專利名稱：重癥急性呼吸綜合癥(sars)的治療的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及膠原凝集素(collectin)和/或纖維膠凝蛋白(ficolin)的亞單位和寡聚物諸如甘露聚糖-結(jié)合凝集素(mannan-binding lectin)(MBL)在預(yù)防和/或治療個(gè)體中的重癥急性呼吸綜合征(Severe Acute RespiratorySyndrome)(SARS)中的用途。
SARS感染表現(xiàn)高熱，干咳，肌痛(肌肉疼痛)和咽喉痛的癥狀。大多數(shù)患有SARS的個(gè)體發(fā)展成最終需要呼吸機(jī)支持的呼吸困難和嚴(yán)重的血小板減少癥。5-10％患有SARS的個(gè)體最終死于這種疾病。
SARS的病因還不知道。推測可能是由一種病毒引起的，其中所提到的病毒包括冠狀病毒(coronavirus)和副粘病毒(paramyxovirus)。
在暴露后2-14天SARS癥狀開始出現(xiàn)。
發(fā)明概述本發(fā)明建議使用膠原凝集素和/或纖維膠凝蛋白預(yù)防和/或治療重癥急性呼吸綜合征。
所有的膠原凝集素都表現(xiàn)出下列結(jié)構(gòu)特征它們具有能形成鏈內(nèi)二硫鍵的N-末端半胱氨酸富集區(qū)，緊接著是類膠原區(qū)，α-螺旋盤旋區(qū)(α-helicalcoiled-coil region)和最后的C型凝集素域即模式識(shí)別區(qū)，也稱糖識(shí)別域(carbohydrate recognition domain)(CRD)。因?yàn)槟z原和凝集素的存在所以得名膠原凝集素。α-螺旋盤旋區(qū)啟動(dòng)單個(gè)多肽的三聚化形成膠原三螺旋，因此產(chǎn)生各自由三個(gè)單獨(dú)的多肽組成的凝集素亞單位，而N-末端區(qū)域介導(dǎo)亞單位寡聚物的形成。不同的膠原凝集素都表現(xiàn)出特征性的高級(jí)結(jié)構(gòu)，比較常見地是亞單位四聚物或亞單位六聚物。盡管每一個(gè)CRD對(duì)糖的固有親和力相對(duì)較低，大量的結(jié)合域(binding domain)的組合(grouping)使膠原凝集素能夠以較高的親和力結(jié)合到微生物細(xì)胞壁上。
發(fā)現(xiàn)在種系發(fā)生和功能方面，蛋白中C-類型的CRD都廣泛存在。不同膠原凝集素的不同CRD使他們能夠識(shí)別暴露在不同微生物表面的一定范圍內(nèi)不同微生物表面成分。末端CRD以這樣一種方式分布，使得呈遞結(jié)合位點(diǎn)的所有三個(gè)結(jié)構(gòu)域靶表面有大約53的間隔(Sheriff et al.，1994；Weis&Drickamer，1994)?！澳Ｊ阶R(shí)別”的這種特性進(jìn)一步地促進(jìn)與微生物表面的選擇性結(jié)合。膠原區(qū)域或可能是膠原凝集素的N末端尾能夠被吞噬細(xì)胞表面的特異性受體識(shí)別，并且是結(jié)合蛋白酶的位點(diǎn)，CRD域與靶一結(jié)合，所述蛋白酶就被活化而啟動(dòng)補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)。
纖維膠凝蛋白如MBL一樣是包含類膠原域的凝集素。然而與MBL不同的是纖維膠凝蛋白具有與纖維蛋白原β-和γ-鏈相似的類纖維蛋白原域。纖維膠凝蛋白也形成結(jié)構(gòu)亞單位的寡聚物，每個(gè)亞單位由三條相同的35kDa多肽組成。每個(gè)亞單位由半胱氨酸富集的氨基末端，Gly-Xaa-Yaa三聯(lián)體序列(其中Xaa和Yaa代表任何氨基酸)串聯(lián)重復(fù)組成的類膠原域，頸區(qū)和類纖維蛋白原域組成。纖維膠凝蛋白的寡聚物包含兩個(gè)或更多個(gè)亞單位，具體已經(jīng)觀察到纖維膠凝蛋白的四聚體形式。
一些纖維膠凝蛋白以基本上與MBL類似的方式觸發(fā)補(bǔ)體系統(tǒng)的激活。補(bǔ)體系統(tǒng)的這種觸發(fā)導(dǎo)致上述的新絲氨酸蛋白酶(MASPs)的活化。
幾種凝集素的類纖維蛋白域具有與包含MBL的C類型凝集素的CRD類似的功能，因此作為模式識(shí)別受體起作用以區(qū)別病原菌與自身。
血清纖維膠凝蛋白對(duì)GlcNAc(N-乙酰葡糖胺)，彈性蛋白或GalNAc(N-乙酰半乳糖胺)具有共同的結(jié)合特異性。類纖維蛋白域負(fù)責(zé)結(jié)合糖。在人血清中已經(jīng)鑒定出兩種類型的纖維膠凝蛋白，稱為L-纖維膠凝蛋白(P35，纖維膠凝蛋白L，纖維膠凝蛋白2或hucolin)和H-纖維膠凝蛋白(Hakata抗原，纖維膠凝蛋白2或不耐熱的b2-巨糖蛋白)，兩種都具有凝集素活性。L-纖維膠凝蛋白識(shí)別GlcNAc，H-纖維膠凝蛋白識(shí)別GalNAc。認(rèn)為另一種稱為M-纖維膠凝蛋白(P35相關(guān)蛋白，纖維膠凝蛋白1，纖維膠凝蛋白A)的纖維膠凝蛋白不是蛋白，在白細(xì)胞和肺中發(fā)現(xiàn)了它。L-纖維膠凝蛋白和H-纖維膠凝蛋白活化與MASP相關(guān)的凝集素-補(bǔ)體路徑。M-纖維膠凝蛋白，L-纖維膠凝蛋白和H-纖維膠凝蛋白具有不依賴鈣的凝集素活性。
甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)與甘露糖-結(jié)合凝集素、甘露聚糖-結(jié)合蛋白或甘露糖-結(jié)合蛋白(MBP)同義，屬于C型凝集素亞組，術(shù)語稱為膠原凝集素，因?yàn)檫@些可溶性蛋白由呈現(xiàn)三個(gè)連接到膠原莖2的CRD的亞單位組成。MBL與許多微生物呈遞的糖作用，積累的證據(jù)表明它在先天免疫防御方面起重要作用3。當(dāng)與糖結(jié)合時(shí)，MBL能夠活化補(bǔ)體系統(tǒng)。
可以通過三條路徑活化補(bǔ)體系統(tǒng)經(jīng)典路徑，旁路途徑和新描述的第三條路徑，即由MBL與微生物呈遞的糖結(jié)合而啟動(dòng)的甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)路徑。旁路和MBL路徑中的組分是先天免疫防御的部分，也稱為天然或非克隆性免疫防御的一部分，而經(jīng)典路徑涉及與特異性免疫防御抗體的協(xié)同作用4。
人MBL蛋白由多達(dá)18個(gè)相同的32kDa的多肽鏈組成27，每一條多肽鏈包含含有三個(gè)半胱氨酸殘基的21個(gè)氨基酸短N(yùn)-末端片段，緊接著是7個(gè)重復(fù)的膠原基序Gly-X-Y，其被一個(gè)谷氨酰胺中斷后接著又是另外的12個(gè)Gly-X-Y重復(fù)。由34個(gè)殘基組成的小“頸區(qū)”將分子的93個(gè)氨基酸的C-末端Ca2+依賴凝集素域與膠原部分連接起來28。
三個(gè)多肽鏈的膠原區(qū)結(jié)合形成通過二硫鍵共價(jià)穩(wěn)定的亞單位。二硫鍵和非共價(jià)作用將各個(gè)亞單位結(jié)合在一起27。
人血清中MBL的濃度主要由遺傳決定，但據(jù)報(bào)道在急性反應(yīng)期會(huì)增加到三倍8。導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的三種突變和啟動(dòng)子區(qū)域中的兩種突變與MBL缺乏相關(guān)9。
許多種寡糖能夠與MBL結(jié)合。因?yàn)橥ǔ１┞队诓溉閯?dòng)物細(xì)胞表面的靶糖密度不夠高，所以MBL通常不能識(shí)別自身的決定簇，但它特別適于與呈現(xiàn)重復(fù)性糖決定簇的微生物細(xì)胞表面發(fā)生相互作用。
因此本發(fā)明的特征在于使用從天然來源或重組技術(shù)得到的物質(zhì)中純化的MBL，或從任何其他合適的產(chǎn)MBL細(xì)胞系得到的MBL來預(yù)防和/或治療SARS。可以在醫(yī)療治療之前或之后給予MBL，持續(xù)任意合適長的時(shí)間。
相信MBL主要通過其調(diào)理活性(使微生物易于被吞噬)而表現(xiàn)出抗SARS活性。這種活性依賴于MBL結(jié)合到微生物表面和C4b，C3b沉積在微生物上之后所發(fā)生的補(bǔ)體活化。MBL也能夠促進(jìn)直接補(bǔ)體介導(dǎo)的微生物殺傷，所述殺傷作用通過補(bǔ)體的末端溶解路徑的活化和細(xì)胞膜中膜攻擊復(fù)合體(MAC)的插入來進(jìn)行。認(rèn)為這一機(jī)理的重要性處于次要地位。
參照本發(fā)明可以預(yù)防性地治療SARS。通過使用MBL進(jìn)行預(yù)防性的治療能夠防止隨后的SARS或降低SARS接觸者的危險(xiǎn)。
本發(fā)明另一方面涉及包含至少一個(gè)甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)亞單位，或至少一種包含至少一個(gè)甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)亞單位的寡聚物的組合物在制備預(yù)防，緩解或治愈個(gè)體中SARS的藥物中的用途，所述個(gè)體中起始MBL血漿水平較低，如血漿水平為0mg/ml，或血漿水平超過10ng/。具體地所述個(gè)體可為遺傳性MBL缺乏(deficiency)或者獲得性MBL缺乏而導(dǎo)致感染危險(xiǎn)性增加的個(gè)體。因此本發(fā)明也涉及患有甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)缺乏，包括任何MBL產(chǎn)生和/或MBL功能中的缺乏的個(gè)體中，具體是那些已經(jīng)患有或被懷疑患有SARS的個(gè)體中SARS的治療。
另一方面還提供了一種估計(jì)個(gè)體中任何SARS嚴(yán)重后果出現(xiàn)概率的方法，所述方法包括檢測個(gè)體血漿或血清中MBL濃度和在已測定的濃度的基礎(chǔ)上估計(jì)概率的步驟。
而且對(duì)被懷疑個(gè)體進(jìn)行基因分型也可以估計(jì)所述概率。
發(fā)明詳述在個(gè)體中，可不依賴個(gè)體血清中膠原凝集素和/或纖維膠凝蛋白的水平，如MBL的水平來預(yù)防和/或治療SARS。
依照本發(fā)明，膠原凝集素可以是任何能夠預(yù)防和/或治療個(gè)體中SARS的膠原凝集素。
因此，膠原凝集素可以選自以下物質(zhì)組成的組MBL(甘露聚糖-結(jié)合凝集素)，SP-A(肺表面活性蛋白A)，SP-D(肺表面活性蛋白D)，BK(或BC，牛膠固素)，CL-L1(Ohtani et al.1999，Molecular cloning of a novel humancollectin from liver(CL-L1)，J.Biol.Chem.27413681-89)，CL-P1(Ohtani et al.2001.The membrane-type collectin CL-P1 is a scavenger receptor on vascularendothelial cells.J.Biol.Chem.27644222-28)和CL-43(膠原凝集素-43)。最優(yōu)選的凝集素是MBL。(Holmskov et al.2003，Annu Rev.Immunol.21547-78)。
在具體優(yōu)選的實(shí)施例中，膠原凝集素具有以下序列之一，所述序列的數(shù)據(jù)庫和登錄號(hào)一并給出。
膠原凝集素1Q9NPY3補(bǔ)體成分Clq受體前體(補(bǔ)體成分l，q亞成分，受體l)(ClqRp)(ClqR(p))(Clq/MBL/SPA受體)(CD93抗原)(CDw93)gi|21759074|sp|Q9NPY3|CD93_HUMAN[21759074]
2BAC05523胎盤膠原凝集素1[小鼠(Mu smusculus)]gi|21901969|dbj|BAC05523.1|[21901969]3AAM3474346-kDa膠原凝集素前體[牛(Bos taurus)]gi|21105687|gb|AAM34743.1|AF509590_1[21105687]4AAM3474246-kDa膠原凝集素前體[牛]gi|21105685|gb|AAM34742.1|AF509589_1[21105685]5XP_139613與膠原凝集素亞家族成員10相似；肝膠原凝集素1，膠原凝集素34[小鼠]gi|20903807|ref|XP_139613.1|[20903807]6XP_123211與膠原凝集素亞家族成員12相似[小鼠]gi|20876566|ref|XP_123211.1|[20876566]7NP_571645類甘露糖結(jié)合凝集素[鮐(Danio rerio)]gi|18858997|ref|NP_571645.1|[18858997]
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gi|71970|pir||LNDGPS[71970]19LNHUPS肺表面活性蛋白A前體(基因組克隆)-人gi|71967|pir||LNHUPS[71967]20A53570膠原凝集素-43-牛gi|1083017|pir||A53570[1083017]21S33603表面活性蛋白D-牛gi|423283|pir|S33603[423283]22AAF28384肺表面活性蛋白A[野豬]gi|6782434|gb|AAF28384.1|AF133668_1[6782434]23AAF22145肺表面活性蛋白D前體；SPD；SP-D；CP4[野豬]gi|6760482|gb|AAF22145.2|AF132496_1[6760482]24P15783肺表面活性相關(guān)蛋白C(SP-C)(肺表面活性相關(guān)蛋白脂質(zhì)SPL(VAL))gi|131422|sp|P15783|PSPC_BOVIN[131422]25P35246肺表面活性相關(guān)蛋白D前體(SP-D)(PSP-D)gi|464485|sp|P35246|PSPD_BOVIN[464485]26P42916
膠原凝集素-43(CL-43)gi|1168967|sp|P42916|CL43_BOVIN[1168967]27CAB56155DMBT1/8kb.2蛋白[人]gi|5912464|emb|CAB56155.1|[5912464]28AAD49696gp-340蛋白變體[人]gi|5733598|gb|AAD49696.1|AF159456_1[5733598]29AAD31380表面活性蛋白D前體[小鼠]gi|4877556|gb|AAD31380.1|AF047742_1[4877556]30B61249肺表面活性蛋白C-狗gi|539712|pir||B61249[539712]31S00609肺表面活性蛋白C-牛gi|89749|pir||S00609[89749]32A43628肺表面活性蛋白A-人(片段)gi|280854|pir||A43628[280854]33AAB48076表面活性蛋白B(SP-B)[穴兔(Oryctolagus cuniculus)]gi|1850933|gb|AAB48076.1|[1850933]
341901176A表面活性蛋白Agi|382753|prf||1901176A[382753]35CAA53510肺表面活性蛋白D[牛]gi|415939|emb|CAA53510.1|[415939]36CAA53511膠原凝集素-43[牛]gi|499385|emb|CAA53511.1|[499385]37CAA46152肺表面活性蛋白D[人]gi|34767|emb|CAA46152.1|[34767]38AAA92788肺表面活性蛋白C[褐家鼠(Rattus norvegicus)]gi|595282|gb|AAA92788.1|[595282]39AAA31468表面活性蛋白A[穴兔]gi|431446|gb|AAA31468.1|[431446]甘露糖結(jié)合凝集素1Q9NPY3補(bǔ)體成分Clq受體前體(補(bǔ)體成分l，q亞成分，受體l)(ClqRp)(ClqR(p))(Clq/MBL/SPA受體)(CD93抗原)(CDw93)gi|21759074|sp|Q9NPY3|CD93_HUMAN[21759074]
2O89103補(bǔ)體成分Clq受體前體(補(bǔ)體成分l，q亞成分，受體l)(ClqRp)(ClqR(p))(Clq/MBL/SPA受體)(CD93抗原)(CD93抗原)(細(xì)胞表面抗原AA4)(淋巴細(xì)胞抗原68)gi|21541998|sp|O89103|CD93_MOUSE[21541998]3P09871補(bǔ)體Cls成分前體(C1酯酶)gi|115205|sp|P09871|ClS_HUMAN[115205]4NP_036204補(bǔ)體成分l，q亞成分，受體l；補(bǔ)體成分Clq受體[人]gi|6912282|ref|NP_036204.1|[6912282]5NP_000233可溶性甘露糖結(jié)合凝集素前體，甘露糖結(jié)合凝集素，甘露糖結(jié)合蛋白，甘露糖結(jié)合凝集素2，可溶型(調(diào)理素缺陷(opsonic defect))，[人]gi|4557739|ref|NP_000233.1|[4557739]6AAM94381凝集素前體[蔥連念珠菌(Zephyranthes candida)]gi|22212748|gb|AAM94381.1|AF527385_1[22212748]7AAH21762甘露糖結(jié)合凝集素，肝(A)[小鼠]gi|18256010|gb|AAH21762.1|[18256010]8AAH10760類似于甘露糖結(jié)合凝集素，血清(C)[小鼠]gi|14789670|gb|AAH10760.1|[14789670]
9P11226甘露糖結(jié)合蛋白C前體(MBP-C)(MBP1)(甘露聚糖結(jié)合蛋白)(甘露糖結(jié)合凝集素)gi|126676|sp|P11226|MABC_HUMAN[126676]10NP_034897甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶2[小鼠]gi|6754642|ref|NP_034897.1|[6754642]11Q9ET61補(bǔ)體成分Clq受體前體(補(bǔ)體成分l，q亞成分，受體l)(ClqRp)(ClqR(p))(Clq/MBL/SPA受體)(CD93抗原)(細(xì)胞表面抗原AA4)gi|21541989|sp|Q9ET61|CD93_RAT[21541989]12NP_006601甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶2，同種型1前體，19kD的MBL相關(guān)血漿蛋白，小MBL相關(guān)蛋白[人]gi|21264363|ref|NP_006601.2|[21264363]13NP_631947甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶2，同種型2前體，19kD的MBL相關(guān)血漿蛋白，小MBL相關(guān)蛋白[人]gi|21264361|ref|NP_631947.1|[21264361]14NP_624302甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶1，同種型2，前體，蛋白酶，絲氨酸，5(甘露糖結(jié)合蛋白相關(guān)的)，甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶1；Ra-反應(yīng)因子絲氨酸蛋白酶p100[人]gi|21264359|ref|NP_624302.1|[21264359]15NP_001870
甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶2，亞型1，前體，蛋白酶，絲氨酸，5(甘露糖結(jié)合蛋白相關(guān))，甘露聚糖結(jié)合型凝集素絲氨酸蛋白酶1；Ra-反應(yīng)因子絲氨酸蛋白酶p100[人]gi|21264357|ref|NP_001870.3|[21264357]16XP_122683類似于甘露糖結(jié)合凝集素，肝(A)[小鼠]gi|20872845|ref|XP_122683.1|[20872845]17AAM21196C-型甘露糖結(jié)合凝集素[鱒魚(Oncorhynchus mykiss)]gi|20385163|gb|AAM21196.1|AF363271_1[20385163]18AAD45377甘露糖結(jié)合凝集素[野豬]gi|5566370|gb|AAD45377.1|AF164576_1[5566370]19NP_034905甘露糖結(jié)合凝集素，肝(A)[小鼠]gi|6754654|ref|NP_034905.1|[6754654]20NP_034906甘露糖結(jié)合凝集素，血清(C)[小鼠]gi|6754656|ref|NP_034906.1|[6754656]21AAL14428樹突細(xì)胞特異性ICAM-3抓取型非整聯(lián)蛋白(grabbing nonintegrin)[猿(Macaca nemestrina)]gi|16118455|gb|AAL14428.1|AF343727_1[16118455]22AAF63470
甘露糖結(jié)合-樣凝集素前體(mannose binding-like lectin precursor)[鮒魚]gi|7542474|gb|AAF63470.1|AF227739_1[7542474]23AAF63469甘露糖結(jié)合-樣凝集素前體[鮐]gi|7542472|gb|AAF63469.1|AF227738_1[7542472]24AAF63468甘露糖結(jié)合-樣凝集素前體[鯉魚]gi|7542470|gb|AAF63468.1|AF227737_1[7542470]25AAF21018甘露糖結(jié)合凝集素2[野豬]gi|6644342|gb|AAF21018.1|AF208528_1[6644342]26AAK30298甘露糖結(jié)合凝集素前體蛋白[原雞]gi|13561409|gb|AAK30298.1|[13561409]27LNMSMC甘露糖結(jié)合凝集素C前體-小鼠gi|7428747|pir||LNMSMC[7428747]28LNMSMA甘露糖結(jié)合凝集素A前體-小鼠gi|625320|pir||LNMSMA[625320]29LNRTMA甘露糖結(jié)合凝集素A前體-大鼠gi|71975|pir||LNRTMA[71975]
30LNRTMC甘露糖結(jié)合凝集素C前體-大鼠gi|71974|pir||LNRTMC[71974]31LNHUMC甘露糖結(jié)合凝集素前體-人gi|71973|pir||LNHUMC[71973]32BAA86864補(bǔ)體Cls[人]gi|6407558|dbj|BAA86864.1|[6407558]33P49329甘露糖特異性凝集素(凝集素(agglutinin))gi|1346426|sp|P49329|LEC_ALOAR[1346426]34CAB56124甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911809|emb|CAB56124.1|[5911809]35CAB56123甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911807|emb|CAB56123.1|[5911807]36CAB56122甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911798|emb|CAB56122.1|[5911798]37CAB56121甘露糖結(jié)合凝集素-人
gi|5911796|emb|CAB56121.1|[5911796]38CAB56045甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911794|emb|CAB56045.1|[5911794]39CAB56120甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911792|emb|CAB56120.1|[5911792]40CAB56044甘露糖結(jié)合凝集素-人gi|5911790|emb|CAB56044.1|[5911790]41AAB53110ClqR(p)[人]gi|2052498|gb|AAB53110.1|[2052498]膠原凝集素優(yōu)選包括膠原凝集素或所述膠原凝集素的變異體或同系物的至少10個(gè)，例如至少12個(gè)，至少15個(gè)，至少20個(gè)，至少25個(gè)，至少30個(gè)，至少35個(gè)，至少40個(gè)，至少50個(gè)的連續(xù)氨基酸殘基。所述變異體或同系物優(yōu)選與膠原凝集素至少70％，例如80％，90％，95％相同。
纖維膠凝蛋白本發(fā)明的纖維膠凝蛋白可以是L-纖維膠凝蛋白，H-纖維膠凝蛋白或M-纖維膠凝蛋白或他們的變異體或同系物。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，纖維膠凝蛋白是L-纖維膠凝蛋白。
在一個(gè)具體優(yōu)選的實(shí)施例中，纖維膠凝蛋白具有下列序列之一，其數(shù)據(jù)庫和登錄號(hào)一并給出。描述了每一個(gè)序列的半胱氨酸富集區(qū)和類膠原區(qū)。
NP_003656.纖維膠凝蛋白3前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域)3(Hakata抗原)[人][gi4504331]90..299/區(qū)_名稱＝″pfam00147，纖維蛋白原_C，纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″90..299/區(qū)_名稱＝″smart00186，F(xiàn)BG纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)；纖維蛋白原β鏈和γ鏈C-末端出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)域，多種纖維蛋白原相關(guān)蛋白，包括腱生蛋白和果蠅糙蛋白(Drosophila scabrous)″1 mdllwilpsl wllllggpac lktqehpscp gpreleaskv vllpscpgap gspgekgapg61 pqgppgppgk mgpkgepgdp vnllrcqegp rncrellsqg atlsgwyhlc lpegralpvf121 cdmdtegggw lvfqrrqdgs vdffrswssy ragfgnqese fwlgnenlhq ltlqgnwelr181 veledfngnr tfahyatfrl lgevdhyqla lgkfsegtag dslslhsgrp fttydadhds241 snsncavivh gawwyascyr snlngryavs daaahkygid wasgrgvghp yrrvrmmlrXP_116792.類似于纖維膠凝蛋白2前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白2)(纖維膠凝蛋白-B)(纖維膠凝蛋白B)(血清凝集素P35)(EBP-37)(Hucolin)(L-纖維膠凝蛋白)[人][gi20477458]91..168/區(qū)_名稱＝″pfam00147，纖維蛋白原C，纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″91..168/區(qū)_名稱＝″smart00186，F(xiàn)BG，纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)；纖維蛋白原β鏈和γ鏈C-末端出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)域，多種纖維蛋白原相關(guān)蛋白，包括腱生蛋白和果蠅糙蛋白(Drosophila scabrous)″1 mgpallalsf lwtmaltedt cpamleyval nsepgmaskn psrrhglsll vvdqgpgarg61 vrtdqgpsga dpgslelhge cpifpseqvi lthhnnypfs tedqdndrda encavhyqga121 wwyaschlsh lngvylggar dsftnginwk sgkgnnysyk vsemkvrptO00602.纖維膠凝蛋白1前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白1)(纖維膠凝蛋白-A)(纖維膠凝蛋白A)(M-纖維膠凝蛋白)[gi20455484]1..29/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″30..326/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白1.″55..93/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″133/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″沖突″/注釋＝″T-＞N(見參考文獻(xiàn)1).″144..290/基因＝″FCN1″區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″287/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″″沖突/注釋＝″N-＞S(見參考文獻(xiàn)1).″305/基因＝″FCN1″/位點(diǎn)_類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在).″1 melsgatmar glavllvlfl hiknlpaqaa dtcpevkvvg legsdkltil rgcpglpgap61 gpkgeagvig ergerglpga pgkagpvgpk gdrgekgmrg ekgdagqsqs catgprnckd121 lldrgyflsg whtiylpdcr pltvlcdmdt dgggwtvfqr rmdgsvdfyr dwaaykqgfg181 sqlgefwlgn dnihaltaqg sselrvdlvd fegnhqfaky ksfkvadeae kyklvlgafv241 ggsagnsltg hnnnffstkd qdndvsssnc aekfqgawwy adchasnlng lylmgphesy301 anginwsaak gykysykvse mkvrpa//O75636.纖維膠凝蛋白3前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白3)(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素3P35)(Hakata抗原)[gi13124185]1..21/基因＝″FCN3″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″22..299/基因＝″FCN3″/區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白3.″48..80/基因＝″FCN3″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″50/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″53/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″59/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″65基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″68/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″77/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″羥基化″119..265/基因＝″FCN3″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″纖維蛋白原C-末端″
189/基因＝″FCN3″/位點(diǎn)_類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在).″1 mdllwilpsl wllllggpac lktqehpscp gpreleaskv vllpscpgap gspgekgapg61 pqgppgppgk mgpkgepgdp vnllrcqegp rncrellsqg atlsgwyhlc lpegralpvf121 cdmdtegggw lvfqrrqdgs vdffrswssy ragfgnqese fwlgnenlhq ltlqgnwelr181 veledfngnr tfahyatfrl lgevdhyqla lgkfsegtag dslslhsgrp fttydadhds241 snsncavivh gawwyascyr snlngryavs daaahkygid wasgrgvghp yrrvrmmlrXP_130120.類似于纖維膠凝蛋白2前體類似物(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白2)(纖維膠凝蛋白-B)(纖維膠凝蛋白B)(血清凝集素P35)(EBP-37)(Hucolin)[小鼠][gi20823464]59..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″59..89/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″60..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″60..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″60..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″60..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″60..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″61..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db xref＝″CDDpfam01391″61..95/區(qū)名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″
61..95/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20份)″/注釋＝″膠原″/db xref＝″CDDpfam01391″103..312//區(qū)_名稱＝纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″/注釋＝″纖維蛋白原_C″/db xref＝″CDDpfam00147″103..312/區(qū)_名稱＝“纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)″/注釋＝″FBG″/db xref＝″CDDsmart00186″1 malgsaalfv ltltvhaagt cpelkvldle gykqltilqg cpglpgaagp kgeagakgdr61 gesglpgipg kegptgpkgn qgekgirgek gdsgpsqsca tgprtckell tqghfltgwy121 tiylpdcrpl tvlcdmdtdg ggwtvfqrrl dgsvdffrdw tsykrgfgsq lgefwlgndn181 ihalttqgts elrvdlsdfe gkhdfakyss fqiqgeaeky klilgnflgg gagdsltphn241 nrlfstkdqd ndgstsscam gyhgawwysq chtsnlngly lrgphksyan gvnwkswrgy301 nysckvsemk vrliNP_056654.纖維膠凝蛋白2同種型d前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2(hucolin)；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2；hucolin[人][gi8051590]39..95/區(qū)_名稱＝″類膠原域″1 meldravgvl gaatlllsfl gmawalqaad tcpevkmvgl egsdkltilr gcpglpgapg61 dkgeagtngk rgergppgpp gkagppgpng apgepqpclt gdNP_056653.纖維膠凝蛋白2同種型c前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2(hucolin)；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2；hucolin[人][gi8051588]39..95/區(qū)_名稱＝″類膠原域″102..143/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″/注釋＝″纖維蛋白原C″，/db_xref＝″CDDpfam00147″
102..143/區(qū)_名稱＝“纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)″/注釋＝″FBG″/db_xref＝″CDDsmart00186″1 meldravgvl gaatlllsfl gmawalqaad tcpevkmvgl egsdkltilr gcpglpgapg61 dkgeagtngk rgergppgpp gkagppgpng apgepqpclt gprtckdlld rghflsgwht121 iylpdcrplt vlcdmdtdgg gwtvsvglgr ggqpgspggq aahlvgehtl efsillvgds181 qrNP_056652.纖維膠凝蛋白2同種型b前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2(hucolin)；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2；hucolin[人][gi8051586]信號(hào)肽1..25成熟肽26..27560..275/區(qū)_名稱＝″FBG域″/注釋＝″纖維蛋白原β和γ同系物″64..275/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)″/注釋＝″FBG″/db_xref＝″CDDsmart00186″64..274/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″/注釋＝″纖維蛋白原_C″/db_xref＝″CDDpfam00147″1 meldravgvl gaatlllsfl gmawalqaad tcpgergppg ppgkagppgp ngapgepqpc61 ltgprtckdl ldrghflsgw htiylpdcrp ltvlcdmdtd gggwtvfqrr vdgsvdfyrd121 watykqgfgs rlgefwlgnd nihaltaqgt selrvdlvdf ednyqfakyr sfkvadeaek181 ynlvlgafve gsagdsltfh nnqsfstkdq dndlntgnca vmfqgawwyk nchvsnlngr241 ylrgthgsfa nginwksgkg ynysykvsem kvrpaNP_001994.纖維膠凝蛋白1前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域)1[人][gi8051584]信號(hào)肽1..27成熟肽28..326
40..108/區(qū)_名稱＝″類膠原域″50..105/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″51..107/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″52..106/區(qū)_名稱＝″膠原三螺旋重復(fù)(20次)″/注釋＝″膠原″/db_xref＝″CDDpfam01391″115..326/區(qū)_名稱＝″FBG域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物″115..326/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)″/注釋＝″FBG″/db_xref＝″CDDsmart00186″115..325/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″/注釋＝″纖維蛋白原_C″/db_xref＝″CDDpfam00147″variation315/db_xref＝″dbSNP1128428″variation316/db_xref＝″dbSNP1128429″variation317/db_xref＝″dbSNP1128430″1 melsgatmar glavllvlfl hiknlpaqaa dtcpevkvvg legsdkltil rgcpglpgap61 gpkgeagvig ergerglpga pgkagpvgpk gdrgekgmrg ekgdagqsqs catgprnckd121 lldrgyflsg whtiylpdcr pltvlcdmdt dgggwtvfqr rmdgsvdfyr dwaaykqgfg181 sqlgefwlgn dnihaltaqg sselrvdlvd fegnhqfaky ksfkvadeae kyklvlgafv241 ggsagnsltg hnnnffstkd qdndvsssnc aekfqgawwy adchasnlng lylmgphesy301 anginwsaak gykysykvse mkvrpaNP_004099.纖維膠凝蛋白2亞型a前體；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2(hucolin)；纖維膠凝蛋白(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的凝集素)2；hucolin[人][gi4758348]信號(hào)肽1..25成熟肽26..31339..95/區(qū)_名稱＝″類膠原域″98..313/區(qū)_名稱＝″FBG域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物″115..326/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原相關(guān)結(jié)構(gòu)域(FReDs)″/注釋＝″FBG″/db_xref＝″CDDsmart00186″102..312/區(qū)_名稱＝″纖維蛋白原β鏈和γ鏈，C-末端球狀結(jié)構(gòu)域″/注釋＝″纖維蛋白原_C″db_xref＝″CDDpfam001471 meldravgvl gaatlllsfl gmawalqaad tcpevkmvgl egsdkltilr gcpglpgapg61 dkgeagtngk rgergppgpp gkagppgpng apgepqpclt gprtckdlld rghflsgwht121 iylpdcrplt vlcdmdtdgg gwtvfqrrvd gsvdfyrdwa tykqgfgsrl gefwlgndni181 haltaqgtse lrvdlvdfed nyqfakyrsf kvadeaekyn lvlgafvegs agdsltfhnn241 qsfstkdqdn dlntgncavm fqgawwyknc hvsnlngryl rgthgsfang inwksgkgyn301 ysykvsemkv rpaQ9WTS8.纖維膠凝蛋白1前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白1)(纖維膠凝蛋白-A)(纖維膠凝蛋白A)(M-纖維膠凝蛋白)[gi13124116]1..22/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″23..335/基因＝″FCN1″//區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白1.″50..88/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″152..298/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″271/基因＝″FCN1″/位點(diǎn)-類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在).″1 mwwpmlwafp vllclcssqa lgqesgacpd vkivglgaqd kvaviqscps fpgppgpkge61 pgspagrger glqgspgkmg ppgskgepgt mgppgvkgek gergtasplg qkelgdalcr121 rgprsckdll trgifltgwy tiylpdcrpl tvlcdmdvdg ggwtvfqrrv dgsinfyrdw181 dsykrgfgnl gtefwlgndy lhlltangnq elrvdlrefq gqtsfakyss fqvsgeqeky241 kltlgqfleg tagdsltkhn nmafsthdqd ndtnggknca alfhgawwyh dchqsnlngr301 ylpgshesya dginwlsgrg hrysykvaem kirasQ15485.纖維膠凝蛋白2前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白2)(纖維膠凝蛋白-B)(纖維膠凝蛋白B)(血清凝集素P35)(EBP-37)(Hucolin)(L-纖維膠凝蛋白)[gi13124203]1..25/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″26..313/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白2″54..92/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″131..277/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″240/基因＝″FCN2″/位點(diǎn)/類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在).″300/基因＝″FCN2″/位點(diǎn)/類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在).″1 meldravgvl gaatlllsfl gmawalqaad tcpevkmvgl egsdkltilr gcpglpgapg61 dkgeagtngk rgergppgpp gkagppgpng apgepqpclt gprtckdlld rghflsgwht121 iylpdcrplt vlcdmdtdgg gwtvfqrrvd gsvdfyrdwa tykqgfgsrl gefwlgndni181 haltaqgtse lrvdlvdfed nyqfakyrsf kvadeaekyn lvlgafvegs agdsltfhnn241 qsfstkdqdn dlntgncavm fqgawwyknc hvsnlngryl rgthgsfang inwksgkgyn301 ysykvsemkv rpaO70497.纖維膠凝蛋白2前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白2)(纖維膠凝蛋白-B)(纖維膠凝蛋白B)(血清凝集素P35)(EBP-37)(Hucolin)(L-纖維膠凝蛋白)[gi13124181]＜1..15/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″16..＞306/基因＝″FCN2″/＝區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白2″41..79/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″130..276/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″299/基因＝″FCN2″/位點(diǎn)類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在)1 lgsaalfvlt ltvhaagtcp elkvldlegy kqltilqgcp glpgaagpkg eagakgdrge61 sglpgipgke gptgpkgnqg ekgirgekgd sgpsqscatg prtckelltq ghfltgwyti121 ylpdcrpmtv lcdmdtdggg wtvfqrrldg svdffrdwts ykrgfgsqlg efwlgndnih
181 alttqgtsel rvdlsdfegk hdfakyssfq iqgeaekykl ilgnflggga gdsltphnnr241 lfstkdqdnd gstsscamgy hgawwysqch tsnlnglylr gphksyangv nwkswrgyny301 sckvseO70165.纖維膠凝蛋白1前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白1)(纖維膠凝蛋白-A)(纖維膠凝蛋白A)(M-纖維膠凝蛋白)[gi13124179]1..22/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″23..334/基因＝″FCN1″∧＝區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白1″50..88/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″152..298/基因＝″FCN1″/區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″261/基因＝″FCN1″/位點(diǎn)/類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在)″1 mqwptlwafs gllclcpsqa lgqergacpd vkvvglgaqd kvvviqscpg fpgppgpkge61 pgspagrger gfqgspgkmg pagskgepgt mgppgvkgek gdtgaapslg ekelgdtlcq121 rgprsckdll trgifltgwy tihlpdcrpl tvlcdmdvdg ggwtvfqrrv dgsidffrdw181 dsykrgfgnl gtefwlgndy lhlltangnq elrvdlqdfq gkgsyakyss fqvseeqeky241 kltlgqfleg tagdsltkhn nmsftthdqd ndansmncaa lfhgawwyhn chqsnlngry301 lsgshesyad ginwgtgqgh hysykvaemk irasP57756.纖維膠凝蛋白2前體(包含膠原/纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域的蛋白2)(纖維膠凝蛋白-B)(纖維膠凝蛋白B)(血清凝集素P35)(EBP-37)(Hucolin)[gi13124114]1..22/″FCN2″/區(qū)_名稱＝″信號(hào)″/注釋＝″潛在″23..319/基因＝″FCN2″/＝區(qū)_名稱＝″成熟鏈″/注釋＝″纖維膠凝蛋白2″48..86/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″137..283/基因＝″FCN2″/區(qū)_名稱＝″域/注釋＝″纖維蛋白原C-末端.″306/基因＝″FCN2″/位點(diǎn)/類型＝″糖基化″/注釋＝″N-連接(GLCNAC...)(潛在)
1 mvlgsaalfv lslcvteltl haadtcpevk vldlegsnkl tilqgcpglp galgpkgeag61 akgdrgesgl pghpgkagpt gpkgdrgekg vrgekgdtgp sqscatgprt ckelltrgyf121 ltgwytiylp dcrpltvlcd mdtdgggwtv fqrridgtvd ffrdwtsykq gfgsqlgefw181 lgndnihalt tqgtnelrvd ladfdgnhdf akyssfqiqg eaekyklilg nflgggagds241 ltsqnnmlfs tkdqdndqgs sncavryhga wwysdchtsn lnglylrglh ksyangvnwk301 swkgynysyk vsemkvrliJC5980.纖維膠凝蛋白-A前體-小鼠e[gi7513652]1..21/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″信號(hào)序列″50..64/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″68..106/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″123..334區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物，#標(biāo)記為FBG″1 mqwptlwafs gllclcpsqa lgqergacpd vkvvglgaqd kvvviqscpg fpgppgpkge61 pgspagrger gfqgspgkmg pagskgepgt mgppgvkgek gdtgaapslg ekelgdtlcq121 rgprsckdll trgifltgwy tihlpdcrpl tvlcdmdvdg ggwtvfqrrv dgsidffrdw181 dsykrgfgnl gtefwlgndy lhlltangnq elrvdlqdfq gkgsyakyss fqvseeqeky241 kltlgqfleg tagdsltkhn nmsftthdqd ndansmncaa lfhgawwyhn chqsnlngry301 lsgshesyad ginwgtgqgh hysykvaemk irasS61517.纖維膠凝蛋白-1前體-人[gi2135116]1..326/注釋＝″36K HLA-交叉血漿反應(yīng)蛋白；hucolin，35K″1..22/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″信號(hào)序列″52..108/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″115..326/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物，#標(biāo)記為FBG″305/位點(diǎn)/類型＝″結(jié)合″/注釋＝″糖類(Asn)(共價(jià))″1 melsgatmar glavllvlfl hiknlpaqaa dtcpevkvvg legsdkltil rgcpglpgap61 gpkgeagvig ergerglpga pgkagpvgpk gdrgekgmrg ekgdagqsqs catgprnckd
121 lldrgyflsg whniylpdcr pltvlcdmdt dgggwtvfqr rmdgsvdfyr dwaaykqgfg181 sqlgefwlgn dnihaltaqg sselrvdlvd fegnhqfaky ksfkvadeae kyklvlgafv241 ggsagnsltg hnnnffstkd qdndvsssnc aekfqgawwy adchasslng lylmgphesy301 anginwsaak gykysykvse mkvrpaA47172.轉(zhuǎn)化生長因子β1-結(jié)合蛋白同系物纖維膠凝蛋白α-豬[gi423206]112..323/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物，#標(biāo)記為FBG″1 mdtrgvaaam rplvllvafl ctaapaldtc pevkvvgleg sdklsilrgc pglpgaagpk61 geagasgpkg gqgppgapge pgppgpkgdr gekgepgpkg esweteqclt gprtckellt121 rghilsgwht iylpdcqplt vlcdmdtdgg gwtvfqrrsd gsvdfyrdwa aykrgfgsql181 gefwlgndhi haltaqgtne lrvdlvdfeg nhqfakyrsf qvadeaekym lvlgafvegn241 agdsltshnn slfttkdqdn dqyasncavl yqgawwynsc hvsnlngryl ggshgsfang301 vnwssgkgyn ysykvsemkf ratJC4942.纖維膠凝蛋白-1前體-人[gi2135117]1..22/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″信號(hào)序列″45..101/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類膠原″108..319/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″纖維蛋白原β/γ同系物，#標(biāo)記為FBG″111..315/區(qū)_名稱＝″域″/注釋＝″類纖維蛋白原″298/位點(diǎn)類型＝″結(jié)合″/注釋＝″糖類(Asn)(共價(jià))″1 marglavllv lflhiknlpa qaadtcpevk vvglegsdkl tilrgcpglp gapgpkgeag61 vigergergl pgapgkagpv gpkgdrgekg mrgekgdagq sqscatgprn ckdildrgyf121 lsgwhtiylp dcrpltvlcd mdtdgggwtv fqrrmdgsvd fyrdwaaykq gfgsqlgefw181 lgndnihalt aqgsselrvd lvdfegnhqf akyksfkvad eaekyklvlg afvggsagns
241 ltghnnnffs tkdqdndvss sncaekfqga wwyadchasn lnglylmgph esyanginws301 aakgykysyk vsemkvrpaAAF44911.標(biāo)記＝BGDS00929...[gi7287873]1 mkscffvlfl wtllfevgqs sphtcpsgsp ngihqlmlpe eepfqvtqck ttardwiviq61 rrldgsvnfn qswfsykdgf gdpngeffig lqklylmtre qphelfiqlk hgpgatvyah121 fddfqvdset elyklervgk ysgtagdslr yhinkrfstf drdndesskn caaehgggww181 fhsclsr纖維膠凝蛋白優(yōu)選包括上述鑒定的纖維膠凝蛋白或所述纖維膠凝蛋白變異體或同系物的至少10個(gè)，例如至少12個(gè)，至少15個(gè)，至少20個(gè)，至少25個(gè)，至少30個(gè)，至少35個(gè)，至少40個(gè)，至少50個(gè)的連續(xù)氨基酸殘基。所述變異體或同系物優(yōu)選與補(bǔ)體活化蛋白至少70％，例如80％，90％，95％相同。
接下來以MBL為例來對(duì)發(fā)明進(jìn)行描述。
給血清MBL水平超過10ng/ml血清的個(gè)體施用MBL可以預(yù)防SARS。血清MBL水平超過50ng/ml血清的個(gè)體，諸如血清MBL水平超過100ng/ml血清和150ng/ml血清的個(gè)體也需要治療。
也可以將MBL和相關(guān)的抗生素，抗病毒制劑或抗真菌劑聯(lián)合給藥這些個(gè)體來治療SARS。
特別是可能患SRAS的高危個(gè)體將從MBL的預(yù)防性治療中獲益。通常暴露于SARS病人的所有個(gè)體都應(yīng)當(dāng)用不依賴于他們自身特異性MBL水平的MBL進(jìn)行治療。其原因在于SARS會(huì)導(dǎo)致MBL消耗，因此能提高初始MBL水平的MBL“增強(qiáng)劑”將能夠降低MBL被消耗到不足水平以下的風(fēng)險(xiǎn)，通過施用重組或天然血漿衍生的MBL可以加強(qiáng)這些病人的免疫防御體系。特別是將MBL給予血清MBL水平超過10ng/ml血清的個(gè)體可以預(yù)防SARS。血清MBL水平超過50ng/ml血清的個(gè)體，例如血清MBL水平超過100ng/ml血清和150ng/ml血清的個(gè)體也需要治療。
本發(fā)明的發(fā)明者也在本文表明，具體地血清MBL水平低于500ng/ml血清的個(gè)體將從MBL治療中獲益。因此，具體是血清MBL水平低于400ng/ml血清的個(gè)體，例如血清MBL水平低于250ng/ml血清的個(gè)體，血清MBL水平低于200ng/ml血清的個(gè)體將會(huì)獲益。
因此，本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例涉及MBL在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療血清MBL水平為10-500ng/ml血清的個(gè)體，諸如血清水平為50-500ng/ml血清的個(gè)體以治療和/或預(yù)防SARS。
為了預(yù)防和/或治療SARS而需要MBL治療的一組個(gè)體是具有不依賴于所述MBL水平的低水平功能性MBL的個(gè)體，而這是因?yàn)橛捎贛BL的一些突變，發(fā)現(xiàn)雖然MBL亞單位和寡聚物在血清中表達(dá)，但是它們的功能性較低。MBL的功能性或功能活性可以用它形成導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)活化的MBL/MASP復(fù)合體的能力來表示。當(dāng)C4被MBL/MASP切割后暴露出活性硫羥酸酯，結(jié)果C4就共價(jià)附著在附近的親核基團(tuán)上。C4b的主要部分因此能夠附著在包被的塑料孔上，用抗-C4b可以進(jìn)行檢測。
用下列方法構(gòu)建用于MBL功能活性的定量TRIFMA1)用溶解在100ml緩沖液中的1mg甘露聚糖包被微滴定孔；2)用Tween-20封閉；3)加入檢測樣本，如稀釋的MBL制備物；4)加入MBL缺乏的血清(這會(huì)導(dǎo)致MBL/MASP復(fù)合體的形成)；也可以在使用前將MBL與MBL缺乏的血清與微量滴定用孔混合；5)加入5mg/ml純化的補(bǔ)體因子C4；6)37℃保溫1小時(shí)；7)加入銪(Eu)標(biāo)記的抗C4抗體；8)加入增強(qiáng)溶液；和9)采用時(shí)間分辨熒光計(jì)(time resolved fluorometry)讀Eu。除了步驟8和9之間以外，其他的每個(gè)步驟之間都在室溫保溫和洗滌所述板。
類似地，也可以采用ELISA估計(jì)MBL功能活性，例如在步驟7中加入生物素標(biāo)記的抗C4抗體；8)中加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素蛋白；9)中加入底物；以及10)中讀出顯色強(qiáng)度。
功能性可以用MBL的特異性活性，諸如每ng MBL中1單位MBL的活性來表示。非功能性MBL定義為特異性活性不到血漿MBL特異性活性50％的MBL，諸如不到血漿MBL特異性活性25％的MBL，其中血漿MBL純化自沒有發(fā)生MBL突變的個(gè)體。具體的參比血漿MDL是血漿庫(pool)LJ6.57 28/04/97。
因此，本發(fā)明也涉及預(yù)防和/或治療在其MBL基因中發(fā)生突變而導(dǎo)致MBL表達(dá)降低和/或非功能性MBL表達(dá)的個(gè)體中的SARS。
具體地，MBL基因的這種突變能夠?qū)е?2位氨基酸(包括MBL前導(dǎo)肽而進(jìn)行的編號(hào))從精氨酸變成半胱氨酸，54位氨基酸從甘氨酸變成天門冬氨酸或75位氨基酸從甘氨酸變成谷氨酸。
MBL基因啟動(dòng)子區(qū)域的突變也能夠?qū)е螺^低的MBL水平。特別是-221位的突變對(duì)MBL的表達(dá)有影響。
在瑞士蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(swiss.prot)中可以找到MBL的序列，登錄號(hào)為11226。
可以使用任何現(xiàn)有MBL來源來制備用于生產(chǎn)MBL藥物的MBL組合物。MBL可以是天然MBL，即在天然宿主生物中產(chǎn)生的MBL，意味著這種MBL是由通常表達(dá)MBL的細(xì)胞生產(chǎn)的。一種制備MBL組合物的常用方法是從人的體液如血清或血漿中提取MBL，但從肝細(xì)胞的培養(yǎng)物中也可以獲得MBL。
另一方面，通過非天然表達(dá)MBL多肽的宿主生物體，例如采用重組技術(shù)可以制備MBL寡聚物。
在第一個(gè)實(shí)施例中MBL來源是血清，其中采用合適的純化方法，例如利用糖衍生化的基質(zhì)(諸如甘露糖或甘露聚糖偶聯(lián)的基質(zhì))的親和層析法從血清，血漿，乳制品，初乳等純化得到了MBL組合物。在WO99/64453中討論了這種方法，其中為了從MBL來源中去除感染因子，在純化過程后進(jìn)行了去除病毒的步驟，這是由于從體液中純化所得的蛋白質(zhì)的一個(gè)主要問題之一就是存在隨所需蛋白一起引入感染因子的危險(xiǎn)。在此引入WO99/64453作為參考。
用來制備MBL藥物的MBL組合物優(yōu)選包含大小分布實(shí)質(zhì)上與血清中MBL的大小分布相同，例如大小分布圖譜與血清中的MBL大小分布圖譜至少50％相同的MBL寡聚物。相同意味著采用SDS-PAGE和/或Western印跡分析時(shí)至少50％的寡聚物具有高于200kDa的表觀分子量。
在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，MBL組合物中的MBL寡聚物的大小分布圖譜與血清中MBL大小分布圖譜至少有75％相同，例如與血清中MBL大小分布圖譜至少有90％相同，更優(yōu)選地與血清中MBL大小分布圖譜至少有95％相同。
當(dāng)從本身含有其他大小分布圖譜的MBL來源中純化MBL時(shí)，優(yōu)選用于從MBL來源中進(jìn)行純化的親和層析有利于純化表觀分子量大于200kDa的寡聚物。使用基本上對(duì)MBL亞單位和/或二聚物沒有親和力的糖衍生化的基質(zhì)可以實(shí)現(xiàn)這一目的。優(yōu)選所述糖衍生化的基質(zhì)基本上只對(duì)重組MBL四聚物，五聚物和/或六聚物具有親和力。
所述基質(zhì)可以用任何糖或糖混合物衍生化，其中所述糖或糖混合物與MBL結(jié)合，并且其與MBL的較大寡聚物結(jié)合有利。糖衍生化的基質(zhì)優(yōu)選是己糖衍生化的基質(zhì)，例如甘露糖或N-乙酰葡糖胺衍生化的基質(zhì)，最優(yōu)選的是甘露糖衍生化的基質(zhì)。
通過確保基質(zhì)諸如非衍生化的基質(zhì)對(duì)MBL多肽基本上沒有親和力，具體是對(duì)MBL三聚物或更小的寡聚物沒有親和力，可以獲得糖衍生化的基質(zhì)的選擇性。當(dāng)這種基質(zhì)中沒有糖時(shí)就可以保證這一點(diǎn)。具體是，基質(zhì)不應(yīng)該包含任何瓊脂糖或其類似物。優(yōu)選由含有聚合物材料的非糖組成的基質(zhì)，例如FractogelTSK珠。
所述基質(zhì)可以是適合層析法的任何形式，主要是珠的形式，諸如塑料珠。
加載MBL來源后洗滌柱子，優(yōu)選使用非變性緩沖液，其組成，pH值和離子強(qiáng)度可以導(dǎo)致清除蛋白質(zhì)，但不會(huì)將MBL的較大寡聚物洗脫下來。這種緩沖液可以是TBS。MBL的洗脫用能夠高效洗脫MBL較大寡聚物的選擇性脫附劑，諸如包含脫附劑如EDTA(如5mM EDTA)或甘露糖(如50mM甘露糖)的TBS進(jìn)行，收集MBL寡聚物。在國際專利申請(qǐng)WO00/70043中描述了這種純化方法。
一個(gè)優(yōu)選方面，臨床級(jí)別的MBL組合物可通過利用重組技術(shù)制備的MBL來源獲得，其中MBL來源是從產(chǎn)MBL細(xì)胞的培養(yǎng)獲得的培養(yǎng)基。
因此，本發(fā)明包括用制備重組聚甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)的方法生產(chǎn)的MBL，所述方法包括如下步驟-制備包含MBL多肽或其功能等價(jià)物DNA序列的基因表達(dá)構(gòu)建體，-用所述構(gòu)建體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞培養(yǎng)物，-培養(yǎng)該宿主細(xì)胞培養(yǎng)物，使所述多肽表達(dá)并分泌到培養(yǎng)基中，接下來-收集包含人重組MBL的培養(yǎng)基。
包含人重組MBL多肽的培養(yǎng)基可以用上述純化MBL的方法處理。
MBL多肽優(yōu)選是哺乳動(dòng)物MBL多肽，例如更優(yōu)選是人MBL多肽。所述基因表達(dá)構(gòu)建體可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方法，例如美國專利5,270,199中描述的方法來制備。
在另外一個(gè)實(shí)施方案中，采用WO 00/70043中的方法制備基因表達(dá)構(gòu)建物。
表達(dá)優(yōu)選在例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行，依照本發(fā)明的制備物是使用包含有來自MBL基因內(nèi)含子序列和至少一個(gè)外顯子序列的表達(dá)載體的結(jié)果。作為表達(dá)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物這一術(shù)語，在上下文中指已被基因修飾以包含和表達(dá)人MBL基因或其片段或其類似物的動(dòng)物。
除了純化方法外，也優(yōu)選所述基因表達(dá)構(gòu)建物和宿主細(xì)胞有助于較大寡聚物的制備，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)使用包含來自人MBL基因或其功能等同物的至少一個(gè)內(nèi)含子序列的基因表達(dá)構(gòu)建體，可以達(dá)到這一目的。malian細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞。
因此，MBL組合物可以用來預(yù)防和/或治療個(gè)體中的SARS，其中的微生物種類是真菌，酵母，原生動(dòng)物，寄生蟲和/或細(xì)菌。
可以使用從親和層析獲得的洗脫液來制備藥物。但是優(yōu)選在使用之前將洗脫液進(jìn)一步純化。
除了MBL寡聚物外，藥物可以包含可藥用載體物質(zhì)和/或載體。具體地，要加入穩(wěn)定劑來穩(wěn)定MBL蛋白。穩(wěn)定劑可以是糖醇(sugar alcohol)，糖類(saccharide)，蛋白和/或氨基酸。穩(wěn)定劑的具體實(shí)例有甘露糖或白蛋白。
根據(jù)給藥形式可以將其它常規(guī)添加劑加入到藥物中。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物是適于注射的形式。因此可以使用常規(guī)的載體物質(zhì)，諸如等滲鹽水。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物是適于肺部給藥的形式，諸如供局部應(yīng)用的可吸入粉劑或乳劑或液體。
給藥途徑可以是任何合適的途徑，例如經(jīng)靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)，皮下或皮內(nèi)。本發(fā)明也涉及到肺部給藥或局部給藥。
通常每次劑量為1-100mg，諸如2-10mg，根據(jù)待治療的個(gè)體，大部分情況下每次劑量為5-10mg，例如以0.1mg/kg體重給藥。
使用MBL組合物制備藥物制劑也進(jìn)一步包括為了獲得試劑盒而制備另外的藥物，諸如抗真菌藥物，抗酵母菌藥物，抗細(xì)菌藥物和/或抗病毒藥物。
所述抗病毒藥物是可以減少和/或清除病毒的制劑。
本發(fā)明一方面也涉及利用測定的MBL水平作為個(gè)體患SARS風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測性標(biāo)記物以及是否需要治療的指標(biāo)。具體地，低于500ng/ml的MBL水平是指示用MBL治療的預(yù)測性標(biāo)記物。
因此，本發(fā)明也涉及使用MBL組合物預(yù)防和/或治療個(gè)體中SARS的方法，所述方法包括下列步驟i)確定個(gè)體血清MBL水平，ii)估計(jì)個(gè)體發(fā)生明顯臨床SARS的概率，以及可選，給個(gè)體施用MBL組合物。
可以采用時(shí)間分辨免疫熒光測定法(TRIFMA)，ELISA，RIA或比濁法(nephelometry)測定血清或血漿中的MBL水平。
MBL水平也可從對(duì)上述MBL基因的基因型與導(dǎo)致MBL水平下降的MBL突變之間的關(guān)系的分析推斷出。
用下面的實(shí)施例來解釋本發(fā)明。
實(shí)施例1SARS病人的血清MBL水平從表現(xiàn)出上述臨床明顯的SARS的個(gè)體中選擇病人。通過對(duì)病人數(shù)據(jù)庫的回顧性計(jì)算機(jī)搜索來鑒別病人。
在治療前，取患者血樣置于包含EDTA(終濃度約為10mM)的真空玻璃管中。將血漿等份分開，檢測前保藏在-80℃。采用類似方法從健康血液捐獻(xiàn)者中獲取血漿樣品。在采取血樣時(shí)病人沒有被感染。
采用時(shí)間分辨免疫熒光測定法(TRIFMA)確定MBL的濃度。微量滴定板的孔通過與100μl PBS(0.14M NaCl，10mM磷酸鹽，pH 7.4)中的500ng抗人MBL抗體(Mab 131-1，Statens Serum Institut，Copenhagen，Denmark)在室溫保溫過夜而被包被(fluoroNunc，Nunc，Kamstrup，Denmark)。用含有Tween的緩沖液(TBS，0.14M NaCl，10mM Tris/HCl，7.5mM NaN3，0.05％Tween 20，pH 7.4)洗滌后，向含有額外的0.5M NaCl和10mM EDTA的TBS/Tween中加入檢測樣品(1/20血漿)和校準(zhǔn)稀釋物。
4℃保溫過夜并洗滌后，向含25μM EDTA的TBS/Tween中加入顯影用銪標(biāo)記抗體(按照制造商Wallac，Turku，F(xiàn)inland的說明將12.5ngMab131-1用含有銪的螯合物，異硫氰酸根苯甲酰-二亞乙基三胺-四乙酸(isothiocyanato-benzoyl-diethylene-triamine-tetra acetic acid)進(jìn)行標(biāo)記)。
在保溫2小時(shí)并洗滌后，加入熒光增強(qiáng)溶液(Wallac)，在時(shí)間分辨熒光計(jì)(Delfia 1232，Wallac)上讀出板的讀數(shù)。利用以等份保存在-80℃的一份血漿稀釋液作出校準(zhǔn)曲線。
根據(jù)前面概述的方法，可以比較SARS病人和非SARS病人的血清MBL水平。
實(shí)施例2MBL對(duì)SARS相關(guān)的冠狀病毒(SARS-CoV)感染性的影響在這個(gè)實(shí)施例中使用了下列原料HBSS＝Hanks平衡的鹽溶液PBS＝磷酸鹽緩沖的生理鹽水制備病毒和細(xì)胞原型(prototype)SARS-CoV HKU39849生長在胎兒恒河猴(rhesus)腎細(xì)胞中(FRhK-4)(ATCC)。在含有10％胎牛血清的MEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述細(xì)胞。
通過對(duì)FRhK-4細(xì)胞的10倍連續(xù)稀釋溶液進(jìn)行滴定，確定病毒滴度(TCID50)。
MBL與SARS-CoV株的結(jié)合的評(píng)估使用了重組人MBL(Natimmune A/S)。
用ELISA檢測MBL與SARS-CoV株的結(jié)合，其中用PBS稀釋的病毒懸浮液(103-105TCID50)在4℃在96孔板上保溫過夜，然后進(jìn)行洗滌并加入MBL保溫。
在加入MBL之前，用PBS溶液中的BSA和明膠封閉板，用含有0.05％Tween20的HBSS洗滌。
接下來加入在含有Ca2+的HBSS中稀釋的MBL(0-10μg/ml)，允許其與病毒保溫2小時(shí)，洗去未結(jié)合的凝集素(用HBSS洗滌三次)。將EDTA或聚甘露糖加入到含有MBL的一些孔中進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
用在HBSS/Ca2+中稀釋的生物素化單克隆抗MBL抗體(HYB131-01，抗體商店)檢測結(jié)合的MBL。用偶聯(lián)了辣根過氧化物酶的抗生物素蛋白鏈菌素和四甲基聯(lián)苯胺(′TMB′)底物檢測生物素。用0.5M H2SO4終止反應(yīng)。用ELISA讀數(shù)儀檢測出吸光度。每一個(gè)獨(dú)立數(shù)據(jù)點(diǎn)以一式三份進(jìn)行。在不包含病毒的孔中，MBL的本底結(jié)合最少。
這個(gè)實(shí)驗(yàn)證明，MBL能夠與SARS-CoV進(jìn)行特異性結(jié)合。
SARS-CoV感染性的測定在96孔板中制備單層胎兒恒河猴腎細(xì)胞系(FRhK-4)，培養(yǎng)至滿底。用SARS-CoV(100TCID50)感染這些細(xì)胞層，其中SARS-CoV使用之前用MBL在37℃處理了2小時(shí)。2-3天以后，在光學(xué)顯微鏡下檢測致細(xì)胞病變效應(yīng)(cythophatic effects)(CPE)。
該實(shí)驗(yàn)證明，MBL對(duì)SARS-CoV感染性的濃度依賴性抑制。
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權(quán)利要求
1.下述組合物在制備用于預(yù)防和/或治療重癥急性呼吸綜合征的藥物中的用途，所述組合物包含至少一個(gè)膠原凝集素和/或纖維膠凝蛋白亞單位，諸如甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)亞單位，或至少一個(gè)含有膠原凝集素亞單位和/或纖維膠凝蛋白亞單位的膠原凝集素寡聚物和/或纖維膠凝蛋白寡聚物，諸如含有至少一個(gè)甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)亞單位的甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)寡聚物。
2.權(quán)利要求1的用途，其中所述組合物包含至少一種含有至少一個(gè)甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)亞單位的甘露聚糖-結(jié)合凝集素(MBL)寡聚物。
3.權(quán)利要求2的用途，其中所述的寡聚物優(yōu)選選自四聚物，五聚物和/或六聚物組成的組。
4.權(quán)利要求1的用途，其中所述個(gè)體的血清MBL水平超過10ng/ml血清。
5.權(quán)利要求1的用途，其中所述個(gè)體血清MBL水平超過50ng/ml血清。
6.權(quán)利要求4或5的用途，其中所述血清MBL水平指功能性血清MBL水平。
7.權(quán)利要求1的用途，進(jìn)一步包括制備能夠減少和/或清除微生物種類的抗微生物藥物以獲得試劑盒。
8.權(quán)利要求7的用途，進(jìn)一步包括制備能夠減少和/或清除細(xì)菌的抗細(xì)菌藥物以獲得試劑盒。
9.權(quán)利要求1的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物在天然宿主生物體中制備。
10.權(quán)利要求9的用途，其中所述天然宿主生物體是天然表達(dá)MBL亞單位或MBL寡聚物的人細(xì)胞。
11.權(quán)利要求1的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物由非天然表達(dá)MBL多肽的宿主生物體產(chǎn)生。
12.權(quán)利要求1的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物由包含體外重組DNA技術(shù)的至少一個(gè)步驟的方法制備。
13.權(quán)利要求11或12的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物的產(chǎn)生通過非天然與MBL多肽表達(dá)相關(guān)聯(lián)的表達(dá)控制序列來控制。
14.權(quán)利要求9-13任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物分離自宿主生物體。
15.權(quán)利要求14的用途，其中所述MBL亞單位或MBL寡聚物通過涉及親和層析的至少一個(gè)步驟的方法分離。
16.權(quán)利要求13的用途，其中所述親和層析步驟能夠從還包含另外的MBL寡聚物和/或MBL亞單位的組合物中分離MBL四聚物，五聚物和/或六聚物。
17.權(quán)利要求11-16任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述MBL亞單位和/或MBL寡聚物不含有任何在天然宿主生物體中產(chǎn)生時(shí)天然地與MBL相關(guān)聯(lián)的雜質(zhì)。
18.權(quán)利要求1的用途，其中所述MBL亞單位是哺乳動(dòng)物MBL亞單位。
19.權(quán)利要求18的用途，其中所述哺乳動(dòng)物MBL亞單位是人MBL亞單位。
20.權(quán)利要求1的用途，其中所述藥物在另一種治療前給予個(gè)體。
21.前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用途，其中所述治療是預(yù)防性治療。
22.權(quán)利要求1-21任意一項(xiàng)所述的用途，其中在具有高于預(yù)先確定的最低MBL血清水平10ng/ml的MBL血清水平的個(gè)體中，所述藥物是MBL血清水平的增強(qiáng)劑。
23.權(quán)利要求22所述的用途，其中所述個(gè)體具有的血清MBL水平低于預(yù)先確定的最高M(jìn)BL血清水平500ng/ml。
24.權(quán)利要求1或23所述的用途，其中所述個(gè)體的血清MBL水平超過75ng/ml。
25.權(quán)利要求1或23所述的用途，其中所述個(gè)體的血清MBL水平超過100ng/ml。
26.權(quán)利要求1或23所述的用途，其中所述個(gè)體的血清MBL水平超過150ng/ml。
27.權(quán)利要求1或24所述的用途，其中所述個(gè)體血清MBL水平低于500ng/ml。
28.權(quán)利要求1或24所述的用途，其中所述個(gè)體血清MBL水平低于400ng/ml.。
29.權(quán)利要求1或24所述的用途，其中所述個(gè)體血清MBL水平低于300ng/ml。
30.前面任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的用途，其中通過定量分析確定所述個(gè)體中的血清或血漿MBL水平。
31.權(quán)利要求30的用途，其中所述分析包含ELISA，TRIFMA，RIA或比濁法中的至少一種。
32.使用MBL組合物預(yù)防和/或減輕個(gè)體中的SARS的方法，包括下列步驟a)確定個(gè)體中的血清MBL水平，b)估計(jì)所述個(gè)體中發(fā)生明顯臨床SARS的概率，以及可選地c)給予該個(gè)體所述MBL組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及膠原凝集素和/或纖維膠凝蛋白的亞單位和寡聚物諸如甘露聚糖－結(jié)合凝集素(MBL)在預(yù)防和/或治療個(gè)體中的重癥急性呼吸綜合癥(SARS)中的用途。此外，本發(fā)明涉及治療SARS的方法，包括測定個(gè)體中的血清MBL水平，以及如果相關(guān)將MBL給藥所述個(gè)體。
文檔編號(hào)A61P11/00GK1805753SQ200480016153
公開日2006年7月19日 申請(qǐng)日期2004年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月9日
發(fā)明者利夫·康格斯萊夫, 迪特馬·韋爾格尼, 芬恩·馬西森, 詹斯·C·詹斯尼厄斯 申請(qǐng)人:納蒂芒公司, 奧胡斯大學(xué)