專利名稱：納米磁性微球制備方法及利用該方法制備的抗癌口服劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新型腫瘤藥品的制備方法，特別是新型載藥納米磁性 微球的制備方法，及其在腫瘤藥物口服制劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
關(guān)于"納米磁性生物材料"在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，目前己經(jīng)公開的 技術(shù)主要有各種載藥磁性納米粒/微囊/微球在注射劑中的應(yīng)用研究、超 順磁氧化鐵納米粒子在磁共振成像造影劑中的廣泛臨床應(yīng)用、以及納米磁 性生物材料透皮制劑技術(shù)應(yīng)用于皮膚科外用藥OTC系列產(chǎn)品中(包括液 體、粉劑、軟膏劑等)。
"載藥納米磁性微球"(亦稱"載藥納米磁性微囊"、"納米磁性生 物導(dǎo)彈")具有良好的生物降解性與生物相容性，可有效促進(jìn)藥物吸收、 提高藥物生物利用度，其良好的靶向性及緩控釋效應(yīng)是提高藥物療效、減 少毒副作用的重要保證。
"納米磁性生物材料" 一納米級超順磁Fe304，是已經(jīng)公開的成熟技 術(shù)，具有非常確切的安全性，己經(jīng)廣泛使用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。由于該載體 具有非常獨(dú)特的理化特性，尤其適合作為本發(fā)明口服靶向制劑的"導(dǎo)彈 頭"。
磁共振成像造影劑臨床研究證實(shí)超順磁性氧化鐵具有磁力矩，體積
小，具有生物降解性與生物相容性，其毒性閾值為正常人體內(nèi)鐵的總量達(dá)15g以上，或每克肝組織內(nèi)鐵含量達(dá)到200|jg以上，目前臨床應(yīng)用中
超順磁性氧化鐵的實(shí)際用量都遠(yuǎn)小于其毒性閾值。
目前已經(jīng)市場化并公開的技術(shù)所配制的用于治療或輔助治療各種常
見的癌癥的各種中草藥口服制劑，普遍存在有如下缺點(diǎn)1、藥物的有效 成分不能快速到達(dá)人體指定的病灶靶位，藥物釋放遭到網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)
(RES)對其非選擇性清除，藥物在人體內(nèi)消化吸收的過程中同時(shí)影響到 正常的健康組織細(xì)胞，尤其是對肝、脾、腎等所產(chǎn)生的副作用很大。2、
藥物在消化道劇烈的環(huán)境中遭受酶系統(tǒng)的代謝和降解，同時(shí)藥物大分子 (有效成分)很難穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)被充分吸收，藥物的生物利用度 很低。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種具
有特殊理化性能的骨架材料，包合載體材料及抗腫瘤藥物組合，制備載藥 納米磁性微球的制備方法。
本發(fā)明的第二個(gè)目的在于將該載藥納米磁性微球新技術(shù)應(yīng)用于抗腫 瘤藥物口服制劑中，該載藥納米磁性微球可快速到達(dá)人體指定的病灶靶 位，進(jìn)入靶細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)藥物的耙向釋放及緩釋效應(yīng)，提高靶細(xì)胞內(nèi)的藥物 濃度，而不影響到正常的健康組織細(xì)胞，提高機(jī)體免疫力，激活患者體內(nèi) 抗癌機(jī)制，減少癌變機(jī)率，誘導(dǎo)和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，達(dá)到多重治療和多 藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案是 一種納米磁性微球制備 方法，包括如下歩驟3、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料為納米磁性生物材料，為粒子直徑在2 20 nm之間的 Fe3CU粉體，骨架材料為P-環(huán)糊精，F(xiàn)e304粉體與(3-環(huán)糊精和藥物的重量
比為0.001 0.01 :1:1，溶劑適量；b、制備將(3-環(huán)糊精和藥物加
入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘， 然后加入「63〇4粉體后再均速攪拌30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘 頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入溶劑，至成漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)， 開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000 3000轉(zhuǎn)/分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后 取出并倒入容器；c、穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后，進(jìn)行40 65" 恒溫干燥，目標(biāo)濕度為5 12%; d、粉碎及制劑將干燥好的藥物粉碎 達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠囊或壓片包衣。
所述的納米磁性微球制備方法，所述藥物為親水性藥物或藥物組合， 所用溶劑為Ph值6 7的水，藥物與溶劑的重量比為1: 1 2。
所述的納米磁性微球制備方法，所述藥物為疏水醇溶性藥物或藥物組 合，所用溶劑為50 95%的乙醇，藥物與溶劑的重量比為1: 1 2。
所述的納米磁性微球制備方法，所述藥物為油相及脂溶性藥物或藥物 組合，所用溶劑為Ph值6 7的水，藥物與溶劑的重量比為1: 2 3。
所述的納米磁性微球制備方法，所述藥物為現(xiàn)代中藥復(fù)方、天然藥物 復(fù)方或化學(xué)藥物復(fù)方。
所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑，所述抗癌口服劑所 用的藥物為現(xiàn)代中藥復(fù)方，組方中每種藥物水提取物粉末的重量份額分別 為半枝蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑10份、虎杖10份、海金沙 10份、黃芪10份、龍須草5份、郁金5份、川芎4份、蟾酥1份。所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑，所述抗癌口服劑所 用藥物為天然藥物復(fù)方，該組方由現(xiàn)代中藥與化學(xué)藥物組成，所述現(xiàn)代中
藥占整個(gè)藥物組方的80-98%，所述化學(xué)藥物占整個(gè)藥物組方的20-2%，
組方中的現(xiàn)代中藥復(fù)方每種藥物的醇提取物粉末的重量份額分別為半枝
蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑10份、虎杖10份、海金沙10份、黃 芪10份、龍須草5份、郁金5份、川芎4份、蟾酥1份；組方中的化學(xué) 藥物復(fù)方每種藥物的重量份額分別為異環(huán)磷酰胺80份，紫杉醇20份。
所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑，所述抗癌口服劑所 用藥物為化學(xué)藥物復(fù)方，復(fù)方中每種藥物的重量份額分別為5-氟脲密啶 50份，異環(huán)磷酰胺40份，紫杉醇9份和鹽酸阿霉素1份。
本發(fā)明的載藥納米磁性微球具有良好的生物降解性與生物相容性， 可有效促進(jìn)藥物吸收、提高藥物生物利用度，其良好的耙向性及緩控釋效 應(yīng)是提高藥物療效、減少毒副作用的重要保證。載藥納米磁性微球可以通 過細(xì)胞外膜的特異性通道(OprD)—"膜離子通道"或非特異性通道(OprF)， 將藥物成分與生物活性因子順利帶入靶細(xì)胞內(nèi)，抑制靶細(xì)胞的基因表達(dá)與 擴(kuò)增，改變其某些生化特征及凋亡抑制，使其變性壞死或凋亡。由于耐藥 株細(xì)胞存在多種耐藥機(jī)制，藥物分子越大，所帶負(fù)電荷越多，疏水性越強(qiáng)， 越不易通過細(xì)胞外膜的非特異性通道(OprF)，不能形成細(xì)胞內(nèi)有效藥物濃 度，以致產(chǎn)生耐藥性。藥物的大分子如果被?；杉{米粒徑級的小分子后、 就能穿透組織間隙，并可通過人體最小的毛細(xì)血管。載藥納米磁性微球由 于自身獨(dú)特的尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)能夠順利進(jìn)入靶細(xì)胞，提高靶細(xì)胞內(nèi)的 藥物濃度，達(dá)到多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用。"多藥耐藥逆轉(zhuǎn)"可以使腫瘤治療失敗的機(jī)率下降，具有很高的臨床價(jià)值。
多數(shù)大分子藥物的口服遞送策略基本相同，就是讓系統(tǒng)中的大分子藥 物免受酶的降解，同時(shí)提高藥物在消化道上皮細(xì)胞膜的透過效率。載藥納 米磁性微球遞送系統(tǒng)正好滿足這兩點(diǎn)要求，它們能夠保護(hù)容易失活的大分 子藥物在消化道劇烈的環(huán)境中免受酶系統(tǒng)的代謝和降解。在不加入促滲劑 的情況下，這些微粒載體能夠被消化道上皮細(xì)胞所吸收，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)大分子 的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，克服這個(gè)大分子口服給藥途徑中最大的生物屏障。
任何生長、增殖細(xì)胞的膜上都有鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的受體TfR。攜帶Fe3+ 的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(transferrin;Tf )與受體結(jié)合后經(jīng)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，供細(xì) 胞內(nèi)合成利用。尤其是腫瘤細(xì)胞，TfR的表達(dá)密度在腫瘤細(xì)胞要比多數(shù)正 常細(xì)胞高許多倍，且與Tf親和力明顯增加；TfR在腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)穩(wěn)定， 很少被修飾、覆蓋、或丟失；受體是內(nèi)吞性的，容易進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，許多腫 瘤如肝細(xì)胞癌、乳腺癌及胰腺癌等，均高表達(dá)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)。已經(jīng) 知道癌細(xì)胞需要大量鐵離子來復(fù)制DNA，因此癌細(xì)胞中的鐵離子濃度比 正常細(xì)胞的濃度高。癌細(xì)胞表面存在比正常細(xì)胞更多的鐵傳蛋白受體。由 于癌細(xì)胞對鐵的貪婪，使得載藥納米磁性微球具有很高的靶向性。
本發(fā)明的抗癌口服劑是以載藥納米磁性微球和中藥抗癌物質(zhì)為主要 原料制備的抗癌藥口服制劑，其通過納米磁性生物導(dǎo)彈攜帶納米生物材 料、生物活性材料、中藥抗癌物質(zhì)等，迅速到達(dá)指定病灶靶位，進(jìn)入靶細(xì) 胞，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向釋放及緩釋效應(yīng)，抑制靶細(xì)胞的基因表達(dá)與擴(kuò)增，改 變其某些生化特征及凋亡抑制，使其變性壞死或凋亡；同時(shí)增強(qiáng)NK細(xì)胞 T細(xì)胞的殺傷活性以及巨噬細(xì)胞對靶細(xì)胞的吞噬能力，提高機(jī)體免疫力，達(dá)到多重治療和多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用。其載藥納米磁性微球可快速到達(dá)人體 指定的病灶靶位，而不影響到正常的健康組織細(xì)胞；同時(shí)可使藥物的有效 成分穿透細(xì)胞膜順利進(jìn)入耙細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)大分子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，克服這個(gè) 大分子口服給藥途徑中最大的生物屏障，提高靶細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度，抗癌 抑瘤、解毒消腫、散瘀活血、通絡(luò)止痛，適用于乳腺癌、宮頸癌、肝癌、 肺癌、食管癌、胃癌、直腸癌等，能有效抑制腫瘤細(xì)胞分裂增殖，提高機(jī) 體免疫力，激活患者體內(nèi)抗癌機(jī)制，減少癌變機(jī)率，誘導(dǎo)和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞 凋亡，達(dá)到多重治療和多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施方式一
制作一種新型納米磁性微球，包括如下歩驟
3、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料
為納米磁性生物材料，即粒子直徑在2 20nm之間的Fe3O4粉體，骨架 材料為p-環(huán)糊精，藥物為親水性的現(xiàn)代中藥復(fù)方，所用溶劑為Ph值6 7 的水。載體材料、骨架材料、藥物和溶劑的重量比為0.001 0.01 : 1 :
1: 1 2。
b、 制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 2(X) 轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉休后再均速攪拌 30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入水，至成 漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000 3000轉(zhuǎn)/ 分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65i:恒溫干燥到濕度為5 12%;
d、粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠 囊或壓片包衣。 實(shí)施方式二
制作一種新型納米磁性微球，包括如下步驟
3、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料
為納米磁性生物材料，即粒子直徑在2 20nm之間的Fe3O4粉體，骨架 材料為[3-環(huán)糊精，藥物為疏水醇溶性的天然藥物復(fù)方，所用溶劑為50 95%的乙醇。載體材料、骨架材料、藥物和溶劑的重量比為0.001 0.01 :
1 : 1: 1 2。
b、 制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200 轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉體后再均速攪拌 30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入50 95% 的乙醇，至成漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以 1000 3000轉(zhuǎn)/分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65。C恒溫干燥到濕
度為5 12%;
d、 粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠
囊或壓片包衣。 實(shí)施方式三
制作一種新型納米磁性微球，包括如下步驟
3、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料為納米磁性生物材料，即粒子直徑在2 20nm之間的Fe3O4粉體，骨架 材料為P-環(huán)糊精，藥物為油相及脂溶性藥物或藥物組合，溶劑為Ph值6 7的水。載體材料、骨架材料、藥物和溶劑的重量比為0.001 0.01 :
1:1: 2 3。
b、 制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200 轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉體后再均速攪拌 30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入水，至成 漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000 3000轉(zhuǎn)/ 分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65。C恒溫干燥到濕
度為5 12%;
d、 粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠 囊或壓片包衣。
利用上述三種不同類型的納米磁性微球，分別制備三種不同抗癌藥組
方的口服制劑，
具體實(shí)施例方式
實(shí)施方式一
制備一種新型抗癌藥口服制劑，包括如下步驟
a、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料
為納米磁性生物材料，即粒子直徑在2 20nm之間的Fe304粉體，骨架 材料為(3-環(huán)糊精，藥物為親水性的現(xiàn)代中藥復(fù)方，每種藥物的水提取物粉 末的重量份額分別為半枝蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑10份、虎 杖10份、海金沙10份、黃芪10份、龍須草5份、郁金5份、川芎4份、蟾酥1份，所用溶劑為Ph值6 7的水，載體材料、骨架材料、藥物和 溶劑的重量比為0.001 0.01 :1:1: 1 2。
b、 制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200
轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉體后再均速攪拌 30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入水，至成 漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000 3000轉(zhuǎn)/ 分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65i:恒溫干燥到濕
度為5 12%;
d、 粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠 囊或壓片包衣。
實(shí)施方式二
制備一種新型抗癌藥口服制劑，包括如下步驟
a、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料
為納米磁性生物材料，即為粒子直徑在2 20nm之間的Fe304粉體，骨 架材料為p-環(huán)糊精，藥物為疏水醇溶性的天然藥物復(fù)方，由現(xiàn)代中藥組方 和化學(xué)藥物組方組成，所述現(xiàn)代中藥組方占整個(gè)藥物復(fù)方的80-98%，所 述化學(xué)藥物組方占整個(gè)藥物復(fù)方的20-2%,其中現(xiàn)代中藥組方每種藥物的 醇提取物粉末的重量份額分別為半枝蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑 10份、虎杖10份、海金沙10份、黃芪10份、龍須草5份、郁金5份、 川芎4份、蟾酥1份；其中化學(xué)藥物組方每種藥物的重量份額分別為異環(huán)磷酰胺80份，紫杉醇20份。所用溶劑為50 95。/。的乙醇。載體材料、
骨架材料、藥物和溶劑的重量比為0.001 0.01 :1:1: 1 2。
b、 制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200 轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉體后再均速攪拌 30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入50 95% 的乙醇，至成漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以 1000 3000轉(zhuǎn)/分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65'C恒溫干燥到濕
度為5 12%;
d、 粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠
囊或壓片包衣。
實(shí)施方式三
制備一種新型抗癌藥口服制劑，包括如下歩驟
3、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料
為納米磁性生物材料，即粒子直徑在2 20nm之間的Fe304粉體，骨架 材料為(3-環(huán)糊精，藥物為油相及脂溶性藥物或藥物組合，溶劑為Ph值6 7的水，藥物為化學(xué)藥物復(fù)方，每種藥物的重量份額分別為5-氟脲密啶 50份，異環(huán)磷酰胺40份，紫杉醇9份和鹽酸阿霉素1份。載體材料、骨
架材料、藥物和溶劑的重量比為0.001 0.01 :1:1: 2 3
b、制備將(3-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50 200 轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe304粉體后再均速攪拌30 90分鐘，改以50 500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入水，至成 漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000 3000轉(zhuǎn)/ 分鐘的頻率包絡(luò)化合30 120分鐘后取出并倒入容器；
c、 穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后進(jìn)行40 65t:恒溫干燥到濕 度為5 12%;
d、 粉碎及制劑將干燥好的藥品粉碎達(dá)80 325目后過篩，灌裝膠
囊或壓片包衣。
說明本發(fā)明所述機(jī)械設(shè)備、載體材料、骨架材料、藥物組合之各種
品種規(guī)格、以及溶劑等均屬國內(nèi)市售產(chǎn)品/商品。
對本發(fā)明制備的抗癌口服劑，特委托福建省藥品檢驗(yàn)所進(jìn)行檢驗(yàn)，其
具體檢驗(yàn)報(bào)告如下 實(shí)驗(yàn)材料
1.1動(dòng)物清潔級ICR小鼠
1.2受試藥物本發(fā)明制備的抗癌口服劑，規(guī)格為0.25g/粒，人的口服量 為0.1g/kg。此前本發(fā)明藥品的內(nèi)容物用蒸餾水?dāng)嚢柩心ヅ渲贸晒┰嚌舛?的供試液；注射用環(huán)磷酰胺臨前用蒸餾水配置1.75mg/ml濃度。
1.3瘤株宮頸癌1114腹水型肝癌H22
2.實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果 2.1急性毒性實(shí)驗(yàn)
在無法測出LD^的情況下，取體重18-21g小鼠20只，雌雄各半， 實(shí)驗(yàn)前禁食16H，不禁水，以最大給藥濃度0.44g/ml、最大給藥容積 0.04ml/gBW給予小鼠灌胃給藥，上、下午各1次，給藥后正常詞養(yǎng)，連續(xù)觀察14天，小鼠未見異常，全部存活。結(jié)果測得本發(fā)明的藥品對小鼠
灌胃給藥最大耐受量為35.3g/kg，相當(dāng)于人臨床用量的352倍。 2.2抗實(shí)體型移植性惡性腫瘤宮頸癌1114實(shí)驗(yàn)
取體重18-22g雌性小鼠50只，在無菌條件下，從接種10天腫瘤生 良好的宮頸癌小鼠上，選取完好的瘤塊，剔除包膜和壞死部分，剪成小
塊，按1: 6加入生理鹽水置于玻璃勻漿器內(nèi)研磨，過濾，配制成瘤細(xì)胞
懸液，按0.01ml/gBW分別接種在每只小鼠右側(cè)前肢腋窩皮下，接種24h 后將小鼠按體重隨機(jī)分成5組，每組10只，給藥組分別以30、 65、 125mg/ml濃度的本發(fā)明藥品，給藥體積0.02ml/gBW灌胃給藥，每天1 次，又停藥后24h稱重，處死小鼠，剝出腫瘤稱重?？瞻讓φ战M給于等體 積蒸餾水，陽性對照組于接種后24h灌胃給于環(huán)磷酰胺35mg/kg1次。按 下式介紹腫瘤抑制率，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以spss10.0軟件進(jìn)行單因素方差分析， 經(jīng)方差分析檢驗(yàn)，方差齊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用lsd法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，方差不齊 的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用tambane法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表1、 2
腫瘤抑制率％=
對照組平均瘤重一給藥組平均瘤重 對照組平均瘤重
X 100%
表1本發(fā)明的藥品灌胃對小鼠宮頸癌U,4生長的抑制作用(X士S，『10)
藥:
劑量(g/kg) 瘤重(g)
i瘤率(％:
p值
蒸餾水 0.2ml/10gxl0 1.691±1.102 殳明的藥品 0.6x10 1.422±0.811
本發(fā)明的藥品
1.3x10 0.132±0.273*
15.9
92.2
1.0
0.014本發(fā)明的藥品 2.5x100.011±0.015** 99.CPM 0.035x1 0.282士0.268^ 83.
0.0090.028
與空白組對照比較，*p<0.05，**: p<0.01
表2本發(fā)明的藥品灌胃對宮頸癌U,4小鼠體重的影響(g， X±S)
組別動(dòng)物數(shù) (只)初始體重終期體重P值增重P值
蒸餾水1019.3±1.425.7土1.7/6.4士2.9/
低劑量組1018.7±0.824.9士1.80.3566.2±2.20.853
中劑量組1019.1±1.024.8±2.30，5.7±2.60.518
高劑量
組1018.8±1.024.1土1.90.0695.3±2.10.311
CPM1018.5士2.026.7士1.80.2507.8土2.20.199
結(jié)果本發(fā)明的藥品的灌胃1.3、2.5g/kg劑量組對接種宮頸癌U,4小鼠的抑瘤率分別為92.2%、 99.3%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析(F檢驗(yàn))與空白對照組比較差異均有顯著意義(PO.05,PO.01),說明本發(fā)明對實(shí)體型腫瘤宮頸癌U,4
/ 、
￡3
眠
具有明顯的抑瘤作用，CPM組顯示陽性效果，抑瘤率為83.3(P<0.05)，
且各組小
:重均未減輕(P>0.05)。
2.3抗腹水型抑制性惡性腫瘤肝癌(H22)實(shí)驗(yàn)
取體重22-26g雌性小鼠55只，在無菌條件下，從接種7天生長良好的腹水型(H22)小鼠腹腔取腹水制成l:8腫瘤細(xì)胞生理鹽水混懸液，分別給每只小鼠腹腔接種0.01ml/gBW，接種24h后將小鼠俺體重隨機(jī)分為5組，每組11只，給藥組分別以125、 250、 500mg/ml濃度的康愛膠囊供試液，給藥體積0.02ml/gBW灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7天，空白對照組
16給予等體積蒸餾水，陽性對照組隔天1次灌胃給予環(huán)磷酰胺(CPM)
35mg/kg共4次。記錄各組小鼠死亡狀況，至第30天，按下式計(jì)算生命延長百分率，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以SPSSIO.O軟件進(jìn)行單因素方差分析，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)，方差齊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用LSD進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，方差不齊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Tamhane進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果見表3。
生命延長率
'藥組平均存活天數(shù)-對照組平均存活天數(shù)對照組平均存活天數(shù)
%= xioo%
表3本發(fā)明藥品灌胃對小鼠腹水型肝癌(H22)生命延長作用的影響(X±S， n=ll)
劑量小鼠生存天生命延長率
藥物(g/kg)數(shù)(%)P值
蒸餾水0.2ml/10x712.7±3.1//
本發(fā)明的藥品2.5x716.6士6.530.70.617
本發(fā)明的藥品5.0x711.5±2.6-9.4/
本發(fā)明的藥品10.0x717.1士9.1女34.60.821
CPM0.035x414.3±1.712.50,849
該組中有3只小鼠生存30天未死亡。一比蒸餾水組生命減少％ 。
結(jié)果本發(fā)明的藥品灌胃2.5、 10.0g/kg劑量組對腹水型肝癌(H22)小鼠的生命延長率分別為30.7、 34.6%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析(F檢驗(yàn))與空白對照組比較差異均無顯著意義(P〉0.5)，而康愛膠囊10.0g/kg組有3只小鼠存活超過30天(治愈)，說明本發(fā)明的藥品具有延長腹水型肝癌 (H")小鼠生命的趨勢，但效果不明顯。3.小結(jié)
本發(fā)明的藥品對小鼠灌胃給藥毒性較低，MTD為35.2g/kg，相當(dāng)于人臨床用量的352倍；對實(shí)體型腫瘤宮頸癌(Ul4)小鼠灌胃給藥抑瘤率分別達(dá)到92.2% (P>0.05)， 99.3% (P〉0.01)，表明對實(shí)體瘤具有明顯的抑瘤作用。對腹水型腫瘤肝癌(H22)小鼠灌胃給藥的生命延長率分別為30.7%、 34.6%，有延長腹水型肝癌(H22)小鼠生命的趨勢，但與空白對照組比較差異無顯著意義(P〉0.5)，表明對腹水型肝癌(H22)藥效不明顯。
權(quán)利要求
1、一種納米磁性微球制備方法，其特征在于包括如下步驟a、備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑，其中，載體材料為納米磁性生物材料，為粒子直徑在2～20nm之間的Fe3O4粉體，骨架材料為β-環(huán)糊精，F(xiàn)e3O4粉體與β-環(huán)糊精和藥物的重量比為0.001～0.0111，溶劑適量；b、制備將β-環(huán)糊精和藥物加入可變速食品攪拌機(jī)中，以50～200轉(zhuǎn)/分鐘的頻率均速攪拌5至15分鐘，然后加入Fe3O4粉體后再均速攪拌30～90分鐘，改以50～500轉(zhuǎn)/分鐘頻率攪拌，并連續(xù)緩慢注入溶劑，至成漿后取出并倒入超分子包絡(luò)化合機(jī)，開動(dòng)包絡(luò)化合頭以1000～3000轉(zhuǎn)/分鐘的頻率包絡(luò)化合30～120分鐘后取出并倒入容器；c、穩(wěn)定及干燥待漿料穩(wěn)定24小時(shí)后，進(jìn)行40～65℃恒溫干燥，目標(biāo)濕度為5～12％；d、粉碎及制劑將干燥好的藥物粉碎達(dá)80～325目后過篩，灌裝膠囊或壓片包衣。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法，其特征在于所 述藥物為親水性藥物或藥物組合，所用溶劑為Ph值6 7的水，藥物與 溶劑的重量比為1: 1 2。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法，其特征在于所述藥物為疏水醇溶性藥物或藥物組合，所用溶劑為50 95%的乙醇，藥物與溶劑的重量比為1: 1 2。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法，其特征在于所述藥物為油相及脂溶性藥物或藥物組合，所用溶劑為Ph值6 7的水，藥物與溶劑的重量比為1: 2 3。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法，其特征在于所 述藥物為現(xiàn)代中藥復(fù)方、天然藥物復(fù)方或化學(xué)藥物復(fù)方。
6、 利用權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑， 其特征在于所述抗癌口服劑所用的藥物為現(xiàn)代中藥復(fù)方，組方中每種藥 物水提取物粉末的重量份額分別為半枝蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑10份、虎杖10份、海金沙10份、黃芪10份、龍須草5份、郁金5 份、川芎4份、蟾酥1份。
7、 利用權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑，其特征在于所述抗癌口服劑所用藥物為天然藥物復(fù)方，該組方由現(xiàn)代中藥與化學(xué)藥物組成，所述現(xiàn)代中藥占整個(gè)藥物組方的80-98%,所述化學(xué) 藥物占整個(gè)藥物組方的20-2%，組方中的現(xiàn)代中藥復(fù)方每種藥物的醇提取 物粉末的重量份額分別為半枝蓮30份、紫花地丁15份、山慈姑10份、 虎杖10份、海金沙10份、黃芪10份、龍須草5份、郁金5份、川芎4 份、蟾酥1份；組方中的化學(xué)藥物復(fù)方每種藥物的重量份額分別為異環(huán)磷 酰胺80份，紫杉醇20份。
8、 利用權(quán)利要求1所述的納米磁性微球制備方法制備的抗癌口服劑， 其特征在于所述抗癌口服劑所用藥物為化學(xué)藥物復(fù)方，復(fù)方中每種藥物 的重量份額分別為5-氟脲密啶50份，異環(huán)磷酰胺40份，紫杉醇9份和
全文摘要
本發(fā)明公開了一種納米磁性微球制備方法及利用該方法制備的抗癌口服劑，包括如下步驟a.備料準(zhǔn)備載體材料、骨架材料、藥物和溶劑；b.制備；c.穩(wěn)定及干燥；d.粉碎及制劑等工藝步驟。本發(fā)明以β-環(huán)糊精為骨架材料，包合載體材料(納米磁性生物材料)和藥物組合等，本發(fā)明的載藥納米磁性微球可迅速到達(dá)指定病灶靶位，穿透靶細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)大分子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，達(dá)到靶向釋放及緩控釋效應(yīng)，提高靶細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度，抑制靶細(xì)胞的基因表達(dá)與擴(kuò)增使其變性壞死或凋亡；同時(shí)增強(qiáng)NK細(xì)胞T細(xì)胞的殺傷活性以及巨噬細(xì)胞對靶細(xì)胞的吞噬能力，提高機(jī)體免疫力，達(dá)到多重治療和多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用。
文檔編號A61K9/14GK101461784SQ20071030124
公開日2009年6月24日 申請日期2007年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月17日
發(fā)明者黃云清 申請人:黃云清