專利名稱：非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球、其制備方法及其應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及藥物制劑領域，具體的說，涉及非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球、其制備方法及其應用。
背景技術(shù)：
非那雄胺是一種4-氮甾體激素，它是一種5-α還原酶特異抑制劑。5-α還原酶能將睪酮代謝成更強效的雄激素雙氫睪酮，后者是前列腺生長所依賴的物質(zhì)。非那雄胺能抑制雙氫睪酮的合成而使前列腺消腫。臨床用于良性前列腺增生的治療。
非那雄胺口服的生物利用度為63～80％。(張石革，孫定人主編，新藥臨床藥理與應用手冊，化學工業(yè)出版，北京2001年p421)國外一資料報道，895例良性前列腺增生患者口服本品，一日5mg，連續(xù)一年，血漿雙氫睪酮水平下降70％，前列腺體積縮小19％，尿流量峰值增加1.6％，(NEng J Med 1992年)。另一報道，2902例患者口服本品，一日5mg，連續(xù)二年，前列腺體積縮小15.3％，尿流量峰值增加1.5％(Urology，1998年)。國內(nèi)報道，1645例良性前列腺增生患者一日口服5mg，連續(xù)一年治療，癥狀和尿流率有明顯改善者占1/3左右(中華泌尿外科雜志，1992年)。本品口服主要不良反應為乳房增大和壓痛，偶見性功能障礙和皮疹，口唇腫脹等過敏反應。
本品市售制劑為片劑，商品名保列治(Troscar)，劑量5mg。盡管口服非那雄胺對治療前列腺增生有肯定療效，但必須堅持每日用藥。這對患者，特別是老年患者存在著順應性問題，另外口服制劑由于肝的首過效應往往存在生物利用度低的缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于口服制劑的上述缺陷，我們利用微囊化技術(shù)成功研究了一種可在體內(nèi)緩釋一個月的注射用非那雄胺生物降解微球。該微球可經(jīng)皮下注射埋植于體內(nèi)，藥物可通過微球骨架材料緩慢釋放，骨架材料在體內(nèi)可逐漸降解成無毒小分子物質(zhì)(CO2和水)，最后排出體外。微球每注射一次可在體內(nèi)維持一個月療效。由于注射劑不像口服制劑要經(jīng)過肝首過效應，所以生物利用度高。在我們的動物藥效學研究中，采用口服28天總劑量的80％藥物量的微球進行對照試驗，發(fā)現(xiàn)兩組動物藥效基本相同。微球在體內(nèi)可維持平穩(wěn)的血藥濃度，這對保持療效，減少不良反應是有利的。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球。
本發(fā)明所要解決的另一個技術(shù)問題是提供非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球的制備方法。
本發(fā)明所要解決的再一個技術(shù)問題是提供另一種非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球的制備方法。
本發(fā)明所要解決的最后一個技術(shù)問題是非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球用于制備治療前列腺增生的長效制劑。
本發(fā)明所述的非那雄胺微球包含占其重量5～80％(w/w)的非那雄胺及其類似物和占其重量95～20％的分子量為5000～300000道爾頓的生物降解聚合物。生物降解聚合物可選自聚丙交酯-乙交酯，聚丙交酯，聚羥基乙酸，聚β-羥基丁酸酯，聚乳酸羥乙酸，聚原酸酯，聚己內(nèi)酯，聚酸酐，聚磷酸酯，聚磷腈，聚氰基丙烯酸酯，聚酰胺。優(yōu)選聚丙交酯-乙交酯，聚丙交酯，聚乳酸羥乙酸。分子量優(yōu)選10,000-300,000道爾頓。共聚物中兩者單體克分子比為15∶85～85∶15，優(yōu)選25∶75～75∶25。
本發(fā)明所述的非那雄胺類似物包括依立雄胺(Epristeride)和度他雄胺(Dutasteride)。
本發(fā)明的非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球采用乳化分散-液中干燥法制備，包括下列步驟a)將生物降解聚合物和藥物溶解在合適有機溶媒中后，作為分散相；b)將分散相滴入不斷攪拌的加有乳化劑的連續(xù)相中，有機溶媒逐漸揮發(fā)，析出微球；c)微球混懸液經(jīng)離心分離；d)經(jīng)減壓干燥或冷凍干燥制得微球；e)微球無菌粉末混懸于藥學可接受溶液中，搖勻即得。
將分散相加入正在攪拌的連續(xù)相，攪拌速度是控制微球粒徑很重要的參數(shù)，攪拌器采用垂直式三葉不銹鋼攪拌漿，轉(zhuǎn)速500～8000rpm。用本發(fā)明制備的微球粒徑分布范圍為10～200μm，篩選20μm～130μm粒徑為注射用微球。微球混懸液經(jīng)離心分離，收集上清液，微球用蒸餾水少量多次淋洗，于室溫下減壓干燥或冷凍干燥即得。
非那雄胺注射用微球可以采用油/水(O/W)乳化-液中干燥法制備。將生物降解聚合物溶解在合適有機溶媒中后，加入藥物溶解作油相，油相滴入正在攪拌的表面活性劑水溶液中(水相)使成O/W乳劑。在恒定溫度下使上述有機溶劑逐漸揮發(fā)，析出載藥微球，離心分離，洗滌干燥即得。
油/水(O/W)乳化-液中干燥法的分散相揮發(fā)性溶媒可用二氯甲烷、氯仿、醋酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、丙酮、乙醇、甲醇、DMSO和苯的單一組分或兩種或兩種以上組分結(jié)合而成。連續(xù)相以水為介質(zhì)，介質(zhì)中應有表面活性劑，如PVPk-30、明膠、CMC-Na、低黏度HPMC、HPC或PVA的單一組分或其中兩種或兩種以上組分的混合物，首選PVPk-30和PVA。表面活性劑加入量為連續(xù)相體積的0.2-8.0％，首選0.3～2.0％。本發(fā)明中，聚合物溶媒品種，首選二氯甲烷或醋酸乙酯的單一組分或兩組分的混合物。聚合物濃度為1～50％(w/v)藥物占微球重量的百分比為5～80％，分散相與連續(xù)相體積比為1/20～1/5，首選1/10～1/5。
非那雄胺微球也可采用油/油(O/O)乳化-液中干燥法制備。采用O/O乳化法制備微球，溶解聚合物和非那雄胺的乳劑分散相(內(nèi)相)有機溶媒可采用丙酮、乙腈或醋酸乙酯，連續(xù)相可采用礦油，如液狀石蠟，硅油或二甲硅油。植物油如花生油，棉子油，麻油，茶油和豆油。為了使分散相能更好的分散在連續(xù)相中，后者應加入低HLB值非離子表面活性劑，其HLB值在1.8～4.8之間為宜。優(yōu)選Span80或Span85。微球制備可將分散相滴入攪拌著的連續(xù)相中。上述系統(tǒng)在一恒定溫度中，在恒定攪拌速度下，分散相中有機溶媒逐漸蒸發(fā)，載藥微球析出。混懸液離心分離，去上清液，微球經(jīng)濾膜減壓分離而得。用己烷或環(huán)己烷少量多次淋洗，去微球表面油跡。室溫減壓干燥或冷凍干燥而得。
非那雄胺微球也可采用噴霧干燥法制備。采用噴霧干燥制備微球時，生物降解聚合物被有機溶媒溶解后，加入非那雄胺或其類似物，攪拌使其成澄清溶液，過濾，濾液經(jīng)噴霧干燥制成微球。分散相有機溶媒可采用二氯甲烷，氯仿，醋酸乙酯，二氧六環(huán)，丙酮，四氫呋喃中的一種或其任意混合物。
本發(fā)明所述的非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球長效制劑是將制好的微球無菌粉末混懸于0.3-0.6％羧甲基纖維素鈉水溶液中，振搖均勻，作皮下注射。該新劑型延長了藥物作用時間，減少了用藥次數(shù)，提高了藥物生物利用度。
以下通過實施例進一步說明本發(fā)明所述的非那雄胺微球及其制備方法，釋藥模式和對動物前列腺增生的治療作用。


圖1為非那雄胺微球體外累計釋藥曲線圖。
具體實施例方式
實施例1將100mg聚丙交酯溶于0.6ml二氯甲烷中，加入100mg非那雄胺，攪拌溶解使成澄清溶液。在一裝有攪拌槳平底燒杯中加入0.5％PVA(05-88)水溶液，恒溫(25℃)，后于攪拌下將上述聚合物溶液滴入其中，以2000rpm攪拌形成乳劑，再加入大量蒸餾水，維持200rpm，使o/w乳劑中有機溶劑逐漸蒸干。整個過程不斷抽樣鏡檢，觀察多階段微球形成過程。
上述溶液離心分離，傾去上清液，于濾膜上減壓收集微球，用蒸餾水少量多次洗滌，微球減壓室溫干燥即得。
實施例2將160mg聚DL丙交酯-乙交酯溶于醋酸乙酯中，加入40mg非那雄胺，攪拌成澄明溶液。在一裝有攪拌槳平底燒杯中加入分散相體積10倍的1％PVPk-30水溶液，恒溫(25℃)后，攪拌下將上述聚合物溶液滴入其中，以2000rpm攪拌形成乳劑，再加入大量蒸餾水，維持200rpm轉(zhuǎn)速攪拌4小時，使o/w乳劑中有機溶媒逐漸蒸干。整個過程不斷抽樣鏡檢，觀察多階段微球形成過程。
上述溶液離心分離，傾去上清液，于濾膜上減壓收集微球，用蒸餾水少量多次洗滌，微球減壓室溫干燥即得。
實施例3將800mg聚乳酸-羥乙酸溶于2.5ml乙腈中，加入非那雄胺200mg。攪拌使其溶解。作為O1相；在30ml液狀石蠟中，加入1.5％Span85，混勻后作為O2相。在3000rpm轉(zhuǎn)速下，將O1滴入O2中，使成O1/O2乳劑?？刂葡到y(tǒng)溫度，恒溫在30℃，使分散相中有機溶媒逐漸蒸發(fā)至干，混懸液進行離心分離，去上清液，微球用己烷少量多次洗凈，于室溫減壓干燥即得。
實施例4將聚DL丙交酯-乙交酯10g溶解于二氯甲烷中，加入非那雄胺2.0g，攪拌使其溶解。過濾，濾液待用。噴霧干燥過程調(diào)節(jié)進口氣流溫度40±2℃，出口溫度35±1℃，聚合物溶液進料速度2.5ml/min。收集器中微球呈白色粉末狀，粒徑在3-10μm間。
實施例5將157mg聚乳酸羥乙酸溶于0.5ml二氯甲烷中，加入38mg非那雄胺，攪拌溶解使成澄明溶液。在一裝有攪拌槳平底燒杯中加入0.5％PVA(05-88)水溶液，恒溫(25℃)，后于攪拌下將上述聚合物溶液滴入其中，以2000rpm攪拌形成乳劑，再加入大量蒸餾水，維持200rpm，使o/w乳劑中有機溶劑逐漸蒸干。整個過程不斷抽樣鏡檢，觀察多階段微球形成過程。
上述溶液離心分離，傾去上清液，于濾膜上減壓收集微球，用蒸餾水少量多次洗滌，微球減壓室溫干燥即得。
實施例6取例1微球(粒徑20-130μm)39.1mg，置于100ml含增溶劑的PH7.4PBS鹽水瓶中，于37℃搖床中，以110rpm轉(zhuǎn)速振搖，定時取樣檢測不同時間藥物累計釋放率(％)，原瓶中補充同體積介質(zhì)水溶液。其樣品釋藥曲線見表1。
表1.非那雄胺微球體外累計釋藥曲線

由表1制得非那雄胺微球體外累計釋藥曲線圖，見附1所示。
從圖1可見，本發(fā)明制備的非那雄胺微球，釋放呈3相模式。第一相為首日突釋效應，釋藥量為11.1％，第二相在第2-7d之間，微球以較小的釋放速度(1.48％/日)釋放藥物；第三相在第7-27天之間，釋藥以近乎0級模式(r＝0.994)以3.72％/日速度釋藥。本載藥微球與一般微球釋藥相比有以下特點(1)一般載藥微球首日突釋效應往往在20-40％之間，首日較高的突釋劑量對治療并不是有益，相反將導致毒副作用。
(2)對PLGA/PLA微球，由于其本體降解機理，溶出的第一周往往有一釋藥停滯期(lag time)，本發(fā)明通過分子量及聚合物單體篩選，挑出的聚合物一定程度的減少這段時間藥物釋放的停滯狀態(tài)，促進整個過程釋藥的均勻性。
(3)從第7天開始，微球以零級釋放速率(3.72％/日)釋藥，至27天，將絕大多數(shù)藥物均勻釋放完全。
所以，微球的上述釋藥模式能較好的符合治療需要。
實施例7采用實施例1制得的非那雄胺微球進行SD大鼠前列腺增生治療試驗。試驗分丙酸睪丸酮模型組，非那雄胺片口服組和非那雄胺微球組，每組動物均為6只。丙酸睪丸組采用2.5mg/kg皮下注射給藥，非那雄胺組采用2.5mg/kg口服灌胃；上述兩組每日給藥，連續(xù)28天。非那雄胺微球每28日給藥一次。采用總劑量(2.5mg/kg×28)的80％，即2.5×28×0.8/微球藥物含量，皮下注射給藥。各組于28日處死動物，解剖，觀察前列腺重量，前列腺體積，計算前列腺指數(shù)和前列腺組織含水量，其試驗結(jié)果如下表2.SD大鼠藥效學試驗結(jié)果

注(*)表示P＜0.05，(**)表示P＜0.01上述試驗結(jié)果表明，非那雄胺微球?qū)Ρ岵G酮引起的大鼠前列腺增生有明顯的抑制作用。
權(quán)利要求
1.一種非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球，其特征在于它包含下列組分占微球重量5～80％的非那雄胺及其類似物和占微球重量95～20％的生物降解聚合物。
2.按照權(quán)利要求1所述的注射用緩釋微球，其中生物降解聚合物的分子量為5000～300000道爾頓。
3.按照權(quán)利要求1所述的注射用緩釋微球，其中非那雄胺類似物包括依立雄胺Epristeride和度他雄胺Dutasteride。
4.按照權(quán)利要求1至3中任一權(quán)利要求所述的注射用緩釋微球，其中生物降解聚合物選自聚丙交酯-乙交酯，聚丙交酯，聚羥基乙酸，聚β-羥基丁酸酯，聚乳酸羥乙酸，聚原酸酯，聚己內(nèi)酯，聚酸酐，聚磷酸酯，聚磷腈，聚氰基丙烯酸酯，聚酰胺中的一種或任意混合物。
5.按照權(quán)利要求4所述的注射用緩釋微球，其中生物降解聚合物選自聚丙交酯-乙交酯，聚丙交酯或聚乳酸羥乙酸。
6.按照權(quán)利要求5所述的注射用緩釋微球，其中聚丙交酯-乙交酯，聚丙交酯，聚乳酸羥乙酸的分子量為10000～30000道爾頓。
7.按照權(quán)利要求5或6所述的注射用緩釋微球，其聚丙交酯-乙交酯或聚乳酸羥乙酸兩聚合單體克分子比為15∶85～85∶15。
8.按照權(quán)利要求7所述的注射用緩釋微球，其聚丙交酯-乙交酯或聚乳酸羥乙酸兩聚合單體克分子比為25∶75～75∶25。
9.權(quán)利要求1的注射用緩釋微球的制備方法，采用乳化分散-液中干燥法制備，包括下列步驟a)將生物降解聚合物和藥物溶解在合適有機溶媒中后，作為分散相；b)將分散相滴入不斷攪拌的加有乳化劑的連續(xù)相中，有機溶媒逐漸揮發(fā)，析出微球；c)微球混懸液經(jīng)離心分離；d)經(jīng)減壓干燥或冷凍干燥制得微球；e)微球無菌粉末混懸于藥學可接受溶液中，搖勻即得。
10.按照權(quán)利要求9的制備方法，其中步驟b)的攪拌速度為500～8000rpm。
11.按照權(quán)利要求9的制備方法，其中乳化分散-液中干燥法包括油/水乳化分散法或油/油乳化分散法。
12.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/水乳化分散法中，分散相中有機溶媒為二氯甲烷、氯仿、醋酸乙酯、乙腈、丙酮、甲醇、乙醇、DMSO和苯的單一組分或其任意混合物。
13.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/水乳化分散法中，連續(xù)相介質(zhì)為水。
14.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/水乳化分散法中，乳化劑為PVPk-30、明膠、CMC-Na、低黏度HPMC、HPC或PVA的單一組分或其任意混合物。
15.按照權(quán)利要求14的制備方法，其中乳化劑為PVPk-30或PVA。
16.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/油乳化分散法中，分散相有機溶媒為丙酮，乙腈或醋酸乙酯。
17.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/油乳化分散法中，連續(xù)相為礦油或植物油。
18.按照權(quán)利要求17的制備方法，其中礦油為液態(tài)石蠟，硅油或二甲硅油。
19.按照權(quán)利要求17的制備方法，其中植物油為花生油，棉子油，麻油，茶油或豆油。
20.按照權(quán)利要求11的制備方法，其中油/油乳化分散法中，乳化劑為HLB值1.8-4.8之間的非離子表面活性劑。
21.按照權(quán)利要求20的制備方法，所述的非離子表面活性劑為Span80或Span85。
22.權(quán)利要求1的注射用緩釋微球的制備方法，采用噴霧干燥法制備，生物降解聚合物被有機溶媒溶解后，加入非那雄胺或其類似物，攪拌使其成澄清溶液，過濾，濾液經(jīng)噴霧干燥制成微球，微球無菌粉末混懸于藥學可接受載體中，搖勻即得。
23.按照權(quán)利要求22的制備方法，所述的有機溶媒為二氯甲烷、氯仿、醋酸乙酯、二氧乙環(huán)、丙酮、四氫呋喃中的一種或其任意混合物。
24.權(quán)利要求1的注射用緩釋微球用于制備治療前列腺增生的長效制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了非那雄胺及其類似物的注射用緩釋微球，其制備方法及其應用。該注射用緩釋微球包含占微球重量5～80％的非那雄胺及其類似物和占微球重量95～20％生物降解聚合物。制備方法可采用乳化分散法(油/水法或油/油法)－液中干燥法，也可采用噴霧干燥法制備。該新劑型延長了藥物作用時間，減少了用藥次數(shù)，提高了藥物生物利用度。
文檔編號A61P13/08GK1965839SQ20051011038
公開日2007年5月23日 申請日期2005年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月15日
發(fā)明者肖莉莉, 陳慶華, 包泳初, 潘峰, 曹霖, 朱焰, 謝淑武 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院