專利名稱：辣椒CaWRKY40基因在煙草耐高溫基因工程中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種辣椒CaWRKY40基因及其超表達載體的構(gòu)建及在基因工程中的應用，更具體地涉及到了該辣椒超表達載體在茄科植物煙草耐高溫基因工程中的應用，屬于植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
植物在其生長、發(fā)育過程中不可避免地遭受病蟲、極端溫度、干旱等生物和非生物逆境脅迫，在逆境脅迫下被誘導產(chǎn)生抗逆反應是植物在長期的進化過程中所形成的經(jīng)濟有效的抗逆機制，包括關(guān)閉其它抗逆途徑、適當減少用于生長和發(fā)育的物質(zhì)和能量、抗逆反應的負反饋調(diào)節(jié)使有限的物質(zhì)和能量在逆境脅迫期間盡可能地應用到相關(guān)的抗逆反應，并使抗逆反應強度不至于太大以減少物質(zhì)和能量的浪費和對自身的傷害，這種特定抗逆途徑的啟動、另一些抗逆途徑及生長的關(guān)閉都是通過復雜的信號傳遞網(wǎng)絡實現(xiàn)的。因此，信號網(wǎng)絡的剖析是闡明植物抗逆分子機制的重要途徑。研究表明，Ca2+信使、植物激素(SA、JA、ABA、 乙烯、油菜素內(nèi)酯等)、蛋白磷酸化、激酶、轉(zhuǎn)錄因子等組成了應答逆境的各種信號通路，它們彼此相互作用，構(gòu)成信號網(wǎng)絡，最終使細胞核內(nèi)的基因發(fā)生逆境、細胞、組織特異性的表達調(diào)整，調(diào)節(jié)植物生長并提高植物對逆境抗性。作為整合逆境信號從細胞質(zhì)傳遞進入細胞核并調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達轉(zhuǎn)錄因子，其在植物抗逆分子機制的闡釋及抗逆基因工程中的作用近年來受到了人們的高度重視，研究表明，WRKY、ATAFU MYB, AP2/ERF、CAERFU AREB, DREB 等參與了植物對逆境脅迫誘導抗性的調(diào)控，這些轉(zhuǎn)錄因子在轉(zhuǎn)基因植株中的超表達可顯著改善植物對特定逆境的抗性。因此，植物應答逆境的轉(zhuǎn)錄因子的分離、功能鑒定及其在植物抗逆基因工程中的應用已經(jīng)成了當前國際生物學界十分活躍的研究領(lǐng)域。辣椒是一種重要的蔬菜和工業(yè)原料作物，近年其播種面積居在蔬菜中僅次于大白菜居第二位，而其產(chǎn)值則居所有蔬菜之冠。辣椒生產(chǎn)是我國當前種植結(jié)構(gòu)調(diào)整，農(nóng)業(yè)增效和農(nóng)民增收的重要選擇然而，辣椒又十分忌連作，是土傳病害較多、發(fā)病較為嚴重的茄科植物，且對高溫、高濕敏感(高志奎.辣椒優(yōu)質(zhì)豐產(chǎn)栽培原理與技術(shù)[M].北京中國農(nóng)業(yè)出版社，2002. 19 20.)，培育和推廣應用抗病及抗逆的辣椒品種并采取相應的栽培管理技術(shù)是解決辣椒病害及逆境危害的根本技術(shù)措施，揭示辣椒等茄科植物抗病及抗逆分子機制是有效開展辣椒抗逆遺傳改良的重要基礎，轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)和功能鑒定則不僅有利于揭示辣椒等茄科植物抗病獲抗逆分子機制，還可為辣椒等作物抗逆遺傳改良提供有應用價值的基因。WKRY是一類植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族，在擬南芥中已發(fā)現(xiàn)74個成員，水稻含有 100多個成員，這些WRKY蛋白均含有由1到2個保守的WRKY功能域，由WRKYGQK序列和調(diào)節(jié)WRKY蛋白與DNA結(jié)合特性的CX4-7 -CX23-28 -HX1_2-(H/C)類鋅指域所構(gòu)成。根據(jù)所含WRKY保守域的數(shù)目，WRKY蛋白可分為3種類型，它們均可識別和結(jié)合靶基因啟動子上的 W盒(C/T)TGAC(T/C)并一定程度受到其側(cè)翼序列的影響，調(diào)節(jié)靶基因的表達。WRKY參與衰老、發(fā)育、休眠以及植物對環(huán)境脅迫的應答等生物學過程，迄今大量關(guān)于WRKY功能的研究報道主要集中在植物對病原菌、昆蟲等生物逆境以及干旱、鹽脅迫、高溫、重金屬脅迫、機械損傷、UV-B等非生物逆境脅迫應答和抗性中的作用。例如，擬南芥WRKY70和WRKY72不僅參與了植物對病原菌的基礎抗性(PTI)，還參與了 R基因介導的基因?qū)驅(qū)Ｒ恍钥剐?ETI) 水稻0sWRKY03、OsffRKYl3, WRKY45、0sffRKY71等基因超表達可提高對病原菌抗性。WRKY家族蛋白調(diào)控生物性狀的機制十分復雜，部分成員表現(xiàn)出功能特異性和多樣性，對同一種性狀起正調(diào)節(jié)或負調(diào)節(jié)等不同的作用；部分成員中一個WRKY蛋白可調(diào)節(jié)另一個WRKY基因的表達，或若干個WRKY蛋白協(xié)同作用，構(gòu)成復雜的WRKY調(diào)節(jié)網(wǎng)絡而表現(xiàn)出一定的功能冗余； 部分成員在植物應答不同生物逆境、非生物逆境甚至不同的生物逆境和非生物逆境的信號 crosstalk中充當重要的節(jié)點，表現(xiàn)出對多種逆境脅迫的應答和抗性。由于生物進化環(huán)境和途徑的多樣性，不同植物的WRKY家族成員的功能和作用機制、WRKY信號網(wǎng)絡以及在多種應答不同逆境的信號crosstalk中的作用機制可能都有其特異性。然而，迄今大量有關(guān)WRKY 結(jié)構(gòu)、功能和作用機制的研究多數(shù)集中在水稻、擬南芥等少數(shù)模式植物中的部分成員，對于大多數(shù)植物中WRKY家族的復雜作用機制還有待深入研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)現(xiàn)提供了一種辣椒6 / ^ 基因在煙草耐高溫基因工程中的應用，將大力促進煙草耐高溫基因工程的發(fā)展與應用。本發(fā)明的辣CaWRKY40基因至少含有如SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。構(gòu)建方法如下
將辣椒CaWRKY40基因與CaMV35S啟動子核心序列融合，構(gòu)建成CaWRKY40的超表達載體。所述的CaMV35S啟動子核心序列為CGACCGCAAG
ACCCTTCCTCTATATAAGGAAGTTCATTTCATTTGGAGAGGAC。所述辣椒 CaWRKY40 基因是從 UV-B 輻射辣椒葉片的cDNA文庫中分離獲得的CaWRKY40基因。構(gòu)建的超表達載體在茄科植物煙草耐高溫基因工程中的應用。將所述超表達載體 ^itAgrobacterium tumefaciens EHA105農(nóng)桿菌，采用葉盤遺傳轉(zhuǎn)化法侵染煙草得到轉(zhuǎn)基因煙草，結(jié)果證明提高了該轉(zhuǎn)基因?qū)煵莸哪透邷匦?，尤其是?2°C高溫下。本發(fā)明從辣椒UV-B處理下的cDNA文庫中分離獲得一個WRKY家族成員的全長
，其表達產(chǎn)物定位于細胞核，可與W盒結(jié)合，表現(xiàn)出WRKY蛋白的典型特征。 該基因在煙草中超表達可顯著提高轉(zhuǎn)基因煙草對高溫的耐性，表明6 / ^ 在植物應答高溫信號傳遞中起著重要的調(diào)節(jié)作用。本發(fā)明的顯著優(yōu)點
本發(fā)明的辣椒6 / ^ 基因在煙草中的超表達與野生型煙草相比顯著提高轉(zhuǎn)基因煙草的耐高溫能力，該基因在植物耐高溫基因工程中具有十分重要的應用價值。


圖1為CaWRKY40蛋白保守域分析； 圖2為CaWRKY40推定蛋白的疏水輪廓；
圖3為CaWRKY40在洋蔥表皮上的亞細胞定位； 圖4為pBT 10-GUS質(zhì)粒圖譜；圖5為CaWRKY40與W盒的瞬間表達分析； 圖6為CaWRKY40在高溫脅迫下的表達情況； 圖7為CaWRKY40在轉(zhuǎn)基因煙草中超表達對高溫脅迫的耐性。
具體實施例方式1載體構(gòu)建過程 1. 1材料
辣椒品種為江西省蓮花縣的地方辣椒品種120#，由福建農(nóng)林大學生命科學學院實驗室保存；烤煙品種品種由福建農(nóng)林大學病毒所惠贈；UV-B處理的辣椒葉片的cDNA文庫 (UV-B紫外線處理將植株置于離紫外燈(UV-B)下25cm處照射2h.6hU2h.24h和48h， 所有不同處理時間段處理的植物用液氮進行速凍處理后放入一 80°C冰箱保存)為福建農(nóng)林大學生命科學學院實驗室構(gòu)建(根據(jù)^witrogen公司試劑盒上的說明操作)，滴度高達 IXlO7 ； CloneMiner cDNA Library Construction Kit 和 Gateway 載體構(gòu)建試劑盒均購自美國^witrogen公司。B型質(zhì)粒小量快速提取試劑盒購自北京博大泰克生物基因技術(shù)有限責任公司，PCR相關(guān)dNTP、Taq酶、PCR buffer購自大連TaKaRa公司產(chǎn)品，反轉(zhuǎn)錄及 Real-Time PCR試劑盒購自大連TaKaRa公司。慶大霉素、卡那霉素、利福平、羧卞青霉素等為Sigma公司產(chǎn)品。其它化學試劑均為國產(chǎn)化學純。1.2 方法
1. 2. 1辣椒CaWRKY40候選基因的分離
以擬南芥的WRKY蛋白的氨基酸序列為探針，搜索獲得辣椒相關(guān)EST，通過對辣椒EST進行拼接，根據(jù)共有序列來設計、合成特異性引物，引物序列為Pl 5，-GCTCAAGTGATGAAGAGTC-3，；P2 :5，-AATGGTTGGTCCTGAAGG-3，。然后采用基于 PCR 技術(shù)的 96孔板法從cDNA文庫中篩選cDNA陽性克隆，測序結(jié)果表明，該cDNA陽性克隆的長度為 1431bp，其開放閱讀框長1086bp，推測編碼一個含361氨基酸(aa)、分子量39. 6 kDa、等電點(pi) 8. 12的蛋白質(zhì)，第168到234氨基酸序列之間是WRKY的保守區(qū)域(見圖1)，C端有一個C^2鋅指結(jié)構(gòu)，將該cDNA陽性克隆命名為CaWRKY40基因。在NCBI網(wǎng)站對CaWRKY40基因的氨基酸進行Bla^p同源序列搜索，可以發(fā)現(xiàn)該基因與其它不同植物已經(jīng)報道的WRKY基因的氨基酸序列有很大的同源性，與煙草、Nicotiana tabacum)WIZZ 的同源性最高 80%,與西芹 iPetroselinum crispum) transcription factor WRKY4 (gb | AAG35658. 11AF204925J 的同源性為 52%，與葡萄 iyitis aestivalis)\>\itatiYe WRKY4 transcription factor(AAR37421. 1)的同源性為 5396，與大豆〈Glycine WRKY27 (ABC26917. 1)的同源性為 48%，與矮橡樹{Larrea tridentata) WRKY transcription factor 21 (AAW30662. 1)的同源性為 47%。與 CaWRKY40 失系級近的WRKY蛋白的比對分析結(jié)果，可以看出保守性主要體現(xiàn)在WRKY結(jié)構(gòu)域。疏水性分析發(fā)現(xiàn) CaWRKY40的C端的少部分區(qū)域和中間大部分區(qū)域的疏水性較強，小部分區(qū)域的親水性較強 (圖 2)。1.2.2辣椒CaWRKY40基因超表達載體構(gòu)建
本發(fā)明應用gateway技術(shù)(Walhout et al.，2000)構(gòu)建雙子葉植物轉(zhuǎn)基因用超表達載體。首先根據(jù)gateway載體構(gòu)建技術(shù)設計并合成內(nèi)側(cè)特異引物WRKY40F 5-AAAAAGCAGGCTTATGGAATTTACCAGTTTGGTTGA-3 ；WRKY40R5-AGAAAGCTGGGTCT TACCATCTGCCCGTCTGA-3(第一輪)和外側(cè)接頭引物aiiBl 5，_G GGG ACA AGT TTG TAC AAA AAA GCA GGC T -3，；aiiB2 5，-GGG GAC CAC TTT GTA CAA GAA AGC TGG GT -3，(第二輪)。然后根據(jù)添加aiiB接頭的兩輪PCR擴增程序，在6 / ^ 基因兩側(cè)添加attB接頭， 兩輪PCR擴增程序程序如下
第一輪為了充分得到添加^iB接頭的PCR產(chǎn)物，在50μ1 PCR反應體系中內(nèi)側(cè)特異引物每種最多只能添加10 pmoles，擴增參數(shù)為 預變性 2min 95° C 1 cycle 變性 15 s 94° C 退火 30s 55° C 延伸 1 min 68° C 10 cycles 第二輪轉(zhuǎn)移第一輪PCR產(chǎn)物10 μ 1至含有40pmoles aiiBl和aiiB2外側(cè)接頭引物的40ylPCR混合液中，連續(xù)使用先低溫度退火再高溫特異退火的兩套擴增參數(shù)為 預變性 Imin95° C 1 cycle
變性 15 s94° C
退火 30 s45° C
延伸 1 min68° C 5 cycles
變性 15 s94° C
退火 30 s55° C
延伸 1 min68° C 15-20 cycles
瓊脂糖凝膠電泳檢測條帶質(zhì)量并膠回收純化aiiB-PCR產(chǎn)物。然后通過BP反應體系將目的基因(純化的WiB-PCR產(chǎn)物)克隆到入門載體 PD0NR207上形成入門克隆，pD0NR207-R0P,測序檢測目的基因序列無誤后，再通過LR反應體系將目的基因克隆轉(zhuǎn)移到超表達載體PMDC32，這樣也就將目的基因克隆于Ti質(zhì)粒的 CaMV35S啟動子下游，形成含目的基因的超表達載體，可實現(xiàn)其在轉(zhuǎn)基因植株內(nèi)的超表達， 最后參照分子克隆指南將含目的基因的超表達載體進一步轉(zhuǎn)化EHA105農(nóng)桿菌，以備用于煙草遺傳轉(zhuǎn)化。BP反應體系
PCR products100 ng
Vector (pD0NR207)30-50 ng
5X Buffer1 μ 1
BP enzyme mix0. 3 μ 1
Add water to total5 μ 1
25°C溫浴過夜，反應結(jié)束后加入蛋白酶K，37°C消化lOmin，將反應產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5 α感受態(tài)細胞。LR反應體系
Entry clone50-100 ng
Destination vector100 ngLR Enzyme mix0. 5 μ 1
Add water to total5 μ 1
25°C溫浴過夜，反應結(jié)束后加入蛋白酶K，37°C消化lOmin，將反應產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5a感受態(tài)細胞。 1.2.3辣椒CaWRKY40基因亞細胞定位
首選用EcoRI/ BamHI和Smal/BamHI這兩對限制性內(nèi)切酶酶切載體pEGAD，回收大片段連接。同時以連接在T載體上經(jīng)過測序的質(zhì)粒為模板，用引物擴增(WRKY40-GFPF:5-CGGAAT TCATGATGGAATTTACCAGTTTGGTTGA-3 EcoRI, WRKY40-GFPR:5-CGGGATCCTTACCATCTGCCCGTCTG A-3 ^>wm)CaWRKY40的完整編碼序列，同樣用EcoRI/ BamHI和Smal/BamHI雙酶切后插入到酶切回收的PEGAD載體上，構(gòu)建融合載體并通過PCR和酶切鑒定并測序驗證。鑒定成功的重組質(zhì)粒用基因槍轟擊洋蔥表皮細胞，導入洋蔥表皮后，將平板放入組培室避光培養(yǎng)對-36 h，使質(zhì)粒編碼的GFP融合蛋白在洋蔥表皮細胞內(nèi)充分表達。然后將洋蔥表皮置于雙蒸水中浸泡，再用0.45 mol/L甘露醇(用雙蒸水配制)處理1. 5 h，直至細胞發(fā)生質(zhì)壁分離，隨后在德國產(chǎn)Olimpus熒光顯微鏡上進行觀察，觀察條件為藍色激發(fā)光， 并進行圖象采集。從結(jié)果中可看出融合蛋白定位于細胞核中，從熒光顯微鏡下觀察到綠光 (見圖3)，說明這些基因與預測的結(jié)果相符，初步說明他們具有轉(zhuǎn)錄因子的特征。
1.2.4 CaWRKY40基因與W盒結(jié)合特性分析
植物中的WRKY蛋白被證實能與擁有核心序列TGAC或其互補序列GTCA的W盒元件結(jié)合 (Rushton et ah 1996) 0 WRKY蛋白與W盒元件結(jié)合己被許多體外和體內(nèi)的實驗所證實。瞬間表達分析是是一種較為簡便的方法，外源遺傳物質(zhì)導入植物細胞內(nèi)之后，作為一種基因組外的遺傳物質(zhì)在一定時間內(nèi)(降解之前)產(chǎn)生瞬間表達，并在轉(zhuǎn)化細胞內(nèi)積累表達產(chǎn)物。 我們在應用Gateway載體構(gòu)建技術(shù)構(gòu)建報告載體和效應載體的基礎上，應用瞬間表達分析技術(shù)對已分離的辣椒WRKY基因進行功能的初步鑒定，為后續(xù)研究奠定基礎。委托上海博亞生物技術(shù)公司合成下列順式作用元件(斜體部分為核心序列)單鏈， 兩端帶有BamHI和)(baI酶切位點粘性末端，使正反鏈退火合成的雙鏈兩側(cè)分別帶有BamHI 和)(bal兩個限制性酶切位點粘性末端。正義鏈5-GATCCTTATTCAGCCATCAAAAGT7i^O:AATA ATTTATTCAGCCATCAAAAGT7^CCAATAATT-3 ；反義鏈3-GAATAAGTCGGTAGTTTTCMC7^GT
TATTAAATAAGTCGGTAGTTTTCM^GTTATTAAGATC-5,
將等量的單鏈寡核苷酸溶解在50mM的NaCl溶液中，置于70°C 5min后，自然冷卻到室溫(30min)即可將單鏈合成雙鏈DNA。提取ρΒΤΙΟ-GUS質(zhì)粒(圖4)，并用BamHI和)(baI兩個限制性酶進行酶切，將酶切回收的大片段與2W盒順式作用元件的核苷酸雙鏈DNA用T4 DNA連接酶連接，連接產(chǎn)物即PBT10-2W-GUS，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH-5a，根據(jù)載體序列設計一對引物A1A2 正義鏈 5' AGCGAGGAAGCGGAAGAGC3 ‘，反義鏈5' GGACACCCGTAAGTCAGAC3 ‘，擴增片斷長度約為 300bp，篩選陽性單克隆并經(jīng)此引物PCR，測序鑒定(參照第二章操作)。1.2.5效應載體的構(gòu)建(見1.2.2) 1. 2. 6 瞬間表達
質(zhì)粒構(gòu)建完成后用基因槍(Bio-Rad PDS-1000/He)轟擊洋蔥鱗片內(nèi)表皮細胞，驗證質(zhì)粒的功能，設置PBT10-2W-GUS單質(zhì)粒轉(zhuǎn)化為陰性對照。過程包括(1)樣品制備將Iug/ul 質(zhì)粒 DNA 各 1 μ 1 與 25 μ 1 鎢粉(1. 6 μ m，60mg/ml)、25 μ 1 2. 5mol/L CaCl2 禾口 10 μ 1 0. lmol/L亞精胺在振蕩器上混勻，經(jīng)70%和無水乙醇充分脫水洗滌以后，懸浮于50 μ 1無水乙醇，取10μ 1滴加在載物膜上。( 轉(zhuǎn)化條件為樣品室真空度27Pa，壓力llOOpsi，樣品距載物膜距離為25cm。轟擊后于黑暗濕潤的環(huán)境下，室溫培養(yǎng)Mh。X-Gluc染色后在顯微鏡下觀察并拍照。采用瞬間表達實驗的方法證實了 6 / ^ 陽性克隆可與順式元件結(jié)合(見圖5)， 激活它所驅(qū)動的⑶S在洋蔥上表皮中表達，說明該基因是一個辣椒WRKY蛋白的編碼基因。2煙草轉(zhuǎn)基因植株的獲得與耐高溫分析 2. 1煙草遺傳轉(zhuǎn)化及Tl代轉(zhuǎn)基因種子的收獲
采用葉盤遺傳轉(zhuǎn)化法(徐剛標等，2007 ；植物基因工程(第二版))，利用1.2.2中所構(gòu)建的含目的基因的超表達載體的農(nóng)桿菌，侵染2個月的無菌野生型煙草1(3 小苗的葉盤 (0. 5cmX0. 5cm)。在含卡那霉素(100 mg/L)的MS培養(yǎng)基上篩選抗性小苗，并對抗性小苗的基因組DNA進行PCR檢測，以確定卡那霉素篩選的可靠性。獲得15個轉(zhuǎn)基因株系。所有的株系均用套袋自交收獲Tl代轉(zhuǎn)基因種子。利用T2代轉(zhuǎn)基因種子進行轉(zhuǎn)基因煙草表型分析與功能鑒定。參與植物高溫耐受的調(diào)控
本發(fā)明分析了 CaWRKY40在植物對高溫脅迫中的可能作用，將收獲的T2代轉(zhuǎn)基因種子及1(3 野生型成熟種子分別種子無菌水浸泡Mh，75%酒精30s，10%過氧化氫lOmin， 無菌水清洗5-6次，播種MS培養(yǎng)上，十五天后，移栽于育苗盤，一個月后選取大小一致的苗移栽于小花盆中培養(yǎng)9周后，辣椒6 / ^ 超表達和1(3 植株暴露于42°C，光照 1500LX-2000LX, 16day/8night光周期，高溫脅迫24h后，置于正常生長溫度25°C，光照 1500LX-2000LX, 16day/8night光周期，15天后拍照(見圖6)，辣椒CkTMT^ 超表達煙草植株相對于野生型對照表現(xiàn)出對42°C高溫的明顯耐性，野生型煙草出現(xiàn)整株萎蔫甚至死亡。 相同試驗至少重復三次以上，均有同一趨勢結(jié)果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，6 / ^ 轉(zhuǎn)基因煙草突變體對42°C高溫的耐性強于野生型對照(圖7)，說明CaWRKY40參與了植物對高溫的抗性調(diào)節(jié)。
3結(jié)果
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)辣椒&/ ^ 可顯著提高轉(zhuǎn)基因煙草對42° C以上高溫的耐性，該基因在植物耐高溫基因工程上具有十分重要的應用價值。
權(quán)利要求
1. 一個辣椒基因，其特征在于所述辣椒基因命名為fer^r勸基因，從UV - B處理的辣椒葉片的cDNA文庫分離獲得，該基因至少含有如SEQ ID No. 1所示的核苷酸序列。
2.一種如權(quán)利1要求所述基因的超表達載體的構(gòu)建方法，其特征在于將辣椒 CaWRKY40基因與CaMV35S啟動子核心序列融合，構(gòu)建成CaWRKY40的超表達載體。
3.一種含有權(quán)利要求1所述的基因或由權(quán)利要求2所述的方法構(gòu)建的超表達載體在煙草耐高溫基因工程中的應用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種辣椒CaWRKY40基因在煙草耐高溫基因工程中的應用，所述辣椒基因命名為CaWRKY40基因，從UV–B處理的辣椒葉片的cDNA文庫分離獲得，該基因至少含有如SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。所述的基因或由其構(gòu)建的超表達載體在煙草耐高溫基因工程中的應用。本發(fā)明的辣椒CaWRKY40基因在煙草中的超表達與野生型煙草相比顯著提高轉(zhuǎn)基因煙草的耐高溫能力，該基因在植物耐高溫基因工程中具有十分重要的應用價值。
文檔編號C12N15/82GK102260685SQ20111017705
公開日2011年11月30日 申請日期2011年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月28日
發(fā)明者何水林, 黨峰峰, 劉志欽, 官德義, 王育娜 申請人:福建農(nóng)林大學