專利名稱：一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬扶正化瘀藥物組合物應(yīng)用領(lǐng)域，特別是涉及一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門(mén)靜脈高壓癥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肝硬化是彌漫性肝纖維化伴有結(jié)節(jié)形成的一種病理改變。我國(guó)肝硬化患病率達(dá)100多萬(wàn)人/年(主要與病毒性肝炎有關(guān))，年死亡11萬(wàn)。這不僅嚴(yán)重危害我國(guó)人民的健康，而且還為國(guó)家?guī)?lái)嚴(yán)重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
門(mén)靜脈高壓癥是肝硬化的主要并發(fā)癥，是決定肝硬化預(yù)后的主要因素。肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化(生成大量細(xì)胞外基質(zhì)，形成肝竇毛細(xì)血管化和纖維間隔)和收縮(使肝竇狹窄)是肝硬化門(mén)脈高壓癥形成的中心環(huán)節(jié)，內(nèi)皮素(endothelin，ET)是引起HSC收縮的最重要的血管活性物質(zhì)之一。
門(mén)靜脈高壓癥是肝硬化發(fā)展至一定程度后必然出現(xiàn)的后果，主要臨床表現(xiàn)有脾腫大、門(mén)腔側(cè)支循環(huán)形成及腹水。上消化道出血是門(mén)靜脈高壓癥最主要的并發(fā)癥，食管和胃底靜脈曲張破裂為主要病因。雖然近年來(lái)內(nèi)科和外科治療有了很大進(jìn)展，但尚未從根本上改變預(yù)后，上消化道出血仍然是肝硬化門(mén)靜脈高壓患者死亡的主要原因。在發(fā)現(xiàn)靜脈曲張的第一、二年里，出血的風(fēng)險(xiǎn)為25～35％，且多數(shù)發(fā)生在第一年。大多數(shù)研究表明首次出血的死亡率達(dá)30％～50％，約60％患者死于無(wú)法控制的出血。
積極預(yù)防上消化道出血和再出血，對(duì)減少患者出血的風(fēng)險(xiǎn)、提高生存率、改善預(yù)后有重要意義?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)尚無(wú)對(duì)食管靜脈輕度曲張的患者有效的預(yù)防出血的措施，對(duì)食管靜脈中重度曲張者首選β受體阻滯劑普奈洛爾(心得安)以降低門(mén)靜脈壓力，預(yù)防上消化道出血。但是因部分患者對(duì)β受體阻滯劑有禁忌或副反應(yīng)，常不能耐受治療，而β受體阻滯劑對(duì)引起門(mén)靜脈高壓的根本原因即HSC的收縮和所導(dǎo)致的肝纖維化無(wú)治療作用，因而只是治標(biāo)，不能治本。
扶正化瘀方是由本公司開(kāi)發(fā)的用于治療慢性肝炎肝纖維化的藥物，是由丹參、桃仁、蟲(chóng)草菌絲等組成。基于此方的兩個(gè)制劑(膠囊和片劑)已經(jīng)獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局上市許可，中國(guó)專利發(fā)明名稱為“一種治療慢性肝病的中藥復(fù)方制劑及制備方法”，申請(qǐng)?zhí)枮?00610023308.3。其中并無(wú)扶正化瘀方用于肝硬化門(mén)脈高壓的觀察報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門(mén)靜脈高壓癥中的應(yīng)用，對(duì)大鼠肝臟的肝細(xì)胞變性、壞死，肝內(nèi)出血、纖維增生有明顯改善，門(mén)靜脈壓力顯著下降。
一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門(mén)靜脈高壓癥中的應(yīng)用。
所述的一種扶正化瘀植物藥組合物，包括下述有效成分丹參提取物25-38％，絞股藍(lán)提取物20-25％，五味子醇提取物1-6％，蟲(chóng)草菌絲體提取物19-26％，松花粉提取物6-％，桃仁提取物6-10％。加入輔料而成。
所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用，包括下列步驟(1)按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍(lán)加水煎煮，合并濾液，取上清液，濃縮成浸膏，冷卻，加乙醇，使含醇量達(dá)70％，靜置，濾過(guò)，取濾液濃縮并干燥；(2)稱取發(fā)酵蟲(chóng)草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻，合并乙醇液，濾過(guò)，濾液濃縮干燥；(3)稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，(4)取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復(fù)方制劑。
本發(fā)明制劑經(jīng)藥理藥效研究，具有降低肝硬化門(mén)脈高壓癥的新用途，其試驗(yàn)結(jié)果如下一、模型與分組腹腔注射0.5％的二甲基亞硝胺(dimethylnitrosamine，DMN)，連續(xù)注射3天后休息4天，共進(jìn)行4周。造模結(jié)束后，隨機(jī)抽取2只大鼠處死觀察肝臟的病變情況，經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)肝臟有硬化改變后，造模組隨機(jī)分為模型組和扶正化瘀方組。扶正化瘀方組給予扶正化瘀方灌胃，模型組和正常值給予相同劑量的飲用水，共3周。
二、藥效作用結(jié)果1各組哺乳類(lèi)死亡及腹水情況造模4W時(shí)，各組均無(wú)哺乳類(lèi)死亡，第5W開(kāi)始出現(xiàn)哺乳類(lèi)死亡，至第7W末，正常組無(wú)哺乳類(lèi)死亡，模型組死亡4只，扶正化瘀方組死亡2只，死亡原因?yàn)楦喂δ芩ソ?；腹水發(fā)生數(shù)則以模型組最多，經(jīng)卡方檢驗(yàn)，扶正化瘀方和模型組相比，有顯著差異。參見(jiàn)表1。
表1.各組哺乳類(lèi)死亡及腹水情況統(tǒng)計(jì)

注與模型組比較*p＜0.052各組哺乳類(lèi)肝體比及脾體比比較模型組造模后3W周(第7W末)哺乳類(lèi)體重(不包括腹水)明顯比正常組降低，肝/體減小為0.029，脾/體增大為0.005；經(jīng)扶正化瘀方治療3W后的哺乳類(lèi)體重有所回復(fù)，與模型組相比，肝/體增加，脾/體降低。參見(jiàn)表2。
表2.各組哺乳類(lèi)肝/體及脾/體比較(mean±SD)

注與正常組比較##P＜0.013.肝組織病理學(xué)觀察3.1肝組織HE染色觀察正常哺乳類(lèi)肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞索由中央靜脈向四周呈放射狀排列，可見(jiàn)少許竇旁細(xì)胞，匯管區(qū)可見(jiàn)極少量纖維結(jié)締組織。造模結(jié)束3W時(shí)模型組哺乳類(lèi)肝臟可見(jiàn)大面積出血壞死，并見(jiàn)大量腫脹壞死的肝細(xì)胞，同時(shí)有大量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肝竇扭曲變形；匯管區(qū)明顯增寬，廣泛增生的纖維組織形成間隔，將肝小葉分割包繞成大小不等的假小葉；扶正化瘀方組大鼠肝臟的肝細(xì)胞變性、壞死，肝內(nèi)出血、纖維增生都有不同程度的改善。參見(jiàn)圖1。


圖1.DMN模型哺乳類(lèi)肝組織炎癥變化及扶正化瘀方的作用，肝組織HE染色(×200)。
圖2.DMN模型哺乳類(lèi)肝組織膠原纖維沉積變化及扶正化瘀方的作用，肝組織天狼猩紅染色(×200)。
圖3.正常組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力。
圖4.模型組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力。
圖5.扶正化瘀方組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力。
圖6.哺乳類(lèi)肝組織中ET-1含量和門(mén)靜脈壓力的相關(guān)性。
圖7.扶正化瘀方治療后哺乳類(lèi)肝組織中ET-1含量和門(mén)靜脈壓力的相關(guān)性4.各組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力的變化經(jīng)DMN造模以后，模型組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力顯著升高，與正常組比較，升高幅度達(dá)到了8mmHg，而在給予扶正化瘀方治療3周之后，門(mén)靜脈壓力顯著下降，與模型組比較，兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＝0.035)。參見(jiàn)表7，圖3-5。
表7.各組哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力的變化(mean±SD)

注與正常組比，##p＜0.01，與模型組比，*p＜0.055.肝硬化哺乳類(lèi)肝組織ET-1含量的變化造模后第3w時(shí)，模型組肝組織中ET-1含量明顯高于正常組，給予扶正化瘀方治療之后，肝組織中ET-1含量顯著下降，與同期模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＝0.044)。參見(jiàn)表8。
表8.肝硬化哺乳類(lèi)肝組織ET-1含量的變化(mean±SD)

注與正常組比，##p＜0.01，與模型組比，*p＜0.056.哺乳類(lèi)肝組織中ET-1含量和門(mén)靜脈壓力的相關(guān)性肝硬化哺乳類(lèi)肝組織中ET-1含量和門(mén)靜脈壓力之間呈顯著正相關(guān)，r＝0.675，p＜0.01。參見(jiàn)圖6。
在運(yùn)用扶正化瘀方治療3w后，肝組織ET-1含量和門(mén)靜脈壓力之間仍然呈顯著正相關(guān)，r＝0.447，p＜0.05。參見(jiàn)圖7。
三、藥效結(jié)果分析哺乳類(lèi)造模4w肝硬化成型后，隨機(jī)分組，用扶正化瘀方治療3w。結(jié)果顯示，扶正化瘀方治療后，哺乳類(lèi)死亡率和腹水發(fā)生率均較模型組明顯降低，肝體比增加，脾體比則下降；肝臟纖維化程度大為減輕，肝內(nèi)纖維間隔變窄變短，門(mén)靜脈壓力較模型組顯著下降了4.6mmHg，幅度達(dá)33％，差異相當(dāng)顯著。
本項(xiàng)研究中，模型組哺乳類(lèi)肝組織中ET-1的含量較正常組明顯升高，約達(dá)40％，同時(shí)模型組哺乳類(lèi)的門(mén)靜脈壓力也顯著上升了1.4倍，而給予扶正化瘀方治療之后，哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力降低，肝組織中ET-1的含量也相應(yīng)的下降。相關(guān)性分析顯示，肝硬化哺乳類(lèi)肝組織中ET-1含量和門(mén)靜脈壓力之間呈顯著正相關(guān)。在肝硬化早期，肝內(nèi)阻力增高是引起門(mén)脈高壓的始動(dòng)因素，而HSC的收縮加強(qiáng)是肝內(nèi)阻力增高最重要的原因。ET就是通過(guò)促進(jìn)HSC的收縮而在門(mén)脈高壓形成的始動(dòng)因素中起著重要作用。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
病例1吳××，男，34歲，2002年9月體檢發(fā)現(xiàn)“肝硬化”，來(lái)上海第七人民醫(yī)院進(jìn)一步診療，檢查發(fā)現(xiàn)HBV-M示“HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)”，HBV DNA(+)，血清肝纖四項(xiàng)示P-III-P(III型前膠原肽)1.81ng/ml，IV-C(IV型膠原)547ng/ml，HA(透明質(zhì)酸)377ng/ml，LN(層粘蛋白)369ng/ml。肝功能正常，B超示肝臟光點(diǎn)增粗，呈慢性肝病改變，門(mén)靜脈12mm，脾臟腫大，144mm×52mm，腹脹，納呆，乏力，胃鏡下可見(jiàn)胃底靜脈曲張中度。
予扶正化瘀膠囊治療，1月后復(fù)查，血清肝纖四項(xiàng)基本正常。半年后復(fù)查B超，門(mén)靜脈11mm，脾臟縮小，100mm×39mm，繼續(xù)服用扶正化瘀膠囊，1年后，腹脹、納呆、乏力諸癥減輕，2003年2月胃鏡檢查，胃底靜脈曲張輕度。
病例2陳××，男，41歲，慢乙肝11年，2003年3月查HBV-M“HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)”，肝功能正常，B超示門(mén)靜脈內(nèi)徑14mm，門(mén)靜脈流速15mm/s，脾臟體積115mm×37mm，胃鏡可見(jiàn)食道靜脈曲張中度。開(kāi)始服用扶正化瘀膠囊。
1年后查，門(mén)靜脈內(nèi)徑12mm，門(mén)靜脈流速19mm/s，脾臟體積112mm×35mm，食道靜脈曲張輕度，連續(xù)服用2年后，2005年3月查，門(mén)靜脈內(nèi)徑12mm，門(mén)靜脈流速21mm/s，脾臟體積101mm×31mm，食道靜脈曲張消失。
權(quán)利要求
1.一種扶正化瘀植物藥組合物在制備治療肝硬化門(mén)靜脈高壓癥的植物藥制劑中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用，其特征在于所述組分包括丹參提取物25-38％、絞股藍(lán)提取物20-25％、五味子醇提取物1-6％、蟲(chóng)草菌絲體提取物19-26％、松花粉提取物6-8％、桃仁提取物6-10％、加入輔料而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用，其特征在于所述的制備步驟(1)按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍(lán)加水煎煮，合并濾液，取上清液，濃縮成浸膏，冷卻，加乙醇，使含醇量達(dá)70％，靜置，濾過(guò)，取濾液濃縮并干燥；(2)稱取發(fā)酵蟲(chóng)草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻，合并乙醇液，濾過(guò)，濾液濃縮干燥；(3)稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，(4)取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復(fù)方制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用，其特征在于對(duì)哺乳類(lèi)肝臟的肝細(xì)胞變性、壞死，肝內(nèi)出血、纖維增生有改善。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種扶正化瘀植物藥組合物的應(yīng)用，其特征在于哺乳類(lèi)門(mén)靜脈壓力顯著下降。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種扶正化瘀植物藥組合物在治療肝硬化門(mén)靜脈高壓癥中的應(yīng)用，組合物包括丹參提取物25－38％、絞股藍(lán)提取物20－25％、五味子醇提取物1－6％、蟲(chóng)草菌絲體提取物19－26％、松花粉提取物6－8％、桃仁提取物6－10％、加入輔料而成。制備步驟包括按組分配比稱取丹參、桃仁、絞股藍(lán)加水煎煮，靜置，濾干燥；稱取發(fā)酵蟲(chóng)草菌粉，五味子加乙醇熱回流，冷卻濾過(guò)干燥；稱取松花粉乙醇溫浸，合并干燥成干膏，取上述三種干膏，混合粉碎，加淀粉，混勻，制備成復(fù)方制劑。本發(fā)明對(duì)哺乳類(lèi)肝臟的肝細(xì)胞變性、壞死，肝內(nèi)出血、纖維增生都有明顯改善，門(mén)靜脈壓力顯著下降。
文檔編號(hào)A61P1/00GK101045092SQ20071004033
公開(kāi)日2007年10月3日 申請(qǐng)日期2007年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月29日
發(fā)明者徐列明, 劉成 申請(qǐng)人:上?，F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司