振蕩型單細(xì)胞分離器的制造方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種振蕩型單細(xì)胞分離器，包括底層振蕩器，上層旋轉(zhuǎn)體和毛細(xì)管，底層振蕩器和上層旋轉(zhuǎn)體組成倒T型，底層振蕩器為圓盤狀，上層旋轉(zhuǎn)體為圓柱體狀，上層旋轉(zhuǎn)體上設(shè)置有至少一圈毛細(xì)管，毛細(xì)管管道為S型彎曲狀，毛細(xì)管為玻璃材質(zhì)，底層振蕩器內(nèi)設(shè)置有振動(dòng)馬達(dá)并與上層旋轉(zhuǎn)體連接，上層旋轉(zhuǎn)體內(nèi)腔的上部設(shè)置有旋轉(zhuǎn)馬達(dá)。至少一圈毛細(xì)管通過上層旋轉(zhuǎn)體外部的固定卡扣順時(shí)針螺旋下降固定在旋轉(zhuǎn)體上。本發(fā)明用以從細(xì)胞懸浮液中分離出單細(xì)胞。通過在上層旋轉(zhuǎn)體上設(shè)置的至少一圈毛細(xì)管，其管道呈S型彎曲狀，在管道內(nèi)的細(xì)胞懸浮液在底層振蕩器的振蕩和上層旋轉(zhuǎn)體的旋轉(zhuǎn)下，將單細(xì)胞從細(xì)胞懸浮液中分離出來。
【專利說明】振蕩型單細(xì)胞分離器

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種振蕩型單細(xì)胞分離器，屬于生物醫(yī)藥儀器設(shè)備。

【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)前基于單細(xì)胞水平的研究越來越受到重視并成為今后研究的一種趨勢。已廣泛應(yīng)用于單細(xì)胞的DNA擴(kuò)增、基因組測序和單細(xì)胞水平亞細(xì)胞給藥系統(tǒng)研究等領(lǐng)域。而單細(xì)胞分離技術(shù)的成功解決是實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平研究的基礎(chǔ)。如何有效的獲得單細(xì)胞以進(jìn)一步研究其生物學(xué)特性問題常常困擾著研究者。
[0003]傳統(tǒng)的方法就是反復(fù)多次有限稀釋法，有限稀釋法即把細(xì)胞稀釋到理論上的I個(gè)細(xì)胞每2~5 μ L，然后用移液器吸取相應(yīng)容積的細(xì)胞懸液進(jìn)行單細(xì)胞分離。但實(shí)際的操作中，該法效率不高，一般在20%左右，大量存在的空白孔和多細(xì)胞孔(細(xì)胞數(shù)大于或等于2)需要研究人員觀察排除，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。該操作方法簡單，但是整個(gè)過程周期長，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且不能保證單個(gè)細(xì)胞的獲取。
[0004]單細(xì)胞顯微操作法，移液器體積偏大在顯微鏡下操作不方便，且穩(wěn)定性差，加之移液尖尖端直徑太大，吸液量大且容易吸進(jìn)顯微鏡視野下不同層面的多個(gè)細(xì)胞。
[0005]目前高端的流式細(xì)胞儀不僅可以實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞的多通道分選(熒光激活細(xì)胞分選，F(xiàn)ACS)，還可以進(jìn)行單細(xì)胞的分離種植分選，為大規(guī)模的單細(xì)胞研究奠定技術(shù)基礎(chǔ)。但是這些分選設(shè)備價(jià)格昂貴，目前還難以普及。由于FACS過程因?yàn)樯婕凹?xì)胞的消化及分選，可能對細(xì)胞的活性及表面標(biāo)記產(chǎn)生影響從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。而且流式細(xì)胞儀獲得的是細(xì)胞群體信息的平均值，并不能反映單細(xì)胞內(nèi)部的生理生化變化。
[0006]以上各種方法，有的方法效率不高或操作不方便或價(jià)格昂貴，容易損傷細(xì)胞，因此，探索一個(gè)操作簡單、快速、高效的單細(xì)胞分離方法十分有意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了解決上述問題，進(jìn)一步簡化技術(shù)模式，方便操作，提高準(zhǔn)確性和效率，減輕工作量，不損傷細(xì)胞，方便檢測單細(xì)胞內(nèi)生理生化反應(yīng)，本發(fā)明提供一種振蕩型單細(xì)胞分離器，能夠快速分離單細(xì)胞，可在生物安全柜中無菌操作、分離器各部件可拆卸、滅菌后使用、操作簡單、且對細(xì)胞本身無損傷，還有利于細(xì)胞的后續(xù)培養(yǎng)及檢測。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案是:
一種振蕩型單細(xì)胞分離器，包括底層振蕩器，上層旋轉(zhuǎn)體和毛細(xì)管，底層振蕩器和上層旋轉(zhuǎn)體組成倒T型，底層振蕩器為圓盤狀，上層旋轉(zhuǎn)體為圓柱體狀，上層旋轉(zhuǎn)體上設(shè)置有至少一圈毛細(xì)管，毛細(xì)管管道為S型彎曲狀，毛細(xì)管為玻璃材質(zhì)，底層振蕩器內(nèi)設(shè)置有振動(dòng)馬達(dá)并與上層旋轉(zhuǎn)體連接，上層旋轉(zhuǎn)體內(nèi)腔的上部設(shè)置有旋轉(zhuǎn)馬達(dá)。
[0009]至少一圈毛細(xì)管通過上層旋轉(zhuǎn)體外部的固定卡扣順時(shí)針螺旋下降固定在旋轉(zhuǎn)體上。
[0010]至少一圈毛細(xì)管的材質(zhì)可為玻璃材質(zhì)。
[0011]至少一圈毛細(xì)管的管道內(nèi)徑自流入口到流出口逐漸減小至與細(xì)胞相吻合的尺寸。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明用以從細(xì)胞懸浮液中分離出單細(xì)胞。通過在上層旋轉(zhuǎn)體上設(shè)置的至少一圈毛細(xì)管，其管道呈S型彎曲狀，在管道內(nèi)的細(xì)胞懸浮液在底層振蕩器的振蕩和上層旋轉(zhuǎn)體的旋轉(zhuǎn)下，將單細(xì)胞從細(xì)胞懸浮液中分離出來。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是振蕩型單細(xì)胞分離器的主視圖；
圖2是振蕩型單細(xì)胞分離器的剖面圖；
圖3是玻璃毛細(xì)管內(nèi)部的精細(xì)結(jié)構(gòu)圖；
圖4是振蕩型單細(xì)胞分離器分離出單細(xì)胞時(shí)的狀態(tài)圖。
[0014]圖中:10—底層振蕩器，101—彈黃，102—底座，103—軸承，104—振動(dòng)馬達(dá)，20—上層旋轉(zhuǎn)體，201—固定卡扣，202—旋轉(zhuǎn)馬達(dá)，203—鎖緊蓋，30—毛細(xì)管，301—加入口，302—流出口，40—單細(xì)胞。

【具體實(shí)施方式】
[0015]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
[0016]如圖1至圖4所示，本發(fā)明的一種振蕩型單細(xì)胞分離器，包括底層振蕩器10，上層旋轉(zhuǎn)體20和毛細(xì)管30，底層振蕩器10和上層旋轉(zhuǎn)體20組成倒T型，底層振蕩器10為圓盤狀，上層旋轉(zhuǎn)體20為圓柱體狀，上層旋轉(zhuǎn)體20上設(shè)置有至少一圈毛細(xì)管30，毛細(xì)管30管道為S型彎曲狀，毛細(xì)管30為玻璃材質(zhì)，底層振蕩器10內(nèi)設(shè)置有振動(dòng)馬達(dá)104并與上層旋轉(zhuǎn)體20連接，上層旋轉(zhuǎn)體20內(nèi)腔的上部設(shè)置有旋轉(zhuǎn)馬達(dá)202。
[0017]毛細(xì)管30通過上層旋轉(zhuǎn)體20外部的固定卡扣201順時(shí)針螺旋下降固定在上層旋轉(zhuǎn)體20上。
[0018]毛細(xì)管30的材質(zhì)為玻璃材質(zhì)。本實(shí)施方式中，毛細(xì)管30材質(zhì)為石英。
[0019]毛細(xì)管30的管道內(nèi)徑自流入口到流出口逐漸減小至與細(xì)胞相吻合的尺寸。
[0020]底層振蕩器10和所述上層旋轉(zhuǎn)體20材質(zhì)為不銹鋼或金屬。本實(shí)施方式中，底層振蕩器10和上層旋轉(zhuǎn)體20材質(zhì)為金屬鋁。
[0021]底層振蕩器10外部包括底座102和彈簧101，內(nèi)部包括振動(dòng)馬達(dá)104和軸承103，底層振蕩器10通過振動(dòng)馬達(dá)104進(jìn)行上下振蕩。
[0022]上層旋轉(zhuǎn)體20包括外部的固定卡扣201，內(nèi)部的旋轉(zhuǎn)馬達(dá)202和鎖緊蓋203，上層旋轉(zhuǎn)體20在旋轉(zhuǎn)馬達(dá)202的作用下逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)。上層旋轉(zhuǎn)體20與底層振蕩器10通過軸承103連接。
[0023]毛細(xì)管30通過固定卡扣201由上而下順時(shí)針固定在上層旋轉(zhuǎn)體20上，毛細(xì)管30內(nèi)部管道為S型彎曲狀，使得細(xì)胞在其中排列整齊。本實(shí)施方式中，有四圈毛細(xì)管通過固定卡扣201固定在上層旋轉(zhuǎn)體20上。
[0024]細(xì)胞懸浮液從加入口 301流入毛細(xì)管30，在毛細(xì)管30內(nèi)經(jīng)底層振蕩器10的振蕩和上層旋轉(zhuǎn)體20的旋轉(zhuǎn)作用下，細(xì)胞在毛細(xì)管內(nèi)部S型彎曲的管道內(nèi)進(jìn)行排列，并在重力勢能的作用下一個(gè)個(gè)的從流出口 302滴出，從而分離出單細(xì)胞40，保證無菌，簡單，易操作，過程中不損傷細(xì)胞。毛細(xì)管30的圓弧直徑根據(jù)細(xì)胞大小分為不同尺寸，如100 μ m, 150 μ m,200 μ m等，從而降低液體下流速度，利于單細(xì)胞分離。
本實(shí)施方式中的振蕩型單細(xì)胞分離器在獲得單個(gè)完整細(xì)胞后，可用于單細(xì)胞的光電同步檢測。
[0025]綜上所述，本發(fā)明的振蕩型單細(xì)胞分離器通過將至少一圈毛細(xì)管30固定在上層旋轉(zhuǎn)體20上，通過至少一圈毛細(xì)管30的S型彎曲的管道、底層振蕩器10的振蕩和上層旋轉(zhuǎn)體20的旋轉(zhuǎn)，即可輕松將單細(xì)胞從細(xì)胞懸浮液中分離出來。本發(fā)明振蕩型單細(xì)胞分離器可在生物安全柜中操作，保證無菌操作，所述毛細(xì)管可拆卸，滅菌后使用。本發(fā)明的振蕩型單細(xì)胞分離器對操作人員的操作技能要求較寬，可大大減輕研發(fā)人員的時(shí)間和精力，同時(shí)還能快速分離單個(gè)細(xì)胞，且對細(xì)胞本身無損傷，還對細(xì)胞的后期培養(yǎng)和檢測無影響。
【權(quán)利要求】
1.一種振蕩型單細(xì)胞分離器，其特征在于:包括底層振蕩器，上層旋轉(zhuǎn)體和毛細(xì)管，所述底層振蕩器和所述上層旋轉(zhuǎn)體組成倒T型，所述底層振蕩器為圓盤狀，所述上層旋轉(zhuǎn)體為圓柱體狀，所述上層旋轉(zhuǎn)體上設(shè)置有至少一圈毛細(xì)管，毛細(xì)管管道為S型彎曲狀，毛細(xì)管為玻璃材質(zhì)，底層振蕩器內(nèi)設(shè)置有振動(dòng)馬達(dá)并與上層旋轉(zhuǎn)體連接，所述上層旋轉(zhuǎn)體內(nèi)腔的上部設(shè)置有旋轉(zhuǎn)馬達(dá)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的振蕩型單細(xì)胞分離器，其特征在于:所述至少一圈毛細(xì)管通過上層旋轉(zhuǎn)體外部的固定卡扣順時(shí)針螺旋下降固定在旋轉(zhuǎn)體上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的振蕩型單細(xì)胞分離器，其特征在于:所述至少一圈毛細(xì)管的材質(zhì)為玻璃材質(zhì)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的振蕩型單細(xì)胞分離器，其特征在于:所述至少一圈毛細(xì)管的管道內(nèi)徑自流入口到流出 口逐漸減小至與細(xì)胞相吻合的尺寸。
【文檔編號】C12M1/00GK104130936SQ201410401533
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年8月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月14日
【發(fā)明者】徐艇 申請人:江蘇瑞明生物科技有限公司