專利名稱：苦膽草抗肺纖維化的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于含有有機有效成分的醫(yī)藥配制品。
背景技術：
嚴重急性呼吸綜合征，即SARS，是一種以呼吸道為主要傳播途徑、病情發(fā)展迅速、病死率高的急性傳染病。SARS死亡病人肺組織病理學顯示出不同發(fā)展水平和嚴重程度的彌漫性肺瘀血、出血，肺泡損害，透明膜形成、肺泡細胞向腔內(nèi)的脫落，肺小血脈管壁纖維素樣壞死，間質中單核細胞炎性浸潤和肺纖維化等病變(Yan KV，Chan JK.Image in pathologypulmonary pathology of severe acute respiratory syndrome.Int.J Surg Pathol.2003；11118-126.)。SARS患者在疾病晚期出現(xiàn)的病理變化與肺纖維化的主要病理特點膠原纖維增生、肺間質纖維化等相一致(Holmes KU.SARS-associated coronavirus.N EnglJ Med.2003；151948-1951.)。
苦膽草又名龍膽、草龍膽，其主要有效成分為龍膽苦甙(gentiopicroside，GPS)，是一種來源廣、毒副作用少的常用中草藥，能清熱燥濕、瀉肝膽實火、清下焦?jié)駸?、開胃、治肝經(jīng)熱盛、驚癇燥狂、熱痢目赤，咽腫、黃疽、食欲不振、尿路感染、陰囊腫脹、陰部濕癢等。臨床上常用于治療感冒，扁桃體炎，支氣管炎，急性菌痢，胃腸炎等多種感染性疾病(江蘇新醫(yī)學院。中藥大辭典上冊。上海上海科學技術出版社.2001)。
中藥是中華民族的傳統(tǒng)醫(yī)藥寶庫。針對SARS病人，發(fā)揮發(fā)揮中藥的特長，特別是云南中藥的地域優(yōu)勢，利用有大量臨床應用基礎的苦膽草中藥進行抗肺纖維化藥理學作用研究，以緩解病情、控制癥狀和降低死亡率為目標，尚無比較深入地研究和探索。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是研究苦膽草對抗肺纖維化的藥理學作用，為臨床治療SARS及抗肺纖維化提供實驗依據(jù)和有效的治療藥物。
本發(fā)明通過以下途徑實現(xiàn)，其特征在于將苦膽草作為治療肺纖維化的藥物。
所述苦膽草可以是片劑、丸劑、噴劑之一類型的中成藥。
本發(fā)明動物藥理學實驗表明，苦膽草有較好的抗肺纖維化的藥理學作用，能減輕BLMA5誘導的肺纖維化，降低肺纖維化程度，對于治療肺間質纖維化將是可選用的藥物，為臨床治療SARS及肺纖維化提供科學的實驗依據(jù)。
具體實施例方式
(1)本發(fā)明抗BLMA5致肺纖維化大鼠的作用博萊霉素A5(Bleomycin A5，BLMA5)致肺纖維化動物模型的肺組織病理學和生理學改變與人肺纖維化相似。當成纖維細胞增多時，I型膠原產(chǎn)物顯著增加，使I型與III型膠原比例失調，導致膠原沉積，形成肺纖維化。
將實驗用、體重180-200g、健康昆明SD大鼠隨機分為正常對照組、生理鹽水組、BLMA5組和苦膽草組。其中，BLMA5組用20％烏拉坦按100mg/100g體重腹腔注射麻藥后，無菌條件下，切開頸前正中皮膚長約0.5cm，用1ml無菌注射器刺入氣管，按0.5ml/100g體重緩慢滴注5％BLMA5；注藥后將大鼠直立旋轉，使BLMA5在肺內(nèi)均勻分布；縫合皮膚，置于SPF動物室內(nèi)飼養(yǎng)，記錄死亡率?？嗄懖萁M用0.705g/100g d-1體重劑量的藥物給大鼠灌胃，共2.5次。末次給藥后1小時氣管內(nèi)緩慢滴入BLMA5，按0.705g/100g d-1體重劑量每天分兩次給予苦膽草，連續(xù)給藥。
統(tǒng)計學分析不同實驗組動物死亡率的比較采用x2檢驗，結果以P＜0.05判定有顯著性差異。結果表明，與BLMA5組大鼠相比，苦膽草片能明顯降低其死亡率(P＜0.01)，見表1。
表1苦膽草抗BLMA5致肺纖維化大鼠死亡率的作用(x±s)

與正常對照組和生理鹽水組比，▲P＜0.05；與BLMA5組相比，*P＜0.01。
(2)本發(fā)明對大鼠肺組織勻漿中HYP測定羥脯氨酸(Hydroxyproline，HYP)為膠原纖維所特有，其它蛋白中不存在或含量非常低。因此，測定肺組織HYP的含量可評價肺纖維化的嚴重程度。
檢測原理HYP在氧化劑作用下，產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物與二甲氨基醛作用呈現(xiàn)紫紅色，根據(jù)呈色深淺可換算出HYP的含量，反映肺纖維化的程度。采用HYP檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定操作步驟。將受試大鼠隨機分為正常對照組、生理鹽水組、BLMA5組和苦膽草組，在第14天和在第28天各組隨機分取10只處死檢測。
統(tǒng)計學分析數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，組間藥物療效的比較采用重復測量的方差分析，結果以P＜0.05判定有顯著性差異。結果如表2表2.苦膽草對大鼠肺組織勻漿中HYP含量的影響(x±s)

與正常對照組和生理鹽水組比，▲P＜0.01與BLMA5組相比，*P＜0.01。
表2中，14天模型組大鼠肺勻漿中HYP含量顯著升高，28天達高峰(P＜0.05)，提示已成功復制了肺纖維化模型。實驗結果表明，與BLMA5組大鼠相比，苦膽草組大鼠肺組織勻漿中HYP含量明顯降低(P＜0.01)。
(3)本發(fā)明對大鼠肺組織形態(tài)學觀察拉頸脫臼處死大鼠，開胸取肺，用10％中性甲醛固定24小時后，常規(guī)石蠟包埋、切片，GS染色后光鏡下觀察肺組織形態(tài)結構變化。
表3苦膽草對大鼠肺組織形態(tài)學觀察(GS染色4×)

權利要求
1.苦膽草抗肺纖維化的應用，其特征在于將苦膽草作為治療肺纖維化的藥物。
2.根據(jù)權利要求1所述的苦膽草抗肺纖維化的應用，其特征在于苦膽草可以是片劑、丸劑、或噴劑之一類型的中成藥。
全文摘要
苦膽草抗肺纖維化的應用，本發(fā)明屬于含有有機有效成分的醫(yī)藥配制品。SARS患者在疾病晚期出現(xiàn)的病理變化與肺纖維化的主要病理特點膠原纖維增生、肺間質纖維化等相一致?？嗄懖菔且环N來源廣、毒副作用少的常用中草藥，臨床上常用于治療多種感染性疾病。本發(fā)明是用苦膽草作為治療SARS及抗肺纖維化的藥物。本發(fā)明動物藥理學實驗表明，苦膽草有較好的抗肺纖維化的藥理學作用，能減輕BLMA5誘導的肺纖維化，降低肺纖維化程度，對臨床治療SARS及肺纖維化提供了可選用的藥物。
文檔編號A61K36/19GK1872195SQ20061001080
公開日2006年12月6日 申請日期2006年4月11日 優(yōu)先權日2006年4月11日
發(fā)明者王殿華, 張旋, 張恒麗, 張潔, 薛鳳麟, 雷偉亞, 張榮平 申請人:昆明醫(yī)學院