專利名稱：生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是利用臍帶組織培養(yǎng)擴(kuò)增出能用于生殖保健用干細(xì)胞，涉及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、生殖保健科學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，生殖健康的重要性正受到越來(lái)越多人的關(guān)注，因?yàn)樯诚到y(tǒng)活動(dòng)不僅影響目前的社會(huì)，還直接影響人類社會(huì)的未來(lái)。所以，生殖系統(tǒng)健康已不單純是一個(gè)醫(yī)學(xué)范疇的課題，而是人類社會(huì)生存、發(fā)展與進(jìn)步的永恒主題。一直以來(lái)，人們常把生殖系統(tǒng)健康簡(jiǎn)單地歸之于婦科方面，然而事實(shí)上，生殖系統(tǒng)健康不是只對(duì)女性而言的，男性的生殖系統(tǒng)的保健也同樣非常重要。生殖系統(tǒng)的健康不僅僅是指沒(méi)有生殖系統(tǒng)活動(dòng)的異常和疾病，還表現(xiàn)在生理、心理及社會(huì)各方面的完全良好狀態(tài)。生殖系統(tǒng)分為男性生殖系統(tǒng)和女性生殖系統(tǒng)兩種。男性生殖系統(tǒng)主要是由睪丸、附睪、輸精管和精囊腺組成，其中睪丸是男性的性腺，也叫主要性器官，產(chǎn)生精子和雄性激素，附睪主要為儲(chǔ)存睪丸產(chǎn)生的精子。睪丸產(chǎn)生的精子，就是一個(gè)雄的生殖細(xì)胞。女性生殖系統(tǒng)則包括卵巢、子宮、輸卵管和陰道，其中卵巢是女性的性腺，也是生殖系統(tǒng)的主要性器官，產(chǎn)生卵子和雌性激素。輸卵管連接卵巢與子宮，后者是接受受精卵長(zhǎng)成一個(gè)初生嬰兒的地方。人的生殖系統(tǒng)成熟較晚，但卻是最先開(kāi)始衰老的。女性的生殖機(jī)能從30歲開(kāi)始下滑，到35歲以后呈直線衰退，如果沒(méi)有保養(yǎng)好，之后女性就將過(guò)早的面臨痛苦而漫長(zhǎng)的更年期，衰老也更快的來(lái)臨。隨著年齡的增大，分娩、性生活、雌激素下降等因素的影響，生殖機(jī)能日漸衰退，直接導(dǎo)致自身免疫能力下降，各種細(xì)菌病毒乘虛而入引發(fā)各種生殖疾病。同時(shí)，由于卵巢功能衰退，性激素分泌必然減少，包括雌激素，這樣導(dǎo)致神經(jīng)介質(zhì)功能失衡，從而植物神經(jīng)功能紊亂，機(jī)體的行為和情緒也都受到顯著影響。生殖保養(yǎng)就是為了提高生殖機(jī)能，增強(qiáng)生殖自身對(duì)疾病 的抵抗力。男性生殖機(jī)能與女性不同，男性到35歲左右生殖機(jī)能開(kāi)始下降，到了 55歲以后則急劇下降，往往會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)痿、早泄、性欲低下等癥狀。同時(shí)，男性有面對(duì)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的巨大壓力，又由于生物學(xué)上的差異，男性為地位、權(quán)力奮斗成為自身的心理獎(jiǎng)賞，比女性付出和消耗更多的生物性能量。但是，成功和滿意的男性只是少數(shù)，其余的男性容易有抑郁和失落心理卻又不愿承認(rèn)。同時(shí)，與女性相比，男性的健康意識(shí)還是很淡薄。男性健康意識(shí)的淡薄和不健康的生活方式(吸煙、酗酒、無(wú)規(guī)律的生活、經(jīng)常熬夜、久坐等)，對(duì)男性健康也形成了巨大的危害?？陀^地說(shuō)，所有男人都比女人更需要醫(yī)學(xué)保健。然而，目前用于生殖系統(tǒng)保健有中醫(yī)藥保健法，營(yíng)養(yǎng)保健法，理療保健法等，這些保健方法均存在缺陷。干細(xì)胞(Stem Cell, SC)是一類具有自我復(fù)制和多向分化潛能的原始細(xì)胞，它能產(chǎn)生表現(xiàn)型和基因型與自己完全相同的子代干細(xì)胞，也能在一定條件下分化成為各種功能的細(xì)胞。根據(jù)其發(fā)育階段，可將干細(xì)胞分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞是指來(lái)源于胚胎組織的具有多分化潛能且可發(fā)育成機(jī)體的各種組織臟器的細(xì)胞。人類胚胎干細(xì)胞(human embryonic stem cell, HESC)的來(lái)源主要有三種:(1)從人工受精中捐獻(xiàn)的多余膈胎中獲??；(2)從死亡胎水尸體的原始生殖組織分離；(3)從體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移術(shù)所創(chuàng)造的胚胎中分離。成體干細(xì)胞可分為造血和非造血干細(xì)胞，非造血干細(xì)胞包括脂肪干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、皮膚干、肝臟干、心臟干、生殖干、肌肉干等，造血干細(xì)胞包括骨髓干、外周干、臍帶血干細(xì)胞、胎肝血干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有全能性，能分化為各個(gè)胚層來(lái)源的細(xì)胞，但是存在免疫排斥、致瘤性和倫理等問(wèn)題，因此胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用受到限制。成體干細(xì)胞避免了上述胚胎干細(xì)胞的缺點(diǎn)，且具有多向分化的潛能，在一定條件下也能分化為各個(gè)胚層來(lái)源的細(xì)胞，甚至能分化為多能干細(xì)胞、胚胎樣干細(xì)胞。目前，干細(xì)胞移植不僅在血液病、實(shí)體瘤、遺傳性疾病方面取得了良好的臨床療效，而且在神經(jīng)系統(tǒng)疾病、骨關(guān)節(jié)疾病、心血管疾病、代謝性疾病如糖尿病、自身免疫性疾病，以及在亞健康治療、抗衰老、美容等方面都有很好的應(yīng)用。人類胳帶間充質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilical mesenchymal stem cells, HUMSC)來(lái)源于婦女分娩時(shí)的臍帶組織。臍帶是指胎兒時(shí)期連接母體與胎兒的索狀結(jié)構(gòu)，其外被羊膜，內(nèi)含二條臍動(dòng)脈、一條臍靜脈，在動(dòng)靜脈之間含有特殊的胚胎粘液樣結(jié)締組織-華爾通氏膠(Whartonps Jelly),從華爾通氏膠分離得到的基質(zhì)細(xì)胞即為人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical mesenchymal stem cell, HUMSC)。研究表明，HUMSC 具有多向分化潛能和可塑性，可分化成三個(gè)胚層來(lái)源的組織細(xì)胞，如成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、胰島細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞、生殖細(xì)胞(如精原細(xì)胞、卵母細(xì)胞等)。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞用于移植有如下優(yōu)點(diǎn):(1)來(lái)源豐富，(2)采集時(shí)對(duì)新生兒和母體無(wú)任何傷害和痛苦，(3)以實(shí)物儲(chǔ)存用時(shí)即可將細(xì)胞復(fù)蘇或培養(yǎng)擴(kuò)增，而且體外擴(kuò)增能力強(qiáng)，(4)用于移植時(shí)無(wú)需組織配型、不發(fā)生移植物抗宿主病(GVHD、無(wú)巨細(xì)胞病毒(CMV)感染等。HUMSC的這些特點(diǎn)以及可分化為生殖細(xì)胞的潛能為人類的生殖保健帶來(lái)了福音。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明利用志愿者 的臍帶分離純化，并在特定的培養(yǎng)體系中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，在干細(xì)胞總數(shù)達(dá)到一定數(shù)目后，通過(guò)靜脈輸注，保養(yǎng)生殖系統(tǒng)。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有來(lái)源豐富、以實(shí)物儲(chǔ)存用時(shí)即可將細(xì)胞復(fù)蘇或培養(yǎng)擴(kuò)增、體外擴(kuò)增能力強(qiáng)、用于移植時(shí)無(wú)需組織配型、不發(fā)生移植物抗宿主病(GVHD、無(wú)巨細(xì)胞病毒(CMV)感染、無(wú)毒副作用和不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。HUMSC的這些特點(diǎn)以及可分化為生殖細(xì)胞的潛能為人類生殖保健提供了良好方法。
具體實(shí)施例方式通過(guò)本實(shí)施例來(lái)具體說(shuō)明本發(fā)明生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)。臍帶是連接胎盤(pán)與胎兒的組織，在胎兒出生的時(shí)候?qū)⑵浼粝拢渲泻写罅康拈g充質(zhì)干細(xì)胞，增殖能力強(qiáng)，用于移植時(shí)無(wú)需配型。本發(fā)明操作步序如下:(I)干細(xì)胞采集和加工，簽訂產(chǎn)婦臍帶和臍帶血捐獻(xiàn)同意書(shū)，在產(chǎn)房無(wú)菌條件下取得產(chǎn)婦臍帶血(AB血型)和臍帶，36小時(shí)內(nèi)在GMP車間的100級(jí)層流罩內(nèi)分離臍帶血:留取適當(dāng)樣品做質(zhì)檢(HBsAg、HCV-Ab, TP-Ab, HIVl/2-Ab、CMV-1gM)，700 轉(zhuǎn) / 分鐘離心 10 分鐘后去除臍帶血紅細(xì)胞，混勻后2800轉(zhuǎn)/分鐘離心25分鐘后用壓漿機(jī)去除血漿。在此過(guò)程中注意盡可能多地保留單核細(xì)胞。此臍血含有單核細(xì)胞、紅細(xì)胞和血漿。臍帶組織的處理:在與臍血同樣條件的廠房中去除臍帶中的血管和外膜，組織剪成Imm3大小。(2)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及傳代，臍帶組織加工完后接種于T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶，DMEM完全培養(yǎng)液并添加營(yíng)養(yǎng)因子，即10ng/ml ITS (胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒)，100u/ml青霉素，100u/ml 鏈霉素，20ng/ml of rEGF, 20ng/ml of rPDGF-bb, lOng/ml of LIF, 20ng/mlof bFGF。同時(shí)加入20%的分離純化的臍帶血干細(xì)胞，放置于37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)7-10天后，間充質(zhì)干細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出，換液，并補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)因子。間充質(zhì)干細(xì)胞匯合度達(dá)80%時(shí)，上清液取出(過(guò)濾以去除死亡的細(xì)胞及細(xì)胞碎片，待用)并用DMEM培養(yǎng)液洗滌間充質(zhì)干細(xì)胞，用0.25%胰酶-0.1 %膠原酶消化15分鐘，輕叩培養(yǎng)瓶使干細(xì)胞脫落(除去成纖維細(xì)胞等)。細(xì)胞懸液經(jīng)100目濾網(wǎng)過(guò)濾以去除組織塊，后用800r/min離心6min,以過(guò)濾的原培養(yǎng)液重懸,傳代于T175ml培養(yǎng)瓶(Pl代，培養(yǎng)瓶用10ug/ml的纖粘素包被)，原培養(yǎng)液、分離的臍帶血和DMEM新鮮的完全培養(yǎng)液各三分之一體積并補(bǔ)充間充質(zhì)干細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)因子，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)，每3-4天換液一次，之后的傳代按照I: 3比例傳。(3)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞特異誘導(dǎo)，P3代HUMSC上清液除去，經(jīng)0.25%胰酶-0.1%膠原酶消化15分鐘后，800r/min離心6min重懸,并接種于經(jīng)10ug/ml纖粘素包被的IOOmm的培養(yǎng)皿，以DMED完全培養(yǎng)液并增補(bǔ)20ng/ml of rEGF、20ng/ml of bFGF和20mU/ml人絨毛膜促性腺激素，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)48小時(shí)為男性生殖系保健移植之用；培養(yǎng)液增補(bǔ)20ng/ml of rEGF、20ng/ml of bFGF和15%濃度的卵泡液，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)48小時(shí)為女性生殖系保健移植之用。生移植物抗宿主病(GVHD、無(wú)巨細(xì)胞病毒(CMV)感染、無(wú)毒副作用和不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。HUMSC的這些特點(diǎn)以及可分化為生殖細(xì)胞的潛能為人類生殖保健提供了良好方法。
具體實(shí)施例方式通過(guò)本實(shí)施例來(lái)具體說(shuō)明本發(fā)明生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)。臍帶是連接胎盤(pán)與胎兒的組織，在胎兒出生的時(shí)候?qū)⑵浼粝?，其中含有大量的間充質(zhì)干細(xì)胞，增殖能力強(qiáng)，用于移植時(shí)無(wú)需配型。本發(fā)明操作步序如下:(I)干細(xì)胞 采集和加工，簽訂產(chǎn)婦臍帶和臍帶血捐獻(xiàn)同意書(shū)，在產(chǎn)房無(wú)菌條件下取得產(chǎn)婦臍帶血和臍帶，36小時(shí)內(nèi)在GMP車間的100級(jí)層流罩內(nèi)分離臍帶血:留取適當(dāng)樣品做質(zhì)檢(HBsAg、HCV-Ab, TP-Ab, HIVl/2-Ab、CMV-1gM)，700 轉(zhuǎn) / 分鐘離心 10 分鐘后去除臍帶血紅細(xì)胞，混勻后2800轉(zhuǎn)/分鐘離心25分鐘后用壓漿機(jī)去除血漿。在此過(guò)程中注意盡可能多地保留單核細(xì)胞。此臍血含有單核細(xì)胞、紅細(xì)胞和血漿。臍帶組織的處理:在與臍血同樣條件的廠房中去除臍帶中的血管和外膜，組織剪成Imm3大小。(2)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及傳代，臍帶組織加工完后接種于T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶，DMEM完全培養(yǎng)液并添加營(yíng)養(yǎng)因子，S卩10ng/ml ITS(胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒)，100u/ml青霉素，100u/ml 鏈霉素，20ng/ml of rEGF, 20ng/ml of rPDGF-bb, lOng/ml of LIF, 20ng/mlof bFGF。同時(shí)加入20%的分離純化的臍帶血干細(xì)胞，放置于37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)7-10天后，間充質(zhì)干細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出，換液，并補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)因子。間充質(zhì)干細(xì)胞匯合度達(dá)80%時(shí)，上清液取出(過(guò)濾以去除死亡的細(xì)胞及細(xì)胞碎片，待用)并用DMEM培養(yǎng)液洗滌間充質(zhì)干細(xì)胞，用0.25%胰酶-0.1 %膠原酶消化15分鐘，輕叩培養(yǎng)瓶使干細(xì)胞脫落(除去成纖維細(xì)胞等)。細(xì)胞懸液經(jīng)100目濾網(wǎng)過(guò)濾以去除組織塊，后用800r/min離心6min,以過(guò)濾的原培養(yǎng)液重懸,傳代于T175ml培養(yǎng)瓶(Pl代，培養(yǎng)瓶用10ug/ml的纖粘素包被)，原培養(yǎng)液、分離的臍帶血和DMEM新鮮的完全培養(yǎng)液各三分之一體積并補(bǔ)充間充質(zhì)干細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)因子，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)，每3-4天換液一次，之后的傳代按照I: 3比例傳。(3)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞特異誘導(dǎo)，P3代HUMSC上清液除去，經(jīng)0.25%胰酶-0.1%膠原酶消化15分鐘后，800r/min離心6min重懸,并接種于經(jīng)10ug/ml纖粘素包被的IOOmm的培養(yǎng)皿，以DMED完全培養(yǎng)液并增補(bǔ)20ng/ml of rEGF、20ng/ml of bFGF和20m U/ml人絨毛膜促性腺激素，37°C>5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)48小時(shí)為男性生殖系保健移植之用；培養(yǎng)液增補(bǔ)20ng/ml of rEGF、20ng/ml of bFGF和15%濃度的卵泡液，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中飽和濕度培養(yǎng)48小時(shí)為女性生殖系保健移植之用。(4)間充質(zhì)干細(xì)胞移植，將擴(kuò)增的干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)檢:經(jīng)體外處理的P3代HUMSC上清液收集做質(zhì)檢(革蘭氏菌涂片、厭氧菌、需氧菌培養(yǎng)、真菌和霉菌)，HUMSC經(jīng)0.25%胰酶-0.1 %膠原酶消化后800r/min離心6min重懸，用DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)液洗滌三次并進(jìn)一步質(zhì)檢如有核細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力觀察、流式檢測(cè)(CD44，CD73，CD90和CD105)、克隆集落形成實(shí)驗(yàn)。干細(xì)胞移植前告知患者或簽訂知情者同意書(shū)。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)質(zhì)檢合格后，以
3.7X105/KG的干細(xì)胞劑量經(jīng)手背靜脈輸注以生殖保健。剩余的干細(xì)胞凍存(將制備好的自體干細(xì)胞加入10% DMSO和1%· BSA，存入-196°液氮罐保存)。
權(quán)利要求
1.生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilical meschymal stem cell,HUMSC)技術(shù)，其特征在于: (1)干細(xì)胞采集和加工，采集的臍帶和臍帶血在GMP車間處理并接種于T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
(2)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及傳代，干細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)消化，傳代并使用條件培養(yǎng)基培養(yǎng)。
(3)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞特異誘導(dǎo)，HUMSC消化離心后用特異培養(yǎng)液培養(yǎng)以備移植之用。
(4)間充質(zhì)干細(xì)胞移植，經(jīng)質(zhì)檢合格后的HUMSC以以一定的干細(xì)胞劑量移植于生殖保健者。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)，其特征是:(I)干細(xì)胞采集和加工，選取病毒檢測(cè)陰性的產(chǎn)婦并與其簽訂臍帶和臍帶血捐獻(xiàn)同意書(shū)，無(wú)菌條件采集臍帶血和臍帶，并于100級(jí)層流罩內(nèi)留取樣品做質(zhì)檢(HBsAg、HCV-Ab、TP-Ab、HIVl/2-Ab、CMV-1gM)，經(jīng)過(guò)700轉(zhuǎn)/分鐘和2800轉(zhuǎn)/分鐘分別離心10分鐘和25分鐘，以去除紅細(xì)胞和血漿。臍帶組織在與臍血同樣的車間條件下去除血管和外膜，并將組織剪成Imm3大小碎塊。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)，其特征是:(2)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及傳代，處理完的臍帶組織塊接種于T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶，以DMEM完全培養(yǎng)液并添加營(yíng)養(yǎng)因子:10ng/ml ITS(胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒)、100u/ml青霉素、100u/ml鏈霉素、20ng/ml of rEGF、20ng/ml of rPDGF-bb、lOng/ml of LIF、20ng/ml of bFGF。同時(shí)加入20 %的分離純化后的臍帶血干細(xì)胞，常規(guī)培養(yǎng)7-10天換液。間充質(zhì)干細(xì)胞匯合度達(dá)80 %時(shí)用0.25%胰酶-0.1%膠原酶消化，并輕叩培養(yǎng)瓶利用差異粘附除去成纖維細(xì)胞等。細(xì)胞重懸后傳代于經(jīng)10ug/ml的纖粘素包被的T175ml培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)液為:原培養(yǎng)液過(guò)濾液、分離的臍帶血和DMEM新鮮的完全培養(yǎng)液各三分之一體積并補(bǔ)充間充質(zhì)干細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)因子，常規(guī)培養(yǎng)、換液及按照1: 3比例傳代。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)，其特征是:(3)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞特異誘導(dǎo)，P3代HUMSC經(jīng)胰酶-膠原酶消化后離心、重懸、接種于經(jīng)纖粘素包被的IOOmm 的培養(yǎng)皿，培養(yǎng)液:DMED完全培養(yǎng)液、20ng/ml of rEGF、20ng/ml of bFGF、20mU/ml 的人絨毛膜促性腺激素，常規(guī)培養(yǎng)48小時(shí)為男性生殖系保健移植之用；女性生殖系保健移植之用的培養(yǎng)液只改變?nèi)私q毛膜促性腺激素為15%濃度的卵泡液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞技術(shù)，其特征是:(4)間充質(zhì)干細(xì)胞移植，經(jīng)體外處理的P3代HUMSC上清液收集做質(zhì)檢(革蘭氏菌涂片、厭氧菌、需氧菌培養(yǎng)、真菌和霉菌)，HUMSC經(jīng)胰酶-膠原酶消化后離心、重懸，用DMED基礎(chǔ)培養(yǎng)液洗滌三次并質(zhì)檢如有核細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力觀察、流式檢測(cè)(CD44，CD73，CD90和CD105)、克隆集落形成實(shí)驗(yàn)。簽訂知情者 同意書(shū)后以3.7X105/KG的HUMSC劑量經(jīng)手背靜脈輸注以生殖保健。剩余的HUMSC以DMEM完全培養(yǎng)基加10% DMSO和1% BSA，存入-196°液氮罐保存。
全文摘要
一種利用志愿者的臍帶分離培養(yǎng)出能夠用于生殖保健用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，涉及基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、生殖保健醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。從志愿者的臍帶組織中分離純化出干細(xì)胞，并在特定的培養(yǎng)體系中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，在干細(xì)胞總數(shù)達(dá)到一定數(shù)目后，通過(guò)靜脈輸注，保養(yǎng)生殖系統(tǒng)。本間充質(zhì)干細(xì)胞可用于生殖系統(tǒng)保養(yǎng)及功能障礙治療，具有來(lái)源豐富、以實(shí)物儲(chǔ)存用時(shí)即可將細(xì)胞復(fù)蘇或培養(yǎng)擴(kuò)增、體外擴(kuò)增能力強(qiáng)、用于移植時(shí)無(wú)需組織配型、不發(fā)生移植物抗宿主病(GVHD、無(wú)巨細(xì)胞病毒(CMV)感染等優(yōu)點(diǎn)。用于保健或治療，無(wú)毒副作用和不良反應(yīng)。
文檔編號(hào)C12N5/0775GK103243069SQ20121003019
公開(kāi)日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2012年2月10日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月10日
發(fā)明者孫勇 申請(qǐng)人:孫勇