專利名稱：黃曲霉毒素b的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種解毒酶，特別是黃曲霉毒素B1的解毒酶提取工藝。
現(xiàn)有技術(shù)中去除或轉(zhuǎn)化黃曲霉毒素B1的方法有(1)化學(xué)法要使用次氯酸鈉、臭氧、過氧化氫、氫氧化鈉、甲醛、銨鹽以及氯氣等，主要缺點(diǎn)是在破壞黃曲霉毒素B1的同時(shí)也破壞了食品中的許多營養(yǎng)成份，如維生素、蛋白質(zhì)、生物堿，并且常常會(huì)影響食品或調(diào)味品的色、香、味(尤其是使用氯氣或銨鹽時(shí))，有些方法還不能用于水相處理；(2)物理-化學(xué)法這類方法是以r-射線、紫外線照射與化學(xué)方法結(jié)合使用，其缺點(diǎn)與化學(xué)法類似；(3)物理吸附法這類方法是使用硅藻土、超濾等技術(shù)除去液態(tài)食品中的黃曲霉毒素B1或M1，此法的缺點(diǎn)是工藝復(fù)雜，難以工業(yè)化生產(chǎn)，效果不十分理想，且在使用的同時(shí)，不可避免地引起食品營養(yǎng)成份的損失；(4)體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化法，此方法是用某些化學(xué)試劑如2-叔丁基對(duì)甲酚、Oltipraz等，喂食動(dòng)物誘導(dǎo)體內(nèi)肝臟谷胱肽轉(zhuǎn)移酶增多，以增加對(duì)肝內(nèi)的黃曲霉毒素B1的轉(zhuǎn)化，其缺點(diǎn)是必須依賴體內(nèi)細(xì)胞色素P450的存在；對(duì)黃曲霉毒素B1的解毒是在黃曲霉毒素被活化成有毒性后才進(jìn)行解毒；誘導(dǎo)劑本身就有毒性；此法不能用于食品加工過程。
本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種專一、高效、無毒并可直接對(duì)黃曲霉毒素B1解毒的解毒酶提取工藝。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種黃曲霉毒素B1解毒酶的提取工藝，其特征在于用假密環(huán)菌(Armillariella Fabescens)，在25-30℃培養(yǎng)5-70天，取出菌體，以菌體重∶緩沖液(PH6)＝1∶1(濕重∶體積)，加入PH6的緩沖液，以機(jī)械研磨或超聲，或高壓破碎方法將菌體破壞，使其胞質(zhì)液流出，而后，離心取上清液，用30-85％的硫酸銨沉淀后，用緩沖液或蒸餾水透析4-24小時(shí)脫鹽，即得黃曲霉毒素B1的解毒酶。
下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述取50g假密環(huán)菌菌種接種于綜合馬鈴薯培養(yǎng)基中，在28℃下培養(yǎng)至生長旺盛期約28天，過濾取出菌體，稱重約1000g，與1000mlPH6的磷酸緩沖液混合均勻，以機(jī)械研磨，或高壓，或超聲波破碎菌體，使胞質(zhì)液流出，經(jīng)離心取出上清液約1000ml，用50％的硫酸銨沉淀，用蒸餾水透析10小時(shí)后即得黃曲霉毒素B1的解毒酶。
本發(fā)明工藝提取的解毒酶，是一種生物酶，對(duì)黃曲霉毒素B1有專一性，高效性，能直接對(duì)其解毒，由于本解毒酶來源于食用真菌，故無毒，可安全食用，另由于食用真菌來源豐富，可擴(kuò)大為工業(yè)化生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1.一種黃曲霉毒素B1解毒酶的提取工藝，其特征在于用假密環(huán)菌(Armillariella tabescens)，在25-30℃培養(yǎng)5-70天，取出菌體，以菌體重∶緩沖液(PH6)＝1∶1(濕重∶體積)，加入PH6的緩沖液，以機(jī)械研磨或超聲或高壓破碎方法將菌體破壞，使其胞質(zhì)液流出，而后，離心取上清液，用30-85％的硫酸銨沉淀后，用緩沖液或蒸餾水透析4-24小時(shí)脫鹽，即得黃曲霉毒素B1的解毒酶。
全文摘要
本發(fā)明提供一種黃曲霉毒素B
文檔編號(hào)C12N9/50GK1240828SQ98113268
公開日2000年1月12日 申請(qǐng)日期1998年6月30日 優(yōu)先權(quán)日1998年6月30日
發(fā)明者劉大嶺, 姚冬生, 梁仁 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院