專利名稱：：羥基酪醇和含有羥基酪醇的橄欖提取物/濃縮物的新穎用途的制作方法羥基酪醇和含有羥基酪醇的橄欖提取物/濃縮物的新穎用途本發(fā)明涉及羥基酪醇或包含羥基酪醇的組合物的下述用途用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物(優(yōu)選人)、特別是老年動(dòng)物(優(yōu)選老年人)中維持眼健康，用于改善動(dòng)物(優(yōu)選人)視覺，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持高分辨率視覺和/或用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視敏度,-以及用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺性能和Z或在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺功能。顧名思義，年齡相關(guān)的黃斑變性(AMD)是與年齡相關(guān)的黃斑的變性病癥。黃斑表示視網(wǎng)膜的中心部分，其對于高分辨率視覺而言是關(guān)鍵性的，因?yàn)榇颂幑飧惺芷?感光細(xì)胞)的密度最大。因此，如果黃斑出現(xiàn)功能障礙，則需要高分辨率的視覺工作例如識(shí)別臉部或閱讀變得越來越困難，直到在深度AMD(advancedAMD)的晚期變得不可能進(jìn)行。事實(shí)上，該病癥是美國和世界上其他國家中失明的主導(dǎo)原因。通常，AMD在超過55和65之間的年齡開始，在黃斑區(qū)域內(nèi)和周圍積聚特征性的黃色沉積物，稱作玻璃疣?；加羞@些早期改變的大部分人仍然具有滿意的視覺，但是它們處于發(fā)生深度AMD的風(fēng)險(xiǎn)下。玻璃疣較大且數(shù)量眾多并且伴隨著與光感受器鄰近的色素細(xì)胞層(稱作視網(wǎng)膜色素上皮(RPE))中的擾動(dòng)時(shí)，該風(fēng)險(xiǎn)顯著地更高。造成重大視覺損失的深度AMD具有兩種形式干性和濕性。中央地圖樣萎縮(Centralgeographicatrophy)——深度AMD的"干性"形式——通過眼中心部分光感受器和支持光感受器的細(xì)胞的損失引起這些問題。目前對該病癥尚無治療方法。新生血管(Neovascular)或滲出性AMD"^深度AMD的"濕性"形式——由于黃斑下和進(jìn)入黃斑內(nèi)的異常血管生長(血管發(fā)生)而引起視覺損失。這些新形成的血管是有缺陷的，血從中滲漏造成血在視網(wǎng)膜下積累，這導(dǎo)致對黃斑功能層的不可逆的損傷。如果不治療該病癥，則最終視覺會(huì)完全喪失。盡管目前已開始能夠獲得針對該新生血管("濕性")形式AMD的有效但是非常昂貴的治療方法，但是理想的選擇仍然是預(yù)防該疾病發(fā)生或至少降低該病癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。為了理解AMD的病因?qū)W及其可能的預(yù)防或治療，認(rèn)識(shí)到光感受器長期暴露于視網(wǎng)膜環(huán)境中的氧化性損傷是重要的，所述氧化性損傷的特征是光和氧的同時(shí)存在。結(jié)果，光感受器變得受損和功能紊亂，并且這些"失效"光感受器必須被去除，同時(shí)必須形成新的光感受器。前一工作由RPE細(xì)胞完成。這些細(xì)胞在巨大的代謝負(fù)荷下發(fā)揮作用。據(jù)估計(jì)在約10天的時(shí)間段內(nèi)，每個(gè)單個(gè)RPE細(xì)胞必須將約50個(gè)光感受器吞噬、消化并排入血流中。因此在60年間，任何單個(gè)RPE細(xì)胞必須處理超過100000個(gè)光感受器。不足為奇，在這一密集的代謝活動(dòng)期間失效光感受器的消化和排除并不總是完全的并且細(xì)胞碎片不斷累積，造成漸進(jìn)性的功能障礙，最終造成RPE以及光感受細(xì)胞死亡。因此，預(yù)防AMD的符合邏輯的目標(biāo)似乎是以下這些1:通過抗氧化劑減少氧化性損傷；2:通過可特異吸收藍(lán)光的黃色物質(zhì)(例如葉黃素和玉米黃素)減少最具損傷性的藍(lán)光的量；3:支持RPE細(xì)胞，使其更好地應(yīng)付其極端的代謝負(fù)荷；4:通過抑制血管發(fā)生減少新的有缺陷血管的產(chǎn)生。胡蘿卜醇(xanthophyll)型類胡蘿卜素葉黃素(lutein)和玉米黃素(zeaxanthin)天然在中心視網(wǎng)膜中累積至人體中各處所觀察到的最高濃度。因此，并且由于它們的藍(lán)光(其能夠引起對視網(wǎng)膜的損傷)吸收和抗氧化特征，有人提出葉黃素和玉米黃素能夠有助于AMD的風(fēng)險(xiǎn)降低。對膳食補(bǔ)充抗氧化劑維生素C和E與)8-胡蘿卜素和鋅的組合已經(jīng)被證明降低了AMD發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)。在其整個(gè)生命中用消除了類胡蘿卜素的膳食飼養(yǎng)的猴子中，黃斑下的視網(wǎng)膜色素上皮是有缺陷的，其含有的細(xì)胞比用類胡蘿卜素詞養(yǎng)的猴子少得多。另外，最近推測的炎癥在AMD病程中的重要性與環(huán)氧合酶(COX)抑制劑可能有效預(yù)防AMD的預(yù)期一致，這受到下述發(fā)現(xiàn)的支持特異的COX抑制劑也抑制VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)。因此，阿司匹林也顯示降低AMD的風(fēng)險(xiǎn)。具有抗血管生成特征的另一物質(zhì)是大豆的主要成分一一染料木黃酮。因此，染料木黃酮可能與AMD風(fēng)險(xiǎn)的降低相關(guān)，這是受到以下觀察結(jié)果支持的一個(gè)觀點(diǎn)亞洲老年人中濕性AMD的發(fā)病率低于年齡匹配的歐洲人中的發(fā)病率。上述物質(zhì)主要適用于降低發(fā)生AMD的風(fēng)險(xiǎn)。最近已能夠獲得用于治療新生血管AMD的針對VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)的抗體。然而，它們必須被注射進(jìn)眼球中，這對患者而言是有風(fēng)險(xiǎn)的和麻煩的。因此，對患有AMD或處于發(fā)生AMD風(fēng)險(xiǎn)下的人而言，對AMD預(yù)防和不危險(xiǎn)療法的醫(yī)學(xué)需要仍未解決。最近，丙烯醛對培養(yǎng)的RPE細(xì)胞的作用據(jù)我們所知首次由Jiaetal.在InvestOphthalmolVisSci.2007Jan;48(l):339-348:Acrolein,aToxicantinCigaretteSmoke，CausesOxidativeDamageandMitochondrialDysfimctioninRPECells:Protectionby(R)-a-LipoicAcid中描述。該出版物記錄了丙烯醛是線粒體毒性的，并且硫辛酸能夠降低氧化性RPE損傷，導(dǎo)致硫辛酸和具有相似作用機(jī)制的化合物能夠治療或預(yù)防AMD的結(jié)論。目前我們出人意料地發(fā)現(xiàn)，羥基酪醇也可以降低對暴露于強(qiáng)氧化劑丙烯醛的經(jīng)培養(yǎng)的RPE細(xì)胞的氧化性RPE損傷。羥基酪醇發(fā)揮作用的潛在機(jī)制可以經(jīng)由編碼抗氧化蛋白質(zhì)和第II階段酶的基因的關(guān)鍵調(diào)節(jié)子一一Nrf2實(shí)現(xiàn)，所述第II階段酶中和自由基并將其他毒性化合物轉(zhuǎn)化為活性較弱的分子。在該過程中，第II階段酶將"中和"元件粘附在不想要的物質(zhì)上，使它們更容易被身體排泄。第n階段酶的例子是已知介導(dǎo)酶促身體解毒和/或顯示抗氧化功能從而保護(hù)細(xì)胞免受毒素?fù)p傷的谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶、NAD(P)H:醌氧化還原酶1、UPD-葡萄糖苷酸基轉(zhuǎn)移酶、7-谷氨酸半胱氨酸連接酶和血紅素氧化酶-1。我們的數(shù)據(jù)表明羥基酪醇提高APRE19細(xì)胞中的Nrf2蛋白質(zhì)水平，并隨后以積極方式調(diào)控GSH(谷胱甘肽的還原丙烯醛硫辛酸7形式)和SOD(超氧化物岐化酶)水平。另外，羥基酪醇處理保護(hù)細(xì)胞免受線粒體功能減退并且提高細(xì)胞生存力。因此，羥基酪醇能夠在人中治療和/或預(yù)防AMD。氧化應(yīng)激和導(dǎo)致的RPE細(xì)胞損傷是AMD發(fā)病機(jī)制的一部分。丙烯醛在RPE細(xì)胞中引起氧化應(yīng)激。因此，該細(xì)胞培養(yǎng)物模型能夠用于鑒定保護(hù)RPE細(xì)胞在氧化應(yīng)激后免于細(xì)胞死亡的化合物?？梢酝茰y，任何抗氧化劑都有可能保護(hù)RPE細(xì)胞免受丙烯醛誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激。我們發(fā)現(xiàn)在測試的抗氧化劑的整個(gè)陣列中，HT是唯一能夠保護(hù)的抗氧化劑。如引言中所述，視網(wǎng)膜環(huán)境的特征是光和氧的同時(shí)存在。這種狀態(tài)導(dǎo)致產(chǎn)生大量活性氧物質(zhì)和高度活性的氧自由基例如羥基自由基和超氧自由基。羥基酪醇在給定的實(shí)施例中驚人地顯示能夠減輕丙烯醛的毒性。因此，羥基酪醇及其衍生物以及含有羥基酪醇的任何橄欖果汁/水性制劑/提取物/濃縮物可能能夠維持視覺性能和/或視覺功能。視覺功能是視覺性能(即考慮速度和準(zhǔn)確度的視覺工作的性能)的前題條件。視覺工作可包括若干種能力，如閱讀以確定的字體大小書寫的文本；在不同光照條件下和針對近距離以及遠(yuǎn)距離物體的視敏度(能夠看到清晰/調(diào)好焦距的圖像)；在確定的光照條件下在圖像中分辨確定大小的細(xì)節(jié)的能力(圖像分辨率、對比度(即在低光照條件(弱對比)下以高圖像分辨率觀察的能力)))，和在不同光照條件之間迅速適應(yīng)的能力。羥基酪醇及其衍生物式I的化合物羥基酪醇(式I的化合物；3，4-二羥基苯乙醇)可以是合成來源的，或者其可以與其他水溶性多酚(例如酪醇或橄欖苦苷)一起從橄欖葉、橄欖果實(shí)和橄欖油生產(chǎn)的植被水(vegetationwater)的提取中獲得。涉及從橄欖葉中提取橄欖苦苷和/或羥基酪醇的參考文獻(xiàn)的例子是WO02/18310、US2002/0198415、WO2004/005228、US6,416,808和US2002/0058078，它們公開了下述方法將橄欖植被水用酸水解2到12個(gè)月，直至存在的橄欖苦苷中至少90%被轉(zhuǎn)化。從橄欖、橄欖果肉、橄欖油和橄欖研磨廢水中提取酚類化合物的方法由Usanalnc.專利US6,361,803和WO01/45514和US2002/0004077描述。EP-A1582512描述了從橄欖葉中提取羥基酪醇。從去核橄欖的植被水中獲得羥基酪醇和/或橄欖苦苷的方法公開于US2004/0039066Al中第-段。衍生物可以例如是酯。羥基酪醇的優(yōu)選的酯的一個(gè)例子是橄欖苦苷?？商貏e地根據(jù)US6,416,808(第4欄第37行到第7欄第27行)；WO2004/005228;US6,936,287;US2005-103711;US2003-108651;US2002-198415;US6,165,475;JP2001-252054;JP2000-319161;WO01/45514(Us扁);US6,358,542(特別見第4欄第1行到第9欄第50行和實(shí)施例1-5和11-13);US6,361,803(特別見第3欄第64行到第9欄第47行和實(shí)施例1_5和ii_i3);和WO2006/084658中公開的方法之一制造植被水。優(yōu)選地如US6,416,808(第4欄第37行到第7欄第27行)中所公開的內(nèi)容來制造植被水。還可使用植被水濃縮物代替羥基酪醇；然而優(yōu)選使用純度至少為1.5重量％，優(yōu)選地至少為30重量％，更優(yōu)選地至少為50重量％的羥基酪醇。一種特別合適的植被水濃縮物是例如可商業(yè)得自CreAgri,Hayward，美國的"HDDROX⑧6%"，"HDDROX6%"含有以HDDROX6%總重為基礎(chǔ)5到8重量％的蛋白質(zhì)，45到68重量％的碳水化合物，17到30重量%的脂肪，8到15重量％的灰分和最少6重量％的水溶性單酚和多酚。也可使用均可商業(yè)得自CreAgri，Hayward，美國的"HIDROX⑧2%"和"HIDROX9%"，以及可商業(yè)得自GlanbiaandIndena(Milan,Italy)的以下產(chǎn)品含有20到35重量％羥基酪醇和4到6重量％酪醇的OLIVACTIV;總酚含量^30重量％(通過UV測量)，羥基酪醇量2.5重量％(通過HPLC測量)，毛蕊花糖苷(verbascoside)量S.O重量％(通過HPLC測量)的OLEASELECT;和每kg含有22到24g羥基酪醇和5.0到6.5g酪醇的粉末OLIVE(OLEA)DRY。9其他合適的產(chǎn)品是可商業(yè)得自Seppic的Prolivols，其含有35重量％的多酚，特別是20mg羥基酪醇(每gProlivols)和3mg酪醇(每gProlivols);以及OliveBraunStandard500(來自obipektin):每kg含l.O到2.2g羥基酪醇和0.2到0.7g酪醇的粉末；Olivex橄欖多酚液體PlO(來自AlbertIsliker):每kg含2.0到3.5g羥基酪醇和0.2到1.0g酪醇的液體；Olivex橄欖多酚(來自AlbertIsliker):每kg含22到23g羥基酪醇和6.5到8.0g酪醇的粉末；和OlivePolyphenolsNLT(來自LalilabInc.)，其含有2.0到6重量％的羥基酪醇和0.7至".1重量％的酪醇。在合適的可商業(yè)獲得的植被水濃縮物中，羥基酪醇的量在每kg植被水濃縮物總重1.0到220g的范圍內(nèi)變化。酪醇的量優(yōu)選地在每kg植被水濃縮物總重0.2到45g的范圍內(nèi)變化。羥基酪醇與酪醇的重量比例優(yōu)選地在100:10和100:40之間，最優(yōu)選地在100:18和100:35之間。"老年人"在本發(fā)明的上下文中表示年齡在50到125范圍內(nèi)，優(yōu)選地年齡在60到90范圍內(nèi)的人。"治療"在本發(fā)明的上下文中被定義為口服應(yīng)用，從而終止或延遲眼疾的發(fā)展。"預(yù)防"在本發(fā)明的上下文中被定義為目的是減小罹患眼疾的風(fēng)險(xiǎn)的干預(yù)措施。"維持眼健康"在本發(fā)明的上下文中被定義為確保眼、尤其是視網(wǎng)膜及其不同層整體保持完全有功能或基本有功能或部分有功能。"改善視覺"在本發(fā)明的上下文中表示一般性地改善視覺性能，如通過視覺低分辨率圖表所測量的，如ETDRS(早期治療糖尿病性視網(wǎng)膜病研究)圖表。"維持高分辨率視覺"在本發(fā)明的上下文中表示維持通過閱讀圖表所測量的閱讀能力。"維持視敏度"在本發(fā)明的上下文中表示預(yù)防視敏度的減退。視敏度是最普遍(但不是唯一)的視覺功能臨床度量。視敏度是在標(biāo)準(zhǔn)化的距離下隨著符號(hào)大小變化而鑒別白色背景上黑色符號(hào)能力的定量度量。視敏度代表在這樣的圖表(通常是所謂的SnellenChart)上恰好能夠可靠鑒別的最小尺寸。視敏度通常被表述為普通分?jǐn)?shù)(commonfraction)。使用米作為測量單位，該分?jǐn)?shù)視敏度相對于6/6表述。具有6/6的視敏度表示通常應(yīng)當(dāng)在6米外被識(shí)別的字母大小確實(shí)在該距離被識(shí)別。這是最好的視敏度，并且在十進(jìn)制體系中代表表示100%視敏度的1.0。6/60的視敏度表示在6米處看到具有正常視覺的人在60米距離能看到的細(xì)節(jié)，這表示10%視敏度。然而，視敏度也可以高于100%。用于人(70kg人)的羥基酪醇每日劑量可以從5到500mg變化，優(yōu)選地從15到100mg變化。對哺乳動(dòng)物而言，羥基酪醇的優(yōu)選的劑量從0.28到1.9mg/kg代謝體重變化，其中對哺乳動(dòng)物而言"代謝體重"[以kg計(jì)^(體重[以kg計(jì)])075這表示例如對70kg的人而言，優(yōu)選的每日劑量應(yīng)在6.77和45.98mg之間變化，對20kg的狗而言，優(yōu)選的每日劑量應(yīng)在2.23和15.1mg之間變化。動(dòng)物在本發(fā)明的上下文中包括人、寵物(狗、貓、鳥(例如金絲雀、鸚鵡、相思鸚鵡(budgerigars)、貝殼長尾小鸚鵡(shellparakeet)))、農(nóng)業(yè)動(dòng)物、隼和鷹，其中人是特別優(yōu)選的。本發(fā)明還涉及包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物，其用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)、特別是在老年動(dòng)物(優(yōu)選老年人)中維持眼健康，用于改善動(dòng)物(優(yōu)選人)的視覺，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持高分辨率視覺和/或用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視敏度，以及用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺性能和/或在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺功能。本文使用的術(shù)語營養(yǎng)藥物組合物包括食物制品、食品、膳食補(bǔ)劑、營養(yǎng)補(bǔ)劑或用于食物制品或食品的補(bǔ)劑組合物、飲料(例如但不限于運(yùn)動(dòng)飲料、功能性水、果汁、思慕雪；即食飲品)、乳制品(例如但不限于單次酸乳飲品(singleshotyogurtdrink))、營養(yǎng)棒和涂抹物(spreads)。本文使用的術(shù)語"食物制品"是指適用于被人或動(dòng)物消耗的任何食物或伺料。食物制品可以是經(jīng)制備和包裝的食物(例如蛋黃醬、色拉醬、面包或乳酪食物)或動(dòng)物飼料(例如擠壓和成粒的動(dòng)物飼料、粗混合飼料或?qū)櫸锸澄锝M合物)。本文使用的術(shù)語"食品"是指適合人或動(dòng)物消耗的任何物質(zhì)。術(shù)語"食品補(bǔ)劑"是指用于補(bǔ)充人或動(dòng)物膳食的小量化合物，其被包裝在單個(gè)或多個(gè)劑量單位中。膳食補(bǔ)劑通常不提供大量的卡路里，但是可含有其它微量營養(yǎng)物(例如維生素或礦物)。術(shù)語"營養(yǎng)補(bǔ)劑"是指包含與卡路里來源組合的膳食補(bǔ)劑的組合物。在一些實(shí)施方案中，營養(yǎng)補(bǔ)劑是肉替代物或補(bǔ)劑(例如營養(yǎng)或能量棒或營養(yǎng)飲料或濃縮物)。食物制品或食品為例如飲料(如非酒精飲品和酒精飲品)以及要被添加進(jìn)飲用水和液體食物中的液體制劑，非酒精飲品為例如軟飲、運(yùn)動(dòng)飲品、果汁(例如橙汁、蘋果汁和柚子汁)；蔬菜汁例如番茄汁；檸檬水、茶、接近水的飲品和乳和其它乳制品飲品(例如酸乳飲品)和減肥飲品。在另一實(shí)施方案中，食物制品或食品是指包含本發(fā)明的組合物的固體或半固體的食物。這些形式可包括但不限于烘焙的商品如蛋糕和曲奇、布丁、乳制品、糖膏(confection)、點(diǎn)心食物或冷凍糖膏或花式新品(novelties)(例如冰激凌、奶昔)，制備的冷凍肉、糖果、點(diǎn)心制品(例如薯片)，液體食物如湯、涂抹物、醬、沙拉醬、制備的肉制品、乳酪、酸乳和任何其它含脂肪或油脂的食物，和食物成分(例如小麥粉)。術(shù)語食物制品或食品還包括功能性食物和制備的食物制品，后者是指適合人消耗的任何預(yù)先包裝的食物。包括寵物食物組合物的動(dòng)物飼料有利地包括旨在補(bǔ)充必需膳食需要的食物，以及調(diào)劑物(treats)(例如狗餅干)或其它食物補(bǔ)劑。包含本發(fā)明的組合物的動(dòng)物詞料可以是干燥組合物(例如粗粒)、半潮濕組合物、潮濕組合物，或其任何混合物的形式?；蛘呋蛄硗猓瑒?dòng)物飼料是補(bǔ)劑，例如肉湯、引用水、酸乳、粉末、懸浮液、咀嚼物(chew)、調(diào)劑物(例如餅干)或任何其它遞送形式。本發(fā)明的膳食補(bǔ)劑可以以適用于口遞送的任何合適的方式被遞送。本發(fā)明的膳食補(bǔ)劑的成分包含在可接受的用于口消耗的賦形劑和/或載體中。載體和由此產(chǎn)生的膳食補(bǔ)劑自身的實(shí)際形式不是關(guān)鍵的。載體可以是液12體、凝膠、軟膠囊、膠囊、粉末、固體片劑(包衣或非包衣的)、茶等等。膳食補(bǔ)劑優(yōu)選地以片劑或膠囊的形式，最優(yōu)選以硬(殼)明膠膠囊的形式。合適的賦形劑和/或載體包括麥芽糖糊精、碳酸轉(zhuǎn)、磷酸二,丐、磷酸三鈣、微晶纖維素、葡萄糖、米粉、硬脂酸鎂、硬脂酸、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉羥乙酸鈉、交聚維酮、蔗糖、植物膠、乳糖、甲基纖維素、聚維酮、羧甲基纖維素、玉米淀粉等等(包括其混合物)。優(yōu)選的載體包括碳酸鈣、硬脂酸鎂、麥芽糖糊精及其混合物。使用傳統(tǒng)的技術(shù)將多種成分和賦形劑和/或載體混合并形成想要的形式。本發(fā)明的片劑或膠囊可以用腸包衣包裹，所述腸包衣在約6.0到7.0的pH下溶解。在小腸中溶解而不在胃中溶解的合適腸包衣是醋酸鄰苯二甲酸纖維素(celluloseacetatephthalate)。配制和施用技術(shù)的更多細(xì)節(jié)可見于最新版的Remington'sPharmaceuticalSciences(MaackPublishingCo.，Easton,PA)。在其它一些實(shí)施方案中，膳食補(bǔ)劑作為適合被消費(fèi)者添加進(jìn)食物或飲料中的粉末或液體提供。例如，在一些實(shí)施方案中，膳食補(bǔ)劑可以以粉末的形式被施用給個(gè)體，所述粉末例如要通過混合進(jìn)飲料中使用，或通過攪拌進(jìn)半固體的食物(如例如布丁、點(diǎn)心(topping)、醬、濃湯(puree)、烹調(diào)的谷物或沙拉醬)中使用，或以其它方式通過添加進(jìn)食物(例如封裝在食物或飲料容器的蓋中，用于在消耗前立即釋放)使用。膳食補(bǔ)劑可含有一種或多種惰性成分，特別是如果期望限制由膳食補(bǔ)劑添加進(jìn)食譜中的卡路里數(shù)時(shí)。例如，本發(fā)明的膳食補(bǔ)劑也可以含有任選的成分，包括例如草藥、維生素、礦物、強(qiáng)化劑、著色劑、甜味劑、調(diào)味劑、惰性成分等等。在一些實(shí)施方案中，膳食補(bǔ)劑還含有維生素和礦物，包括但不限于磷酸鈣或醋酸鈣；磷酸氫二鉀；硫酸鎂或氧化鎂；鹽(氯化鈉)；氯化鉀或醋酸鉀；抗壞血酸；正磷酸鐵；煙酰胺；硫酸鋅或氧化鋅；泛酸f5;葡萄糖酸銅；核黃素；^-胡蘿卜素；鹽酸吡哆醇；硫胺單硝酸酯；葉酸；生物素；氯化鉻或吡啶甲酸絡(luò)；碘化鉀；硒酸鉀；鉬酸鈉；葉綠醌；維生素D3;氰鈷銨素；亞硒酸鈉；硫酸銅；維生素A;維生素C;肌醇；碘化鉀。維生素和礦物的合適劑量可以通過參考U.S.RDA指南獲得。在其它一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含本發(fā)明的組合物的營養(yǎng)補(bǔ)劑(例如能量棒或肉代替品棒或飲料)。營養(yǎng)補(bǔ)劑可以作為進(jìn)餐或點(diǎn)心替換物使用，并通常提供養(yǎng)分卡路里。優(yōu)選地，營養(yǎng)補(bǔ)劑以平衡的量提供碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪。營養(yǎng)補(bǔ)劑還可包含碳水化合物，單糖、中鏈長度糖或多糖或其組合。單糖可以針對想要的感覺特性選擇。未烹飪的淀粉是復(fù)雜碳水化合物的一個(gè)例子。如果期望其維持其高分子量結(jié)構(gòu)，則食物配制物或其部分中僅應(yīng)該包含未經(jīng)烹飪或加熱加工的碳水化合物，因?yàn)榧訜釙?huì)將復(fù)雜的碳水化合物分解為單純的碳水化合物，其中單純的碳水化合物是單糖或二糖。在一個(gè)實(shí)施方案中，營養(yǎng)補(bǔ)劑包含三種鏈長度水平的碳水化合物(簡單、適中和復(fù)雜；例如蔗糖、麥芽糖糊精和未烹飪的玉米淀粉)來源的組合。要摻入本發(fā)明的營養(yǎng)補(bǔ)劑中的蛋白質(zhì)來源可以是用于營養(yǎng)配制物中的任何合適的蛋白質(zhì)，其可包括乳清蛋白、乳清蛋白濃縮物、乳清粉末、卵、大豆粉、大豆乳、大豆蛋白、大豆蛋白分離物、酪蛋白酸鹽(例如酪蛋白酸鈉、酪蛋白酸鈣鈉、酪蛋白酸鈣、酪蛋白酸鉀)、動(dòng)物和植物蛋白質(zhì)和水解產(chǎn)物及其混合物。選擇蛋白質(zhì)來源時(shí)，首先應(yīng)當(dāng)考慮蛋白質(zhì)的生物學(xué)價(jià)值，最高的生物學(xué)價(jià)值在酪蛋白酸鹽、乳清、乳清蛋白、卵清蛋白和全卵蛋白中發(fā)現(xiàn)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，蛋白質(zhì)是乳清蛋白濃縮物和酪蛋白酸鈣的組合。這些蛋白質(zhì)具有高生物學(xué)價(jià)值；即它們具有高比例的必需氨基酸0參閱ModernNutritioninHealthandDisease,eighthedition,Lea&Febiger,publishers,1986,especiallyVolume1,pages30-32。營養(yǎng)補(bǔ)劑可還含有其它成分，如其它維生素、礦物、抗氧化劑、纖維和其它膳食補(bǔ)劑(例如蛋白質(zhì)、氨基酸、膽堿、卵磷脂、脂肪酸)的一種或組合。一種或若干種這些成分的選擇是配制、設(shè)計(jì)、消費(fèi)者偏好和最終用戶的一個(gè)問題。添加進(jìn)本發(fā)明的膳食補(bǔ)劑中的這些成分的用量是技術(shù)人員容易知道的。對這些用量的指南可以由針對兒童和成人的U.S.RDA提供?？梢员惶砑拥钠渌S生素和礦物包括，但不限于磷酸鈣或醋酸鈣；磷酸氫二鉀；硫酸鎂或氧化鎂；鹽(氯化鈉)；氯化鉀或醋酸鉀；抗壞血酸；正磷酸鐵；煙酰胺；硫酸鋅或氧化鋅；泛酸鈣；葡萄糖酸銅；核黃素；/3-胡蘿卜素；鹽酸吡哆醇；硫胺單硝酸酯；葉酸；生物素；氯化鉻或吡啶甲酸14鉻；碘化鉀；硒酸鉀；鉬酸鈉；葉綠醌；維生素D3;氰鈷銨素；亞硒酸鈉；硫酸銅；維生素A;維生素C;肌醇；碘化鉀。營養(yǎng)補(bǔ)劑可以以多種形式和通過多種生產(chǎn)方法提供。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，為了制造食物棒，液體成分被烹飪；干燥成分與液體成分被添加進(jìn)混合機(jī)中并混合，直到獲得生面團(tuán)相；將生面團(tuán)放進(jìn)擠壓機(jī)中并擠壓；將經(jīng)擠壓的生面團(tuán)切成合適的長度；使產(chǎn)物冷卻。除了本文明確列出的成分外，棒還可含有其它養(yǎng)分和填充劑以加強(qiáng)口味。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解其它成分(例如填充劑、乳化劑、防腐劑等)可以被添加進(jìn)本文所述的這些中，用于加工或制造營養(yǎng)補(bǔ)劑。另外，調(diào)味劑、著色劑、香料、堅(jiān)果等等可以被摻入營養(yǎng)藥物組合物中。調(diào)味劑可以是有味的提取物、揮發(fā)油、巧克力調(diào)味劑、花生醬調(diào)味劑、曲奇碎屑、松脆米(crisprice)、香草或任何可商業(yè)獲得的調(diào)味劑的形式。有用的調(diào)味劑的例子包括，但不限于純凈的茴香提取物、仿造的香蕉提取物、仿造的櫻桃提取物、巧克力提取物、純凈的檸檬提取物、純凈的橙提取物、純凈的薄荷提取物、仿造的菠蘿提取物、仿造的朗姆提取物、仿造的草莓提取物或純凈的香草提取物；或揮發(fā)油，如香蜂葉油(balmoil)、月桂葉油、佛手柑油、柏木油(cedarwoodoil)、胡桃油、櫻桃油、桂皮油、丁香油或薄荷油；花生醬、巧克力調(diào)味劑、香草曲奇碎屑、奶油糖(butterscotch)或太妃糖(toffee)。在一個(gè)實(shí)施方案中，膳食補(bǔ)劑含有可可或巧克力。乳化劑可以被添加用于營養(yǎng)藥物組合物的穩(wěn)定性。合適的乳化劑的例子包括，但不限于卵磷脂(例如來自卵或大豆)，和/或甘油單酯和甘油二酯。其它乳化劑對技術(shù)人員是顯而易見的，對合適的乳化劑的選擇將部分取決于配制物和最終產(chǎn)物。也可以向營養(yǎng)補(bǔ)劑中添加防腐劑以延長產(chǎn)物的貨架壽命。優(yōu)選地，使用如山梨酸鉀、山梨酸鈉、苯甲酸鉀、苯甲酸鈉、或EDTA轉(zhuǎn)二鈉(calciumdisodiumEDTA)。除了上述碳水化合物外，營養(yǎng)藥物組合物可含有天然或人工的(優(yōu)選低卡路里的)甜味劑，例如糖類、環(huán)己烷氨基磺酸鹽(cyclamate)、天冬胺(aspartamine)、天冬甜素(aspartame)、安賽蜜K(acesulfameK)和/或山梨糖醇。如果營養(yǎng)補(bǔ)劑旨在被超重或肥胖的個(gè)體或患有II型糖尿病的個(gè)體(其易于患高血糖癥)消耗，則這類人工甜味劑是期望的。另外，可以向本發(fā)明的營養(yǎng)藥物性組合物中添加多種維生素和礦物補(bǔ)劑，以獲得一些膳食中缺乏的足夠量的必需養(yǎng)分。多種維生素和礦物補(bǔ)劑也可以適用于疾病預(yù)防和防止生活方式引起的營養(yǎng)喪失和缺乏。當(dāng)然，通過營養(yǎng)藥物組合物施用的羥基酪醇的劑量和比例可根據(jù)已知的因素改變，所述因素例如具體組合物的生理特征；接收者的年齡、健康和體重；癥狀的性質(zhì)和程度；共存的治療種類；治療的頻率；和想要的作用，所述因素可以由本領(lǐng)域的專家使用常規(guī)試驗(yàn)確定，或使用關(guān)于營養(yǎng)藥物組合物配制的常見考慮決定。食物或飲料適當(dāng)?shù)孛糠莺屑s0.5mg到約1000mg的羥基酪醇。如果組合物是藥物組合物，則這類藥物組合物可以以從約1mg到約2000mg每劑量單位(例如每膠囊或片劑)的量含有羥基酪醇，或含有從約1mg每日劑量到約3000mg每日劑量的液體制劑。本發(fā)明還涉及包含羥基酪醇的藥物組合物，其用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)、特別是在老年動(dòng)物(優(yōu)選老年人)中維持眼健康，用于改善動(dòng)物(優(yōu)選人)的視覺，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持高分辨率視覺和/或用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視敏度，以及用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺性能和/或在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺功能。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選地還包含可藥用載體。合適的藥物載體例如在本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)--上文Remington'sPharmaceuticalSciences中有所描述。這類可藥用載體的例子為適用于口施用的無機(jī)和有機(jī)載體材料，其包括水、明膠、阿拉伯膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、植物油等等。藥物組合物可還含有常規(guī)的藥物添加劑和佐劑、賦形劑或稀釋劑，其包括但不限于水、任何來源的明膠、植物膠、木質(zhì)素磺酸鹽、滑石、糖、淀粉、阿拉伯膠、植物油、聚亞烷基二醇、調(diào)味劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、緩沖液、潤滑劑、著色劑、濕潤劑、填充劑等等。藥物組合物中各個(gè)組分的劑量和比例可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用常見的臨床前和臨床試驗(yàn)確定，或使用關(guān)于營養(yǎng)藥物組合物配制的常見考慮決疋。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，羥基酪醇通過藥物組合物以單個(gè)劑量或多個(gè)劑量的方式被施用，其用量為至少0.3mg/kg體重/天，優(yōu)選地用量為l-450mg/kg體重/天，最優(yōu)選地用量為4-140mg/kg體重/天。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以是適用于口施用給動(dòng)物體(包括人體)的任何蓋倫形式(galenicform),例如固體形式，例如作為食物或飼料(用的添加劑/補(bǔ)充劑)、食物或飼料預(yù)混物、強(qiáng)化的食物或飼料、片劑、丸劑、顆粒劑、錠劑、膠囊和泡騰配制劑(如粉末和片劑)，或液體形式，例如溶液、乳劑或懸浮液的形式，例如作為飲料、糊劑和油懸浮液。糊劑可以被填充進(jìn)硬或軟殼膠囊中，其中膠囊具有例如(魚、豬、家禽、牛)明膠、植物蛋白或木質(zhì)素磺酸鹽的基質(zhì)。營養(yǎng)藥物和藥物組合物可以是受控(延遲)釋放的配制劑的形式。本發(fā)明接著通過以下的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步闡述。實(shí)施例實(shí)施例1通過常規(guī)工序來制備提供下述劑量的軟明膠膠囊，所述劑量為每粒膠囊50mg羥基酪醇。合適的每日劑量為l到5粒膠囊。其它成分甘油。水、明膠、植物油實(shí)施例2硬明膠膠囊通過常規(guī)工序來制備提供下述劑量的硬明膠膠囊，所述劑量為每粒膠囊75mg羥基酪醇。合適的每日劑量為l到5粒膠囊。其它成分填料適量的乳糖或纖維素或纖維素衍生物潤滑劑如果需要的話，硬脂酸鎂(0.5%)實(shí)施例3片劑通過常規(guī)工序來制備片劑，每片提供100mg羥基酪醇作為活性成分，和微晶纖維素、二氧化硅(Si02)、硬脂酸鎂、交羧甲基纖維素鈉總計(jì)500mg作為賦形劑。實(shí)施例4軟飲可如下制備含有羥基酪醇的軟飲:成分[g]A.果汁濃縮物和水溶性香料60.3°白利糖度，5.15%酸度657.9943.5°白利糖度，32.7%酸度95.96水溶性橙味香料3.43水溶性杏味香料6.71水26.46B.色素iS-胡蘿卜素10%CWS0.89水67,65c.酸和抗氧化劑抗壞血酸4.11無水檸檬酸0.69水43.18D.穩(wěn)定劑果膠0.20苯甲酸鈉2.74水65.6018E.油溶性香料<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>F.活性成分羥基酪醇提供15mg的量混合果汁濃縮物和水溶性香料而不摻入空氣。將色素溶于去離子水中。將抗壞血酸和檸檬酸溶于水中。將苯甲酸鈉溶于水中。果膠在攪拌下被添加并在煮沸時(shí)溶解。冷卻溶液。預(yù)混合橙油和油溶性香料。將"F"下提到的活性成分?jǐn)嚢柽M(jìn)A的果汁濃縮物混合物中。為了制備軟飲，將所有的組分A-F混合在一起后使用Turrax和隨后使用高壓勻化器(p,=200bar,p2=50bar)勻化。實(shí)施例5使用人ARPE-19細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)物測試將人ARPE-19細(xì)胞(人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞系)維持在補(bǔ)充了10%胎牛血清、0.348%碳酸氫鈉、2mML-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100|ag/ml鏈霉素的DMEM-F12培養(yǎng)基(Dulbecco，s改良的Eagle's培養(yǎng)基)中。將細(xì)胞培養(yǎng)物于37"C下維持在95%空氣和5%C02的潮濕大氣中。每3到4天更換培養(yǎng)基。使用IO代以內(nèi)的ARPE-19細(xì)胞。試劑丙烯醛購自SinopharmChemicalReagentCo.,Ltd(上海，中國)。除非另有說明，所有的試劑購自Sigma-AldrichChemicalCo.(St.Louis，MO)。羥基酪醇是化學(xué)合成的。丙烯醛暴露和HTS補(bǔ)充所有實(shí)驗(yàn)用96孔板或6孔板中培養(yǎng)的80%匯合的單細(xì)胞層進(jìn)行。將羥基酪醇(HTS)溶于DMSO(二甲基亞砜)中。每次實(shí)驗(yàn)是在將丙烯醛溶于PBS(磷酸鹽緩沖液)后立即進(jìn)行的。對急性毒性研究而言，將細(xì)胞暴露于丙烯醛24小時(shí)。通過用HTS將細(xì)胞預(yù)處理48小時(shí)或7天，用急性毒性模型研究HTS(羥基酪醇)的保護(hù)作用。針對細(xì)胞生存力的MTT檢驗(yàn)使用MTT還原檢驗(yàn)(MTTassayreductionassay)作為細(xì)胞生存力的定性指標(biāo)。使用微量培養(yǎng)板分光光度計(jì)(SpectraMax340，MolecularDabices，Sunnyvate，CA)在555nm處對光密度讀數(shù)。用未處理的細(xì)胞對吸光度數(shù)值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，以計(jì)算細(xì)胞生存力的改變。針對線粒體膜電位的JC-1檢驗(yàn)使用親脂的陽離子探針5,5，,6，6，-四氯-1，1',3,3，-四乙基苯并咪唑-碳花菁石典(5,5，,6,6，-tetrachloro-1,1,,3，3，-tetraethylbenzimidazol-carbocyanineiodine,JC-l)在活A(yù)PRE-19細(xì)胞中評(píng)價(jià)線粒體電位改變(A)。對定量熒光測量而言，在JC-1染色后將細(xì)胞洗滌一次，并在485nm激發(fā)和535nm和590nm發(fā)射下用多標(biāo)簽計(jì)數(shù)器(Wallac1420;PerkinElmerLifeSciences,Wellesley，MA)掃描，以分別測量綠色和紅色的JC-1熒光。在25個(gè)區(qū)域中掃描每個(gè)孔，所述25個(gè)區(qū)域以5x5的模式成矩形排列，其具有1mm的間隔和約lmn^的光束面積(底部掃描)。對于JC-1染色ARPE-19的顯微鏡觀察而言，用裝備了電荷耦合設(shè)備(CCD)數(shù)字照相機(jī)(DiagnosticInstruments,SterlingHeights,MI)白勺顯，斂f竟(Axiover25;CarlZeissMeditec,Inc.,Thomwood，NY)上的FITC和TRITC熒光濾鏡立方體收集圖像，并用圖像管理軟件(Photoshopver,7,0;AdobeSystems,MountainView,CA)處理?？偪寡趸芰νㄟ^可商業(yè)獲得的檢驗(yàn)試劑盒(Totalantioxidantpower,A-015,JianchengBiochemicalInc.，南京，中國)根據(jù)試劑盒說明書檢驗(yàn)ARPE-19細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)總抗氧化能力。超氧化物岐化酶(SOD)測量通過超氧化物岐化酶檢驗(yàn)試劑盒(A001,JianchengBiochemicalInc.,南京，中國)根據(jù)試劑盒的說明書測量細(xì)胞內(nèi)SOD活性。GSH水平的檢驗(yàn)使用基于巰基-特異性試劑二硫代硝基苯甲酸(DTNB)的檢驗(yàn)，用可商業(yè)獲得的檢驗(yàn)試劑盒(JianchengBiochemicalInc.,南京，中國)測定GSH水平，并在412nm處通過分光光度計(jì)測量加合物。蛋白質(zhì)羰基的檢測為了測定蛋白質(zhì)氧化的度量——蛋白質(zhì)羰基，將細(xì)胞在100mm平板上培養(yǎng)。用Oxyblot蛋白質(zhì)氧化檢測試劑盒(CellBioHTSbs,SanDiego，CA)測定可溶蛋白質(zhì)中的蛋白質(zhì)羰基。核因子-E2-reHTSted因子2(NrfT)的總水平將細(xì)胞在100mm平板上培養(yǎng)，并在RIPA緩沖液[150mMPBS，其含有1%(體積/體積)lgepalCA630、0.5%(重量/體積)去氧膽酸鈉、0.1%(重量/體積)SDS和5pg4d蛋白酶抑制劑混合物]pH7.4中勻化(I:IO)，使用50嗎蛋白質(zhì)進(jìn)行總Nrf2水平的Western分析，并以1:500的效價(jià)用抗-Nrf2抗體(SantaCruz)標(biāo)記。通過來自AmershamPharmacia的ECLWestern印跡檢測試劑盒檢測化學(xué)發(fā)光。細(xì)胞內(nèi)鈣檢驗(yàn)通過可商業(yè)獲得的測試試劑盒(C004，JianchengBiochemicalInc.，，南京，中國)根據(jù)試劑盒說明書測定細(xì)胞內(nèi)(^++水平。線粒體復(fù)合物i、n和m的活性檢驗(yàn)將ARPE-19細(xì)胞在100mm平板中培養(yǎng)，在PBS中洗滌，重懸于適當(dāng)?shù)牡葷B緩沖液(0.25M蔗糖、5mMTris-HCl，pH7.5禾口0.1mM苯甲磺酰氟化物)中并勻化。通過細(xì)胞勻化物的差速離心分離線粒體。使用略微修改的常規(guī)測試，通過光譜測定NADH-CoQ氧化還原酶(復(fù)合物I)、琥珀酸鹽-CoQ氧化還原酶(復(fù)合物II)、CoQ-細(xì)胞色素c還原酶(復(fù)合物III)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)被表示為兩個(gè)或三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的均值士SD，如圖例中所示。使用Prism軟件(4.0a版)，使用單通道ANOVA計(jì)算統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，<0.05的p值被認(rèn)為是顯著的。結(jié)果在圖中使用以下縮寫21"C"=對照；:八"=丙烯醛；'11"=羥基酪醇；:H+A'^羥基酪醇+丙烯醛；;0+『=對照+羥基酪醇；HTSx-A"=不同濃度的羥基酪醇與丙烯醛。HTS對ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的細(xì)胞生存力降低的保護(hù)作用將ARPE-19細(xì)胞以每孔4x104接種于96孔板中。當(dāng)細(xì)胞80%匯合時(shí)用不同水平的HTS將其預(yù)處理48小時(shí)，然后用75pM丙烯醛處理24小時(shí)。在使用的濃度中(ARPE-19中10-100(iMHTS)HTS自身對細(xì)胞生存力沒有明顯的影響(圖O。用HTS預(yù)處理ARPE-19細(xì)胞導(dǎo)致針對75pM丙烯醛誘導(dǎo)的毒性的顯著保護(hù)。在10-20jaM范圍內(nèi)，HTS能夠防護(hù)急性丙烯醛誘導(dǎo)的細(xì)胞生存力的降低。將ARPE-19細(xì)胞預(yù)處理7天時(shí)20nM的HTS完全消除了丙烯醛毒性(圖3)。圖1顯示通過MTT檢驗(yàn)測量的HTS對丙烯醛誘導(dǎo)的細(xì)胞生存力降低的保護(hù)作用。經(jīng)過48h-HTS預(yù)處理的ARPE-19細(xì)胞。數(shù)值是來自四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值土SD;每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。絲表示與對照(HTS0^M)相比pO.Ol。*表示與75iuM丙烯醛無HTS相比p<0.05。圖3顯示通過MTT檢驗(yàn)測量的HTS對丙烯醛誘導(dǎo)的細(xì)胞生存力降低的保護(hù)作用。經(jīng)過7天-HTS預(yù)處理的ARPE-19細(xì)胞。數(shù)值是來自四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值士SD;每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。弁弁表示與HTS0相比p<0.01。*表示與丙烯醛無HTS相比p<0.05且**表示與丙烯醛無HTS相比pO.Ol。HTS對ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體膜電位降低的保護(hù)作用與細(xì)胞生存力的結(jié)果相似，在使用的濃度下(ARPE-19細(xì)胞中10-100pMHTS)HTS自身在兩種ARPE-19細(xì)胞中均對線粒體膜電位沒有明顯影響。與對細(xì)胞生存力的保護(hù)相似，7天的預(yù)處理增強(qiáng)了HTS的保護(hù)作用。如圖2、4和IO中所示，HTS顯著地防止了急性丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體膜電位的降低。濃度低于10pM的HTS對ARPE-19中丙烯醛誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性不顯示保護(hù)作用。圖2顯示通過JC-1檢驗(yàn)測量的HTS對丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體膜電位降低的保護(hù)作用。經(jīng)48h-HTS預(yù)處理的ARPE-19細(xì)胞。數(shù)值是來自三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值土SD;每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。#表示與HTS0相比p<0.05且##表示與HTS0相比p<0.01。*表示與HTS0十丙烯醛75|uM相比p0.05。圖4顯示通過JC-1檢驗(yàn)測量的HTS對丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體膜電位降低的保護(hù)作用。經(jīng)7天-HTS預(yù)處理的ARPE-19細(xì)胞。數(shù)值是來自代表三個(gè)實(shí)驗(yàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值士SD;每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。絲表示與對照相比p<0.01。*表示與無HTS的丙烯醛相比p<0.05且**表示與無HTS的丙烯醛相比p<0.01。HTS調(diào)控丙烯醛誘導(dǎo)的ARPE細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)SOD的減少用75pM丙烯醛處理引起ARPE-19細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)SOD活性的顯著降低(圖6A)。100HTS的預(yù)處理防止了SOD活性的降低(圖6A)。用不含丙烯醛的100)liMHTS處理在未處理的正常ARPE-19細(xì)胞中提高了細(xì)胞內(nèi)SOD活性(圖6A)。HTS調(diào)控丙烯醛誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)總抗氧化能力的降低75的丙烯醛降低了ARPE-19細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)抗氧化能力。用100HTS預(yù)處理防止了細(xì)胞經(jīng)受丙烯醛誘導(dǎo)的所述降低(圖6B)。與SOD活性相似，該保護(hù)可歸因于HTS自身的抗氧化活性，因?yàn)闊o丙烯醛的lOOnMHTS提高了細(xì)胞內(nèi)總體抗氧化能力(圖6B)。圖6顯示ARPE-19細(xì)胞中急性丙烯醛暴露(24小時(shí))誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)SOD、抗氧化能力和Ca^水平的改變，以及HTS(48小時(shí)預(yù)處理)對它們的調(diào)控。數(shù)值是來自三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值士SD，并且每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。#表示與對照相比p<0.05且##表示與對照相比p<0.01。*表示與無HTS的丙烯醛相比p<0.05且**表示與無HTS的丙烯醛相比p<0.01。HTS調(diào)控ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛引起的細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加線粒體功能障礙通常導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)Ca&水平的提高，所述C^+水平是氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙的生物標(biāo)記物。用75nM丙烯醛處理ARPE-19細(xì)胞導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)(^2+水平的顯著提高(圖.6C)。在75pM丙烯醛之前用100iliMHTS預(yù)處理顯著地抑制了Ca"+的提高。100無丙烯醛的HTS未顯著改變ARPE-19細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)Ca^水平。HTS抑制ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的GSH水平降低用HTS將ARPE-19細(xì)胞預(yù)處理48小時(shí)顯示提高GSH水平的趨勢(圖7)。用75丙烯醛處理24小時(shí)引起GSH水平的顯著降低，用100i!MHTS處理48小時(shí)提供了對GSH水平的完全保護(hù)(圖7)。圖7顯示丙烯醛誘導(dǎo)的GSH水平改變和ARPE細(xì)胞中HTS的保護(hù)作用。用HTS預(yù)處理48小時(shí)并暴露于丙烯醛24小時(shí)。數(shù)值是來自四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值士SD，并且每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行。^^#表示與對照相比p<0.01，*表示與75^M無HTS的丙烯醛相比p0.05。HTS抑制ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)羰基增加75丙烯醛處理24小時(shí)引起蛋白質(zhì)氧化指標(biāo)——蛋白質(zhì)羰基的顯著增加(圖8)。用100pMHTS預(yù)處理48小時(shí)顯示對丙烯醛誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)羰基增加的顯著抑制(圖8)。圖8顯示ARPE細(xì)胞中通過western印跡測定的，丙烯醛誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)羰基改變和HTS的保護(hù)作用。HTS預(yù)處理48小時(shí)并暴露于丙烯醛24小時(shí)。蛋白質(zhì)羰基的代表性定量數(shù)據(jù)來自4個(gè)獨(dú)立的相似實(shí)驗(yàn)。HTS調(diào)控ARPE-19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的總Nrf2表達(dá)的降低75(iM丙烯醛處理24小時(shí)引起ARPE-19細(xì)胞中總Nrf2表達(dá)的顯著降低，100uMHTS預(yù)處理48小時(shí)顯著防止了細(xì)胞發(fā)生丙烯醛誘導(dǎo)的總Nrf2的降低(圖9)。圖9顯示ARPE細(xì)胞中通過western印跡測定的，丙烯醛誘導(dǎo)的總Nrf2表達(dá)改變和HTS的保護(hù)作用。HTS預(yù)處理48小時(shí)并暴露于丙烯醛24小時(shí)。HTS調(diào)控ARPE-'19細(xì)胞中丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體復(fù)合物I、II和III的減企用75丙烯醛處理24小時(shí)引起ARPE-19細(xì)胞1中線粒體復(fù)合物24I、n和m活性的顯著降低(圖10A、B和C)。用100nMHTS預(yù)處理顯示對復(fù)合物I(圖10A)、復(fù)合物II(圖10B)和復(fù)合物III(圖10C)的顯著保護(hù)。圖IO顯示ARPE-19細(xì)胞中HTS對丙烯醛誘導(dǎo)的線粒體復(fù)合物減少的保護(hù)。(A)復(fù)合物I，(B)復(fù)合物II，和(C)復(fù)合物III。用不同濃度的HTS預(yù)處理ARPE-19細(xì)胞，然后用75)iM丙烯醛處理。數(shù)值對復(fù)合物I而言是來自四個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值士SD，對復(fù)合物II和III而言是來自三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)的均值±SD，每個(gè)實(shí)驗(yàn)一式兩份進(jìn)行。#表示與對照相比p<0.05和弁弁表示與對照相比p<0.01，^表示與無HTS的75pM丙烯醛相比pO.Ol。權(quán)利要求1.用于以下用途的包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物中維持眼健康，用于改善動(dòng)物視覺，用于在動(dòng)物中維持高分辨率視覺，用于在動(dòng)物中維持視敏度，用于在動(dòng)物中維持視覺性能和/或用于在動(dòng)物中維持視覺功能。2.根據(jù)權(quán)利要求1的營養(yǎng)藥物組合物，其中所述動(dòng)物是人。3.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物中維持眼健康，用于改善動(dòng)物視覺，用于在動(dòng)物中維持高分辨率視覺，用于在動(dòng)物中維持視敏度，用于在動(dòng)物中維持視覺性能和/或用于在動(dòng)物中維持視覺功能的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。4.根據(jù)權(quán)利要求3的用途，其中所述動(dòng)物是人。5.用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性的包含羥基酪醇的藥物組合物。6.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在人中治療年齡相關(guān)的黃斑變性的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。7.用于在動(dòng)物中、特別是在(老年)人中維持眼健康的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。8.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在動(dòng)物中、特別是在(老年)人中維持眼健康的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。9.用于改善動(dòng)物、特別是人的視覺的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。10.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于改善動(dòng)物、特別是人的視覺的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。11.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持高分辨率視覺的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。12.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持高分辨率視覺的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。13.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺性能的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。14.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺性能的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。15.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視敏度的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。16.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視敏度的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。17.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺功能的，包含羥基酪醇的營養(yǎng)藥物組合物。18.羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺功能的用途(或用于制造用于上述用途的組合物的用途)。19.用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性的方法，所述方法通過對人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。20.用于在動(dòng)物中維持眼健康，用于改善動(dòng)物視覺，用于在動(dòng)物中維持高分辨率視覺，用于在動(dòng)物中維持視敏度，用于在動(dòng)物中維持視覺性能和/或用于在動(dòng)物中維持視覺功能的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中所述動(dòng)物是人。22.用于在動(dòng)物中、特別是在(老年)人中維持眼健康的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/(老年)人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。23.用于改善動(dòng)物、特別是人的視覺的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。24.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持高分辨率視覺的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。25.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺性能的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。26.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視敏度的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。27.用于在動(dòng)物中、特別是在人中維持視覺功能的方法，所述方法通過對所述動(dòng)物/人施用有效量的羥基酪醇(或包含羥基酪醇的組合物)來實(shí)現(xiàn)。全文摘要本發(fā)明涉及羥基酪醇或包含羥基酪醇的組合物的下述用途用于在人中治療或預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑變性，用于在動(dòng)物(優(yōu)選人)、特別是老年動(dòng)物(優(yōu)選老年人)中維持眼健康，用于改善動(dòng)物(優(yōu)選人)視覺，用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持高分辨率視覺和/或用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視敏度，以及用于在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺性能和/或在動(dòng)物中(優(yōu)選在人中)維持視覺功能。文檔編號(hào)A61K31/05GK101652130SQ200780052642公開日2010年2月17日申請日期2007年4月18日優(yōu)先權(quán)日2007年4月18日發(fā)明者卡林·威茲,建康·劉,沃夫?qū)に股澈?迎·王-史密特申請人:帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司