專利名稱：：醫(yī)療用途的粘合劑和止血?jiǎng)┑闹谱鞣椒?br>技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)療用途的粘合劑和止血?jiǎng)?。本發(fā)明特別涉及用于制備適于將硬組織和軟組織相互粘合、閉合傷口的粘合劑的試劑盒，以及所述粘合劑自身及其在醫(yī)療領(lǐng)域的應(yīng)用。所述試劑盒或?qū)儆诖说恼澈蟿┲邪圊┭趸傅牡孜镆约岸喾友趸缸陨碜鳛閱为?dú)成分。另外，本發(fā)明的主旨在于新的止血?jiǎng)约爸荚趥陂]合時(shí)結(jié)合使用止血?jiǎng)┖驼澈蟿?br>背景技術(shù)：
：近年來，特別可用于棘手情況下的組織粘合劑的研制有著重要意義。迄今所用的基于丙烯酸酯的組織粘合劑只可以施用于表面?zhèn)谏希驗(yàn)楸┧狨ゲ荒苌锝到獠⑶铱赡芤馕吨卸拘晕ｋU(xiǎn)。因此注意力首先在于所用材料的可生物降解性。出于該理由，諸如植物或動(dòng)物來源的聚合物對(duì)于粘合劑的制備有著重要意義。貝殼能夠例如在水中產(chǎn)生與各種載體基質(zhì)的特別牢固的粘合結(jié)合。其中的原因是形成/析出了MAP(貝殼粘合蛋白質(zhì))。MAP根據(jù)貝殼種類可以由不同的大量蛋白質(zhì)組成。US5015677A中保護(hù)了一種組織粘合劑，其利用了一種極其特殊的從貝殼中分離出來的十肽作為基本成分。這種十肽含有二羥基芳族化合物作為非常特殊的可看作是肽鏈基本組分的氨基酸的取代物。隨后，在酪氨酸酶的作用下肽鏈相互結(jié)合。除此之外，沒有已知的能夠?qū)崿F(xiàn)利用粘合劑將骨骼與植入體固定的滿意方案。EP0947142公開了通過多銅酶使其交聯(lián)而提高蛋白質(zhì)的分子量。所述底物蛋白質(zhì)的分子量在培育17小時(shí)之后出現(xiàn)提高。利用EP0947142的方法交聯(lián)的蛋白質(zhì)首先適用于食品中，例如用于改變香腸的稠度。而通過取代的二羥基芳族化合物進(jìn)行的蛋白質(zhì)交聯(lián)則沒有在EP0947142中公開。當(dāng)需要將傷口粘合劑用于大量流血的傷口時(shí)，就存在著粘合成分隨著血流沖走并在不希望的地方出現(xiàn)粘合的風(fēng)險(xiǎn)。由此也就顯著提高了形成血栓的危險(xiǎn)。急性處理大量流血的傷口迄今以來都是一個(gè)無法滿意解決的問題?，F(xiàn)有技術(shù)中通過以下方法來實(shí)現(xiàn)止血a)例如通過金屬鹽使蛋白質(zhì)變性b)微孔生物聚合物或具有較大內(nèi)表面積的生物聚合物。它們吸收水，由此使得血細(xì)胞以及凝血因子濃縮。特別合適的是由聚-N-乙?；?葡糖胺或殼聚糖構(gòu)成的多糖。它們包含于諸如昆蟲的骨骼中或者藻類中。諸如明膠、膠原、纖維蛋白海綿體或氧化纖維素的生物聚合物具有很大的內(nèi)表面積。這種大面積上的吸收，使得凝血因子濃縮。c)酶，特別是通過凝血酶或具有凝血酶類似作用的蛋白水解酶，并且可添加或不添加鉀d)高濃縮的凝血因子e)c)和d)的組合f)藻酸釣g)具有微孔結(jié)構(gòu)的硅酸鋁的合成產(chǎn)物迄今用于止血的硅酸鋁的合成產(chǎn)物是各種組成的堿金屬和堿土金屬硅酸鋁。為了即時(shí)處理戰(zhàn)爭(zhēng)創(chuàng)傷和緊急處理，Z-Medica，US4S司基于合成的和超過4001C完全脫水的堿土金屬硅酸鋁研制出了一種合成產(chǎn)品。通過強(qiáng)烈放熱的反應(yīng)，從血中抽去水并產(chǎn)生凝血作用。這類合成產(chǎn)品直接以顆粒形式施用于傷口處。以商品名"Quikclot"銷售。該產(chǎn)品有記載的缺點(diǎn)是，由于放熱反應(yīng)(溫度高達(dá)60*0)因此會(huì)出現(xiàn)鄰近組織的損傷。(JournalofTrauma54(2003)6，1077-1082)。特別針對(duì)傷口處理開發(fā)出了合成的硅酸鋰鋁(EP1176991Al,WO00/69480)并且以商品名CERDAC銷售。在CERDAC的情況下，采用高溫(>iooox:)條件下制得微孔的陶瓷產(chǎn)品，以實(shí)現(xiàn)最佳的傷口處理。除了考慮成本高昂的制備過程，毛細(xì)管力作用也過小而不足以滿足所有的要求。另外，一個(gè)很大的問題也在于傷口可能發(fā)生慢性化，特別是對(duì)于危重患者。這一點(diǎn)迄今已來還不能可靠地避免，并且這類傷口的處理也一貫以來都很困難。伴隨著慢性化過程通常會(huì)發(fā)生細(xì)菌繁殖到傷口上的情況。僅在德國(guó)就有四百萬患者罹受慢性的開放性傷口之苦。每年的花費(fèi)為17至32億歐元。為處理慢性傷口，迄今以來還沒有得到滿意的解決方案?？傊梢钥隙ǎ瑹o論對(duì)于粘合軟和硬局部組織的困難還是對(duì)于快速愈合、處理大量流血的傷口以及首先處理慢性傷口來說，迄今以來在各方面都還沒有找到令人滿意的方案。本發(fā)明任務(wù)在于，通過對(duì)于軟和硬局部組織都具有有效粘合性能的產(chǎn)品來解決現(xiàn)有技術(shù)中所提出的問題。特別應(yīng)提供諸如粘合劑的體系，且所述體系能實(shí)現(xiàn)止住傷口的大量流血和/或?qū)⒐趋啦糠窒嗷ブg或者骨骼部分與植入體牢固地連接在一起。理想的粘合劑也要能實(shí)現(xiàn)將軟組織與骨骼相連接，例如對(duì)于軟骨植入體。所發(fā)現(xiàn)的閉合傷口的方法也優(yōu)選應(yīng)能轉(zhuǎn)用于慢性的和受感染的傷口。本發(fā)明認(rèn)識(shí)到，采用(木質(zhì)素降解的(lignolytisch))多酚氧化酶并利用橋分子使具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物形成共價(jià)鍵從而相互交聯(lián)和/或與肌體本身的組織交聯(lián)并因此可用作軟和硬局部組織的粘合劑。本發(fā)明的另一認(rèn)識(shí)是，經(jīng)特殊處理的天然沸石能起到快速止血的作用。就此而言，在第一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明旨在一種含有以下單獨(dú)成分的試劑盒a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和C)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中兩個(gè)單獨(dú)成分(成分b)和c))，即橋分子與多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解多酚氧化酶并不接觸。本發(fā)明中，所謂試劑盒應(yīng)理解為缺別是一種能夠并列地保存單獨(dú)廟分使得它們不相接;is的包裝。在這種情況下，必須至少使橋分子(成分b))與(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶(成分c))相分開，由此避免提前的且不期望的反應(yīng)。因此，可以混合成分a)和b)和/或混合成分a)和c)。為避免橋分子和(木質(zhì)素降解的)多酴氧化酶之間的接觸，可以優(yōu)選在不同的容器或腔室內(nèi)保存兩種單個(gè)成分。若將一種或兩種單個(gè)成分b)和c)與聚合物a)相混合，則也是如此。也可考慮一種能夠?qū)崿F(xiàn)經(jīng)由兩個(gè)針頭(Kamiele)將兩種單個(gè)成分，即橋分子和(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶相互分離地釋放出來的注射器。并且也優(yōu)選使兩種單個(gè)成分，即橋分子和(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶存在于注射器的不同腔室內(nèi)。自然也可以考慮試劑盒包括至少兩個(gè)注射器，其中一個(gè)含有橋分子而另一個(gè)含有(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，試劑盒為優(yōu)選已接有混合擠出機(jī)的雙成分注射器。其能允許特別精確地加料和簡(jiǎn)便的操作。優(yōu)選的是例如Mixpac型(MixpacSystemsAG^Rotkreuz，瑞士)的雙室注射器。顯而易見的，在本發(fā)明范疇內(nèi)可以相互獨(dú)立地采用一種或更多種不同的單獨(dú)成分a)、b)和c)。因此，相對(duì)于所有成分，單個(gè)和多個(gè)都是同義的。一個(gè)必要的前提是，試劑盒包含具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物作為組分a)。所謂游離氨基在本發(fā)明中應(yīng)理解為是一種并非聚合物鏈組成部分而是聚合物鏈上基團(tuán)的氨基。在所述聚合物存在于試劑盒中之后，它們就不是人體的組成部分了。所謂聚合物優(yōu)選是包含超過一個(gè)氨基基團(tuán)的聚合物，即富含氨基的聚合物，如肽。在肽中(即在寡肽和蛋白質(zhì)中)氨基酸之間自然存在著酰胺鍵。優(yōu)選的肽含有賴氨酸。根據(jù)本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，采用含有賴氨酸的寡肽。也可以考慮肽為膠原。若聚合物是肽，則就會(huì)帶來特殊的優(yōu)點(diǎn)，即通過成分的反應(yīng)而形成的連接(Verbindung)是生物可降解的。通過含有與粘合作用相關(guān)的氨基酸的肽序列的連接(Verknuepfung)，形成一種非常牢固的連接，但是其在治療過程中可以被再吸收。初始時(shí)與高粘合性能相關(guān)的硬化階段和隨著時(shí)間過去在進(jìn)一步的治療過程中被軀體緩慢再吸收的過程是別具優(yōu)點(diǎn)的，因?yàn)樵谡澈衔恢脙?nèi)會(huì)不斷地堆積入軀體自身的組織。在本發(fā)明范疇內(nèi)，稱作肽的既有寡肽(2至約100個(gè)氨基酸長(zhǎng)度，優(yōu)選約4至約20個(gè)氨基酸長(zhǎng)度或約6至約10個(gè)氨基酸長(zhǎng)度)又有蛋白質(zhì)(蛋白，約100至約5000個(gè)氨基酸長(zhǎng)度，優(yōu)選100-1000或100-200個(gè)氨基酸長(zhǎng)度)。優(yōu)選肽具有10-1000個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度。肽可以具有約1至約100或至約200kDa、特別約2至約50kDa或約5至約20kDa的分子量。其可以經(jīng)改性或取代，例如經(jīng)糖基化。除了通常的蛋白原氨基酸之外，寡肽中也可以含有改性的或非典型的氨基酸，如羥基賴氨酸。還可以釆用D-氨基酸代替L-氨基酸或者同時(shí)使用前者和后者并延緩肽的分解。氨基可以優(yōu)選是伯氨基或仲氨基。但是伯氨基特別有活性。優(yōu)選肽的至少一個(gè)活性基團(tuán)是二氨基酸，如賴氨酸的組成部分。因此，優(yōu)選肽包括至少一個(gè)二氨基酸，優(yōu)選至少2、3、4、5或更多個(gè)二氨基酸。優(yōu)選采用如上所提到的含賴氨酸的肽(寡肽或蛋白質(zhì))。也有其他一些諸如精氨酸、天冬酰胺、谷氨酸或組氨酸的氨基酸具有活性氨基，它們會(huì)與二羥基芳族化合物反應(yīng)。氨基基團(tuán)，特別由二氨基酸提供而得的氨基基團(tuán)特別適于肽與橋分子之間的交聯(lián)反應(yīng)。但是肽中的羥基或巰基也可以有助于交聯(lián)反應(yīng)。因此，優(yōu)選肽含有至少一種具有羥基的氨基酸，也即特別優(yōu)選是絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸或具有巰基的氨基酸，例如半胱氨酸。本發(fā)明所用的肽中也可以存在如存在于MAP中的多酚氨基酸結(jié)構(gòu)單元或羥賴氨酸。然而本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，并不必須存在這種特殊的氨基酸結(jié)構(gòu)單元并由此而使用MAP。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，聚合物不含多酚氨基酸結(jié)構(gòu)單元，即不含MAP。所用的肽因此可以例如沒有困難地重組制備。由橋分子與肽反應(yīng)而形成的交聯(lián)也取決于肽中所具有的活性基團(tuán)的含量有多高。具有活性氨基基團(tuán)(例如二氨基酸，如賴氨酸)的肽的氨基酸含量自至少10%起即能獲得良好的粘合性能。若聚合物并非肽，則具有氨基的聚合物結(jié)構(gòu)單元的含量也優(yōu)選為至少約10%。但是更優(yōu)選這種氨基酸或結(jié)構(gòu)單元的含量更高，為至少20%，至少30%,至少40%或至少50%甚或至少80%至100%?？梢圆捎锰烊淮嬖诘碾暮偷鞍踪|(zhì)，例如清蛋白或酪蛋白，特別合適的是例如MAP。但是也可以采用其他較短的且易于人工制備的肽。在一個(gè)特別優(yōu)選的本發(fā)明實(shí)施方式中，肽的約50%的氨基酸是賴氨酸。賴氨酸和另一氨基酸可以例如排列為重復(fù)的二肽單元。但是也可以采用其他順序或接受其他氨基酸，特別如精氨酸、天冬酰胺、谷氨酸或組氨酸(代替賴氨酸或額外使用)，絲氨酸或蘇氨酸(代替酪氨酸或額外使用)，半胱氨酸或其他氨基酸。特別優(yōu)選的是約10-20個(gè)氨基酸的肽長(zhǎng)度或者不同鏈長(zhǎng)的肽的混合物。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式中所涉及的是僅由兩種氨基酸組成的聚合物，例如(賴氨酸-酪氨酸)n,其中可以采用n-5至40之間的值，如5、10或20。本發(fā)明的另一必要的前提是，試劑盒包含如上所述起到交聯(lián)聚合物作用的橋分子，所述聚合物具有至少一個(gè)游離氨基(如二氨基酸)。適合作為橋分子的原則上是取代的二羥基芳族化合物和/或諸如漆酶的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶的底物。因此采用單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物或它們的混合物。與已知的貝殼粘合材料不同，本發(fā)明的羥基芳族化合物并非聚合物鏈的組成部分。也可以考慮進(jìn)一步取代這些芳族化合物。優(yōu)選的官能團(tuán)是選自下列基團(tuán)的取代基卣素、磺基、磺?；?、磺酰胺基(Sulfamindo)、氨碌酰(Sulfanyl)、氨基、酰氨基、偶氮基、亞氨基(Immino-)和羥基。并且，特別觀察到的是，取代的芳族化合物，特別是取代的二鞋基芳族化合物具有令人驚奇的特別有益的聚合性質(zhì)，特別是實(shí)現(xiàn)快速聚合，更小的自偶合和良好的粘合強(qiáng)度。芳族化合物的合適取代甚至可以使得此后作為橋分子，單羥基芳族化合物也適合交聯(lián)。在本發(fā)明范疇內(nèi)，取代特別意味著在芳族化合物上除了羥基之外還連接有1、2、3或4個(gè)其他基團(tuán)。另一方面，單羥基化的聯(lián)芳基化合物(Biarylverbindung)也是適合的。特別優(yōu)選的是在鄰位或?qū)ξ簧暇哂辛u基或甲氧基的酚衍生物。因此優(yōu)選式3和4的以下化合物其中n=0-10，優(yōu)選0或1，特別優(yōu)選0，R產(chǎn)OH或NH2或卣素，優(yōu)選OH、Cl或Br,特別優(yōu)選OH,R2=H、CH3、CHO、COCH3、CONH2、CON國(guó)烷基、CON-烷基-OH、COOH、COO-烷基、烷基、取代的芳族化合物，特別優(yōu)逸CON-烷基或COO-烷基，和R3=H、CH3、烷基、取代的芳族化合物，特別優(yōu)選H或CH3。烷基表示支化或非支化的脂族烴鏈，優(yōu)選具有1-20、更優(yōu)選l-6個(gè)碳，例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丁基、正戊基、正己基。式3的化合物是可以的并且其中氬醌還可以進(jìn)一步被取代。在粘合反應(yīng)盡可能快的這一方面，根據(jù)本發(fā)明，自偶合較少的取代的二羥基芳族化合物是特別合適的。優(yōu)選采用2，5-二羥基苯曱酰胺，特別優(yōu)選2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯甲酰胺。若為三羥基芳族化合物則優(yōu)選每個(gè)苯單元存在不超過兩個(gè)羥基。特別優(yōu)選的是下式5的聚苯，即聯(lián)苯或三苯，其中n=0-10，優(yōu)選0或1且R產(chǎn)H和R2=OH或R產(chǎn)OH或R2=H。其中，式5的苯基可以被取代，例如在OH基團(tuán)的鄰位上以CH3、CHO、COCH3、CONH2、CON曙烷基、CON國(guó)烷基國(guó)OH、COOH、COO-烷基、烷基、取代的芳族化合物，特別是CON-烷基或COO-烷基取代，和/或在OH基團(tuán)的間位上以CH3、烷基、取代的芳族化合物，特別是CH3取代。另外，也要求試劑盒含有諸如木質(zhì)素降解的多酚氧化酶、特別是漆酶(EC1.10.3.2)的多盼氧化酶作為其他的單獨(dú)成分。漆酶在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。它們可以來自植物、真菌、細(xì)菌或昆蟲或者衍生于天然的酶。本發(fā)明范疇內(nèi)所使用的漆酶可以重組制備或者是經(jīng)純化的。并且，通常不需要漆酶有特別的純度，某些情況下也可以使用木質(zhì)素降解的真菌的上清液(Ueberstaende)。但是，對(duì)于醫(yī)療用途，通常期望基本分離諸如脂多糖或者其他的細(xì)胞壁成分的微生物物質(zhì)。漆酶例如來自如下屬，即曲霉菌屬"^^"http:///ws)、脈孢菌屬(7Ve"nw/7om)、柄孢殼菌屬(Po^印ofYi)、葡萄孢屬(fi^o^/s)、金錢菌屬(CW/y6/fl)、層孔菌屬(i^挑M)、香菇屬(Z^/i"""s)、側(cè)耳屬(iVw似s)、密孑L菌屬(i^cw^""MS)、梨孢屬(戶jr/c"/"〃Vi)、栓菌屬(7!r謂^s)、絲核菌屬CRA/w"ow/fl)、鬼傘屬(Co/，f/wiis)、小脆柄菇屬(尸sfl(vre〃")、毀絲霉屬(Afyce/z'o/7AAom)、柱霉屬(ScMfl/zWM附)、多孑L菌屬(/^(v/^ri/s)、射脈菌屬(i^/W/fl)或革蓋菌屬(CoriW^)。漆酶的制備公開于例如EP0947142中。通過將多酚氧化酶，如木質(zhì)素降解的多酚氧化酶、優(yōu)選漆酶(EC1.10.3.2)用于試劑盒中，就使它們寬泛而特殊的底物鐠(Substratspektrum)可用于粘合反應(yīng)中。因此，試劑盒的特點(diǎn)特別在于，粘合反應(yīng)不只局限于特別在自然界中發(fā)現(xiàn)的、能起到橋分子作用的肽，而且也一方面能釆用寬范圍的橋分子以及另一方面寬范圍的諸如寡肽的肽或蛋白質(zhì)。對(duì)于單獨(dú)成分a)，特別是肽以及對(duì)于橋分子，用量比例都可以在約l-50mM范圍內(nèi)變化。對(duì)于每次應(yīng)用，都可在預(yù)試驗(yàn)中計(jì)算出最佳的用量比。同時(shí)也必須注意到，根據(jù)所選的橋分子不同也會(huì)發(fā)生橋分子的自反應(yīng)，該反應(yīng)會(huì)減少交聯(lián)產(chǎn)物的形成。過小濃度的橋分子會(huì)導(dǎo)致過于緩慢的反應(yīng)，而過高的濃度又會(huì)由于自偶合而導(dǎo)致較強(qiáng)的副反應(yīng)。若肽存在量較小，則在交聯(lián)作用中增強(qiáng)地引入待粘合基體的活性氨基、巰基和/或羥基。多酚氧化酶的量影響反應(yīng)速度，并且，根據(jù)應(yīng)用情況可以實(shí)現(xiàn)快速達(dá)到凝膠點(diǎn)或達(dá)到完全固化或者組合的較長(zhǎng)時(shí)間可處理性。因此，通過在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行的用量比的最優(yōu)化，試劑盒就能適于各個(gè)具體任務(wù)。試劑盒的一個(gè)特別的優(yōu)點(diǎn)就是，試劑盒中組分以預(yù)先最優(yōu)化的經(jīng)過測(cè)量用于各種應(yīng)用中的用量比存在。用于粘合局部軟組織的優(yōu)選用量比為例如，[Tyr-Lysn，n=4-35，8.5mM;2，5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯甲酰胺12.5mM;多酚咸化酶0.32U(156nmo1ml"min1)。該用量比在試劑盒中可以預(yù)先設(shè)定并且省下了繁瑣的配料的各個(gè)添加過程。用于試劑盒中的組合還可以含有添加劑和助劑，例如填充劑如膠原、清蛋白、透明質(zhì)酸或類似物。優(yōu)選諸如肽的單獨(dú)成分a)和橋分子的總量為約50-卯％。試劑盒的基本組分優(yōu)選以一種或多種水性溶劑溶解。對(duì)于醫(yī)療用途而言，溶劑是無毒性并且生物相容的。作為生物應(yīng)用的溶劑優(yōu)選是磷酸鹽緩沖液如磷酸鈣或磷酸鈉緩沖液或者PBS。而對(duì)于其他應(yīng)用，也可以是有機(jī)溶劑例如DMSO，或者是由水性溶劑和有機(jī)溶劑組成的混合物。或者，所述組合或者它們的組分在使用前才容納于溶劑中并導(dǎo)入到試劑盒內(nèi)。但是，試劑盒中所用成分的稠度不必是液態(tài)的，而是可以具有骨狀的稠度。所用單獨(dú)成分的粘度和流動(dòng)能力可以例如，根據(jù)所要固定的傷口的長(zhǎng)度和傷口裂痕的深度或者所要粘合的基體而進(jìn)行調(diào)節(jié)。除了所用的肽/聚合物的長(zhǎng)度，溶劑的量也影響這些參數(shù)。也可采用諸如觸變劑的添加劑來調(diào)節(jié)粘度和流動(dòng)能力。通常，為粘合硬組織，采用具有比粘合軟組織情況下更高粘度的組合。pH值優(yōu)選為2-10，特別是5-7。反應(yīng)可以在約2-80"C下進(jìn)行，但是優(yōu)選溫度為約20-37匸或者25-30"C。因此，可以在室溫/體溫下利用試劑盒進(jìn)行粘合反應(yīng)。對(duì)于例如深凍的纖維蛋白粘合劑的存儲(chǔ)，并沒有特殊的要求。諸如漆酶的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶可以溶解形式使用，并且在冷拒溫度下存儲(chǔ)即已足夠。也可以提供粉末形式的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶并且在可預(yù)見的使用之前將其溶解。試劑盒或其各個(gè)成分的殺菌可以有利地在不改變結(jié)構(gòu)的情況下實(shí)現(xiàn)，例如可以將溶液過濾殺菌。但也優(yōu)選經(jīng)由伽馬射線來殺菌，因?yàn)檫@可以是在已經(jīng)被封裝的情形下進(jìn)行并由此而不需要無菌灌裝。(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶，如漆酶的活性會(huì)由于伽馬線殺菌而損失多達(dá)50%，而這可以通過相應(yīng)提高初始濃度而簡(jiǎn)便地彌補(bǔ)。優(yōu)選將上述的試劑盒用作藥物。同樣可以根據(jù)國(guó)家法律將其分類為藥物制劑或醫(yī)療產(chǎn)品。這些術(shù)語(yǔ)對(duì)于本發(fā)明說明書目的來說是可互換的。另一方面，本發(fā)明也涉及含有上述單獨(dú)成分的粘合劑。因此，所述粘合劑包括以下單獨(dú)成分a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，其中所述聚合物并非人體成分，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二幾基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和c)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中兩個(gè)單獨(dú)成分(成分b)和c))，即橋分子與多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解多酚氧化酶相接觸，即相互混合。有關(guān)各個(gè)成分可參考關(guān)于試劑盒的描述內(nèi)容。據(jù)此顯而易見，在本發(fā)明范疇內(nèi)可以相互獨(dú)立地采用一種或更多種不同的單獨(dú)成分a)、b)和c)。因此，相對(duì)于所有成分，單個(gè)和多個(gè)都是同義的。一個(gè)必要的前提是，粘合劑含有包含至少一個(gè)游離氨基的聚合物作為單獨(dú)成分a)。在本發(fā)明中，所謂游離氨基應(yīng)理解為并非聚合物鏈組成部分而是聚合物鏈上基團(tuán)的氨基。所謂粘合劑的聚合物是指并非人體的組成部分的聚合物。所述聚合物優(yōu)選是包含超過一個(gè)氨基的聚合物，即富含氨基的聚合物，如肽。在肽中(即在寡肽和蛋白質(zhì)中)氨基酸之間自然存在著酰胺鍵。優(yōu)選的肽含有賴氨酸。根據(jù)本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，采用含有賴氨酸的寡肽。也可以考慮肽為膠原。若聚合物是肽，則就會(huì)帶來特殊的優(yōu)點(diǎn)，即通過成分的反應(yīng)而形成的連接是生物可降解的。通過含有與粘合作用相關(guān)的氨基酸的肽序列的連接，形成一種非常牢固的連接，但是其在治療過程中可以被再吸收。初始時(shí)與高粘合性能相關(guān)的硬化階段和隨著時(shí)間過去在進(jìn)一步的治療過程中被軀體緩慢再吸收的過程是別具優(yōu)點(diǎn)的，因?yàn)樵谡澈衔恢脙?nèi)會(huì)不斷地堆積入軀體自身的組織。在本發(fā)明范疇內(nèi)，稱作肽的既有寡肽(2至約100個(gè)氨基酸長(zhǎng)度，優(yōu)選約4至約20個(gè)氨基酸長(zhǎng)度或約6至約10個(gè)氨基酸長(zhǎng)度)又有蛋白質(zhì)(蛋白，約100至約5000個(gè)氨基酸長(zhǎng)度，優(yōu)選100-1000或100-200個(gè)氨基酸長(zhǎng)度)。優(yōu)選肽具有10-1000個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度。肽可以具有約l至約100或至約200kDa、特別約2至約50kDa或約5至約20kDa的分子量。其可以經(jīng)改性或取代，例如經(jīng)糖基化。除了通常的蛋白原氨基酸之外，寡肽中也可以含有改性的或非典型的氨基酸，如羥基賴氨酸。還可以釆用D-氨基酸代替L-氨基酸或者同時(shí)使用前者和后者并延緩肽的分解。氨基可以優(yōu)選是伯氨基或仲氨基。但是伯氨基特別有活性。優(yōu)選肽的至少一個(gè)活性基團(tuán)是二氨基酸，如賴氨酸的組成部分。因此，優(yōu)選肽包含至少一個(gè)二氨基酸，優(yōu)選至少2、3、4、5或更多個(gè)二氨基酸。優(yōu)選釆用如上所提到的含賴氨酸的肽(寡肽或蛋白質(zhì))。也有其他一些諸如精氨酸、天冬酰胺、谷氨酸或組氨酸的氨基酸具有活性氨基基團(tuán)，它們會(huì)與二羥基芳族化合物反應(yīng)。氨基基團(tuán)，特別由二氨基酸提供而得的氨基基團(tuán)特別適于肽與橋分子之間的交聯(lián)反應(yīng)。但是肽中的羥基或巰基也可以有助于交聯(lián)反應(yīng)。因此，優(yōu)選肽含有至少一種具有羥基的氨基酸，也即特別優(yōu)選是絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸或具有巰基的氨基酸，例如半胱氨酸。本發(fā)明所用的肽中也可以存在如存在于MAP中的多酚氨基酸結(jié)構(gòu)單元或羥賴氨酸。然而本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，并不必須存在這種特殊的氨基酸結(jié)構(gòu)單元并由此而使用MAP。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，聚合物不含多酚氨基酸結(jié)構(gòu)單元，即不含MAP。所用的肽因此可以例如沒有困難地重組制備。由橋分子與肽反應(yīng)而形成的交聯(lián)也取決于肽中所具有的活性基團(tuán)的含量有多高。具有活性氨基基團(tuán)(例如二氨基酸，如賴氨酸)的肽的氨基酸含量自至少10。/。起即能獲得良好的粘合性能。若聚合物并非肽，則具有氨基的聚合物結(jié)構(gòu)單元的含量也優(yōu)選為至少約10%。但是更優(yōu)選這種氨基酸或結(jié)構(gòu)單元的含量更高，為至少20%,至少30%,至少40%或至少50%甚或至少80%至100%?？梢圆捎锰烊淮嬖诘碾暮偷鞍踪|(zhì)，例如清蛋白或酪蛋白，特別合適的是例如MAP。但是也可以采用其他較短的且易于人工制備的肽。在一個(gè)特別優(yōu)選的本發(fā)明實(shí)施方式中，肽的約50%的氨基酸是賴氨酸。賴氨酸和另一氨基酸可以例如排列為重復(fù)的二肽單元。但是也可以采用其他順序或接受其他氨基酸，特別如精氨酸、天冬酰胺、谷氨酸或組氨酸(代替賴氨酸或額外使用)，絲氨酸或蘇氨酸(代替酪氨酸或額外使用)，半胱氨酸或其他氨基酸。特別優(yōu)選的是約10-20個(gè)氨基酸的肽長(zhǎng)度或者不同鏈長(zhǎng)的肽的混合物。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方式中所涉及的是僅由兩種氨基酸組成的聚合物，例如(賴氨酸-酪氨酸)n，其中可以釆用n-5至40之間的值，如5、10或20。本發(fā)明的另一必要的前提是，試劑盒包含如上所述起到交聯(lián)聚合物作用的橋分子，所述聚合物具有至少一個(gè)游離氨基(如二氨基酸)。適合作為橋分子的原則上是取代的二羥基芳族化合物和/或諸如漆酶的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶的底物。因此采用單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物或它們的混合物。與已知的貝殼粘合材料不同，本發(fā)明的羥基芳族化合物并非聚合物鏈的組成部分。也可以考慮進(jìn)一步取代這些芳族化合物。優(yōu)選的官能基團(tuán)是選自如下一組的取代基卣素、磺基、磺?；?、磺酰胺基、氨磺酰、氨基、酰氨基，偶氮基、亞氨基和羥基。并且，特別觀察到的是，取代的芳族化合物，特別是取代的二羥基芳族化合物具有令人驚奇的特別有益的聚合性質(zhì)，特別是實(shí)現(xiàn)快速聚合，更小的自偶合和良好的粘合強(qiáng)度。芳族化合物的合適取代甚至可以使得此后作為橋分子，單羥基芳族化合物也適合交聯(lián)。在本發(fā)明范疇內(nèi)，取代特別意味著在芳族化合物上除了羥基之外還連接有l(wèi)、2、3或4個(gè)其他基團(tuán)。另一方面，單羥基化的聯(lián)芳基化合物也是適合的。特別優(yōu)選的是在鄰位或?qū)ξ簧暇哂辛u基或甲氧基的酚衍生物。因此優(yōu)選式3和4的以下化合物其中n=0-10，優(yōu)選O或l,特別優(yōu)選0，R尸OH或NH2或卣素，優(yōu)選OH、Cl或Br,特別優(yōu)選OH,R2=H、CH3、CHO、COCH3、CONH2、CON-烷基、CON誦烷基-OH、COOH、COO-烷基、烷基、取代的芳族化合物，特別優(yōu)選CON-烷基或coo隱烷基，和R3=H、CH3、烷基、取代的芳族化合物，特別優(yōu)選H或CH3。烷基表示支化或非支化的脂族烴鏈，優(yōu)選具有1-20、更優(yōu)選l-6個(gè)碳，例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丁基、正戊基、正己基。式3的化合物是可以的并且其中氫醌還可以進(jìn)一步被取代。在粘合反應(yīng)盡可能快的這一方面，根據(jù)本發(fā)明，自偶合較少的取代的二羥基芳族化合物是特別合適的。優(yōu)選采用2，5-二羥基苯甲酰胺，特別優(yōu)選2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯甲酰胺。若為三羥基芳族化合物則優(yōu)選每個(gè)苯單元存在不超過兩個(gè)羥基。特別優(yōu)選的是下式5的聚苯，即聯(lián)苯或三苯，其中n=0-10,優(yōu)選0或1且R產(chǎn)H和R2=OH或R尸OH或R2=H。其中，式5的苯基可以被取代，例如在OH基團(tuán)的鄰位上以CH3、CHO、COCH3、CONH2、CON-烷基、CON-烷基誦OH、COOH、COO-烷基、烷基、取代的芳族化合物，特別是CON-烷基或COO-烷基取代，和/或在OH基團(tuán)的間位上以CH3、烷基、取代的芳族化合物，特別是CH3取代。另外，也要求試劑盒含有諸如木質(zhì)素降解的多酚氧化酶、特別是漆酶(EC1.10.3.2)的多酚氧化酶作為其他的單獨(dú)成分。漆酶在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。它們可以來自植物、真菌、細(xì)菌或昆蟲或者衍生于天然的酶。本發(fā)明范疇內(nèi)所使用的漆酶可以重組制備或者是經(jīng)純化的。并且，通常不需要漆酶有特別的純度，某些情況下也可以使用木質(zhì)素降解的真菌的上清液。但是，對(duì)于醫(yī)療用途，通常期望能基本分離諸如脂多糖或者其他的細(xì)胞壁成分的微生物物質(zhì)。漆酶例如來自如下屬，即曲霉菌屬、脈孢菌屬、柄孢殼菌屬、葡萄孢屬、金錢菌屬、層孔菌屬、香菇屬、側(cè)耳屬、密孔菌屬、梨孢屬、栓菌屬、絲核菌屬、鬼傘屬、小脆柄菇屬、毀絲霉屬、柱霉屬、多孔菌屬、射脈菌屬或革蓋菌屬。漆酶的制備公開于例如EP0947142中。通過將多酚氧化酶，如木質(zhì)素降解的多酚氧化酶、優(yōu)選漆酶(EC1.10.3.2)用于粘合劑中，就使它們寬泛而特殊的底物鐠可用于粘合反應(yīng)中。因此，粘合劑的特點(diǎn)特別在于，粘合反應(yīng)不只局限于特別在自然界中發(fā)現(xiàn)的、能起到橋分子作用的肽，而且也一方面能采用寬范圍的橋分子以及另一方面寬范圍的諸如寡肽的肽或蛋白質(zhì)。對(duì)于單獨(dú)成分a),特別是肽以及對(duì)于橋分子，用量比例都可以在約l-50mM范圍內(nèi)變化。對(duì)于每次應(yīng)用，都可在預(yù)試驗(yàn)中計(jì)算出最佳的用量比。同時(shí)也必須注意到，根據(jù)所選的橋分子不同也會(huì)發(fā)生橋分子的自反應(yīng)，該反應(yīng)會(huì)減少交聯(lián)產(chǎn)物的形成。過小濃度的橋分子會(huì)導(dǎo)致過于緩慢的反應(yīng)，而過高的濃度又會(huì)由于自偶合而導(dǎo)致較強(qiáng)的副反應(yīng)。若肽存在量較小，則在交聯(lián)作用中增強(qiáng)地引入待粘合基體的活性氨基、巰基和/或羥基。多酚氧化酶的量影響反應(yīng)速度，并且，根據(jù)應(yīng)用情況可以實(shí)現(xiàn)快速達(dá)到凝膠點(diǎn)或達(dá)到完全固化或者組合的較長(zhǎng)時(shí)間可處理性。因此，通過在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行的用量比的最優(yōu)化，粘合劑就能適于各個(gè)具體任務(wù)。粘合劑的一個(gè)特別的優(yōu)點(diǎn)就是，粘合劑中組分以預(yù)先最優(yōu)化的經(jīng)過測(cè)量用于各種應(yīng)用的用量比存在。用于粘合局部軟組織的優(yōu)選用量比為例如，[Tyr-Lysn，n=4-35，8.5mM;2，5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯曱酰胺12.5mM;多酚氧化酶0.32U(156nmo1ml"min1)。該用量比在粘合劑中可以預(yù)先設(shè)定并且省下了繁瑣的配料的各個(gè)添加過程。用于粘合劑中的組合還可以含有添加劑和助劑，例如填充劑如膠原、清蛋白、透明質(zhì)酸或類似物。優(yōu)選諸如肽的單獨(dú)成分a)和橋分子的總量為約50-卯％。粘合劑的基本組分優(yōu)選以一種或多種水性溶劑溶解。對(duì)于醫(yī)療用途而言，溶劑是無毒性并且生物相容的。作為生物應(yīng)用的溶劑優(yōu)選是磷酸鹽緩沖液如磷酸鉀或磷酸鈉緩沖液或者PBS。而對(duì)于其他應(yīng)用，也可以是有機(jī)溶劑例如DMSO，或者是由水性溶劑和有機(jī)溶劑組成的混合物?；蛘撸鼋M合或者它們的組分在使用前才容納于溶劑中。但是，粘合劑中所用成分的稠度不必是液態(tài)的，而是可以具有骨狀的稠度。所用單獨(dú)成分和/或粘合劑的粘度和流動(dòng)能力可以例如，根據(jù)所要固定的傷口的長(zhǎng)度和傷口裂痕的深度或者所要粘合的基體而進(jìn)行調(diào)節(jié)。除了所用的肽/聚合物的長(zhǎng)度，溶劑的量也影響這些參數(shù)。也可釆用諸如觸變劑的添加劑來調(diào)節(jié)粘度和流動(dòng)能力。通常，為粘合硬組織，采用具有比粘合軟組織情況下更高粘度的組合。pH值優(yōu)選為2-10，特別是5-7。反應(yīng)可以在約2-80^C下進(jìn)行，但是優(yōu)選溫度為約20-37匸或者25-30"C。因此，可以在室溫/體溫下利用粘合劑進(jìn)行粘合反應(yīng)。對(duì)于例如深凍的纖維蛋白粘合劑的存儲(chǔ)，并沒有特殊的要求。諸如漆酶的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶可以溶解形式使用，并且在冷拒溫度下存儲(chǔ)即已足夠。也可以提供粉末形式的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶并且在可預(yù)見的使用之前將其溶解。粘合劑或其各個(gè)成分的殺菌可以有利地在不改變結(jié)構(gòu)的情況下實(shí)現(xiàn)，例如可以將溶液過濾殺菌。但也優(yōu)選經(jīng)由伽馬射線來殺菌，因?yàn)檫@可以是在已經(jīng)被封裝的情形下進(jìn)行并由此而不需要無菌灌裝。(木質(zhì)素降解的)多酴氧化酶，如漆酶的活性會(huì)由于伽馬線殺菌而損失多達(dá)50%,而這可以通過相應(yīng)提高初始濃度而簡(jiǎn)便地彌補(bǔ)。優(yōu)選將上述的粘合劑用作藥物。同樣可以根據(jù)國(guó)家法律將其分類為藥物制劑或醫(yī)療產(chǎn)品。這些術(shù)語(yǔ)對(duì)于本發(fā)明說明書目的來說是可互換的。以下更為詳盡地闡述本發(fā)明的試劑盒和粘合劑的用途。本發(fā)明認(rèn)識(shí)到，利用橋分子并釆用諸如漆酶的(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶，則會(huì)與具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物形成共價(jià)鍵從而產(chǎn)生交聯(lián)。因此，本發(fā)明的目的一方面即在于如上定義的試劑盒或粘合劑用于閉合傷口的用途。但是，只具有單獨(dú)成分b)和c)的試劑盒或粘合劑也足以起到如下進(jìn)一步所述的粘合傷口或類似情況的作用。因此，本發(fā)明的目的也在于包含如下單獨(dú)成分的試劑盒的用途，用于制備用以粘合傷口、特別是硬組織和軟組織的粘合劑的用途，即如下文所要詳細(xì)描述的那樣，其中所述試劑盒包含a)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和b)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中兩個(gè)單獨(dú)成分(成分a)和b))，即橋分子與多酴氧化酶，特別是木質(zhì)素降解多酚氧化酶不接觸。因此，以下所謂試劑盒或粘合劑應(yīng)理解為是包含兩種單獨(dú)成分"橋分子"和"多酚氧化酶"或者包含三種單獨(dú)成分"具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物"、"橋分子，，和"多酚氧化酶"的試劑盒或粘合劑，其中優(yōu)選的是含有三種上述單獨(dú)成分的試劑盒或粘合劑。有關(guān)各個(gè)成分和其優(yōu)選的實(shí)施方式可參考上面定義的試劑盒或粘合劑。試劑盒和/或粘合劑可用于粘合硬的或軟的組織。例如可以粘合結(jié)締組織、皮膚、肌腱、器官、血管和/或神經(jīng)(軟組織)和/或牙齒和/或骨骼(硬組織)。很顯然的，也可以將不同的組織相互粘合，例如肌腱和骨骼。特別優(yōu)選用于粘合傷口邊緣或粘合各種器官，如肝、腎或脾的裂口。用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑也可以來處理外科手術(shù)傷口，例如在去除肺瘤之后。其他一些應(yīng)用領(lǐng)域是-在整形、修復(fù)和/或美容外科手術(shù)中特別用于減少縫合傷口誘發(fā)的瘢痕。閉合和隔絕液體和氣體滲漏，例如在血管手術(shù)(Gefaefichirurgie)中阻隔支溝涌血(Stichkanalblutung)，用在動(dòng)脈分流術(shù)中或者用于胸腔手術(shù)中阻隔肺部泄露(Lungenleckage)。試劑盒和/或粘合劑的另一有益應(yīng)用是柔韌的、經(jīng)過一定時(shí)間可以被再吸收的血管或中空器官上接合處和修補(bǔ)處(Patchen)的密封。試劑盒和/或粘合劑也適用于固定給藥裝置和再生醫(yī)學(xué)(組織工程(TissueEngineering))中可能使用的多空載體結(jié)構(gòu)或膜。這里特別有利的是，倘若非生物來源的表面具有游離氨基則也可以實(shí)現(xiàn)與其的粘合。在這些非生物來源的表面上，游離氨基可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法，如等離子法而得到(Schr6der等的Improvedlow-pressuremicrowaveplasmaassistedaminofimctionalizationofpolymers,Plasmaprocessesandpolymers,Weinheim，德國(guó),Weinheim:Wiley-VCH，2005;SchrMer等的Plasma-InducedSurfaceFimctionalizationofPolymericBiomaterialsinAmmoniaPlasma,Contrib.PlasmaPhys.41,2001,562-572;Mayer腸Plath等,Currenttrendsinbiomaterialsurfacefunctionalization-nitrogen-containingplasmaassistedprocesseswithenhancedselectivity,Vacuum71,2003,391-406)。應(yīng)與周圍組織利用試劑盒和/或粘合劑相連接的諸如植入體或給藥裝置的表面，應(yīng)含有至少約2%的游離氨基。術(shù)語(yǔ)"表面"在此描述的不只是平坦的平面，而且還有各種形狀的固體基體的邊界層?；w也可以例如是小球(珠)或者復(fù)雜形狀的表面。同樣，本發(fā)明的主題在于一種可在水性環(huán)境中使用的粘合方法，其中使用上述能導(dǎo)致牢固的交聯(lián)且可再吸收的連接的試劑盒和/或粘合劑。其中，經(jīng)由如上定義的具有游離氨基酸的聚合物和橋分子通過(木質(zhì)素降解的)多酴氧化酶誘發(fā)的，如漆酶誘發(fā)的交聯(lián)作用而尤其實(shí)現(xiàn)牢固的連接。因此，本發(fā)明特別涉及一種通過如上所述的試劑盒和/或粘合劑來粘合軟組織和硬組織的方法。所謂粘合軟組織和硬組織還可以是指粘合骨骼和骨骼。并且其中特別可用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑來固定那些由于其尺寸大小而無法或者只能勉強(qiáng)用螺栓固定的很小的骨骼碎片。相比于金屬植入體，在用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑進(jìn)行粘合時(shí)，骨折愈合之后不需要第二次手術(shù)。此外，利用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑也能將骨骼固定于軟組織上。特別是如用于治療關(guān)節(jié)病的軟骨植入體(例如來自組織培養(yǎng)的)可以借助于本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑而充分固定直至在關(guān)節(jié)面上生長(zhǎng)。在這方面特別有益的是，試劑盒和/或粘合劑逐漸被再吸收。另外，利用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑也能將骨骼固定于植入體上。特別是對(duì)于骨質(zhì)疏松的骨骼，螺栓的結(jié)合力顯著下降。通過采用本發(fā)明的試劑盒和/或粘合劑而大面積地將骨骼外側(cè)與植入體(例如板)相粘合，螺栓的結(jié)合力就能獲得支持或者甚至還可完全棄用螺栓。細(xì)胞活力試驗(yàn)表明交聯(lián)產(chǎn)品有著良好的生物相容性。由此，本發(fā)明特別也包括如上定義的具有兩種單獨(dú)成分"橋分子"和"多酚氧化酶"或者特別優(yōu)選具有三種單獨(dú)成分"具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物"、"橋分子"和"多酚氧化酶"的本發(fā)明試劑盒，用于制備本發(fā)明的閉合傷口用粘合劑的用途。所謂傷口是軀體表面和內(nèi)面的連續(xù)性的中斷，如割傷和骨折。因此，本發(fā)明也特別包括本發(fā)明的試劑盒用于制備如上所述的粘合軟組織和硬組織以及將骨骼與植入體(例如板)相粘合的粘合劑的用途。通過利用本發(fā)明的組合進(jìn)行交聯(lián)，特別是含有與粘合作用有關(guān)的氨基酸的肽序列的連接，借助于諸如漆酶的酶體系(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶，在各種應(yīng)用領(lǐng)域中形成非常牢固的粘合，但是這種粘合在愈合過程中可以被再吸收。與高粘合性有關(guān)的起始硬化階段和逐步愈合過程中體內(nèi)隨時(shí)間的緩慢吸收過程是別具優(yōu)點(diǎn)的。粘合劑或試劑盒可在骨折時(shí)使用，可用于固定人造血管(Gefaessprothese)、可生物降解的植入體、導(dǎo)管、支架和其他材料。由此，本發(fā)明也包括如上定義的具有兩種單獨(dú)成分"橋分子"和"多酚氧化酶"或者特別優(yōu)選具有三種單獨(dú)成分"具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物"、"橋分子"和"多酚氧化酶"的本發(fā)明試劑盒，用于制備粘合骨折和/或固定人造血管、可生物降解的植入體、導(dǎo)管、支架和其他材料的粘合劑的用途。對(duì)于骨骼的粘合以及對(duì)于將植入體快速地整合到尤其骨骼區(qū)域中去來說，植入材料為骨細(xì)胞接受這一點(diǎn)是十分重要的。這當(dāng)然也涉及所用的粘合劑。通過迅速的成骨細(xì)胞的移入和其隨后的成熟，促進(jìn)骨骼再生并縮短愈合過程。因此，植入體被制成具有微結(jié)構(gòu)表面。本發(fā)明的試劑盒或粘合劑獲得這種結(jié)構(gòu)并支持骨骼再生。對(duì)于那些對(duì)于骨骼愈合必不可少的膠原的產(chǎn)生來說，賴氨酸和脯氨酸這些氨基酸是必需的。因此，對(duì)于該應(yīng)用領(lǐng)域，優(yōu)選將(賴氨酸-酪氨酸)n用作聚合物。若使用(賴氨酸-酪氨酸)n作為聚合物，則賴氨酸在粘合位置以很高濃度存在。由此也就對(duì)骨骼形成產(chǎn)生了積極影響。所形成的細(xì)胞外基質(zhì)可經(jīng)由諸如aipi或a3pl的整合素，根據(jù)RDG-序列(Arg-Gly-Asp)鑒別出。由此就產(chǎn)生了一個(gè)信號(hào)級(jí)聯(lián)，其在細(xì)胞內(nèi)引發(fā)細(xì)胞骨架上的變化并在增殖階段和分化階段之間轉(zhuǎn)換。所形成的蛋白質(zhì)基質(zhì)還起到積累鈣鹽的作用。這就實(shí)現(xiàn)了在復(fù)雜的骨折和插入骨骼碎片時(shí)的應(yīng)用。在復(fù)雜的骨折手術(shù)中，本發(fā)明的組合在止血和高粘合力上的優(yōu)點(diǎn)是很重要的。另一方面，本發(fā)明目的也在于新型的沸石顆粒，其適于止血并且既可以單獨(dú)使用也可以補(bǔ)充用于本發(fā)明的試劑盒中。通過該新型沸石顆粒特別實(shí)現(xiàn)傷口邊緣的快速粘合。所謂新型的沸石顆粒指的是具有至少70重量％沸石，特別是含有斜發(fā)沸石、菱沸石和絲光沸石以及平均孔徑為0.3至0.5nm的微孔空間的沸石顆粒。優(yōu)選這種沸石顆粒是不含水合物的，并且該狀態(tài)優(yōu)選通過在低于2001C的溫度下小心地脫水而在干燥和粉碎之后獲得。在小心的脫水過程中要特別釆用低于200*C的不同溫度區(qū)間(Temperaturinterwalle)。特別優(yōu)選采用具有0.8-0.2mm粒徑范圍(Kornband)的級(jí)分的沸石顆津立。有關(guān)該沸石顆粒的純度，應(yīng)要滿足美國(guó)藥典或歐洲藥典的要求。已經(jīng)確信，這種沸石顆粒的微孔空間內(nèi)選擇性富集特定的參與凝血的因子。這就會(huì)活化生理凝血過程，而其會(huì)產(chǎn)生明顯勝過傳統(tǒng)止血?jiǎng)┑闹寡饔谩＿@里具有特別的優(yōu)點(diǎn)的是，在傷口處絕對(duì)不會(huì)釋放出有毒物質(zhì)。在所述的本發(fā)明制備過程中得到一種在晶格內(nèi)具有強(qiáng)烈靜電場(chǎng)的沸石顆粒，其本身就能在l分鐘內(nèi)止住嚴(yán)重的出血?，F(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的沸石顆粒要?jiǎng)俪鍪袌?chǎng)上基于微孔化合成的硅酸鋰的產(chǎn)品(EP1176991Al、WO00/69480、US6833486Bl)，如CERDAC，5至10倍高的毛細(xì)作用力。部分脫水作用的結(jié)果就是不出現(xiàn)可能由于灼熱而引起組織損害的放熱反應(yīng)。通過所述的本發(fā)明的制備過程，此時(shí)可以首次以成本低廉的直接的方法提供天然沸石作為止血?jiǎng)┖蛡谧o(hù)理劑。因此，本發(fā)明也包括作為醫(yī)療產(chǎn)品或作為藥劑的本發(fā)明的沸石顆粒和本發(fā)明沸石顆粒用于制備止血用的醫(yī)療產(chǎn)品和/或藥劑的用途。如有關(guān)試劑盒內(nèi)容中所述，可以根據(jù)國(guó)家法律將其分類為藥物制劑或醫(yī)療產(chǎn)品。這些術(shù)語(yǔ)對(duì)于本發(fā)明說明書目的來說是可互換的。如上所述，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，通過本發(fā)明的沸石顆粒不止能實(shí)現(xiàn)止血還能實(shí)現(xiàn)傷口邊緣的快速粘合。在傷口邊緣粘合了之后，可以例如通過類似于瘡痂的傷口覆蓋物脫落和殘余物的吸取而徹底去除礦物質(zhì)。在本發(fā)明的該實(shí)施方式中可以將沸石用于例如基于纖維素或基于織物或基于膠原非織造織物的包封中。因此，也就可以隨后特別毫無問題地完全加以除去。通過纖維蛋白體系的活化，傷口邊緣相互粘合。因此，本發(fā)明也包括本發(fā)明的沸石顆粒用于制備本發(fā)明的粘合傷口用以及密封血管或中空器官上的接合處和修補(bǔ)處用的粘合劑的用途。但是，傷口接縫處的耐裂強(qiáng)度要小于傳統(tǒng)的纖維蛋白粘合劑。為了提高耐裂強(qiáng)度，合乎目的地將本發(fā)明的沸石顆粒用于上述的試劑盒或粘合劑中。通過這種組合，就能制得特別有效的止血的傷口粘合劑，用于傷口處理、傷口閉合和止血。就此而言，在另一個(gè)實(shí)施方式中本發(fā)明目的在于一種試劑盒，其含有以下單獨(dú)成分a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，c)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，和d)止血礦物，特別是如上所述的沸石顆粒，其中兩個(gè)單獨(dú)成分b)、c)和d)，即橋分子與木質(zhì)素降解的多酚氧化酶和止血礦物不相互接觸。有關(guān)各單獨(dú)成分及其優(yōu)選實(shí)施方式的內(nèi)容可參考上面的描述。因此，試劑盒特別基于天然沸石的細(xì)顆粒和多盼氧化酶(特別是漆酶)，多肽或寡肽可以與之交聯(lián)。其中優(yōu)選使天然沸石細(xì)顆粒不與試劑盒的其他單獨(dú)成分相接觸，即優(yōu)選將沸石分開封裝并因此而分開使用。其中，天然沸石細(xì)顆粒由于其很高的毛細(xì)作用力而通過集中凝血因子(Gerinnungsfaktor)來快速地閉合傷口。隨后，沸石能夠毫無問題的再被除去。由此得到無血的一目了然的手術(shù)區(qū)域。在例如添加未交聯(lián)的聚合物之前一一如果需要一一還可能進(jìn)行修正，這也是非常行之有效的。若在這些首先臨時(shí)閉合的傷口中加入試劑盒的單獨(dú)成分a)至c)，則在形成共價(jià)鍵的同時(shí)會(huì)產(chǎn)生耐久的具有承載能力的然而另一方面也能被再吸收的傷口閉合。自然也可以考慮用于止血的不同于本發(fā)明的沸石顆粒的其他制劑，其可以大大降低血液的外流并由此而阻止使用處(木質(zhì)素降解的)多酚氧化酶，特別是漆酶的流失。同樣也可以在用天然沸石-細(xì)顆粒止血之后采用其他的組織粘合劑。但是，所述方法一一即先用天然沸石細(xì)顆粒來止血和傷口閉合，隨后在諸如漆酶的多酚氧化酶作用下進(jìn)行耐久的粘合一一體現(xiàn)出來很多優(yōu)點(diǎn)并且從成本觀點(diǎn)來看也是頗有竟?fàn)巸?yōu)勢(shì)的方法。除此之外，本發(fā)明用于傷口處理、密封傷口以及用于粘合局部軟組織和硬組織和植入體的止血試劑盒還可簡(jiǎn)便易操作。止血粘合劑可有利地用于-在整形、修復(fù)和/或美容外科手術(shù)中，特別防止傷口縫合誘發(fā)的瘢痕形成的-閉合和隔絕液體和氣體滲漏，例如在血管手術(shù)中阻隔支溝涌血，用在動(dòng)脈分流術(shù)中或者用于胸腔手術(shù)中阻隔肺部泄露。本發(fā)明的試劑盒既是電凝法也是以針線縫合傷口的替代方案。因此，本發(fā)明也包括本發(fā)明的含有單獨(dú)成分b)至d)或更優(yōu)選a)至d)的試劑盒用于制備閉合傷口的粘合劑的用途。另外，本發(fā)明還特別包括了含有單獨(dú)成分b)至d)或更優(yōu)選a)至d)的本發(fā)明試劑盒用于制備粘合劑的用途。此外本發(fā)明目的還在于一種含有如上所述的成分b)至d)或更優(yōu)選a)至d)的粘合劑，其中至少成分b)至c)或a)至c)，優(yōu)選所有的單獨(dú)成分b)至d)或a)至d)相互接觸。天然沸石細(xì)顆粒的高毛細(xì)管力對(duì)于傷口護(hù)理，特別對(duì)處理難以愈合和已經(jīng)慢性化的傷口的應(yīng)用來說，也有特別重要的意義。特別合適的是將天然沸石細(xì)顆粒用于伴有滲出，即在發(fā)炎的傷口上有血液成分流出的傷口上。通常，滲出表明傷口有感染。根據(jù)本發(fā)明所得到的沸石顆粒的微孔結(jié)構(gòu)能夠吸收會(huì)在"濕"的傷口上過量釋放出來的傷口滲出物。同時(shí)，過量滲出物的吸收也能在傷口上營(yíng)造潮濕的氣氛，而這對(duì)于傷口愈合來說是頗為重要的。本發(fā)明的其他用途是-作為事故之后急救的手段-用于給受感染的傷口進(jìn)行傷口消毒完全令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，孔寬度為0.3至0.5nm的沸石可以與如下進(jìn)一步定義的水生生物的生物質(zhì)(Biomasse)以1:10至10:1的比例相混，而止血作用和毛細(xì)作用力又不會(huì)遭到損失。由此，通過用生物質(zhì)來代替這種材料，就能拓寬新型沸石顆粒的使用范圍。因此，本發(fā)明也包括另外含有生物質(zhì)的沸石顆粒，特別優(yōu)選沸石與生物質(zhì)之比為1:10至10:1。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選選擇具有抗菌活性的微藻類，將其生物質(zhì)凍干并研磨和/或根據(jù)Liikowski等Pharmaceuticallyorcosmeticallyactiveagentsobtainedfromlipid-containingmarineorganisms.US10/507,061的技術(shù)教導(dǎo)處理。通過將天然沸石細(xì)顆粒與如此處理的含有抗微生物活性物質(zhì)的生物質(zhì)混合，就能成功地得到一種組合，其能夠保證吸收過量傷口滲出物，保持傷口濕潤(rùn)，抑制細(xì)菌在傷口上繁殖，起到阻止發(fā)炎和刺激免疫的作用和促進(jìn)細(xì)胞增殖。在根據(jù)US10/507,061進(jìn)行處理時(shí)優(yōu)選脂質(zhì)含量〉20。/。并含有很多不飽和脂肪酸和/或具有很高的聚-N-乙?；?葡糖胺含量的微藻類。因此，可以有利地將脂肪酸的抗菌活性用于所述目的。優(yōu)選由聚-N-乙酰基-葡糖胺或殼聚糖構(gòu)成的多糖具有很大的內(nèi)表面積。由于是在這種大面積上的吸收，所以在凝血因子富集過程中同樣也如在吸收傷口分泌物以及細(xì)菌毒素時(shí)一樣產(chǎn)生協(xié)同作用。此外，這些多糖具有刺激免疫的功能。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，采用綠藻類衣藻(Chlamydomonas)和/或微藻類螺旋藻(Spirulina)和/或魚腥藻(Anabaena)的凍干的生物質(zhì)。若在流血的傷口上采用含有或不含有生物質(zhì)的沸石，則由于纖維蛋白體系的活化而形成固態(tài)的類似癡痂的覆蓋物，該覆蓋物能可靠的防止細(xì)菌感染。所述覆蓋物會(huì)在傷口愈合過程中脫離掉。在一個(gè)合適的使用方式中，也可以采用微藻類生物質(zhì)和天然沸石的細(xì)小顆粒，以治療嚴(yán)重感染的潮濕傷口。在不同應(yīng)用領(lǐng)域中，試劑盒和/或粘合劑可以含有所有上面詳述的實(shí)施方式中的本發(fā)明的沸石顆粒和生物質(zhì)的組合。本發(fā)明特征除了權(quán)利要求中的之外也來自于說明書，并且各個(gè)特征都分別單獨(dú)或以多個(gè)組合的方式構(gòu)成有益的能夠保護(hù)的實(shí)施方式，針對(duì)這些實(shí)施方式以本文提出保護(hù)。本發(fā)明的步驟可以單獨(dú)使用。本發(fā)明將根據(jù)以下實(shí)施例來闡述，但是并非局限于這些實(shí)施例。實(shí)施例實(shí)施例1:制備天然沸石細(xì)顆粒經(jīng)選擇性分解的含有>70%沸石成分，優(yōu)選斜發(fā)沸石、菱沸石和絲光沸石的礦物在干燥和粉碎之后通過分級(jí)而獲得0.8-0.2mm的粒徑范圍。有關(guān)純度，要滿足美國(guó)藥典或歐洲藥典的要求。通過在所選的<200"C的溫度區(qū)間內(nèi)小心的熱處理而進(jìn)行部分脫水作用，得到晶格結(jié)構(gòu)。實(shí)施例2:微孔體積和粒度分布的測(cè)試根據(jù)實(shí)施例1制得的產(chǎn)品具有25-50%的微孔體積(以總體積計(jì))和0.3-0.5nm的平均納米孔直徑。納米孔徑和細(xì)顆粒結(jié)構(gòu)能夠?qū)崿F(xiàn)最大的血液吸收和吸附劑細(xì)顆粒的快速滲透。毛細(xì)管力作用要比對(duì)比方式測(cè)試的商業(yè)制劑CERDAC高5到10倍。實(shí)施例3:測(cè)試細(xì)顆粒的止血能力方法測(cè)試根據(jù)實(shí)施例1制得的2種細(xì)顆粒。在小鼠肝臟上進(jìn)行測(cè)試，作為嚴(yán)重溢血的器官的原型。為此目的將小鼠麻醉。在打開腹腔之后用解剖刀切開約lcm長(zhǎng)的切口。拍攝出血過程。測(cè)量直至止血的時(shí)間。結(jié)果采用本發(fā)明的顆粒，能在1分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)止血(未處理的對(duì)照則要長(zhǎng)達(dá)8分鐘)。并且會(huì)生成瘡痂般的保護(hù)傷口的結(jié)^。實(shí)施例4:體外測(cè)試細(xì)顆粒的止血能力在不同的血漿上進(jìn)行測(cè)試得到以下結(jié)果a)標(biāo)準(zhǔn)血漿(預(yù)培育2分鐘)<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>凝塊=凝結(jié)b)有缺陷的血漿<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>不含顆粒無法凝結(jié)。c)肝素血漿(2和3分鐘的預(yù)培育)<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>結(jié)果證明，內(nèi)源的凝血體系被激活，并且缺陷因子F-VII和組織因子導(dǎo)致凝血酶和纖維蛋白的生成增強(qiáng)。通過根據(jù)實(shí)施例1的礦物傷口敷料(Wundauflage)使得纖維蛋白濃度相對(duì)升高。實(shí)施例5:測(cè)試微藻類萃取物的抗菌效果方法在線性模型(lineareModus)中利用Whitley自動(dòng)螺旋涂布器(WhitleyAutomaticSpiralPlater)將各種葡萄球菌林均勻分布在瓊脂平板(BectonDickinson的Mtiller-Hinton-II-成品瓊脂平板)上。將相應(yīng)于2mg萃取物量的萃取物溶液滴加到如用于制備傷口敷料的醋酸酯織物上并使其干燥。為制備萃取物，采用綠藻類衣藻、微藻類螺旋藻(BlueBiotechBtisum)和魚腥藻(GreifswaldErnst-Moritz-Arndt-大學(xué)，藥學(xué)院的菌種收藏中心)的凍干的生物質(zhì)。在萃取儀DIONEXASE200上用正己烷萃取。利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器從萃取物溶液中除去溶劑。結(jié)果對(duì)照樣品中計(jì)數(shù)得到70-120林/cm2。在所涂覆的傷口敷料下，沒有檢測(cè)到有令人擔(dān)心的作為傷口感染病原體且耐受曱氧笨青霉素(Methicillin)的金黃色葡萄球菌(Staphylokkusausreus)菌林(MRSA)。對(duì)于其他的葡萄球菌，則細(xì)菌生長(zhǎng)降至原始菌林?jǐn)?shù)的IO至20%。實(shí)施例6:由天然沸石和微藻類的生物質(zhì)制備細(xì)顆粒將脂質(zhì)含量>20%的微藻生物質(zhì)以1:10至10:1的比例混入到根據(jù)實(shí)施例l所制得的礦物細(xì)顆粒。由此也抑制了傷口上的細(xì)菌繁殖。實(shí)施例7:測(cè)試細(xì)顆粒的止血和閉合傷口的能力a)方法測(cè)試根據(jù)實(shí)施例1制得的2種細(xì)顆粒。在小鼠肝臟上進(jìn)行測(cè)試，作為嚴(yán)重溢血的器官的原型。為此目的將小鼠麻醉。在打開腹腔之后用解剖刀切開約lcm長(zhǎng)的切口。拍攝出血過程。測(cè)量直至止血的時(shí)間。肉眼評(píng)價(jià)傷口的閉合。結(jié)果釆用本發(fā)明的顆粒在1分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)止血(對(duì)照長(zhǎng)達(dá)8分鐘)。并且會(huì)生成瘡痂般的保護(hù)傷口的結(jié)疤。b)在另一些試驗(yàn)中，在l分鐘之后用解剖刀去掉結(jié)疤。結(jié)果得到不再流血的并表面閉合住的傷口，且傷口閉合外觀良好.采用基于礦物/藻類生物質(zhì)的細(xì)顆粒得到的傷口:巧今祐-,殳好-7只采用基于礦物f^得的制劑的情況。c)在其他試驗(yàn)中通過纖維布將細(xì)顆粒與傷口隔開。結(jié)果即便在這些條件下，止血仍然在少于一分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)。形成了一片一目了然的手術(shù)區(qū)，從而使得采用本發(fā)明的組織粘合劑能毫無問題地實(shí)現(xiàn)傷口的牢固粘合。實(shí)施例8:制備粘合劑預(yù)聚物并進(jìn)行軟組織和硬組織粘合的粘合反應(yīng)所開發(fā)的粘合劑由各個(gè)成分寡肽1(由酪氨酸和賴氨酸的重復(fù)二肽單元構(gòu)成的氨基酸序列，且n-5或n=10)、橋分子2(2，5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯曱酰胺)和酶漆酶(示意圖5)的混合物制成。試驗(yàn)在磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行。示意圖5:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>通過漆酶與和寡肽連接的橋分子進(jìn)行酶促反應(yīng)而產(chǎn)生粘合作用。釆用以下混合比例[Tyr-Lysn，n=4-35,8.5mM;2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯甲酰胺12.5mM;酶:0.3211(1561111101ml1min力。溶劑的甲醇含量為10%(v/v)。實(shí)施例9:測(cè)試粘合縫的強(qiáng)度為在拉伸試驗(yàn)中測(cè)試粘合縫的強(qiáng)度，必須要事先將待測(cè)的組織部分固定。將豬的軟組織用氰基丙烯酸酯粘合劑固定在聚甲基丙烯酸曱酯(PMMA)構(gòu)成的試樣支架上，或者將牛的骨骼制成的骨板(Knochenplatte)夾入到機(jī)械夾中。隨后，將待測(cè)的粘合劑混合物(參見實(shí)施例6)涂覆于組織上。在軟組織粘合時(shí)，IO分鐘之后，在測(cè)試儀ZwickBZ2.5/TN1S(測(cè)試速度10mm/min)上并在拉伸載荷下計(jì)算粘合縫的強(qiáng)度。拉伸剪切載荷條件下以5mm/min的測(cè)試速率來進(jìn)行硬組織粘合之后的粘合縫的機(jī)械測(cè)試。結(jié)果得到相比于受試的市售纖維蛋白粘合劑兩倍強(qiáng)的強(qiáng)度實(shí)施例10:根據(jù)本發(fā)明摻雜的膠原非織造織物的擴(kuò)散阻礙試驗(yàn)，與用常規(guī)抗生素?fù)诫s的非織造織物比較方法根據(jù)Burkhardt方法(Burkhardt,F.(Hrsg.)MikrobiologischeDiagnostik.Georg-Thieme出版社，斯圖加特，紐約，1992，724頁(yè))進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。15個(gè)試驗(yàn)都采用置于Stacker-培養(yǎng)皿(BectonDickinsonMicrobiologySystems，Cockeysville，美國(guó))中的Mueller-HintonII-瓊脂。作為測(cè)試菌林，選^金黃色葡萄菌抹ATCC6538。選擇這些測(cè)試菌林的接種方式，使得在歷經(jīng)1620小時(shí)的培養(yǎng)之后會(huì)發(fā)展成緊密排列的但并不匯合的單個(gè)集落。在將接種的培養(yǎng)基干燥之后，將摻雜的膠原非織造織物鋪設(shè)于瓊脂表面上。在36X:培養(yǎng)18+2小時(shí)之后，測(cè)量抑菌圏(Hemmhof)。結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>本發(fā)明的非織造織物具有以下優(yōu)點(diǎn)，更好的抗微生物效果，即使對(duì)于多種抗性的菌體.非常良好的止血作用.筒單施用時(shí)良好的傷口粘合。實(shí)施例11:測(cè)試根據(jù)本發(fā)明摻雜多酚的表面的抗菌作用方法在線性模型中利用Whitley自動(dòng)螺旋涂布器將各種葡萄球菌林均勻分布在瓊脂平板(BectonDickinson的Mtiller-Hinton-II-成品瓊脂平板)上。才艮據(jù)Contrib.PlasmaPhys.41,2001，562-572在氨-血漿中對(duì)聚合物生物材料(均為lcm"進(jìn)行官能化。然后與2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯甲酰胺(12.5mM)在漆酶(0.32U(156nmo1ml1min4))作用下進(jìn)行反應(yīng)。溶劑的曱醇含量為10%(v/v)。干燥之后將平板置于瓊脂上。結(jié)果對(duì)照樣品中計(jì)數(shù)得到120林/cm2。在經(jīng)涂布的表面下沒有檢測(cè)到有菌林。實(shí)施例12:采用本發(fā)明的組合物來處理流血的傷口方法如實(shí)施例7中所述麻醉小鼠，打開腹腔并在肝臟上做一個(gè)切口。如實(shí)施例7c中那樣止血。去除生成的結(jié)皰。隨后用傷口粘合劑來粘合切口。為此，將實(shí)施例6中所述的寡肽吸收入PBS(磷酸鹽緩沖鹽水，2.7MNaCl，54mMKC1，87mMNa2HP04，30mMKH2P04，pH7.4)中并添加漆酶(成分1)。將2，5-二羥基-N-(2-幾乙基)-苯甲酰胺溶于PBS中(成分2)。測(cè)試不同比的寡肽/2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯曱酰胺/漆酶，例如1/1/0.1;1/2/0.5;1/10/1。溶劑量選擇最小，以得到盡可能濃縮的各成分溶液。在帶有Mixpac型混合擠出機(jī)的雙成分注射器(Mixpac系統(tǒng)，Rotkreuz，瑞士)提供各成分并注入到傷口裂縫中。結(jié)果通過止血就已經(jīng)能得到良好的傷口閉合。粘合劑可以直接置入所得的狹小縫隙中。最后使傷口邊緣獲得非常牢固的粘合。實(shí)施例13:膠原的粘合方法將膠原膜(DOTGmbH)固定于平坦的基底上。將膠原膜劃分為8段(每列四個(gè)成兩列)并且將粘合劑直接混合到膜上(利用表面張力)。粘合劑溶于磷酸鹽-檸檬酸鹽緩沖液中。測(cè)試不同濃度的橋分子(漆酶-底物)。粘合劑蛋白質(zhì)具有約4000D的MW。隨后涂覆很小的膠原膜塊，輕輕擠壓并使其干燥。結(jié)果在粘合膠原時(shí)獲得牢固的連接。不添加粘合劑蛋白質(zhì)也能實(shí)現(xiàn)粘合。而通過粘合劑蛋白質(zhì)能增強(qiáng)粘合力。實(shí)施例14:膠原溶液與粘合劑的混合在膠原溶液與粘合劑混合之后通過顯微鏡能觀察到強(qiáng)的結(jié)構(gòu)化作用。溶解和隨機(jī)排列的膠原分子被平行取向一一形成纖維。實(shí)施例15:膠原和聚苯乙烯的粘合方法將一滴(20pl)檸檬酸鹽-磷酸鹽緩沖液(對(duì)照)或粘合劑溶液(緩沖液、漆酶、漆酶-底物)涂覆于60mm的TCPS-細(xì)胞培養(yǎng)皿表面上，每個(gè)上面放置小塊的膠原膜(8x4mm)并輕輕擠壓，然后使其干燥。結(jié)果盡管表面是絕對(duì)光滑且惰性的但是仍然能實(shí)現(xiàn)粘合。膠原能與基底持久地連接。實(shí)施例16:負(fù)載有膠原的表面上的細(xì)胞粘著方法以成纖維細(xì)胞-細(xì)胞系(FL-細(xì)胞)來測(cè)試細(xì)胞粘著情況。在根據(jù)實(shí)施例15涂覆以膠原的60mm的TCPS-細(xì)胞培養(yǎng)臟上進(jìn)行細(xì)胞粘著。在以結(jié)晶紫將細(xì)胞染色之后采用CellExplorer進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果FL-細(xì)胞被較強(qiáng)地粘結(jié)(參見圖1)。權(quán)利要求1.一種含有以下單獨(dú)成分的試劑盒:a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和c)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中單獨(dú)成分b)和c)不接觸。2.根據(jù)權(quán)利要求l的試劑盒，其中通過二氨基酸得到游離氨基。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的試劑盒,其中所述聚合物與二羥基芳族化合物和/或木質(zhì)素降解的多酚氧化酶接觸。4.根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)的試劑盒，其中所述試劑盒是具有兩個(gè)針頭的注射器，通過該注射器可以將二羥基芳族化合物和木質(zhì)素降解的多酚氧化酶分開地釋放出來。5.—種包含以下單獨(dú)成分的粘合劑a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，其中所述聚合物并非人體成分，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二鞋基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和c)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中單獨(dú)成分b)和c)相接觸。6.根據(jù)權(quán)利要求5的粘合劑，其中所述單獨(dú)成分a)至c)相接觸。7.—種沸石含量為至少70重量％且平均孔徑為0.3至0.5nm的沸石顆粒，所述沸石顆粒通過研磨、分級(jí)和在低于2001C的溫度下脫水的步驟而得到。8.根據(jù)權(quán)利要求7的沸石顆粒，其中所述沸石顆粒的平均顆粒尺寸為0.2至0.8。9，根據(jù)前述權(quán)利要求7~8中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中所述沸石顆粒包含來自水生生物的生物質(zhì)。10.根據(jù)前述權(quán)利要求7~9中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中所述生物質(zhì)的脂質(zhì)含量>20%。11.根據(jù)前述權(quán)利要求7~10中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中所述水生生物具有抗菌活性和/或含有聚-N-乙?；?葡糖胺。12.根據(jù)前述權(quán)利要求7~11中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中采用綠藻類衣藻(Chlamydomonas)和/或微藻類螺旋藻(Spirulina)和/或魚腥藻(Anabaena)的凍干生物質(zhì)。13.根據(jù)前述權(quán)利要求7~12中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中所述生物質(zhì)與沸石顆粒以1:10至10:1的比例混合。14.根據(jù)前述權(quán)利要求7~13中任一項(xiàng)的沸石顆粒，其中所述沸石顆粒和任選地所述生物質(zhì)位于優(yōu)選是基于纖維素或基于織物或膠原非織造織物的包封內(nèi)。15.根據(jù)前述權(quán)利要求1~6中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述試劑盒或粘合劑包含根據(jù)權(quán)利要求7~14中任一項(xiàng)的沸石顆粒作為其他單獨(dú)成分d)。16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的試劑盒，其中所述沸石顆粒不與其它單獨(dú)成分a)至c)接觸。17.才艮據(jù)權(quán)利要求15所述的粘合劑，其中所述沸石顆粒與其它單獨(dú)成分接觸。18.根據(jù)前述權(quán)利要求l~6和15~17中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述芳族化合物被取代。19.根據(jù)前述權(quán)利要求l~6和15~18中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述二羥基芳族化合物是2，5-二羥基苯曱酰胺。20.根據(jù)前述權(quán)利要求l~6和15~19中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述二羥基芳族化合物是2,5-二羥基-N-(2-羥乙基)-苯曱酰胺。21.根據(jù)前述權(quán)利要求l~6和15~20中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述木質(zhì)素降解的多酚氧化酶是漆酶。22.根據(jù)前述權(quán)利要求1~6和15~21中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述聚合物選自寡肽、肽和蛋白質(zhì)。23.根據(jù)前述權(quán)利要求1~6和15~22中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述聚合物含有賴氨酸。24.根據(jù)前述權(quán)利要求1~6和15~23中任一項(xiàng)的試劑盒或粘合劑，其中所述聚合物是含有賴氨酸的寡肽或膠原。25.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的作為藥物的試劑盒、粘合劑或沸石顆粒。26.可用于水環(huán)境中的粘合方法，其特征在于，釆用根據(jù)權(quán)利要求5、6、15、17~24中任一項(xiàng)的粘合劑來實(shí)現(xiàn)牢固交聯(lián)的可再吸收連接。27.包含以下單獨(dú)成分的試劑盒用于制備閉合傷口用粘合劑的用途，a)具有至少一個(gè)游離氨基的非必需的聚合物，b)選自單環(huán)的鄰二鞋基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和c)多酚氧化酶，其中單獨(dú)成分b)和c)不相接觸。28.根據(jù)權(quán)利要求27的用途，其中所述試劑盒還根據(jù)權(quán)利要求2~4、15、16和18~24中任一項(xiàng)來定義。29.包含根據(jù)權(quán)利要求7~14中任一項(xiàng)的沸石顆粒的試劑盒用于制備閉合傷口用的粘合劑的用途。30.根據(jù)權(quán)利要求27~29中任一項(xiàng)的用于交聯(lián)膠原的用途。31.根據(jù)前述權(quán)利要求27~30中任一項(xiàng)的用于創(chuàng)造無血的手術(shù)區(qū)的用途。32.根據(jù)前述權(quán)利要求27~30中任一項(xiàng)的用于密封血管或中空器官上接合處和修補(bǔ)處的用途。33.根據(jù)前述權(quán)利要求27~32中任一項(xiàng)的用途，其中所述密封經(jīng)過一定時(shí)間被再吸收。34.根據(jù)前述權(quán)利要求27~33中任一項(xiàng)的用途，其中所述密封是柔韌的。35.根據(jù)前述權(quán)利要求27~34中任一項(xiàng)的用于慢性傷口的傷口愈合的用途。36.根據(jù)前述權(quán)利要求27~35中任一項(xiàng)的用于受感染的傷口上傷口消毒的用途。37.根據(jù)前述權(quán)利要求27~36中任一項(xiàng)的用于粘合器官、組織或骨骼以及粘合骨骼與植入體的用途。38.根據(jù)權(quán)利要求7~14中任一項(xiàng)的沸石顆粒的用于制備閉合傷口的止血?jiǎng)┑挠猛?。全文摘要本發(fā)明涉及一種試劑盒，其含有以下單獨(dú)成分a)具有至少一個(gè)游離氨基的聚合物，b)選自單環(huán)的鄰二羥基芳族化合物、單環(huán)的對(duì)二羥基芳族化合物、雙環(huán)的單羥基芳族化合物、多環(huán)的單羥基芳族化合物、雙環(huán)的二羥基芳族化合物、多環(huán)的二羥基芳族化合物、雙環(huán)的三羥基芳族化合物、多環(huán)的三羥基芳族化合物和它們的混合物的橋分子，和c)多酚氧化酶，特別是木質(zhì)素降解的多酚氧化酶，其中單獨(dú)成分b)和c)不接觸。文檔編號(hào)A61L24/04GK101384284SQ200780005159公開日2009年3月11日申請(qǐng)日期2007年2月9日優(yōu)先權(quán)日2006年2月9日發(fā)明者烏爾麗克·林德奎斯特,克里斯蒂安·舒爾茨,卡特林·曼達(dá),安德烈亞斯·維爾納·施派特林,弗里德·肖爾,沃爾夫-迪特爾·于利希,約阿希姆·朔姆堡,菲利普·普羅克特,阿內(nèi)特·米科拉什申請(qǐng)人:史塞克創(chuàng)傷有限責(zé)任公司