專利名稱：作為cetp抑制劑的4－羧基氨基－2－乙基－1,2,3,4－四氫喹啉結(jié)晶的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)抑制劑、含有該抑制劑的藥物組合物以及該抑制劑用于在某些哺乳動物(即，在其血漿中含有CEPT的哺乳動物)、包括人中升高某些血漿脂類、包括高密度脂蛋白(HDL)-膽固醇的水平和降低某些其它的血漿脂類、例如低密度脂蛋白(LDL)-膽固醇和甘油三酯的水平從而治療由低水平的HDL膽固醇和/或高水平的LDL-膽固醇和甘油三酯引起的疾病、例如動脈粥樣硬化和心血管疾病的用途。
更具體地講，本發(fā)明涉及CETP抑制劑的結(jié)晶、含有這些結(jié)晶的藥物組合物、制備這些結(jié)晶的方法以及用該結(jié)晶治療動脈粥樣硬化、肥胖和相關(guān)疾病和/或病癥的方法。
動脈粥樣硬化以及相關(guān)的冠狀動脈疾病(CAD)是工業(yè)化國家的主要死因。盡管嘗試改變第二危險因素(吸煙、肥胖、缺乏鍛煉)和通過飲食調(diào)整和藥物療法來治療血脂異常，但冠心病(CHD)仍然是美國最常見的死亡原因，其中，心血管疾病占所有死因的44％，其中的53％與動脈粥樣硬化性冠心病有關(guān)。
已證實發(fā)生該病癥的危險性與某些血漿脂類水平密切相關(guān)。盡管升高的LDL-膽固醇可能是最為公認的血脂異常形式，但它決不是唯一與脂類有關(guān)的引起CHD的重要因素。HDL-膽固醇低也是CHD的危險因素(Gordon，D.J.等“高密度脂蛋白膽固醇和心血管疾病”，Circulation，(1989)，798-15)。
高的LDL-膽固醇和甘油三酯水平與發(fā)生心血管疾病的危險性是正相關(guān)的，而高的HDL-膽固醇水平與發(fā)生心血管疾病的危險性呈負相關(guān)。因此，血脂異常不是CHD的單一的危險特征，而是可能包括一個或多種脂類的偏離。
在控制這些疾病所依賴的血漿水平的諸多因素中，膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)活性影響著所有三種因素。該存在于多種動物、包括人中的70,000道爾頓的血漿糖蛋白的作用是在脂蛋白顆粒之間轉(zhuǎn)移膽固醇酯和甘油三酯，包括高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒。CETP活性的凈的結(jié)果是降低HDL膽固醇和增加LDL膽固醇。據(jù)信這種對脂蛋白分布型的影響是致動脈粥樣硬化的，特別是在其脂類分布型構(gòu)成了增加的CHD危險性的個體中。
目前還不存在完全令人滿意的HDL升高療法。煙酸可以明顯增加HDL，但有嚴重的耐受性問題，從而降低了依從性。氯貝特類和HMG CoA還原酶抑制劑僅能一定程度地升高HDL-C(～10-12％)。因此，仍非常需要可以明顯升高血漿HDL水平的耐受性良好的藥物，從而逆轉(zhuǎn)或延緩動脈粥樣硬化的進程。
共同轉(zhuǎn)讓的美國申請序列號09/391,152(1999年9月7日申請，發(fā)明名稱為4-羧基氨基-2-取代的-1，2，3，4-四氫喹啉，其公開的內(nèi)容引入本文作為參考)涉及如下通式的化合物 具體地講，公開了化合物[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯。
因此，雖然有多種抗動脈粥樣硬化的療法，但在該領(lǐng)域仍然需要并且仍在尋找其它療法。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及式I的結(jié)晶 或者，以上式I的結(jié)晶可以命名為[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯。
另一方面，本發(fā)明涉及式I的無水結(jié)晶。
另一方面，本發(fā)明涉及具有

圖1所示的X-射線粉末衍射圖形的相應的無水結(jié)晶。
另一方面，本發(fā)明涉及式I的乙醇化物結(jié)晶。
另一方面，本發(fā)明涉及具有圖2所示的X-射線粉末衍射圖形的相應的乙醇化物結(jié)晶。
優(yōu)選的劑量是約0.01至100mg/kg/天式I的結(jié)晶。特別優(yōu)選的劑量是約0.1至10mg/kg/天式I的結(jié)晶。
在本文的以下方法、藥物組合物、聯(lián)合形式以及藥盒中，所涉及的均是式I的結(jié)晶。盡管可以理解，如果結(jié)晶是在溶液中，結(jié)晶形式是不存在的(與例如干燥的片劑形式相反)，但以下方法、藥物組合物、聯(lián)合形式和藥盒包括了使用所述結(jié)晶的方法或用所述結(jié)晶所形成的制劑(例如，施用含有結(jié)晶的油溶液的明膠膠囊)。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類，可以是男性或女性)中治療動脈粥樣硬化、外周血管疾病、血脂異常、高β脂蛋白血癥、低α脂蛋白血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、家族性高膽固醇血癥、心血管疾病、心絞痛、局部缺血、心臟缺血、中風、心肌梗塞、再灌注損傷、血管成形術(shù)再狹窄、高血壓、糖尿病的血管并發(fā)癥、肥胖或內(nèi)毒素血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用動脈粥樣硬化、外周血管疾病、血脂異常、高β脂蛋白血癥、低α脂蛋白血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、家族性高膽固醇血癥、心血管疾病、心絞痛、局部缺血、心臟缺血、中風、心肌梗塞、再灌注損傷、血管成形術(shù)再狹窄、高血壓、糖尿病的血管并發(fā)癥、肥胖或內(nèi)毒素血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療動脈粥樣硬化的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用動脈粥樣硬化治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療外周血管疾病的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用外周血管疾病治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療血脂異常的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用血脂異常治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療高β脂蛋白血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用高β脂蛋白血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療低α脂蛋白血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用低α脂蛋白血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療高膽固醇血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用高膽固醇血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療高甘油三酯血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用高甘油三酯血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療家族性高膽固醇血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用家族性高膽固醇血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療心血管疾病的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用心血管疾病治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療心絞痛的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用心絞痛治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療局部缺血的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用局部缺血性疾病治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療心臟局部缺血的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用心臟局部缺血治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療中風的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用中風治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療心肌梗塞的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用心肌梗塞治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療再灌注損傷的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用再灌注損傷治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療血管成形術(shù)再狹窄的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用血管成形術(shù)再狹窄治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療高血壓的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用高血壓治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療糖尿病的血管并發(fā)癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用糖尿病的血管并發(fā)癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療肥胖的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用肥胖治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物(包括人類)中治療內(nèi)毒素血癥的方法，該方法包括向需要所述治療的哺乳動物施用內(nèi)毒素血癥治療量的式I結(jié)晶。
本發(fā)明還涉及含有治療有效量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療動脈粥樣硬化、外周血管疾病、血脂異常、高β脂蛋白血癥、低α脂蛋白血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、家族性高膽固醇血癥、心血管疾病、心絞痛、局部缺血、心臟局部缺血、中風、心肌梗塞、再灌注損傷、血管成形術(shù)再狹窄、高血壓、糖尿病的血管并發(fā)癥、肥胖或內(nèi)毒素血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，該藥物組合物含有動脈粥樣硬化治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療外周血管疾病的藥物組合物，該藥物組合物含有外周血管疾病治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療血脂異常的藥物組合物，該藥物組合物含有血脂異常治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療高β脂蛋白血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有高β脂蛋白血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療低α脂蛋白血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有低α脂蛋白血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療高膽固醇血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有高膽固醇血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療高甘油三酯血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有高甘油三酯血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療家族性高膽固醇血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有家族性高膽固醇血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療心絞痛的藥物組合物，該藥物組合物含有心絞痛治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療局部缺血的藥物組合物，該藥物組合物含有局部缺血治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療心臟局部缺血的藥物組合物，該藥物組合物含有心臟局部缺血治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療中風的藥物組合物，該藥物組合物含有中風治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療心肌梗塞的藥物組合物，該藥物組合物含有心肌梗塞治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療再灌注損傷的藥物組合物，該藥物組合物含有再灌注損傷治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑.。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療血管成形術(shù)再狹窄的藥物組合物，該藥物組合物含有血管成形術(shù)再狹窄治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療高血壓的藥物組合物，該藥物組合物含有高血壓治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療糖尿病的血管并發(fā)癥的藥物組合物，該藥物組合物含有糖尿病的血管并發(fā)癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療肥胖的藥物組合物，該藥物組合物含有肥胖治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及用于在哺乳動物(包括人類)中治療內(nèi)毒素血癥的藥物組合物，該藥物組合物含有內(nèi)毒素血癥治療量的式I結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
本發(fā)明還涉及復方藥物組合物，該組合物含有治療有效量的含有如下成分的組合物第一種化合物，所述第一種化合物是式I的結(jié)晶；第二種化合物，所述第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白(MTP)/Apo B分泌抑制劑、PPAR激活劑、膽酸重吸收抑制劑、膽固醇吸收抑制劑、膽固醇合成抑制劑、氯貝特類、煙酸、離子交換樹脂、抗氧劑、ACAT抑制劑或膽酸螯合劑；和/或選擇性的藥物載體、賦形劑或稀釋劑。
優(yōu)選的第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑和MTP/Apo B分泌抑制劑。
特別優(yōu)選的HMG-CoA還原酶抑制劑是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀或利伐他汀。
本發(fā)明的另一方面涉及在哺乳動物中治療動脈粥樣硬化的方法，該方法包括向患有動脈粥樣硬化的哺乳動物施用第一種化合物，所述第一種化合物是式I的結(jié)晶；和第二種化合物，所述第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑、MTP/Apo B分泌抑制劑、膽固醇吸收抑制劑、膽固醇合成抑制劑、氯貝特類、煙酸、離子交換樹脂、抗氧劑、ACAT抑制劑或膽酸螯合劑；其中第一種和第二種化合物的量可以產(chǎn)生治療效果。
在上述方法的一個優(yōu)選的方面，第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑或MTP/Apo B分泌抑制劑。
在上述方法的一個特別優(yōu)選的方面，其中的HMG-CoA還原酶抑制劑是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀或利伐他汀。
本發(fā)明的另一方面涉及一種藥盒，該藥盒含有a.在第一單位劑量形式中的第一種化合物和可藥用載體，所述第一種化合物是式I的結(jié)晶；b.在第二單位劑量形式中的第二種化合物和可藥用載體，所述第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑、MTP/Apo B分泌抑制劑、膽固醇吸收抑制劑、膽固醇合成抑制劑、氯貝特類、煙酸、離子交換樹脂、抗氧劑、ACAT抑制劑或膽酸螯合劑；和c.用于包含所述第一和第二劑量形式的容器，其中第一種和第二種化合物的量可以產(chǎn)生治療效果。
優(yōu)選的第二種化合物是HMG-CoA還原酶抑制劑或MTP/Apo B分泌抑制劑。
特別優(yōu)選的HMG-CoA還原酶抑制劑是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀或利伐他汀。
本發(fā)明還涉及制備結(jié)晶狀的無水[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯的方法，該方法包括將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在適宜的有機溶劑、優(yōu)選己烷的存在下溶解或混合。
本發(fā)明的另一方面涉及制備結(jié)晶狀的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯乙醇化合物的方法，該方法包括將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在乙醇/水中于室溫下溶解或混合約0.5至約18小時。優(yōu)選使用不含水的乙醇。
本發(fā)明還涉及制備結(jié)晶狀的無水[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯的方法，該方法包括將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在乙醇中于室溫下溶解或混合約2至約24小時。
我們注意到，無水結(jié)晶和乙醇化物結(jié)晶處于不同的能級，用無水形式還是乙醇化物作為晶種將會決定所分離的結(jié)晶形式。正如本領(lǐng)域已知的，在實驗室的空氣中存在的晶種可能足以“引入晶種”。在一個實施方案中，無水的結(jié)晶可以用己烷得到，所形成的無水結(jié)晶可作為晶種用來從乙醇中生產(chǎn)無水的結(jié)晶。
本文所用的術(shù)語“哺乳動物”是指所有在其血漿中含有CETP的哺乳動物，例如兔子和靈長目例如猴子和人。某些其他的哺乳動物例如狗、貓、牛、山羊、綿羊和馬，在其血漿中不含CETP，因此不包括在內(nèi)。
術(shù)語“乙醇化物”是指溶劑化的乙醇。
本文所用的術(shù)語“治療”包括預防性和緩解性的治療。
“可藥用的”是指載體、溶媒、稀釋劑、賦形劑和/或鹽必需與制劑的其它成分能夠相容，并且對使用者無害。
本文所用的表達方式“反應惰性的溶劑”和“惰性溶劑”是指不會以對所需產(chǎn)物的收率產(chǎn)生不利影響的方式與原料、試劑、中間體或產(chǎn)物相互作用的溶劑或溶劑混合物。
可以理解，本發(fā)明的化合物可以以放射性標記的形式存在，即，所述化合物可以含有一個或多個所含的原子質(zhì)量或原子數(shù)不同于自然界中存在的原子質(zhì)量或原子數(shù)的原子。氫、碳、磷、氟和氯的放射性同位素分別包括3H、14C、32P、35S、18F和36Cl。含有這些放射性同位素和/或其它原子的其它放射性同位素的本發(fā)明化合物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。特別優(yōu)選氚(即3H)和碳-14(即14C)放射性同位素，因其易于制備和檢測。放射性標記的本發(fā)明化合物通?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法進行制備。通常，所述放射性標記的化合物可以通過以下實施例中公開的方法，用易得的放射性標記的試劑代替非放射性標記的試劑來制備。
根據(jù)描述發(fā)明的說明書和權(quán)利要求書，其它的特點和優(yōu)點將是顯而易見的。
附圖概述圖1是表明無水的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯是結(jié)晶的特征性x-射線粉末衍射圖型。(縱軸強度(CPS)；橫軸2θ(度))圖2是結(jié)晶狀的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯乙醇化物的特征性x-射線粉末衍射圖型。(縱軸強度(CPS)；橫軸2θ(度))發(fā)明詳述總的來說，本發(fā)明的化合物可以通過包括化學領(lǐng)域已知的類似方法在內(nèi)的方法來制備，特別是可以按照本文的描述進行制備。某些生產(chǎn)本發(fā)明化合物的方法構(gòu)成了本發(fā)明另外的特點，并在以下進行描述，包括在實施例中進行描述。
本發(fā)明化合物[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯的無定形形式按照如下描述制備(參見實施例1)。
上述化合物的無水結(jié)晶形式可以從無定形的化合物通過在己烷(由己烷異構(gòu)體(例如正己烷、環(huán)己烷、甲基戊烷等)組成的溶劑)中、在約40℃至約80℃、優(yōu)選60℃的溫度下重結(jié)晶進行制備，隨后通常還?；s2至約24小時，然后過濾并晾干。
或者，無水的結(jié)晶可以從乙醇化物結(jié)晶形式(如下所述)利用與上述方法類似的方法制備。此外，可以通過從己烷中共沸除去乙醇來提高該方法的收率。
上述化合物的乙醇化物結(jié)晶形式可以從無定形的化合物通過用乙醇/水在約20℃至約25℃、優(yōu)選在室溫下重結(jié)晶約0.5小時至約18小時來制備。通常的范圍是約3％至約10％的乙醇和約90％至約97％的水。優(yōu)選該比例是約10％至約90％的乙醇/水。
或者，乙醇化物結(jié)晶形式可以采用與以上描述類似的方法但單獨使用乙醇來制備。濾出的物質(zhì)通常?；s2小時至約24小時然后晾干。
下表1詳細描述了三種形式的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯無定形的(A)；和兩種結(jié)晶形式乙醇化物(B)和無水結(jié)晶(C)的重要性質(zhì)。
表1熱穩(wěn)定性 結(jié)晶性 溶解度 穩(wěn)定性
無定形A1乙醇化物B(圖2)無水結(jié)晶C(圖1)1在密封的瓶子中在周圍環(huán)境條件下失去部分乙醇，但仍然是結(jié)晶狀的。
本發(fā)明的化合物可以口服給藥，因此可與適于口服劑量形式的可藥用賦形劑、載體或稀釋劑一起使用。適宜的可藥用載體包括惰性固體填充劑或稀釋劑以及無菌的水溶液或有機溶液?；钚曰衔镌谒鏊幬锝M合物中的存在量應足以提供在下述范圍內(nèi)的所需劑量。因此，對于口服給藥，可將化合物與適宜的固體或液體載體或稀釋劑混合以形成膠囊、片劑、散劑、糖漿、溶液劑、混懸劑等。如需要，藥物組合物還可以含有其它成分例如矯味劑、甜味劑、賦形劑等。
片劑、丸劑、膠囊等還可以含有粘合劑例如西黃著膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；賦形劑例如磷酸二鈣；崩解劑例如玉米淀粉、土豆淀粉、藻酸；潤滑劑例如硬脂酸鎂以及甜味劑例如蔗糖、乳糖或糖精。當劑量單位形式是膠囊例如凝膠膠囊時，除上述類型的物質(zhì)外，它還可以含有液體載體例如脂肪酸甘油酯或脂肪酸甘油酯的混合物，例如橄欖油或MiglyolTM或CapmulTM甘油酯。劑量形式還可以包括口服混懸液。
還可以存在各種其它物質(zhì)作為包衣劑或者用來改變劑量單位的物理形式。例如，片劑可用紫膠、糖或同時用這兩種物質(zhì)進行包衣。除活性成分外，糖漿或酏劑可以含有蔗糖作為甜味劑、對羥基苯甲酸甲酯和丙酯作為防腐劑、染料和矯味劑例如櫻桃或橙香精。
本發(fā)明的化合物還可以胃腸外給藥。對于胃腸外給藥，可將該化合物與無菌的含水或有機溶媒混合以形成可注射溶液或混懸液。然后可將以該方式制得的可注射溶液靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下或肌肉內(nèi)給藥。
適于注射應用的藥物形式包括無菌溶液或分散液以及用于現(xiàn)場制備無菌可注射溶液或分散液的無菌粉末。無論如何，該劑型必需是無菌的并且必需是易于注射的液體。其在生產(chǎn)和存放的條件下必需是穩(wěn)定的，并且必需能夠防止微生物例如細菌和真菌的污染。它們可以通過例如用能夠阻留細菌的濾紙過濾、通過向組合物中摻入滅菌劑或者當輻射或加熱適用于藥物制劑時，通過輻射或加熱組合物來滅菌。
其它藥物制劑可以包括栓劑、舌下含片、局部制劑形式等，這些制劑可以按照本領(lǐng)域公認的方法進行制備。
控釋、持續(xù)釋放和延遲釋放的口服或胃腸外組合物也可使用。
本發(fā)明化合物的給藥劑量通常按照本領(lǐng)域公知的原則并考慮到所治療病癥的嚴重程度以及給藥途徑而改變。通常，可將化合物向溫血動物(例如人、家畜或?qū)櫸?給藥從而使其能夠接受有效劑量、通常是以單一或分開的部分給藥的每日劑量、例如約0.01至約100mg/kg/天體重、優(yōu)選約0.1至約10mg/kg/天體重的劑量。上述劑量是一般情況的示范性劑量，當然，有些個體可能會需要更高和更低的劑量，而這些偏差也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
實施例熔點用Thomas Hoover熔點儀或DSC儀器測定。若無另外說明，NMR波譜均使用CD3Cl3。微量分析由Schwarzkopf微量分析實驗室進行。所有試劑和溶劑均是購得的并且不經(jīng)純化直接使用。
實施例1順-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧基羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯將順-4-(3，5-二-三氟甲基-芐基氨基)-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(2.0g，3.7mmol)和吡啶(0.58g，7.4mmol)的100ml二氯甲烷溶液在冰/水浴中冷卻并緩慢加入氯甲酸甲酯(0.87g，9.2mmol)。室溫攪拌過夜后，將反應混合物用2N鹽酸溶液洗滌兩次，用硫酸鎂干燥，過濾然后真空濃縮得到粗產(chǎn)物，將其通過硅膠色譜純化，用5-10％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑得到1.8g標題產(chǎn)物。MS m/z 601(M++1)；1H NMR(構(gòu)象異構(gòu)體的聚結(jié)混合物，CDCl3)δ0.6-0.8(bm，3H)，1.2-1.3(bm，3H)，1.3-1.5(bm，2H)，1.6-1.75(bm，1H)，2.1-2.3(bm，1H)，3.7-3.9(bs，3H)，4.0-4.4(bm，4H)，5.0-5.6(bm，2H)，7.1(s，1H)，7.4-7.6(bm，2H)，7.6-7.8(bm，3H)。
通過用常規(guī)方法拆分相應的外消旋體或其合成中間體制得旋光富集形式的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯。
實施例2(1-苯并三唑-1-基-丙基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺氮氣氛下，向2L的四頸燒瓶中加入苯并三唑(36.96g，310mmol，1.0當量)和干燥的甲苯(400ml)。于1分鐘內(nèi)加入室溫下的4-(三氟甲基)苯胺(39.1mL，310mmol，1.0當量)和50ml甲苯的溶液。然后于20分鐘內(nèi)加入室溫下的丙醛(24.6ml，341mmol，1.1當量)和50ml甲苯的溶液。在加料過程中，反應放熱，溫度從23℃升至30℃。攪拌24小時后，加入正庚烷(500ml)，然后將漿液繼續(xù)攪拌1小時。將懸浮液過濾，將固體用正庚烷洗滌(1×100mL，然后是1×200mL)然后干燥。分離得到有光澤的白色針狀(1-苯并三唑-1-基-丙基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺(81.3g，82％)。24小時后，從濾液中分離出第二批產(chǎn)物(8.7g，9％)。mp 130-132℃；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ0.82(t，3H，J＝7.5Hz)，2.25(m，2H)，6.49(m，1H)，6.80(d，2H，J＝8.7Hz)，7.35(m，3H)，7.50(m，1H)，7.88(d，H，J＝8.3Hz)，7.99(m，1H)，8.09(d，1H，J＝8.5Hz)；13C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ149.32，146.19，131.46，127.73，126.8，125.33(q，J＝270Hz)，124.44，119.88，118.27(q，J＝31.7Hz)，112.91，111.56，71.03，28.08，10.29；DEPT波譜季碳δ149.32，146.19，131.46，125.33，118.27；CH碳δ127.73，126.8，124.44，119.88，112.91，111.56，71.03；CH2碳δ28.08；CH3碳δ10.29；IR(漂移)3292(s)，3038(m)，2975(m)，1621(s)，1331(s)，1320(s)，1114(vs)；分析計算值C16H15N4F3C，59.99；H，4.72；N，17.49。實測值(第一批)C，60.16；H，4.74；N，17.86。實測值(第二批)C，59.97；H，4.66；N，17.63。
實施例3順-(2-乙基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基)-氨基甲酸芐酯氮氣氛下，向1L的四頸燒瓶中加入N-乙烯基-氨基甲酸芐酯(27.66g，156mmol，1.0當量)和干燥的甲苯(500ml)。加入(1-苯并三唑-1-基-丙基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺(50.0g，156mmol，1.0當量)和對甲苯磺酸一水合物(297mg，1.56mmol，0.01當量)，將混合物加熱至70℃。2小時后，將混合物冷卻至室溫然后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。加入乙酸乙酯(500ml)。將混合物用1×200mL 1N NaOH、1×200mL H2O、1×200mL鹽水洗滌然后干燥(MgSO4)。將混合物過濾然后將固體用1×50mL乙酸乙酯洗滌。將濾液濃縮至約250mL。加入500mL甲苯，然后將混合物濃縮至約500mL。加入500mL正庚烷，將漿液攪拌1小時，用布氏漏斗過濾然后干燥。分離得到白色粉末狀的順-(2-乙基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基)-氨基甲酸芐酯(45.04g，76％)mp 155-157℃；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ0.92(t，3H，J＝7.5Hz)，1.5(m，3H)，2.00(m，1H)，3.35(m，1H)，4.77(m，1H)，5.07(d，1H，J＝12.5Hz)，5.15(d，1H，J＝12.5Hz)，6.35(s，1H)，6.61(d，1H，J＝8.5Hz)，7.12(s，1H)，7.18(dd，1H，J＝1.9，8.5Hz)，7.4(m，5H)，7.70(d，1H，J＝9.1Hz)；13C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ157.03，149.02，137.79，128.82，128.23，128.03，125.9(q，J＝270 Hz)，125.06，123.50，121.73，115.2(q，J＝31.7Hz)，113.33，65.85，52.09，47.83，34.02，28.68，9.93；DEPT波譜季碳δ157.03，149.02，137.79，125.9，121.73，115.2；CH碳δ128.82，128.23，128.03，125.06，123.50，113.33，52.09，47.83；CH2碳δ65.85，34.02，28.68；CH3碳δ9.93；IR(漂移)3430(m)，3303(s)，2951(m)，1686(vs)，1542(vs)，1088(vs)；MS(APCI+)m/z(相對強度)379(M+H+，53)，228(100)；分析計算值C20H21N2O2F3C，63.48；H，5.59；N，7.40；實測值C，63.69；H，6.06，N，7.36。
實施例4順-4-芐氧羰基氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯氮氣氛下，向3L的四頸燒瓶中加入順-(2-乙基-6-三氟甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-4-基)-氨基甲酸芐酯(96.0g，254mmol，1.0當量)、干燥二氯甲烷(720ml)和干燥吡啶(103ml，1.27mol，5.0當量)。于4小時內(nèi)緩慢加入氯甲酸乙酯(121ml，1.27mol，5.0當量)的干燥二氯甲烷(240ml)溶液。氯甲酸酯加料結(jié)束后，立即將反應液在冰浴中冷卻并加入1350mL 1N NaOH。將混合物攪拌15分鐘，然后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。分層并將水層用1×1L二氯甲烷洗滌。將合并的二氯甲烷層用1×1350mL 1N HCl、1×1L飽和NaHCO3水溶液、1×L鹽水洗滌然后干燥(Na2SO4)。將混合物過濾，將濾液濃縮成橙色油狀。加入570mL無水乙醇并將溶液濃縮。將固體溶于1370mL無水乙醇。在45分鐘內(nèi)滴加570mL H2O。將形成的粘稠漿液攪拌18小時然后過濾。將固體用冷的7∶3無水乙醇/水洗滌(1×250mL，然后是1×100mL)然后干燥(真空烘箱，45℃)得到白色結(jié)晶固體狀的順-4-芐氧羰基氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(94.54g，83％)mp 92-96℃；1HNMR(CDCl3，400MHz)δ0.84(t，3H，J＝7.4Hz)，1.28(t，3H，J＝7.0Hz)，1.4(m，2H)，1.62(m，1H)，2.53(m，1H)，4.23(m，2H)，4.47(m，1H)，4.79(m，1H)，5.01(d，1H，J＝9.2Hz)，5.18(m，2H)，7.4(m，5H)，7.5(m，2H)，7.57(m，1H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ155.97，154.43，139.44，136.21，134.33，128.61，128.33，128.22，126.32(q，J＝31.7Hz)，126.18，124.22，124.19，124.12(q，J＝273Hz)，120.74，120.70，67.22，62.24，53.47，46.79，37.75，28.25，14.38，9.78；DEPT波譜季碳δ155.97，154.43，139.44，136.21，134.33，126.32，124.12；CH碳δ128.61，128.33，128.22，126.18，124.22，124.19，120.74，120.70，53.47，46.79；CH2碳δ 67.22，62.24，37.75，28.25；CH3碳δ14.38，9.78；IR(漂移)3304(s)，3067(m)，3033(m)，2982(m)，2932(m)，1723(s)，1693(s)，1545(s)；MS(APCI+)m/z(相對強度)451(M+H+，2)，300(100)；分析計算值C23H25N2O4F3C，61.33；H，5.60；N，6.22。實測值C，61.07；H，5.69；N，6.22。
實施例5順-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯氮氣氛下，向1L的四頸燒瓶中加入順-4-芐氧羰基氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(40.1g，89mmol，1.0當量)、甲醇(400mL)和甲酸銨(14.0g，223mmol，2.5當量)。加入10％Pd/C(含50％的水，4.0g)并將該漿液在1小時內(nèi)加熱至40℃。1.5小時后，將混合物冷卻至室溫并用硅藻土過濾。將濾餅用2×100mL甲醇洗滌。將濾液濃縮至約75mL，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并用400mL乙酸乙酯稀釋。將混合物用1×125mL飽和NaHCO3水溶液、1×100mL鹽水洗滌然后干燥(Na2SO4)。將混合物過濾并將濾液濃縮成澄清的油。將該油用100mL正庚烷結(jié)晶得到白色結(jié)晶固體狀的順-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(26.05g，93％)mp 61.5-63.5℃；1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ0.79(t，3H，J＝7.5Hz)，1.24(m，4H)，1.42(m，1H)，1.51(brs，2H)，1.62(m，1H)，2.46(m，1H)，3.73(m，1H)，4.17(m，2H)，4.36(m，1H)，7.44(m，2H)，7.66(m，1H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ154.6，139.3，138.9，126.3(q，J＝32Hz)，125.7，124.3(q，J＝271Hz)，123.5，119.8，61.96，54.16，46.91，41.50，28.85，14.38，9.60；DEPT波譜季碳δ154.6，139.3，138.9，126.3，124.3；CH碳δ125.7，123.5，119.8，54.16，46.91；CH2碳δ61.96，41.50，28.85；CH3碳δ14.38，9.60；IR(漂移)3350(s)，3293(m)，2972(s)，1697(vs)；MS(ES+)m/z(相對強度)358(M+H+CH3CN+，55)，317(M+H+，7)，300(100)；分析計算值C15H19N2O2F3C，56.96；H，6.06；N，8.86。實測值C，56.86；H，6.28；N，8.82。
實施例6(-)(2R，4S)-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯半-(-)-二苯甲?；?L-酒石酸鹽氮氣氛下，向1L的燒瓶中加入順-4-芐氧羰基氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(24.0g，75.9mmol，1.0當量)和(-)二苯甲酰基-L-酒石酸(無水的)(27.19g，75.9mmol，1.0當量)。加入300mL約97％的乙醇(通過將10.5mL H2O加入500mL無水乙醇中、混合進行制備，然后量出300mL)。將混合物室溫攪拌18小時然后過濾。將固體用1×48mL約97％的乙醇洗滌然后干燥得到白色結(jié)晶固體狀的(-)(2R，4S)-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯半-(-)-二苯甲?；?L-酒石酸鹽(14.77g，39％)mp 189.5-191.5℃(分解)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ0.62(t，3H，J＝7.3Hz)，1.16(t，3H，J＝7.1Hz)，1.3(m，3H)，2.5(m，1H)，4.1(m，4H)，5.63(s，1H，DBTA中的次甲基部分)，7.47(m，2H，DBTA的芳香族H)，7.6(m，3H，DBTA的芳香族H)，7.68(s，1H)，7.95(m，2H)，8.2(br s，NH3+，未積分)；13C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ169.85，165.53，154.10，140.14，134.59，133.51，130.74，129.69，128.98，126.74，124.82(q，J＝31.7Hz)，124.69(q，J＝271Hz)，124.50，120.90，74.49，62.14，53.51，45.94，38.81，28.23，14.63，9.58；DEPT波譜季碳δ169.85，165.53，154.10，140.14，134.59，130.74，124.82，124.69；CH碳δ133.51，129.69，128.98，126.74，124.50，120.90，74.49，53.51，45.94；CH2碳δ62.14，38.81，28.23；CH3碳δ14.63，9.58；IR(漂移)3278(m)，2400-3100(寬)，1703(vs)；MS(ES+)m/z(相對強度)358(M+H+CH3CN+，55)，317(M+H+，7)，300(100)；分析計算值C15H19N2O2F3·C9H7O4C，58.18；H，5.29；N，5.65。實測值C，57.99；H，5.15；N，5.64；手性HPLC流動相950∶50∶2正己烷2-丙醇HOAc，流速1.50mL/分鐘，柱溫40℃，chiralpakTMAD 4.6×250mm，樣品濃度約為0.5mg/mL約1∶1的正己烷2-丙醇。可信的外消旋體顯示的保留時間為7.5分鐘和10.0分鐘。(-)(2R，4S)-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯半-(-)-二苯甲?；?L-酒石酸鹽10.0分鐘，88.9％，7.5分鐘＜＜1％，2.0分鐘(溶劑前沿)11.1％；[α]D＝-153(c＝1.07，CH3OH)。
實施例7(-)-(2R，4S)-4-(3，5-二-三氟甲基-芐基氨基)-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯甲苯磺酸鹽將(-)(2R，4S)-4-氨基-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯半-(-)-二苯甲?；?L-酒石酸鹽(13.0g，26.2mmol，1.0當量)在500mL分液漏斗中懸浮在1，2-二氯乙烷(260ml)中。將該混合物用1×65mL 1N NaOH、1×65mL鹽水洗滌然后干燥(MgSO4)。將混合物過濾，濃縮至約80mL然后轉(zhuǎn)移至250mL三頸燒瓶中。加入3，5-二(三氟甲基)苯甲醛(4.53ml，27.5mmol，1.05當量)然后將該混合物在氮氣氛下室溫攪拌1小時。一次性加入三乙酰氧基硼氫化鈉(11.1g，52.4mmol，2.0當量)并將該白色的漿液攪拌18小時。加入50mL1，2-二氯乙烷和50mL 2N NaOH，將水層用2×50mL 1，2-二氯乙烷萃取。將合并的有機萃取液用1×31mL 1N HCl、1×50mL飽和NaHCO3水溶液、1×50mL鹽水洗滌然后干燥(Na2SO4)。將混合物過濾然后濃縮成澄清的油。將該油溶于甲醇(71mL)。加入對甲苯磺酸一水合物(5.23g，27.5mmol，1.05當量)。15分鐘后，加入284mL異丙基醚。將溶液濃縮至約35mL，轉(zhuǎn)移至500mL三頸燒瓶中(機械攪拌器)并用284mL異丙基醚稀釋。在10分鐘內(nèi)形成粘稠的白色漿液。攪拌3小時后，將漿液過濾并將濾餅用2×70ml異丙基醚洗滌。干燥后，分離得到白色粉末狀的(-)-(2R，4S)-4-(3，5-二-三氟甲基-芐基氨基)-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯甲苯磺酸鹽(16.18g，86％總收率)mp191-192℃；1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ0.78(t，3H，J＝7.5Hz)，1.21(t，3H，J＝7.0Hz)，1.5(m，3H)，2.24(s，3H)，3.08(m，1H)，4.17(m，2H)，4.41(m，1H)，4.50(m，2H)，4.79(m，1H)，7.04(d，2H，J＝7.9Hz)，7.42(d，2H，J＝7.9Hz)，7.7(m，2H)，7.81(s，1H)，8.21(s，1H)，8.35(s，2H)，9.58(br s，1H)，9.83(br s，1H)；13C NMR(DMSO-d6，100MHz)δ154.00，145.46，140.21，138.39，135.33，132.51，131.62，130.79(q，J＝33.2Hz)，128.49，127.40，125.82，125.36，124.99(q，J＝31.7Hz)，124.59(q，J＝271Hz)，123.69(q，J＝273Hz)，123.44，120.33，62.32，53.99，53.79，47.98，33.30，28.61，21.13，14.63，9.58；DEPT波譜季碳δ154.00，145.46，140.21，138.39，135.33，130.79，124.99，124.59，123.69；CH碳δ132.51，131.62，128.49，127.40，125.82，125.36，123.44，120.33，53.99，53.79；CH2碳δ62.32，47.98，33.30，28.61；CH3碳δ21.13，14.63，9.58IR(漂移)2300-3100(寬)，2974(m)，2731(m)，2620(m)，2455(m)，1714(s)，1621(m)，1283(vs)，1169(vs)，1126(vs)；MS(ES+)m/z(相對強度)584(M+H+CH3CN+，100)，543(M+H+，80)；分析計算值C24H23N2O2F9·C7H8O3SC，52.11；H，4.37；N，3.92。實測值C，52.15；H，4.22；N，3.69；[α]D＝-77.9(c＝1.05，CH3OH)。
實施例8(-)-(2R.4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯一乙醇化物將Na2CO3(固體)(6.75g，63.7mmol，3.5當量)加入到室溫下的(-)-(2R，4S)-4-(3，5-二-三氟甲基-芐基氨基)-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯甲苯磺酸鹽(13.0g，18.2mmol，1.0當量)的干燥THF(130mL)溶液中。在2分鐘內(nèi)滴加氯甲酸甲酯(3.51mL，45.5mmol，2.5當量)。24小時后，將混合物濃縮至65mL，用260mL乙酸乙酯稀釋然后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。將混合物用1×90mL 1N HCl(CO2溢出)、1×90mL飽和NaHCO3水溶液、1×90mL鹽水洗滌然后干燥(MgSO4)。過濾并將濾液濃縮得到澄清的油，將其用3×33mL 2B乙醇共反萃。將油溶于33mL 2B乙醇并用數(shù)毫克(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯一乙醇化物接種。室溫攪拌18小時后，將漿液過濾然后干燥得到白色結(jié)晶粉末狀(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯一乙醇化物(8.66g，74％)mp 54-58℃；1H NMR(CDCl3，400MHz，55℃)δ0.73(t，3H，J＝7.0Hz)，1.20(t，EtOH)，1.27(t，3H，J＝7.1Hz)，1.42(m，2H)，1.66(m，1H)，2.25(br s，1H)，3.67(q，EtOH)，3.79(s，3H)，4.2(m，3H)，4.33(m，1H)，5.2(br s，2H)，7.12(s，1H)，7.49(d，1H，J＝8.3Hz)，7.57(d，1H，J＝8.5Hz)，7.73(s，2H)，7.78(s，1H)；13C NMR(CDCl3，400MHz)δ157.74，154.37，141.73，140.05，133.83，132.14(q，J＝33Hz)，126.94，124.49，123.96(q，J＝273Hz)，123.13(q，J＝273Hz)，121.31，119.17，62.29，58.28，54.42，53.71，53.08，46.67，37.01，29.02，18.29，14.32，9.22(注第四個四重峰似乎埋在了δ126.94的峰下面，J約為32Hz)；DEPT波譜季碳δ157.74，154.37，141.73，140.05，133.83，132.14，123.96，123.13；CH碳δ126.94，124.49，121.31，119.17，54.42，53.08；CH2碳δ62.29，58.28，46.67，37.01，29.02；CH3碳δ53.71，18.29，14.32，9.22；IR(漂移)3489(s)，2974(s)，2884(m)，1701(vs)，1280(vs)，1131(vs)；MS(ES+)m/z(相對強度)601(M+H+，100)；分析計算值C26H25N2O4F9·C2H6OC，52.01；H，4.83；N，4.33。實測值C，51.84；H，4.54；N，4.33；手性HPLC流動相950∶50∶2正己烷2-丙醇HOAc，流速1.0mL/分鐘，254nm，chiralpak AD 4.6×250mm，柱溫40℃，樣品濃度約為0.5mg/mL 90∶10正己烷2-丙醇，可信的外消旋體保留時間為3.6和4.6分鐘。(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯一乙醇化物顯示4.6分鐘，99.1％和3.6分鐘，未測定；[α]D＝-93.3(c＝1.08，CH3OH)。
實施例9無水的(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯將2.6g 4(S)-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2(R)-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(主要是無定形的物質(zhì)和少量乙醇化物結(jié)晶顯示的混合物；標題化合物以類似的方式從純凈的無定形或純凈的乙醇化物制備)加入13mL己烷中并于約60℃下加熱以形成溶液。停止加熱并使反應液在1小時內(nèi)冷卻至室溫。將反應液用無水的(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯接種并在周圍環(huán)境條件下粒化18小時。或者，無水的結(jié)晶可以在不加入晶種的條件下從己烷中制備。過濾收集產(chǎn)物然后晾干。分離出的產(chǎn)物的X射線圖型與計算出的粉末圖型相符。密度1.406晶系三角形顯微鏡檢查當通過C軸觀察時，形狀良好的棒狀和等徑的(破碎的棒)結(jié)晶會顯示很高的雙折射。由于處于三角形晶系，當通過C軸觀察時，該結(jié)晶不顯示雙折射。結(jié)晶顯示與C軸垂直的裂開面。熔融顯微鏡檢查在A型油中-------于50℃溶解。
干燥的-----------于86℃清晰地熔化。NMR沒有痕量的乙醇化物結(jié)晶度高度結(jié)晶狀的吸濕性在100％相對濕度下48小時是非吸濕性的。外觀自由流動的白色粉末。在表2中提供了X射線衍射d-間距。
表2陽極CU-波長11.54056波長21.54439(相對強度0.500)級差#1-偶合的3.000至40.000步長0.040步長時間1.00平滑寬度0.300閾值1.0
實施例10一乙醇化物，(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯將4.0g(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯溶于3.5ml乙醇然后超聲2分鐘以完全溶解。形成白色固體，向其中加入10ml乙醇并在室溫下攪拌過夜。濾出白色粉末并收集在0.22μm LS濾紙上，然后用約15ml乙醇洗滌。分離出的產(chǎn)物的X射線圖型與計算出的粉末圖型相符。密度1.402晶系正交晶顯微鏡檢查具有中等雙折射的針狀結(jié)晶熔融顯微鏡檢查在A型油中-----于43℃熔融并溶解同時失去水分干燥的---------于43℃清晰地熔化。NMR顯示溶劑化的乙醇結(jié)晶度高度結(jié)晶狀的吸濕性非吸濕性的。外觀自由流動的白色粉末。在表3中提供了X射線衍射d-間距。
表3陽極CU-波長11.54056波長21.54439(相對強度0.500)級差#1-偶合的3.000至40.000步長0.040步長時間1.00平滑寬度0.300閾值1.0
實施例11無水的(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯將約42g(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在500ml乙酸乙酯中的粗品溶液(通過實施例8中描述的方法制得)真空濃縮至體積為100-135ml。將剩余的乙酸乙酯用3×220ml 2B EtOH替換至終體積為100-135ml。將該溶液用無水的(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯結(jié)晶接種。室溫下攪拌18小時后，將該漿液過濾然后真空干燥得到19.81g無水的(-)-(2R，4S)-4-[(3，5-二-三氟甲基芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯。其熔點特性與實施例9制得的物質(zhì)相同，證實了該物質(zhì)的無水特性。
權(quán)利要求
1.式I化合物的結(jié)晶形式
2.無水的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯的結(jié)晶。
3.[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯乙醇化物的結(jié)晶。
4.權(quán)利要求1的結(jié)晶，該結(jié)晶是無水的結(jié)晶，具有如下X射線粉末衍射d-間距陽極CU-波長11.54056波長21.54439(相對強度0.500)級差#1-偶合的3.000至40.000步長0.040步長時間1.00平滑寬度0.300閾值1.0
5.權(quán)利要求1的結(jié)晶，該結(jié)晶是乙醇化物結(jié)晶，具有如下X射線粉末衍射d-間距陽極CU-波長11.54056波長21.54439(相對強度0.500)級差#1-偶合的3.000至40.000步長0.040步長時間1.00平滑寬度0.300閾值1.0
6.藥物組合物，其含有治療有效量的權(quán)利要求1的結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
7.權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中的藥物組合物含有動脈粥樣硬化、外周血管疾病、血脂異常、高β脂蛋白血癥、低α脂蛋白血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、家族性高膽固醇血癥、心血管疾病、心絞痛、局部缺血、心臟局部缺血、中風、心肌梗塞、再灌注損傷、血管成形術(shù)再狹窄、高血壓、糖尿病的血管并發(fā)癥、肥胖或內(nèi)毒素血癥治療量的權(quán)利要求1的結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
8.權(quán)利要求6所述的用于治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其含有動脈粥樣硬化治療量的式I的結(jié)晶和可藥用載體、賦形劑或稀釋劑。
9.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其中，式I結(jié)晶的動脈粥樣硬化治療量是約0.1至10mg/kg/天，并且該藥物組合物通過將權(quán)利要求1的結(jié)晶溶于不揮發(fā)油制得。
10.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其中式I的結(jié)晶是無水的。
11.權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其中式I的結(jié)晶是乙醇化物結(jié)晶。
12.在有需要的哺乳動物中抑制CETP的方法，該方法包括施用CETP抑制量的權(quán)利要求1所述的式I結(jié)晶。
13.權(quán)利要求12所述的方法，該方法包括，通過向需要治療的哺乳動物施用治療有效量的式I結(jié)晶來治療動脈粥樣硬化、外周血管疾病、血脂異常、高β脂蛋白血癥、低α脂蛋白血癥、高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥、家族性高膽固醇血癥、心血管疾病、心絞痛、局部缺血、心臟局部缺血、中風、心肌梗塞、再灌注損傷、血管成形術(shù)再狹窄、高血壓、糖尿病的血管并發(fā)癥、肥胖或內(nèi)毒素血癥。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中，用動脈粥樣硬化治療量的式I結(jié)晶來治療動脈粥樣硬化。
15.權(quán)利要求14所述的方法，其中式I結(jié)晶的動脈粥樣硬化治療量是約0.1至10mg/kg/天，并且式I的結(jié)晶溶于不揮發(fā)油中。
16.權(quán)利要求15所述的方法，其中式I的結(jié)晶是無水的。
17.權(quán)利要求15所述的方法，其中式I的鹽是乙醇化物。
18.制備無水的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯結(jié)晶的方法，該方法包括，將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在己烷中、在室溫下溶解或混合約2至約24小時，其中所述的前體不是無水的結(jié)晶形式。
19.制備[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯的乙醇化物結(jié)晶的方法，該方法包括，將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在乙醇/水中、在室溫下溶解或混合約0.5至約18小時，其中所述的前體不是結(jié)晶狀的乙醇化物形式。
20.權(quán)利要求19所述的方法，其中使用不含水的乙醇。
21.制備無水的[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯結(jié)晶的方法，該方法包括，將[2R，4S]4-[(3，5-二-三氟甲基-芐基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-甲酸乙酯在乙醇中、在室溫下溶解或混合約2至約24小時，其中所述的前體不是無水的結(jié)晶形式。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)的CETP抑制劑的結(jié)晶形式、制備該結(jié)晶的方法、使用該結(jié)晶的方法以及含有該結(jié)晶的藥物組合物。
文檔編號A61P31/04GK1402711SQ00816463
公開日2003年3月12日 申請日期2000年11月14日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月30日
發(fā)明者D·J·M·艾倫, T·A·阿普勒頓, L·R·布羅斯特穆, D·L·逖克尼爾 申請人:輝瑞產(chǎn)品公司