一種用于解酒護(hù)肝的植物提取物及其在食品、保健食品中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于解酒護(hù)肝的組合物，該組合物包括以下重量份的原料：葛根提取物15~20份；葛花提取物15~20份；枳椇子提取物8~12份；蒲公英提取物45~55份。經(jīng)體外乙醇脫氫酶（ADH）活性試驗(yàn)和抗氧化能力指數(shù)（ORAC）試驗(yàn)證明，本發(fā)明組合物具有即時(shí)有效地提高乙醇脫氫酶（ADH）的活性的能力，加速乙醇代謝；同時(shí)可以高效地清除自由基，降低因乙醇引起的氧化損傷，防止因一次性大量飲酒及長期飲酒造成的醉酒、頭暈、酒精性肝損傷等不良結(jié)果。該組合物可制成具有解酒護(hù)肝作用的食品、保健食品，作為即時(shí)解酒、長期保護(hù)肝臟的輔助產(chǎn)品等。
【專利說明】—種用于解酒護(hù)肝的植物提取物及其在食品、保健食品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品加工領(lǐng)域，具體涉及一種用于解酒護(hù)肝的組合物及其在食品和保健食品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]我國的酒文化源遠(yuǎn)流長，酒在國民生活中占據(jù)著重要的位置。從三千年前的商周時(shí)代開始，我國就有了酒曲復(fù)式發(fā)酵法釀制黃酒的記載。從宋代開始，白酒成為中國人飲用的主要酒類。2012年的中國白酒產(chǎn)量達(dá)1023.32萬千升，11月產(chǎn)量為115.09萬千升，同比增長18%。然而伴隨著飲酒文化及酒產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，因飲酒產(chǎn)生的疾病也逐漸加劇。長期飲酒或一次性大量攝入酒類制品都有可能導(dǎo)致急性酒精中毒及相關(guān)并發(fā)癥，過量飲酒被視為不健康的生活方式。
[0003]在飲酒人群中，商務(wù)人士、管理人員、知識分子、公務(wù)人員等具有更高的健康意識，迫切需要一種能夠有效地即時(shí)解酒、保護(hù)肝臟的保健產(chǎn)品。傳統(tǒng)的解酒產(chǎn)品主要有以下幾類:一種是以催吐為主要解決方式的藥物，通過排出胃中的乙醇降低乙醇吸收，對人體胃腸刺激較大，不適合做；另一種是養(yǎng)胃護(hù)肝的保健藥品，但大多起效慢，需要長期服用，對于即時(shí)解酒效果并不好；還有一種是以中藥為原料制成的解酒茶，味道濃重，口感接受度較差?；诖朔N情況，研發(fā)一種具有即時(shí)解酒效果，并且能保護(hù)肝臟的保健產(chǎn)品，將會(huì)有極大的社會(huì)效益及應(yīng)用前景。
[0004]研究表明，乙醇在機(jī)體內(nèi)主要有三條代謝途徑，如圖1所示。乙醇進(jìn)入胃中經(jīng)過首關(guān)代謝(First Pass metabolism, FPM)后,再通過肝臟內(nèi)的脫氫酶系統(tǒng)(乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶)以及氧化酶-過氧化酶系統(tǒng)完成催化代謝。攝入體內(nèi)的乙醇主要由肝臟中的乙醇脫氫酶(ADH)催化代謝，而氧化酶-過氧化酶系統(tǒng)的作用是降低因乙醇激發(fā)的自由基所造成的氧化損傷。
[0005]越來越多的研究表明，葛根提取物可以通過抑制酒精對腸道滲透性的影響，顯著改善大鼠酒精灌胃后出現(xiàn)的狀況，葛花及葛根提取物可保護(hù)肝乙醇脫氫酶活性，使乙醇在大鼠體內(nèi)的代謝加快，血醇濃度降低，能起到解酒作用。同時(shí)，葛根提取物可通過抗自由基、減輕脂質(zhì)過氧化、抑制β-ΕΡ、P-selectin的釋放等方面對急性酒精性肝臟傷有保護(hù)作用，可應(yīng)用于臨床治療酒精中毒；葛花提取物可降低酒后血中乙醇濃度，增強(qiáng)肝中ADH活性.其機(jī)制可能是通過抑制消化道對乙醇的吸收，從而起到有效的降醇解酒作用；枳犋子提取物具有抗脂質(zhì)過氧化，保護(hù)肝細(xì)胞活性等作用。有研究發(fā)現(xiàn)，枳犋子甲醇提取物能提高急性肝損傷小鼠的GSH氧化功能、降低丙二醛(MDA)水平、增強(qiáng)谷朧甘膚疏基轉(zhuǎn)移酶(GST)催化的GSH結(jié)合反應(yīng)，增加超氧化物歧化酶，過氧化氫酶(CAT)活性，拮抗乙醇所致的肝損傷。試驗(yàn)表明枳犋子提取物能阻滯肝纖維化的發(fā)生發(fā)展，保護(hù)肝細(xì)胞活性，促進(jìn)肝細(xì)胞修復(fù)再生。
[0006]通過體外乙醇脫氫酶(ADH)活性試驗(yàn)和抗氧化能力指數(shù)(ORAC)試驗(yàn)，證明本發(fā)明組合物具有激活乙醇脫氫酶活性、加速乙醇代謝，從而改善因酒精引起的醉酒癥狀的作用；同時(shí)又能清除因乙醇引發(fā)的自由基，從而降低因乙醇引起的氧化損傷，防止氧化損傷造成的不良后果。
[0007]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]在下文中給出關(guān)于本發(fā)明的簡要概述，以便提供關(guān)于本發(fā)明的某些方面的基本理解。應(yīng)當(dāng)理解，這個(gè)概述并不是關(guān)于本發(fā)明的窮舉性概述。它并不是意圖確定本發(fā)明的關(guān)鍵或重要部分，也不是意圖限定本發(fā)明的范圍。其目的僅僅是以簡化的形式給出某些概念，以此作為稍后論述的更詳細(xì)描述的前序。
[0009]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種用于解酒護(hù)肝的組合物及其在食品、保健食品中的應(yīng)用。
[0010]本發(fā)明采用如下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題:
本發(fā)明組合物由以下重量份的原料配方制成:葛根提取物15?20份；葛花提取物15?20份；枳犋子提取物8?12份；蒲公英提取物45?55份。
[0011]本發(fā)明組合物在制備食品、保健食品的過程中，可以按照需要加入調(diào)味劑、助溶齊U、乳化劑、賦形劑，制成的食品、保健食品是任意形式可接受的產(chǎn)品，如膠囊、片劑、沖劑、泡騰片、飲料、食品配料包等類型的產(chǎn)品。
[0012]體外乙醇脫氫酶(ADH)活性試驗(yàn)和抗氧化能力指數(shù)(ORAC)試驗(yàn)證明，本發(fā)明組合物具有激活乙醇脫氫酶活性、加速乙醇代謝，從而改善因酒精引起的醉酒癥狀的作用；同時(shí)又能清除因乙醇引發(fā)的自由基，從而降低因乙醇引起的氧化損傷，防止氧化損傷造成的不良后果。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
1.配方合理:本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物包含能夠有效促進(jìn)乙醇脫氫酶活性的原料，也包含有效提高抗氧化能力的原料。各原料配伍使用，療效更佳。
[0014]2.本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物能夠有效提高人體內(nèi)乙醇脫氫酶(ADH)的活性，促進(jìn)ADH對乙醇的代謝，降低血液中的乙醇濃度。
[0015]3.本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物能夠提高機(jī)體抗氧化能力，清除因乙醇激發(fā)的自由基，提高機(jī)體抗氧化水平，減輕脂質(zhì)過氧化等損傷，預(yù)防酒精性肝病的發(fā)生，改善飲酒造成的身體不適。
[0016]4.本發(fā)明組合物原料均為天然物質(zhì)，不含化學(xué)合成物質(zhì)，安全無副作用。
[0017]5.本發(fā)明組合物可以制成多種形式的食品、保健食品，如膠囊、片劑、沖劑、泡騰片、飲料、食品配料包等，適宜在各種場合服用，便于攜帶與保存。
[0018]下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明。
[0019]實(shí)驗(yàn)例I體外乙醇脫氫酶(ADH)活力評價(jià)試驗(yàn) I試驗(yàn)原理
氧化型輔酶I (氧化態(tài)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD)是一種脫氫酶的輔酶，在乙醇脫氫酶(ADH)氧化乙醇反應(yīng)時(shí)，接受氫離子，從氧化態(tài)轉(zhuǎn)化為還原型輔酶I (還原態(tài)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，NADH)。NADH在340nm處有吸收峰，因此可以采用測定NADH的A34tlnm的方法，推導(dǎo)計(jì)算NADH的含量及ADH的活性。[0020]2材料與方法
2.1材料
2.1.1試劑
氧化輔酶I，美國Sigma公司；乙醇脫氫酶，美國Sigma公司；突光物質(zhì)SodiumFluorescein,美國Sigma公司；磷酸氫二鉀，北京化工廠，分析純；磷酸二氫鈉，北京化工廠，分析純；焦磷酸鈉，北京化工廠，分析純；乙醇，北京化工廠，分析純。
[0021]2.1.2儀器設(shè)備
Synergy H4多功能熒光分析儀及GENE5工作站，德國BIO-TEK公司；96微孔板。
[0022]2.1.3 樣品
本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物。
[0023]2.2試驗(yàn)方法
參考瓦勒-霍赫(Vallee&Hoch)方法中各樣品溶液的比例，調(diào)節(jié)酶標(biāo)板中各個(gè)反應(yīng)溶液的添加量，測定體外ADH的活性。
[0024]在96孔白色板各微孔中分別加入焦磷酸鈉緩沖液(pH=8.8) 135 μ LUmg/mL的待測樣品溶液ΙΟμ?、體積分?jǐn)?shù)為11.5%的乙醇溶液45 μ L (以等量蒸餾水代替乙醇調(diào)零)，用自動(dòng)加樣器向各微孔中添加濃度為27mmol/L的氧化輔酶I (MD+) 90μ?，在25° C下溫育5min后，用自動(dòng)加樣器加入濃度為0.25U/mL的ADH溶液15μ?并迅速啟動(dòng)反應(yīng)，以激發(fā)波長測定體系在340nm處的吸光度，`整個(gè)體系保持25° C，每45s測定一次熒光強(qiáng)度，每次測定前中速震動(dòng)孔板5s，連續(xù)測定20min后停止，取反應(yīng)最初的線性部分(曲線如圖2所示)。
[0025]2.3計(jì)算方法
計(jì)算Λ A34tlnmAiin的值，根據(jù)生成物NADH在340nm處的摩爾消光系數(shù)為6.22，計(jì)算ADH的活力單位。
[0026]酶活性(U/mL)=( Λ AX (Tv/Sv ) X 1000)/(minX ε XL) ε:消光系數(shù)，e 340NADH=6.22 X ΙΟ3；
Tv:總反應(yīng)體積；
Sv:樣品體積；
L:光徑。
[0027]按下式計(jì)算激活/抑制率:
激活/抑制率=((酶活力加樣品丨式驗(yàn)組_酶活力無樣品i式驗(yàn)組)/酶活力無樣品i式驗(yàn)組)X100%
3測定結(jié)果及分析
根據(jù)前20min內(nèi)各樣品的吸光度變化，如圖3所示。根據(jù)2.3所述公式計(jì)算樣品的酶活激活/抑制率，結(jié)果如表1所示。
[0028]表1不同樣品對乙醇脫氫酶活性的影響
編號I樣品I激活/抑制率

I_葛根提取物70.59%士 17.16%
2 葛花提取物~^46%±37.17%
3~枳犋子提取物731.09%±11.37%
~ I蒲公英提取物|631.09%±20.64%
本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物中的配方組分對ADH的激活率有較高的激活作用，枳犋子提取
物的激活率達(dá)到731.09%,蒲公英提取物的激活率也較高，達(dá)到631.09%,結(jié)果表明，本發(fā)明組合物能夠顯著的提高乙醇脫氫酶的活性，使其快速代謝乙醇，從而達(dá)到快速解酒的作用。
[0029]實(shí)驗(yàn)例2抗氧化能力指數(shù)(ORAC)試驗(yàn) I試驗(yàn)原理
抗氧化能力指數(shù)(Oxygen Radical Absorption Capacity,ORAC)分析方法是根據(jù)自由基破壞熒光探針，使熒光強(qiáng)度產(chǎn)生變化原理，以維生素E水溶性類似物Trolox為定量標(biāo)準(zhǔn)，使用熒光微孔板分析儀進(jìn)行分析。熒光強(qiáng)度的變化大小反映自由基破壞的程度。在抗氧化劑存在時(shí)，它可以抑制由自由基引起的熒光變化。抑制程度反映了它對自由基的抗氧化能力。
[0030]2材料與方法
2.1材料
2.1.1試劑
突光物質(zhì)Sodium Fluorescein,美國Sigma公司；自由基產(chǎn)生劑AAPH,美國Sigma公司；抗氧化標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Trolox，美國Sigma公司；磷酸氫二鉀，北京化工廠，分析純；磷酸二氫鈉，北京化工廠，分析純；焦磷酸鈉，北京化工廠，分析純。
[0031]2.1.2儀器設(shè)備`
Synergy H4多功能熒光分析儀及GENE5工作站，德國BIO-TEK公司；96微孔板。
[0032]2.1.3 樣品
本發(fā)明解酒護(hù)肝組合物。`
[0033]2.2試驗(yàn)方法
ORAC反應(yīng)在75mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH=7.2)體系中進(jìn)行。在96孔的黑色熒光酶標(biāo)板各微孔中分別加入不同濃度的待測樣品溶液25PL，用自動(dòng)加樣器向各微孔中添加濃度為8.61 X 10_5mM的熒光物質(zhì)FL溶液150μ?，中速振搖2min，在37° C下孵育IOmin后，用自動(dòng)加樣器加入濃度為153mM的AAPH溶液25μ?并迅速啟動(dòng)反應(yīng)，以激發(fā)波長485±20nm，發(fā)射波長530±20nm進(jìn)行連續(xù)測定熒光強(qiáng)度，整個(gè)體系保持37° C，每2min測定一次熒光強(qiáng)度，每次測定前中速震動(dòng)孔板10s，測定時(shí)間設(shè)定在熒光衰減呈基線后為止。
[0034]2.3計(jì)算方法
ORAC試驗(yàn)所得的各微孔不同時(shí)間點(diǎn)的絕對熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)與其初始時(shí)間的熒光強(qiáng)度相比，折算成相對熒光強(qiáng)度f，以相對熒光強(qiáng)度采用近似積分法計(jì)算熒光衰退曲線下面積(AUC)，其公式為:AUC=0.5X [2X (fo+fi+...+fn_!+fn)-f0-fn] XAt
其中fn標(biāo)示第η個(gè)測定點(diǎn)的相對熒光強(qiáng)度，At表示相鄰兩點(diǎn)的時(shí)間間隔(2min)，則上述公式可簡化為:AUC=2X (fg+f!+...+fn-1+fn)
[0035]測定結(jié)果以O(shè)RAC值表示，ORAC值得計(jì)算過程為:首先計(jì)算待測樣品的AUC與僅有AAPH作用下的AUC之差，得到凈AUC (netAUC)值，通過樣品與Trolox凈AUC的比值與二者摩爾濃度(molarity)的比值做比,得到樣品的ORAC值，即Trolox當(dāng)量。待測樣品的ORAC值就是以Mmol Trolox當(dāng)量/g樣品表示,具體計(jì)算公式表示為:
Relative ORAC value= ((AUCsample-AUCblank)/ (AUCTrolox-AUCTrolox)) / (molarity ofTrolox/molarity of sample)
3測定結(jié)果及分析
根據(jù)2.3所述方法，本研究樣品(葛根提取物、葛花提取物、枳犋子提取物、蒲公英提取物)每個(gè)樣品做3份平行實(shí)驗(yàn)，經(jīng)EXCEL軟件計(jì)算得到ORAC值。
[0036]圖5所示為樣品反應(yīng)體系下的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，Τι?Ιοχ系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度隨時(shí)間衰減圖見圖5所示，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，凈面積為縱坐標(biāo)，繪制Trolox系列標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見圖6。
[0037]由Trolox標(biāo)準(zhǔn)品測定結(jié)果可知，Trolox系列標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率為0.5668，相關(guān)系數(shù)R2=0.9985，截距為0.3951，根據(jù)Dejian Huang與Boxin Ou的研究報(bào)道，截距大小與空白面積有關(guān)，對樣品的ORAC測定結(jié)果無影響。
[0038]不同樣品的熒光衰減示意圖如圖7所示，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各樣品的ORAC值，如表2所示。
[0039]表2不同樣品的ORAC值
【權(quán)利要求】
1.一種用于解酒護(hù)肝的組合物，其特征在于，該組合物包括以下重量份的原料: 葛根提取物15~20份；葛花提取物15~20份；枳犋子提取物8~12份；蒲公英提取物45~55份。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，該組合物包括以下重量份的原料: 葛根提取物16~18份；葛花提取物16~18份；枳犋子提取物--Ο份；蒲公英提取物48~53份。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，該組合物包括以下重量份的原料: 葛根提取物18份；葛花提取物18份；枳犋子提取物9份；蒲公英提取物55份。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物，在制備食品、保健食品的過程中加入調(diào)味劑、助溶劑、乳化劑、賦形劑。
5.如權(quán)利要求4所述的組合物，在制備食品、保健食品的過程中加入但不限于的調(diào)味劑為檸檬酸、木糖醇、薄荷油。
6.如權(quán)利要求4所述的組合物，在制備食品、保健食品的過程中加入但不限于的助溶劑為β_環(huán)糊精、麥芽糊精。
7.如權(quán)利要求4所述的組合物，在制備食品、保健食品的過程中加入但不限于的乳化劑為乙?；瘑?、雙甘油脂肪酸 酯。
8.如權(quán)利要求4所述的組合物，在制備食品、保健食品的過程中加入但不限于的賦形劑為硬脂酸鎂、微晶纖維素。
9.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是應(yīng)用于食品、保健食品中的任意形式的產(chǎn)品。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物制成的食品、保健食品，其特征在于產(chǎn)品形式為膠囊、片劑、沖劑、泡騰片、飲料、食品配料包等。
11.如權(quán)利要求1所述的組合物的用途，其特征是其解酒作用是指激活乙醇脫氫酶的活性，使乙醇加速分解代謝，降低人體內(nèi)乙醇的濃度，從而改善因酒精引起的醉酒癥狀。
12.如權(quán)利要求1所述的組合物的用途，其特征是其護(hù)肝作用是指清除因乙醇引發(fā)的自由基，從而降低因乙醇引起的 氧化損傷，防止氧化損傷造成的不良后果。
【文檔編號】A23L1/29GK103494193SQ201310413965
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月12日
【發(fā)明者】陳遠(yuǎn), 王沛 申請人:北京中科邦尼國際科技有限責(zé)任公司