專(zhuān)利名稱(chēng)：在發(fā)酵過(guò)程中由紅曲霉屬直接生產(chǎn)結(jié)晶色素的方法
《食品工藝》第49頁(yè)(1986年7月)指出“消費(fèi)者是首先以顏色來(lái)判斷食品的質(zhì)量的?！北M管應(yīng)批評(píng)消費(fèi)者這種更優(yōu)先考慮直觀感覺(jué)而不是考慮味覺(jué)及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的態(tài)度，但是仍必須積極面對(duì)消費(fèi)市場(chǎng)的這一看法。
雖然天然產(chǎn)生的色素被首先用作食品的著色劑，但是，化學(xué)的發(fā)展作為一種懲戒，導(dǎo)致很多合成染料(特別是苯胺類(lèi)染料)排擠了天然產(chǎn)生的色素，而用作為食品添加劑。作為一類(lèi)合成著色劑，它具有很多優(yōu)點(diǎn)，例如在顏色的均勻性和再現(xiàn)性，顏色穩(wěn)定性，無(wú)味性，和對(duì)氧化和/或熱和/或光的穩(wěn)定性等方面，都比天然產(chǎn)生的色素優(yōu)越;它來(lái)源廣泛，相對(duì)地不太受作物收成的影響。其結(jié)果是，合成著色劑的普及最終被理解了。
然而，隨著消費(fèi)者對(duì)食品添加劑更多的了解，及對(duì)某些有代表性樣品的檢驗(yàn)水平的提高，因而關(guān)心起這些合成著色劑的安全性了。最近幾年，已經(jīng)看到，過(guò)去用作食品色素的某些材料，全都不僅受到譴責(zé)，而且受到懷疑，甚至受到廢除或者至少限制其使用。例如FD&C紅2號(hào)及FD&C紫1號(hào)，在美國(guó)及其它國(guó)家已被禁用。由于從FD&C黃5號(hào)單獨(dú)誘發(fā)多種過(guò)敏性反應(yīng)，因此最近美國(guó)命令凡是用該染料染色的食品，必須在其產(chǎn)品標(biāo)簽上作出標(biāo)記。其結(jié)果是，輿論開(kāi)始再一次移向了作為食品添加劑的天然產(chǎn)生的色素。
由紅曲霉屬的真菌所產(chǎn)生的色素(一般由東方的大米來(lái)培植)是橙黃色的，相對(duì)地不溶于水，但是很容易和含有氨基的化合物進(jìn)行反應(yīng)，而生成水溶性的著色劑。紅曲霉屬色素作為一般的食用色素及酒和腐乳的色素，在東方已經(jīng)使用幾百年了。該色素也可作成水溶性的或者油溶性的，它在PH2～10的范圍內(nèi)是穩(wěn)定的，并且對(duì)熱穩(wěn)定，而且可用高壓滅菌器來(lái)滅菌。在東方各國(guó)，這種類(lèi)型的微生物一般由大米粒來(lái)培養(yǎng)，而且一旦該大米粒被紅色菌絲體所滲透，則將該大米細(xì)磨成粉末，而用作為食品著色劑。該橙黃色色素是紅曲紅素(monascorubin)和紅色點(diǎn)狀菌落(rubropunctatin)的混合物，其結(jié)構(gòu)由Fielding等人在Tetrahedron Letter NO.5，24～7(1960)和Kumasaki等人在Tetrahedron，18，1171(1962)中作了說(shuō)明。二者的結(jié)構(gòu)不同，前者具有一個(gè)7碳酮基，而后者具有一個(gè)5碳酮基。為了本申請(qǐng)的目的，“前體物色素”指的是含有紅曲紅素和紅色點(diǎn)狀菌落的水不溶橙黃色色素的任何混合物，混合物是通過(guò)合適的紅曲霉屬的發(fā)酵來(lái)制備的。
前體物色素的工業(yè)化生產(chǎn)，需要適合的發(fā)酵方法的改進(jìn)。近年來(lái)，已有很多報(bào)導(dǎo)涉及這一主題。Shepherd等人在美國(guó)專(zhuān)利U.S.4，145，254中通過(guò)使用兩相的方法，作出了重要改進(jìn)，其中該微生物首先在PH4～7的生長(zhǎng)促進(jìn)介質(zhì)中進(jìn)行培養(yǎng)，然后將其轉(zhuǎn)移到其PH值為2～4的第2種介質(zhì)中，以刺激前體物色素的生成。低的PH值并不影響前體物色素的生成，但是都能干擾在該介質(zhì)中的隨后與蛋白質(zhì)的氨基和/或銨離子的反應(yīng)。其結(jié)果是，排除了作為染料的橙黃色前體物色素的生成。另一例子是U.S.4，442，209，其權(quán)利要求是，通過(guò)在含有麥芽糖醇的介質(zhì)中培養(yǎng)紅曲霉屬，而增加前體物色素的生成。
正如Shepherd等人所說(shuō)的“希望工業(yè)上得到的色素具有完全可以測(cè)定的結(jié)構(gòu)(該色素可進(jìn)行嚴(yán)格的寬容度檢驗(yàn)，并顯示完美的可重現(xiàn)性)，首先應(yīng)該研究的問(wèn)題就是高純橙黃色色素的高產(chǎn)率生成?！逼窠榻B的所有方法中，在高純度前體物色素的分離和離析方面都存在著嚴(yán)重的缺點(diǎn)。特別是在現(xiàn)有制法中，所生成的前體物色素都是以無(wú)定形、塊狀物的形式存在，而據(jù)信，這是某些類(lèi)型色素-類(lèi)脂結(jié)合的結(jié)果。該固體物質(zhì)不能從菌絲體中分離出來(lái)，因?yàn)樗环峙溥M(jìn)入另一個(gè)相中了。前體物色素與真菌產(chǎn)生的類(lèi)脂強(qiáng)烈結(jié)合，造成了色素萃取和純化的極大困難、麻煩及費(fèi)用大。在一種可能是典型的方法中，在菌絲體分離之后，用有機(jī)溶劑將色素產(chǎn)生介質(zhì)進(jìn)行萃取，或是用有機(jī)溶劑來(lái)萃取含有均勻菌絲體的生成介質(zhì)，然后將溶劑蒸發(fā)以得到前體物色素的粗產(chǎn)品，接著將該粗產(chǎn)品進(jìn)一步純化，例如通過(guò)層析法和結(jié)晶法來(lái)進(jìn)行。就純前體物色素的產(chǎn)率及及生產(chǎn)費(fèi)用而言，這樣萃取-層析-結(jié)晶的方法是沒(méi)有效果的，因?yàn)橐褂萌軇﹣?lái)萃取色素，以及需要昂貴的能源從萃取液中蒸去溶劑，而且這不易于被用作連續(xù)的發(fā)酵方法，以連續(xù)地生成前體物色素。
雖然在由紅曲霉屬生產(chǎn)前體物色素中，還有其它需要注意的方面，例如得到適宜的突變體或得到另外的遺傳改變的微生物等，但是本發(fā)明只瞄準(zhǔn)前體物色素的生產(chǎn)，取消費(fèi)用大的萃取方法。具體地說(shuō)，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，如在紅曲霉屬生產(chǎn)色素的發(fā)酵過(guò)程中，其介質(zhì)含有某種外來(lái)的物質(zhì)，則該前體物色素以結(jié)晶狀來(lái)形成，其自身較純，并且不與真菌產(chǎn)生的類(lèi)脂相結(jié)合。同樣重要的是，已經(jīng)觀察到這樣形成的前體物色素晶體能容易地分配進(jìn)入到一種油相，從而使其能很容易地從菌絲體和發(fā)酵介質(zhì)中分離出來(lái)。本發(fā)明的理論基礎(chǔ)尚不確定，但可能是某些物質(zhì)起著生物調(diào)節(jié)劑的作用，該調(diào)節(jié)劑阻塞了類(lèi)脂的合成，但不影響前體物色素的生成。不管其理論基礎(chǔ)如何，這些生物化學(xué)調(diào)節(jié)劑的附加效果在于該前體物色素由細(xì)胞中被排泄出來(lái)，并很快地形成可以被收集的大的嫩橙黃色結(jié)晶，該結(jié)晶本身是相當(dāng)純的，并且通常在使用之前不需進(jìn)一步純化?；谶@種發(fā)現(xiàn)的制法，用葡萄糖作為碳的來(lái)源，來(lái)有效地生產(chǎn)前體物色素，生成效率為7%，并且可以方便地用作連續(xù)發(fā)酵。正如將要認(rèn)識(shí)到的，本方法與產(chǎn)生前體色素的特殊微生物和微生物賴(lài)以生長(zhǎng)的介質(zhì)皆無(wú)關(guān)系。
本發(fā)明的目的是提高由紅曲霉屬在發(fā)酵條件下生成的水不溶橙黃色色素離析的易行性及效率。一種具體實(shí)施包括在含有結(jié)晶色素誘導(dǎo)物(其數(shù)量足以有效地誘導(dǎo)結(jié)晶色素的生成)的色素產(chǎn)生培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)紅曲霉屬。在特殊的實(shí)施例中，該誘導(dǎo)物是一種液態(tài)植物油。在另一具體的實(shí)施方案中，該結(jié)晶誘導(dǎo)物是棕櫚酸的聚(氧乙烯)山梨糖醇酐酯。在另外的更為具體實(shí)施方案中，該誘導(dǎo)物是棕櫚酸的聚(氧乙烯)山梨糖醇酐酯，其存在于產(chǎn)生色素的培養(yǎng)介質(zhì)中的量為大約0.1%至大約1%重量，其它實(shí)施方案通過(guò)下面的敘述將會(huì)明白。
構(gòu)成本發(fā)明基礎(chǔ)的觀察結(jié)論是，當(dāng)紅曲霉屬在生成色素的培養(yǎng)介質(zhì)中生長(zhǎng)時(shí)，以及當(dāng)該介質(zhì)中含有某種添加劑時(shí)，則色素可以被誘導(dǎo)而生成結(jié)晶。所生成的結(jié)晶色素，不與菌絲體相結(jié)合，這種情況與本發(fā)明的不含有結(jié)晶誘導(dǎo)物的情況相反，因此色素可以相當(dāng)簡(jiǎn)單地收集起來(lái)而予以分離，不必對(duì)均勻的發(fā)酵培養(yǎng)液進(jìn)行萃取。其結(jié)果是，基于這一觀察結(jié)果的本制法，使得以明顯低于過(guò)去成本而更有效地分離色素變得可能了，另外，在進(jìn)行色素分離時(shí)，該方法不殺死紅曲霉屬真菌細(xì)胞，從而提供了重復(fù)利用細(xì)胞的機(jī)會(huì)，也提供了一種連續(xù)生產(chǎn)色素的方法。
需要強(qiáng)調(diào)的是，本發(fā)明的關(guān)鍵之處在于由生成了前體物色素的發(fā)酵培養(yǎng)液直接生產(chǎn)結(jié)晶的前體物色素。本發(fā)明的添加劑并不誘導(dǎo)色素的生成，而是在發(fā)酵過(guò)程中當(dāng)它生成時(shí)即誘導(dǎo)之，使其結(jié)晶，因此本發(fā)明的成功與所用的特殊紅曲霉屬無(wú)關(guān)，而且也沒(méi)有任何聯(lián)系，只要紅曲霉屬能生產(chǎn)足夠的色素，使其超過(guò)其在發(fā)酵介質(zhì)中的溶解極限就可以了。特殊的紅曲霉屬對(duì)例如前體物色素的產(chǎn)生數(shù)量和產(chǎn)生速度方面有影響，然而不影響結(jié)晶前體物色素的生成。
長(zhǎng)期以來(lái)人們就知道，紅曲霉屬可用于制備一種代謝物，即水不溶的橙黃色色素(紅曲紅素和紅色點(diǎn)狀菌落的混合物)。在本申請(qǐng)中，此色素稱(chēng)作為前體物色素?？梢允褂萌魏文墚a(chǎn)生其數(shù)量超過(guò)其在生成培養(yǎng)介質(zhì)中溶解極限的前體物色素的紅曲霉屬。為了所有實(shí)用目的，這種需要就是在生成色素的條件下，每1升應(yīng)該至少生成30毫克前體物色素。適用的紅曲霉屬可以從各種來(lái)源中方便地得到，例如，Lin在〔J.Ferment.Technol.，51，407(1973)〕中已經(jīng)描述了由高粱白蘭地(Koaliang brandy)的粬(沉積物)得到的多種離析物。相同的離析物可以很容易地從用紅曲霉屬霉菌著色的東方發(fā)酵食品如紅米、紅米酒、紅豆干酪等中得到。Lin還報(bào)導(dǎo)由幾種來(lái)源所得到的以類(lèi)型培養(yǎng)液公開(kāi)提供的物種。在他們的分類(lèi)研究中，Hawksworth和pitt在〔Aust.J.Bot.，31，51(1983)〕已經(jīng)鑒定了多種離析物，它們之中的許多種，都可由保藏處得到，或者易于由東方發(fā)發(fā)酵食品中離析出來(lái)。
上述中需要指出的是，適宜的紅曲霉屬菌株廣泛存在，也即它們中的多數(shù)可以由保藏處得到，而且更能由東方的發(fā)酵食品中常規(guī)地離析出來(lái)。因此，為適應(yīng)更合適地生產(chǎn)前體物色素的要求，在本發(fā)明的實(shí)施中，所用的紅曲霉屬，只是從任何人都容易得到的大量菌株中選擇。盡管如M.purpureus，M.major，M.rubinginosus及M.Anka一類(lèi)品種已列作為前體物色素的生產(chǎn)者，但是Hawksworth和pitt的分類(lèi)研究工作認(rèn)為，這些菌還需進(jìn)行再分類(lèi)。
如Shepherd等人在U.S.4，145，254中所指出的，在完全抑制第二種代謝物(例如前體物色素)的條件下紅曲霉屬可以生長(zhǎng)。因此，本發(fā)明的目的在于必須使紅曲霉屬在生產(chǎn)色素的培養(yǎng)介質(zhì)中生長(zhǎng)。在本發(fā)明中，在色素生長(zhǎng)過(guò)程中，產(chǎn)生色素的培養(yǎng)介質(zhì)的PH需要在約2至約4之間。一種通用色素生成培養(yǎng)介質(zhì)可以含有KH2PO4(1～100mM)，MgSO4(0.1～10mM)，NaCl(1～10mM)，F(xiàn)eSO4(0.01～1.0mM)，以及NH4Cl或KNO3(1～20mM)。幾種碳水化合物可以用作為色素生產(chǎn)中的碳源和能源，其濃度為0.1～40%，而且還可以包括復(fù)雜的碳水化合物，例如淀粉，二糖類(lèi)(例如蔗糖或乳糖)，及單糖類(lèi)(例如葡萄糖或果糖)，而最好的基質(zhì)物是葡萄糖。
紅曲霉屬在適宜的介質(zhì)中生長(zhǎng)以生成前體物色素是眾所周知的，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)的區(qū)別之處在于，生成前體物色素的培養(yǎng)介質(zhì)含有添加劑(結(jié)晶色素誘導(dǎo)劑或誘導(dǎo)物)，該添加物可以有許多類(lèi)型，其中之一是聚(氧乙烯)山梨糖醇酐酯類(lèi)，其成員一般以其商標(biāo)吐溫(Tween)而為人們所知曉。特別是吐溫20，吐溫40和吐溫80已被發(fā)現(xiàn)非常有效，不僅可以誘導(dǎo)結(jié)晶色素的生成，而且還可以誘導(dǎo)大晶體(即至少為10微米長(zhǎng)的晶體)的生成。所有的前述吐溫都是酯的混合物，其脂肪酸組分包括棕櫚酸。吐溫的使用濃度低至約0.01%重量仍然有效，但是推薦其使用濃度至少約為0.1%重量及高達(dá)約1%重量。也可以在培養(yǎng)介質(zhì)中使用較高百分濃度的吐溫，雖然這并不具有任何明顯效果。當(dāng)使用吐溫來(lái)作為結(jié)晶誘導(dǎo)物時(shí)，和本發(fā)明的其他結(jié)晶誘導(dǎo)物一樣，必須對(duì)培養(yǎng)介質(zhì)進(jìn)行良好的混合，以保證所用的結(jié)晶誘導(dǎo)物獲得充分的分散。
另外一類(lèi)的結(jié)晶誘導(dǎo)物是由液態(tài)植物油所組成，特別是玉米油和豆油，也包括下述物料，如棉子油，棕櫚油，花生油，葵花子油，紅花油，芝麻油，油菜子油和橄欖油，雖然這些植物油當(dāng)其加入量是培養(yǎng)介質(zhì)的大約0.1%重量至約10%重量時(shí)是有效的，但是所生成的結(jié)晶常常比較小，即小于10微米長(zhǎng)。由于這些植物油不溶于發(fā)酵介質(zhì)中，因此生成乳濁液，該乳濁液在色素生長(zhǎng)的過(guò)程中，影響了真菌的良好通風(fēng)性。另外，這些油在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)部分地水解而成為游離的脂肪酸，此脂肪酸在油中形成不溶的薄膜。最后，該色素有時(shí)會(huì)溶于液態(tài)植物油中，在收集結(jié)晶時(shí)，一部分色素(有時(shí)是很大一部分)就會(huì)被損失掉。這些特性使得液態(tài)植物油的使用不夠理想，而寧愿使用吐溫來(lái)作為結(jié)晶色素誘導(dǎo)物。
第三類(lèi)結(jié)晶色素誘導(dǎo)物由甘油三酯組成。用甘油三醋酸酯，甘油三花生酸酯，甘油三丁酸酯，甘油三亞油酸酯，甘油三棕櫚酸酯，甘油三硬脂酸酯得到勉強(qiáng)可以的較小結(jié)晶。另外，甘油三油酸酯，甘油三棕櫚酸酯及甘油三巖芹酸酯都可以導(dǎo)致較大結(jié)晶的生成，因此這些材料或它們的任意結(jié)合，被特別推薦用在本發(fā)明的實(shí)施中?？梢灶A(yù)料，如果甘油三酯中的脂肪酸基團(tuán)是棕櫚酸、棕櫚油酸、油酸或巖芹酸的任意結(jié)合，都可能是有效的結(jié)晶色素誘導(dǎo)物。
在結(jié)晶前體物色素的制備中，該紅曲霉屬一般在含有一定量結(jié)晶色素誘導(dǎo)物的生成色素培養(yǎng)介質(zhì)中生長(zhǎng)，該誘導(dǎo)物在一般的生長(zhǎng)條件下可以誘導(dǎo)結(jié)晶色素的生成。這些生長(zhǎng)條件包括溫度為大約20到35℃之間，時(shí)間為約2至30天。如上所述，必須很好地進(jìn)行混合以保證誘導(dǎo)物的分散，也必須使培養(yǎng)介質(zhì)有良好的通風(fēng)以保證真菌的繼續(xù)生長(zhǎng)。然而加入結(jié)晶誘導(dǎo)物時(shí)，除了要進(jìn)行充分混合外，不附加其它要求，可是以前并未認(rèn)識(shí)到把它用于以紅曲霉屬發(fā)酵來(lái)制備前體物色素的方法。經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)陌l(fā)酵過(guò)程之后，該結(jié)晶色素可以用適當(dāng)?shù)姆绞絹?lái)收集。
下述實(shí)施例僅僅說(shuō)明了本發(fā)明，而絕不是以任何方式作為對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。
實(shí)施例Ⅰ紅曲霉屬的離析紅曲霉屬真菌很容易從中國(guó)的發(fā)酵食品中離析出來(lái)，所用的這種特殊微生物由當(dāng)?shù)刂袊?guó)餐館中的福建(Fukien)型紅色醬油樣品中分離而得。為了離析每種菌落，可將此紅色漿液置于固態(tài)西瑞糖和淀粉(5%)介質(zhì)上(該介質(zhì)含有1%的
蛋白胨、1.5%的瓊脂)劃出界線。產(chǎn)生紅色色素的每種真菌菌落再在相同的介質(zhì)中進(jìn)行無(wú)性繁殖，所產(chǎn)生的最紅色的離析物(其顏色是由顏色強(qiáng)度來(lái)判斷)被選擇用于所有下一步的試驗(yàn)中。
紅曲霉屬的典型發(fā)酵方法將上述紅曲霉屬真菌保持在瓊脂斜面上，該瓊脂斜面包含(以每升介質(zhì)計(jì))酵母抽出物(3克)，麥芽浸膏(3克)，細(xì)菌胨(5克)，葡萄糖(10克)及瓊脂(15克)，該斜面用紅曲霉屬真菌進(jìn)行接種，在30℃培育2周。在這些條件下，真菌制備出穩(wěn)定的有性孢子，后者可以在4℃下貯存數(shù)月。
斜面被用來(lái)接種一種約100ml的培養(yǎng)液生長(zhǎng)介質(zhì)，此培養(yǎng)液含有(以每升計(jì))葡萄糖(40克)，酵母抽出物(10克)，KH2PO4(3克)，和0.1～10毫升的吐溫-40。在生長(zhǎng)介質(zhì)中吐溫40可以防止細(xì)胞誘導(dǎo)色素的合成，使真菌以分散的菌絲體而生長(zhǎng)。該培養(yǎng)物于30℃在250ml的燒瓶中培育，以每分鐘200次的轉(zhuǎn)數(shù)搖蕩，時(shí)間為一周。
將上述培養(yǎng)液培養(yǎng)物的接種物的10%，用于接種1～20升的，色素產(chǎn)生介質(zhì)，后者含有(以每升介質(zhì)計(jì))KH2PO4(1克)，MgSO4·7H2O(0.5克)，NaCl(0.5克)，F(xiàn)eSO4·7H2O(0.1克)，NH4Cl(0.5克)，葡萄糖(40克)及適合的結(jié)晶色素誘導(dǎo)物。培養(yǎng)物在28℃在通氣下被進(jìn)行接種，時(shí)間一般為2周。在這些生長(zhǎng)條件下，介質(zhì)的發(fā)酵液使PH值降至約3.0，色素生成。當(dāng)在發(fā)酵介質(zhì)中的葡萄糖消耗凈盡及大量色素已經(jīng)生產(chǎn)出來(lái)之后，則收集此前體物色素結(jié)晶。
實(shí)施例Ⅱ用吐溫生產(chǎn)結(jié)晶色素在如實(shí)施例1中所說(shuō)的由發(fā)酵紅色大米離析出來(lái)的紅曲霉真菌，在發(fā)酵介質(zhì)中長(zhǎng)大，該介質(zhì)含有1%重量的作為結(jié)晶誘導(dǎo)物的各種吐溫。其結(jié)果示于表1。表中標(biāo)出的“大”結(jié)晶表示此結(jié)晶至少為10微米長(zhǎng)，“小”結(jié)晶表示此結(jié)晶長(zhǎng)度在10微米以下。
表1 用不同吐溫化合物誘導(dǎo)結(jié)晶生長(zhǎng)誘導(dǎo)物 結(jié)晶生長(zhǎng)3天 17天吐溫20 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶大吐溫40 結(jié)晶少，結(jié)晶大 結(jié)晶多，結(jié)晶大吐溫60 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶少，結(jié)晶小吐溫80 無(wú)結(jié)晶 結(jié)晶多，結(jié)晶大實(shí)施例Ⅲ液態(tài)植物油作為結(jié)晶誘導(dǎo)物上述的紅曲霉屬，在實(shí)施例1所說(shuō)的生長(zhǎng)介質(zhì)中生長(zhǎng)。該介質(zhì)含有不同用量的液態(tài)植物油。其結(jié)果總結(jié)在表2中。當(dāng)使用1.0%重量的植物油時(shí)，表現(xiàn)出良好的通風(fēng)性，而真菌在裝有培養(yǎng)物的搖蕩燒瓶中生長(zhǎng)。
表2 用不同植物油誘導(dǎo)結(jié)晶生長(zhǎng)油(重量5) 結(jié)晶生長(zhǎng)9天 17天玉米油(1.0%) 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶小玉米油(10.0%) 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶豆油(1.0%) 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶小豆油(10.0%) 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶實(shí)施例Ⅳ甘油三酯作為誘導(dǎo)物按上述兩個(gè)實(shí)施例，使紅曲霉屬生長(zhǎng)，但要將1%重量的各種甘油三酯添加到生長(zhǎng)介質(zhì)中。
表3 用不同的甘油脂肪酸酯誘導(dǎo)結(jié)晶生長(zhǎng)甘油三酯 結(jié)晶生長(zhǎng)4天 12天甘油三醋酸酯 無(wú)結(jié)晶 結(jié)晶少，結(jié)晶小甘油三花生酸酯 無(wú)結(jié)晶 結(jié)晶少，結(jié)晶小甘油三山萮酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三丁酸酯 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶少，結(jié)晶小甘油三癸酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三己酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三辛酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三-11-花生酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油(三)反油酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三芥酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三月桂酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三亞油酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三亞麻酸酯 無(wú)結(jié)晶 結(jié)晶少，結(jié)晶小甘油三肉豆蔻酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶甘油三油酸酯 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶大甘油三棕櫚酸酯 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶少，結(jié)晶小甘油三棕櫚油酸酯 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶大甘油三巖芹酸酯 結(jié)晶少，結(jié)晶小 結(jié)晶多，結(jié)晶大甘油三硬脂酸酯 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶對(duì)比實(shí)驗(yàn) 無(wú)結(jié)晶 無(wú)結(jié)晶
權(quán)利要求
1.一種由紅曲霉屬誘導(dǎo)生成結(jié)晶前體物色素的方法，該紅曲霉屬在色素生成培養(yǎng)介質(zhì)中生成前體物色素，其特征在于該紅曲霉屬在含有結(jié)晶色素誘導(dǎo)物的色素生成培養(yǎng)介質(zhì)中生長(zhǎng)，該誘導(dǎo)物的量應(yīng)能有效地誘導(dǎo)結(jié)晶色素的形成。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步的特征在于該紅曲霉屬是從由M.anka，M.purpureus，M.major及M.rubiginosus所組成的一組中選擇的。
3.按照權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步的特征在于該結(jié)晶色素誘導(dǎo)物是棕櫚酸的聚(氧乙烯)山梨糖醇酐酯。
4.按照權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步的特征在于該結(jié)晶色素誘導(dǎo)物是一種液態(tài)植物油。
5.按照權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步的特征在于該結(jié)晶色素誘導(dǎo)物是棕櫚酸，油酸，棕櫚油酸，及巖芹酸的甘油三酯，或者是它們的任意結(jié)合。
6.按照權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步的特征在于結(jié)晶色素誘導(dǎo)物是至少含有一種酸成分的甘油三酯，該酸成分選自由棕櫚酸，油酸，棕櫚油酸，及巖芹酸所組成的一組。
全文摘要
結(jié)晶前體物色素的生成是在含有紅曲霉屬的色素生成培養(yǎng)介質(zhì)中，通過(guò)添加有效的結(jié)晶色素誘導(dǎo)物而直接制得的。通過(guò)在培養(yǎng)介質(zhì)中直接誘導(dǎo)生成結(jié)晶色素而實(shí)質(zhì)上改進(jìn)了作為紅曲霉屬的第二種代謝物所產(chǎn)生的水不溶橙黃色色素分離的難易程度及成本，棕櫚酸的聚(氧乙烯)山梨糖醇酐酯特別有效，并且可以導(dǎo)致大結(jié)晶的生成。另外一類(lèi)的結(jié)晶色素誘導(dǎo)物是液態(tài)植物油，不過(guò)它一般導(dǎo)致較小的結(jié)晶。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1056711SQ90103080
公開(kāi)日1991年12月4日 申請(qǐng)日期1990年5月21日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月15日
發(fā)明者愛(ài)德華·J·圣馬丁 申請(qǐng)人:美國(guó)環(huán)球油品公司