專利名稱：：一種桑黃提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及藥用真菌提取物，具體地說涉及一種桑黃提取物及其制備方法。背景資料桑黃是一種珍稀的藥用真菌，20世紀(jì)前，桑黃主要來源于野生資源，由于野生資源稀少，導(dǎo)致子實體的售價很貴，每公斤在千元以上。近年來，隨著食藥用菌栽培技術(shù)的發(fā)展，桑黃已獲得人工馴化的成功，使其后期開發(fā)成本降低。由于人工栽培桑黃的藥效研究尚未深入，相關(guān)深加工技術(shù)和產(chǎn)品的開發(fā)研究不多，使得國內(nèi)桑黃的種植未能進一步發(fā)展，研究基礎(chǔ)少，且不深入，尤其對國內(nèi)人工栽培的桑黃缺乏全面深入的研究?，F(xiàn)代藥理研究表明桑黃具有抗腫瘤、抗氧化、抗肝纖維化、增強免疫等作用，但以桑黃為原料開發(fā)的產(chǎn)品在國內(nèi)還是空白。對人工培植的桑黃進行生物活性的研究，針對其主要的功能活性成份開發(fā)相應(yīng)的產(chǎn)品，是對其進行深度利用的良好途徑，也是填補我國珍稀藥用真菌桑黃開發(fā)利用的空白。糖尿病是一種常見的內(nèi)分泌代謝疾病，常伴隨多種慢性并發(fā)癥，造成多器官、多系統(tǒng)的廣泛損傷，具有較高的致殘率，是繼心腦血管疾病、癌癥之后危害人類身體健康的第三大疾病。我國糖尿病患者約4000萬人，是糖尿病患者最多的國家之一，且發(fā)病率呈逐年上升趨勢。口服降糖藥物和胰島素治療雖然能有效地控制高血糖，但對慢性并發(fā)癥的預(yù)防和治療仍缺乏有效措施，連續(xù)服用口服降糖藥物會出現(xiàn)藥物失效、高胰島素血癥和胰島素抵抗等問題
發(fā)明內(nèi)容-本發(fā)明是基于一令人驚喜的發(fā)現(xiàn)，桑黃的提取物能夠降低小鼠血糖濃度。本發(fā)明首先提供了一種桑黃提取物，該提取物是采用桑黃菌種進行椴木栽培的桑黃子實體進行提取加工得到，含有黃酮和多糖，其提取物干粉中黃酮的重量百分百含量為20—30%，多糖的重量百分百含量5—10%。本發(fā)明所用的桑黃菌種(戶/ze〃/m^6aw7wm7Pilat)來自中國微生物菌種保藏中心上海食用菌分中心，編號為PhellinusbaumiiPilat3249。具體的提取方法為桑黃原料的選擇選用i^e///mkmmwz7Pilat菌種進行椴木栽培的子實體。將桑黃子實體用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物l;上述剩余殘渣揮發(fā)掉乙醇后，水浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物2;將提取物1和提取物2混合，得到本發(fā)明的桑黃提取物。更具體一點的制備方法為將桑黃子實體于75%-90%室溫下浸泡24_48小時，料液比1:10-20(重量公斤比體積升)，過濾后保留上清液，殘渣再用80%乙醇浸泡24一48小時；合并兩次浸提液，于4(TC下減壓濃縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水繼續(xù)減壓濃縮，濃縮罐溫度50—55。C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重1.050~1.080(50°C熱測)，濃縮液冷凍干燥得桑黃提取物1;將乙醇浸泡提取后的桑黃子實體殘渣風(fēng)干，揮去乙醇，加水于90一10(TC提取2時，料液比l:5-15(重量公斤比體積升)；過濾收集提取液，殘渣再加水提取一次，合并兩次提取液，提取液泵入減壓濃縮罐中，進行減壓濃縮，濃縮罐溫度65。C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重1.0501.080(50。C熱測)，濃縮液噴霧干燥，得提取物2;將提取物1和提取物2混合、混勻，得到桑黃提取物。本發(fā)明還提供了一種藥學(xué)組合物，該藥學(xué)組合物包含上述桑黃提取物以及藥學(xué)上可接受的載體。該藥學(xué)組合物可制備成口服制劑、注射制劑、直腸栓劑、膏霜劑等多種劑型，可以口服、肌肉注射、靜脈注射、皮下注射、直腸給藥等方式給藥。動物試驗證明，本發(fā)明的桑黃提取物可明顯降低糖尿病小鼠體內(nèi)的血糖濃度。因此，本發(fā)明的桑黃提取物可用于制備降血糖的藥物，因為糖尿病的治療主要依據(jù)的就是降血糖，因此，本發(fā)明的桑黃提取物可用于制備治療糖尿病的藥物。桑黃作為藥用真菌，具有天然無毒副作用的特點，本發(fā)明通過先乙醇提、殘渣繼續(xù)水提的方法，充分利用了桑黃子實體全草，富含黃酮類和多糖類的有效成份，具有明顯的降血糖效果。圖1桑黃提取物制備方法工藝路線圖下面通過具體實施例對本發(fā)明做一詳細的敘述，但是本發(fā)明并不僅僅限于具體實施例。應(yīng)理解為，凡與本發(fā)明技術(shù)特征相似、等效的技術(shù)特征均為本發(fā)明所涵蓋的范圍。具體實施例方式實施例1桑黃提取物的制備1.原料去雜質(zhì)清洗將桑黃子實體去除雜質(zhì)，用原料粗粉碎機進行粗粉碎成小粒狀。2.提取物1的制備采用80%食用級酒精室溫下浸泡24—48小時，料液比l:15(重量公斤比體積升)，過濾后保留上清液，殘渣再用80%乙醇浸泡24—48小時；合并兩次浸提液，于4(TC下減壓濃縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水繼續(xù)減壓濃縮，濃縮罐溫度50—55。C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重1.0501.0S0(50。C熱測)，濃縮液冷凍干燥得桑黃提取物1。3.提取物2的制備將乙醇浸泡提取后的桑黃子實體殘渣風(fēng)干，揮去乙醇，加水于90—10(TC提取2小時，料液比l:10(重量公斤比體積升)；過濾收集提取液，殘渣再加水提取一次，合并兩次提取液，提取液泵入減壓濃縮罐中，進行減壓濃縮，濃縮罐溫度65°C，壓力小于O.lMPa，濃縮到比重1.0501.080(50。C熱測)，濃縮液噴霧干燥，得提取物2。4.兩提取物混合將提取物1和提取物2混合，在混合攪拌機中混勻，得到桑黃提取物，該提取物中黃酮的含量為26.7%，多糖的含量為7.2。/^。5.滅菌包裝桑黃提取物用膠囊自動灌裝機灌裝，裝瓶輻照滅菌，備用。實施例2桑黃提取物的降血糖作用1.實驗材料1.1動物清潔級雄性ICR小鼠，18~22g，由揚州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，合格證號SCXK(蘇)2007-0001。1.2藥物及試劑四氧嘧啶，美國sigma公司，Lot37H1381;葡萄糖測定試劑盒，上海榮盛生物技術(shù)有限公司，批號20080413;鹽酸二甲雙胍片，昆山雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號0604193;桑黃提取物l、桑黃提取物2、桑黃提取物，為按照實施例l方法制備得到的。1.3儀器BS110S電子天平，北京賽多利斯天平有限公司；KUBOTA-5800離心機，KUBOTACorporation;MultiskanSpectrumMSS1500-320,ThermoElectronCorporation。2.實驗方法隨機取出小鼠10只作為正常組，其余小鼠禁食14-16h后，尾靜脈注射四氧嘧啶60mg/kg，注射后72小時眼眶后靜脈叢取血，分離血清，預(yù)測血糖，選空腹血糖>12mmol/L的小鼠90只，隨機分為9組，其中5組分別按10ml/kg體重經(jīng)口給予桑黃提取物1200、400mg/kg，桑黃提取物2200、400mg/kg，桑黃提取物200、400mg/kg，二甲雙胍200mg/kg，模型組經(jīng)口給予等體積的水。每日一次，連續(xù)給藥14天。其中，第7次給藥前各組禁食4h，給藥后繼續(xù)禁食2h，然后小鼠眼眶后靜脈叢取血，分離血清，測定血糖。末次給藥前禁食4h，給藥后繼續(xù)禁食2h，小鼠摘眼球取血，分離血清，以試劑盒方法測定空腹血糖。3.統(tǒng)計實驗數(shù)據(jù)以7土5D表示，并用t檢驗統(tǒng)計表示組間差異。4.試驗結(jié)果與正常組相比，四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖極明顯升髙(尸O.Ol)。與模型組相比，在給藥后第7天，桑黃提取物l和桑黃提取物在200mg/kg和400mg/kg劑量時均能極明顯地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.01);桑黃提取物2在200mg/kg能明顯地降低糖尿病小鼠的空腹血糖(尸<0.05)，在400mg/kg劑量時均能極明顯地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.Ol)。給藥后14天，桑黃提取物及提取物1和2在200mg/kg和400mg/kg劑量時都均能極明顯地降低糖尿病小鼠的空腹血糖CPO.Ol)。表l桑黃提取物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>尸O.Ol與正常組比較；*尸<0.05，**P<0.01與模型組比較試驗證明，桑黃提取物l、桑黃提取物2和桑黃提取物均具有明顯的降血糖作用，二甲雙胍為陽性對照藥物，是一種治療糖尿病的藥物，能有效降低空腹血糖水平。本試驗結(jié)果表明，桑黃提取物與二甲雙胍均能降低糖尿病小鼠的空腹血糖，在統(tǒng)計學(xué)上同比無顯著性差異。從結(jié)果來看，二甲雙胍的降血糖效果更顯著一些，但這是一種化學(xué)藥物，長期服用對肝、腎功能會有影響，尤其肝、腎功能不全的患者就不宜服用。而桑黃提取物是一種天然制品，無毒副作用，對患者不會產(chǎn)生不良影響。權(quán)利要求1.一種桑黃提取物，含有黃酮和多糖，其中黃酮的重量百分百含量為20—30％，多糖的重量百分百含量為5—10％。2.—種制備權(quán)利要求1所述提取物的方法，該方法包括如下步驟將桑黃子實體用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物l;上述剩余殘渣揮發(fā)掉乙醇后，水浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物2;將提取物1和提取物2混合，得到桑黃提取物。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于該方法包括如下步驟將桑黃子實體于75%-90%室溫下浸泡24—48小時，料液比1:10-20，過濾后保留上清液，殘渣再用80%乙醇浸泡24—48小時；合并兩次浸提液，于4(TC下減壓濃縮，待蒸去大部分乙醇后，再加水繼續(xù)減壓濃縮，濃縮罐溫度50—55°C，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重1.050~1.080，濃縮液冷凍干燥得桑黃提取物1;將乙醇浸泡提取后的桑黃子實體殘渣風(fēng)干，揮去乙醇，加水于90_10(TC提取2時，料液比l:5-15;過濾收集提取液，殘渣再加水提取一次，合并兩次提取液，提取液泵入減壓濃縮罐中，進行減壓濃縮，濃縮罐溫度65t，壓力小于0.1MPa，濃縮到比重1.050~1.080，濃縮液噴霧干燥，得提取物2;將提取物1和提取物2混合、混勻，得到桑黃提取物。4.一種桑黃提取物，是由下述方法制備得到的將桑黃子實體用75%-90%的乙醇浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物l;上述剩余殘渣揮發(fā)掉乙醇后，水浸泡，取上清液，濃縮干燥得到提取物2;將提取物1和提取物2混合，得到桑黃提取物。5.—種藥學(xué)組合物，其特征在于包含權(quán)利要求1或3任一項所述桑黃提取物以及藥學(xué)上可接受的載體。6.權(quán)利要求1或3任一項所述桑黃提取物用于制備治療糖尿病藥物的用途。全文摘要本發(fā)明公開了一種桑黃提取物，該提取物包含黃酮20-30％，多糖5-10％。該桑黃提取物具有明顯的降血糖作用，可用于制備降血糖的藥物。文檔編號A61K36/06GK101474211SQ200810201798公開日2009年7月8日申請日期2008年10月27日優(yōu)先權(quán)日2008年10月27日發(fā)明者劉艷芳,帥周,唐慶九,張勁松,焱楊,郝瑞霞申請人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院