專(zhuān)利名稱(chēng)：：用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種可用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥，特別是用于防治糖尿病心臟病及糖尿病神經(jīng)病變的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：糖尿病是一種常見(jiàn)和多發(fā)性疾病，其對(duì)人體健康的危害主要表現(xiàn)在由其所導(dǎo)致的多種慢性并發(fā)癥上，包括糖尿病腎病、糖尿病眼病、糖尿病心臟病、糖尿病神經(jīng)病變及其它多種微血管病變等。公告號(hào)CN1331474C的中國(guó)專(zhuān)利文獻(xiàn)提供了一種以大黃總游離蒽醌與黃芩苷為有效藥物成分的藥物，可對(duì)糖尿病慢性腎病、糖尿病眼病、糖尿病血管病變等慢性并發(fā)癥有較好的防治效果。
發(fā)明內(nèi)容鑒于上述情況，本發(fā)明將提供一種同樣也可用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥，并且特別是用于防治糖尿病心臟病及糖尿病神經(jīng)病變的藥物組合物。本發(fā)明用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物，是以絞股藍(lán)總皂苷與黃芩苷為有效藥物成分，與藥學(xué)中可以接受的輔助成分共同組成，有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷/黃芩苷的重量比為1/(0.25~4),更好的比例是1/(0.52)，優(yōu)選的比例為1/1。黃芩是具有清熱、瀉火、解毒功效的一味傳統(tǒng)中藥，其主要有效成分為黃芩苷和/或包括黃芩苷在內(nèi)的黃芩總苷。研究發(fā)現(xiàn)，黃芩苷或黃芩提取物對(duì)糖尿病神經(jīng)病變及糖尿病腎病有較好的防治作用。黃芩苷作為化學(xué)原料藥收載于國(guó)家藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)第十冊(cè)，含量大于90.0%(注射用)，含量大于83.0%(口服用)；黃芩提取物收載于《中國(guó)藥典》2005年一部，其含黃芩苷不得少于85.0%。絞股藍(lán)[Gynostemmapentaphyllum(thumb.)Mak.]系雙子葉綱葫蘆科絞股藍(lán)屬植物，又名七葉膽。研究表明絞股藍(lán)含多種對(duì)人體有益的皂甙、維生素、氨基酸以及黃酮類(lèi)物質(zhì)，絞股藍(lán)活性成份具有降血脂、降血糖、抗腫瘤、抗衰老、保護(hù)肝臟及增強(qiáng)肌體免疫功能等作用。研究發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總皂苷由80余種皂苷組成，其中78種分別命名為絞股藍(lán)皂苷ILXXVin，另一部分分別為人參皂苷Rbl、Rb3、Rd，以及人參二醇、2a-羥基人參二醇，2a，19-二羥基-12-脫氧人參二醇等。研究發(fā)現(xiàn)，絞股蘭總皂苷對(duì)心臟病具有較好的防治作用，并對(duì)糖尿病腎病及糖尿病心臟病均有較好的防治作用。絞股藍(lán)總甙原料藥收載于中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第四冊(cè)，其含量大于70.0%。本發(fā)明人的深入研究發(fā)現(xiàn)，以絞股藍(lán)總皂苷與黃芩苷共同作為有效藥物成分組合后，可對(duì)糖尿病慢性并發(fā)癥，特別是在對(duì)糖尿病心臟病、糖尿病神經(jīng)病變及糖尿病微血管病變等的防治上，能產(chǎn)生顯著的協(xié)同增效作用。進(jìn)一步的試驗(yàn)顯示，在上述的有效藥物成分中，所說(shuō)的絞股藍(lán)總皂苷除可以采用市售的商品絞股藍(lán)總甙外，還可以采用目前已有文獻(xiàn)報(bào)道/或使用的方法，如中國(guó)專(zhuān)利86104409A、或曾憲明等(《西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》1993;14(3):276-279)、以及蘆金清等(《中成藥》1992;14(4):2-3)所報(bào)道的，以大孔吸附樹(shù)脂法從絞股藍(lán)中提取分離得到絞股藍(lán)總皂苷或含量》50(w)。/。的絞股藍(lán)提取物進(jìn)行替換。本發(fā)明上述藥物組合物中所說(shuō)的有效藥物成分黃芩苷，除可以直接使用黃芩苷外，還可以用含有黃芩苷的黃芩總皂苷，或是用符合藥典規(guī)定的市售商品黃芩提取物、以及由目前己有文獻(xiàn)報(bào)道域使用的方法從黃芩中提取得到的黃芩苷的含量》50(w)y。的黃芩提取物替換，試驗(yàn)結(jié)果顯示不會(huì)對(duì)本發(fā)明藥物組合物的療效產(chǎn)生不利的影響。以上述組成形式的有效藥物成分及藥學(xué)中可以接受的適當(dāng)藥用輔料或載體等輔助成分按相應(yīng)的制藥方法加工，可以制成為相應(yīng)的口服型藥物制劑，如片劑、滴丸、膠囊劑、微丸等。其中口服制劑中可以接受及常用的藥用輔料、載體等輔助成分，可包括如崩解劑、賦形劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、填充劑等。以下結(jié)合實(shí)施例的具體實(shí)施方式再對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段做出的各種替換或變更，均應(yīng)包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取重量含量為81.5%的市售絞股藍(lán)總皂苷500g和重量含量為98.3%的市售黃芩苷104g，研細(xì)、混勻，加入到PEG-6000熔融液中，攪拌混勻，在滴丸機(jī)中制成l萬(wàn)粒滴丸，即為所述的丸劑型藥物。實(shí)施例2取重量含量為81.5。/。的市售絞股藍(lán)總皂苷500g和重量含量為88.1%市售并符合藥典規(guī)定的黃芩提取物231g，研細(xì)、混勻，加入藥用淀粉269g，混合均勻，干法制粒，裝入膠囊，每粒重(K25g，即為所述的膠囊劑型藥物。實(shí)施例3將絞股藍(lán)藥材50kg，每次加水12倍，煎煮提取2次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，上D101型大孔樹(shù)脂柱，用水洗滌至流出液近無(wú)色，再用70%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮、干燥，得絞股藍(lán)總皂苷3.1kg。按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第四冊(cè)第31頁(yè)絞股藍(lán)總甙項(xiàng)下的含量測(cè)定方法測(cè)得總皂苷的重量含量為50.3%。將黃芩藥材50kg,每次加水12倍，煎煮提取3次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并提取液，濃縮至適量，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.02.0，80'C保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀物加適量水?dāng)噭?，?0。/。氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.02.0,6(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至pH值至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，得黃芩提取物4.8kg。按照《中國(guó)藥典》2005版一部第280頁(yè)黃芩提取物項(xiàng)下的含量測(cè)定方法測(cè)得黃芩苷的重量含量為75.6%。取上述絞股藍(lán)總皂苷500g和黃芩提取物333g，研細(xì)、混勻，加入藥用輔料667g，混合均勻，制粒、壓片，每片重0.3g，即為所述的片劑型藥物。實(shí)施例4將絞股藍(lán)藥材50kg，按照公開(kāi)號(hào)CN86104409A的文獻(xiàn)方法提取得絞股藍(lán)總皂苷2.4kg。按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第四冊(cè)第31頁(yè)絞股藍(lán)總甙項(xiàng)下的含量測(cè)定方法測(cè)得總皂苷的重量含量為72.7%。將黃芩藥材50kg，每次加水12倍，煎煮提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過(guò)，合并提取液，濃縮至適量，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1.02.0，80'C保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至pH值至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，得黃芩提取物8.2kg。按照《中國(guó)藥典》2005版一部第280頁(yè)黃芩提取物項(xiàng)下的含量測(cè)定方法測(cè)得黃薈苷的重量含量為50.4%。取上述絞股藍(lán)總皂苷500g和黃芩提取物1442g，研細(xì)、混勻，加入藥用輔料158g，混合均勻，干法制粒，裝入膠囊，每粒重0.3g，即為所述的膠囊劑型藥物。實(shí)施例5將絞股藍(lán)藥材50kg，每次加水8倍，煎煮提取3次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，上HPD300型大孔樹(shù)脂柱，先用PH9-11的堿洗沖洗柱子至流出液近無(wú)色，再用水洗至中性，最后用85%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮、干燥，得絞股藍(lán)總皂苷1.9kg。按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第四冊(cè)第31頁(yè)絞股藍(lán)總甙項(xiàng)下的含量測(cè)定方法測(cè)得總皂苷的重量含量為94.5%。取上述絞股藍(lán)總皂苷500g和重量含量為85.9W的市售黃芩提取物2200g，研細(xì)、混勻，加入藥用輔料800g，混合均勻，制粒、壓片，每片重0.5g，即為所述的片劑型藥物。以本發(fā)明上述不同形式有效藥物成分的組合物進(jìn)行的相關(guān)試驗(yàn)結(jié)果如下-。試驗(yàn)l:不同比例的黃芩苷與絞股藍(lán)總甙組合對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的血管內(nèi)皮細(xì)胞，傾去培養(yǎng)基，用2mlTNE消化一定時(shí)間后，當(dāng)細(xì)胞產(chǎn)生收縮，并開(kāi)始脫落時(shí)，傾去TNE，準(zhǔn)確加入一定體積的10%FBSRPMI1640培養(yǎng)基，用吸管反復(fù)吹打使貼壁細(xì)胞脫落，并使細(xì)胞在培養(yǎng)基中分散均勻后，取20nl該細(xì)胞懸液在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)，然后根據(jù)需要，用10。/。FBSRPMI1640培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋成2xl0"孔濃度，24小時(shí)后，將10%FBSRPMI1640培養(yǎng)基換成不含血清的RPMI1640培養(yǎng)基使其同步化，同步24小時(shí)后，將培養(yǎng)基分別換成5.5mMglucose10%FBSRPMI1640(對(duì)照)或30.0mMglucose10%FBSRPMI1640，分別加入市售黃吝苷(純度為98.3%)及市售絞股藍(lán)總甙(純度為81.5%)，使其最終濃度(分別按黃芩苷及絞股藍(lán)總甙計(jì)算)如表1所示，然后在加藥后72小時(shí)，取上清液分別測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)的水平。黃芩苷和絞股藍(lán)總甙的藥物濃度及相應(yīng)的試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。表1不同比例的黃芩提取物與絞股藍(lán)提取物組合對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響(X士S，N=5)以黃苳苷計(jì)以絞股藍(lán)總武計(jì)黃芩苷/絞股藍(lán)總甙GlucoseLDH(Hg/ml)(|ig/ml)比例(mM)(OD)0050.0252士0.0053"'00300.3372±0.0188020300.3112土0.0127'040300.3002士0.0179'080300.2826士0.0129'"200300.2872士0.0163'"20201/1300.1828士0.0156"'20400.5/1300.1594士0.0138"'20800.25/1300.1556士0.0188'"400300.312±0.0091'"40202/1300.2466士0.02I0"'40401/1300.1344土0.0250"'40800.5/1300.1476土0.0077'"800300.303土0.0107"80204/1300.2688士0扁5"'80402/1300.1442i0扁l"'80801/1300.111土0.0124"'注與高糖組比較'P<0.05，"P<0.01,"'P<0.001。血管內(nèi)皮細(xì)胞受損是糖尿病引起心臟病的重要因素。從表1可見(jiàn)，與30mM的葡萄糖培養(yǎng)基(模擬糖尿病環(huán)境)72小時(shí)，血管內(nèi)皮細(xì)胞上清液中的LDH(為一種細(xì)胞損傷指標(biāo))的活性顯著升高，與正常培養(yǎng)基(5mM的葡萄糖培養(yǎng)基)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;黃芩苷及絞股藍(lán)總甙單用均有一定降低LDH活性的作用，但作用較弱；當(dāng)兩者合用時(shí)，6其作用顯著增強(qiáng)，特別是當(dāng)黃芩苷與絞股藍(lán)總甙的比例為(0.52):1時(shí)各組的協(xié)同作用最為明顯。試驗(yàn)2:不同比例的黃芩苷與絞股藍(lán)總武組合對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的血管平滑肌細(xì)胞，傾去培養(yǎng)基，用2mlTNE消化一定時(shí)間后，當(dāng)細(xì)胞產(chǎn)生收縮，并開(kāi)始脫落時(shí)，傾去TNE，準(zhǔn)確加入一定體積的10%FBSRPMI1640培養(yǎng)基，用吸管反復(fù)吹打使貼壁細(xì)胞脫落，并使細(xì)胞在培養(yǎng)基中分散均勻后，取該細(xì)胞懸液在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)，然后根據(jù)需要，用10。/。FBSRPMI1640培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋成2><105/孔濃度，并立即加入內(nèi)置已進(jìn)行消毒處理過(guò)的蓋玻片的96孔板，24小時(shí)后，將10%FBSRPMI1640培養(yǎng)基換成不含血清的RPMI1640培養(yǎng)基使其同步化，同步24小時(shí)后，將培養(yǎng)基分別換成5.5mMglucose10%FBSRPMI1640(對(duì)照)或30.0mMglucose10%FBSRPMI1640，分別加入不同濃度的黃芩苷及絞股藍(lán)總甙，然后在加藥后72小時(shí)，與MTT作用4小時(shí)后，用酶標(biāo)儀測(cè)定其光密度(OD)，波長(zhǎng)為570nm。黃芩苷和絞股藍(lán)總甙的藥物濃度及相應(yīng)的試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。表2不同比例的黃芩苷與絞股藍(lán)總甙組合對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增值的影響(X土S,N二5)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與高糖組比較*P<0.05,**P<0.01，"*P<0.001。血管平滑肌增殖是糖尿病慢性并發(fā)癥的主要特征之一。從表2可見(jiàn)，與30mM的葡萄糖培養(yǎng)基72小時(shí)，血管平滑肌細(xì)胞顯著增殖，與正常培養(yǎng)基(5mM的葡萄糖培養(yǎng)基)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；黃芩苷及絞股藍(lán)總甙單用均有一定抑制其增殖的作用，但作用較弱;當(dāng)兩者合用時(shí)，其作用顯著增強(qiáng)，特別是當(dāng)黃芩苷與絞股藍(lán)總甙的比例為(0.51):1時(shí)的各組協(xié)同作用最為明顯。試驗(yàn)3:不同來(lái)源的黃芩苷與不同來(lái)源的絞股藍(lán)總甙組合對(duì)高糖致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用細(xì)胞培養(yǎng)如試驗(yàn)l，在同步24小時(shí)后，將培養(yǎng)基分別換成5.5mMglucose10%FBSRPMI1640(對(duì)照)或30.0mMglucose10%FBSRPMI1640,按表3所示分別加入不同濃度的由實(shí)施例l，實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4及實(shí)施例5的黃芩苷及絞股藍(lán)總皂苷(甙)，然后在加藥后72小時(shí)，取上清液分別測(cè)定乳酸脫氫酶(LDH)的水平，本試驗(yàn)直接用光密度(OD)代表其活性。結(jié)果見(jiàn)表3表3不同來(lái)源的黃芩苷、絞股藍(lán)總甙相互組合對(duì)高糖致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用pas，N-5)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與高糖組比較P<0.001。從表3可見(jiàn)，與30mM的葡萄糖培養(yǎng)基(模擬糖尿病環(huán)境)72小時(shí)，血管內(nèi)皮細(xì)胞上清液中的LDH(為一種細(xì)胞損傷指標(biāo))的活性顯著升高，與正常培養(yǎng)基(5mM的葡萄糖培養(yǎng)基)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；不同來(lái)源的黃芩苷與不同來(lái)源的絞股藍(lán)總武配伍均可顯著降低LDH活性，與高糖組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而各組合物之間的作用強(qiáng)度相似，相互之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。試驗(yàn)4:對(duì)I型糖尿病性心臟病的治療作用隨機(jī)選取雄性SD大鼠，體重250-280g，腹腔注射STZ65mg/kg體重后，隨機(jī)血糖>16.7mm0l/L并且持續(xù)1周以上為糖尿病大鼠模型,同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組。在糖尿病造模一個(gè)月后，將模型動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、市售絞股藍(lán)總甙(含量81.5%)100mg/kg(以絞股藍(lán)總甙計(jì)，以下同)、市售黃芩苷(含量98.3%)100mg/kg(以黃芩苷計(jì)，以下同)、胰島素20U/kg、絞股藍(lán)總甙50mg/kg加黃芩苷50mg/kg合用組。模型組和對(duì)照組每天則給予等體積的蒸餾水，每天l次，連續(xù)1個(gè)月。在末次給藥后24小時(shí)，將大鼠用戊巴比妥鈉(40mg/kg,ip)麻醉，仰位固定。分離右側(cè)股動(dòng)脈、股靜脈，分別做插管。分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，做動(dòng)脈插管，直至進(jìn)入左心室，插管內(nèi)充滿(mǎn)肝素鈉(40IU/ml)溶液。插管連接壓力換能器，壓力換能器連接RM—6000型四道生理紀(jì)錄儀。手術(shù)完成后，股靜脈注射肝素鈉溶液(500IU/kg)使動(dòng)物全身肝素化，并同步監(jiān)測(cè)肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定30分鐘后，測(cè)定并記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖，左心室峰值(LVSP)，左心室內(nèi)壓的微分(+dp/dUax，—dp/dtmax)，左心室舒張末期壓(LVSP)，股動(dòng)脈血壓(BP)。結(jié)果見(jiàn)表4。表4對(duì)I型糖尿病心臟病大鼠模型的影響(X士S，N=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與模型組比較"P<0.01,*"P<0.001,與合用組比較"P<0.01。從表4可見(jiàn)，糖尿病大鼠的心率減慢，LVSP降低、LVDP升高，其士dp/dt顯著變小，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。膠股藍(lán)總甙和黃芩苷均有改善糖尿病心臟病大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)，但作用較弱，與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而絞股藍(lán)總甙與黃吝苷合用可顯著改善糖尿病心臟病大鼠血流動(dòng)力學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)，并顯著增加糖尿病大鼠心率，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)提取物與黃芩提取物存在顯著的協(xié)同作用，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。絞股藍(lán)總甙與黃芩苷合用的療效明顯優(yōu)于陽(yáng)性藥胰島素(PO.01)。試驗(yàn)5:對(duì)II型糖尿病性心臟病的治療作用隨機(jī)選取雄性SD大鼠，體重250280g，在給予高脂飼料2個(gè)月后，腹腔注射STZ25mg/kg以造成II糖尿病大鼠模型，在造型3天后測(cè)定其血糖、血脂水平，取血糖水平>11.0mmol/L的動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，然后根據(jù)血糖、血脂水平及體重將模型動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、絞股藍(lán)總皂苷(含量72.7%，實(shí)施例4)100mg/kg、市售的黃芩提取物(含量88.1%，實(shí)施例2)100mg/kg、絞股藍(lán)總皂苷50mg/kg加黃芩提取物50mg/kg合用組。模型組和對(duì)照組每天則給予等體積的蒸餾水，每天1次，連續(xù)1個(gè)月。在末次給藥后24小時(shí)，將大鼠用戊巴比妥鈉(40mg/kg，ip)麻醉，仰位固定。分離右側(cè)股動(dòng)脈、股靜脈，分別做插管。分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，做動(dòng)脈插管，直至進(jìn)入左心室，插管內(nèi)充滿(mǎn)肝素鈉(40IU/ml)溶液。插管連接壓力換能器，壓力換能器連接RM—6000型四道生理紀(jì)錄儀。手術(shù)完成后，股靜脈注射肝素鈉溶液(500IU/kg)使動(dòng)物全身肝素化，并同步監(jiān)測(cè)肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定30分鐘后，測(cè)定并記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖，左心室峰值(LVSP)，左心室內(nèi)壓的微分(+dp/dtmax，—dp/dtmax)，左心室舒張末期壓(LVSP)，股動(dòng)脈血壓(BP)。內(nèi)壓的微分(+dp/dtmax，一dp/dtmax)，左心室舒張末期壓(LVSP)，股動(dòng)脈血壓(BP)。結(jié)果見(jiàn)表5。表5TSK對(duì)n型糖尿病心臟病大鼠模型的影響(X士S，N=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與模型組比較"PO.Ol，'"PO.OOl,與合用組比較"P<0.01。從表5可見(jiàn)，II型糖尿病大鼠的心率減慢，LVSP降低、LVDP升高，其土dp/dt顯著變小，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。膠股藍(lán)總皂苷和黃芩提取物均有改善糖尿病心臟病大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)，但作用較弱，與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物合用可顯著改善糖尿病心臟病大鼠血流動(dòng)力學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)，并顯著增加糖尿病大鼠心率，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物存在顯著的協(xié)同作用，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物合用的療效明顯優(yōu)于陽(yáng)性藥吡格列酮(PO.01)。試驗(yàn)6:對(duì)糖尿病神經(jīng)病變的保護(hù)作用隨機(jī)選取雄性SD大鼠，體重250-280g,腹腔注射STZ65mg/kg體重后，隨機(jī)血糖>16.7mmol/L并且持續(xù)l周以上為糖尿病大鼠模型,同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組。在糖尿病造模一個(gè)月后，將模型動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、絞股藍(lán)總皂苷(含量72.7%，實(shí)施例4)100mg/kg、市售的黃芩提取物(含量88.1%，實(shí)施例2)100mg/kg、胰島素20U/kg、絞股藍(lán)總皂苷50mg/kg加黃芩提取物50mg/kg合用組。模型組和對(duì)照組每天給予等體積的蒸餾水，每天l次，連續(xù)l個(gè)月，胰島素組則每天皮下注射中效胰島素。在末次給藥后24小時(shí)用生物信號(hào)系統(tǒng)測(cè)定運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度及感覺(jué)神經(jīng)傳導(dǎo)速度，同時(shí)取血測(cè)定其血糖水平，結(jié)果見(jiàn)表6。從表6可見(jiàn)，糖尿病大鼠的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度及感覺(jué)傳導(dǎo)速度均明顯減慢，其血糖水平明顯升高，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。膠股藍(lán)總皂苷和黃芩提取物均有改善糖尿病神經(jīng)病變大鼠的神經(jīng)傳導(dǎo)速度，與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物合用的作用明顯增強(qiáng)，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物存在顯著的協(xié)同作用，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。絞股藍(lán)總皂苷與黃芩提取物合用的療效明顯優(yōu)于陽(yáng)性藥胰島素(PO.01)。表6TSK對(duì)I型糖尿病神經(jīng)病變大鼠模型的影響(X士S，N=8)組另IJ運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(m/s)感覺(jué)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(m/s)血糖(mmol/L)對(duì)照組42.4±3.5"'44.2±6.40'"5.5±4.3'"模型組31.4±4.7021.3±5.526.4±5.2絞股藍(lán)總皂苷(100mg/kg)35.1士3.7"28.7±5.1*"26.8±6.5黃芩提取物(100mg/kg)34.3±2,2"27.4±5.6"25.9±3.3絞股藍(lán)總皂苷+黃芩提取物(50mg+50mg/kg)39.1±2.7**37.6±7.2***26.6±3.7"*胰島素(20mg/kg)36.3士3.3"30.5士6.5"11.2士5.5"注與模型組比較"PO.Ol，"'PO.OOl，與合用組比較"PO.Ol。試驗(yàn)7:比較研究市售絞股藍(lán)總甙與黃芩苷配伍和絞股藍(lán)總皂苷與市售黃芩提取物配伍對(duì)II型糖尿病心臟病大鼠的保護(hù)作用隨機(jī)選取雄性SD大鼠，體重250280g，在給予高脂飼料2個(gè)月后，腹腔注射STZ25mg/kg以造成II糖尿病大鼠模型，在造型3天后測(cè)定其血糖、血脂水平，取血糖水平>11.0mmol/L的動(dòng)物作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，然后根據(jù)血糖、血脂水平及體重將模型動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、市售絞股藍(lán)總甙100mg/kg、黃芩苷100mg/kg、市售黃芩提取物IOOmg/kg加絞股藍(lán)總苷100mg/kg、吡格列酮20mg/kg。模型組和對(duì)照組每天給予等體積的蒸餾水，每天1次，連續(xù)1個(gè)月。在末次給藥后24小時(shí)稱(chēng)體重，取血測(cè)定相應(yīng)生化指標(biāo)，同時(shí)取心臟稱(chēng)濕重并計(jì)算其臟器指數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表7。表7比較研究?jī)煞N組合物對(duì)n型糖尿病大鼠的影響(X士S,N^0)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與模型組比較"P<0.01,PO.OOl。從表7可見(jiàn)，糖尿病大鼠心臟指數(shù)顯著增加，其糖化血紅蛋白水平及乳酸脫氫酶(LDH)活性顯著增加，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而黃芩苷與絞股藍(lán)總甙組合物、黃芩提取物與絞股藍(lán)總皂苷組合物以及吡格列酮均有較好的防治作用，與模型組比較有不統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而三種藥物的作用強(qiáng)度相似，相互之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。權(quán)利要求1.用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物，其特征是以絞股藍(lán)總皂苷與黃芩苷為有效藥物成分，與藥學(xué)中可以接受的輔助成分組成，有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷/黃芩苷的重量比為1/(0.25～4)。2.如權(quán)利要求1所述的用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物，其特征是所說(shuō)的有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷/黃芩苷的重量比為1/(0.5~2)。3.如權(quán)利要求1所述的用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物，其特征是所說(shuō)的有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷/黃芩苷的重量比為1/1。4.如權(quán)利要求1至3之一所述的藥物組合物，其特征是所說(shuō)有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷為含有該總皂苷的絞股藍(lán)提取物。5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征是所說(shuō)的絞股藍(lán)提取物中絞股藍(lán)總皂苷的重量含量>50%。6.如權(quán)利要求1至3之一所述的藥物組合物，其特征是所說(shuō)有效藥物成分中的黃芩苷為含有黃岑苷的黃芩總苷。7.如權(quán)利要求1至3之一所述的藥物組合物，其特征是所說(shuō)有效藥物成分中的黃芩苷為黃芩苷的重量含量>50%的黃芩提取物。8.如權(quán)利要求1至3之一所述的藥物組合物，其特征是由所說(shuō)的有效藥物成分與藥學(xué)中可以接受的輔助成分共同組成的口服型藥物制劑。全文摘要用于防治糖尿病慢性并發(fā)癥的藥物組合物，其特征是以絞股藍(lán)總皂苷與黃芩苷為有效藥物成分，與藥學(xué)中可以接受的輔助成分共同組成，有效藥物成分中的絞股藍(lán)總皂苷與黃芩苷的重量比為1∶(0.25～4)。該藥物組合物在防治糖尿病慢性并發(fā)癥，特別是在防治糖尿病心臟病及糖尿病神經(jīng)病變方面可具有顯著的功效和作用。文檔編號(hào)A61K36/185GK101513450SQ200810045378公開(kāi)日2009年8月26日申請(qǐng)日期2008年2月19日優(yōu)先權(quán)日2008年2月19日發(fā)明者唐大軒,易進(jìn)海,蕾程,譚正懷申請(qǐng)人:四川省中醫(yī)藥科學(xué)院