4 干燥，并且在減壓下除去溶劑。產(chǎn)生的殘余物裝入一個(gè)Biotage 25M柱中并且用1-6%的甲 醇在己烷中用多于15CV進(jìn)行洗脫。然后使用純的樣品部分進(jìn)行NMR，并且將所有其他部分 的混合物合并。在高真空下干燥過(guò)夜之后，收集淺黃色產(chǎn)品(2.578，95%的產(chǎn)率)。mPEG7-地昔帕明將以上的亞氨基二芐的烷基化產(chǎn)物混合物(325mg、l. 2mmol) 與 mPEG7-NH2 (340 μ L、L(Mimol) —起加入一個(gè)微波反應(yīng)管中。加入 K2CO3 (207mg、1. 5讓ol)與H20(lmL)。將起始材料懸浮在水相的頂層，因?yàn)樵诩訜岚l(fā)生之前難以攪拌。微波反應(yīng)在 120°C繼續(xù)進(jìn)行2hrs。該反應(yīng)通過(guò)TLC監(jiān)測(cè)mPEG_NH2的消失。該反應(yīng)然后使用NaHCO3水 溶液稀釋并且用DCM(10mLx3)萃取。將合并的有機(jī)相用MgSO4干燥，將其過(guò)濾，并且在減壓 下除去溶劑。將產(chǎn)生的殘余物裝入一個(gè)Biotage 25M柱中并且用2-18%的甲醇在DCM中用 多于20CV進(jìn)行純化。過(guò)夜干燥之后，收集無(wú)色的產(chǎn)物(193mg、34%的產(chǎn)率)。所希望的產(chǎn) 物通過(guò)NMR和LC-MS鑒定并且分析-HPLC表明純度是大于98%。HiPEG3-地昔帕明反應(yīng)以一種與以上類(lèi)似的方式進(jìn)行。然而，該產(chǎn)物混合物包含 一個(gè)單烷基化產(chǎn)物與二烷基化產(chǎn)物之比幾乎為1 1的產(chǎn)物，這些產(chǎn)物通過(guò)TLC不能分離。 通過(guò)Biotage快速色譜法的純化(12M反相柱，25-100% CAN在16CV內(nèi))產(chǎn)生了所希望的、 所具有的純度大于98%的產(chǎn)物(187mg、25%的產(chǎn)率)。5-(3-氯-丙)-10，11- 二 氫-5H- 二苯并[b，f]氮雜萆(30) =Rf = 0.22(Hex EtOAc = 16 1), RP-HPLC(betasil C18，0. 5mL/min，10—80 % ACN in 10min)9. 55min, LC-MS (ESI, MH+) 272. 2 ； 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 04 (2H, q, J = 6. 6Hz)， 3. 16 (4H, s)，3. 57 (2H, t, J = 6. 3Hz)，3. 90 (2H, t, J = 6. 3Hz)，6. 93 (2H, dt, J= 1. 2, 6. 9Hz)，7· 07-7. 16 (6H, m)。N-mPEG3-3-(10,11- 二氫-二苯并[b，f]氮雜革 _5_ 基)-丙胺(34a) =Rf =0. 43(DCM MeOH= 10 1), RP-HPLC(betasil C18，0. 5mL/min，10—80 % ACN in 10min)6. 49min, LC-MS (ESI, MH+) 399. 3 ；1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 05-2. 13 (2H, m)， 3. 05 (4H, bs)，3. 15 (4H, s)，3. 31 (3H, s)，3. 43-3. 52 (6H, m)，3. 60-3. 64 (2H, m)，3. 76 (2H, t, J = 6. OHz)，3. 85 (2H, t, J = 6. OHz)，6. 94 (2H, t, J = 7. 4Hz)，7. 04-7. 17 (6H, m)。N-mPEG7-3-(10,11- 二氫-二苯并[b，f]氮雜革 _5_ 基)-丙胺(34b) =Rf =0.45(DCM MeOH= 10 1), RP-HPLC(betasil C18，0. 5mL/min，10—80 % ACN in 10min)6. 39min, LC-MS (ESI, MH+) 575. 4 ；1H NMR(300MHz， CDCl3) δ 1. 92-1. 96 (2H, m)， 2. 81-2. 88 (4H, m)，3. 14 (4H, s)，3. 36 (3H, s)，3. 51-3. 67 (26H, m)，3. 81 (2H, t, J = 6. 3Hz)， 6. 91 (2H, t, J = 7. 2Hz)，7. 05-7. 14 (6H, m)。pKa 和 LogP 的測(cè)定
mPEG3-N-地昔帕明 8. 47 3. 41 mPEG5-N-地昔帕明 8.55 3.11 mPEG8-N-地昔帕明 8. 66 2. 77 mPEG3-NH-地昔帕明 8. 96 3. 14 實(shí)例2mPEG-n-卡馬西平的合成 將卡馬西平(118mg、0.5mmol)溶解在5ml 1"冊(cè)中并且將妝!1(60%、6011^、1. 5mmol) 加入到該溶液中。在加入HiPEGn-Br [η = 3、5、7] (0. 6mmol)之前，將混合物攪拌5min。將 產(chǎn)生的混合物在室溫下攪拌14h。然后除去固體并且加入150ml的二氯甲烷。有機(jī)相用 H20(2X 150mL)洗滌，用Na2SO4干燥并且將溶劑在減壓下除去。粗產(chǎn)品使用柱色譜純化 (Biotage 快速色譜法系統(tǒng)，[A:MeOH、l-4% (20CV)、4_6% (IOCV)、B :DCM]。所希望的產(chǎn)物 作為粘性油獲得(產(chǎn)率60-80% )。mPEG3-N-卡馬西平1H NMR(300MHz、CDCl3) δ 7. 48-7. 31 (m，8H)，6· 92(s，2H)， 3. 59(m，2H)，3. 53(m，6H)，3. 46 (m，2H)，3. 38(s，3H)，3. 34 (m, 2H)。LC-MS :383. 2 (M+H)+。mPEG5-N-卡馬西平1H NMR(300MHz、CDCl3) δ 7. 48-7. 31 (m，8H)，6· 92(s，2H)， 3. 66-3. 54 (m, 16H)，3. 45 (m，2H)，3. 38(s，3H)，3. 33 (m, 2H)。LC-MS :471. 2 (M+H)+。mPEG7-N-卡馬西平1H NMR(300MHz、CDCl3) δ 7. 48-7. 31 (m，8H)，6· 92(s，2H)， 3. 66-3. 55 (m, 18H)，3· 54-3. 51 (m，6H)，3· 44(m，2H)，3· 38(s，3H)，3· 31 (m，2H)。LC-MS 559. 3 (M+H)+。實(shí)例3 合成HiPEGn-N-阿米替林共軛物
合成5-環(huán)丙基-10，11- 二氫-5Η- 二苯并[a，d]環(huán)庚烯_5_醇(3)在裝有攪拌器的一個(gè)三頸圓底燒瓶中加入(0. 243g、0. 009mol)的鎂屑以及2. 5mL 的干THF。將反應(yīng)攪拌以允許金屬溶解。在這一點(diǎn)上將溫度升高到60°C并且滴加入環(huán)丙基 溴(1. 21g、0. OlOmol)。允許反應(yīng)混合物在70°C回流1. 5h并且然后降低到60°C。然后滴加 入(1.04g，0.005mol)的10，11-二氫-二苯并[a，d]環(huán)庚烯_5_酮。一旦加入，溶液顏色 變成紫色。加入完成之后將溫度升高到70°C。將反應(yīng)再回流2h并且使用HPLC來(lái)檢測(cè)反應(yīng) 進(jìn)展。加入氯化銨/H2O(7. 5mL)以淬滅該反應(yīng)并且將該燒瓶置于一個(gè)冰浴中。將產(chǎn)生的溶 液進(jìn)行過(guò)濾并且將濾液轉(zhuǎn)移到一個(gè)250-mL的添加有DCM(IOOmL)的分液漏斗中。然后最后 加入NaCVH2O溶液(SOmL)。將有機(jī)相除去并且用Na2SO4干燥2h。將溶劑在減壓下除去并 且將產(chǎn)物在真空下干燥過(guò)夜。1H NMR和LC/MS證實(shí)了該產(chǎn)物。(產(chǎn)率約52% )合成-5-(3_溴-亞丙基)-10，11_ 二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯(4)在一 個(gè)100-mL的圓底燒瓶中加入5-環(huán)丙基-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯_5_醇 (0. 130g、0. 0006mol)與ImL的乙酸。在反應(yīng)混合物冷凍到10°C的時(shí)刻允許將該固體溶解。 然后向該燒瓶中加入一個(gè)33%的鹽酸溶液(0. 5mL的鹽酸以及0. 5mL的乙酸；總計(jì)ImL)。 允許將反應(yīng)再攪拌30min，同時(shí)將反應(yīng)通過(guò)HPLC進(jìn)行監(jiān)控。然后將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到一個(gè) 分液漏斗中并且加入DCM(IOOmL)。收集有機(jī)層并且用H2O(IxlOOmL)洗滌并且用Na2SO4干燥2hrs。產(chǎn)生的產(chǎn)物用MeOH/DCM(Bi0tage 25M柱)通過(guò)硅膠快速柱色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn) 物通過(guò)1H NMR來(lái)證實(shí)。(產(chǎn)率約62% )合成mPEGn-N-阿米替林(6)在一個(gè)100-mL圓底燒瓶中加入(0. 120g、0. 0004mol) 的5-(3-溴-亞丙基)-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯與丙酮(ImL)直至固體完全 溶解。然后加入(0. 137g、0. 0008mol)的 PEGn-甲基胺。加入 K2CO3 (0. 267g、0. 002mol)與丙 酮(5mL)。將該反應(yīng)混合物加熱至70°C回流。8h之后通過(guò)HPLC檢測(cè)反應(yīng)完全。冷卻之后 向該燒瓶中加入DCM(IOOmL)并且將產(chǎn)生的溶液置于一個(gè)分液漏斗中。除去有機(jī)層并且用 NaCVH2O溶液(IxlOOmL)洗滌并且用Na2SO4干燥2hrs。產(chǎn)生的產(chǎn)物用MeOH/DCM(Biotage 25M柱)通過(guò)硅膠快速柱色譜法進(jìn)行純化以獲得所希望的產(chǎn)物。(產(chǎn)率約13-20% )mPEG3-N-阿米替林1H-WrGOOMHz, DMS0-d6) δ 7. 24-7. 02 (m, 8H)，5. 79 (t, 1H)， 3. 50-3. 41 (m, 10H)，3. 18 (s, 3H)，2. 75 (br, 4H)，2. 41-2. 55 (m, 5H)，2. 13 (br, 2H)，2. 04 (s, 3H) ；LC-MS 計(jì)算 409. 4 ；發(fā)現(xiàn) 410. 4 (MH+)。mPEG5-N-阿米替林1H-WR(SOC)MHz, DMS0-d6) ； δ 7. 22-7. 14 (m, 8H)，5. 85 (t, 1H)， 3. 50-3. 45 (m, 20H)，3. 23 (s, 3H)，2. 90 (br, 4H)，2. 51-2. 50 (m, 5H)，2. 41 (br, 2H)，2. 01 (s， 3H) ；LC-MS 計(jì)算 497. 4 ；發(fā)現(xiàn) 498. 4 (MH+)。mPEG6-N-阿米替林1H-WR(SOC)MHz, DMS0-d6) δ 7. 21-7. 12(m，8H)，5· 82 (t, 1H)， 3. 51-3. 43 (m, 24H)，3. 23 (s, 3H)，2. 90 (br, 4H)，2. 51-2. 50 (m, 5H)，2. 41 (br, 2H)，2. 07 (s, 3H) ；LC-MS 計(jì)算 541. 4 ；發(fā)現(xiàn) 542. 3 (MH+)。mPEG7-N-阿米替林1H-WR(SOC)MHz, DMS0-d6) δ 7. 35-7. 15(m，8H)，5· 90 (t, 1H)， 3. 51-3. 29(m，28H)，3. 23(s，3H)，2· 86(br,4H)2. 79-2. 42 (m，5H)，2. 36(br,2H) ,2. 10 (s， 3H) ；LC-MS 計(jì)算 585. 4 ；發(fā)現(xiàn) 586. 3 (MH+)。實(shí)例4PEG-多塞平的合成 PEG-多塞平的合成(另一種方法):
實(shí)例5組胺受體結(jié)合測(cè)定使用放射性配體結(jié)合測(cè)定在由CH0細(xì)胞(這些細(xì)胞表達(dá)了重組人類(lèi)HI、H2、H3或 H4組胺受體)制備的膜中對(duì)阿米替林以及四種mPEG共軛物的受體結(jié)合親和力進(jìn)行評(píng)估。在可變濃度的試驗(yàn)化合物的存在下通過(guò)用一種固定濃度的放射性配體孵育膜來(lái) 進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)。所使用的放射性配體對(duì)于每種受體亞型是特異的，并且測(cè)定條件說(shuō)明 于表2中。孵育之后，將這些膜洗滌并且測(cè)量結(jié)合的放射活性。在過(guò)量未經(jīng)標(biāo)記的配體的 存在下對(duì)非特異性結(jié)合進(jìn)行測(cè)量；將該值從總結(jié)合中減去，得到在每個(gè)試驗(yàn)化合物濃度下 的特異性結(jié)合。IC5(I值獲自劑量反應(yīng)曲線的非線性回歸分析，并且僅對(duì)于在所測(cè)試的最高濃度下 顯示出大于50%結(jié)合抑制的那些化合物進(jìn)行計(jì)算。使用Cheng PrusofT校正獲得&，該校 正使用了在相同的測(cè)定條件下預(yù)先確定的實(shí)驗(yàn)性Kd值。阿米替林以及mPEG-阿米替林共軛物的結(jié)合親和力示于表1。阿米替林以及 PEG-阿米替林共軛物展示出結(jié)合HI受體的高親和力。PEG共軛導(dǎo)致了在結(jié)合親和力上小 于20倍的的降低，并且這一作用是依賴(lài)于PEG大小的。對(duì)于所測(cè)試的全部分子，在H2受體上的結(jié)合親和力比在HI受體上的結(jié)合親和力 低幾乎3個(gè)數(shù)量級(jí)。mPEG共軛物還在H2受體上產(chǎn)生了結(jié)合親和力的降低，并且這一作用也 是依賴(lài)于PEG大小的。對(duì)于在H2受體上的mPEG-6和mPEG_7阿米替林，不能確定&值，因?yàn)樵谒鶞y(cè)試的最高濃度下不能觀察到大于50%的抑制。在H2受體上的結(jié)合親和力的損失(大于63倍， 對(duì)比母體)大于在HI受體上的結(jié)合親和力的損失(小于23倍，對(duì)比母體)，提示mPEG共 軛物增加了 HI H2受體的選擇性，使這些mPEG-阿米替林共軛物對(duì)HI受體更具有選擇 性。在所測(cè)試的最高濃度下沒(méi)有檢測(cè)到對(duì)H3和H4受體的可測(cè)量的結(jié)合。對(duì)阿米替林以及 mPEG-阿米替林共軛物的受體結(jié)合選擇性是HI >>> H2 > H3 = H4。表1.結(jié)合親和力總結(jié) 不能確定在H3和H4受體上的&值，因?yàn)樵谒鶞y(cè)試的最高濃度下獲得了小于50% 的放射性配體結(jié)合的抑制。表2.測(cè)定條件受體來(lái)源表達(dá)單個(gè)的組胺H1、H2、H3、或H4受體的人類(lèi)重組CH0或CHO K1細(xì)胞。
實(shí)例 _通道測(cè)定
共軛物對(duì)鈉通道的作用以便在分離的心臟
玍體外評(píng)估了卡馬西平以及它的.細(xì)胞(人類(lèi)心房肌細(xì)胞)以及神經(jīng)元細(xì)胞(大鼠背根神經(jīng)節(jié))中使用全細(xì)胞膜片鉗法來(lái)確 定它們的阻斷特性。人類(lèi)肌細(xì)胞獲自人類(lèi)右心耳的樣品，它是在手術(shù)過(guò)程中從經(jīng)受心肺分流術(shù)的患者 獲得的。該程序產(chǎn)生了桿狀的、離子耐受的細(xì)胞，這些細(xì)胞在分離之后24小時(shí)使用(Crumb et al. 、1995、Am J Physiol268 :H1335_H1342)。背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元是從出生后14-18天的大鼠制備的(Blair andBean, 2002, J Neurosci 22:10277-10290)。用異氟醚將動(dòng)物麻醉、斷頭并且將神經(jīng)節(jié)去除。對(duì)神經(jīng)節(jié)片 進(jìn)行處理以產(chǎn)生單個(gè)的細(xì)胞，這些細(xì)胞在分離后48小時(shí)內(nèi)使用。在23士 1°C下在高倍可見(jiàn)放大倍率下采用精密的顯微操作來(lái)進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗技 術(shù)以測(cè)量鈉電流。將玻璃移液管火琢以產(chǎn)生直徑為l-4i!m的尖端。將充滿(mǎn)了電解質(zhì)“內(nèi) 部，，溶液((mM) :115CsF、20CsCl、10NaF、10HEPES、5EGTA 的一種組合物；用 CsOH 將 pH調(diào)節(jié)至 7. 2)的移液管的尖端置于一個(gè)細(xì)胞中。將該細(xì)胞置于一個(gè)液浴“外部”溶液(由以下各項(xiàng)構(gòu) 成(mM) :115TMA 氯化物、10NaCl、5CsCl、l. 8CaCl2、l. 2MgCl2、10HEPES、11 右旋糖，用 TMA-OH 將pH調(diào)節(jié)至7. 4)中。當(dāng)充滿(mǎn)內(nèi)部溶液時(shí)，移液管尖端的電阻大約是1.0至2. 0MQ。然后， 對(duì)該移液管內(nèi)部進(jìn)行抽吸以便將細(xì)胞膜密封到該尖端上。然后，另一個(gè)抽吸脈沖打破了該 膜，建立了進(jìn)入該細(xì)胞內(nèi)部的電入口。然后，細(xì)胞內(nèi)部由充滿(mǎn)了片移液管的溶液變得透析。在細(xì)胞膜破裂之后(進(jìn)入全細(xì)胞模式)，當(dāng)用內(nèi)部溶液對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行透析并且在 1Hz下搏動(dòng)(3-5分鐘)時(shí)，允許電流動(dòng)力學(xué)以及幅值穩(wěn)定(將由在0. 1Hz下給出的一系列 電壓脈沖所引發(fā)的電流進(jìn)行疊加)。使用從_120mV的保持電位至-20mV(40ms脈沖寬度) 的一個(gè)電壓脈沖來(lái)測(cè)量鈉電流(INa)。對(duì)于INa測(cè)量峰內(nèi)向電流。檢測(cè)了 0. 1和3Hz的起搏 頻率。將濃度為0. 1、1、3、10、30、以及100 yM的試驗(yàn)物品以一種累積的方式加到一個(gè)細(xì)胞 中。所有化合物的母液是在DMS0中以10mM的濃度來(lái)制備的。為了對(duì)細(xì)胞靈敏度進(jìn)行測(cè) 試，在暴露于測(cè)試物品之后加入1 P M TTX (河豚毒素)。將2個(gè)心肌細(xì)胞暴露至TTX產(chǎn)生了 47. 2%以及56. 8%的INa的降低。將2個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞暴露于TTX產(chǎn)生了 93. 2%以及96. 8% 的INa的降低。使用片夾鉗放大器(Axopatch 1_B，Axon Instruments)記錄電流和電壓。電 壓鉗脈沖的產(chǎn)生以及數(shù)據(jù)的獲取是由使用電生理學(xué)軟件(pCLAMP version 9. 2, Axon Instruments, now MDS, Sunnyvale, CA)的計(jì)算機(jī)來(lái)控制的。數(shù)據(jù)被呈現(xiàn)為電流幅值的％降 低，被測(cè)量為相對(duì)于引入試驗(yàn)物品之前的電流幅值(對(duì)照)、在試驗(yàn)物品的存在下達(dá)到一個(gè) 穩(wěn)態(tài)效果之后的電流降低。每個(gè)細(xì)胞充當(dāng)其自身的對(duì)照物。針對(duì)心臟和神經(jīng)元的INa，使用GraphPad’ s Prism 5. 01軟件，從劑量反應(yīng)曲線 的非線性回歸分析中獲得大概的IC5(I值(表3)。可替代地，針對(duì)在所測(cè)試的最高濃度下 (100 uM)的平均百分比抑制士SEM來(lái)分析這些數(shù)據(jù)，其中不能獲得大于50%抑制的INa。針對(duì)心臟和神經(jīng)元的鈉通道速率依賴(lài)性抑制來(lái)測(cè)試卡馬西平及其PEG共軛物。所 有的PEG共軛物在心臟(圖1)和神經(jīng)元(圖2)的鈉通道上都具有與母體化合物相類(lèi)似的 活性。在測(cè)定條件下，當(dāng)使用高達(dá)100 yM的濃度時(shí)，所有試驗(yàn)物品產(chǎn)生了鈉通道的不完全 阻斷并且不能獲得可信賴(lài)的IC5(I。所有試驗(yàn)物品顯示出相比于心臟INa更低的針對(duì)神經(jīng)元 1的親和性(圖3)；母體化合物的反應(yīng)與已出版的報(bào)告相一致，這表明卡馬西平具有相比 于心臟INa更低的針對(duì)神經(jīng)元INa的親和性。這些數(shù)據(jù)提示PEG共軛不會(huì)改變母體卡馬西平
實(shí)例7去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合測(cè)定
在心臟和神經(jīng)元的鈉通道上的固有藥理學(xué)。
使用放射性配體結(jié)合測(cè)定在從大鼠前腦(它表達(dá)了去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)制備 的膜中對(duì)地昔帕明及五種PEG共軛物的結(jié)合親和力進(jìn)行評(píng)估。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)是通過(guò)在不同的試驗(yàn)化合物濃度(對(duì)于母體和PEG共軛物分別是 0. InM至3 ii M以及3nM至100 u M)的存在下用1. OnM放射性配體、[3H]_尼索西汀孵育膜 來(lái)進(jìn)行的。該反應(yīng)在 0_4°C下在 50mM Tris-HCl(pH 7. 4)、300mM NaCl、5mM KC1 進(jìn)行了 4 小 時(shí)。孵育之后，將這些膜洗滌，并且對(duì)結(jié)合的放射活性進(jìn)行測(cè)量。在作為冷配體的過(guò)量地昔 帕明(l.OyM)的存在下對(duì)非特異性結(jié)合進(jìn)行測(cè)量；將該值從總結(jié)合中減去，得到在每種試 驗(yàn)化合物濃度下的特異性結(jié)合。IC5(I值獲自劑量反應(yīng)曲線(圖4)的非直線回歸分析，并且對(duì)在所測(cè)試的最高濃度 下顯示出大于50%的結(jié)合抑制的那些化合物進(jìn)行計(jì)算。使用Cheng PrusofT校正獲得&， 該校正使用了在這些測(cè)定條件下預(yù)先確定的實(shí)驗(yàn)性Kd值。地昔帕明以及mPEG-地昔帕明共軛物的結(jié)合親和力示于表4。相對(duì)于地昔帕明， PEG-地昔帕明共軛物展示了對(duì)去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的更低的親和力。PEG共軛產(chǎn)生了在 結(jié)合親和力上高于739倍的降低，并且這種作用依賴(lài)于結(jié)合位點(diǎn)處的化學(xué)性。與母體相比，在類(lèi)似的PEG大小(相對(duì)于母體分別是739至1058倍以及2972至 3336倍)下，對(duì)于mPEG-N-共軛物的結(jié)合親和力損失小于對(duì)于mPEG_NH-共軛物的結(jié)合親和 力損失。表4.對(duì)去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的結(jié)合親和性的總結(jié)。 實(shí)例8毒蕈堿受體結(jié)合測(cè)定使用放射性配體結(jié)合測(cè)定在從CH0細(xì)胞(這些細(xì)胞表達(dá)了重組人類(lèi)M1、M2、M3、M4 或M5毒蕈堿乙酰膽堿受體)制備的膜中對(duì)阿米替林以及四種阿米替林-PEG共軛物的受體 結(jié)合親和力進(jìn)行評(píng)估。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)是通過(guò)在可變濃度的試驗(yàn)化合物的存在下用一個(gè)固定 濃度的放射性配體孵育膜來(lái)進(jìn)行的。將0. 8nM的3H-N-甲基東莨菪堿用作所有受體亞型的 放射性配體。在25°C下在含有50mM Tris HClUOmM MgCl2、以及ImM EDTA的緩沖液中進(jìn)行孵育，持續(xù)2小時(shí)。孵育之后，對(duì)這些膜進(jìn)行洗滌，對(duì)結(jié)合的放射活性進(jìn)行測(cè)量。在作為冷 配體的過(guò)量阿托品的存在下測(cè)量非特異性結(jié)合；將該值從總結(jié)合中減去，得到在每個(gè)試驗(yàn) 化合物濃度下的特異性結(jié)合。IC5(I值獲自劑量反應(yīng)曲線的非直線回歸分析，并且僅對(duì)在所測(cè) 試的最高濃度下顯示出大于50%的結(jié)合抑制的那些化合物進(jìn)行計(jì)算。使用Cheng Prusoff 校正獲得&，該校正使用了在那些測(cè)定條件下預(yù)先確定的實(shí)驗(yàn)性Kd值。阿米替林以及PEG共軛物在五種毒蕈堿受體亞型上的結(jié)合親和力示于表1。阿米 替林展示出對(duì)所有毒蕈堿受體亞型的高結(jié)合親和力(其中Ki值在從大約10至90nM的范 圍內(nèi))，并且展示出對(duì)任何毒蕈堿受體亞型的很小的選擇性。相比之下，這些PEG共軛物在 所有亞型上展示出結(jié)合親和力的顯著降低，在任何具體的受體亞型的Ki降低了 10-100倍。 在一些情況下，在所測(cè)試的最高濃度下不能獲得放射性配體結(jié)合的顯著性抑制并且因此數(shù) 據(jù)顯示為“沒(méi)有顯著性結(jié)合”。這些數(shù)據(jù)提示PEG共軛顯著地降低了阿米替林對(duì)毒蕈堿乙酰 膽堿受體的結(jié)合親和力。 實(shí)例9鎮(zhèn)痛測(cè)定鎮(zhèn)痛測(cè)定用來(lái)確定一種給定的化合物是否可以降低和/或防止小鼠的內(nèi)臟疼痛。該測(cè)定使用了 CD-I雄性小鼠(每組5-8只)，在研究當(dāng)天每只小鼠是大約 0. 015-0. 030kg。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)試驗(yàn)計(jì)劃對(duì)小鼠進(jìn)行處理。
在給予乙酸溶液之前三十分鐘，給予小鼠一個(gè)單“預(yù)處理”劑量的一種化合物(該 化合物缺少與一種水溶性、非肽的低聚物的共價(jià)附連)、一種對(duì)應(yīng)形式(包括共價(jià)地附連到 一種水溶性、非肽的低聚物上的化合物)、或?qū)φ杖芤?IV、SC、IP或口服)。給予該動(dòng)物一 種引發(fā)“扭體”的刺激物(乙酸)的IP注射液，這種扭體可以包括腹部收縮、軀干的扭曲 和翻轉(zhuǎn)、拱背以及后肢伸長(zhǎng)。給予小鼠0.5%乙酸溶液的一個(gè)單IP注射液(0.1mL/10g體 重)。注射之后，將這些動(dòng)物放回它們的觀察圍封物內(nèi)，并且對(duì)它們的行為進(jìn)行觀察。在注 射后的0至20分鐘之間，對(duì)收縮進(jìn)行計(jì)數(shù)。這些動(dòng)物使用一次。每個(gè)測(cè)試物品以1、3以及 10mg/kg(n = 5動(dòng)物/劑量)進(jìn)行給藥。圖5示出了該測(cè)試化合物對(duì)抗標(biāo)準(zhǔn)的鎮(zhèn)痛藥嗎啡的鎮(zhèn)痛活性。
權(quán)利要求
一種化合物，包括通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接而附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)化合物殘基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下結(jié)構(gòu) 化學(xué)式I-C其中<Y是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-, -CH2CH2-, -CH = CH-,-CH2-S-、CH2-O-、CH2-NH-、-S-CH2-、-O-CH2、-NH-CH2、-HN-、-O-、-N = C-、-C = N-、 和-s-，它們是未取代的或任選地取代的； X是一個(gè)間隔部分；并且 POLY是一種水溶性、非肽的低聚物。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化合 物的一個(gè)殘基 R化學(xué)式I其中D和R1作為整體是選自下組，其構(gòu)成為-HC-R1、-C = R1、和-HN-R1 ； R1是選自下組，其構(gòu)成為烷基、氨基、?；被?、酰基、酰氨基、芳氧基、烷氨基、具有2 到4個(gè)碳原子(包括端值)的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷基、N-(低級(jí)烷基)-2-哌啶基、嗎 啉基、1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、4-(羥基-低級(jí)烷基)-1_哌嗪基、和4-(甲氧 基_低級(jí)烷基)-ι-哌嗪基，它們是未取代的或任選地取代的；Y是選自下組，其構(gòu)成為-CH2-、-CH-, -CH2CH2-, -CH = CH-, -CH2-S-, CH2-O-, CH2-NH-, -S-CH2-、-O-CH2、-NH-CH2、-HN-、-0-、-N = C_、_C = N-、和-S-，它們是未取代的或任選地取 代的；并且R2> R3> R4> R5> R6> R7> R8> R9中的一個(gè)或多個(gè)各自獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為零、氫、鹵素、氰基、羥基、羧基、酮基、硫酮基、氨基、?；被?、?；?、酰氨基、芳氧基、烷基、鏈烯基、炔 基、雜烷基、鹵烷基、烷氧基、二氧基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、以及雜環(huán)烷基，它們是未取代的 或任選地取代的。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化合 物的一個(gè)殘基 A是選自以下基團(tuán)的一個(gè)橋-(CH2)m-、和-CH = CH-，其中 m是從1至3 (包括端值)的一個(gè)整數(shù)，X和Y是選自下組，其構(gòu)成為氫以及鹵素，該鹵素選自氟、氯以及溴； R和R'是選自下組，其構(gòu)成為氫以及具有從一至五個(gè)(包括端值)碳原子的低級(jí)燒 基；并且n是從1至12 (包括端值)的一個(gè)整數(shù)。
5.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化合 物的一個(gè)殘基(3' -二甲氨基亞丙基)_ 二苯并仏，(1)-環(huán)庚并-1，4-二烯^氧化物。
6.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán) 化合物的一個(gè)殘基，該化學(xué)式選自下組，其構(gòu)成為2_氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b， f)[l，4]氧-氮雜萆、2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f)[l，4]氧-氮雜革鹽酸鹽、2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f)[1,4]氧-氮雜革富馬酸鹽、2-氯-11-(1-哌嗪基)二 苯并(b，f)[l，4]氧-氮雜革硫酸鹽、和2-氯-11-(1-哌嗪基)二苯并(b，f)[l，4]氧-氮 雜革二庚酸鹽。
7.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化合 物的一個(gè)殘基5-(3' -二甲氨基-2'-甲基丙基)二苯并^，(1][1，4]-環(huán)庚二烯。
8.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的一個(gè)三環(huán) 化合物的殘基，該化學(xué)式選自下組，其構(gòu)成為3_氯-5- ( Y _ 二甲基氨基-丙基)_亞氨基 二芐、3-氯-5-( Y -二甲基氨基_丙基)_亞氨基二芐的一種藥學(xué)上可接受的酸加成鹽、和3-氯-5-( Y _ 二甲基氨基-丙基)_亞氨基二芐鹽酸鹽。
9.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的一種三環(huán) 化合物的一個(gè)殘基
10.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的一種三 環(huán)化合物的一個(gè)殘基，該化學(xué)式選自下組，其構(gòu)成為5_ ( Y -甲氨基-丙基)_亞氨基二芐 以及它的無(wú)毒的加成鹽類(lèi)，N-(3-甲氨基丙基)_亞氨基二芐，以及N-(3-甲氨基丙基)_亞氨基二芐鹽酸鹽。
11.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的一種 三環(huán)化合物的一個(gè)殘基，該化學(xué)式選自下組，其構(gòu)成為具有以下化學(xué)式的10_(堿性取代 的)-10，11_ 二氫-5Η-二苯并[b，e] [1,4] 二氮雜革 其中X代表具有2和3之間(包括端值)的碳原子的亞烷基；Y是構(gòu)成如下的類(lèi)別中的 一員具有2和4之間(包括端值)的碳原子的二烷氨基、吡咯烷基、哌啶基、以及嗎啉基； R1和R2可互換地代表構(gòu)成如下的類(lèi)別中的一員氫、甲基、以及乙基；并且R3和R4可互換地 代表構(gòu)成如下的類(lèi)別中的一員氫、氯、甲基、乙基、甲氧基以及乙氧基。
12.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 亞烷基——X其中亞烷基具有2至4個(gè)(包括端值)碳，并且至少兩個(gè)碳將X與該雜環(huán)的核分開(kāi)；X 是選自下組，其構(gòu)成為2至4個(gè)碳的二烷氨基、吡咯烷基、哌啶基以及嗎啉基；并且每個(gè)Y 獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為氫、氯、甲基、甲氧基以及乙氧基。
13.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是一種三環(huán)化合物的一個(gè)殘基，該殘基選自下組，其構(gòu)成為具有以下化學(xué)式的取代的5H-二苯并[b，e][l,4] 二氮雜 萆衍生物 其中禮是選自由氫、甲基以及乙基構(gòu)成的類(lèi)別；-X-Y是一個(gè)堿性基團(tuán)，其中X是含有2 和3之間(包括端值)的碳原子的烴鏈，并且Y是選自以下類(lèi)別，其構(gòu)成為具有2和4之間 (包括端值)的碳原子的二烷氨基、哌啶基、吡咯烷基、N-(低級(jí)烷基)-2_哌啶基、嗎啉基、 1-哌嗪基、4-(低級(jí)烷基)-1-哌嗪基、4-(羥基-低級(jí)烷基)-1-哌嗪基、和4-(甲氧基-低 級(jí)烷基)-1-哌嗪基并且R2和R3是選自以下類(lèi)別，其構(gòu)成為氫、氯、甲基、乙基、甲氧基、乙 氧基、三氟甲基、甲基巰基、以及乙基巰基。
14.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中R是選自CH3和C2H5構(gòu)成的組的一員，并且禮是選自下組的一員，該組的構(gòu)成為 C1、CH3、CF3、和 C2H5 o
15.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基11-(3_ 二甲氨基亞丙基)-6，11- 二氫-二苯并_(b，e)噻庚英。
16.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 R1是選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫以及鹵素，并且A是4- (β -羥乙基-哌啶基)。
17.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中η是從O至1的整數(shù)并且R1是具有從1至4個(gè)碳原子的烷基。
18.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中X和Y各自獨(dú)立地選自下組，其構(gòu)成為氫、具有從1至4個(gè)碳原子的烷基、具有從 1至4個(gè)碳原子的烷氧基、具有從1至4個(gè)碳原子的硫代烷氧基、氯、復(fù)、三氟甲基、具有從1 至4個(gè)碳原子的?；⒁约熬哂袕?至8個(gè)碳原子的二烷基亞磺酰氨基。
19.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基
20.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基
21.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中&和R3各自是選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫、氟、氯、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷硫基、以及三氟甲基，并且Z是--水—- 低級(jí)-烷氨基c
22.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基
23.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基亞烷基-Am其中亞烷基代表具有2-3個(gè)碳原子的一個(gè)亞烷基鏈并且Am代表選自下組的一員，該組 的構(gòu)成為一個(gè)低分子二烷氨基基團(tuán)、N-哌啶基-、N-嗎啉基-、和N-吡咯烷基的基團(tuán)。
24.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 Y是選自下組，其構(gòu)成為CH2-CH2和CH = CH ； R1是選自下組，其構(gòu)成為H和CH3;R2代表具有最大4個(gè)碳原子的一個(gè)烷基基團(tuán)； n是選自下組，其構(gòu)成為1、2、和3 ；R3是選自下組，其構(gòu)成為苯基以及被最多三個(gè)取代基取代的苯基，這些取代基選自下 組，其構(gòu)成為F、CI、OH、CF3，連同含有最多4個(gè)碳原子的烷基和烷氧基；以及在3，4-位上 具有一個(gè)取代基的一個(gè)苯基基團(tuán)，該取代基選自下組，其構(gòu)成為亞烷基二氧基(具有最多 6個(gè)碳原子)、環(huán)烷基二氧基(具有最多6個(gè)碳原子)以及乙二氧基；R4是選自下組，其構(gòu)成 為:H、F、C1、0CH3、CF3、和 SO2N(CH3)2。
25.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中R1和R2各自是一個(gè)低級(jí)烷基基團(tuán)；X是選自下組，其構(gòu)成為氧、鹵素、低級(jí)烷基以 及低級(jí)烷氧基；Y是選自下組，其構(gòu)成為氫和鹵素；并且 是選自下組，其構(gòu)成為二 _低級(jí)_烷氨基、芐基_低級(jí)_烷氨基、以及雜環(huán)胺的基團(tuán)， 所述雜環(huán)胺是選自下組，其構(gòu)成為吡咯烷、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、N1-低級(jí)-烷基哌嗪、以 及上述各項(xiàng)的C-低級(jí)烷基衍生物。
26.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中R1和R2各自是一個(gè)低級(jí)烷基基團(tuán)；X是選自下組，其構(gòu)成為氧、鹵素、低級(jí)烷基以 及低級(jí)烷氧基；Y是選自下組，其構(gòu)成為氫和鹵素；并且 是選自下組，其構(gòu)成為二 -低級(jí)-烷氨基、芐基-低級(jí)-烷氨基、以及具有一個(gè)飽和 的五元環(huán)的一個(gè)雜環(huán)胺的基團(tuán)，具有一個(gè)飽和的六元環(huán)的一個(gè)雜環(huán)胺的基團(tuán)，所述雜環(huán)胺 是選自下組，其構(gòu)成為吡咯烷、哌啶、嗎啉、硫代嗎啉、N1-低級(jí)烷基哌嗪、以及上述各項(xiàng)的 C-低級(jí)烷基衍生物。
27.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中R和R'是相同或不同的并且各自代表氫或具有一至五個(gè)碳原子的烷基，并且R1 是氫、具有一至五個(gè)碳原子的烷基、或芐基。
28.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中R是選自下組，其構(gòu)成為氫、低級(jí)烷基、苯基以及芐基。
29.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是具有以下化學(xué)式的三環(huán)化 合物的一個(gè)殘基 其中X和Y各自代表選自下組的一員，該組的構(gòu)成為氫以及鹵素。
30.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是一個(gè)三環(huán)化合物的殘基， 它選自下組，其構(gòu)成為安咪奈丁、阿米替林、氧阿米替林、阿莫沙平、布替林、氯米帕明 (clomiprimine)、地美替林、地昔帕明、二苯西平、二甲他林、度琉平、多塞平、氟西嗪、丙米 嗪、N-氧化丙米嗪、洛非帕明、美利曲辛、美他帕明、去甲替林、奧匹哌醇、丙吡西平、普羅替 林、奎紐帕明、噻奈普汀、曲米帕明以及卡馬西平。
31.如權(quán)利要求1至30中任一項(xiàng)所述的化合物，其中該水溶性、非肽的低聚物是聚(氧 化烯)。
32.如權(quán)利要求31所述的化合物，其中該聚(氧化烯)是聚(氧化乙烯)。
33.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中水溶性、非肽的低聚物是由1和30之 間個(gè)單體構(gòu)成的。
34.如權(quán)利要求33所述的化合物，其中該水溶性、非肽的低聚物是由1和10之間個(gè)單 體構(gòu)成的。
35.如權(quán)利要求31所述的化合物，其中該聚(氧化烯)包括一種烷氧基或羥基封端的 部分。
36.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，一種單一的水溶性、非肽的低聚物 被附接到該三環(huán)化合物的殘基上。
37.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，大于一種的水溶性、非肽的低聚物 被附接到該三環(huán)化合物的殘基上。
38.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定 的連接共價(jià)地附接的。
39.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中該三環(huán)化合物殘基是通過(guò)一個(gè)可降 解的連接共價(jià)地附接的。
40.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中該連接是一個(gè)醚連接。
41.如以上權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，其中該連接是一個(gè)酯連接。
42.一種組合物，該組合物包括一種化合物以及任選地一種藥學(xué)上可接受的賦形劑，該 化合物包括通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性的并且非肽的低聚 物上的一個(gè)三環(huán)化合物殘基。
43.一種物質(zhì)的組合物，該組合物包括一種化合物，該化合物包括通過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可 降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)化合物殘基，其中該化 合物是以一種劑型存在。
44.一種方法，該方法包括將一種水溶性、非肽的低聚物附接到一種三環(huán)的化合物上。
45.一種治療方法，包括將一種化合物給予對(duì)其有需要的一個(gè)受試者，該化合物包括通 過(guò)一個(gè)穩(wěn)定的或可降解的連接共價(jià)地附接到一種水溶性、非肽的低聚物上的一個(gè)三環(huán)化合 物殘基。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過(guò)一種水溶性低聚物的共價(jià)附接進(jìn)行化學(xué)改性的小分子藥物。當(dāng)通過(guò)多種給藥途徑中的任何一種給藥時(shí)，本發(fā)明的共軛物呈現(xiàn)出與未附接到水溶性低聚物上的小分子藥物的特征相比不同的特征。
文檔編號(hào)A61K47/48GK101878042SQ200880118154
公開(kāi)日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2008年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月28日
發(fā)明者J·里吉斯-索希爾, S·阿爾魯姆斯, 張文, 顧敘元 申請(qǐng)人:尼克塔治療公司