專利名稱：β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及新穎的多結(jié)合性化合物(活性劑)，它們是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑、部分激動(dòng)劑，和包含這類化合物的藥物組合物。因此，本發(fā)明的多結(jié)合性化合物和藥物組合物可用于治療和預(yù)防呼吸疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病和慢性支氣管炎。它們還可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)損傷和早產(chǎn)。
參考文獻(xiàn)本申請(qǐng)引用下列出版物，以上標(biāo)數(shù)字表示1Hardman，J.G.等，“The Pharmacological Basis ofTherapeutics”(治療劑的藥理學(xué)基礎(chǔ))，McGraw-Hill，New York，(1996).2Strosberg，A.D.，“Structure，F(xiàn)unction and Regulation ofAdrenergic Receptors”(腎上腺素能受體的結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)節(jié))Protein Sci.(蛋白質(zhì)科學(xué))2，1198-1209(1993).3Beck-Sickinger，A.G.，“Structure Characterization andBinding Sites of G-Protein-coupled Receptors”(G-蛋白偶聯(lián)受體的結(jié)構(gòu)特征鑒別與結(jié)合部位)DDT，1，502-513，(1996).4Hein，L.& Kobilka，B.K.“Adrenergic Receptor SignalTransduction and Regulation”(腎上腺素能受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與調(diào)節(jié))Neuropharmacol.(神經(jīng)藥理學(xué))，34，357-366，(1995).5Strosberg，A.D.& Pietri-Rouxel，F(xiàn).“Function andRegulation of β3-Adrenoceptor”(β3-腎上腺素受體的功能與調(diào)節(jié))TiPS，17，373-381，(1996).6Barnes，P.J.“Current Therapies for Asthma”(哮喘流行療法)CHEST，11117S-26S，(1997).7Jack，D.A.“A way of Looking at Agonism and AntagonismLessons from Salbutamol，Salmeterol and other β-AdrenoceptorAgonists”(考慮激動(dòng)作用與拮抗作用的方法沙丁胺醇、沙美特羅和其他β-腎上腺受體激動(dòng)劑課程)Br.J.Clin.Pharmac.(英國(guó)臨床藥理學(xué)雜志)31，501-514，(1991).8Kissei Pharmaceutical Co.Ltd.“2-Amino-1-(4-hydroxy-2-methyl-phenyl)propanol derivatives”(2-氨基-1-(4-羥基-2-甲基-苯基)丙醇衍生物)JP-10152460(
公開日1998年6月9日).
所有上述出版物都全文引用在此作為參考文獻(xiàn)，相當(dāng)于每份出版物都單獨(dú)具體地全文引用在此作為參考文獻(xiàn)。
本領(lǐng)域現(xiàn)狀受體是具有一個(gè)或多個(gè)結(jié)合結(jié)構(gòu)域的生物結(jié)構(gòu)，它可逆地與一個(gè)或多個(gè)配體配位化合，這種配合作用具有生物學(xué)后果。受體可以完全存在于細(xì)胞之外(細(xì)胞外受體)、在細(xì)胞膜內(nèi)(但是呈遞受體的區(qū)段給細(xì)胞外環(huán)境和細(xì)胞溶質(zhì))或者完全在細(xì)胞內(nèi)(細(xì)胞內(nèi)受體)。它們還可以獨(dú)立于細(xì)胞發(fā)揮功能(例如凝塊生成)。細(xì)胞膜內(nèi)的受體允許細(xì)胞傳達(dá)其邊界之外的空間(也就是發(fā)信號(hào))以及發(fā)揮轉(zhuǎn)運(yùn)分子和離子進(jìn)出細(xì)胞的功能。
配體是特異性受體或受體家族的結(jié)合配偶體。配體可以是受體的內(nèi)源性配體，或者可以是受體的合成配體，例如藥物、候選藥物或藥理學(xué)工具。
七種跨膜蛋白(7-TM)總家族也稱G-蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)，代表了一類最顯著的膜結(jié)合受體，它們傳達(dá)發(fā)生在細(xì)胞邊界之外的變化到其內(nèi)部，在適當(dāng)時(shí)觸發(fā)細(xì)胞應(yīng)答。G-蛋白在被活化時(shí)，積極地和消極地影響廣泛的下游效應(yīng)器系統(tǒng)(例如離子通道、蛋白激酶級(jí)聯(lián)、轉(zhuǎn)錄、粘連蛋白的移行等)。
腎上腺素能受體(AR)是G-蛋白偶聯(lián)受體的成員，它們由三種受體亞型組成β1(A，B，D)、β2(A，B，C)和β(1，2，3)1-5。這些受體在各種系統(tǒng)組織和哺乳動(dòng)物器官內(nèi)被表達(dá)，α與β受體的比例因組織而異。例如，支氣管平滑肌組織主要表達(dá)β2-AR，而皮膚血管組織僅含有β-AR亞型。
已經(jīng)確定的是，β2-AR亞型與呼吸疾病有關(guān)，例如哮喘6、慢性支氣管炎、神經(jīng)系統(tǒng)損傷和早產(chǎn)8。目前，大量具有β2-AR激動(dòng)劑活性的藥物、例如沙丁胺醇、福莫特羅、isoprenolol或沙美特羅用于治療哮喘。不過，這些藥物的實(shí)用性有限，因?yàn)樗鼈円词欠沁x擇性的，從而導(dǎo)致不良的副作用，例如肌肉震顫、心動(dòng)過速、心悸和坐立不安6，要么作用持續(xù)時(shí)間短和/或起效緩慢7。因此，需要起效迅速和功效更強(qiáng)和/或作用持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)的β2-選擇性AR激動(dòng)劑。
本發(fā)明的多結(jié)合性化合物滿足了這種需求。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新穎的多結(jié)合性化合物(藥物)，它們是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑，因此可用于治療和預(yù)防呼吸疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病和慢性支氣管炎。它們還可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)損傷和早產(chǎn)。
因此，本發(fā)明在其組成方面之一提供式(I)的多結(jié)合性化合物(L)p(X)q(I)其中p是從2至10的整數(shù)；q是從1至20的整數(shù)；X是連接基團(tuán)；L是配體，其中配體之一L是式(a)化合物 其中
Ar1和Ar2獨(dú)立地選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組，其中每個(gè)所述Ar1和Ar2取代基可選地連接該配體與連接基團(tuán)；R1選自由氫、烷基、和取代的烷基組成的組，或者R1是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；R2選自由氫、烷基、芳烷基、酰基、取代的烷基、環(huán)烷基、和取代的環(huán)烷基組成的組，或者R2是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；W是連接-NR2-基團(tuán)與Ar2的共價(jià)鍵、亞烷基或取代的亞烷基，其中所述亞烷基或取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、?；⒒蜻B接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S(O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P(O)O-組成的組，進(jìn)而其中所述亞烷基或取代的亞烷基可選地連接該配體與連接基團(tuán)，其條件是Ar1、Ar2、R1、R2、或W至少有一個(gè)連接該配體與連接基團(tuán)；其他配體彼此獨(dú)立地是式(b)化合物-Q-Ar3(b)其中Ar3選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組；Q連接另一個(gè)配體與該連接基團(tuán)，選自由共價(jià)鍵、亞烷基、和取代的亞烷基組成的組，其中所述亞烷基和取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、酰基、或連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S(O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P(O)O-組成的組；其單獨(dú)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的混合物和藥學(xué)上可接受的鹽，其條件是(i)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，則W和X都不是亞烷基，若W是亞烷基-O-，則X不是-O-亞烷基；(ii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-羥基-2-甲基苯基，Ar2是芳基，Ar3是芳基或雜環(huán)基，W是亞乙基，Q是共價(jià)鍵，R1是烷基，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接；(iii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，R2是氫或芐基，W是亞烷基，Ar2是芳基或環(huán)烷基，Q是共價(jià)鍵，則X不是-亞烷基-O-；(iv)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-芐氧基-3-甲?；被琑2是芳烷基，W是-CH(CH3)CH2-，Ar2和Ar3是苯基，Q是共價(jià)鍵，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接。
更優(yōu)選地，式(I)的多結(jié)合性化合物中的每個(gè)連接基團(tuán)X獨(dú)立地具有下式-Xa-Z-(Ya-Z)m-Xa-其中m是從0至20的整數(shù)；Xa在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-S-、-NR-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR-、-NRC(O)-、C(S)、-C(S)O-、-C(S)NR-、-NRC(S)-、或共價(jià)鍵組成的組，其中R是如下所定義的；Z在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由亞烷基、取代的亞烷基、亞環(huán)烷基、取代的亞環(huán)烷基、亞烯基、取代的亞烯基、亞炔基、取代的亞炔基、亞環(huán)烯基、取代的亞環(huán)烯基、亞芳基、亞雜芳基、亞雜環(huán)基、或共價(jià)鍵組成的組；Ya在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR-、-S(O)n-、-C(O)NR’-、-NR’C(O)-、-NR’C(O)NR’-、-NR’C(S)NR’-、-C(＝NR’)-NR’-、-NR’-C(＝NR’)-、-OC(O)-NR’-、-NR’-C(O)-O-、-N＝C(Xa)-NR’-、-NR’-C(Xa)＝N-、-P(O)(OR’)-O-、-O-P(O)(OR’)-、-S(O)nCR’R”-、-S(O)n-NR’-、-NR’-S(O)n-、-S-S-、和共價(jià)鍵組成的組；其中n是0、1或2；R、R’和R”在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基組成的組，Xa是如上所定義的。
優(yōu)選地，在本發(fā)明的多結(jié)合性化合物中q小于p。
本發(fā)明在其另一個(gè)組成方面提供藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體和有效量的式(I)的多結(jié)合性化合物(L)p(X)q(I)其中p是從2至10的整數(shù)；q是從1至20的整數(shù)；X是連接基團(tuán)；L是配體，其中配體之一L是式(a)化合物 其中Ar1和Ar2獨(dú)立地選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組，其中每個(gè)所述Ar1和Ar2取代基可選地連接該配體與連接基團(tuán)；R1選自由氫、烷基、和取代的烷基組成的組，或者R1是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；R2選自由氫、烷基、芳烷基、?；⑷〈耐榛?、環(huán)烷基、和取代的環(huán)烷基組成的組，或者R2是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；W是連接-NR2-基團(tuán)與Ar2的共價(jià)鍵、亞烷基或取代的亞烷基，其中所述亞烷基或取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、?；?、或連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S(O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P(O)O-組成的組，進(jìn)而其中所述亞烷基或取代的亞烷基可選地連接該配體與連接基團(tuán)，其條件是Ar1、Ar2、R1、R2、或W至少有一個(gè)連接該配體與連接基團(tuán)；其他配體彼此獨(dú)立地是式(b)化合物-Q-Ar3(b)其中Ar3選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組；Q連接另一個(gè)配體與該連接基團(tuán)，選自由共價(jià)鍵、亞烷基、和取代的亞烷基組成的組，其中所述亞烷基和取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、酰基、或連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S(O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P(O)O-組成的組；其單獨(dú)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的混合物和藥學(xué)上可接受的鹽，其條件是(i)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，則W和X都不是亞烷基，若W是亞烷基-O-，則X不是-O-亞烷基；(ii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-羥基-2-甲基苯基，Ar2是芳基，Ar3是芳基或雜環(huán)基，W是亞乙基，Q是共價(jià)鍵，R1是烷基，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接；(iii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，R2是氫或芐基，W是亞烷基，Ar2是芳基或環(huán)烷基，Q是共價(jià)鍵，則X不是-亞烷基-O-；(iv)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-芐氧基-3-甲?；被琑2是芳烷基，W是-CH(CH3)CH2-，Ar2和Ar3是苯基，Q是共價(jià)鍵，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接。
更優(yōu)選地，式(I)的多結(jié)合性化合物中的每個(gè)連接基團(tuán)X獨(dú)立地具有下式-Xa-Z-(Ya-Z)m-Xa-其中m是從0至20的整數(shù)；Xa在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-S-、-NR-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR-、-NRC(O)-、C(S)、-C(S)O-、-C(S)NR-、-NRC(S)-、或共價(jià)鍵組成的組，其中R是如下所定義的；Z在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由亞烷基、取代的亞烷基、亞環(huán)烷基、取代的亞環(huán)烷基、亞烯基、取代的亞烯基、亞炔基、取代的亞炔基、亞環(huán)烯基、取代的亞環(huán)烯基、亞芳基、亞雜芳基、亞雜環(huán)基、或共價(jià)鍵組成的組；Ya在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR-、-S(O)n-、-C(O)NR’-、-NR’C(O)-、-NR’C(O)NR’-、-NR’C(S)NR’-、-C(＝NR’)-NR’-、-NR’-C(＝NR’)-、-OC(O)-NR’-、-NR’-C(O)-O-、-N＝C(Xa)-NR’-、-NR’-C(Xa)＝N-、-P(O)(OR’)-O-、-O-P(O)(OR’)-、-S(O)nCR’R”-、-S(O)n-NR’-、-NR’-S(O)n-、-S-S-、和共價(jià)鍵組成的組；其中n是0、1或2；R、R’和R”在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基組成的組，Xa是如上所定義的。
本發(fā)明在另一方面提供治療哺乳動(dòng)物由β2腎上腺素能受體介導(dǎo)的疾病的方法，所述方法包含對(duì)所述哺乳動(dòng)物給以治療學(xué)上有效量的藥物組合物，該組合物包含藥學(xué)上可接受的載體和式(I)的多結(jié)合性化合物(L)p(X)q(I)其中p是從2至10的整數(shù)；q是從1至20的整數(shù)；X是連接基團(tuán)；L是配體，其中配體之一L是式(a)化合物 其中Ar1和Ar2獨(dú)立地選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組，其中每個(gè)所述Ar1和Ar2取代基可選地連接該配體與連接基團(tuán)；R1選自由氫、烷基、和取代的烷基組成的組，或者R1是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；R2選自由氫、烷基、芳烷基、?；?、取代的烷基、環(huán)烷基、和取代的環(huán)烷基組成的組，或者R2是連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵；W是連接-NR2-基團(tuán)與Ar2的共價(jià)鍵、亞烷基或取代的亞烷基，其中所述亞烷基或取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、酰基、或連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S(O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P((O)O-組成的組，進(jìn)而其中所述亞烷基或取代的亞烷基可選地連接該配體與連接基團(tuán)，其條件是Ar1、Ar2、R1、R2、或W至少有一個(gè)連接該配體與連接基團(tuán)；其他配體彼此獨(dú)立地是式(b)化合物-Q-Ar3(b)其中Ar3選自由芳基、雜芳基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、和雜環(huán)基組成的組；Q連接另一個(gè)配體與該連接基團(tuán)，選自由共價(jià)鍵、亞烷基、和取代的亞烷基組成的組，其中所述亞烷基和取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被取代基取代，取代基選自由-NRa-(其中Ra是氫、烷基、酰基、或連接該配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵)、-O-、-S (O)n(其中n是從0至2的整數(shù))、-CO-、-PRb-(其中Rb是烷基)、-P(O)2-、和-O-P(O)O-組成的組；其單獨(dú)的異構(gòu)體、異構(gòu)體的混合物和藥學(xué)上可接受的鹽，其條件是(i)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，則W和X都不是亞烷基，若W是亞烷基-O-，則X不是-O-亞烷基；(ii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-羥基-2-甲基苯基，Ar2是芳基，Ar3是芳基或雜環(huán)基，W是亞乙基，Q是共價(jià)鍵，R1是烷基，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接；(iii)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1和Ar3是芳基，R2是氫或芐基，W是亞烷基，Ar2是芳基或環(huán)烷基，Q是共價(jià)鍵，則X不是-亞烷基-O-；(iv)若式(I)的多結(jié)合性化合物是下式化合物 其中Ar1是4-芐氧基-3-甲酰基氨基，R2是芳烷基，W是-CH(CH3)CH2-，Ar2和Ar3是苯基，Q是共價(jià)鍵，則連接基團(tuán)X不通過氧原子與Ar2基連接。
更優(yōu)選地，式(I)的多結(jié)合性化合物中的每個(gè)連接基團(tuán)X獨(dú)立地具有下式-Xa-Z-(Ya-Z)m-Xa-其中m是從0至20的整數(shù)；Xa在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-S-、-NR-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR-、-NRC(O)-、C(S)、-C(S)O-、-C(S)NR-、-NRC(S)-、或共價(jià)鍵組成的組，其中R是如下所定義的；Z在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由亞烷基、取代的亞烷基、亞環(huán)烷基、取代的亞環(huán)烷基、亞烯基、取代的亞烯基、亞炔基、取代的亞炔基、亞環(huán)烯基、取代的亞環(huán)烯基、亞芳基、亞雜芳基、亞雜環(huán)基、或共價(jià)鍵組成的組；Ya在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR-、-S(O)n-、-C(O)NR’-、-NR’C(O)-、-NR’C(O)NR’-、-NR’C(S)NR’-、-C(＝NR’)-NR’-、-NR’-C(＝NR’)-、-OC(O)-NR’-、-NR’-C(O)-O-、-N＝C(Xa)-NR’-、-NR’-C(Xa)＝N-、-P(O)(OR’)-O-、-O-P(O)(OR’)-、-S(O)nCR’R”-、-S(O)n-NR’-、-NR’-S(O)n-、-S-S-、和共價(jià)鍵組成的組；其中n是0、1或2；R、R’和R”在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基組成的組，Xa是如上所定義的。
優(yōu)選地，p小于q。
本發(fā)明在另一方面涉及用于生成不同多聚化合物的大型文庫(kù)的通用合成方法，這些多聚化合物是對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的候選者。由本發(fā)明所提供的不同多聚化合物文庫(kù)是這樣合成的，將一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)與一個(gè)配體或多個(gè)配體結(jié)合，以提供多聚化合物文庫(kù)，其中的連接基團(tuán)和配體各自具有允許共價(jià)連接的互補(bǔ)性官能團(tuán)。優(yōu)選地選擇這樣的連接基團(tuán)文庫(kù)，它們具有不同的性質(zhì)，例如化合價(jià)、連接基團(tuán)長(zhǎng)度、連接基團(tuán)幾何學(xué)與剛性、親水性或疏水性、兩親性、酸度、堿度和極化強(qiáng)度。優(yōu)選地選擇這樣的配體文庫(kù)，它們?cè)谙嗤潴w上具有不同連接點(diǎn)、在另一相同配體的相同部位上具有不同官能團(tuán)等。
本發(fā)明還涉及不同多聚化合物的文庫(kù)，這些多聚化合物是對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的候選者。這些文庫(kù)是經(jīng)由上述方法制備的，允許迅速和高效地評(píng)價(jià)什么樣的分子限制賦予定向受體的一個(gè)配體或一類配體以多結(jié)合性質(zhì)。
因此，本發(fā)明在其方法方面之一涉及鑒別對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚配體化合物的方法，該方法包含(a)鑒別一個(gè)配體或配體混合物，其中每個(gè)配體含有至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)；(b)鑒別連接基團(tuán)文庫(kù)，其中在所述文庫(kù)中的每個(gè)連接基團(tuán)包含至少兩個(gè)官能團(tuán)，其反應(yīng)性與配體的至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)互補(bǔ)；(c)制備多聚配體化合物文庫(kù)將在(a)中所鑒別的至少兩個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的配體或配體混合物與在(b)中所鑒別的連接基團(tuán)文庫(kù)在這樣的條件下結(jié)合，其中互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，在所述連接基團(tuán)與至少兩個(gè)所述配體之間生成共價(jià)鍵；和(d)測(cè)定在上述(c)中生成的多聚配體化合物，以鑒別對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚配體化合物。
本發(fā)明在其另一方法方面涉及鑒別對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚配體化合物的方法，該方法包含(a)鑒別配體文庫(kù)，其中每個(gè)配體含有至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)；(b)鑒別一個(gè)連接基團(tuán)或連接基團(tuán)文庫(kù)，其中每個(gè)連接基團(tuán)包含至少兩個(gè)官能團(tuán)，其反應(yīng)性與配體的至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)互補(bǔ)；(c)制備多聚配體化合物文庫(kù)將在(a)中所鑒別的至少兩個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的配體文庫(kù)與在(b)中所鑒別的連接基團(tuán)或連接基團(tuán)混合物在這樣的條件下結(jié)合，其中互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，在所述連接基團(tuán)與至少兩個(gè)所述配體之間生成共價(jià)鍵；和(d)測(cè)定在上述(c)中生成的多聚配體化合物，以鑒別對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚配體化合物。
多聚配體化合物文庫(kù)的制備是這樣實(shí)現(xiàn)的，將在(a)中所鑒別的兩個(gè)或多個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的配體與在(b)中所鑒別的連接基團(tuán)先后或同時(shí)結(jié)合。當(dāng)采用不同配體的混合物時(shí)，先后加入是優(yōu)選的，以確保所制備的是雜二聚或多聚化合物。當(dāng)至少一部分所制備的多聚化合物是均多聚化合物時(shí)，進(jìn)行配體的同時(shí)加入。
(d)中所述測(cè)定方案可以針對(duì)在上述(c)中所生成的多聚配體化合物文庫(kù)而進(jìn)行，或者優(yōu)選地，通過制備型液相色譜-質(zhì)譜(LCMS)分離每個(gè)文庫(kù)成員。
本發(fā)明在其組合物方面之一涉及多聚配體化合物文庫(kù)，這些化合物可以對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)，該文庫(kù)是通過下述方法制備的(a)鑒別一個(gè)配體或配體混合物，其中每個(gè)配體含有至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)；(b)鑒別連接基團(tuán)文庫(kù)，其中在所述文庫(kù)中的每個(gè)連接基團(tuán)包含至少兩個(gè)官能團(tuán)，其反應(yīng)性與配體的至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)互補(bǔ)；和(c)制備多聚配體化合物文庫(kù)將在(a)中所鑒別的至少兩個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的配體或配體混合物與在(b)中所鑒別的連接基團(tuán)文庫(kù)在這樣的條件下結(jié)合，其中互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，在所述連接基團(tuán)與至少兩個(gè)所述配體之間生成共價(jià)鍵。
本發(fā)明在其另一組合物方面涉及多聚配體化合物文庫(kù)，這些化合物可以對(duì)β2腎上腺素能受體具有多價(jià)結(jié)合性質(zhì)，該文庫(kù)是通過下述方法制備的(a)鑒別配體文庫(kù)，其中每個(gè)配體含有至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)；(b)鑒別一個(gè)連接基團(tuán)或連接基團(tuán)文庫(kù)，其中每個(gè)連接基團(tuán)包含至少兩個(gè)官能團(tuán)，其反應(yīng)性與配體的至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)互補(bǔ)；和(c)制備多聚配體化合物文庫(kù)將在(a)中所鑒別的至少兩個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的配體文庫(kù)與在(b)中所鑒別的連接基團(tuán)或連接基團(tuán)混合物在這樣的條件下結(jié)合，其中互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，在所述連接基團(tuán)與至少兩個(gè)所述配體之間生成共價(jià)鍵。
在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在本發(fā)明方法或文庫(kù)方面所采用的連接基團(tuán)文庫(kù)選自包含下述的組柔性連接基團(tuán)、剛性連接基團(tuán)、疏水性連接基團(tuán)、親水性連接基團(tuán)、不同幾何學(xué)的連接基團(tuán)、酸性連接基團(tuán)、堿性連接基團(tuán)、不同極化強(qiáng)度的連接基團(tuán)和兩親性連接基團(tuán)。例如，在一種實(shí)施方式中，連接基團(tuán)文庫(kù)中的每個(gè)連接基團(tuán)可以包含不同鏈長(zhǎng)和/或具有不同互補(bǔ)性反應(yīng)性基團(tuán)的連接基團(tuán)。這類連接基團(tuán)長(zhǎng)度可以優(yōu)選地從約2至100埃。
在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，選擇這樣的配體或配體混合物，它們?cè)谒雠潴w的不同部位上具有反應(yīng)性官能團(tuán)，目的是在所述多聚配體化合物上提供一定范圍的所述配體取向。這類反應(yīng)性官能團(tuán)例如包括羧酸、羧酸鹵化物、羧基酯、胺、鹵化物、異氰酸酯、乙烯基不飽和度、酮、醛、硫醇、醇、酸酐和它們的前體。當(dāng)然，可以理解的是在配體上選擇與連接基團(tuán)上至少一個(gè)反應(yīng)性基團(tuán)互補(bǔ)的反應(yīng)性官能團(tuán)，以便能夠在連接基團(tuán)與配體之間生成共價(jià)鍵。
在其他實(shí)施方式中，多聚配體化合物是均聚的(也就是說(shuō)，每個(gè)配體是相同的，不過它可以連接在不同的點(diǎn))或雜二聚的(也就是說(shuō)，至少一個(gè)配體不同于其他配體)。
除了這里所述的組合方法以外，本發(fā)明提供合理評(píng)價(jià)什么樣的分子限制賦予定向受體的一類多聚化合物或配體以多結(jié)合性質(zhì)的內(nèi)在反應(yīng)方法。具體而言，該方法方面涉及鑒別對(duì)β2腎上腺素能受體具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚配體化合物的方法，該方法包含(a)制備第一批或循環(huán)的多聚化合物使至少兩個(gè)化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的定向受體的配體或配體混合物與連接基團(tuán)或連接基團(tuán)混合物接觸，其中所述配體或配體混合物包含至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)，所述連接基團(tuán)或連接基團(tuán)混合物包含至少兩個(gè)官能團(tuán)，其反應(yīng)性與配體的至少一個(gè)反應(yīng)性官能團(tuán)互補(bǔ)，其中所述接觸是在這樣的條件下進(jìn)行的，其中互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，在所述連接基團(tuán)與至少兩個(gè)配體之間生成共價(jià)鍵；(b)測(cè)定所述第一批或循環(huán)的多聚化合物，以評(píng)估任意所述多聚化合物是否具有對(duì)β2腎上腺素能受體的多結(jié)合性質(zhì)；(c)重復(fù)上述(a)和(b)的過程，直至發(fā)現(xiàn)至少一種多聚化合物具有對(duì)β2腎上腺素能受體的多結(jié)合性質(zhì)；(d)評(píng)價(jià)什么樣的分子限制賦予在上述(a)-(c)所述第一循環(huán)中發(fā)現(xiàn)的一種或多種多聚化合物以對(duì)β2腎上腺素能受體的多結(jié)合性質(zhì)；(e)創(chuàng)建第二批或循環(huán)多聚化合物，它們?cè)敿?xì)說(shuō)明賦予在所述第一循環(huán)中發(fā)現(xiàn)的一種或多種多聚化合物以多結(jié)合性質(zhì)的特定分子限制；
(f)評(píng)價(jià)什么樣的分子限制賦予在上述(e)中所述第二批或循環(huán)中發(fā)現(xiàn)的一種或多種多聚化合物以增強(qiáng)的多結(jié)合性質(zhì)；(g)可選地重復(fù)步驟(e)和(f)，以進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明所述分子限制。
優(yōu)選地，步驟(e)和(f)重復(fù)至少兩次，更優(yōu)選為2-50次，進(jìn)而更優(yōu)選為3至50次，進(jìn)一步更優(yōu)選為5-50次。
附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1闡述多結(jié)合性化合物的實(shí)例，它包含2個(gè)以不同形式與連接基團(tuán)連接的配體。
圖2闡述多結(jié)合性化合物的實(shí)例，它包含3個(gè)以不同形式與連接基團(tuán)連接的配體。
圖3闡述多結(jié)合性化合物的實(shí)例，它包含4個(gè)以不同形式與連接基團(tuán)連接的配體。
圖4闡述多結(jié)合性化合物的實(shí)例，它包含＞4個(gè)以不同形式與連接基團(tuán)連接的配體。
圖5-15闡述式(I)化合物的合成。
發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明定義本發(fā)明涉及多結(jié)合性化合物，它們是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑，還涉及含有這類化合物的藥物組合物和治療哺乳動(dòng)物β2腎上腺素能受體介導(dǎo)疾病的方法。在討論這些化合物、組合物或方法時(shí)，下列術(shù)語(yǔ)具有下列含義，另有指定除外。任意未經(jīng)定義的術(shù)語(yǔ)具有本領(lǐng)域公認(rèn)的含義。
術(shù)語(yǔ)“烷基”指支鏈或直鏈飽和烴鏈的一價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有1至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為1至10個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為1至6個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正己基、正癸基、十四烷基等。
術(shù)語(yǔ)“取代的烷基”指如上所定義的烷基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、?；被?、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基?；?、氨基酰氧基、氧基氨基?；B氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。該術(shù)語(yǔ)例如羥甲基、羥乙基、羥丙基、2-氨基乙基、3-氨基丙基、2-甲氨基乙基、3-二甲氨基丙基、2-磺酰氨基乙基、2-羧基乙基等。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基”指支鏈或直鏈飽和烴鏈的二價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有1至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為1至10個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為1至6個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)例如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構(gòu)體(例如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
術(shù)語(yǔ)“取代的亞烷基”指如上所定義的亞烷基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、?；被?、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基?；?、氨基酰氧基、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。另外，這類取代的亞烷基包括其中在亞烷基上的2個(gè)取代基與亞烷基稠合構(gòu)成一個(gè)或多個(gè)環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基或雜芳基的那些。優(yōu)選地，這類稠合的基團(tuán)含有1至3個(gè)稠合的環(huán)結(jié)構(gòu)。
術(shù)語(yǔ)“烷芳基”或“芳烷基”指-亞烷基-芳基和-取代的亞烷基-芳基，其中亞烷基、取代的亞烷基和芳基是如本文所定義的。這類烷芳基例如芐基、苯乙基等。
術(shù)語(yǔ)“雜芳烷基”指-亞烷基-雜芳基和-取代的亞烷基-雜芳基，其中亞烷基、取代的亞烷基和雜芳基是如本文所定義的。這類雜芳烷基例如吡啶-3-基甲基、吡啶-3-基甲氧基等。
術(shù)語(yǔ)“烴氧基”指烷基-O-、烯基-O-、環(huán)烷基-O-、環(huán)烯基-O-、和炔基-O-，其中烷基、烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、和炔基是如本文所定義的。優(yōu)選的烴氧基是烷基-O-，例如包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等。
術(shù)語(yǔ)“取代的烴氧基”指取代的烷基-O-、取代的烯基-O-、取代的環(huán)烷基-O-、取代的環(huán)烯基-O-、和取代的炔基-O-，其中取代的烷基、取代的烯基、取代的環(huán)烷基、取代的環(huán)烯基和取代的烯基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“烯基”指支鏈或直鏈不飽和烴的一價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有2至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為2至10個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為2至6個(gè)碳原子，并且具有至少1個(gè)、優(yōu)選為1-6個(gè)乙烯基不飽和部位。優(yōu)選的烯基包括乙烯基(-CH＝CH2)、正丙烯基(-CH2CH＝CH2)、異丙烯基(-C(CH3)＝CH2)等。
術(shù)語(yǔ)“取代的烯基”指如上所定義的烯基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、酰基、?；被ⅤＱ趸?、氨基、取代的氨基、氨基?；被Ｑ趸?、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。
術(shù)語(yǔ)“亞烯基”指支鏈或直鏈不飽和烴的二價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有2至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為2至10個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為2至6個(gè)碳原子，并且具有至少1個(gè)、優(yōu)選為1-6個(gè)乙烯基不飽和部位。該術(shù)語(yǔ)例如亞乙烯基(-CH＝CH-)、亞丙烯基異構(gòu)體(例如-CH2CH＝CH-和-C(CH3)＝CH-)等。
術(shù)語(yǔ)“取代的亞烯基”指如上所定義的亞烯基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、氨基酰氧基、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。另外，這類取代的亞烯基包括其中在亞烯基上的2個(gè)取代基與亞烯基稠合構(gòu)成一個(gè)或多個(gè)環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基或雜芳基的那些。優(yōu)選地，這類稠合的基團(tuán)含有1至3個(gè)稠合的環(huán)結(jié)構(gòu)。
術(shù)語(yǔ)“炔基”指不飽和烴的一價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有2至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為2至20個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為2至6個(gè)碳原子，并且具有至少1個(gè)、優(yōu)選為1-6個(gè)乙炔(叁鍵)不飽和位點(diǎn)。優(yōu)選的炔基包括乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)等。
術(shù)語(yǔ)“取代的炔基”指如上所定義的炔基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、?；被?、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、氨基酰氧基、氧基氨基酰基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。
術(shù)語(yǔ)“亞炔基”指支鏈或直鏈不飽和烴的二價(jià)原子團(tuán)，優(yōu)選地具有2至40個(gè)碳原子，更優(yōu)選為2至10個(gè)碳原子，進(jìn)而更優(yōu)選為2至6個(gè)碳原子，并且具有至少1個(gè)、優(yōu)選為1-6個(gè)乙炔(叁鍵)不飽和部位。優(yōu)選的亞炔基包括亞乙炔基(-CH≡CH-)、亞炔丙基(-CH2C≡C-)等。
術(shù)語(yǔ)“取代的亞炔基”指如上所定義的亞炔基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、酰基、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基?；?、氨基酰氧基、氧基氨基?；B氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。
術(shù)語(yǔ)?；富鶊F(tuán)HC(O)-、烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、環(huán)烷基-C(O)-、取代的環(huán)烷基-C(O)-、環(huán)烯基-C(O)-、取代的環(huán)烯基-C(O)-、芳基-C(O)-、雜芳基-C(O)-和雜環(huán)基-C(O)-，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“酰基氨基”或“氨基羰基”指基團(tuán)-C(O)NRR，其中每個(gè)R獨(dú)立地是氫、烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基，或者其中兩個(gè)R連接構(gòu)成雜環(huán)基(例如嗎啉代基)，其中烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“磺?；被敝富鶊F(tuán)-NRSO2Ra，其中R是氫、烷基、取代的烷基、芳烷基、或雜芳烷基，Ra是烷基、取代的烷基、氨基、或取代的氨基，其中烷基、取代的烷基、芳烷基、雜芳烷基和取代的氨基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“氨基?；敝富鶊F(tuán)-NRC(O)R，其中每個(gè)R獨(dú)立地是氫、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、氨基、取代的氨基、芳基、雜芳基、或雜環(huán)基，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“氨基酰氧基”或“烴氧羰基氨基”指基團(tuán)-NRC(O)OR，其中每個(gè)R獨(dú)立地是氫、烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基、或雜環(huán)基，其中烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“酰氧基”指基團(tuán)烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、環(huán)烷基-C(O)O-、取代的環(huán)烷基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、雜芳基-C(O)O-、和雜環(huán)基-C(O)O-，其中烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、和雜環(huán)基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“芳基”指6至20個(gè)碳原子的不飽和芳族碳環(huán)基團(tuán)，具有單一的環(huán)(例如苯基)或多個(gè)融合(稠合)的環(huán)(例如萘基或蒽基)。優(yōu)選的芳基包括苯基、萘基等。除非關(guān)于芳基取代基的定義另有約定，這類芳基可以可選地被1至5個(gè)取代基、優(yōu)選為1至3個(gè)取代基取代，取代基選自下組酰氧基、羥基、巰基、?；⑼榛?、烴氧基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的烷基、取代的烴氧基、取代的烯基、取代的炔基、取代的環(huán)烷基、取代的環(huán)烯基、氨基、取代的氨基、氨基?；?、?；被⒒酋；被⑼榉蓟?、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、羧基烷基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、氨基酰氧基、氧基?；被?、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基、-SO2-雜芳基和三鹵甲基。優(yōu)選的芳基取代基包括烷基、烴氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵甲基、和硫代烷氧基。
術(shù)語(yǔ)“芳氧基”指基團(tuán)芳基-O-，其中芳基是如上所定義的，包括可選被取代的芳基，也是如上所定義的。
術(shù)語(yǔ)“亞芳基”指從如上所定義的芳基(包括取代的芳基)衍生的二價(jià)原子團(tuán)，例如1，2-亞苯基、1，3-亞苯基、1，4-亞苯基、1，2-亞萘基等。
術(shù)語(yǔ)“氨基”指基團(tuán)-NH2。
術(shù)語(yǔ)“取代的氨基”指基團(tuán)-NRR，其中每個(gè)R獨(dú)立地選自下組氫、烷基、取代的烷基、?；h(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，其條件是兩個(gè)R不都是氫。
術(shù)語(yǔ)“羧基烴基”或“烴氧羰基”指基團(tuán)“-C(O)O-烷基”、“-C(O)O-取代的烷基”、“-C(O)O-環(huán)烷基”、“-C(O)O-取代的環(huán)烷基”、“-C(O)O-烯基”、“-C(O)O-取代的烯基”、“-C(O)O-炔基”和“-C(O)O-取代的炔基”，其中烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、炔基和取代的炔基是如本文所定義的。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指3至20個(gè)碳原子的環(huán)狀烷基，具有單一的環(huán)或多個(gè)稠合的環(huán)，所述環(huán)烷基可以可選地與芳基或雜芳基稠合。這類環(huán)烷基例如包括單環(huán)結(jié)構(gòu)，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)辛基等，或多環(huán)結(jié)構(gòu)，如金剛烷基等。
術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烷基”指如上所定義的環(huán)烷基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烷基、烯基、取代的烯基、烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基?；被Ｑ趸?、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”指4至20個(gè)碳原子的環(huán)狀烯基，具有單一的環(huán)和至少一個(gè)內(nèi)不飽和點(diǎn)。適合的環(huán)烯基實(shí)例例如包括環(huán)丁-2-烯基、環(huán)戊-3-烯基、環(huán)辛-3-烯基等。
術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烯基”指如上所定義的環(huán)烯基，具有1至5個(gè)取代基，優(yōu)選為1至3個(gè)取代基，取代基選自下組烷基、烯基、取代的烯基、烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、?；被ⅤＱ趸?、氨基、取代的氨基、氨基?；?、氨基酰氧基、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。
術(shù)語(yǔ)“鹵”或“鹵素”指氟、氯、溴和碘。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指1至15個(gè)碳原子的芳族基團(tuán)，在至少一個(gè)環(huán)(如果有不止一個(gè)環(huán))內(nèi)具有1至4個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子。雜芳基環(huán)可以可選地與環(huán)烷基或雜環(huán)基環(huán)稠合。除非關(guān)于雜芳基取代基的定義另有約定，這類雜芳基可以可選地被1至5個(gè)取代基、優(yōu)選為1至3個(gè)取代基取代，取代基選自下組酰氧基、羥基、巰基、酰基、烷基、烴氧基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的烷基、取代的烴氧基、取代的烯基、取代的炔基、取代的環(huán)烷基、取代的環(huán)烯基、氨基、取代的氨基、氨基?；Ⅴ；被⒒酋；被?、烷芳基、芳基、芳氧基、疊氮基、羧基、羧基烷基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、氨基酰氧基、氧基?；被?、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基、-SO2-雜芳基和三鹵甲基。優(yōu)選的雜芳基取代基包括烷基、烴氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵甲基、和硫代烷氧基。這類雜芳基可以具有單一的環(huán)(例如吡啶基或呋喃基)或多個(gè)稠合的環(huán)(例如吲嗪基或苯并噻吩基)。優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基、吡咯基和呋喃基。
術(shù)語(yǔ)“雜芳氧基”指雜芳基-O-基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“亞雜芳基”指從如上所定義的雜芳基(包括取代的雜芳基)衍生的二價(jià)原子團(tuán)，例如2，6-亞吡啶基、2，4-亞吡啶基、1，2-亞喹啉基、1，8-亞喹啉基、1，4-亞苯并呋喃基、2，5-亞吡啶基、2，5-亞吲哚基等。
術(shù)語(yǔ)“亞環(huán)烷基”指從如上所定義的環(huán)烷基衍生的二價(jià)原子團(tuán)，例如1，6-亞環(huán)己基、1，3-亞環(huán)戊基等。
術(shù)語(yǔ)“取代的亞環(huán)烷基”指從如上所定義的取代的環(huán)烷基衍生的二價(jià)原子團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“亞環(huán)烯基”指從如上所定義的環(huán)烯基衍生的二價(jià)原子團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“取代的亞環(huán)烯基”指從如上所定義的取代的環(huán)烯基衍生的二價(jià)原子團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”指1至40個(gè)碳原子的一價(jià)飽和或不飽和基團(tuán)，具有單一的環(huán)或多個(gè)稠合的環(huán)，在環(huán)內(nèi)具有1至10個(gè)、優(yōu)選為1至4個(gè)選自氮、硫、磷和/或氧的雜原子，進(jìn)一步地其中一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)環(huán)碳原子可以可選地被羰基(即酮基)代替。除非關(guān)于雜環(huán)基取代基的定義另有約定，這類雜環(huán)基可以可選地被1至5個(gè)取代基、優(yōu)選為1至3個(gè)取代基取代，取代基選自下組烴氧基、取代的烴氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、?；?、酰基氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基?；?、氨基酰氧基、氧基氨基?；?、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代酮基、羧基、羧基烷基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基、硫代雜環(huán)氧基、巰基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烴氧基氨基、硝基、-SO-烷基、-SO-取代的烷基、-SO-芳基、-SO-雜芳基、-SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-芳基和-SO2-雜芳基。這類雜環(huán)基可以具有單一的環(huán)或多個(gè)稠合的環(huán)。優(yōu)選的雜環(huán)基包括嗎啉代基、哌啶基等。
雜芳基和雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于吡咯、噻吩、呋喃、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲嗪、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、酞嗪、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、吡咯烷、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、嗎啉、四氫呋喃基、四氫噻唑等，以及含有N-烴氧基-氮的雜環(huán)。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)氧基”指雜環(huán)基-O-基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“硫代雜環(huán)氧基”指雜環(huán)基-S-基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“亞雜環(huán)基”指從如上所定義的雜環(huán)生成的二價(jià)原子團(tuán)，例如2，6-嗎啉代基、2，5-嗎啉代基等。
術(shù)語(yǔ)“氧基酰基氨基”或“氨基碳酰氧基”指-OC(O)NRR基團(tuán)，其中每個(gè)R獨(dú)立地是氫、烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基、或雜環(huán)基，其中烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基是如上所定義的。
術(shù)語(yǔ)“螺接環(huán)烷基”指經(jīng)由兩個(gè)環(huán)共用的一個(gè)碳原子與另一個(gè)環(huán)連接的環(huán)烷基。
術(shù)語(yǔ)“巰基”指-SH基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“硫代烷氧基”或“烷硫基”指-S-烷基。
術(shù)語(yǔ)“取代的硫代烷氧基”指-S-取代的烷基。
術(shù)語(yǔ)“硫代芳氧基”指芳基-S-基團(tuán)，其中芳基是如上所定義的，可選地也包括如上所定義的取代的芳基。
術(shù)語(yǔ)“硫代雜芳氧基”指雜芳基-S-基團(tuán)，其中雜芳基是如上所定義的，可選地也包括如上所定義的取代的雜芳基。
關(guān)于任意上述可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基的基團(tuán)，當(dāng)然可以理解的是這類基團(tuán)不含有任意空間不合理和/或合成不可行的取代或取代模式。另外，本發(fā)明化合物包括由這些化合物的取代而產(chǎn)生的所有立體化學(xué)異構(gòu)體。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”指這樣的鹽，它們保留本發(fā)明多結(jié)合性化合物的生物有效性和性質(zhì)，并且不是生物學(xué)上所不可取的。在很多情況下，由于氨基和/或羧基或與之相似的基團(tuán)的存在，本發(fā)明的多結(jié)合性化合物能夠生成酸和/或堿鹽。
藥學(xué)上可接受的堿加成鹽可以從無(wú)機(jī)和有機(jī)堿制備。從無(wú)機(jī)堿衍生的鹽例如包括鈉、鉀、鋰、銨、鈣和鎂鹽。從有機(jī)堿衍生的鹽包括但不限于伯、仲與叔胺的鹽，例如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、環(huán)烷基胺、二(環(huán)烷基)胺、三(環(huán)烷基)胺、取代的環(huán)烷基胺、二取代的環(huán)烷基胺、三取代的環(huán)烷基胺、環(huán)烯基胺、二(環(huán)烯基)胺、三(環(huán)烯基)胺、取代的環(huán)烯基胺、二取代的環(huán)烯基胺、三取代的環(huán)烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、雜芳基胺、二雜芳基胺、三雜芳基胺、雜環(huán)胺、二雜環(huán)胺、三雜環(huán)胺、混合的二-與三-胺，其中胺上至少兩個(gè)取代基是不同的，選自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基等組成的組。也包括這樣的胺，其中兩個(gè)或三個(gè)取代基與氨基氮一起構(gòu)成雜環(huán)基或雜芳基。適合的胺實(shí)例例如包括異丙胺、三甲胺、二乙胺、三(異丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、氨丁三醇、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、哈胺、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、N-烷基葡糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、嗎啉、N-乙基哌啶等。也可以理解的是，其他羧酸衍生物可用于實(shí)施本發(fā)明，例如羧酸酰胺，包括甲酰胺、低級(jí)烷基酰胺、二烷基酰胺等。
藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可以從無(wú)機(jī)和有機(jī)酸制備。從無(wú)機(jī)酸衍生的鹽包括氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等的鹽。從有機(jī)酸衍生的鹽包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對(duì)-甲苯磺酸、水楊酸、萘甲酸、2-羥基萘甲酸等的鹽。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子”指藥學(xué)上可接受的鹽的陽(yáng)離子。
術(shù)語(yǔ)“文庫(kù)”指至少3種、優(yōu)選為102至109種、更優(yōu)選為102至104種多聚化合物。優(yōu)選地，這些化合物被制成在單一溶液或反應(yīng)混合物中的化合物多重態(tài)，以便輕易地合成之。在一種實(shí)施方式中，多聚化合物文庫(kù)可以直接測(cè)定其多結(jié)合性。在另一種實(shí)施方式中，首先分離多聚化合物文庫(kù)的每個(gè)成員，再可選地鑒定特征。然后測(cè)定該成員的多結(jié)合性。
術(shù)語(yǔ)“一批”指先后或同時(shí)(例如組合)制備的一組多聚化合物。一批包含至少2個(gè)成員，優(yōu)選為2至109個(gè)成員，進(jìn)而更優(yōu)選為10至104個(gè)成員。
術(shù)語(yǔ)“多聚化合物”指包含2至10個(gè)通過至少一個(gè)連接基團(tuán)共價(jià)連接的配體的化合物，這些化合物可以具有或者沒有多結(jié)合性(如本文所定義)。
術(shù)語(yǔ)“擬鹵化物”指在置換反應(yīng)中反應(yīng)的方式與鹵素相似的官能團(tuán)。這類官能團(tuán)例如包括甲磺?；⒓妆交酋；?、疊氮基和氰基。
術(shù)語(yǔ)“保護(hù)基團(tuán)”指任意這樣的基團(tuán)，當(dāng)與化合物(包括其中間體)的一個(gè)或多個(gè)羥基、巰基、氨基或羧基鍵合時(shí)，防止這些基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)，并且可以被常規(guī)的化學(xué)或酶學(xué)步驟除去，以重新生成羥基、巰基、氨基或羧基(參見T.W.Greene和P.G.H.Wuts，“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”(有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán))第2版)。所采用的特定的可除去的保護(hù)基團(tuán)不是關(guān)鍵，優(yōu)選的可除去的羥基保護(hù)基團(tuán)包括常規(guī)的取代基，例如烯丙基、芐基、乙酰基、氯乙酰基、硫代芐基、亞芐基、苯甲酰甲基、叔丁基二苯基甲硅烷基和任意其他這樣的基團(tuán)，能夠通過化學(xué)方法被引入到羥基官能團(tuán)，隨后在與產(chǎn)物性質(zhì)相容的溫和條件下通過化學(xué)或酶學(xué)方法被選擇性除去。優(yōu)選的可除去的巰基保護(hù)基團(tuán)包括二硫基、酰基、芐基等。
優(yōu)選的可除去的氨基保護(hù)基團(tuán)包括常規(guī)的取代基，例如叔丁氧羰基(t-BOC)、芐氧羰基(CBZ)、芴基甲氧羰基(FMOC)、烯丙氧羰基(ALOC)等，它們能夠通過與產(chǎn)物性質(zhì)相容的條件被除去。
優(yōu)選的羧基保護(hù)基團(tuán)包括酯，例如甲基、乙基、丙基、叔丁基酯，它們能夠通過與產(chǎn)物性質(zhì)相容的溫和條件被除去。
術(shù)語(yǔ)“可選”或“可選地”表示隨后描述的事件、環(huán)境或取代基可以發(fā)生或不發(fā)生，包括其中所述事件或環(huán)境發(fā)生的情形和不發(fā)生的情形。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“配體”表示這樣一種化合物，它是β2腎上腺素能受體的結(jié)合配偶體，因互補(bǔ)性而與之結(jié)合。優(yōu)選的配體是β2腎上腺素能受體的激動(dòng)劑、部分激動(dòng)劑或拮抗劑。被受體識(shí)別的配體的特異性區(qū)域被稱為“配體結(jié)構(gòu)域”。配體可能獨(dú)自與受體結(jié)合，或者可能需要一種或多種非配體組分的存在用于結(jié)合(例如配體與各種配體結(jié)合部位的結(jié)合需要Ca+2、Mg+2或水分子)?？捎糜诒景l(fā)明的配體實(shí)例如本文所述。本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)到，并非特異性分子識(shí)別和結(jié)合活性所必需的配體結(jié)構(gòu)部分可以有本質(zhì)上的改變，可以被無(wú)關(guān)結(jié)構(gòu)(例如如下所定義的輔助基團(tuán))代替或取代，在有些情況下還可以完全省略，而不影響結(jié)合的相互作用。對(duì)配體的主要要求是它具有如上所定義的配體結(jié)構(gòu)域?？梢岳斫獾氖切g(shù)語(yǔ)配體并不打算限于已知可用于與β2腎上腺素能受體結(jié)合的化合物(例如已知藥物)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解到，術(shù)語(yǔ)配體同樣可適用于通常與β2腎上腺素能受體結(jié)合性質(zhì)無(wú)關(guān)的分子。另外應(yīng)當(dāng)注意，作為單體表現(xiàn)邊緣活性或者缺乏有用活性的配體可能作為多價(jià)化合物是非常有活性的，這是由多價(jià)性所賦予的。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“配體”打算包括配體的外消旋形式以及單獨(dú)的對(duì)映體和非對(duì)映體及其非外消旋的混合物。
術(shù)語(yǔ)“多結(jié)合性化合物或活性劑”指這樣一種化合物，它是如下所定義的多價(jià)的，具有2-10個(gè)與一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)共價(jià)鍵合的配體。在所有情況下，多結(jié)合性化合物中的每個(gè)配體和連接基團(tuán)是獨(dú)立地加以選擇的，以便多結(jié)合性化合物包括對(duì)稱的化合物(也就是說(shuō)，其中每個(gè)配體以及每個(gè)連接基團(tuán)是相同的)和不對(duì)稱的化合物(也就是說(shuō)，其中至少一個(gè)配體不同于其他配體和/或至少一個(gè)連接基團(tuán)不同于其他連接基團(tuán))。多結(jié)合性化合物提供比用于結(jié)合的等量未連接配體集合更大的生物和/或治療效果。也就是說(shuō)，與多結(jié)合性化合物連接的配體的生物和/或治療效果大于用于與配體結(jié)合部位(受體)結(jié)合的等量未連接的配體。措辭“生物或治療效果增加”例如包括親合性增加、選擇性增加、毒性減少、活性或作用的持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)、殺死細(xì)胞(例如真菌病原體、癌細(xì)胞等)的能力增加、副作用減少、治療指數(shù)增加、生物利用度提高、藥動(dòng)學(xué)提高、活性譜提高等。本發(fā)明的多結(jié)合性化合物將表現(xiàn)至少一種、優(yōu)選為不止一種上述效果。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“單價(jià)”指在如本文所定義的一個(gè)配體與如本文所定義的一個(gè)配體結(jié)合部位之間的單一結(jié)合的相互作用。應(yīng)當(dāng)注意，當(dāng)僅有一個(gè)配體與配體結(jié)合部位相互作用時(shí)，具有一個(gè)配體(或多個(gè)配體)的多個(gè)副本的化合物表現(xiàn)單價(jià)性。單價(jià)相互作用實(shí)例如下所示。 本文所用的術(shù)語(yǔ)“多價(jià)”指2至10個(gè)所連接的配體(它們可以是相同或不同的)同時(shí)與兩個(gè)或多個(gè)相應(yīng)的受體(配體結(jié)合部位) (它們可以是相同或不同的)結(jié)合。
例如，通過連接基團(tuán)連接的兩個(gè)配體同時(shí)與兩個(gè)配體結(jié)合部位結(jié)合將被視為二價(jià)；如此連接的三個(gè)配體將是三價(jià)的實(shí)例。闡述攜帶三個(gè)配體的多結(jié)合性化合物的一價(jià)結(jié)合與三價(jià)結(jié)合的實(shí)例如下所示 單價(jià)相互作用 三價(jià)相互作用應(yīng)當(dāng)認(rèn)為，不是全部含有與一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)連接的配體的多個(gè)副本的化合物都必然地表現(xiàn)多價(jià)現(xiàn)象，也就是說(shuō)，多結(jié)合性藥物的生物和/或治療效果大于用于與配體結(jié)合部位(受體)結(jié)合的未連接配體集合的總和。為了發(fā)生多價(jià)現(xiàn)象，通過一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)連接的配體必須被連接基團(tuán)以特異性方式呈遞給它們的配體結(jié)合部位，目的是引起所需的配體-定向結(jié)果，從而產(chǎn)生多結(jié)合事件。
此外，本發(fā)明的多結(jié)合性化合物可以由全部為β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑、部分激動(dòng)劑的配體組成，或者可以由選自β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑和拮抗劑的配體組成，其條件是多結(jié)合性化合物表現(xiàn)總體的β2腎上腺素能受體激動(dòng)或部分激動(dòng)活性。對(duì)腎上腺素受體表現(xiàn)部分激動(dòng)劑活性的多結(jié)合性化合物優(yōu)于表現(xiàn)完全激動(dòng)作用的化合物。部分激動(dòng)作用可以導(dǎo)致哺乳動(dòng)物組織中受體脫敏、受體再循環(huán)或受體表達(dá)的速率降低。對(duì)病理?xiàng)l件或疾病的長(zhǎng)期治療來(lái)說(shuō)，使用這樣一種激動(dòng)劑可以導(dǎo)致治療有益效果高于充當(dāng)完全激動(dòng)劑的化合物。多結(jié)合性化合物還可以或者另外充當(dāng)組織選擇性部分激動(dòng)劑。例如，具有β2腎上腺素受體激動(dòng)劑活性的多結(jié)合性化合物可以在松弛支氣管組織平滑肌細(xì)胞中表現(xiàn)完全最大反應(yīng)，但是在心肌組織中對(duì)腎上腺素受體激動(dòng)作用表現(xiàn)部分最大反應(yīng)。因而，多結(jié)合性化合物如果是組織選擇性部分激動(dòng)劑，那么不良副作用的發(fā)生率更低，例如陽(yáng)性變時(shí)現(xiàn)象和心輸出量增加。
術(shù)語(yǔ)“效力”指配體能夠達(dá)到所需生物或治療效果的最低濃度。配體的效力通常與其對(duì)配體結(jié)合部位的親合性成比例。在有些情況下，效力可以與其親合性是非線性相關(guān)的。在比較兩種藥物的效力時(shí)，例如多結(jié)合性藥物和其未連接配體集合，在相同的試驗(yàn)條件下測(cè)定各自的劑量-反應(yīng)曲線(例如在體外或體內(nèi)測(cè)定中，在適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型中，例如人類患者)。說(shuō)明效力增強(qiáng)的發(fā)現(xiàn)是，多結(jié)合性藥物在比未連接配體集合更低的濃度下產(chǎn)生等價(jià)的生物或治療效果。
術(shù)語(yǔ)“選擇性”或“特異性”是配體與不同配體結(jié)合部位(受體)結(jié)合優(yōu)選的量度。配體關(guān)于其靶配體結(jié)合部位相對(duì)另一種配體結(jié)合部位的選擇性以各自的Kd值(也就是關(guān)于每種配體-受體復(fù)合物的離解常數(shù))之比表示，或者在觀察到生物效果低于Kd的情況下，以各自的EC50(也就是關(guān)于配體與兩種不同配體結(jié)合部位(受體)相互作用產(chǎn)生50％最大反應(yīng)的濃度)之比表示。
術(shù)語(yǔ)“配體結(jié)合部位”表示β腎上腺素能受體上識(shí)別配體結(jié)構(gòu)域并且為配體提供結(jié)合配偶體的部位。配體結(jié)合部位可以由單體或多聚結(jié)構(gòu)所定義。這種相互作用能夠產(chǎn)生獨(dú)特的生物學(xué)效果，例如激動(dòng)作用、拮抗作用和調(diào)制作用，或者它可以維持正在進(jìn)行中的生物學(xué)事件等。
應(yīng)當(dāng)承認(rèn)，參與生物多價(jià)結(jié)合相互作用的受體的配體結(jié)合部位受到不同程度的分子間與分子內(nèi)締合的限制。例如，配體結(jié)合部位可以共價(jià)連接為單一結(jié)構(gòu)、非共價(jià)締合為多聚結(jié)構(gòu)、包埋在膜或聚合基質(zhì)中等等，因此比作為單體存在于溶液中的相同結(jié)構(gòu)具有較少的平動(dòng)與轉(zhuǎn)動(dòng)自由。
術(shù)語(yǔ)“激動(dòng)作用”、“部分激動(dòng)作用”和“拮抗作用”是本領(lǐng)域所熟知的。術(shù)語(yǔ)“調(diào)制作用”指配體通過與配體結(jié)合部位結(jié)合而改變激動(dòng)劑或拮抗劑活性的能力。
術(shù)語(yǔ)“惰性有機(jī)溶劑”或“惰性溶劑”表示在所述與之有關(guān)的反應(yīng)條件下是惰性的溶劑，例如包括苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、氯仿、二氯甲烷、二乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲乙酮、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、叔丁醇、二噁烷、吡啶等。除非有相反的指定，用在本文所述反應(yīng)中的溶劑都是惰性溶劑。
術(shù)語(yǔ)“治療”指哺乳動(dòng)物病理?xiàng)l件的任意治療，包括(i)預(yù)防受治療者發(fā)生病理?xiàng)l件，該受治療者預(yù)先有患病傾向，但尚未被診斷，因此治療構(gòu)成對(duì)疾病的預(yù)防性處理；(ii)抑制病理?xiàng)l件，也就是阻止它的發(fā)展；(iii)緩解病理?xiàng)l件，也就是導(dǎo)致病理?xiàng)l件的消退；或者(iv)緩解由該病理?xiàng)l件介導(dǎo)的條件。
術(shù)語(yǔ)“受配體治療調(diào)制的病理?xiàng)l件”涵蓋本領(lǐng)域公認(rèn)的一般可用β2腎上腺素能受體治療的所有疾病狀態(tài)(即病理?xiàng)l件)，和已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可用本發(fā)明特異性多結(jié)合性化合物治療的疾病狀態(tài)。這類疾病狀態(tài)例如包括哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病等。
術(shù)語(yǔ)“治療學(xué)上的有效量”指多結(jié)合性化合物在對(duì)需要如上所定義的治療的哺乳動(dòng)物給藥時(shí)，足以進(jìn)行這類治療的量。治療學(xué)上的有效量將因所治療的受治療者與疾病條件、受治療者的體重與年齡、疾病條件的嚴(yán)重性、給藥方式等而異，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以輕易地確定之。
在適當(dāng)時(shí)以符號(hào)“X”限定的術(shù)語(yǔ)“連接基團(tuán)”指共價(jià)連接2至10個(gè)(如上所限定的)配體的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)，以提供多價(jià)化合物。連接基團(tuán)尤其是配體-定向的實(shí)體，允許其上連接配體的至少兩個(gè)副本(它們可以是相同或不同的)。另外，連接基團(tuán)可以是手性或非手性分子。在有些情況下，連接基團(tuán)可以是連接配體的共價(jià)鍵，以提供多價(jià)化合物。另外，在有些情況下，連接基團(tuán)本身可以是生物學(xué)活性的。不過，術(shù)語(yǔ)“連接基團(tuán)”并不延伸涵蓋固體惰性載體，例如珠粒、玻璃顆粒、纖維等。但是可以理解的是，如果需要的話，本發(fā)明的多結(jié)合性化合物可以與固體載體連接。例如，這類與固體載體的連接可以用于分離和純化過程和類似的應(yīng)用。
實(shí)現(xiàn)多價(jià)結(jié)合的程度取決于連接配體的一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)呈遞這些配體給可用配體結(jié)合部位排列的效率。遠(yuǎn)不止呈遞這些配體用于與配體結(jié)合部位發(fā)生多價(jià)相互作用的是，一個(gè)或多個(gè)連接基團(tuán)在空間上限制這些相互作用發(fā)生在由該連接基團(tuán)所定義的尺度內(nèi)。因而，連接基團(tuán)的結(jié)構(gòu)特征(化合價(jià)、幾何學(xué)、取向、大小、柔韌性、化學(xué)組成等)是在決定它們的活性中扮演重要角色的多結(jié)合性藥物特征。
用于本發(fā)明的連接基團(tuán)是這樣選擇的，允許配體與β2腎上腺素能受體的配體結(jié)合部位的多價(jià)結(jié)合，無(wú)論這類部位是否位于受體結(jié)構(gòu)的內(nèi)部、既在內(nèi)部也在外周、還是在其中間位置。
代表性式(I)化合物I.代表性式(I)多結(jié)合性化合物其中p是2，q是1，Ar1是4-羥基-3-羥甲基苯基，Ar2是1，4-亞苯基，R1和R2是氫，X、W、Q和Ar3是如下表A所定義的
表A
II.代表性式(I)多結(jié)合性化合物其中p是2，q是1，Ar1是4-羥基-3-羥甲基苯基，Ar2是1，4-亞苯基，R1和R2是氫，X、W、Q和Ar3是如下表B所定義的
表B
III.代表性式(I)多結(jié)合性化合物其中p是2，q是1，Ar1是4-羥基-3-羥甲基苯基，R1和R2是氫，Ar3是(4-羥基-3-羥甲基)苯基，X、W、Q和Ar2是如下表C所定義的
表C
IV.代表性式(I)多結(jié)合性化合物其中p是2，q是1，Ar1和Ar3是4-羥基-3-羥甲基苯基，R1和R2是氫，Q是一條鍵，W、Ar2和X如下表D所定義的
表D
V.代表性式(I)多結(jié)合性化合物其中p是2，q是1，R1和R2是氫，W是-(CH2)2-，Ar2是1，4-亞苯基，-Q-Ar3是[2-羥基-2-苯基]乙氨基，X是一條鍵，Ar1是如下表E所定義的
表E
VI.各種化合物 優(yōu)選的實(shí)施方式盡管發(fā)明概述部分已經(jīng)闡明了最寬的本發(fā)明定義，不過某些式(I)化合物是優(yōu)選的。
(A)優(yōu)選的一組是式(II)的多結(jié)合性化合物 其中*C具有RS、R或S立體化學(xué)。
在這組(A)中，更優(yōu)選的一組化合物是(i)Ar1是芳基，更優(yōu)選地，Ar1是式(C)的苯基環(huán) 其中R4是氫、烷基、鹵素或烴氧基，優(yōu)選為氫、甲基、氟、氯或甲氧基；R5是氫、羥基、鹵素、氨基或-NHSO2Ra，其中Ra是烷基，優(yōu)選為氫、羥基、氟、氯、氨基或-NHSO2CH3；R6是氫、鹵素、羥基、烴氧基、取代的烷基、磺?；被?、氨基酰基或?；被?；優(yōu)選為氫、氯、氟、羥基、甲氧基、羥甲基、-CH2SO2CH3、-NHSO2CH3、-NHCHO、-CONH2或-NHCONH2；(ii)Ar1是雜芳基，更優(yōu)選地，Ar1是2，8-二羥基喹啉-5-基或3-溴異噁唑-5-基；或者(iii)Ar1是雜環(huán)基，更優(yōu)選地，Ar1是與芳基環(huán)稠合的雜環(huán)基，最優(yōu)選為6-氟苯并二氫吡喃-2-基；W是連接-NR2-基團(tuán)與Ar2的鍵、亞烷基或取代的亞烷基，其中在亞烷基和取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被-O-代替，優(yōu)選為共價(jià)鍵、亞甲基、亞乙基、亞丙基、-(CH2)6-O-(CH2)3-、-(CH2)6-O-或-CH2CH(OH)CH2-O-；Ar2是苯基，其中W和X基團(tuán)連接在該苯基環(huán)的1，2-、1，3-和1，4-位；可選擇性地被甲基取代的環(huán)己基，其中W和X基團(tuán)連接在該環(huán)己基環(huán)的1，3-和1，4-位；或哌嗪，其中W和X基團(tuán)連接在該哌嗪環(huán)的1，4-位，優(yōu)選為1，4-亞苯基。
在上述更優(yōu)選的組中，進(jìn)而更優(yōu)選的兩組化合物是(a)X是-O-、-O-亞烷基、-O-(亞芳基)-NH-(取代的亞烷基)-、-O-(亞烷基)-O-(亞芳基)-(亞烷基)-O-亞烷基-NH-(取代的亞烷基)-、-O-(亞烷基)-O-(亞芳基)-或-(亞烷基)-(亞環(huán)烷基)-NH-(取代的亞烷基)-，優(yōu)選為-O-(CH2)4-；-CH2-(1，4-環(huán)己基)-NH-CH2-CH(OH)-；-O-(1，4-亞苯基)-NH-CH2-CH(OH)-；-O-(CH2)10-O-(1，4-亞苯基)-(CH2)3-O-(CH2)6-NH-CH2-CH(OH)-；-O-(CH2)6-O-(1，4-亞苯基)-(CH2)3-O-(CH2)5-NH-CH2-CH(OH)-；或-O-(CH2)6-O-(1，4-亞苯基)-；Q是共價(jià)鍵；或者(b)X是一條鍵；Q是取代的亞烷基，其中在所述取代的亞烷基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可選地被選自-NRa-(其中Ra是氫、烷基或酰基)和-O-的雜原子代替，優(yōu)選為-NH-CH2-**CH(OH)-；-NH-CH2-**CH(OH)-CH2-O-；-NH-**CH(CH2OH)-；-CH2-NH-CH2-**CH(OH)-；-C(CH3)2-NH-CH2-**CH(OH)-；-(CH2)3-NH-CH2-**CH(OH)-；-(CH2)3-O-(CH2)6-NH-CH2-**CH(OH)-；-(CH2)2-NH-CH2-**CH(OH)-；-O-(CH2)-**CH(OH)-CH2-NH-CH2-**CH(OH)-；或-NH-CH2-**CH(OH)-CH2-O-；更優(yōu)選為-NH-CH2-**CH(OH)-；-NH-**CH(CH2OH)-；-(CH2)3-O-(CH2)6-NH-CH2-**CH(OH)-；或-NH-CH2-**CH(OH)-CH2-O-(其中**是RS、R或S立體化學(xué))；最優(yōu)選為-NH-**CH(CH2OH)-，其中**是RS、R或S立體化學(xué)。
在上述優(yōu)選的、更優(yōu)選的化合物組中，特別優(yōu)選的化合物組是(i)Ar3與上述優(yōu)選實(shí)施方式(A)(i)-(iii)中所定義的Ar1相同。另一組特別優(yōu)選的化合物是(ii)Ar3是式(d)苯基環(huán) 其中R7是氫、烷基、烯基、取代的烷基、鹵素、烴氧基、取代的烴氧基、羥基、氨基酰基或雜芳基，優(yōu)選為氫、甲基、丙烯-2-基、氟、氯、甲氧基、-OCH2CO2Me、-OCON(CH3)2、羥基、-CH2C()NH2、-NHCOCH3、-NHCHO、咪唑-1-基或1-甲基-4-三氟甲基咪唑-2-基；R8是氫、鹵素、烴氧基、取代的烴氧基或?；被瑑?yōu)選為氫、氟、氯、甲氧基、-OCH2CO2Me、-OCON(CH3)2、-NHCHO或-CONH2。
另外一組特別優(yōu)選的化合物是(iii)Ar3是萘基、吡啶基、苯并咪唑-1-基、吲哚基、2-氰基吲哚基、咔唑基、4-甲基二氫茚基、5-(CH3CO2CH2O-)-1，2，3，4-四氫萘基、1H-2-氧代吲哚、2，3，4-三氫硫雜萘、4-羥基-2-苯并噻唑啉酮或4-氧代-2，3-二氫硫雜萘。
在上述優(yōu)選的、更優(yōu)選的和特別優(yōu)選的組中，進(jìn)而更加特別優(yōu)選的組是Ar1是苯基、4-羥基苯基、3，4-二羥基苯基、3，4-二氯苯基、3，5-二羥基苯基、2-氯-3，4-二羥基苯基、2-氟-3，4-二羥基苯基、2-氯-3，5-二羥基苯基、2-氟-3，5-二羥基苯基、4-羥基-3-甲氧基苯基、4-羥基-3-羥甲基苯基、4-羥基-3-(HCONH-)苯基、4-羥基-3-(NH2CO-)苯基、3-氯苯基、2，5-二甲氧基苯基、4-(CH3SO2NH-)苯基、4-羥基-3-(CH3SO2CH2-)苯基、4-羥基-3-(CH3SO2NH-)苯基、4-羥基-3-(NH2CONH-)苯基、3，5-二氯-4-氨基苯基、 或 優(yōu)選為4-羥基-3-羥甲基苯基、4-羥基-3-(HCONH-)苯基、3，5-二氯-4-氨基苯基或 最優(yōu)選為4-羥基-3-(HCONH-)苯基或3，5-二氯-4-氨基苯基；Ar3是 優(yōu)選為苯基或4-羥基-3-羥甲基苯基，更優(yōu)選為苯基。
另外一組優(yōu)選的式(I)化合物是1.下式化合物 其中Ar1選自由4-氨基-3，5-二氯苯基和3-甲酰基氨基-4-羥基苯基組成的組；*C與**C上的立體化學(xué)是(RS)與(RS)；(R)與(R)；(S)與(S)；(R)與(S)；或(S)與(R)；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
在這組中，更優(yōu)選的化合物是其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(RS)，**C上的立體化學(xué)是(RS)，或者*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(R)，或者*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(S)，或者*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(S)，或者*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
在這組中，另一種更優(yōu)選的化合物是其中Ar1是3-甲?；被?4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(RS)，**C上的立體化學(xué)是(RS)，或者*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(R)，或者*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(S)，或者*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(S)，或者*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
通用合成流程本發(fā)明化合物可以通過下示反應(yīng)流程所述方法加以制備。
用于制備這些化合物的原料和試劑可從供應(yīng)商處獲得，例如Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，Wisconsin，USA)、Bachem(Torrance，California，USA)、Emka-Chemie或Sigma(St.Louis，Missouri，USA)，或者通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法加以制備，遵循參考文獻(xiàn)所闡明的工藝，例如Fieser and Fieser’s Reagents forOrganic Synthesis(Fieser與Fieser氏有機(jī)合成試劑)第1-15卷(John Wiley and Sons，1991)、Rodd’s Chemistry of CarbonCompounds(Rodd氏碳化合物化學(xué))第1-5卷和增刊(ElsevierScience Publishers，1989)、Organic Reactions(有機(jī)反應(yīng))第1-40卷(John Wiley and Sons，1991)、March’s Advnced OrganicChemistry(March氏先進(jìn)有機(jī)化學(xué))第4版(John Wiley and Sons)和Larock’s Comprehensive Organic Transformations(Larock氏綜合有機(jī)轉(zhuǎn)化)(VCH Publishers Inc.，1989)。
如果需要的話，反應(yīng)原料和中間體可以利用常規(guī)技術(shù)加以分離和純化，包括但不限于過濾、蒸餾、結(jié)晶、色譜等。這類原料可以利用常規(guī)手段加以特征鑒定，包括物理常數(shù)和光譜數(shù)據(jù)。
此外將領(lǐng)會(huì)到的是，盡管所給出的是典型的或優(yōu)選的方法條件(即反應(yīng)溫度、時(shí)間、反應(yīng)物的摩爾比、溶劑、壓力等)，不過還可以使用其他方法條件，另有規(guī)定除外。最佳反應(yīng)條件可以因所用特定反應(yīng)物或溶劑而異，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員借助例行優(yōu)化工藝可以確定這類條件。
另外，將為本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，常規(guī)的保護(hù)基團(tuán)可能是必要的，以防止某些官能團(tuán)經(jīng)歷不需要的反應(yīng)。適合于特定官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)以及適合于保護(hù)和去保護(hù)的條件都是本領(lǐng)域所熟知的。例如，大量的保護(hù)基團(tuán)和它們的引入與除去描述在T.W.GTeene和P.G.H.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis(有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán))第2版，Wiley，New York，1991及其引用的參考文獻(xiàn)中。
這些流程僅僅是一些方法的說(shuō)明，據(jù)此可以合成本發(fā)明化合物，參考公開內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)@些流程進(jìn)行各種修飾和獲得啟發(fā)。
式(I)多結(jié)合性化合物的制備其中p是2和q是1的式(I)多結(jié)合性化合物可以如下流程A-D所述加以制備。
其中p是2和q是1的式(I)多結(jié)合性化合物可以這樣制備，如下流程A所示，使配體L與連接基團(tuán)X共價(jià)連接，其中至少一個(gè)配體選自如發(fā)明概述部分所定義的式(a)化合物。
流程A方法(a) 方法(b) 方法(a)中，其中p是2和q是1的式(I)多結(jié)合性化合物是在一個(gè)步驟中制備的，使配體L與連接基團(tuán)X共價(jià)連接，其中FG1和FG2代表官能團(tuán)，例如鹵素、氨基、羥基、硫、醛、酮、羧基、羧基衍生物(例如酰鹵、酯、酰氨基等)。這種方法用于制備其中配體相同的式(I)化合物。
方法(b)中，式(I)化合物是按逐步方式制備的，使一當(dāng)量配體L1與配體X共價(jià)連接，其中FG1和FG2代表如上所定義的官能團(tuán)，F(xiàn)G2PG是被保護(hù)的官能團(tuán)，得到式(II)中間體。去保護(hù)配體上的第二官能團(tuán)，然后與配體L2反應(yīng)，后者可以與配體L1相同或不同，得到式(I)化合物。這種方法適合于制備其中配體不相同的式(I)化合物。
利用常規(guī)化學(xué)技術(shù)使配體與連接基團(tuán)共價(jià)連接，提供配體與連接基團(tuán)的共價(jià)鍵。導(dǎo)致這類鍵的反應(yīng)化學(xué)是本領(lǐng)域所熟知的，涉及在連接基團(tuán)和配體上使用互補(bǔ)性官能團(tuán)，如下表I所示。
表I代表性的互補(bǔ)性鍵合化學(xué)第一反應(yīng)基團(tuán)第二反應(yīng)基團(tuán) 鍵羧基胺 酰胺磺酰鹵 胺 磺酰胺羥基 烷基/芳基鹵化物 醚羥基 異氰酸酯 尿烷胺 環(huán)氧化物 β-羥胺胺 烷基/芳基鹵化物 烷基胺胺 異氰酸酯 脲羥基 羧基 酯胺 醛 胺在適合的熟知的活化劑的存在下，例如二環(huán)己基碳二亞胺，連接基團(tuán)或配體的羧酸與配體或連接基團(tuán)的伯或仲胺之間的反應(yīng)生成共價(jià)連接配體與連接基團(tuán)的酰胺鍵；在堿的存在下，例如三乙胺、吡啶等，連接基團(tuán)或配體的胺基與配體或連接基團(tuán)的磺酰鹵之間的反應(yīng)生成共價(jià)連接配體與連接基團(tuán)的磺酰胺鍵；在堿的存在下，例如三乙胺、吡啶等，連接基團(tuán)或配體的醇或酚基與配體或連接基團(tuán)的烷基或芳基鹵化物之間的反應(yīng)生成共價(jià)連接配體與連接基團(tuán)的醚鍵。
如下流程B所示，式(I)多結(jié)合性化合物——其中p是2，q是1，第二配體Ar3與Ar1相同，X是一條鍵，Q是2-羥基乙氨基，各配體通過Ar2基團(tuán)連接——可以從式1的芳基乙二醛衍生物制備。
流程B 式1苯乙酮衍生物與式2二胺在醚性、例如四氫呋喃溶液中縮合，得到式3亞胺。亞胺被適合的還原劑還原，例如二硼烷，得到式(I)化合物。適合的反應(yīng)溶劑是四氫呋喃等。其中Ar1是苯基的化合物1是這樣制備的，在含有48％氫溴酸的二甲基亞砜中加熱苯乙酮。
式1化合物可以通過本領(lǐng)域熟知的方法加以制備。例如，α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮可以這樣制備，在48％氫溴酸中加熱5-乙?；畻钏峒柞ァ?br> 作為替代選擇，如下流程C所示，式(I)多結(jié)合性化合物——其中p是2，q是1，第二配體Ar3與Ar1相同，X是一條鍵，Q是2-羥基乙氨基，各配體通過Ar2基團(tuán)連接——可以從式4的芳基環(huán)氧化物制備。流程C 式(I)化合物可以這樣制備，使式4環(huán)氧化物與式2二胺反應(yīng)。環(huán)氧化物4是商業(yè)上可得到的，或者它們可以通過下述方法制備Kierstead，R.W.等，J.Med.Chem.(醫(yī)藥化學(xué)雜志)26，1561-1569，(1983)或Hett，R.等，Tet.Lett.(四面體快報(bào))35，9345-9348，(1994)。
如下流程D所示，另一種制備式(I)多結(jié)合性化合物——其中p是2，q是1，第二配體Ar3與Ar1相同，X是一條鍵，Q是2-羥基乙氨基，各配體通過Ar2基團(tuán)連接——的方法可以從式5的苯乙酮衍生物開始。
流程D
式5苯乙酮衍生物與溴在鹵代有機(jī)溶劑中溴化，例如氯仿，得到式6的α-溴代苯乙酮衍生物。用疊氮化鈉處理化合物6，然后用適合的還原劑還原所得疊氮化物7，例如氫化鋰鋁，得到式8乙醇胺衍生物。兩當(dāng)量化合物8與式9二醛化合物縮合，得到式10亞胺，再如上流程A所述轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。
另一種制備式(I)多結(jié)合性化合物——其中p是2，q是1，Ar1與Ar3是不同的，X是一條鍵，Q是2-羥基乙氨基，各配體通過Ar2基團(tuán)連接——的方法可以如下流程E所示。
流程E 式11二胺(其中PG1和PG2是適合的氨基保護(hù)基團(tuán)，它們可以被選擇性除去)與式2乙二醛縮合，然后在適合的反應(yīng)溶劑中，例如四氫呋喃，用適合的還原劑還原所得式12亞胺，例如二硼烷，得到式13化合物。式11化合物可以通過圖14所述方法制備。
式15化合物與式16的α-溴代苯乙酮化合物反應(yīng)，然后還原酮基，得到式16化合物。反應(yīng)在本領(lǐng)域熟知的條件下進(jìn)行。去保護(hù)氨基保護(hù)基團(tuán)，得到式(I)化合物。去保護(hù)反應(yīng)條件取決于保護(hù)基團(tuán)的性質(zhì)。例如，如果保護(hù)基團(tuán)是芐基，那么在催化氫化反應(yīng)條件下除去之。
只要是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑的任意化合物都能夠用作本發(fā)明中的配體。通常，選擇用作配體的化合物將具有至少一個(gè)官能團(tuán)，例如氨基、羥基、巰基或羧基等，以便化合物容易與連接基團(tuán)偶聯(lián)。具有這類官能團(tuán)的化合物是本領(lǐng)域已知的，或者可以使用常規(guī)試劑和工藝通過已知化合物的例行修飾加以制備。
連接基團(tuán)可以連接在配體分子的不同位置上，以實(shí)現(xiàn)配體結(jié)構(gòu)域的不同取向，由此促進(jìn)多價(jià)性。盡管β-腎上腺素能-調(diào)制配體上的大量位置在合成實(shí)踐中都可用于連接，不過優(yōu)選的是保持那些對(duì)配體-受體結(jié)合來(lái)說(shuō)是最重要的配體亞結(jié)構(gòu)。目前，芳基和側(cè)鏈氮是優(yōu)選的連接點(diǎn)。
對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見的是，上述化學(xué)不限于制備二價(jià)的式(I)多結(jié)合性化合物，還能夠用于制備三價(jià)、四價(jià)等的式(I)多結(jié)合性化合物。
連接基團(tuán)連接在配體上的這樣一個(gè)位置，它保留配體結(jié)構(gòu)域-配體結(jié)合部位的相互作用，具體來(lái)說(shuō)它允許配體的配體結(jié)構(gòu)域定向自身以與配體結(jié)合部位結(jié)合。這類用于連接的位置和合成方案是本領(lǐng)域所熟知的。術(shù)語(yǔ)連接基團(tuán)涵蓋所有不被視為配體的部分。
其中顯示配體結(jié)構(gòu)域的相對(duì)取向衍生自配體與連接基團(tuán)的特定連接點(diǎn)和框架幾何學(xué)。確定配體上可接受的取代位置通常基于配體和/或同種物的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系(SAR)的現(xiàn)有知識(shí)和/或關(guān)于配體-受體復(fù)合物的結(jié)構(gòu)信息(例如X-射線結(jié)晶學(xué)、NMR等)。這類共價(jià)連接的位置和合成方法是本領(lǐng)域所熟知的。在與所選擇的連接基團(tuán)連接(或者與顯著比例的連接基團(tuán)連接，例如連接基團(tuán)的2-10個(gè)原子)之后，可以在有關(guān)測(cè)定法中試驗(yàn)單價(jià)連接基團(tuán)-配體軛合物的活性保留程度。
連接基團(tuán)在與配體的多個(gè)副本共價(jià)連接時(shí)，生成生物可相容的、基本上非致免疫的多結(jié)合性化合物。多結(jié)合性化合物的生物活性對(duì)連接基團(tuán)的化合價(jià)、幾何學(xué)、組成、大小、柔韌性或剛性等、繼而對(duì)多結(jié)合性化合物的總體結(jié)構(gòu)、以及對(duì)陰離子或陽(yáng)離子電荷的存在與否、連接基團(tuán)的相對(duì)疏水性/親水性等是非常敏感的。因此，優(yōu)選地選擇這樣的連接基團(tuán)，以最大化多結(jié)合性化合物的生物活性，增強(qiáng)分子的生物活性。一般來(lái)說(shuō)，連接基團(tuán)可以選自任意定向兩個(gè)或多個(gè)配體于它們的配體結(jié)合部位的有機(jī)分子構(gòu)造，以允許多價(jià)性。在這點(diǎn)上，連接基團(tuán)可以被視為其上排列配體的“框架”，目的是引起所需的配體-定向結(jié)果，從而生成多結(jié)合性化合物。
例如，不同的取向可以這樣實(shí)現(xiàn)，在框架內(nèi)包括含有單環(huán)或多環(huán)的基團(tuán)，包括芳基和/或雜芳基，或者結(jié)合有一條或多條碳-碳多重鍵的結(jié)構(gòu)(烯基、亞烯基、炔基或亞炔基)。其他基團(tuán)還可以包括支鏈或直鏈的低聚物和聚合物。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，環(huán)狀基團(tuán)的存在賦予剛性(例如芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基等)。在另一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，環(huán)是六元或十元的環(huán)。在更進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式中，環(huán)是芳香性的環(huán)，例如苯基或萘基。
技術(shù)人員能夠容易地控制連接基團(tuán)的不同疏水性/親水性特征以及帶電部分的存在與否。例如，從六亞甲基二胺(H2N(CH2)6NH2)或有關(guān)多元胺衍生的連接基團(tuán)的疏水性可以調(diào)節(jié)為基本上更接近親水性，也就是將亞烷基用聚(氧化亞烷基)代替，例如商業(yè)上可得到的“Jeffamines”。
可以設(shè)計(jì)不同的框架，以提供優(yōu)選的配體取向。這類框架可以表示為點(diǎn)陣(如下所示)，其中每個(gè)點(diǎn)都可能是一個(gè)原子，例如C、O、N、S、P、H、F、Cl、Br和F，或者該點(diǎn)可以表示在該位置上不存在原子。為了有助于理解框架結(jié)構(gòu)，框架在下圖中表示為二維排列，不過顯然框架實(shí)際上是三維排列 每個(gè)點(diǎn)要么是一個(gè)原子，選自碳、氫、氧、氮、硫、磷或鹵素，或者該點(diǎn)代表空間中的一個(gè)點(diǎn)(也就是不存在原子)。對(duì)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)顯而易見的是，柵格上僅有某些原子具有充當(dāng)配體連接點(diǎn)的能力，也就是C、O、N、S和P。
關(guān)于通常的化學(xué)鍵限制，原子可以經(jīng)由化學(xué)鍵彼此連接(單鍵、雙鍵或叁鍵，具有可接受的共振和互變異構(gòu)型)。配體可以經(jīng)由單鍵、雙鍵或叁鍵與框架連接(具有化學(xué)上可接受的互變異構(gòu)和共振型)。多配體基團(tuán)(2至10個(gè))可以這樣與框架連接，以便相鄰配體基團(tuán)之間的最小、最短路徑距離不超過100個(gè)原子。優(yōu)選地，連接基團(tuán)與配體的連接是這樣選擇的，以便兩個(gè)相鄰配體之間的最大空間距離不超過100。
由柵格所代表的連接基團(tuán)實(shí)例如下表示為聯(lián)苯構(gòu)造。 結(jié)點(diǎn)(1，2)、(2，0)、(4，4)、(5，2)、(4，0)、(6，2)、(7，4)、(9，4)、(10，2)、(9，0)、(7，0)都代表碳原子。結(jié)點(diǎn)(10，0)代表氯原子。所有其他結(jié)點(diǎn)(或點(diǎn))都是空間中的點(diǎn)(也就是表示原子不存在)。
結(jié)點(diǎn)(1，2)和(9，4)是連接點(diǎn)。氫原子被添加到結(jié)點(diǎn)(2，4)、(4，4)、(4，0)、(2，0)、(7，4)、(10，2)和(7，0)。結(jié)點(diǎn)(5，2)和(6，2)通過單鍵連接。
鑒于共振和/或互變異構(gòu)的原理，現(xiàn)有碳原子通過單鍵或雙鍵連接。
框架(連接基團(tuán))和配體基團(tuán)的交叉、事實(shí)上是框架(連接基團(tuán))本身可以具有很多不同的鍵合方式?？山邮艿泥徑尤优帕蟹绞降膶?shí)例如下圖所示CCC NCCOCC SCC PCCCCN NCNOCN SCN PCNCCO NCOOCO SCO PCOCCS NCSOCS SCS PCSCCP NCPOCP SCP PCPCNC NNCONC SNC PNCCNN NNNONNSNNPNNCNO NNOONOSNO PNOCNSNNSONS SNS PNSCNPNNPONP SNP PNPCOC NOCOOCSOC POCCOONONOONSON PONCOCNOOOOOSOOPOOCOPNOPOOSSOSPOSOOPSOPPOPCSC NSCCSN NSNOSC SSCPSCCSO NSOOSN SSNPSNCSS NSSOSO SSOPSOCSPNSPOSSSSSPSSOSPSSPPSPCPC NPCCPN NPNOPC SPCPPCCPO NPOOPN SPNPPNCPS NPSOPO SPOPPOCPPNPPOPS SPSPPSOPPSPPPPP本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠確定生成多價(jià)化合物的鍵合方式。生成這些鍵合排列的方法描述在March，“Advanced Organic Chemistry”(先進(jìn)有機(jī)化學(xué))第4版，Wiley-Interscience，New York，New York(1992)中。這些排列描述在上述流程所示點(diǎn)的柵格中。顯示了五種最優(yōu)選的原子的所有可能的排列。每種原子具有各種可接受的氧化態(tài)。帶有下劃線的鍵合排列是不可接受的和不優(yōu)選的。
其中能夠采用上述鍵合方式作為連接基團(tuán)組分的分子結(jié)構(gòu)實(shí)例如下所示。
適當(dāng)?shù)目蚣軒缀螌W(xué)和配體結(jié)構(gòu)域外在大小的確定是構(gòu)建具有增強(qiáng)活性的多結(jié)合性化合物的重要步驟。通過反復(fù)的過程，系統(tǒng)空間檢索策略可以用于輔助確定優(yōu)選的框架。圖3闡述可用于測(cè)定關(guān)于配體結(jié)構(gòu)域的最佳框架顯示取向的策略。各種其他策略對(duì)分子設(shè)計(jì)領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是已知的，可以用于制備本發(fā)明的化合物。
如圖1所示，近似中心結(jié)構(gòu)、例如苯基結(jié)構(gòu)(A道)和環(huán)己烷結(jié)構(gòu)(B道)周圍的顯示載體可以是不同的，配體結(jié)構(gòu)域與核心結(jié)構(gòu)的間距(也就是連接部分的長(zhǎng)度)也是如此。需要注意，除了這里所示以外的核心結(jié)構(gòu)可以用于測(cè)定配體的最佳框架顯示取向。該方法可能需要使用相同中心結(jié)構(gòu)的多個(gè)副本或不同類型顯示核心的組合。
上述方法可以延伸到三聚物(圖2)和更高化合價(jià)的化合物(圖3和圖4)。
如上所述生成的一批化合物各自的測(cè)定將得到具有所需增強(qiáng)活性(例如效力、選擇性等)的化合物子集。利用總體分子動(dòng)力學(xué)等技術(shù)分析該子集，將提供賦予所需性質(zhì)的框架。多種多樣的連接基團(tuán)是商業(yè)上可得到的(例如參見Available Chemistry Directory(ACD))。很多適用于本發(fā)明的連接基團(tuán)都收錄在該目錄中。其他則是容易為本領(lǐng)域熟知的方法合成的和/或如下所述。
在選擇優(yōu)選的框架幾何學(xué)之后，通過改變連接基團(tuán)的化學(xué)組成可以優(yōu)化其物理性質(zhì)。連接基團(tuán)的組成可以是各不相同的，以實(shí)現(xiàn)關(guān)于多結(jié)合性化合物的所需的物理性質(zhì)。
因此可以看出，關(guān)于連接基團(tuán)的組成存在過多的可能性。連接基團(tuán)的實(shí)例包括脂族部分、芳族部分、甾族部分、肽等。具體實(shí)例是肽或聚酰胺、烴、芳族基團(tuán)、醚、脂質(zhì)、陽(yáng)離子或陰離子基團(tuán)或其組合。
下面給出實(shí)例，但是應(yīng)當(dāng)理解，可以進(jìn)行各種改變，可以取代等價(jià)物，而不背離發(fā)明的真正精神和范圍。例如，可以這樣修飾連接基團(tuán)的性質(zhì)，向連接基團(tuán)內(nèi)或連接基團(tuán)上加入或插入輔助基團(tuán)，例如改變多結(jié)合性化合物(在水、脂肪、脂質(zhì)、生物流體等中)的溶解度、疏水性、親水性、連接基團(tuán)柔韌性、抗原性、穩(wěn)定性等。例如，向連接基團(tuán)上或連接基團(tuán)內(nèi)引入一個(gè)或多個(gè)聚(乙二醇)(PEG)基團(tuán)，增強(qiáng)多結(jié)合性化合物的親水性和水溶解度，增加分子量和分子大小，根據(jù)未PEG基化連接基團(tuán)的性質(zhì)，還可以延長(zhǎng)體內(nèi)保留時(shí)間。進(jìn)而PEG可以減少抗原性，有可能增強(qiáng)連接基團(tuán)的總體剛性。
增強(qiáng)連接基團(tuán)的水溶解度/親水性的輔助基團(tuán)和所得多結(jié)合性化合物可用于實(shí)施本發(fā)明。因而，使用輔助基團(tuán)是在本發(fā)明的范圍內(nèi)的，例如乙二醇、醇、多元醇(例如甘油、甘油丙氧基化物、糖類，包括單糖、寡糖等)、羧酸鹽(例如谷氨酸、丙烯酸等的小重復(fù)單元)、胺(例如四亞乙基戊胺)等的小重復(fù)單元，以增強(qiáng)本發(fā)明多結(jié)合性化合物的水溶解度和/或親水性。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，用于提高水溶解度/親水性的輔助基團(tuán)將是聚醚。
在連接基團(tuán)的結(jié)構(gòu)內(nèi)摻入親脂性輔助基團(tuán)以增強(qiáng)本文所述多結(jié)合性化合物的親脂性和/或疏水性，這也在本發(fā)明的范圍內(nèi)?？捎糜诒景l(fā)明連接基團(tuán)的親脂性基團(tuán)例如包括芳基和雜芳基，它們?nèi)缟峡梢允俏慈〈幕蛘弑黄渌鶊F(tuán)取代，但是至少被允許它們與連接基團(tuán)共價(jià)連接的基團(tuán)取代。其他可用于本發(fā)明連接基團(tuán)的親脂性基團(tuán)包括脂肪酸衍生物，它們?cè)谒越橘|(zhì)中直到達(dá)到更高的濃度才形成雙分子層。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)還有輔助基團(tuán)的用途，這導(dǎo)致多結(jié)合性化合物被摻入或固定在小泡內(nèi)或其他膜性結(jié)構(gòu)內(nèi)，例如脂質(zhì)體或膠束。術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)”指任意能夠形成雙分子層或膠束的脂肪酸衍生物，以便脂質(zhì)材料的疏水性部分定向于雙分子層，而親水性部分定向于水相。親水性特征來(lái)自磷酸根、羧酸根、硫酸根、氨基、巰基、硝基和本領(lǐng)域熟知的其他相似基團(tuán)。通過包括這樣的基團(tuán)能夠賦予疏水性，包括但不限于至多20個(gè)碳原子的長(zhǎng)鏈飽和與不飽和脂族烴基和被一個(gè)或多個(gè)芳基、雜芳基、環(huán)烷基和/或雜環(huán)基取代的這類基團(tuán)。優(yōu)選的脂質(zhì)是磷酸甘油酯和鞘脂類，其代表性實(shí)例包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酸、棕櫚酰油?；字Ｄ憠A、溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰基磷脂酰膽堿、二油酰基磷脂酰膽堿、二硬脂?；字Ｄ憠A或二亞油酰基磷脂酰膽堿。其他缺少磷的化合物、例如鞘脂和糖鞘脂家族也屬于脂質(zhì)。另外，上述兩親脂質(zhì)可以與其他脂質(zhì)混合，包括甘油三酯和固醇。
通過包括龐大和/或剛性的輔助基團(tuán)可以控制連接基團(tuán)的柔韌性。龐大或剛性基團(tuán)的存在能夠阻礙關(guān)于連接基團(tuán)中的鍵或連接基團(tuán)與輔助基團(tuán)之間的鍵或連接基團(tuán)與官能團(tuán)之間的鍵的自由旋轉(zhuǎn)。剛性基團(tuán)例如可以包括其中基團(tuán)內(nèi)的環(huán)和/或多重鍵的存在抑制其構(gòu)象易變性的那些基團(tuán)，例如芳基、雜芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基和雜環(huán)基。其他能夠賦予剛性的基團(tuán)包括多肽基團(tuán)，例如寡或多脯氨酸鏈。
靜電作用也能夠賦予剛性。因而，如果輔助基團(tuán)是帶正電或帶負(fù)電的，那么相似帶電的輔助基團(tuán)將迫使連接基團(tuán)形成每個(gè)相似電荷之間的距離最大的構(gòu)型。使相似帶電的基團(tuán)彼此更加接近的高能代價(jià)將趨于保持連接基團(tuán)維持相似帶電的輔助基團(tuán)之間分開的構(gòu)型。另外攜帶相反電荷的輔助基團(tuán)將趨于吸引相反帶電的對(duì)應(yīng)物，并且有可能進(jìn)入分子間與分子內(nèi)離子鍵。這種非共價(jià)機(jī)理將趨于保持連接基團(tuán)的構(gòu)象允許在相反帶電的基團(tuán)之間鍵合。在本發(fā)明的范圍內(nèi)包含加入帶電的或者在向連接基團(tuán)加入之后去保護(hù)而攜帶潛在電荷的輔助基團(tuán)，包括通過pH的改變、氧化、還原或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他機(jī)理進(jìn)行羧基、羥基、巰基或氨基的去質(zhì)子化，導(dǎo)致保護(hù)基團(tuán)的除去。
內(nèi)部氫鍵或疏水性扁塌也可以賦予剛性。
龐大基團(tuán)例如可以包括大的原子、離子(例如碘、硫、金屬離子等)或含有大原子的基團(tuán)，多環(huán)基團(tuán)，包括芳族基團(tuán)、非芳族基團(tuán)，和結(jié)合有一條或多條碳-碳多重鍵的結(jié)構(gòu)(即烯烴和炔烴)。龐大基團(tuán)還可以包括支鏈或直鏈的低聚物和聚合物。支鏈種類預(yù)期比直鏈種類每單位分子量增益更多地增加該結(jié)構(gòu)的剛性。
在優(yōu)選的實(shí)施方式中，環(huán)狀基團(tuán)的存在賦予剛性(例如芳基、雜芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)基等)。在其他優(yōu)選的實(shí)施方式中，連接基團(tuán)包含一個(gè)或多個(gè)六元環(huán)。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式中，該環(huán)是芳基，例如苯基或萘基。
鑒于上述，顯然，連接基團(tuán)的適當(dāng)選擇是本領(lǐng)域所熟知的，以提供適合的取向、受限制/不受限制的旋轉(zhuǎn)、所需的疏水性/親水性程度等。消除或減少本文所述多結(jié)合性化合物的抗原性也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在某些情況下，利用諸如聚(乙二醇)等基團(tuán)可以消除或減少多結(jié)合性化合物的抗原性。
如上所述，本文所述多結(jié)合性化合物包含2-10個(gè)以這樣一種方式與連接基團(tuán)連接的配體，使它們被呈遞給酶，與其上/其中的配體結(jié)合部位發(fā)生多價(jià)相互作用。連接基團(tuán)在空間上限制這些相互作用發(fā)生在由連接基團(tuán)所定義的限度內(nèi)。與相同數(shù)量單結(jié)合型配體相比，這種和其他因素增加多結(jié)合性化合物的生物活性。
本發(fā)明化合物優(yōu)選地以經(jīng)驗(yàn)式(L)p(X)q表示，其中L、X、p和q是如上所定義的。這打算包括若干能夠?qū)⒏髋潴w連接在一起的方式，目的是實(shí)現(xiàn)多價(jià)性目標(biāo)，更詳細(xì)的解釋如下所述。
如前文所述，連接基團(tuán)可以被視為與配體連接的框架。因而，應(yīng)當(dāng)承認(rèn)，配體能夠連接在該框架的任意適合的位置，例如在連接基團(tuán)鏈的末端或任意中間位置。
最簡(jiǎn)單和最優(yōu)選的多結(jié)合性化合物是二價(jià)化合物，可以以L-X-L表示，其中每個(gè)L獨(dú)立地是可以相同或不同的配體，每個(gè)X獨(dú)立地是連接基團(tuán)。這類二價(jià)化合物的實(shí)例見圖1，每個(gè)陰影圓代表一個(gè)配體。三價(jià)化合物也能夠以線性方式表示，也就是重復(fù)單元的序列L-X-L-X-L，其中L是配體，在每次出現(xiàn)時(shí)都是相同或不同的，X也是如此。不過，三聚物還可以是放射狀的多結(jié)合性化合物，包含三個(gè)與中央核心連接的配體，因而以(L)3X表示，其中連接基團(tuán)X例如可以包括芳基或環(huán)烷基。本發(fā)明的三價(jià)和四價(jià)化合物例證分別見圖2和3，其中陰影圓還是代表配體。四價(jià)化合物可以表示為線性排列，例如L-X-L-X-L-X-L帶分支的排列，例如 (帶分支的構(gòu)造類似于丁烷的異構(gòu)體——正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基)或者四面體排列，例如 其中X和L是如本文所定義的。作為替代選擇，它可以表示為烷基、芳基或環(huán)烷基衍生物，如上具有四(4)個(gè)與核心連接基團(tuán)連接的配體。
相同的考慮適用于本發(fā)明的高級(jí)多結(jié)合性化合物，含有5-10個(gè)配體，如圖4所述，同上陰影圓代表配體。不過，關(guān)于與中央連接基團(tuán)、例如芳基或環(huán)烷基連接的多結(jié)合性試劑，存在不言而喻的限制，在連接基團(tuán)上必須有足夠的連接部位，以容納所存在的配體；例如，苯環(huán)不能直接容納6個(gè)以上配體，而多環(huán)的連接基團(tuán)(例如聯(lián)苯)能夠容納更大數(shù)量的配體。
作為替代選擇，上述化合物可以表示為下列形狀的環(huán)狀鏈 及其變體。
所有上述變例都打算包括在由式(L)p(X)q所定義的發(fā)明范圍內(nèi)。
請(qǐng)記住上述，優(yōu)選的連接基團(tuán)可以是由下式所代表的-Xa-Z-(Ya-Z)m-Xa-其中m是從0至20的整數(shù)；Xa在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-S-、-NR-、-C(O)-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR-、-NRC(O)-、C(S)、-C(S)O-、-C(S)NR-、-NRC(S)-、或共價(jià)鍵組成的組，其中R是如下所定義的；Z在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由亞烷基、取代的亞烷基、亞環(huán)烷基、取代的亞環(huán)烷基、亞烯基、取代的亞烯基、亞炔基、取代的亞炔基、亞環(huán)烯基、取代的亞環(huán)烯基、亞芳基、亞雜芳基、亞雜環(huán)基、或共價(jià)鍵組成的組；Ya在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由-O-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR-、-S(O)n-、-C(O)NR’-、-NR’C(O)-、-NR’C(O)NR’-、-NR’C(S)NR’-、-C(＝NR’)-NR’-、-NR’-C(＝NR’)-、-OC(O)-NR’-、-NR’-C(O)-O-、-N＝C(Xa)-NR’-、-NR’-C(Xa)＝N-、-P(O)(OR’)-O-、-O-P(O)(OR’)-、-S(O)nCR’R”-、-S(O)n-NR’-、-NR’-S(O)n-、-S-S-、和共價(jià)鍵組成的組；其中n是0、1或2；R、R’和R”在每次獨(dú)立出現(xiàn)時(shí)選自由氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基組成的組。
另外，連接基團(tuán)部分可以可選地在其中任意原子上被一個(gè)或多個(gè)烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烯基、取代的烯基、環(huán)烯基、取代的環(huán)烯基、炔基、取代的炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基取代。
鑒于上述連接基團(tuán)的說(shuō)明，可以理解的是術(shù)語(yǔ)“連接基團(tuán)”在與術(shù)語(yǔ)“多結(jié)合性化合物”結(jié)合使用時(shí)包括多結(jié)合性化合物內(nèi)的共價(jià)鄰近的單一連接基團(tuán)(例如L-X-L)和多個(gè)共價(jià)非鄰近的連接基團(tuán)(例如L-X-L-X-L)。
組合文庫(kù)上述方法有助于鑒別具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚化合物。
具體來(lái)說(shuō)，諸如多結(jié)合性化合物的單個(gè)配體關(guān)于一個(gè)或多個(gè)靶上結(jié)合部位的有關(guān)排列的適當(dāng)并列等因素對(duì)優(yōu)化多結(jié)合性化合物與其靶的相互作用具有重要意義，以通過多價(jià)性最大化生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)。一種方法是鑒別候選多結(jié)合性化合物的文庫(kù)，這些化合物具有生成與特定靶有關(guān)的多結(jié)合性參數(shù)的性質(zhì)。這些參數(shù)包括(1)配體的同一性，(2)配體的取向，(3)構(gòu)造的化合價(jià)，(4)連接基團(tuán)長(zhǎng)度，(5)連接基團(tuán)幾何學(xué)，(6)連接基團(tuán)物理性質(zhì)，和(7)連接基團(tuán)化學(xué)官能團(tuán)。
制備了潛在具有多結(jié)合性質(zhì)的多聚化合物(即候選的多結(jié)合性化合物)文庫(kù)和包含這類文庫(kù)多重態(tài)的多聚化合物文庫(kù)，然后經(jīng)由常規(guī)測(cè)定法，對(duì)應(yīng)于所選擇的配體和所需的多結(jié)合性參數(shù)，評(píng)價(jià)這些文庫(kù)。與每種這些變量有關(guān)的考慮如下配體的選擇選擇單一配體或一組配體摻入在候選多結(jié)合性化合物的文庫(kù)中，該文庫(kù)是針對(duì)特定的一個(gè)或多個(gè)生物學(xué)靶的，例如β2腎上腺素能受體。對(duì)所選擇的配體的唯一要求是它們能夠與所選擇的靶發(fā)生相互作用。因而，配體可以是已知的藥物、已知藥物的修飾形式、已知藥物的結(jié)構(gòu)或已知藥物修飾形式的底物(它們足以與靶發(fā)生相互作用)或其他化合物。配體優(yōu)選地基于已知的可取性質(zhì)加以選擇，這些性質(zhì)計(jì)劃被帶出或放大到多結(jié)合形式中?？扇〉男再|(zhì)包括經(jīng)過證明的對(duì)人類患者的安全性與功效、適當(dāng)?shù)腜K/ADME概況、合成的可及性、和所需的物理性質(zhì)，例如溶解度、log P等。不過，關(guān)鍵是注意到在前文列表中顯示不可取性質(zhì)的配體通過多結(jié)合性化合物生成的過程可以獲得更可取的性質(zhì)；也就是說(shuō)，配體不應(yīng)在這樣一種基礎(chǔ)上被排除在外。例如，對(duì)特定靶的效力不足、以致對(duì)人類患者的功效不足的配體在以多結(jié)合形式出現(xiàn)時(shí)可以提高效力和功效。有效的但因與機(jī)理無(wú)關(guān)的毒副作用而不實(shí)用的配體作為多結(jié)合性化合物可以增加治療指數(shù)(效力相對(duì)于毒性增加)。體內(nèi)半衰期短的配體作為多結(jié)合性化合物可以延長(zhǎng)半衰期。限制配體有用性的物理性質(zhì)(例如由于溶解度低、疏水性、親水性而生物利用度差)可以在多結(jié)合形式中得到合理調(diào)制，為化合物提供與所需實(shí)用性一致的物理性質(zhì)。
取向配體連接點(diǎn)和連接化學(xué)的選擇在每個(gè)配體上選擇若干使配體與連接基團(tuán)連接的點(diǎn)。對(duì)所選擇的配體/連接基團(tuán)上的連接點(diǎn)進(jìn)行官能化處理，以含有互補(bǔ)的反應(yīng)性官能團(tuán)。這允許探查將配體以多種相對(duì)取向呈遞給它們的受體的效果，這是一種重要的多結(jié)合性設(shè)計(jì)參數(shù)。對(duì)選擇連接點(diǎn)的唯一要求是與至少一個(gè)這些點(diǎn)連接不會(huì)取消配體的活性。通過可利用的結(jié)構(gòu)信息可以鑒別這類連接點(diǎn)。例如，與其靶結(jié)合的蛋白酶抑制劑的共晶體結(jié)構(gòu)檢查允許人們鑒別一個(gè)或多個(gè)部位，其中連接基團(tuán)的連接將不會(huì)預(yù)先排除酶-抑制劑的相互作用。作為替代選擇，通過核磁共振評(píng)價(jià)配體/靶結(jié)合將鑒別對(duì)配體/靶結(jié)合來(lái)說(shuō)是非必需的部位。例如參見Fesik等美國(guó)專利No.5,891,643。當(dāng)這類結(jié)構(gòu)信息不可利用時(shí)，利用關(guān)于配體的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系(SAR)將提示允許和不允許實(shí)質(zhì)性結(jié)構(gòu)變異的位置。在沒有結(jié)構(gòu)信息和SAR信息的存在下，僅選擇具有多個(gè)連接點(diǎn)的文庫(kù)，以便以多種不同取向呈遞配體。隨后評(píng)價(jià)該文庫(kù)，將指示什么位置適合于連接。
強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)是重要的，即，取消單體配體活性的連接位置也可以有利地包括在候選的多結(jié)合性化合物文庫(kù)中，其條件是這類化合物攜帶至少一個(gè)配體，其連接方式不會(huì)取消內(nèi)在活性。這種選擇例如來(lái)自單一靶分子背景內(nèi)的雜二價(jià)相互作用。例如，考慮與其靶受體結(jié)合的受體拮抗劑配體，然后考慮修飾該配體，使其與具有連接基團(tuán)的相同配體的第二副本連接，該連接基團(tuán)允許第二配體與相同受體分子在鄰近拮抗劑結(jié)合部位的部位發(fā)生相互作用，這些部位包括不是正式拮抗劑結(jié)合部位一部分的受體元件，和/或圍繞該受體的基質(zhì)元件，例如膜。這里，關(guān)于第二配體分子與受體/基質(zhì)的相互作用，最可取的取向可以這樣實(shí)現(xiàn)，使其與連接基團(tuán)在這樣一個(gè)位置上連接，取消配體在正式拮抗劑結(jié)合部位上的活性。另一種考慮方法是在多結(jié)合性結(jié)構(gòu)背景內(nèi)的單個(gè)配體的SAR經(jīng)常不同于單體形式的相同配體的SAR。
上述討論集中于攜帶通過不同連接點(diǎn)與單一連接基團(tuán)連接的相同配體的兩個(gè)副本的二聚化合物的二價(jià)相互作用，其中之一可能取消單體配體的結(jié)合/活性。也應(yīng)當(dāng)可以理解的是，攜帶與公共或不同靶結(jié)合的兩個(gè)不同配體的雜二聚構(gòu)造也可以達(dá)到二價(jià)優(yōu)點(diǎn)。例如，5HT4受體拮抗劑和膀胱選擇性毒蕈堿M3拮抗劑可以通過不取消單體配體對(duì)其各自受體部位的結(jié)合親合性的連接點(diǎn)與連接基團(tuán)連接。二聚化合物可以實(shí)現(xiàn)對(duì)兩種受體的親合性增強(qiáng)，因?yàn)樵?HT4配體與M3受體鄰近正式M3拮抗劑結(jié)合部位的元件之間發(fā)生可取的相互作用和在M3配體與5HT4受體鄰近正式5HT4拮抗劑結(jié)合部位的元件之間發(fā)生可取的相互作用。因而，二聚化合物可以是更有效的選擇性活動(dòng)過度膀胱拮抗劑和優(yōu)異的尿沖動(dòng)失禁療法。
一旦選擇了配體連接點(diǎn)，人們可以鑒別在這些點(diǎn)上可能的化學(xué)鍵類型。最優(yōu)選的化學(xué)鍵類型是與容易和普遍生成的配體(或配體的被保護(hù)形式)的總體結(jié)構(gòu)相容的，在典型的化學(xué)與生理學(xué)條件下是穩(wěn)定的和本質(zhì)上無(wú)害的，并且是與大量可利用的連接基團(tuán)相容的。酰胺鍵、醚、胺、氨基甲酸酯、脲和磺酰胺是一部分優(yōu)選的鍵合實(shí)例。
連接基團(tuán)通過選擇化合價(jià)、連接基團(tuán)長(zhǎng)度、連接基團(tuán)幾何學(xué)、剛性、物理性質(zhì)和化學(xué)官能團(tuán)，生成有關(guān)的多結(jié)合性參數(shù)在用于生成候選多結(jié)合性化合物文庫(kù)的連接基團(tuán)文庫(kù)中，用在該連接基團(tuán)文庫(kù)中的連接基團(tuán)的選擇考慮下列因素化合價(jià)在多數(shù)場(chǎng)合中，連接基團(tuán)的文庫(kù)從二價(jià)連接基團(tuán)開始。配體的選擇和兩個(gè)配體相對(duì)于結(jié)合部位的適當(dāng)并列允許這樣的分子表現(xiàn)靶結(jié)合親合性和特異性，足以賦予生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)。此外，二價(jià)連接基團(tuán)或構(gòu)造還通常是適度大小的，以便它們保留所需的小分子的生物分布性質(zhì)。
連接基團(tuán)長(zhǎng)度在一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)選擇連接基團(tuán)，允許生成一定范圍的配體間距，涵蓋給定二價(jià)相互作用所優(yōu)選的距離。在有些場(chǎng)合中，從靶的高分辨率結(jié)構(gòu)信息，通常為酶和可溶性受體靶，優(yōu)選的距離可以估計(jì)得相當(dāng)精確。在其他場(chǎng)合中，高分辨率結(jié)構(gòu)信息是不可利用的(例如7TM G-蛋白偶聯(lián)受體)，人們可以利用簡(jiǎn)單的模型來(lái)估計(jì)相鄰受體或相同受體不同位置上的結(jié)合部位之間的最大距離。在兩個(gè)結(jié)合部位存在于相同靶(或多個(gè)亞單位靶的靶亞單位)上的情形中，優(yōu)選的連接基團(tuán)距離是2-20，更優(yōu)選的連接基團(tuán)距離是3-12。在兩個(gè)結(jié)合部位位于單獨(dú)的(例如蛋白質(zhì))靶部位上的情形中，優(yōu)選的連接基團(tuán)距離是20-100，更優(yōu)選的距離是30-70。
連接基團(tuán)幾何學(xué)與剛性配體連接部位、連接基團(tuán)長(zhǎng)度、連接基團(tuán)幾何學(xué)和連接基團(tuán)剛性的組合決定了候選多結(jié)合性化合物的配體可以以三維顯示、由此呈遞給它們的結(jié)合部位的可能方式。連接基團(tuán)幾何學(xué)與剛性在正常情況下由化學(xué)組成和鍵合模式來(lái)決定，這在多結(jié)合性排列中可以被控制和系統(tǒng)改變?yōu)榱硪环N生成函數(shù)。例如，連接基團(tuán)幾何學(xué)是這樣改變的，將兩個(gè)配體連接在苯環(huán)的鄰位、間位和對(duì)位，或者在環(huán)己烷核心的1，1-、1，2-、1，3-、1，4-位置上按順式或反式排列，或者在乙烯不飽和度上按順式或反式排列。連接基團(tuán)剛性是這樣改變的，控制連接基團(tuán)可能的不同構(gòu)象狀態(tài)的數(shù)量和相對(duì)能量。例如，攜帶被1，8-辛基連接基團(tuán)連接的兩個(gè)配體的二價(jià)化合物具有更大程度的自由，因此剛性弱于其中兩個(gè)配體與聯(lián)苯連接基團(tuán)4，4’-位置連接的化合物。
連接基團(tuán)物理性質(zhì)連接基團(tuán)的物理性質(zhì)在正常情況下由連接基團(tuán)的化學(xué)組成和鍵合模式來(lái)決定，連接基團(tuán)物理性質(zhì)賦予包括它們的候選多結(jié)合性化合物的總體物理性質(zhì)。通常選擇一定范圍的連接基團(tuán)組成，以在候選多結(jié)合性化合物中提供一定范圍的物理性質(zhì)(疏水性、親水性、兩親性、極化、酸度和堿度)。連接基團(tuán)物理性質(zhì)的特定選擇是在它們所連接的配體的物理性質(zhì)背景內(nèi)進(jìn)行的，優(yōu)選地其目標(biāo)是生成具有可取的PK/ADME性質(zhì)的分子。例如，可以選擇連接基團(tuán)以避免親水性或疏水性太高以致不容易被體內(nèi)吸收和/或分布。
連接基團(tuán)化學(xué)官能團(tuán)選擇這樣的連接基團(tuán)化學(xué)官能團(tuán)，它們與選擇用來(lái)使連接基團(tuán)與配體連接和賦予一定范圍物理性質(zhì)的化學(xué)是相容的，足以使對(duì)該參數(shù)的檢查持續(xù)下去。
組合合成在通過上述方法選擇了一組n個(gè)配體(n由每個(gè)所選擇的配體的不同連接點(diǎn)之和決定)和m個(gè)連接基團(tuán)之后，制備(n！)m個(gè)候選二價(jià)多結(jié)合性化合物的文庫(kù)，生成與特定靶有關(guān)的多結(jié)合性設(shè)計(jì)參數(shù)。例如，從以所有可能的組合連接的兩個(gè)配體所生成的排列——一個(gè)具有兩個(gè)連接點(diǎn)(A1，A2)，一個(gè)具有三個(gè)連接點(diǎn)(B1，B2，B3)——得到至少15種可能的多結(jié)合性化合物組合A1-A1 A1-A2 A1-B1 A1-B2 A1-B3 A2-A2 A2-B1 A2-B2 A2-B3B1-B1B1-B2 B1-B3 B2-B2 B2-B3 B3-B3當(dāng)每種這些組合通過10個(gè)不同的連接基團(tuán)連接時(shí)，得到150種候選多結(jié)合性化合物的文庫(kù)。
給定文庫(kù)的組合屬性，普通化學(xué)優(yōu)選地用于連接配體上的反應(yīng)官能團(tuán)與連接基團(tuán)上的互補(bǔ)反應(yīng)性官能團(tuán)。文庫(kù)因此有助于得到高效的平行合成方法。組合文庫(kù)可以采用本領(lǐng)域熟知的固相化學(xué)，其中使配體和/或連接基團(tuán)與固體載體連接。作為替代選擇和優(yōu)選，組合文庫(kù)是在溶液相中制備的。合成后，可選地純化候選的多結(jié)合性化合物，然后例如通過色譜法(例如HPLC)測(cè)定活性。
通過生物化學(xué)、分析、藥理學(xué)和計(jì)算方法分析排列使用各種方法鑒定文庫(kù)中候選多結(jié)合性化合物的特征和活性，以測(cè)定哪些化合物具有多結(jié)合性質(zhì)?？梢詼y(cè)定物理常數(shù)，例如在各種溶劑條件下的溶解度和logD/clogD值。使用NMR光譜與計(jì)算方法的組合測(cè)定流體介質(zhì)中候選多結(jié)合性化合物的低能構(gòu)象。通過各種標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定文庫(kù)成員與所需靶和其他靶結(jié)合的能力，包括關(guān)于受體和離子通道靶的放射性配體置換測(cè)定和關(guān)于多種酶靶的動(dòng)力學(xué)抑制分析。還可以測(cè)定體外功效，例如受體激動(dòng)劑與拮抗劑、離子通道阻滯劑和抗微生物活性?？梢栽谶m當(dāng)?shù)哪Ｐ椭袦y(cè)定藥理學(xué)數(shù)據(jù)，包括口服吸收、外翻腸透入、其他藥動(dòng)學(xué)參數(shù)和功效數(shù)據(jù)。按這種方式，獲得關(guān)于多結(jié)合性設(shè)計(jì)參數(shù)的關(guān)鍵的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系，然后用于不久之后的工作。
通過常規(guī)方法可以容易地確定表現(xiàn)如本文所定義的多結(jié)合性質(zhì)的文庫(kù)成員。首先，通過上述常規(guī)方法鑒別表現(xiàn)多結(jié)合性質(zhì)的那些成員，包括常規(guī)的測(cè)定法(體外和體內(nèi))。
其次，經(jīng)由本領(lǐng)域認(rèn)可的工藝可以確定表現(xiàn)多結(jié)合性質(zhì)的那些化合物的結(jié)構(gòu)。例如，每種文庫(kù)成員都可以用適當(dāng)?shù)男畔⒓用芑驑?biāo)記，以便在晚些時(shí)候測(cè)定有關(guān)成員的結(jié)構(gòu)。例如參見Dower等國(guó)際專利申請(qǐng)公報(bào)No.WO 93/06121；Brenner等Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院報(bào))，895181(1992)；Gallop等美國(guó)專利No.5,846,839，它們各自全文引用在此作為參考文獻(xiàn)。作為替代選擇，通過本領(lǐng)域已知的方法，還可以從候選多價(jià)化合物的可溶性與未標(biāo)記文庫(kù)測(cè)定有關(guān)多價(jià)化合物的結(jié)構(gòu)，例如Hindsgaul等于L998年6月11日公開的加拿大專利申請(qǐng)No.2,240,325所述。這類方法把前面的親合色譜法與質(zhì)譜法聯(lián)系起來(lái)，測(cè)定候選多結(jié)合性化合物的結(jié)構(gòu)和對(duì)受體的相對(duì)結(jié)合親合性。
上述關(guān)于二聚的候選多結(jié)合性化合物的方法當(dāng)然能夠延伸到三聚的候選化合物及其高級(jí)類似物。
繼續(xù)合成和另外排列的分析基于最初文庫(kù)分析所得信息，該方法的可選組分是確定一種或多種有希望的多結(jié)合性“領(lǐng)導(dǎo)”化合物，它們是由特定的相對(duì)配體取向、連接基團(tuán)長(zhǎng)度、連接基團(tuán)幾何學(xué)等所定義的。然后可以圍繞這些生成另外的文庫(kù)，以提供關(guān)于結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系的進(jìn)一步信息。這些排列通常更集中于連接基團(tuán)結(jié)構(gòu)中的變異，以進(jìn)一步優(yōu)化靶親合性和/或?qū)Π械幕钚?拮抗作用、部分激動(dòng)作用等)，和/或改變物理性質(zhì)。利用新穎的多結(jié)合性設(shè)計(jì)原理以及經(jīng)典的醫(yī)藥化學(xué)、生物化學(xué)和藥理學(xué)方法進(jìn)行反復(fù)的再設(shè)計(jì)/分析，人們能夠制備和鑒別最佳的多結(jié)合性化合物，它們對(duì)它們的靶表現(xiàn)生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)，是治療劑。
為了進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明這種工藝，適合的二價(jià)連接基團(tuán)例如包括從下列衍生的那些二羧酸、二磺酰鹵、二醛、二酮、二鹵化物、二異氰酸酯、二胺、二醇，羧酸、磺酰鹵、醛、酮、鹵化物、異氰酸酯、胺和二醇的混合物。在每種情況下，羧酸、磺酰鹵、醛、酮、鹵化物、異氰酸酯、胺和二醇官能團(tuán)與配體上的互補(bǔ)性官能團(tuán)反應(yīng)，生成共價(jià)鍵。這類互補(bǔ)性官能團(tuán)是本領(lǐng)域所熟知的，如下表所述互補(bǔ)性結(jié)合化學(xué)第一反應(yīng)性基團(tuán) 第二反應(yīng)性基團(tuán) 鍵羥基異氰酸酯尿烷胺 環(huán)氧化物β-羥胺羥胺磺酰鹵 磺酰胺羧酸胺 酰胺羥基烷基/芳基鹵化物 醚醛 胺/NaCNBH3胺酮 胺/NaCNBH3胺胺 異氰酸酯脲下表通過實(shí)例闡述了能夠用于利用上述化學(xué)制備摻入在本發(fā)明多結(jié)合性化合物中的連接基團(tuán)的原料(以X-1至X-418表示)。例如，在偶聯(lián)劑的存在下，例如DCC，1，10-癸烷二羧酸，X1，能夠與2當(dāng)量攜帶氨基的配體反應(yīng)，得到式(I)的二價(jià)多結(jié)合性化合物，其中配體是經(jīng)由1，10-癸烷二酰氨基連接基團(tuán)連接的。二元酸 二元酸
用于本發(fā)明的代表性配體例如包括如上所鑒別的L-1和L-2，其中L-1選自式(a)化合物，L-2選自式(b)化合物。
每項(xiàng)本發(fā)明的配體(L)與連接基團(tuán)(X)的組合例如包括均-與雜-二聚物，其中第一配體選自L-1，第二配體和連接基團(tuán)選自下列L-2/X-1-L-2/X-2- L-2/X-3-L-2/X-4- L-2/X-5- L-2/X-6-L-2/X-7-L-2/X-8- L-2/X-9-L-2/X-10-L-2/X-11-L-2/X-12-L-2/X-13- L-2/X-14-L-2/X-15- L-2/X-16-L-2/X-17-L-2/X-18-L-2/X-19- L-2/X-20-L-2/X-21- L-2/X-22-L-2/X-23-L-2/X-24-L-2/X-25- L-2/X-26-L-2/X-27- L-2/X-28-L-2/X-29-L-2/X-30-L-2/X-31- L-2/X-32-L-2/X-33- L-2/X-34-L-2/X-35-L-2/X-36-L-2/X-37- L-2/X-38-L-2/X-39- L-2/X-40-L-2/X-41-L-2/X-42-L-2/X-43- L-2/X-44-L-2/X-45- L-2/X-46-L-2/X-47-L-2/X-48-L-2/X-49- L-2/X-50-L-2/X-51- L-2/X-52-L-2/X-53-L-2/X-54-L-2/X-55- L-2/X-56-L-2/X-57- L-2/X-58-L-2/X-59-L-2/X-60-L-2/X-61- L-2/X-62-L-2/X-63- L-2/X-64-L-2/X-65-L-2/X-66-L-2/X-67- L-2/X-68-L-2/X-69- L-2/X-70-L-2/X-71-L-2/X-72-L-2/X-73- L-2/X-74-L-2/X-75- L-2/X-76-L-2/X-77-L-2/X-78-L-2/X-79- L-2/X-80-L-2/X-81- L-2/X-82-L-2/X-83-L-2/X-84-L-2/X-85- L-2/X-86-L-2/X-87- L-2/X-88-L-2/X-89-L-2/X-90-L-2/X-91- L-2/X-92-L-2/X-93- L-2/X-94-L-2/X-95-L-2/X-96-L-2/X-97- L-2/X-98-L-2/X-99- L-2/X-100- L-2/X-101- L-2/X-102-L-2/X-103- L-2/X-104- L-2/X-105- L-2/X-106- L-2/X-107- L-2/X-108-L-2/X-109- L-2/X-110- L-2/X-111- L-2/X-112- L-2/X-113- L-2/X-114-L-2/X-115- L-2/X-116- L-2/X-117- L-2/X-118- L-2/X-119- L-2/X-120-L-2/X-121- L-2/X-122- L-2/X-123- L-2/X-124- L-2/X-125- L-2/X-126-L-2/X-127- L-2/X-128- L-2/X-129- L-2/X-130- L-2/X-131- L-2/X-132-L-2/X-133- L-2/X-134- L-2/X-135- L-2/X-136- L-2/X-137- L-2/X-138-L-2/X-139- L-2/X-140- L-2/X-141- L-2/X-142- L-2/X-143- L-2/X-144-L-2/X-145- L-2/X-146- L-2/X-147- L-2/X-148- L-2/X-149- L-2/X-150-L-2/X-151- L-2/X-152- L-2/X-153- L-2/X-154- L-2/X-155- L-2/X-156-L-2/X-157- L-2/X-158- L-2/X-159- L-2/X-160- L-2/X-161- L-2/X-162-L-2/X-163- L-2/X-164- L-2/X-165- L-2/X-166- L-2/X-167- L-2/X-168-L-2/X-169- L-2/X-170- L-2/X-171- L-2/X-172-L-2/X-173- L-2/X-174- L-2/X-175- L-2/X-176- L-2/X-177- L-2/X-178-L-2/X-179- L-2/X-180- L-2/X-181- L-2/X-182-L-2/X-183-L-2/X-184-L-2/X-185- L-2/X-186- L-2/X-187- L-2/X-188-L-2/X-189-L-2/X-190-L-2/X-191- L-2/X-192- L-2/X-193- L-2/X-194-L-2/X-195-L-2/X-196-L-2/X-197- L-2/X-198- L-2/X-199- L-2/X-200-L-2/X-201-L-2/X-202-L-2/X-203- L-2/X-204- L-2/X-205- L-2/X-206-L-2/X-207-L-2/X-208-L-2/X-209- L-2/X-210- L-2/X-211- L-2/X-212-L-2/X-213-L-2/X-214-L-2/X-215- L-2/X-216- L-2/X-217- L-2/X-218-L-2/X-219-L-2/X-220-L-2/X-221- L-2/X-222- L-2/X-223- L-2/X-224-L-2/X-225-L-2/X-226-L-2/X-227- L-2/X-228- L-2/X-229- L-2/X-230-L-2/X-231-L-2/X-232-L-2/X-233- L-2/X-234- L-2/X-235- L-2/X-236-L-2/X-237-L-2/X-238-L-2/X-239- L-2/X-240- L-2/X-241- L-2/X-242-L-2/X-243-L-2/X-244-L-2/X-245- L-2/X-246- L-2/X-247- L-2/X-248-L-2/X-249-L-2/X-250-L-2/X-251- L-2/X-252- L-2/X-253- L-2/X-254-L-2/X-255-L-2/X-256-L-2/X-257- L-2/X-258- L-2/X-259- L-2/X-260-L-2/X-261-L-2/X-262-L-2/X-263- L-2/X-264- L-2/X-265- L-2/X-266-L-2/X-267-L-2/X-268-L-2/X-269- L-2/X-270- L-2/X-271- L-2/X-272-L-2/X-273-L-2/X-274-L-2/X-275- L-2/X-276- L-2/X-277- L-2/X-278-L-2/X-279-L-2/X-280-L-2/X-281- L-2/X-282- L-2/X-283- L-2/X-284-L-2/X-285-L-2/X-286-L-2/X-287- L-2/X-288- L-2/X-289- L-2/X-290-L-2/X-291-L-2/X-292-L-2/X-293- L-2/X-294- L-2/X-295- L-2/X-296-L-2/X-297-L-2/X-298-L-2/X-299- L-2/X-300- L-2/X-301- L-2/X-302-L-2/X-303-L-2/X-304-L-2/X-305- L-2/X-306- L-2/X-307- L-2/X-308-L-2/X-309-L-2/X-310-L-2/X-311- L-2/X-312- L-2/X-313- L-2/X-314-L-2/X-315-L-2/X-316-L-2/X-317- L-2/X-318- L-2/X-319- L-2/X-320-L-2/X-321-L-2/X-322-L-2/X-323- L-2/X-324- L-2/X-325- L-2/X-326-L-2/X-327-L-2/X-328-L-2/X-329- L-2/X-330- L-2/X-331- L-2/X-332-L-2/X-333-L-2/X-334-L-2/X-335- L-2/X-336- L-2/X-337- L-2/X-338-L-2/X-339-L-2/X-340-L-2/X-341- L-2/X-342- L-2/X-343- L-2/X-344-L-2/X-345-L-2/X-346-L-2/X-347- L-2/X-348- L-2/X-349- L-2/X-350-L-2/X-351-L-2/X-352-L-2/X-353- L-2/X-354- L-2/X-355- L-2/X-356-L-2/X-357-L-2/X-358-L-2/X-359- L-2/X-360- L-2/X-361- L-2/X-362-L-2/X-363-L-2/X-364-L-2/X-365- L-2/X-366- L-2/X-367- L-2/X-368-L-2/X-369-L-2/X-370-L-2/X-371- L-2/X-372- L-2/X-373- L-2/X-374-L-2/X-375-L-2/X-376-L-2/X-377- L-2/X-378- L-2/X-379- L-2/X-380-L-2/X-381-L-2/X-382-L-2/X-383- L-2/X-384- L-2/X-385- L-2/X-386-L-2/X-387-L-2/X-388-L-2/X-389- L-2/X-390- L-2/X-391- L-2/X-392-L-2/X-393-L-2/X-394-L-2/X-395- L-2/X-396- L-2/X-397- L-2/X-398-L-2/X-399-L-2/X-400-L-2/X-401- L-2/X-402- L-2/X-403- L-2/X-404-L-2/X-405-L-2/X-406-L-2/X-407- L-2/X-408- L-2/X-409- L-2/X-410-L-2/X-411-L-2/X-412-L-2/X-413- L-2/X-414- L-2/X-415- L-2/X-416-L-2/X-417-L-2/X-418-等等實(shí)用性、試驗(yàn)和給藥實(shí)用性本發(fā)明的多結(jié)合性化合物是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑。因此，本發(fā)明的多結(jié)合性化合物和藥物組合物可用于治療和預(yù)防由β腎上腺素能受體介導(dǎo)的疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、支氣管炎等。它們還可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)損傷和早產(chǎn)。本發(fā)明化合物還可用于治療代謝障礙，例如肥胖、糖尿病等。
試驗(yàn)式(I)化合物的β2腎上腺素能受體激動(dòng)活性可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的各種體外測(cè)定法加以證明，例如生物學(xué)實(shí)施例1和2所述測(cè)定法。還可以通過下述來(lái)自體內(nèi)的測(cè)定法加以測(cè)定Ball，D.1.等，沙美特羅，一種新的長(zhǎng)效β-2腎上腺素能激動(dòng)劑體內(nèi)與體外藥理活性特征″Salmeterol a Novel，Long-acting beta 2-AdrenergicAgonistCharacterization of Pharmacological Activity inVitro and in Vivo″英國(guó)藥理學(xué)雜志(Br.J.Pharmacol.)，104，665-671(1991)；Linden，A.等，″沙美特羅、福莫特羅和沙丁胺醇在離體豚鼠氣管中最在松弛作用和效力不同，在對(duì)于功能性拮抗作用不是這樣(Salmeterol，F(xiàn)ormoterol，and Salbutamol in theIsolated Guinea-Pig TracheaDifferences in Maximum RelaxantEffect and Potency but not in Functional Atagonism).Thorax，48，547-553，(1993)；Bials，A.T.等，確定β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑沙美特羅的作用期間的因素的研究(Investigations intoFactors Determining the Duration of Action of the beta 2Adrenoceptor Agonist，Salmeterol).英國(guó)藥理學(xué)雜志(Br.J.Pharmacol.)，108，505-515(1993)；或者通過下述體內(nèi)測(cè)定法加以測(cè)定Ball，D.I.等，沙美特羅，一種新的長(zhǎng)效β-2腎上腺素能激動(dòng)劑體內(nèi)與體外藥理活性特征″Salmeterol a Novel，Longactingbeta 2-Adrenergic AgonistCharacterization ofPharmacological Activity in Vitro and in Vivo″Br.J.Pharmacol.(英國(guó)藥理學(xué)雜志)，104，665-671(1991)；Kikkawa，H.等，TA-2005，一種新的長(zhǎng)效選擇性β2-腎上腺素能受體激動(dòng)劑在豚鼠和貓中的體內(nèi)支氣管擴(kuò)張作用的特征，與其它β2-激動(dòng)劑相比較″TA-2005，a Novel，Long-acting，and Selective beta 2-AdrenoceptorAgonistCharacterization of its in vivo BronchodilatingAction in Guinea Pigs and Cats in Comparison with other Beta2-Agonists″.Biol.Pharm.Bull.(生物學(xué)與藥學(xué)公報(bào))，17，1047-1052，(1994)；Anderson，G.P.，福莫特羅藥理學(xué)，激動(dòng)作用的分子基礎(chǔ)、高效、長(zhǎng)期機(jī)制以及選擇性β-2腎上腺素能受體激動(dòng)性支氣管擴(kuò)張劑″FormoterolPharmacology，Molecular basisof Agonism and Mechanism of Long Duration of a Highly Potentand Selective Beta 2-Adrenocepto Agonist Bronchodilator，Life Sciences(生命科學(xué))，52，2145-2160，(1993)。
藥物制劑當(dāng)作為藥物使用時(shí)，本發(fā)明化合物通常以藥物組合物的形式給藥。這些化合物可以通過各種途徑給藥，包括口服、直腸、透皮、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和吸入(例如鼻內(nèi)或經(jīng)口吸入)。這些化合物作為可注射的、吸入的和口服的組合物是有效的。這類組合物是按照藥學(xué)領(lǐng)域熟知的方式制備的，包含至少一種活性化合物。本發(fā)明化合物的優(yōu)選給藥方式是吸入。這是一種直接釋放治療劑到呼吸道的有效手段，用于治療諸如哮喘等疾病和其他相似或有關(guān)的呼吸道障礙(參見美國(guó)專利No.5,607,915)。
本發(fā)明還包括藥物組合物，它們含有一種或多種本文所述化合物作為活性成分以及藥學(xué)上可接受的載體。在制備本發(fā)明的組合物時(shí)，通常將活性成分與賦形劑混合，用賦形劑稀釋，或者包封在這樣一種載體內(nèi)，可以是膠囊劑、藥囊劑、紙劑的形式或其他容器。當(dāng)賦形劑充當(dāng)稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體材料，充當(dāng)活性成分的媒介、載體或介質(zhì)。因而，組合物可以是片劑、丸劑、粉劑、錠劑、藥囊劑、扁囊劑、酏劑、懸液、乳液、溶液、糖漿劑、氣霧劑(作為固體或者在液體介質(zhì)中)、軟膏劑(例如含有至多10重量％的活性化合物)、軟與硬膠囊劑、栓劑、無(wú)菌可注射溶液和無(wú)菌包裝粉劑的形式。
在制備制劑時(shí)，可能有必要在與其他成分混合之前研磨活性化合物，得到適當(dāng)?shù)牧?。如果活性化合物基本上是不溶性的，那么通常研磨至粒徑小?00目。如果活性化合物基本上是水溶性的，那么通常通過研磨來(lái)調(diào)整粒徑，以基本上均勻地分布在制劑中，例如約40目。
一些適合的賦形劑實(shí)例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無(wú)菌水、糖漿和甲基纖維素。制劑可以另外包括潤(rùn)滑劑，例如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；濕潤(rùn)劑；乳化與懸浮劑；防腐劑，例如羥基苯甲酸甲酯與丙酯；甜味劑；和矯味劑。采用本領(lǐng)域已知的工藝可以對(duì)本發(fā)明的組合物進(jìn)行配制，以在對(duì)患者給藥后提供活性成分的快速、持續(xù)或延遲釋放。
組合物優(yōu)選地被配制成單位劑型。術(shù)語(yǔ)“單位劑型”指物理上不連續(xù)的單位，適合以單元?jiǎng)┝坑糜谌撕推渌麆?dòng)物，每個(gè)單位含有預(yù)定量的活性物質(zhì)以及適合的藥物賦形劑，活性物質(zhì)的量經(jīng)過計(jì)算可產(chǎn)生所需的治療效果。優(yōu)選地，上述式(I)化合物的用量不超過藥物組合物的20重量％，更優(yōu)選地不超過15重量％，余量為藥學(xué)上的惰性載體。
活性化合物在廣泛的劑量范圍內(nèi)都是有效的，一般按藥學(xué)上的有效量給藥。例如，當(dāng)藥物經(jīng)由吸入作用給藥時(shí)，每劑量含有約1μg至約1000μg、優(yōu)選為約2μg至約500μg、更優(yōu)選為約5μg至約100μg、進(jìn)而更優(yōu)選為約5μg至約60μg的活性成分。不過可以理解的是，化合物在實(shí)際上的給藥量將由醫(yī)師決定，根據(jù)有關(guān)的環(huán)境因素，包括所要治療的病癥、所選擇的給藥途徑、實(shí)際給藥的化合物及其相對(duì)活性、個(gè)體患者的年齡、體重與反應(yīng)、患者癥狀的嚴(yán)重性等。此外，本發(fā)明化合物可以預(yù)防性給藥，例如在哮喘發(fā)作中，含有本發(fā)明化合物的藥物組合物可以在支氣管痙攣開始之前給藥，以防止其發(fā)生或者減少發(fā)生的程度。
關(guān)于制備固體組合物，例如片劑，將主要活性成分與藥物賦形劑混合，形成固體預(yù)制劑組合物，其中含有本發(fā)明化合物的均勻混合物。稱這些預(yù)制劑組合物是均勻的意味著活性成分均勻地分散在全體組合物中，以便組合物可以容易地細(xì)分為同等有效的單位劑型，例如片劑、丸劑和膠囊劑。然后將這種固體預(yù)制劑細(xì)分為上述類型的單位劑型，其中含有本發(fā)明的活性成分。
本發(fā)明的片劑或丸劑可以是包衣的或者是復(fù)合的，以提供長(zhǎng)效劑型。例如，片劑或丸劑可以包含內(nèi)部劑量組分和外部劑量組分，后者是前者上的包膜形式。這兩種組分可以被腸溶層分開，后者的作用是抵抗在胃中崩解，允許內(nèi)部組分完整通過十二指腸，或者延遲釋放。各種原料可以用于這類腸溶層或腸溶衣，這類原料包括大量聚合酸和聚合酸與諸如蟲膠、鯨蠟醇和乙酸纖維素等原料的混合物。
可以摻入本發(fā)明的新穎組合物用于口服或注射給藥的液體包括水溶液、適當(dāng)矯味的糖漿、水或油懸液和經(jīng)過矯味的食用油(例如玉米油、棉子油、芝麻油、椰子油或花生油)乳液以及酏劑和相似的藥物載體。
吸入或吹入組合物包括在藥學(xué)上可接受的水性或有機(jī)溶劑或其混合物中的溶液與懸液和粉末(參加美國(guó)專利No.5,983,956)。液體或固體組合物可以含有適合的藥學(xué)上可接受的賦形劑，如上所述。優(yōu)選地，組合物是通過口或鼻呼吸途徑給藥的，以發(fā)揮局部或全身效果。在優(yōu)選為藥學(xué)上可接受的溶劑中的組合物可以利用惰性氣體霧化?？梢灾苯訌撵F化裝置中吸入經(jīng)過霧化的溶液，或者可以將霧化裝置與面罩或間歇式正壓呼吸機(jī)連接。溶液、懸液或粉末組合物可以優(yōu)選地通過口或鼻從以適當(dāng)方式釋放制劑的裝置中給藥(參見美國(guó)專利No.5,919,827和5,972,919)。
此外，含有一種或多種本發(fā)明化合物的藥物組合物可以與任意其他適合的藥物聯(lián)合給藥，例如適合的固醇類抗炎藥，例如布地奈德、氟可他松(flucatisone)、氯地米松，用于治療呼吸障礙。當(dāng)采用聯(lián)合療法時(shí)，含有本發(fā)明化合物的藥物組合物和固醇類抗炎藥可以同時(shí)、先后或單獨(dú)給藥。用在聯(lián)合療法中的每種組分的用量足以達(dá)到預(yù)期目的。例如，固醇類抗炎藥的用量足以減少體內(nèi)炎癥。本發(fā)明的β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑/部分激動(dòng)劑化合物的用量足以導(dǎo)致例如支氣管系統(tǒng)的平滑肌組織松弛。
優(yōu)選地，本發(fā)明化合物的劑量范圍從約1μg至約1000μg每劑，優(yōu)選為約2μg至約500μg，更優(yōu)選為約5μg至約100μg，進(jìn)而更優(yōu)選為約5μg至約60μg。關(guān)于固醇類抗炎藥的優(yōu)選劑量范圍從約50至4800μg，更優(yōu)選為約100μg至約1600μg。所用特定劑量仍然將取決于患者(年齡、體重等)和疾病的嚴(yán)重性(輕微、中度、嚴(yán)重)。最后，還可以制備含有兩種活性成分的藥物組合物，用于藥物的同時(shí)給藥。
實(shí)施例下列制備例和實(shí)施例使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實(shí)施本發(fā)明。它們不應(yīng)當(dāng)被視為限制發(fā)明的范圍，而僅僅是其例證和代表。
下列實(shí)施例中，下列縮寫具有下列含義。除非另有規(guī)定，所有溫度均為攝氏度。如果縮寫沒有定義，那么它具有普遍接受的含義。
A ＝埃cm ＝厘米DCC ＝二環(huán)己基碳二亞胺DMF ＝N，N-二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亞砜g ＝克HPLC＝高效液相色譜MEM ＝最低必需培養(yǎng)基mg ＝毫克MIC ＝最低抑制濃度min ＝分鐘mL ＝毫升mm ＝毫米
mmol＝毫摩爾N ＝正常THF ＝四氫呋喃μL ＝微升μm ＝微米rt ＝室溫Rf＝保留部分NMR ＝核磁共振ESMS＝電子噴霧質(zhì)譜ppm ＝百萬(wàn)分之濃度合成實(shí)施例實(shí)施例1反式-1，4-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}環(huán)己烷的合成(下圖5) 步驟1向5-乙酰基水楊酸甲酯11(5.0g，25.7mmol)的二甲基亞砜(44mL)溶液中加入48％氫溴酸。將所得混合物在55℃下攪拌24小時(shí)，倒在冰水漿液(200mL)中，沉淀出淡黃色固體。將固體過濾，用水(200mL)洗滌，干燥，得到α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12。將產(chǎn)物再次懸浮在乙醚(200mL)中，過濾，干燥，得到3.41g(59％)純產(chǎn)物。Rf＝0.8(10％ MeOH/CH2Cl2)H1-NMR(4/1 CDCl3/CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)8.73-8.72(d，1H)，8.28-8.24(dd，1H)，7.08-7.05(d，1H)，5.82(s，1H)，4.01(s，3H).
步驟2
向α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12(0.3g，1.33mmol)的THF(10mL)懸液中加入反式-1，4-二氨基環(huán)己烷(76mg，0.66mmol)的THF(5mL)溶液。將所得懸液在環(huán)境溫度和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，此時(shí)通過TLC分析判斷亞胺生成完全。將所得溶液在冰浴上冷卻后，向前述溶液中加入過量的2M BH3-Me2S己烷溶液(4mL，8mmol)。使所得混合物緩慢升溫至rt，在N2氣流下回流4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物后，加入MeOH(5mL)，以猝滅過量的2M BH3-Me2S。攪拌30min后，在真空中蒸發(fā)最終的溶液(或渾濁溶液)，得到淡褐色固體。將該固體用EtOAc/己烷(1/2，20mL)洗滌，干燥。將粗產(chǎn)物溶于含有0.5％ TFA的50％ MeCN/H2O，經(jīng)過制備型高效液相色譜(HPLC)純化，使用線性梯度(5％至50％ MeCN/H2O歷經(jīng)50min，20mL/min；在254nM下檢測(cè))。通過LC-MS分析具有UV吸收的部分，分離反式-1，4-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}環(huán)己烷13。
H1-NMR(CD3OD，299.96 MHz)δ(ppm)7.35(d，2H)，7.18(dd，2H)，6.80-6.78(d，2H)，4.88-4.86(m，2H)，4.65(s，4H)，3.15(br s，4H)，2.89(m，2H)，1.68-1.55(br m，4H)；ESMS(C24H34N2O6)計(jì)算446.5，實(shí)測(cè)447.5[M+H]+.
化合物14如上所述操作，但是用4，4’-亞甲基雙(環(huán)己胺)代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到雙{4，4’-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]環(huán)己烷}甲烷。ESMS(C31H46N2O6)計(jì)算值542.7，觀測(cè)值543.6[M+H]+.
化合物15如上所述操作，但是用1，3-環(huán)己烷雙(甲胺)代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1，3-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基甲基}環(huán)己烷。ESMS(C27H38N2O6)計(jì)算值474.6，觀測(cè)值475.3[M+H]+.
化合物16如上所述操作，但是用1，8-二氨基-對(duì)-薄荷烷代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1，8-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}-對(duì)-薄荷烷。ESMS(C28H42N2O6)計(jì)算值502.6，觀測(cè)值503.3[M+H]+.
化合物17如上所述操作，但是用1，4-雙(3-氨基丙基)哌嗪代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1，4-雙{3-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]丙基}哌嗪。ESMS(C28H44N4O6)計(jì)算值532.6，觀測(cè)值533.3[M+H]+，555.0[M+Na]+.
化合物18如上所述操作，但是用對(duì)-苯二甲基二胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1，4-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基甲基}苯。ESMS(C26H32N2O6)計(jì)算值468.5，觀測(cè)值469.3[M+H]+，492.0[M+Na]+.
化合物19如上所述操作，但是用間-苯二甲基二胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1，3-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基甲基}苯。ESMS(C26H32N2O6)計(jì)算值468.5，觀測(cè)值469.3[M+H]+，492.0[M+Na]+.
化合物20如上所述操作，但是用2-氨基芐胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1-{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基甲基}-2-{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}苯。ESMS(C25H30N2O6)計(jì)算值454.5，觀測(cè)值455.3[M+H]+.
化合物21如上所述操作，但是用2-(4-氨基苯基)乙胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-2-{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}苯。ESMS(C26H32N2O6)計(jì)算值468.5，觀測(cè)值469.3[M+H]+.
化合物22如上所述操作，但是用4，4’-氧聯(lián)二苯胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到4，4’-雙{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}苯基醚。ESMS(C30H32N2O7)計(jì)算值532.6，觀測(cè)值533.3[M+H]+，556.1[M+Na]+.
化合物23如上所述操作，但是用2-氨基芐胺代替反式-1，4-二氨基環(huán)己烷，得到1-{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基甲基}-4-{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}苯。ESMS(C25H30N2O6)計(jì)算值454.5，觀測(cè)值455.5[M+H]+，477.3[M+Na]+.
實(shí)施例21-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-{N-[2-苯基-2-羥基乙基]氨基}苯的合成(下圖6) 向上述實(shí)施例1步驟1中制備的α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12(0.3g，1.33mmol)的THF(10mL)懸液中加入2-(4-氨基苯基)乙胺25(0.181g，1.33mmol)的THF(5mL)溶液。將所得懸液在環(huán)境溫度和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，然后加入α，α-二羥基苯乙酮24(0.2g，1.32mmol)。將反應(yīng)混合物在RT下攪拌3小時(shí)，此時(shí)通過TLC分析判斷亞胺生成完全。將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，加入過量的2M BH3-Me2S己烷溶液(9mL，18mmol)。使所得混合物緩慢升溫至rt，在N2氣流下回流4小時(shí)。冷卻后，加入MeOH(10mL)，以猝滅過量的BH3-Me2S。在rt下攪拌30min后，在真空中蒸發(fā)最終的溶液(或渾濁溶液)，得到淡褐色固體。將該固體用EtOAc/己烷(1/2，20mL)洗滌，干燥。將粗產(chǎn)物溶于含有0.5％ TFA的50％ MeCN/H2O，經(jīng)過制備型高效液相色譜(HPLC)純化，使用線性梯度(5％至50％ MeCN/H2O歷經(jīng)50min，20mL/min；在254nM下檢測(cè))。通過LC-MS分析具有UV吸收的部分，找出1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-{N-[2-苯基-2-羥基乙基]氨基}苯26。ESMS(C25H30N2O4)計(jì)算值422.5，觀測(cè)值423.3[M+H]+.
化合物27如上所述操作，但是用α，α-二羥基苯乙酮代替α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮，得到1-{2-[N-[2-苯基-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-{N-[2-苯基-2-羥基乙基]氨基}苯。ESMS(C24H28N2O8)計(jì)算值376.5，觀測(cè)值377.0[M+H]+.
實(shí)施例31-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖7) 步驟1在rt下，向4-(2-氨基乙基)苯胺25(20g，147mmol)的甲醇(250mL)溶液中加入(Boc)2O(32.4g，148mmol)的甲醇(50mL)溶液。攪拌24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮至干，得到淡黃色油狀殘余物。油狀物質(zhì)緩慢固化；將其溶于5％ MeOH/CH2Cl2，隨后上快速二氧化硅柱色譜(3至10％ MeOH/CH2Cl2)。純化后，得到4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺28，為淡黃色固體(32.95g，95％)Rf＝0.6 in 10％MeOH/CH2Cl2.1H-
NMR(CD3OD，299.96 MHz)δ(ppm)6.96-6.93(d，2H)，6.69-6.65(d，2H)，3.20-3.13(q，2H)，2.63-2.58(t，2H)，1.41(s，9H).
步驟2將4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺28(1.25g，5.29mmol)溶于甲醇(30mL)，然后加入苯甲酰甲醛24(0.708g，5.28mmol)。將反應(yīng)混合物在rt下攪拌1小時(shí)，然后加入NaCNBH3(0.665g，10.6mmol)。將最終的混合物在rt下攪拌12小時(shí)，濃縮，經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(2至5％ MeOH/CH2Cl2)，得到N-(2-苯基-2-羥基乙基)-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺，為淡黃色油(1.71g，91％)Rf＝0.18 in 5％MeOH/CH2Cl2.1H-NMR(CD3OD，299.96 MHz)δ(ppm)7.4-7.25(m，5H)，7.0-6.95(d，2H)，6.63-6.60(d，2H)，4.85-4.79(dd，1H)，3.3-3.21(t，2H)，3.2-3.15(m，2H)，2.64-2.5(t，2H)，1.42(s，9H).
步驟3將N-(2-苯基-2-羥基乙基)-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺(1.7g，4.77mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液在冰浴中冷卻，在氮?dú)饬飨戮徛尤隩FA(10mL)。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，濃縮，得到淡黃色油。粗物質(zhì)經(jīng)過反相HPLC純化(10％至40％MeCN/H2O歷經(jīng)50min；20mL/min)，得到N-(2-苯基-2-羥基乙基)-4-(2-氨基乙基)苯胺29，為TFA鹽(1.1g)1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.42-7.3(m，5H)，7.29-7.25(d，2H)，7.12-7.0(d，2H)，4.85-4.82(m，1H)，3.45-3.35(m，2H)，3.18-3.1(t，2H)，2.98-2.94(t，2H)；ESMS(C16H20N2O1)計(jì)算256.4，實(shí)測(cè)257.1[M+H]+，278.8[M+Na]+，513.4[2M+H]+.
步驟4向N-(2-苯基-2-羥基乙基)-4-(2-氨基乙基)苯胺三氟乙酸鹽29(1.1g，2.3mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入5M NaOH溶液(0.93mL)。攪拌10min后，將溶液濃縮至干。將殘余物溶于THF(25mL)，加入α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12(0.514g，2.27mmol)。將反應(yīng)混合物在rt下攪拌12小時(shí)，冷卻至0℃，在氮?dú)夥障录尤隑H3/Me2S(1.14mL，10M)。使反應(yīng)混合物逐漸升溫至rt，在rt下攪拌2小時(shí)，回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，緩慢加入甲醇(10mL)。在rt下攪拌30min后，將反應(yīng)混合物濃縮，得到固體殘余物，將其溶于含有10％TFA的MeOH(20mL)。蒸發(fā)有機(jī)相，得到淡黃色油，經(jīng)過反相HPLC純化(10％至30％ MeCN/H2O歷經(jīng)50min；20mL/min)，得到1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-羥基乙基)氨基]苯30，為TFA鹽(0.65g)。1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.42-7.3(m，6H)，7.28-7.24(d，2H)，7.18-7.14(dd，1H)，7.1-7.07(d，2H)，6.80-6.77(d，1H)，4.86-4.82(m，2H)，4.65(s，2H)，3.44-3.34(m，2H)，3.28-3.22(m，2H)，3.20-3.14(m，2H)，3.04-2.96(m，2H)；ESMS(C25H30N2O4)計(jì)算422.5，實(shí)測(cè)423.1[M+H]+，404.7[M-1H2O]+，387.1[M-2H2O]+.
實(shí)施例41-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖8) 步驟1將4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺28(7.0g，29.6mmol)與(R)-氧化苯乙烯(3.56g，29.6mmol)的乙醇(100mL)溶液回流24小時(shí)。除去有機(jī)相，得到淡黃色固體。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜分離N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺1/2 EtOAc/己烷至3/1 EtOAc/己烷至含3％ MeOH的3/1 EtOAc/己烷Rf＝0.39，3％MeOH/CH2Cl2.
步驟2在氮?dú)饬飨拢瑢-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺(2.5g，7.0mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液在冰浴中冷卻，緩慢加入TFA(15mL)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物溶于20％ MeCN/H2O，經(jīng)過制備型反相HPLC純化(5至2％ MeCN/H2O歷經(jīng)50min；254nm；20mL/min)，得到N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)-4-(2-氨基乙基)苯胺三氟乙酸鹽31，為無(wú)色的油。1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)；7.45-7.25(m，9H)，4.9(dd，1H)，3.55-3.45(m，2H)，3.21-3.15(t，2H)，3.05-2.95(t，2H)ESMS(C16H20N2O1)計(jì)算.256.4，實(shí)測(cè)257.1[M+H]+，280.2[M+Na]+.
步驟3向N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)-4-(2-氨基乙基)苯胺三氟乙酸鹽31(0.144g，0.3mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入NaOH水溶液(1.0M，0.625mL)。將溶液濃縮至干，將殘余物溶于無(wú)水THF(5mL)。加入α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12(0.067g，0.3mmol)，將反應(yīng)混合物在rt下攪拌12小時(shí)。在0℃下加入BH3-Me2S(0.2mL，2M)，將反應(yīng)混合物在75℃下加熱6小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻后，向其中緩慢加入MeOH(5mL)，以猝滅反應(yīng)，將反應(yīng)混合物在rt下攪拌30min。除去有機(jī)相，將殘余物溶于TFA/MeOH(1/9，20mL)，濃縮。將粗產(chǎn)物溶于20％MeCN/H2O，經(jīng)過制備型HPLC純化(5至20％MeCN/H2O；20mL/min；254nm)，得到1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯33。
1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.42-7.29(m，8H)，7.22-7.18(d，2H)，7.17-7.14(dd，1H)，6.80-6.77(d，1H)，4.9-4.85(m，2H)，4.65(s，2H)，3.5-3.34(m，2H)，3.28-3.25(m，2H)，3.19-3.14(m，2H)，3.04-2.98(m，2H)；ESMS(C25H30N2O4)計(jì)算.422.5，實(shí)測(cè)423.1[M+H]+，446.1[M+Na]+.
如上實(shí)施例4所述操作，但是用(S)-氧化苯乙烯代替(R)-氧化苯乙烯，得到1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(R)-羥基乙基)氨基]苯34。
1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.42-7.28(m，8H)，7.20-7.1(m，3H)，6.80-6.77(d，1H)，4.9-4.85(m，2H)，4.65(s，2H)，3.45-3.34(n，2H)，3.28-3.25(m，2H)，3.19-3.15(m，2H)，3.04-2.98(m，2H)；ESMS(C25H30N2O4)計(jì)算.422.5，實(shí)測(cè)423.1[M+H]+，446.1[M+Na]+.
實(shí)施例51，6-雙{4-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基己氧基丙基]苯氧基}己烷的合成(下圖9) 步驟1將3-(4-羥基苯基)-1-丙醇35(3.3g，21.7mmol)與1，6-二碘己烷(3.5g，8.88mmol)的二甲基亞砜(40mL)溶液用N2氣脫氣和飽和，加入碳酸鉀(4.5g，32.56mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃和氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)，然后用鹽水猝滅(150mL)。產(chǎn)物用EtOAc(200mL)萃取，有機(jī)萃取液用0.1M NaOH和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。在真空中除去有機(jī)相，得到淡褐色固體。該固體經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(4/1己烷/EtOAc至含5％MeOH的1/1己烷/EtOAc)，得到1，6-雙[4-(3-羥基丙基)苯氧基]己烷36(Rf＝0.17，1/1己烷/EtOAc)，收率65％(2.23g)。1H-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.08-7.05(d，4H)，6.80-6.77(d，4H)，3.93-3.89(t，4H)，3.56-3.52(t，4H)，2.64-2.56(t，4H)，1.81-1.69(m，8H)，1.44-1.21(m，4H).
步驟2在0℃和氮?dú)夥障?，?，6-雙[4-(3-羥基丙基)苯氧基]己烷36(2.2g，5.69mmol)的DMF(10mL)溶液加入到含有NaH(0.57g；60％礦物油分散系)的DMF(10mL)溶液中，將反應(yīng)混合物在50℃下加熱。1小時(shí)后，加入6-溴己腈(2.26mL，17mmol)，將反應(yīng)混合物在80℃下加熱24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用鹽水溶液(100mL)猝滅，用EtOAc(250mL)萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，在真空中蒸發(fā)，得到淡黃色油。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(4/1至1/1己烷/EtOAc)，得到1，6-雙[4-(5-氰基戊氧基丙基)苯氧基]己烷37產(chǎn)物(Rf＝0.6，1/1 EtOAc/己烷)。1H-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)7.09-7.06(d，4H)，6.82-6.79(d，4H)，3.94-3.90(t，4H)，3.42-3.37(m，8H)，2.64-2.58(t，4H)，2.40-2.32(m，8H)，1.90-1.26(m，24H).
步驟3將上述步驟2所得1，6-雙[4-(5-氰基戊氧基丙基)苯氧基]己烷37(0.278g，0.48mmol)加入到濃HCl(10mL)與AcOH(2mL)的混合物中，將反應(yīng)混合物在90℃下加熱。15小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用鹽水(50mL)稀釋，用EtOAc(100mL)萃取，用MgSO4干燥。蒸發(fā)有機(jī)相，得到1，6-雙[4-(5-羧基戊氧基丙基)苯氧基]己烷38，為淡黃色油狀殘余物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下面的步驟。1H-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)7.09-7.07(d，4H)，6.82-6.79(d，4H)，3.96-3.92(t，4H)，3.42-3.56(m，8H)，2.64-2.59(t，4H)，2.39-2.32(m，4H)，1.91-1.40(m，24H).
步驟4向2-羥基-2-(4-芐氧基-3-羥甲基苯基)乙胺39(0.263g，0.96mmol)的DMF(8mL)溶液中加入上述步驟3所得1，6-雙[4-(5-羧基戊氧基丙基)苯氧基]己烷38(~0.48mmol)、HOBt(0.13g，0.96mmol)、DIPEA(0.21mL，1.20mmol)和PyBOP(0.502g，0.96mmol)。在rt下攪拌24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用鹽水(20mL)稀釋，用EtOAc(50mL)萃取。有機(jī)層用0.1M NaOH、0.1M HCl和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。在真空中除去有機(jī)溶劑，得到1，6-雙[4-(5-酰氨基戊氧基丙基)苯氧基]己烷，為淡黃色油狀殘余物(0.45g)。
步驟5在0℃下，將上述步驟4所得1，6-雙[4-(5-酰氨基戊氧基丙基)苯氧基]己烷(0.45g，0.4mmol)的無(wú)水THF(10mL)溶液加入到LiAlH4(0.16g，4.22mmol)的無(wú)水THF(40mL)溶液中。將反應(yīng)混合物在80℃和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，然后在0℃下用10％NaOH(1mL)猝滅。30min后，將反應(yīng)混合物過濾，沉淀用含10％ MeOH的THF(50mL)洗滌。將濾液合并，在真空中蒸發(fā)，得到淡黃色油狀殘余物。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(5％ MeOH/CH2Cl2至含3％ i-PrNH2的10％ MeOH/CH2Cl2)，得到1，6-雙[4-(6-氨基己氧基丙基)苯氧基]己烷。
1H-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)7.40-7.25(m，12H)，7.22-7.18(d，2H)，7.09-7.02(d，4H)，6.91-6.88(d，2H)，6.81-6.75(d，4H)，5.01(s，4H)，4.8-4.75(m，2H)，4.70(s，4H)，3.96-3.83(q，4H)，3.42-3.34(m，8H)，2.84-2.64(m，8H)，2.62-2.56(t，4H)，1.84-1.75(m，8H)，1.57-1.50(m，10H)，1.34-1.23(m，10H).
步驟6將上述步驟5所得1，6-雙[4-(6-氨基己氧基丙基)苯氧基]己烷(0.16g，0.15mmol)的EtOH(40mL)溶液在rt和H2(1atm)氣氛下用10％Pd/C催化劑(100mg)氫化24小時(shí)。過濾催化劑，濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物，為淡黃色油。經(jīng)過反相HPLC純化(10至50％ MeCN/H2O歷經(jīng)40min；20mL/min；254nm)，得到1，6-雙{4-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基己氧基丙基]苯氧基}己烷40。H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.35(d，2H)，7.18-7.15(dd，2H)，7.08-7.05(d，4H)，6.82-6.77(m，6H)，4.65(s，4H)，3.96-3.92(t，4H)，3.45-3.34(m，8H)，3.12-3.01(m，6H)，2.94-2.89(t，2H)，2.62-2.57(t，4H)，1.86-1.43(m，28H)；ESMS(C54H80N2O10)計(jì)算917.1，實(shí)測(cè)917.5[M]+，940.8[M+Na]+.
實(shí)施例61-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖10) 步驟1
將4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺28(10g，42.34mmol)、苯甲醛(4.52mL，44.47mmol)與分子篩4A(10g)在甲苯(100mL)中的混合物在95℃下回流15小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，將濾液在真空中濃縮，得到無(wú)色的油。將該油溶于MeOH(150mL)，加入AcOH(0.5mL)和NaCNBH3(2.79g，44.4mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，在rt下攪拌2小時(shí)，然后在真空中濃縮，得到淡黃色油狀殘余物。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(1/1己烷/EtOAc)，得到N-芐基-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺41，為無(wú)色的油(11.5g，83％)。Rf＝0.75 in 1/1己烷/EtOAc.H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.38-7.2(m，5H)，6.87-6.84(d，2H)，6.58-6.55(d，2H)，4.27(s，2H)，3.2-3.15(m，2H)，2.6-2.56(t，2H)，1.41(s，9H)；ESMS(C20H26N2O2)計(jì)算.326.4，實(shí)測(cè)328[M+H]+.
步驟2將N-芐基-4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺41(10g，30.7mmol)與(R)-氧化苯乙烯(3.51mL，30.7mmol)在EtOH(100mL)中的混合物回流48小時(shí)。取少量反應(yīng)混合物進(jìn)行液相色譜分析，說(shuō)明生成了所需加合物2-[N-芐基-4-(2-N-Boc-氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇，為次要產(chǎn)物，以及另一種區(qū)域異構(gòu)體2-[N-芐基-4-(2-N-Boc-氨基乙基)苯氨基]-2-苯基乙醇，比例為~1/2。蒸發(fā)溶液，得到稠厚的淡黃色油，經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(4/1至2/1己烷/EtOAc)。反復(fù)的色譜純化后，得到2-[N-芐基-4-(2-N-Boc-氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇，為無(wú)色的油(4.01g，29％)。
(Rf＝0.76 in 2/1己烷/EtOAc).H1-NMR(CD3OD，299.96 MHz)δ(ppm)7.4-7.1(m，10H)，7.1-7.06(d，2H)，6.68-6.65(d，2H)，5.0(t，1H)，4.52-4.46(d，1H)，4.26-4.22(d，1H)，3.76-3.68(dd，1H)，3.56-3.48(dd，1H)，3.22-3.12(m，2H)，2.68-2.56(m，2H)，1.41(s，9H)；ESMS(C28H34N2O3)計(jì)算.446.6，實(shí)測(cè)447.1[M+H]+，893.4[2M+H]+.
步驟3在氮?dú)饬飨?，向保持在冰浴中?-[N-芐基-4-(2-N-Boc-氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇(4.01g，8.99mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入TFA(15mL)。在0℃下攪拌30min后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，得到淡黃色油。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(1/2己烷/EtOAc至含5％ i-PrNH2的1/2己烷/EtOAc)，得到2-[N-芐基-4-(2-氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇42，為淡黃色油，Rf為0.2(含5％ i-PrNH2的1/2己烷/EtOAc)，收率74％(2.29g)。H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.38-7.06(m，10H)，7.01-6.98(d，2H)，6.71-6.68(d，2H)，5.02-4.96(dd，1H)，4.54-4.48(d，1H)，4.29-4.23(d，1H)，3.76-3.67(dd，1H)，3.58-3.50(dd，1H)，2.82-2.74(t，2H)，2.64-2.59(t，2H)；ESMS(C23H26N2O1)計(jì)算346.5，實(shí)測(cè)346.3[M]+，步驟4將2-[N-芐基-4-(2-氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇42(2.28g，6.59mmol)、苯甲醛(0.74mL，7.28mmol)與分子篩4A(4g)在甲苯(40mL)中的混合物在90℃下加熱14小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，過濾，篩子用甲苯清洗。合并濾液，濃縮，得到油狀殘余物，用己烷洗滌，干燥，將殘余物溶于含有AcOH(0.4mL)的MeOH(40mL)，將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻。加入NaCNBH3(0.62g，9.87mmol)，將反應(yīng)混合物在rt下攪拌2小時(shí)，然后濃縮。將油狀殘余物溶于60％ MeCN/H2O，經(jīng)過反相制備型液相色譜純化(40至80％ MeCN/H2O歷經(jīng)30min；30mL/min)，得到2-[N-芐基-4-(2-N-芐氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇，為TFA鹽。將該產(chǎn)物用堿性鹽水溶液處理，用乙醚萃取(200mL)。有機(jī)層用Na2SO4干燥，濃縮，得到2-[N-芐基-4-(2-N-芐氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇43，為無(wú)色的油(1.36g)。H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.36-7.06(m，15H)，6.98-6.95(d，2H)，6.69-6.60(d，2H)，5.01-4.96(t，1H)，4.54-4.47(d，1H)，4.29-4.24(d，1H)，3.73(s，2H)，3.72-3.68(dd，1H)，3.59-3.54(dd，1H)，2.80-2.74(m，2H)，2.70-2.64(m，2H)；ESMS(C30H32N2O1)計(jì)算436.6，實(shí)測(cè)437.2[M+H]+.
步驟5將濃縮的2-[N-芐基-4-(2-N-芐氨基乙基)苯氨基]-1-苯基乙醇(1.36g，3.12mmol)與化合物(S)-4-芐氧基-3-甲氧羰基氧化苯乙烯44(0.887g，3.12mmol；~95％ee)(如R.Hett，R.Stare，P.Helquist，Tet.Lett.(四面體快報(bào))，35，9375-9378，(1994)所述制備)的甲苯(1mL)溶液在105℃和氮?dú)夥障录訜?2小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(2/1己烷/EtOAc至含3％ MeOH的1/1己烷/EtOAc)，得到1-{2-[N-芐基-N-[2-(4-芐氧基-3-甲氧羰基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯45(Rf＝0.62，含3％ MeOH的1/1己烷/EtOAc)，為淡黃色泡沫(2.0g，89％)。
H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.67-7.66(d，1H)，7.49-7.42(m，2H)，7.38-7.0(m，20H)，6.88-6.85(d，2H)，6.65-6.62(d，2H)，5.15(s，2H)，5.05-4.98(t，1H)，4.6-4.54(t，1H)，4.53-4.46(d，1H)，4.28-4.22(d，1H)，3.84(s，3H)，3.72-3.64(m，3H)，3.56-3.46(dd，1H)，2.74-2.56(m，6H)；ESMS(C47H48N2O5)計(jì)算720.9，實(shí)測(cè)721.4[M+H]+，743.3[M+Na]+.
步驟6在氮?dú)夥障?，向用冰浴冷卻的LiAlH4(0.211g，5.56mmol)的THF(40mL)懸液中加入1-{2-[N-芐基-N-[2-(4-芐氧基-3-甲氧羰基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯45(2.0g，2.78mmol)的THF(10mL)溶液。使反應(yīng)混合物緩慢升溫至rt，繼續(xù)攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)系冷卻至0℃，緩慢加入10％NaOH(0.5mL)。30min后，生成稠厚的凝膠。將該凝膠用THF(300mL)稀釋，過濾，固體物用THF(50mL)清洗。合并濾液，在真空中濃縮，得到油狀殘余物。殘余物經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(2/1己烷/EtOAc至含3％MeOH的1/1己烷/EtOAc)，得到1-{2-[N-芐基-N-[2-(4-芐氧基-3-羥甲基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯，為無(wú)色的油(1.28g，67％)。H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.4-7.0(m，22H)，6.85-6.82(m，3H)，6.63-6.60(d，2H)，5.02-4.94(m，3H)，4.66(s，2H)，4.59-4.54(dd，1H)，4.48-4.4(d，1H)，4.24-4.16(d，1H)，3.76-3.7(d，1H)，3.69-3.62(dd，1H)，3.58-3.52(d，1H)，3.50-3.44(dd，1H)，2.76-2.54(m，6H)；ESMS(C46H48N2O4)計(jì)算692.90，實(shí)測(cè)693.5[M+H]+.
步驟7將1-{2-[N-芐基-N-[2-(4-芐氧基-3-羥甲基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯(1.28g，1.85mmol)的EtOH(80mL)溶液在H2(1atm)下用10％Pd/C(0.6g)氫化36小時(shí)。過濾并用EtOH(50mL)清洗催化劑后，合并濾液，在真空中蒸發(fā)，得到淡黃色泡沫，將其溶于10％ MeCN/H2O，經(jīng)過反相制備型液相色譜純化(10至30％ MeCN/H2O(含有0.3％TFA)歷經(jīng)50min；30mL/min；254nm)，得到1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯，為TFA鹽(0.6g，50％)。利用手性介質(zhì)，用毛細(xì)管電泳法分析1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-(R)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(S)-羥基乙基)氨基]苯46的光學(xué)純度，估計(jì)為~93％。
H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.42-7.28(m，8H)，7.26-7.22(d，2H)，7.18-7.14(dd，1H)，6.80-6.77(d，1H)，4.88-4.82(m，2H)，4.65(s，2H)，3.5-3.43(m，2H)，3.29-3.26(m，2H)，3.19-4.14(m，2H)，3.06-3.0(m，2H)；ESMS(C25H30N2O4)計(jì)算422.5，實(shí)測(cè)423.1[M+H]+，445.4[M+Na]+.
實(shí)施例71-{6-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]己氧基}-4-{6-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]己氧基丙基}苯的合成(下圖11) 步驟1在0℃和氮?dú)夥障拢瑢?-(4-羥基苯基)-1-丙醇(2.0g，13.1mmol)的DMF(5mL)溶液加入到含有NaH(1.31g，60％礦物油分散系)的DMF(35mL)溶液中。將反應(yīng)混合物緩慢加熱至80℃。在80℃下攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入6-溴己腈(5.78g，32.83mmol)。將最終的混合物再次加熱至80℃，攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和NaCl溶液(200mL)猝滅，產(chǎn)物用EtOAc(300mL)萃取。將有機(jī)層用鹽水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，蒸發(fā)至干，得到淡黃色固體。粗產(chǎn)物經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(4/1至1/1己烷/EtOAc)，得到6-{3-[4-(5-氰基戊氧基)苯基]丙氧基}己腈，收率30％(1.33g)。
Rf＝0.63 in 1/1 EtOAc/己烷1H-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)7.09-7.07(d，2H)，6.81-6.78(d，2H)，3.96-3.92(t，2H)，3.42-3.37(m，4H)，2.64-2.58(t，2H)，2.39-2.32(m，4H)，1.87-1.52(m，14H).
步驟2在0℃和氮?dú)夥障?，?-{3-[4-(5-氰基戊氧基)苯基]丙氧基}己腈(1.33g，3.88mmol)的THF(10mL)溶液加入到LiAlH4(0.442g，11.65mmol)的THF(50mL)溶液中。將反應(yīng)混合物緩慢加熱至回流，攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，緩慢加入10％ NaOH溶液(5mL)。30min后，過濾反應(yīng)混合物，收集固體，用THF(100mL)洗滌。濃縮濾液，得到淡黃色油，經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(5％ MeOH/CH2Cl2至3％ i-PrNH2/20％ MeOH/CH2Cl2)，得到6-{3-[4-(6-氨基己氧基)苯基]丙氧基}己胺，為無(wú)色的油(0.5g，37％)，通過上述實(shí)施例1步驟2所述操作轉(zhuǎn)化為所需化合物。粗產(chǎn)物經(jīng)過制備型反相HPLC純化(10至40％ MeCN/H2O歷經(jīng)40min；20mL/min；254nm)。ESMS(C39H58N2O8)計(jì)算.682.8，實(shí)測(cè)683.6[M+H]+，797.5[M+CF3CO2H]+.
實(shí)施例8雙{2-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基氨基]-2-羥基乙氧基}苯的合成(下圖12) 步驟1向N2飽和的含有5-乙?；畻钏峒柞?0(20g，0.1mol)和芐基溴(13.5mL，0.11mol)的乙腈(300mL)溶液中加入K2CO3(28.5g，0.21mol)。將反應(yīng)混合物在90℃下攪拌5小時(shí)。冷卻后，過濾反應(yīng)混合物，將濾液在真空中濃縮，得到白色固體，將其懸浮在己烷(300mL)中，在布氏漏斗上收集，得到O-芐基-5-乙酰基水楊酸甲酯51，為無(wú)色至白色晶體(28.1g，96％)。Rf＝0.69in 1/1 EtOAc/己烷 H1-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)7.8.43-8.42(d，1H)，8.1-8.04(dd，1H)，7.5-7.28(m，5H)，7.08-7.04(d，1H)，5.27(s，2H)，3.93(s，3H)，2.58(s，3H).
步驟2向O-芐基-5-乙?；畻钏峒柞?1(14.15g，0.05mol)的CHCl3(750mL)溶液中加入溴(2.70mL，0.052mol)。將反應(yīng)混合物在rt下攪拌。在攪拌的同時(shí)，反應(yīng)混合物逐漸從紅-褐色變?yōu)闊o(wú)色。將混合物在rt下攪拌2小時(shí)，加入鹽水溶液(300mL)猝滅。在分液漏斗中搖動(dòng)混合物后，收集有機(jī)層，用鹽水洗滌，在Na2SO4下干燥。將有機(jī)溶液在真空中濃縮，得到白色固體。用乙醚(200mL)洗滌。在空氣中干燥后，得到15g(83％)O-芐基-5-(溴乙?；?水楊酸甲酯52。Rf＝0.76 in 1/1 EtOAc/己烷 H1-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)8.48-8.46(d，1H)，8.14-8.08(dd，1H)，7.51-
7.3(m，5H)，7.12-7.09(d，1H)，5.29(s，2H)，4.42(s，2H)，3.94(s，3H).
步驟3向含有O-芐基-5-(溴乙?；?水楊酸甲酯52(7.08g，0.019mol)的DMF(60mL)溶液中加入NaN3(1.9g，0.029mol)。在rt下在黑暗中攪拌24小時(shí)后，將混合物用EtOAc(200mL)稀釋，在分液漏斗中用鹽水溶液洗滌(3×200mL)。將有機(jī)相在MgSO4下干燥，濃縮，得到淡紅色固體。經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(含10至50％EtOAc的己烷)。得到所需產(chǎn)物O-芐基-5-(疊氮乙?；?水楊酸甲酯53，為白色晶體(4.7g，74％)。Rf＝0.68 in 1/1 EtOAc/己烷、H1-NMR(CDCl3，299.96MHz)δ(ppm)8.38-8.36(d，1H)，8.08-8.04(dd，1H)，7.5-7.3(m，5H)，7.12-7.09(d，1H)，5.29(s，2H)，4.53(s，2H)，3.94(s，3H).
步驟4在氮?dú)夥障?，向在冰浴中冷卻的、灰色的LiAlH4(2.74g，0.072mol)的THF(400mL)懸液中加入O-芐基-5-(疊氮乙?；?水楊酸甲酯53(4.7g，0.014mol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，逐漸升溫至rt。在rt下攪拌16小時(shí)后，將混合物在75℃下加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，緩慢加入10％ NaOH(10mL)猝滅。攪拌1小時(shí)后，過濾沉淀，用含5％ MeOH的THF(200mL)清洗。合并濾液，在真空中濃縮，得到淡黃色油狀殘余物。粗產(chǎn)物經(jīng)過快速二氧化硅柱色譜純化(10％ MeOH/CH2Cl2至含5％ i-PrNH2的30％ MeOH/CH2Cl2)，得到2-(4-芐氧基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙胺39，為淡黃色固體(2.6g，66％)。Rf＝0.63 in 5％i-PrNH2in 30％MeOH/CH2Cl2.H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)δ(ppm)7.46-7.28(m，6H)，7.24-7.20(dd，1H)，7.0-6.96(d，1H)，5.11(s，2H)，4.70(s，2H)，4.65-4.60(t，1H)，2.83-2.81(d，2H)；ESMS(C16H19N1O3)計(jì)算273.3，實(shí)測(cè)274.7[M+H]+，547.3[2M+H]+.
步驟5向含有化合物2-(4-芐氧基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙胺39(0.3g，1.1mmol)的EtOH(15mL)溶液中加入間一苯二酚二縮水甘油醚(0.122g，0.55mmol)的EtOH(5mL)溶液。將反應(yīng)混合物回流20小時(shí)。冷卻至rt后，將反應(yīng)混合物用氮脫氣，用10％ Pd/C(0.3g，10％)在H2(1atm)下氫化24小時(shí)。過濾催化劑后，將濾液濃縮至干，得到無(wú)色油狀殘余物，經(jīng)過制備型反相HPLC純化(10至50％ MeCN/H2O歷經(jīng)40min；20mL/min；254nm)，得到雙{2-[2-(4--羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基氨基]-2-羥基乙氧基}苯54。ESMS(C30H40N2O10)計(jì)算588.6，實(shí)測(cè)589.4[M+H]+，610.7[M+Na]+.
實(shí)施例91-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-萘-1-基氧基甲基-2-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖13) 步驟1將含有4-(N-Boc-2-氨基乙基)苯胺28(0.4g，1.69mmol)與3-(1-萘氧基)-1，2-環(huán)氧丙烷55(0.33g，1.65mmol)的EtOH(50mL)溶液回流18小時(shí)，在真空中濃縮至干，得到淡黃色油。將其溶于10mL CH2Cl2，在冰浴中冷卻，用TFA(5mL)處理。在0℃下攪拌2小時(shí)后，蒸發(fā)混合物，得到淡紅色油。將其溶于30％含水乙腈，經(jīng)過制備型HPLC純化(10至30％ MeCN/H2O歷經(jīng)30min；20mL/min；254nm)。得到產(chǎn)物56，為無(wú)色的油(260mg，TFA鹽)。H1-NMR(CD3OD，299.96MHz)d(ppm)8.88-8.25(dd，1H)，7.82-7.79(dd，1H)，7.51-7.42(m，3H)，7.39-7.38(d，1H)，7.33-7.30(d，2H)，7.25-7.23(d，2H)，6.91-6.89(d，1H)，4.37-4.31(m，1H)，4.224.19(m，2H)，3.69-3.63(dd，1H)，3.67-3.54(dd，1H)，3.17-3.11(t，2H)，2.96-2.91(t，2H)；ESMS(C21H24N2O2)計(jì)算.336.4，實(shí)測(cè)337.5[M+H]+，359.6[M+Na]+，673.4[2M+H]+.
步驟2
向化合物56(0.13g，0.023mmol；TFA鹽)的5mL MeOH溶液中加入1.0M NaOH(1.0M，0.46mL)。均勻混合后，將溶液蒸發(fā)至干。將殘余物溶于THF(10mL)，然后加入乙二醛12(52mg，0.023mmol)。將所得懸液在環(huán)境溫度和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將所得溶液在冰浴中冷卻后，向前述反應(yīng)溶液中加入2M BH3-Me2S的THF溶液(3mL，6mmol)。使所得混合物緩慢升溫至rt，在N2氣流下回流4小時(shí)。將熱溶液冷卻后，在氮?dú)夥障孪蚶鋮s后的混合物中加入5mL MeOH，以猝滅反應(yīng)混合物。在rt下攪拌30min后，將最終的溶液在真空中蒸發(fā)，得到淡褐色固體。用EtOAc/己烷(1/2；20mL)洗滌，干燥。將粗產(chǎn)物溶于含有0.5％TFA的50％ MeCN/H2O，經(jīng)過制備型高效液相色譜(HPLC)純化，使用線性梯度(5％至50％MeCN/H2O歷經(jīng)50min，20mL/min；在254nM下檢測(cè))。通過LC-MS分析具有UV吸收的部分，找出所需產(chǎn)物1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-萘-1-基氧基甲基-2-羥基乙基)氨基]苯57。ESMS(C30H34N2O5)計(jì)算.502.6，實(shí)測(cè)503.2[M+H]+，525.6[M+Na]+.
實(shí)施例101，4，7-三{N-[2-(4-羥基-3-羥甲基苯基)-2-羥基乙基]氨基}辛烷的合成 向α，α-二羥基-4-羥基-3-甲氧羰基苯乙酮12(0.45g，1.99mmol)的四氫呋喃(15mL)懸液中加入4-(氨基甲基)-1，8-辛二胺(115mg，0.66mmol)的四氫呋喃(5mL)溶液。將所得懸液在環(huán)境溫度和氮?dú)夥障聰嚢?2小時(shí)。將所得溶液在冰浴中冷卻后，加入過量的2M BH3-Me2S的己烷溶液(6mL，12mmol)。使所得混合物緩慢升溫至rt，在氮?dú)夥障禄亓?小時(shí)。冷卻后，用甲醇(5mL)猝滅反應(yīng)混合物。將所得溶液在rt下攪拌30min，然后在真空中濃縮，得到淡褐色固體。將該固體用乙酸乙酯∶己烷混合物(1∶2)洗滌，然后干燥。將粗產(chǎn)物溶于含有0.5％TFA的50％乙腈/水，經(jīng)過HPLC純化，使用線性梯度(5％至50％MeCN/H2O歷經(jīng)50min，20mL/min；在254nM下檢測(cè))。通過LC-MS分析具有UV吸收的部分，找出所需產(chǎn)物。ESMS(C36H53N3O9)計(jì)算.671.8；實(shí)測(cè)671.7.
實(shí)施例111-{2-[N-[2-(4-氨基-3，5-二氯苯基)-2-(RS)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(RS)-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖14) 步驟1將2-(4-氨基苯基)乙胺25(4.70mL，36.7mmol)、苯甲醛(7.46mL，73.4mmol)與4A分子篩(18g)的甲苯(180mL)溶液回流3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到化合物58(收率95％)。
步驟2在氮?dú)夥障拢蛟诒≈欣鋮s的58(2.00g，6.40mmol)的乙醇(150mL)溶液中緩慢加入硼氫化鈉(361mg，9.50mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1.5小時(shí)，然后緩慢升溫至室溫。緩慢加入50％甲醇/TFA(5mL)猝滅反應(yīng)混合物，然后在減壓下濃縮混合物。將所得殘余物溶于EtOAc，用0.1M NaOH洗滌。經(jīng)Na2SO4干燥后，將有機(jī)相在真空中濃縮，殘余物經(jīng)過快速硅膠色譜純化，使用乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑，得到化合物59(收率80％)。
步驟3向用冰浴冷卻的59(1.00g，3.20mmol)的甲醇溶液中緩慢加入二叔丁基二碳酸酯(0.69g，3.2mmol)的冷甲醇(5mL)溶液。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌0.5小時(shí)，然后逐漸升溫至室溫。攪拌1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，在高真空下干燥過夜。油狀殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，使用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脫，得到化合物60(收率80％)。
步驟4向60(2.09g，5.00mmol)的甲醇(45mL)溶液中加入苯甲酰甲醛(2.01g，15.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后緩慢加入氰基硼氫化鈉(1.25g，20mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，將殘余物溶于甲醇。過濾后，將濾液在減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫，得到化合物61(收率26％)。
步驟5在氮?dú)饬飨?，向在冰浴中冷卻的61(3.19g，5.90mmol)的二氯甲烷(12mL)溶液中緩慢加入三氟乙酸(12mL)。將反應(yīng)混合物在相同溫度下攪拌1小時(shí)后，將混合物在減壓下濃縮，得到化合物62，為油狀殘余物。將產(chǎn)物在真空中干燥過夜，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下面的步驟(收率90％)。
步驟6向62(1.87g，3.4mmol)與2，6-二氯-4-(溴乙?；?苯胺63(1.07g，3.8mmol)在DMF(50mL)中的混合物中加入碳酸鉀(0.96g，6.90mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5小時(shí)，然后在35℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，緩慢加入硼氫化鈉(0.16g，4.10mmol)的乙醇(50mL)溶液。在室溫下繼續(xù)反應(yīng)過夜，然后用含水NH4Cl(飽和)猝滅。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物后，將殘余物溶于乙醚，用鹽水洗滌。經(jīng)MgSO4干燥后，濃縮有機(jī)層，殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用己烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫。得到產(chǎn)物64，收率50％。
步驟7將64(107mg，0.17mmol)與氫氧化鈀(25mg)的乙醇(2.5mL)懸液在氫氣氛(1atm)和室溫下攪拌過夜。過濾混合物，濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過硅膠色譜純化，用6％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到化合物65(收率10％)。ESMS(C24H27Cl2N3O2)計(jì)算460.4；實(shí)測(cè)460[M+H]+，442[M-H2O]+，921[2M+H]+.
實(shí)施例121-{2-[N-[2-(4-羥基-3-甲酰氨基苯基)-2-(RS)-經(jīng)基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(RS)-羥基乙基)氨基]苯的合成(下圖15) 步驟1在室溫下，將1-芐氧基-4-溴乙?；?2-硝基苯66(3.76g，10.8mmol)(如Chem.Bull.(化學(xué)通報(bào))，25，1368-1377，(1977)所述制備)加入到化合物59(3.4g，10.8mmol)的二甲基甲酰胺(150mL)溶液中。28小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，用稀氯化鈉水溶液洗滌。分離有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到粗油。經(jīng)過柱色譜純化，使用己烷∶乙酸乙酯作為洗脫劑，得到化合物67(收率95％)。
步驟2在氮?dú)夥障拢?7(4.0g，6.80mmol)的乙醇(500mL)溶液中歷經(jīng)30min緩慢分批加入硼氫化鈉(1g，26.50mmol)。6小時(shí)后，緩慢加入飽和氯化銨水溶液猝滅反應(yīng)混合物。將溶液用1N氫氧化鈉和乙酸乙酯和己烷稀釋。分離有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，得到化合物68，為油，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下面的步驟。
步驟3向68(3.6g，6.1mmol)與碳酸鉀(3.0g，9.2mmol)在二甲基甲酰胺(100mL)中的混合物中分批加入α-溴苯乙酮(1.28g，6.4mmol)。將反應(yīng)混合物在65℃下加熱過夜。加入另外一部分α-溴苯乙酮(0.25g，1.25mmol)，繼續(xù)加熱。18小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入乙醇(50mL)。加入硼氫化鈉(1.0g，26.5mmol)，繼續(xù)攪拌2.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，然后加入甲醇(25mL)，加入飽和氯化銨溶液猝滅過量氫化物。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和乙醚稀釋。分離有機(jī)層，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。粗油經(jīng)過柱色譜純化，用乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到化合物69。
步驟4向69(0.73g，1.0mmol)在甲醇(20mL)、6N鹽酸(1mL)與水(2mL)的混合物中的溶液中加入鐵粉(0.56g，10.0mmol)。將反應(yīng)混合物在90℃下加熱1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，放置過夜。加入甲醇，濾出褐色沉淀和未反應(yīng)的鐵。將濾液在減壓下濃縮，得到70，為褐色固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下面的步驟。
步驟5在室溫下，將化合物70溶于預(yù)混合的乙酸酐(5mL)與甲醇(3mL)溶液。3小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，蒸發(fā)至干。加入0.5M氫氧化鈉的甲醇溶液，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1N鹽酸的甲醇溶液處理，然后濃縮至干。將殘余物再次溶于甲醇，過濾。濃縮濾液，得到化合物71，為褐色殘余物，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下面的步驟。
步驟6將披鈀碳(10％，0.5g)加入到71的甲醇(120mL)與二甲基甲酰胺(80mL)懸液中。將反應(yīng)混合物用氮?dú)鈨艋?，在氫氣?1atm)和室溫下攪拌過夜。過濾混合物，濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過HPLC純化(乙腈/水/1％TFA梯度)，得到粗產(chǎn)物，經(jīng)過柱色譜純化，使用甲醇/二氯甲烷/1％異丙胺作為洗脫劑，得到所需化合物1-{2-[N-[2-(4-羥基-3-甲酰氨基苯基)-2-(RS)-羥基乙基]氨基]乙基}-4-[N-(2-苯基-2-(RS)-羥基乙基)氨基]苯72。
制劑實(shí)施例實(shí)施例1制備含有下列成分的硬膠囊成分量(mg/粒)活性成分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0將上述成分混合，填充在硬膠囊內(nèi)，含量為340mg。
實(shí)施例2使用下列成分制備片劑成分 量(mg/片)活性成分 25.0微晶纖維素 200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0將各組分摻合，壓制成片，每片重240mg。
實(shí)施例3制備含有下列組分的干粉吸入劑成分重量％活性成分 5乳糖 95將活性成分與乳糖混合，將混合物加入到干粉吸入器具內(nèi)。
實(shí)施例4如下制備片劑，每片含有30mg活性成分成分 量(mg/片)活性成分30.0mg淀粉45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮(10％無(wú)菌水溶液) 4.0mg羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石1.0mg總計(jì)120.0mg
使活性成分、淀粉和纖維素通過No.20目美國(guó)篩，均勻混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與所得粉末混合，然后通過16目美國(guó)篩。將所得顆粒在50至60℃下干燥，通過16目美國(guó)篩。然后向顆粒加入預(yù)先通過No.30目美國(guó)篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石，混合后，在壓片機(jī)上壓制成片，得到片劑，每片重120mg。
實(shí)施例5如下制備膠囊劑，每粒含有40mg藥物成分 量(mg/粒)活性成分 40.0mg淀粉 109.0mg硬脂酸鎂 1.0mg總計(jì) 150.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂摻合，通過No.20目美國(guó)篩，填充在硬膠囊內(nèi)，含量為150mg。
實(shí)施例6如下制備栓劑，每粒含有25mg活性成分成分 量活性成分 25mg飽和脂肪酸甘油酯，至 2000mg使活性成分通過No.60目美國(guó)篩，懸浮在預(yù)先輕微加熱熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物倒在標(biāo)稱容量2.0g的栓劑模具中，冷卻。
實(shí)施例7如下制備懸液，每5.0mL劑量含有50mg藥物成分 量活性成分 50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75g苯甲酸鈉 10.0mg矯味劑和著色劑適量純凈水，至5.0mL將活性成分、蔗糖和黃原膠摻合，通過No.10目美國(guó)篩，然后與預(yù)先制備的微晶纖維素與羧甲基纖維素鈉的水溶液混合。將苯甲酸鈉、矯味劑和著色劑用少量水稀釋，在攪拌下加入。然后加入足量水至所需體積。
實(shí)施例8可以如下制備制劑成分 量(mg/粒)活性成分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總計(jì) 425.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂摻合，通過No.20目美國(guó)篩，填充在硬膠囊內(nèi)，含量為425.0mg。
實(shí)施例9可以如下制備制劑成分 量活性成分 5.0mg玉米油 1.0mL實(shí)施例10可以如下制備局部制劑成分 量活性成分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g白軟石蠟，至 100g
將白軟石蠟加熱至熔化。摻入液體石蠟和乳化蠟，攪拌直至溶解。加入活性成分，繼續(xù)攪拌直至分散。然后冷卻混合物至固體。
用在本發(fā)明方法中的另一種優(yōu)選的制劑采用透皮釋放藥具(“貼劑”)。這類透皮貼劑可以用于提供控制量的本發(fā)明化合物的連續(xù)或不連續(xù)輸注。用于釋放藥物的透皮貼劑的構(gòu)造和用途是本領(lǐng)域所熟知的。例如參見1991年6月11日公布的美國(guó)專利5,023,252，全文引用在此作為參考文獻(xiàn)。這類貼劑可以用于連續(xù)的、脈沖的或即時(shí)的藥物釋放。
其他適合用在本發(fā)明中的制劑可以在E.W.Martin編著的Remington’s Pharmaceutical Sciences(Remington氏藥物科學(xué))(Mack Publishing Company，第18版，1990)中找到。
生物學(xué)實(shí)施例實(shí)施例1β2-腎上腺素能受體體外功能測(cè)定如下試驗(yàn)本發(fā)明化合物的β2-腎上腺素能受體功能活性。
細(xì)胞接種和生長(zhǎng)將來(lái)自21歲男性的原代支氣管平滑肌細(xì)胞(Clonetics，SanDiego，CA)按50,000個(gè)/孔接種在24孔組織培養(yǎng)皿中。所用培養(yǎng)基是Clonetic’s SmBM-2，其中補(bǔ)充有hEGF、胰島素、hFGF和胎牛血清。使細(xì)胞在37℃和5％ CO2下生長(zhǎng)兩天，直至見到融合的單細(xì)胞層。
細(xì)胞的激動(dòng)劑刺激從每孔中抽出培養(yǎng)基，重新放置250ml新鮮培養(yǎng)基，其中含有1mMIBMX，這是一種磷酸二酯酶抑制劑(Sigma，St Louis，MO)。將細(xì)胞在37℃下保溫15分鐘，然后加入適當(dāng)濃度的250ml激動(dòng)劑。然后將細(xì)胞保溫另外10分鐘。抽出培養(yǎng)基，向細(xì)胞加入500ml冷的70％EtOH，在約5分鐘后移到空的96孔深孔平皿中。然后重復(fù)該步驟。然后使深孔平皿在speed-vac中自旋，直至所有EtOH揮發(fā)，留下干燥的顆粒狀物。利用來(lái)自Stragagene(La Jolla，CA)的cAMP ELISA試劑盒量化cAMP(pmol/孔)。利用4-參數(shù)方程生成EC50曲線
y＝(a-d)/(1+(x/c)b)+d，其中y＝cpm，a＝總結(jié)合，c＝IC50，x＝[化合物]，d＝NS結(jié)合，b＝斜率固定NS結(jié)合，允許所有其他參數(shù)浮動(dòng)。
實(shí)施例2β2-腎上腺素能受體體外放射性配體結(jié)合測(cè)定如下可以試驗(yàn)本發(fā)明化合物的β1/2-腎上腺素能受體結(jié)合活性。在96孔平皿中，將含有β1或β2腎上腺素能受體的SF9細(xì)胞膜(NEN，Boston，MA)與0.07nM125I-碘代氰基吲哚洛爾(NEN，Boston，MA)保溫在結(jié)合緩沖液中，其中含有75mM Tris-HCl(pH7.4)、12.5mM MgCl2與2mM EDTA和不同濃度的供試化合物或單獨(dú)的緩沖液(對(duì)照)。在搖動(dòng)下，將平皿在室溫下保溫1小時(shí)。經(jīng)過預(yù)先用0.3％聚環(huán)乙亞胺封閉的96孔GF/B過濾平皿(Packard，Meriden，CT)過濾，收獲與放射性配體結(jié)合的受體，利用細(xì)胞收獲器，用200μl PBS洗滌兩次。利用細(xì)胞收獲器，將濾器用200μl PBS洗滌兩次，然后再次懸浮在40μl閃爍雞尾酒試劑中。利用閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)量與濾器結(jié)合的放射性，利用上述標(biāo)準(zhǔn)4-參數(shù)方程生成IC50曲線。
出于清楚和理解的目的，借助例證和實(shí)施例已經(jīng)對(duì)上述發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)描述。對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)顯而易見的是，可以在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)實(shí)施改變和修飾。因此，可以理解的是，上述說(shuō)明是例證性的而不是限制性的。發(fā)明的范圍因此不應(yīng)當(dāng)由上述說(shuō)明來(lái)決定，而應(yīng)當(dāng)由下列所附權(quán)利要求以及這些權(quán)利要求授權(quán)的等價(jià)方式的完整范圍來(lái)決定。
權(quán)利要求
1.下式化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中Ar1選自由4-氨基-3，5-二氯苯基和3-甲酰氨基-4-羥基苯基組成的組；*C和**C上的立體化學(xué)是(RS)和(RS)；(R)和(R)；(S)和(S)；(R)和(S)；或(S)和(R)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(RS)，**C上的立體化學(xué)是(RS)。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(S)。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(S)。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是4-氨基-3，5-二氯苯基，*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是3-甲酰氨基-4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(RS)，**C上的立體化學(xué)是(RS)。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是3-甲酰氨基-4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是3-甲酰氨基-4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(S)。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是3-甲酰氨基-4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(R)，**C上的立體化學(xué)是(S)。
11.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar1是3-甲酰氨基-4-羥基苯基，*C上的立體化學(xué)是(S)，**C上的立體化學(xué)是(R)。
12.下式化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中*C和**C上的立體化學(xué)是RS、R或S。
13.下式化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中*C和**C上的立體化學(xué)是RS、R或S。
14.藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體和治療學(xué)上有效量的任意權(quán)利要求1-13化合物。
15.權(quán)利要求14的藥物組合物，其中該藥物組合物進(jìn)一步包含治療學(xué)上有效量的固醇類抗炎藥。
16.治療哺乳動(dòng)物由β2腎上腺素能受體介導(dǎo)的疾病的方法，該方法包含對(duì)該哺乳動(dòng)物給以藥物組合物，該組合物包含藥學(xué)上可接受的載體和治療學(xué)上有效量的任意權(quán)利要求1-13化合物。
17.權(quán)利要求16的方法，其中該方法進(jìn)一步包含給以治療學(xué)上有效量的固醇類抗炎藥。
18.權(quán)利要求16的方法，其中該疾病是呼吸疾病。
19.權(quán)利要求18的方法，其中該疾病是哮喘或慢性阻塞性肺疾病。
全文摘要
公開了多結(jié)合性化合物，它們是β2腎上腺素能受體激動(dòng)劑，可用于治療和預(yù)防呼吸疾病，例如哮喘、支氣管炎。它們還可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)損傷和早產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P3/10GK1402702SQ00816436
公開日2003年3月12日 申請(qǐng)日期2000年12月6日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月8日
發(fā)明者E·J·摩蘭, J·H·格里芬, 崔錫基 申請(qǐng)人:施萬(wàn)制藥