專利名稱：一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥保健技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
化橘紅為蕓香科植物化州柚Citrus grandis Tomentosa或柚Citrus grandis(L. ) Osbeck的未成熟或近成熟的干燥外層果皮?；偌t中富含黃酮類成分，如柚皮苷、野漆樹苷、柚皮素等，其中以柚皮苷含量最高。柚皮素為柚皮苷的苷元，具有比柚皮苷更強的抗氧化活性(Cavia-Saiz, M.，J Sci Food Agric, 2010)。柚皮苷是柚皮中的苦味物質(zhì)，其在水中的苦味閾值為20mg/L，但I. 5mg/L即可以被感覺到。柚皮苷的脫苦工藝是目前的研究熱點，柚苷酶法脫苦具有專一性強，對化橘紅中其他營養(yǎng)成分無破壞的優(yōu)點，是較為理想的脫苦方法。柚苷酶由a-L-鼠李糖苷酶和^ -D-葡萄糖苷酶組成，a -L-鼠李糖苷酶可將柚皮苷水解成櫻桃苷和鼠李糖，櫻桃苷的苦味約為柚皮苷的1/3，而櫻桃苷可在3-D-葡萄糖苷酶的作用下生成沒有苦味的柚皮素和葡萄糖。Chien等用高效液相色譜法(HPLC)證實這一水解順序(Journal of Food and DrugAnalysis，2001)。如今在食品工業(yè)中，生物酶脫苦法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于柑橘類果汁中。王鴻飛等，利用柚皮苷酶對柑橘類果汁進行了脫苦研究，結(jié)果表明，柚皮苷酶能在不影響柑橘果汁品質(zhì)的情況下較好地去除苦味(農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2004)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對以上現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法，可顯著改善傳統(tǒng)化橘紅飲品甚苦的口感，所提取的化橘紅提取物抗氧化能力增強，且方法安全簡單，成本低廉。本發(fā)明還公開一種所述顯著改善口感的化橘紅提取物的應(yīng)用。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其包括如下步驟取化橘紅粗顆粒，加體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水，加熱回流提取，過濾，濾液濃縮，加乙醇溶液沉淀，取濾液回收乙醇，加水稀釋，加入柚苷酶液，一定條件下反應(yīng)，加熱煮沸，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。優(yōu)選方案的具體步驟如下取化橘紅粗顆粒，第一次加化橘紅粗顆粒重量20 25倍的體積比濃度為5 10%的食用乙醇溶液或水，浸泡0. 5 I小時后，加熱至沸騰回流I. 5 2小時，濾過；在藥渣中第二次加化橘紅粗顆粒重量20 25倍體積比濃度為5 10%的食用乙醇溶液或水，加熱至沸騰回流I. 5 2小時，濾過；合并濾液；濾液濃縮至生藥含量為0. 8 I. 2g/mL，加入體積比濃度為85 97%乙醇溶液，邊加邊攪拌，使?jié)饪s濾液含乙醇量達到60% 85%的體積比濃度，繼續(xù)加入體積比濃度為60% 85%乙醇溶液使乙醇達到化橘紅粗顆粒的6 9體積倍量，攪拌10 20分鐘后，濾過，濾渣用體積比濃度為60% 85%乙醇溶液分次洗滌，并入濾液，回收乙醇，此時得到生藥含量為0. 8 I. 2g/mL濃縮液，加入蒸餾水將提取物稀釋至生藥含量為0. lg/mL，以生藥含量lmg/mL加入0. 5 I. 5U柚苷酶的比例進行脫苦，50 60° C溫度下反應(yīng)100 150分鐘，加熱煮沸后，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。本發(fā)明還提供所述的化橘紅提取物在食品方面的應(yīng)用。所述的化橘紅提取物可以制成如泡騰片、咀嚼片、沖劑等固體制劑。所述泡騰片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟A.按照下列重量份數(shù)取原料化橘紅提取物5 10份、維生素C 3 5份、阿斯巴 甜0. I 0. 5份、甘露醇6 12份、碳酸氫鈉14 20份、朽1檬酸10 14份、酒石酸5 7份、羧甲基淀粉鈉I 3份、聚乙二醇-6000 I 3份、化橘紅揮發(fā)油P -環(huán)糊精包合物I 3份、聚乙烯吡咯烷酮-K30 (PVP-K30) 0. 5 2份;B.取化橘紅提取物，加入甘露醇混合制成藥材軟材，過24目篩；檸檬酸、酒石酸、羧甲基淀粉鈉、維生素C、聚乙烯吡咯烷酮-K30、阿斯巴甜與適量甘露醇混合制成酸系統(tǒng)軟材，過24目篩；碳酸氫鈉、聚乙二醇-6000混合制成堿系統(tǒng)軟材，過24目篩；將三種軟材分別制粒、烘干、加入化橘紅揮發(fā)油0 -環(huán)糊精包合物混合整粒，溫度25°C，濕度30%條件下，旋轉(zhuǎn)式壓片機壓制成片。所述的化橘紅提取物可以制成功能飲料、口服液等液體劑型。本發(fā)明所述的化橘紅提取物在顯著改善口感的同時，還可以增強化橘紅提取物抗氧化作用強度，在增強機體免疫力、抗衰老、預(yù)防心腦血管疾病等功能的保健食品的應(yīng)用。本發(fā)明所闡述的顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其有益效果在于I.所得到的化橘紅提取物對比原藥材提取液苦味降低，脫苦率達到98. 88%如圖I所示，更適合作為食品或保健食品的原料。2.具有較高的得率，得率為原藥材的69. 39%。3.所得到的化橘紅提取物具有更強的抗氧化活性(DPPH清除率增加0. 11%)，作為抗氧化功能的保健食品原料，具有獨特的優(yōu)勢。


圖I為四種對照品UPLC圖譜(其中，I柚皮苷、2野漆樹苷、3柚皮素、4芹菜素)；圖2為化橘紅柚苷酶解前的UPLC圖譜(其中，I柚皮苷、2野漆樹苷、3柚皮素、4芹菜素)；圖3為化橘紅柚苷酶解后UPLC圖譜(其中I柚皮苷、2野漆樹苷、3柚皮素、4芹菜素)。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細的說明。實施例I一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其步驟包括取化橘紅粗顆粒，第一次加化橘紅粗顆粒重量23倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 5小時后，加熱回流2小時，濾過；在藥渣第二次加化橘紅粗顆粒重量23倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加熱回2小時，濾過，合并濾液。濾液濃縮至生藥含量為lg/mL，，緩緩加入體積比濃度為95%乙醇溶液，邊加邊攪拌，使其含乙醇量達到體積比濃度為78. 5%，繼續(xù)加入體積比濃度為78. 5%乙醇溶液使其達到化橘紅粗顆粒重量的7倍量，攪拌15分鐘后,濾過,濾渣用適量78. 5%濃度的乙醇溶液分次洗滌，并入濾液，回收乙醇,此時濃縮得到的生藥含量為0. 8 I. 2g/mL，加入適量蒸餾水將提取物稀釋，優(yōu)選將提取物稀釋至生藥含量為0. lg/mL,以生藥含量lmg/mL加入IU柚苷酶的比例進行脫苦，54°C溫度下反應(yīng)132分鐘，加熱煮沸殺酶，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。實施例2一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其步驟包括取化橘紅粗顆粒，第一次加化橘紅粗顆粒重量21倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 8小時后，力口熱回流I. 6小時，濾過；在藥渣第二次加化橘紅粗顆粒重量21倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加熱回I. 6小時，濾過，合并濾液。濾液濃縮至生藥含量為I. lg/mL,緩緩加入體積比濃度為93%乙醇溶液，邊加邊攪拌，使其含乙醇量達到體積比濃度為70%，、繼續(xù)加入70%濃度乙醇溶液使其達到化橘紅粗顆粒重量的8. 5倍量，攪拌15分鐘后，濾過，濾渣用70%濃度乙醇溶液分次洗滌，并入濾液，回收乙醇，加入適量蒸餾水將提取物稀釋至生藥含量為0. 2g/mL,以生藥含量I. 5mg/mL加入IU柚苷酶的比例進行脫苦，59°C溫度下反應(yīng)171分鐘，加熱煮沸殺酶，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。實施例3一種顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其步驟包括取化橘紅粗顆粒，第一次加化橘紅粗顆粒重量22倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，浸泡0. 5小時后，加熱回流2小時，濾過；在藥渣第二次加化橘紅粗顆粒重量22倍體積比濃度為5 10%食用乙醇溶液或水溶液，加熱回I. 5小時，濾過，合并濾液。濾液濃縮至生藥含量為lg/mL，緩緩加入體積比濃度為95%乙醇溶液，邊加邊攪拌，使其含乙醇量達到體積比濃度為82%，繼續(xù)加入適量一定濃度乙醇溶液使其達到化橘紅粗顆粒重量的8. I倍量，攪拌15分鐘后，濾過,濾渣用82%濃度乙醇溶液分次洗滌，并入濾液，回收乙醇，加入適量蒸餾水將提取物稀釋，以生藥含量I. 3mg/mL加入IU柚苷酶的比例進行脫苦，60°C溫度下反應(yīng)114分鐘，加熱煮沸殺酶，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。試驗例I響應(yīng)面法優(yōu)化化橘紅酶解工藝I儀器與樣品I. I儀器美國Waters ACQUITY UPLC系統(tǒng)(QSM四元溶劑管理系統(tǒng)、FTN樣品管理系統(tǒng)自動進樣器、CH-A型柱溫箱、UPLC專用二極管陣列檢測器、真空脫氣機、Empowerf色譜工作站)，BP211D型電子天平(德國SartoriUs公司)，KQ-500型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，HH-S6數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州普天儀器制造有限公司)。I. 2材料95份乙醇溶液均為分析純；二苯基苦味?；杂苫?DPPH OSigma公司，水為怡寶水；I. 2材料乙腈(色譜純)，甲醇(色譜純)，冰乙酸(優(yōu)級純)，水為怡寶水；對照品柚皮苷、野漆樹苷、柚皮素(均為自制，采用峰面積歸一化法計算，純度分別為98. 21份、99. 32份、98. 68份)，芹菜素(北京恒元啟天化工技術(shù)研究院，批號520-36-5)；I. 3樣品化橘紅粗提取物(改善前)，化橘紅提取物(改善后)。2方法與結(jié)果2. I色譜條件
ACQUITY UPLC BEH C18 色譜柱(2. ImmX 50mm，I. 7um);流動相A 甲醇，B :0. I 份乙酸水溶液(v/v)，梯度洗脫:0 2min，20份 60份A ;2 3min，60份 60份A ;3 3. 5min, 60份 20份A ；3. 5 5min，20份 20份A ;梯度曲線均為直線。流速0. 5mL .mirT1 ;柱溫35°C ；檢測波長337nm ;進樣量0. 5 y L。2. 2對照品溶液的制備精密稱取經(jīng)105°C干燥至恒重的柚皮苷、野漆樹苷、柚皮素、芹菜素對照品適量，力口甲醇溶解，搖勻，配制成柚皮苷、野漆樹苷、柚皮素、芹菜素濃度分別為20mg/mL、0. 3mg/mL、
I.5mg/mL、0. 04mg/mL的混合對照品儲備液。2. 3供試品的制備精密稱定樣品粉末0. 2g,每個樣品平行做3份，加甲醇20mL，密塞，超聲波提取30min，取出，放涼，搖勻，濾過，并用甲醇洗滌濾器和濾渣數(shù)次，濾液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，取適量用0. 22 y m濾膜濾過，即得。2. 4脫苦率計算取5mL供試液至試管中，根據(jù)要求加入柚苷酶液0. 5mL，在指定的條件下進行酶解反應(yīng)。取反應(yīng)后的供試液0.2mL至試管中，加入甲醇1.8mL，過0.22pm微孔濾膜。按照曾霖霖(食品工業(yè)科技，2011)方法，脫苦率以水解柚皮苷的程度表示。其計算公式為Db= (C-C1)/CX 100 份式中Db——脫苦率，份；C——原供試液柚皮苷含量(mg/mL) ——柚苷酶處理后柚皮苷含量(mg/mL)。2. 5響應(yīng)面法優(yōu)化酶解工藝采用響應(yīng)面法試驗進行酶解工藝優(yōu)化,根據(jù)Box-Behnken的中心試驗設(shè)計原理，以酶用量、PH值、溫度及時間作為考察因素，采用三因素三水平，進行響應(yīng)面設(shè)計，見下表。響應(yīng)面因素水平表
權(quán)利要求
1.一種顯著改善化橘紅提取物ロ感的方法，其特征在于，其包括的步驟如下取化橘紅粗顆粒，加體積比濃度為5 10%的食用こ醇溶液或水溶液，加熱回流提取，濾過，濾液濃縮，加こ醇沉淀，取濾液回收こ醇，加水稀釋，加入柚苷酶，加熱煮沸，濃縮，干燥得粉末狀提取物。
2.如權(quán)利要求I所述的顯著改善化橘紅提取物ロ感的方法，其特征在于，具體步驟為取化橘紅粗顆粒，第一次加化橘紅粗顆粒重量20 25倍的體積比濃度為5 10%的食用こ醇溶液或水，浸泡后，加熱回流I. 5 2小時，濾過；在藥渣中第二次加化橘紅粗顆粒重量20 25倍體積比濃度為5 10%的食用こ醇溶液或水，加熱回流I. 5 2小時，濾過；合并濾液；濾液濃縮至生藥含量為O. 8 I. 2g/mL，加入體積比濃度為85 97%こ醇溶液，使?jié)饪s濾液含こ醇量達到60% 85%的體積比濃度，繼續(xù)加入體積比濃度為60% 85%こ醇溶液使こ醇達到化橘紅粗顆粒的6 9體積倍量，濾過，濾渣用體積比濃度為60% 85%乙醇溶液分次洗滌，并入濾液，回收こ醇；加入蒸餾水將提取物稀釋，以生藥含量lmg/mL加入O.5 I. 5U柚苷酶的比例進行脫苦，50 60° C溫度下反應(yīng)100 150分鐘，加熱煮沸后，濃縮，干燥得粉末狀提取物即化橘紅提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或者2所述的化橘紅提取物在食品方面的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化橘紅提取物在食品方面的應(yīng)用，其特征在于，制成固體制齊 。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化橘紅提取物在食品方面的應(yīng)用，其特征在于，所述固體制劑為泡騰片。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述泡騰片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 Α.按照下列重量份數(shù)配備取原料化橘紅提取物5 10份、維生素C 3 5份、阿斯巴甜O. I O. 5份、甘露醇6 12份、碳酸氫鈉14 20份、朽1檬酸10 14份、酒石酸5 7份、羧甲基淀粉鈉I 3份、聚こニ醇-6000 I 3份、化橘紅揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物I 3份、聚こ烯吡咯烷酮-Κ30 O. 5 2份； B.取化橘紅提取物，加入甘露醇制成藥材軟材；檸檬酸、酒石酸、羧甲基淀粉鈉、維生素C、聚こ烯吡咯烷酮-Κ30、阿斯巴甜和甘露醇制成酸系統(tǒng)軟材；碳酸氫鈉、聚こニ醇-6000制成堿系統(tǒng)軟材；將三種軟材分別制粒、烘干、加入化橘紅揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物混合整粒，溫度在15 30°C，旋轉(zhuǎn)式壓片機壓制成片。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化橘紅提取物在食品方面的應(yīng)用，其特征在于，制成液體劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用生物酶技術(shù)顯著改善化橘紅提取物口感的方法，其包括的步驟如下取化橘紅粗顆粒，加5～10%食用乙醇溶液或水溶液，加熱回流提取，過濾，濾液濃縮，加乙醇沉淀，取濾液回收乙醇，加水稀釋，加入柚苷酶液，一定條件下反應(yīng)，加熱煮沸，濃縮，減壓干燥或冷凍干燥得粉末狀提取物。本發(fā)明并公開了其在研發(fā)醫(yī)藥保健和功能食品的應(yīng)用。本發(fā)明獲得的化橘紅提取物顯著改善了傳統(tǒng)化橘紅提取物甚苦的口感，并能增強其抗氧化功效，可應(yīng)用于化橘紅食品和保健食品制備。
文檔編號A23L1/29GK102657362SQ20121015964
公開日2012年9月12日 申請日期2012年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月21日
發(fā)明者林勵, 王蓮婧 申請人:廣州中醫(yī)藥大學(xué)