專利名稱：新型大環(huán)內(nèi)酯類藥物－9－or－紅霉素a肟，合成方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于抗菌，抗病毒特別是抗SARS病毒的新型大環(huán)內(nèi)酯類藥物即對紅霉素A肟被醚化或酯化反應(yīng)后形成的一系列新的衍生物及其合成方法及其用途。
背景技術(shù)：
目前，對于SARS病沒有特殊療效的治療藥物。但是從前段時(shí)間人們抗擊SARS病的情況來看，仍然尋找了一些對于控制該病較為有效的藥物。由衛(wèi)生部疾病控制司發(fā)布的“非典型肺炎”病例或疑似病例的推薦治療方案和出院診斷參考標(biāo)準(zhǔn)(試行)中提出的推薦治療方案中，適用于早期治療的藥物可選用大環(huán)內(nèi)酯類、氟喹諾酮類、β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類等抗生素藥物，其中的大環(huán)內(nèi)酯類藥物則以紅霉素及其衍生物為主，包括了阿奇霉素、羅紅霉素、琥乙酰紅霉素及紅霉素等。研究表明此類抗生類的作用機(jī)理是通過與敏感細(xì)菌核糖體的50S亞基結(jié)合，主要抑制肽酰基-tRNA由A位移向P位，抑制位移酶，阻礙肽鏈延長。從而抑制了細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成而發(fā)揮抑菌或殺菌作用。而且近年來最新臨床研究也表明，環(huán)內(nèi)酯類抗生素除具有直接的抗菌作用外，還對肺部和呼吸道炎癥疾病如哮喘和彌漫性泛細(xì)支氣管炎表現(xiàn)出治療作用，一系列紅霉素衍生物均對這些呼吸道疾病有療效，因此大環(huán)內(nèi)酯類抗生素在這方面的抗炎活性已成為研究熱點(diǎn)之一。最近的研究工作顯示，此類抗生素可能是通過抑制炎癥反應(yīng)的生理、細(xì)胞和分子過程而體現(xiàn)其抗炎作用。從而對大環(huán)內(nèi)酯類藥物免疫調(diào)節(jié)作用的研究為臨床抗炎提供了依據(jù)，而且因其免疫治療療效顯著，副作用小，因此紅霉素及其衍生物經(jīng)進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)改造很有可能開發(fā)研制出能成為臨床上通過免疫調(diào)節(jié)對治療SARS病有確切療效的藥物。
從目前對該類藥物的研究現(xiàn)狀來看，由于紅霉素本身在被發(fā)現(xiàn)以后就得到了廣泛及臨床應(yīng)用，它是對許多疾病，尤其是對呼吸道感染，包括嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎枝原體、衣原體等細(xì)菌所致的非典型肺炎有著安全有效的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。然而紅霉素存在著抗菌譜窄，水溶性差，在胃酸作用下容易水解形成紅霉胺、紅霉枝糖及紅霉素縮酮且這種變化有不可逆性，從而使它喪失活性。另外，此類藥物容易使病菌產(chǎn)生耐藥性及交叉耐藥性，從而使其應(yīng)用受到了相當(dāng)大的限制，世界藥物學(xué)工作者廣泛開展了對紅霉素結(jié)構(gòu)修飾的研究工作并已取得了重大的進(jìn)展，如通過對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾而有效阻止了因酸作用而失去活性的降解，同時(shí)在結(jié)構(gòu)上引入一些含氮的雜原子如形成肟、胺基、氟原子而獲得了具有良好抗菌活性的新大環(huán)內(nèi)酯類藥物，雖然上述紅霉素衍生物在藥物動力學(xué)、生物利用度等方面比紅霉素有很大的改善，且抗菌譜均類似于紅霉素，有的甚至還有所拓寬，但它們和紅霉素一樣，對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥菌作用效力太差，這包括了治療早期SARS病的羅紅霉素就屬于此類衍生物，羅紅霉素(roxithromyein)，抗菌譜和紅霉素相似，但作用比紅霉素強(qiáng)6倍，生物利用度高。用于呼吸道感染，如肺炎，急性支氣管炎，慢性支氣管炎急性感染，非典型肺炎，及泌尿生殖系統(tǒng)感染，皮膚感染及軟組織感染等，均有良好的治療效果與耐受性，不良反應(yīng)比紅霉素小，但用它們作為治療SARS病仍具有藥效不夠或存在進(jìn)一步應(yīng)用的局限性。因此，迫切需要研制出有較強(qiáng)耐藥性并對SARS病有確切療效的新型大環(huán)內(nèi)酯類藥物。
以前由公開的制備肟及紅霉素A肟的醚及酯的數(shù)種方法，如Synthcommun.，1997，27(7).1143-1148公開的用碳酸氫鈉作堿以水作溶劑在室溫下反應(yīng)48-72小時(shí)來制備肟醚；由Chem Pharm Bull.，1986，34(8)，3458-3464以無水碳酸鉀作為堿，用DMF與乙酸乙酯組成的混合物作溶劑于50℃條件下反應(yīng)制備此類化合物；由J Med Chem.，1998，41(21)，4080-4100公開的以甲醇鈉作為堿用THF作溶劑制備此類化合物；由US4921839公開的以氫氧化四丁基胺作為堿以四氫呋喃甲醇為溶劑制備此類化合物。經(jīng)對已知的上述方法經(jīng)過認(rèn)真的考查后發(fā)現(xiàn)所用的溶劑需要無水操作或者要用高沸點(diǎn)的DMF作溶濟(jì)不易進(jìn)行后處理，除盡該溶劑非常困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問題之一是提供新型大環(huán)內(nèi)酯化合物即紅霉素A肟被醚化或酯化及其相關(guān)衍生物。
本發(fā)明要解決的問題之二是提供新型大環(huán)內(nèi)酯化合物即紅霉素A肟被醚化或酯化及其相關(guān)衍生物的制備方法。以便更為安全、方便、高效的合成和工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明要解決的問題是提供新型大環(huán)內(nèi)酯化合物即紅霉素A肟被醚化或酯化及其相關(guān)衍生物的抗菌，抗病毒用途，尤其是開發(fā)研制出能成為臨床上通過免疫調(diào)節(jié)對治療SARS病有確切療效的藥物。
本發(fā)明提供的一類新型大環(huán)內(nèi)酯化合物即紅霉素A肟被醚化或酯化反應(yīng)后形成的一系列新的衍生物，它的結(jié)構(gòu)通式可表示為 式中R推薦為含有1～30個(gè)碳原子的飽和或不飽和的基團(tuán)其中R可代表一個(gè)飽和或不飽和的含有可達(dá)30個(gè)碳原子的烴基或取代烴基，或者該烴基被一個(gè)或幾個(gè)雜原子所阻斷，還可帶有一個(gè)或幾個(gè)相同或不同的管能團(tuán)；或者可以與與之相連結(jié)的氮原子形成一個(gè)雜環(huán)，該雜環(huán)可以含有一個(gè)或幾個(gè)從氮、硫及氧當(dāng)中選擇的雜原子；R所表示的烴基可被一個(gè)或幾個(gè)相同或不同的雜原子所阻斷，這些雜原子可以是氮、硫及氧；這些烴基可以帶有一個(gè)或幾個(gè)相同或不同的基團(tuán)。這些基團(tuán)可以選自羥基、鹵原子、硝基、氰基、鏈條烯基或炔基烷基、含氧烷基、含氧炔基或烯、含硫烷基、含硫炔基或含硫烯基、含氮炔基或烯、含氮烷基、這些基團(tuán)可最多含30個(gè)碳原子，并可能被一個(gè)或幾個(gè)相同或不同鹵原子所取代。
R所表示可能是一個(gè)或幾個(gè)芳基，一個(gè)或幾個(gè)雜芳基，這些基團(tuán)可能能帶有一個(gè)或多個(gè)鹵原子、硝基、羰基、羧基、含硫基團(tuán)、含氮的除硝基以外的基團(tuán)所取代的芳基或雜芳基?；蚴呛幸粋€(gè)或幾個(gè)雜原子的五員，四員、三員、六員或多員芳雜環(huán)，這些芳雜環(huán)包括含硫、含氮、含硫或者一個(gè)芳雜環(huán)內(nèi)含有幾個(gè)上述三種不同元素氮、氧、硫的芳雜環(huán)。這些芳雜環(huán)上帶有上述所提供的一個(gè)或多個(gè)取代基。
R所表示的烴基可能是烷基，鏈烯基或炔基，芳代烷基、芳代炔基或烯基。在這些烷基烯基或炔基取代基中，優(yōu)選甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、癸基、十二烷基、三十烷基、乙烯基烯丙基乙炔基、丙炔基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
芳基可以是苯基或萘基；芳基還可以是取代的或非取代的芳雜環(huán)基，如噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、惡唑基、三氮唑基、四氮唑基、咪唑基、噻二唑基、吡唑或異吡唑基、呲啶基、嘧啶基、達(dá)嗪或吡嗪基，也可以是吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑或喹啉基。這些芳基可以帶一個(gè)或幾個(gè)前面所提到的取代基。
當(dāng)R與之相連的氮原子構(gòu)成一個(gè)雜環(huán)基時(shí)，尤選的雜環(huán)基為吡咯基、吡咯烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、奎寧環(huán)基、惡唑基、異惡唑基、嗎啉基、吲哚基、咪唑基、苯并咪唑基、三氮唑基、四氮唑基、噻唑基、氮雜環(huán)丁基、氮硫雜環(huán)丁基、氮丙基。
上述“幾個(gè)”除另外說明外，推薦為1～5個(gè)，進(jìn)一步推薦為1～3個(gè)。
尤其推薦R為如下基團(tuán)之一 本發(fā)明的合成方法是以紅霉素A肟為起始原料，與上述活性片斷R的鹵代物在溶劑與堿催化下于反應(yīng)制備此類化合物。所述的鹵代物可以是氯代、溴代或碘代物，其反應(yīng)方程式表示如下，式中R如前所述 本發(fā)明提供的合成方法可具體描述如下1.烷基醚化反應(yīng)在醇或丙酮溶劑中與紅霉素A肟與堿的摩爾比推薦為1∶3.2～4，進(jìn)一步推薦摩爾比為1∶3.5～3.8，反應(yīng)溫度推薦為0～80℃，進(jìn)一步推薦反應(yīng)溫度為25～40℃，反應(yīng)時(shí)間推薦為0.5～24h，進(jìn)一步推薦反應(yīng)時(shí)間為0.5～5h經(jīng)處理得到相應(yīng)的純化合物。所述的堿為無機(jī)堿或有機(jī)堿。
2.酯化，在極性溶劑中紅霉素A肟，有機(jī)堿，酰氯的摩爾此推薦為0.6～1.9∶1～2∶2.1～3.2，進(jìn)一步推薦摩爾比為0.6～1.2∶0.8～1∶1.8～2.0，反應(yīng)溫度推薦為-15～100℃，進(jìn)一步推薦反應(yīng)溫度為0～25℃，反應(yīng)時(shí)間推薦為2～10h，進(jìn)一步推薦反應(yīng)時(shí)間為4～6h，經(jīng)后處理得純品。
上述極性溶劑推薦為水，C1～C3醇，丙酮，四氫呋喃，乙晴或其混合溶劑。C1～C3醇推薦為甲醇，乙醇，丙醇。無機(jī)堿推薦為堿金屬碳酸鹽，碳酸氫鹽，所述有機(jī)堿推薦為三乙胺，二乙胺，二異丙胺，乙二胺，DBU，吡啶等。上述所提后處理指濃縮，減壓蒸餾，脫洗劑，中和，結(jié)晶，過濾，稀釋，萃取，洗滌，重結(jié)晶或干燥中的一步或多步。
本發(fā)明的9-OR-紅霉素A肟化合物可用于制備抗菌、抗病毒藥物。
本發(fā)明的化合物可用作制備治療易受感染的病菌所致的疾病，需特別指出的這些疾病SARS病菌感染癥，葡萄球菌感染癥，如敗血癥，面部或皮膚的惡葡萄球菌感染、化濃性皮炎、傷口的感染或化濃、癤子、癰、蜂窩狀組織炎、丹毒和痤瘡、葡萄球菌感染的疾病如初期感染的急性咽喉炎、流行性感冒后的咽炎、支氣管肺炎、肺部化膿、鏈球菌感染的疾病如急性咽喉炎、以及肺炎球菌引起的肺炎、白喉、此外還對流行性感冒嗜血桿菌屬、立克次體、肺炎支原體、衣原體等的感染。
初步的活性研究表明此類衍生物均具有良好的抑菌，抗病毒活性，而且此類化合物均對SARS病毒有一定的抑制作用，表明這類化物有可能開發(fā)成治療SARS的有效藥物。
發(fā)明人對紅霉素類衍生物-紅霉素A肟進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，引入一些含氟嘧啶環(huán)、含氮雜環(huán)及三氮唑、含氟芳基等對于病毒及真菌有活性的片斷形成一系列新的大環(huán)內(nèi)酯類化合物，使SARS感染病菌難以識別，克服以往大環(huán)內(nèi)酯類藥物對現(xiàn)有的病菌存在的耐藥性及交叉耐藥性，從而對其進(jìn)行有效殺滅。從而找到更有效的抑菌抗病毒藥物特別是能夠在短時(shí)間內(nèi)找到對于SARS病有確切療效的藥物。
本發(fā)明所提供的技術(shù)與現(xiàn)有的技術(shù)相比較，現(xiàn)有的技術(shù)所用所用的溶劑需要無水操作或者要用高沸點(diǎn)的DMF作溶濟(jì)不易進(jìn)行后處理，除盡該溶劑非常困難，給進(jìn)一步的純化帶來困難，不易甚至于不能獲得較高純度的產(chǎn)品，本發(fā)明則克服了上述缺點(diǎn)，提供了一條安全、方便、高效的生產(chǎn)途徑。
具體實(shí)施例方式
以下實(shí)施例有助于理解本發(fā)明，但不限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實(shí)施例1紅霉素A肟醚的制備方法一、在反應(yīng)瓶中，加入10.273g紅霉素A肟，10mL丙酮后，開啟攪拌慢慢將溶有等與量的鹵代烷(氯代、溴代或碘代物)滴加到反應(yīng)瓶中，此時(shí)反應(yīng)體系形成均勻的懸浮液。待加畢后讓其在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)5-8h。反應(yīng)完全后過濾后減壓除去丙酮，殘留物經(jīng)重結(jié)晶得產(chǎn)物化合物11H NMR(300MHz)δppm8.61(1H，s，CH)，4.61-4.67(1H，m，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
19F NMR(300MHz)δppm-134.6，-155.51化合物21H NMR(300MHz)δppm8.93-8.95(1H，m，CH)，7.74(1H，s，CH)，5.84(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物31H NMR(300MHz)δppm8.03(1H，s，CH)，7.57(1H，s，CH)，6.60(1H，s，CH)5.51(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物41H NMR(300MHz)δppm8.04-8.06(1H，s，CH)，7.15(1H，s，CH)，6.61(1H，s，CH)，5.49(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物51H NMR(300MHz)δppm7.68-7.64(1H，m，CH)，7.57(1H，s，CH)，7.12-7.05(1H，m，CH)，6.43(1H，m，CH)，5.51(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物61H NMR(300MHz)δppm8.63(1H，s，CH).，3.84(3H，s，OMe)，2..27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物71H NMR(300MHz)δppm7.58-7.44(1H，m，CH)，6.87-6.99(1H，m，CH)，6.74-6.87(1H，m，CH)，4.96(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2..27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物91H NMR(300MHz)δppm4.11(2H，s，CH2)，6.74-6.87(1H，m，CH)，4.96(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物151H NMR(300MHz)δppm6.78(1H，s，CH)，4.95(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物171H NMR(300MHz)δppm4，54-4.67(2H，m，CH)，4.35(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物221H NMR(300MHz)δppm6.75(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)1.24(s，Me).
化合物261H NMR(300MHz)δppm6.45(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)1.24(s，Me).
化合物271H NMR(300MHz)δppm3.99-3.439(2H，m，CH2)，3.69-33.77(2H，m，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)1.24(s，Me).
化合物291H NMR(300MHz)δppm835(1H，d，J＝2.4Hz，CH)，7.61(1H，dd，J＝8.1，2.4Hz，CH)，7.34(1H，d，J＝8.1Hz，CH)，5.5.04(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me化合物311H NMR(300MHz)δppm8.39-8.67(1H，s，CH)，8.23-8.45(1H，s，CH)，8.05-7.79(1H，s，CH)，7.99-7.86(1H，s，CH)，7.48-7.56(1H，s，CH)，6.58-6.45(1H，s，CH)，4.86(2H，s，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
實(shí)施例2紅霉素A肟酯制備方法一、將19.2g(94.9％)紅霉素A肟及16.95g無水碳酸氫鈉溶于100mL干燥的四氫呋喃中，在良好的攪拌及冷卻下慢慢將30mL三乙胺滴加到反應(yīng)瓶中后，讓其在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h后，再將反應(yīng)瓶冷卻至-5℃后慢慢將11.3mL酰氯滴加到反應(yīng)瓶中，讓其在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)12h待反應(yīng)完全后，反應(yīng)完全后過濾后減壓除去丙酮，殘留物經(jīng)重結(jié)晶得產(chǎn)物。
方法二、將9.2g(94.9％)紅霉素A肟及9.95g無水碳酸氫鈉溶于100mL干燥的丙酮中，在良好的攪拌及冷卻下慢慢將30mL三乙胺滴加到反應(yīng)瓶中后，讓其在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h后，再將反應(yīng)瓶冷卻至-5℃后慢慢將11.3mL酰氯滴加到反應(yīng)瓶中，讓其在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)12h待反應(yīng)完全后，反應(yīng)完全后過濾后減壓除去丙酮，殘留物經(jīng)重結(jié)晶得產(chǎn)物。
化合物81H NMR(300MHz)δppm8.69(1H，s，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物101H NMR(300MHz)δppm8.34-8.11(2H，m，CH2)，7.74-7.46(2H，m，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物111H NMR(300MHz)δppm8.01-7.89(1H，m，CH)，7.57-7.45(1H，m，CH)，7.07-6.99(1H，m，CH)3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物121H NMR(300MHz)δppm8.03-7.78(2H，m，CH2)，6.67-7.65(2H，m，CH2)，6.61(1H，s，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物131H NMR(300MHz)δppm7.98(1H，d，J＝2.0Hz，CH)，7.67(1H，dd，J＝8.1，2.4Hz，CH)，7.56(1H，d，J＝8.1Hz，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me
化合物141H NMR(300MHz)δppm7.04(1H，s，CH).，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物16化合物181H NMR(300MHz)δppm7.78(1H，s，CH)，7.27(1H，s，CH)，7.06(1H，s，CH)，4.25-4.87(2H，m，CH2)，4.22-4.56(2H，m，CH2)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me化合物191H NMR(300MHz)δppm5.78-6.09(1H，m，CH)，5.24-5.45(1H，m，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物201H NMR(300MHz)δppm7.51(1H，s，CH)，3.98(3H，s，OCH3)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物211H NMR(300MHz)δppm8.21-7.99(1H，m，CH)，7.87-7.65(1H，m，CH)，7.07-6.79(1H，m，CH)3.98(3H，s，OMe)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
化合物231H NMR(300MHz)δppm2.94(3H，s，NCH3)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)1.24(s，Me).
化合物241H NMR(300MHz)δppm7.87-7.99(1H，m，C＝CH)，7.45(1H，s，CH)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)1.24(s，Me).
化合物251H NMR(300MHz)δppm8.01-7.79(2H，m，CH2)，7.87-7.89(2H，m，CH2)，7.07-6.79(1H，m，CH)，3.98(3H，s，OMe)，3.84(3H，s，OMe)，2.27(6H，s，NMe)，1.42(3H，s，Me)，1.24(s，Me).
實(shí)施例3抗SARS病毒初篩報(bào)告測試項(xiàng)目藥物抗SARS病毒活性篩選(病毒—細(xì)胞水平模型)測試原理以Vero-E6因細(xì)胞作為病毒宿主細(xì)胞(易感細(xì)胞)，測試樣品抵抗病毒感染細(xì)胞的作用，檢測指標(biāo)為細(xì)胞變性反應(yīng)(CPE)以及感染細(xì)胞保護(hù)率。
測試材料和方法E1.測試樣品化合物1，化合物2，化合物32.病毒株BJ-01(來源于北京軍事科學(xué)院微生物流行病研究所)3.P3實(shí)驗(yàn)室4.樣品處理樣品溶于培養(yǎng)液或DMSO，配成適宜的初始濃度，5倍稀釋，3個(gè)稀釋度。
5.測試方法把Vero-E6細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，置37℃，5％CO2培養(yǎng)，SARS病毒感染細(xì)胞后，分別加入不同稀釋濃度的樣品，設(shè)病毒對照、細(xì)胞對照和樣品對照。每日鏡下觀察結(jié)果，記錄CPE，并用中性紅染色測定OD值，參照對照進(jìn)行樣品抗SARS病毒活性作用的計(jì)算和評價(jià)。
測試結(jié)果化合物1

化合物2

化合物29

細(xì)胞病變法(CPE)以“-”表示細(xì)胞附著形態(tài)完整，未見明顯得脫離，但不比較細(xì)胞數(shù)量的多少；以“+”表示細(xì)胞病變純度，＜25％+，25％～50％++，50％～75％+++，＞75％++++。
被感染細(xì)胞保護(hù)率通過比較病毒對照、細(xì)胞對照和樣品對照的OD值，計(jì)算樣品對病毒感染細(xì)胞的保護(hù)活性，保護(hù)率＞EC20初步被認(rèn)為樣品對被病毒感染的細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用，有抗病毒活性。
*樣品細(xì)胞毒性如果樣品的細(xì)胞毒性與細(xì)胞對照比大于50(＞CC50)時(shí)，不給CPE評價(jià)和保護(hù)率計(jì)算。
權(quán)利要求
1.一種9-OR-紅霉素A肟，它的結(jié)構(gòu)通式可表示為 式中R為含有1～30個(gè)碳原子的飽和或不飽和的基團(tuán)所述的基團(tuán)是烴基、取代烴基、芳基、取代芳基、取代或非取代的芳雜環(huán)基、或者R可以與與之相連結(jié)的氮原子形成一個(gè)雜環(huán)；或者上述烴基被1～5個(gè)雜原子所阻斷，這些雜原子可以是氮、硫及氧；或者上述烴基帶有1～5個(gè)相同或不同的官能團(tuán)，所述的官能團(tuán)選自羥基、鹵原子、硝基、氰基、鏈條烯基或炔基烷基、含氧烷基、含氧炔基或烯、含硫烷基、含硫炔基或含硫烯基、含氮炔基或烯、含氮烷基、這些基團(tuán)含1～30個(gè)碳原子，并可能被1～3個(gè)相同或不同鹵原子所取代；或者上述取代或非取代的芳基、取代或非取代的雜芳基帶有1～3個(gè)下述基團(tuán)鹵原子、硝基、羰基、羧基、含硫基團(tuán)、含氮的除硝基以外的基團(tuán)所取代的芳基或雜芳基；其中所述的烴基是烷基、環(huán)烷基、鏈烯基或炔基，芳代烷基、芳代炔基或烯基；所述的雜環(huán)是含有1～5個(gè)雜原子的三員到八員芳雜環(huán)，這些芳雜環(huán)是含硫、含氮、含硫或者一個(gè)芳雜環(huán)內(nèi)含有2～5個(gè)上述三種不同元素氮、氧、硫的芳雜環(huán)。
2.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟，其特征是所述的烷基、烯基或炔基取代基是甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、癸基、十二烷基、三十烷基、乙烯基烯丙基乙炔基、丙炔基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。所述的芳基可以是苯基或萘基；所述的取代的或非取代的芳雜環(huán)基是噻吩基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、惡唑基、三氮唑基、四氮唑基、咪唑基、噻二唑基、吡唑或異吡唑基、呲啶基、嘧啶基、達(dá)嗪或吡嗪基，也可以是吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑或喹啉基，這些芳基可以帶一個(gè)或幾個(gè)前面所提到的取代基；當(dāng)R與之相連的氮原子構(gòu)成一個(gè)雜環(huán)基時(shí)，雜環(huán)基為吡咯基、吡咯烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、奎寧環(huán)基、惡唑基、異惡唑基、嗎啉基、吲哚基、咪唑基、苯并咪唑基、三氮唑基、四氮唑基、噻唑基、氮雜環(huán)丁基、氮硫雜環(huán)丁基、氮丙基。
3.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟，其特征是所述的R為R’、CH2R’、C(O)R’、CH(CH3)R’、C(O)CH2R’、C(O)CH(COOC2H5)R’、C(O)C(NOCH3)R’或 所述的R’為三到七元環(huán)的環(huán)烷基、芳雜環(huán)基、取代的芳雜環(huán)基、苯基、取代苯基、五到七元環(huán)的氮雜環(huán)基或取代的五到七元環(huán)的氮雜環(huán)基，所述的芳雜環(huán)基為含有1～5個(gè)N、O或S原子的五到七元環(huán)的芳雜環(huán)基，所述的取代基選自鹵素、C(O)H、(O)、HS、CF3、OH、C1～C4的烷基、鹵素、NH2、含有1～5個(gè)N、O或S原子的五到七元環(huán)芳雜環(huán)基。
4.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟，其特征是R為如下基團(tuán)之一
5.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的合成方法，其特征是以紅霉素A肟為起始原料，與上述活性片斷R的鹵代物在溶劑與堿催化下于反應(yīng)制備此類化合物。其反應(yīng)式如下 式中R如前所述。
6.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的合成方法，其特征是烷基醚化反應(yīng)是在醇或丙酮溶劑中，紅霉素A肟與堿的摩爾比為1∶3.2～4，反應(yīng)溫度為0～80℃，反應(yīng)時(shí)間為0.5～24h，經(jīng)處理得到相應(yīng)的純化合物。
7.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的合成方法，其特征是酯化反應(yīng)是在極性溶劑中，紅霉素A肟，有機(jī)堿，酰氯的摩爾比為0.6～1.9∶1～2∶2.1～3.2，反應(yīng)溫度推薦為-15～100℃，反應(yīng)時(shí)間推薦為2～10h，經(jīng)后處理得純品。
8.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的合成方法，其特征是所述的堿是無機(jī)堿或有機(jī)堿，所述的無機(jī)堿為堿金屬碳酸鹽，碳酸氫鹽，所述有機(jī)堿為三乙胺，二乙胺，二異丙胺，乙二胺，DBU，吡啶等。
9.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的用途，其特征是用于制備抗菌、抗病毒藥物。
10.如權(quán)利要求1所述的9-OR-紅霉素A肟的用途，其特征是用于制備治療下述疾病的藥物SARS病菌感染癥；葡萄球菌感染癥，面部或皮膚的惡葡萄球菌感染、化濃性皮炎、傷口的感染或化濃、癤子、癰、蜂窩狀組織炎、丹毒和痤瘡、初期感染的急性咽喉炎、流行性感冒后的咽炎、支氣管肺炎、肺部化膿、鏈球菌感染的疾病、肺炎球菌引起的肺炎、白喉；流行性感冒嗜血桿菌屬、立克次體、肺炎支原體、衣原體的感染。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種9－OR－紅霉素A肟，它的結(jié)構(gòu)通式可表示為右式，其中R可代表一個(gè)飽和或不飽和的含有可達(dá)30個(gè)碳原子的烴基或取代烴基，或者該烴基被一個(gè)或幾個(gè)雜原子所阻斷，還可帶有一個(gè)或幾個(gè)相同或不同的官能團(tuán)；或者可以與與之相連結(jié)的氮原子形成一個(gè)雜環(huán)，該雜環(huán)可以含有一個(gè)或幾個(gè)從氮、硫及氧當(dāng)中選擇的雜原子。以紅霉素A肟為起始原料，與上述活性片斷R的鹵代物在溶劑與堿催化下于反應(yīng)制備得此類化合物。上述化合物可用于制備抗菌、抗病毒藥物。
文檔編號A61P31/12GK1544451SQ20031010871
公開日2004年11月10日 申請日期2003年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月19日
發(fā)明者姜標(biāo), 王亞平, 姜 標(biāo) 申請人:中國科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所