專利名稱：海產(chǎn)品提取液的抗氧化脫腥方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種海產(chǎn)品提取液的抗氧化脫腥方法。
海產(chǎn)品提取物作為保健食品的原料正越來越受到人們的重視，但由于海產(chǎn)品提取物均帶有特殊的腥臭，使得用其所制造的食品口感差，不易為消費(fèi)者所接受。日本特許公報昭63-39224公開了一種多步混合脫腥方法，其主要工藝過程是酶解→酵母發(fā)酵→蒸餾去腥→加調(diào)味劑掩蓋，這是目前較為先進(jìn)有效的方法，但該方法只適用于對海藻類的脫腥，而對動物類海產(chǎn)品如鮑魚、海馬、海龍、鰻魚等的脫腥效果較差。因?yàn)閯游镱惡．a(chǎn)品的腥臭主要是由于其所含的不飽和酯肪酸氧化成過氧化物而造成的，若采用上述多步混合法脫腥，往往會加速海產(chǎn)品中對人體有益的不飽和脂肪酸，如廿碳五烯酸(EPA)、廿二碳六烯酸(DHA)、亞麻酸(GLA)等，氧化成對人體有害的過氧化物，同時也加重腥臭味的產(chǎn)生。所以，如何有效地去除海產(chǎn)品特別是動物類海產(chǎn)品提取物的腥臭并防止其中不飽和脂肪酸的進(jìn)一步氧化，是目前亟待解決的問題。
本發(fā)明的目的是提供一種海產(chǎn)品提取液的抗氧化脫腥方法，該方法不論對植物類還是對動物類海產(chǎn)品均具有理想的脫腥效果，而且所用抗氧化脫腥劑無毒無害，同時具有抑菌保鮮作用。
本發(fā)明方法是采用黃酮類化合物5，7，4’-三羥基-3’，5’-二甲氧基黃酮(以下簡稱為黃酮A)及5，4’-二羥基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黃酮(以下簡稱為黃酮B)作為抗氧化脫腥劑，該兩種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下 5，7，4’-三羥基-3’，5’-二甲氧基黃酮 5，4’-二羥基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黃酮本發(fā)明方法的具體工藝步驟是在按常規(guī)方法制得的海產(chǎn)品提取液(一般每ml相當(dāng)于鮮料0.2g)中加入抗氧化脫腥劑黃酮A或黃酮B或者黃酮A和黃酮B，使海產(chǎn)品提取液中抗氧化脫腥劑的濃度為0.01～10mg/ml，在室溫下放置1～6小時，經(jīng)去沉淀后得到無腥味的海產(chǎn)品提取液，可直接用于制造各種營養(yǎng)保健食品。
黃酮A或黃酮B單獨(dú)使用時，其用量一般為每毫升海產(chǎn)品提取液0.01～10mg。黃酮A和黃酮B同時使用具有協(xié)同增效作用，所以其用量可減少，一般為每毫升海產(chǎn)品提取液用黃酮A＋黃酮B＝0.01～1mg。黃酮A和黃酮B兩者可以任意比例配合使用。
本發(fā)明方法所用的抗氧化脫腥劑黃酮A及黃酮B可以從水稻幼穗分化期至抽穗揚(yáng)花期的莖葉中提取得到。具體方法是取該生長期的水稻新鮮莖葉，切碎勻漿，按重量每公斤加入0.5～6升70～95％的乙醇，攪拌，浸取3～10天，過濾除渣，將濾液濃縮(一般采用減壓濃縮，至每公斤水稻莖葉50ml)；所得濃縮液即為水稻莖葉提取液(含黃酮A＋黃酮B＝25～50mg/ml)；還可以將第一次過濾的濾渣再按上述步驟浸取一次，將所得濾液與第一次濾液合并一起濃縮；濃縮液用石油醚∶乙醚＝(0.3∶0.7)～(0.7∶0.3)(體積比)萃取，去萃取液，余液(水相部分)再經(jīng)乙酸乙酯萃取，去水相部分，取乙酸乙酯相部分過60～200目硅膠柱；然后分別用丙酮∶石油醚＝(15∶85)～(70∶30)(體積比)洗脫得A洗脫液和用丙酮∶石油醚＝(75∶25)～(90∶10)(體積比)洗脫得B洗脫液，將A、B兩洗脫液分別經(jīng)氯仿∶甲醇＝(9∶1)～(5∶5)(體積比)重結(jié)晶即得黃酮A和黃酮B，再經(jīng)60℃干燥得純品。
按照本發(fā)明的方法，可以直接將上述工藝過程中間得到的含有抗氧化脫腥劑黃酮A和黃酮B的水稻莖葉提取液按0.1～2％(體積比)的比例加入到海產(chǎn)品提取液中，其抗氧化脫腥效果與同時加入黃酮A和黃酮B相同。
海產(chǎn)品的腥臭主要是由于其所含不飽和酯肪酸氧化而產(chǎn)生的。不飽和脂肪酸的自動氧化是一種自由基反應(yīng)，氧分子具有二價自由基結(jié)構(gòu)(·O-O·)，能奪取不飽和脂肪酸烯鍵α位的氫，引發(fā)由自基連鎖反應(yīng)，即不飽和脂肪酸的自動氧化。由于本發(fā)明選用黃酮類化合物黃酮A和黃酮B作抗氧化脫腥劑，這兩種化合物所提供的活潑的羥基氫能夠很好地阻止或延緩不飽和脂肪酸的自動氧化，同時，能使已被氧化產(chǎn)生的過氧化物(產(chǎn)生腥味的物質(zhì))還原而除去腥味，所以具有較好的抗氧化脫腥效果，不僅能去除海產(chǎn)品提取液的腥臭，而且能防止其中的不飽和脂肪酸繼續(xù)氧化而再產(chǎn)生腥味。因此，本發(fā)明方法不論是對植物類還是動物類海產(chǎn)品均具有理想的抗氧化脫腥效果。
本發(fā)明所用的抗氧化脫腥劑黃酮A和黃酮B經(jīng)NIH系小鼠腹腔灌胃試驗(yàn)，最大耐受量大于7g/kg，證明其屬于實(shí)際無毒級。
黃酮A和黃酮B除了具有抗氧化脫腥作用外，還具有抑菌保鮮作用，以及抗衰老及治療冠心病、腦動脈硬化等疾病的作用，所以經(jīng)本發(fā)明方法處理的海產(chǎn)品提取液既無需加入掩蓋腥味的調(diào)味劑，也無需加入防腐劑，而且具有保健作用，可制成純天然的營養(yǎng)保健食品。
本發(fā)明方法中抗氧化脫腥劑的用量可根據(jù)海產(chǎn)品提取液的濃度及其腥味的輕重進(jìn)行調(diào)節(jié)。稍過量的抗氧化脫腥劑不僅不會影響海產(chǎn)品提取液的質(zhì)量，而且可起抗氧化及抑菌保鮮作用。
以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1斑海馬(干品)50g，磨成過200目篩的干粉，加入0.5g木瓜蛋白酶和300ml去離子水，70℃水浴3小時，離心去沉淀，上清液加入15ml水稻莖葉提取液(黃酮A＋黃酮B含量10mg/ml，以下同)，室溫放置2小時，離心去沉淀得到無腥味上清液，可直接制成口服液或其它營養(yǎng)保健食品。
實(shí)施例2鮮鰻魚肉20g，勻漿，加入500ml去離子水，加pH7～9的磷酸鹽緩沖液至終濃度為0.01M，加6g彈性蛋白酶，70℃水浴4小時，離心去沉淀，上清液加入水稻莖葉提取液2ml，室溫放置3小時，離心去沉淀，得無腥味鰻魚提取液。
實(shí)施例3海水螺旋藻(干品)20g，加入木瓜蛋白酶和纖維酶各0.5g，以及100ml去離子水，加入pH4.5的磷酸鹽緩沖液至終濃度為0.01M，40～60℃水浴2小時，離心去沉淀，取上清液加入水稻莖葉提取液0.5ml，其余步驟及條件與實(shí)施例1相同。
實(shí)施例4尖海龍(干品)50g磨成粉狀，加入250ml去離子水及0.5g纖維酶，40～70℃水浴3小時，離心去沉淀，上清液加入水稻莖葉提取液5ml，放置1小時，離心去沉淀，得無腥味海龍?zhí)崛∫骸?br> 實(shí)施例5海帶(干品)100g，加去離子水1000ml浸泡2天，其中換水三次，每次重新加入去離子水1000ml，以去掉海帶中過多的鉛，防止制成的提取液鉛含量超標(biāo)。取出海帶，勻漿，加去離子水2000ml，90℃熱提20分鐘，離心去沉淀，上清液加入水稻提取液10ml，放置2小時，離心去沉淀，得無腥味海帶提取液。
實(shí)施例6新鮮鮑魚(九孔鮑)肉50g，勻漿，加200ml去離子水和5g蛋白酶，加入pH4.0的磷酸鹽緩沖液至終濃度為0.05M，70℃水浴3小時，離心去沉淀，上清液加入水稻莖葉提取液20ml，室溫放置6小時，離心去沉淀，得無腥味鮑魚提取液。
實(shí)施例7按實(shí)施例3方法制得的海水螺旋藻提取液，加入濃度為50mg/ml的黃酮A水溶液，至黃酮A終濃度為5mg/ml，室溫放置2小時，過濾得無腥味海水螺旋藻提取液。
實(shí)施例8按實(shí)施例6制得的鮑魚提取液，加入黃酮A水浴液至黃酮A終濃度為10mg/ml，室溫放置3小時，過濾得無腥味鮑魚提取液。
實(shí)施例9鮮海月，去殼取肉30g，勻漿，加200ml去離子水和2g蛋白酶，加入pH6.5的磷酸鹽緩沖液至終濃度為0.01M，45～70℃水浴2小時，離心去沉淀，上清液加入濃度為50mg/ml的黃酮B水溶液，至黃酮B終濃度為8mg/ml，室溫放置4小時，過濾得無腥味的海月提取液。
實(shí)施例10按實(shí)施例5制得的海帶提取液，加入黃酮B水溶液至黃酮B終濃度為0.5mg/ml，室溫放置3小時，過濾得無腥味海帶提取液。
實(shí)施例11按照實(shí)施例2，將其中加入水稻莖葉提取液2ml改為加入黃酮A和黃酮B混合水溶液(含黃酮A和黃酮B各為25mg/ml，以下同)，至黃酮A和黃酮B終濃度各為0.4mg/ml，其它條件與實(shí)施例2相同。
實(shí)施例12紫菜(干品)50g，加水浸泡后取出勻漿，加200ml去離子水，50℃水浴3小時，過濾去濾渣，取濾液加入黃酮A和黃酮B混合水溶液，至黃酮A和黃酮B終濃度各為0.05mg/ml，室溫放置1小時，過濾得無腥味的紫菜提取液。
權(quán)利要求
1.一種海產(chǎn)品提取液的抗氧化脫腥方法，其特征是以黃酮類化合物5，7，4’-三羥基-3’，5-二甲氧基黃酮及5，4’-二羥基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黃酮作為抗氧化脫腥劑，在海產(chǎn)品提取液中加入該兩種抗氧化脫腥劑或者只加入其中一種，使海產(chǎn)品提取液中抗氧化脫腥劑的濃度為0.01～10mg/ml，室溫放置1～6小時，經(jīng)去沉淀后得到無腥味的海產(chǎn)品提取液。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所用的抗氧化脫腥劑是從水稻莖葉中提取得到的；其提取方法是將幼穗分化期至抽穗揚(yáng)花期的水稻莖葉切碎勻漿，按重量每公斤加入0.5～6升70～95％的乙醇，攪拌，浸取3～10天，過濾除渣，將濾液濃縮，所得濃縮液即為水稻莖葉提取液，將該濃縮液用石油醚∶乙醚＝(0.3∶0.7)～(0.7∶0.3)(體積比)萃取，去萃取液，余液再經(jīng)乙酸乙酯萃取，去水相部分，取乙酸乙酯相部分過60～200目硅膠柱，然后分別用丙酮∶石油醚＝(15∶85)～(70∶30)(體積比)洗脫得A洗脫液和用丙酮∶石油醚＝(75∶25)～(90∶10)(體積比)洗脫得B洗脫液，將A、B兩洗脫液分別經(jīng)氯仿∶甲醇＝(9∶1)～(5∶5)(體積比)重結(jié)晶得5，7，4’-三羥基-3’，5’-二甲氧基黃酮和5，4’-二羥基-3’，5’-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黃酮，再經(jīng)干燥可得純品。
3.按照權(quán)利要求2所述的方法，其特征是直接將含有抗氧化脫腥劑的水稻莖葉提取液按體積比為0.1～2％的比例加入到海產(chǎn)品提取液中。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種海產(chǎn)品提取液的抗氧化脫腥方法。該方法以黃酮類化合物5，7，4′-三羥基-3′，5′-二甲氧基黃酮及5，4′-二羥基-3′，5′-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黃酮作抗氧化脫腥劑，只需將其加入到海產(chǎn)品提取液中，即能起到理想的抗氧化脫腥效果，不論對植物類還是對動物類海產(chǎn)品均具有同樣效果，而且具有抑菌保鮮作用，無需再加入防腐劑。本發(fā)明工藝簡單，效果好，所用的抗氧化脫腥劑可從水稻莖葉中提取得到。
文檔編號A23L1/325GK1140563SQ9510728
公開日1997年1月22日 申請日期1995年7月19日 優(yōu)先權(quán)日1995年7月19日
發(fā)明者許東暉, 許實(shí)波 申請人:中山大學(xué)