專利名稱：一種利用基因工程培育新型不育系的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于基因工程和分子育種技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種利用基因工程培育新型不育系的方法，具體涉及到利用基因工程技術(shù)開發(fā)新型蕓薹屬物種細(xì)胞核不育系，將不育系轉(zhuǎn)移到其它物種，一系兩用，實(shí)現(xiàn)新的兩系法種子生產(chǎn)的方法。
背景技術(shù)：
雜種優(yōu)勢利用為解決全球糧食危機(jī)起了舉足輕重的作用。雜種優(yōu)勢是否能夠成功應(yīng)用取決于是否有育性徹底、操作方便和不存在與不育基因連鎖的不良性狀的不育系，以及是否有對應(yīng)的恢復(fù)完全和沒有與不良性狀連鎖的恢復(fù)系。目前作物不育體系主要有三類，一類是細(xì)胞質(zhì)不育，有時(shí)也被稱為細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核互作不育系；第二類為細(xì)胞核雄性不育；第三類為基因工程雄性不育。第一類不育類型操作相對簡單，不存在核不育系中需要去掉50%可育株情況；第二類細(xì)胞核雄性不育一般育性徹底，配制組合自由，容易出現(xiàn)強(qiáng)優(yōu)勢組合，特別是隱性核不育，許多材料都可以作為其恢復(fù)系，并且不受細(xì)胞質(zhì)的影響；第三類為基因工程雄性不育，一般育性徹底和含有除草劑基因，制種純度高，轉(zhuǎn)育相對容易。下面以油菜為例，介紹其不育系利用情況。目前我國栽培的油菜中，主要是甘藍(lán)型油菜。利用雄性不育系生產(chǎn)雜交種是我國油菜雜種優(yōu)勢利用的主要途徑。目前我國選育的雜交油菜品種，大約有50%雜交種主要是利用amMA和Polima等細(xì)胞質(zhì)雄性不育系生產(chǎn)。有40%的雜交種是利用細(xì)胞核雄性不育系制種，包括30%的無上位性基因控制的隱性核不育和10%的上位基因控制的隱性核不育和顯性核不育系，剩下的雜交種主要是化學(xué)殺雄制種其它類型。用于甘藍(lán)型油菜育種的細(xì)胞核雄性不育基因材料主要有3類一類是受兩對顯性基因Ms和Rf互作控制的核不育材料，如宜3A ；—類是由雙隱性基因(mSlmSlmS2mS2)控制的核不育材料，如117A;另外一類是基因互作類型，如甘藍(lán)型油菜核不育系20118A不育基因型為 aabbRfRf 或 aabbRfrf。細(xì)胞質(zhì)雄性不育(CMS)迄今為止，已報(bào)道的油菜CMS系約有20個(gè)，在生產(chǎn)中比較常用的有以下幾個(gè)(1)蘿卜胞質(zhì)不育系統(tǒng)；O) Nap胞質(zhì)不育系統(tǒng)Nap CMS)，又稱Siiga— Thompson系統(tǒng)；(3)波里馬胞質(zhì)不育系統(tǒng)(Polima CMS、Pol CMS或波里馬CMS) ； (4)陜2A 胞質(zhì)不育系統(tǒng)(陜2A CMS或Sian 2A CMS) ； (5)M1胞質(zhì)不育系統(tǒng)(Ml CMS)。其中，從所配三系雜交種的數(shù)量和雜交種的推廣面積來看，最有實(shí)用價(jià)值的油菜CMS為Polima CMS、陜 2A CMS兩大系統(tǒng)和蘿卜胞質(zhì)不育系統(tǒng)。盡管a!an2A和Polma細(xì)胞質(zhì)雄性不育系為中國甚至世界油菜做出了重要貢獻(xiàn)，但其細(xì)胞質(zhì)單一，并且易受溫度影響，育性的不穩(wěn)定性導(dǎo)致可育和不育的轉(zhuǎn)變，雜交種制種純度下降，一定比例的不育株的存在影響了雜交種產(chǎn)量潛力的發(fā)揮。所以發(fā)掘和創(chuàng)建新型雄性不育細(xì)胞質(zhì)一直是油菜品種改良的重要課題。Ogu CMS是一個(gè)新的油菜胞質(zhì)雄性不育類型(劉后利，1985;傅廷棟，2000)。目前改良后的Ogu不育系具有以下優(yōu)點(diǎn)幾乎所有的甘藍(lán)型油菜品種都是它的保持系；在不同的溫光條件下甘藍(lán)型油菜蘿卜質(zhì)不育材料的不育性表現(xiàn)都非常穩(wěn)定，不受環(huán)境條件影響， 并且其不育性徹底，無微粉現(xiàn)象發(fā)生，但受劇烈溫差影響出現(xiàn)死花蕾現(xiàn)象，恢復(fù)基因來源單一，恢復(fù)系轉(zhuǎn)育繁瑣，育種周期相對較長。德國NPZ公司發(fā)現(xiàn)的一種新的不育類型MSL，在國外使用比較廣泛。具有恢復(fù)系非常多，育性徹底的優(yōu)點(diǎn)，但也有保持系比較難培育和不育系死蕾嚴(yán)重的現(xiàn)象。細(xì)胞工程雄性不育最具有代表性的為TA^-barnase基因及轉(zhuǎn)基因雜種油菜。 Goldberg最早在煙草花器中發(fā)現(xiàn)TA^啟動(dòng)子。Marlani等研究發(fā)現(xiàn)，外源的TA^核酸酶基因在絨氈層中特異表達(dá)時(shí)，致使絨氈層細(xì)胞敗育，花粉發(fā)育不正常而表現(xiàn)為雄性不育。同時(shí)，有人將絨氈層專一啟動(dòng)子TA^與核酸抑制物基因構(gòu)成融合基因?qū)酥参?，與上述導(dǎo)入 TA29核酸酶基因后得到的雄性不育株雜交，在Fl雜交種中，由于TA^核酸抑制物基因表達(dá)，抑制了 TA^核酸酶的活性，從而育性恢復(fù)。現(xiàn)在這一技術(shù)已經(jīng)大面積推廣。缺點(diǎn)是在培育新的雜交組合時(shí)，不育系和恢復(fù)系要同時(shí)轉(zhuǎn)育，育種周期較長。核不育育種是油菜雜種優(yōu)勢利用的重要途徑之一，特別是隱性核不育系表現(xiàn)穩(wěn)定，恢復(fù)系廣，易選配強(qiáng)優(yōu)組合，易于回交轉(zhuǎn)育獲得新的不育系，并且一般不受恢保關(guān)系的限制，近年來應(yīng)用較多，主要有雙隱性核不育和三隱性核不育等。然而目前隱性核不育多采用兩系法，雖然恢復(fù)系很多，配制組合容易，但在制種時(shí)需要拔掉一半的可育單株，造成重大的人力資源浪費(fèi)。近幾年，也有人發(fā)現(xiàn)了具有上位抑制基因的三隱性核不育和顯性核不育，雖然部分解決了拔掉一半可育單株的問題，但臨保系選擇比較費(fèi)時(shí)費(fèi)力，在培育不育體系時(shí)花掉很多時(shí)間和精力，影響了育種速度。在隱性核不育系制種時(shí)，若去掉50%可育株不及時(shí)，會(huì)導(dǎo)致可育株和不育株雜交而影響制種的純度。雖然油菜雜種優(yōu)勢利用應(yīng)用廣泛，但各種不育系都有自己的不足。若將隱性細(xì)胞核不育的恢復(fù)系廣泛、組合配制容易、育性徹底、并且不受環(huán)境影響等優(yōu)點(diǎn)，與基因工程的抗除草劑基因結(jié)合，然后再將兩系育種可以簡化育種程序結(jié)合起來，將大大提高制種效率和制種純度。目前尚未有關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種利用基因工程培育新型細(xì)胞核雄性不育系的方法。該方法利用基因工程導(dǎo)入三類基因隱性核不育基因、篩選用的抗除草劑基因及攜帶有誘導(dǎo)啟動(dòng)子的恢復(fù)基因。可克服目前油菜隱性核不育兩系法制種時(shí)需要拔除一半可育單株的問題，利用抗除草劑基因可以提高制種純度，為蕓薹屬的雜種優(yōu)勢利用提供新的途徑。本發(fā)明的思路如下
從報(bào)道的隱性核不育基因中選擇一種控制甘藍(lán)型油菜隱性核不育的基因及其等位的恢復(fù)基因。以35S啟動(dòng)子連接隱性核不育基因，以及抗除草劑基因，接著以化學(xué)物質(zhì)或光誘導(dǎo)型啟動(dòng)子連接對應(yīng)的恢復(fù)基因，構(gòu)建三類組合基因。以基因工程方法將其導(dǎo)入甘藍(lán)型油菜中，獲得轉(zhuǎn)基因不育株系，噴灑化學(xué)試劑(若恢復(fù)基因攜帶的啟動(dòng)子為化學(xué)試劑誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，噴灑試劑后不育轉(zhuǎn)變?yōu)榭捎?或光照處理(若恢復(fù)基因攜帶的啟動(dòng)子為光照誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，則可以種植在不同緯度或不同海拔的區(qū)域使不育轉(zhuǎn)變成可育)誘導(dǎo)恢復(fù)基因的表達(dá)和獲得相應(yīng)的種子，此種子為不育系種子，所得單株可以與其它材料(絕大部分為恢復(fù)系)測配配制雜交組合；此不育系在轉(zhuǎn)育時(shí)可以直接與優(yōu)良材料回交多次，然后根據(jù)需要噴灑除草劑篩選出目標(biāo)單株，可簡化轉(zhuǎn)育程序和節(jié)約轉(zhuǎn)育時(shí)間。本發(fā)明依次通過如下步驟實(shí)現(xiàn)
1)采用植物表達(dá)載體PCAMB1301作為甘藍(lán)型油菜轉(zhuǎn)基因載體，將35S啟動(dòng)子連接隱性核不育基因以及抗除草劑基因，再以誘導(dǎo)型啟動(dòng)子與等位恢復(fù)基因連接，構(gòu)建三類組合基因的表達(dá)載體pCAMB 1301 ；
2)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株DH10B，在含有卡拉霉素的LB培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子，挑選單菌落提取質(zhì)粒，陽性的重組質(zhì)粒通過凍融法導(dǎo)入農(nóng)桿菌菌株LBA4404，得到陽性工程菌株；
3)采用常規(guī)的農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行甘藍(lán)型油菜遺傳轉(zhuǎn)化；
4)TO代植株檢測為陽性的單株觀察育性表現(xiàn)，通過RT-PCR和Southern雜交檢測，確定陽性轉(zhuǎn)基因隱性核不育單株；將成功導(dǎo)入不育基因的不育單株根據(jù)啟動(dòng)子類型苗期噴施化學(xué)試劑或光照處理，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，恢復(fù)基因表達(dá)，使不育變成可育單株，然后收獲種子；
5)不育系的轉(zhuǎn)育以成功導(dǎo)入目的基因的不育單株為母本、以甘藍(lán)型油菜為父本雜交， 回交出現(xiàn)育性分離，AA:Aa= 1 :1的分離比，以除草劑噴施處理，殺死純合的可育單株，留下雜合的可育株繼續(xù)回交，重復(fù)若干代直至雜合可育株綜合性狀與輪回親本相似，再將雜合不育株自交，將其中的不育單株作為大規(guī)模配制雜交組合的母本；
6)將不育系轉(zhuǎn)化為自身保持系不育單株通過噴施化學(xué)誘導(dǎo)劑或光照處理，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，使不育株育性恢復(fù)，自交保留種子，第二年繼續(xù)種植，在無誘導(dǎo)處理的情況下仍然表現(xiàn)不育；
7)將不育株做母本，以具有恢復(fù)基因的材料做恢復(fù)系，按規(guī)常規(guī)制種流程配制雜交組
I=I ο上述方法步驟1)所述的誘導(dǎo)型啟動(dòng)子是指化學(xué)試劑誘導(dǎo)型啟動(dòng)子或光照誘導(dǎo)型啟動(dòng)子?；瘜W(xué)誘導(dǎo)是指殺蟲劑誘導(dǎo)系統(tǒng)EcR，化學(xué)試劑是指含有蛻皮激素的殺蟲劑。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)
1、本發(fā)明的甘藍(lán)型油菜細(xì)胞核雄性不育系的不育性十分穩(wěn)定徹底，且不受環(huán)境(如低溫或高溫、光照和逆境)和遺傳背景的影響，不育系的不育性和不育株率均為100%，沒有死蕾現(xiàn)象，接受花粉能力很強(qiáng)，結(jié)實(shí)能力強(qiáng)，制種產(chǎn)量高；不存在基因累贅的情況。2、因?yàn)榛驗(yàn)殡[性核不育基因，恢復(fù)系很容易找到，常規(guī)甘藍(lán)型油菜中有90%以上的材料含有其恢復(fù)基因?；謴?fù)基因也不存在基因累贅現(xiàn)象。3、不育系無苗期黃化和蜜腺不發(fā)達(dá)的問題。4、本發(fā)明將不育系與保持系一體化，克服了保持不育系時(shí)出現(xiàn)50%可育株的矛盾，省去拔除可育株的步驟，省時(shí)省力。不育株率和不育度均為100%，不存在基因累贅現(xiàn)象。5、在需要轉(zhuǎn)育不育株時(shí)，對回交后代直接噴施除草劑，殺死純合的可育單株，保留雜合可育株，省去自交觀察育性分離的步驟，節(jié)省各項(xiàng)資源，加快育種進(jìn)程1-2倍。6本發(fā)明轉(zhuǎn)育的甘藍(lán)型油菜細(xì)胞核雄性不育系不僅可用于甘藍(lán)型油菜和其其它蕓薹屬物種的雜種優(yōu)勢育種，還可以應(yīng)用到水稻，玉米，高粱等其它作物中。
具體實(shí)施例方式培育甘藍(lán)型油菜新型不育系
1、確定雄性不育基因和誘導(dǎo)性啟動(dòng)子查詢已公開的控制花粉發(fā)育的基因。原則是 該基因的隱性突變只表現(xiàn)出雄性器官發(fā)生退化和花粉徹底敗育，而對其它部位沒有影響。 MALE STERILE 33 (MS33)是擬南芥一個(gè)控制花粉發(fā)育的基因，該基因突變會(huì)造成雄性不育，花絲變短，花粉發(fā)育受阻，導(dǎo)致花粉敗育。查詢和確認(rèn)誘導(dǎo)性啟動(dòng)子?？梢赃x擇兩類， 第一類為低成本、低毒或無毒、誘導(dǎo)后效果持續(xù)時(shí)間長的藥劑，如除草劑、抗蟲劑和各種農(nóng)藥，各種低價(jià)鹽類等藥品；第二類啟動(dòng)子為光照誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，通過種植在不同緯度或不同海拔的區(qū)域使不育轉(zhuǎn)變成可育。如春化有關(guān)基因的啟動(dòng)子，在春性油菜里表達(dá)，而在半冬性的油菜里不表達(dá)，在西北的春油菜區(qū)進(jìn)行種植育性可以恢復(fù)，而在長江中游區(qū)域和下游區(qū)域則表現(xiàn)出不育。本實(shí)例中采用殺蟲劑誘導(dǎo)系統(tǒng)EcR，此系統(tǒng)是Unger等利用歐洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)的蛻皮激素配基結(jié)合結(jié)構(gòu)域(EcR LBD)、玉米Cl激活域(AD)和 GAL4 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DBD)構(gòu)建化學(xué)誘導(dǎo)激活子，噴灑殺蟲劑可誘導(dǎo)該啟動(dòng)子發(fā)揮作用。2、以表達(dá)載體pCAMB1301作為甘藍(lán)型油菜轉(zhuǎn)基因載體。利用高保真PCR的方法，擴(kuò)增隱性突變基因片段，同理擴(kuò)增隱性核不育恢復(fù)基因片段。將抗除草劑Bar基因與隱性核不育基因片段與35S強(qiáng)啟動(dòng)子連接，同時(shí)將隱性核不育恢復(fù)基因與誘導(dǎo)型啟動(dòng)子EcR連接， 將具有三個(gè)基因和兩個(gè)啟動(dòng)子的連接片段克隆到PMD19-T載體，提取具有正確基因序列的質(zhì)粒連接到表達(dá)載體PCAMBIA301上，連接好的載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株DH10B，在含有卡拉霉素的LB培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子，挑選單菌落提取質(zhì)粒，正確的重組質(zhì)粒通過凍融法導(dǎo)入農(nóng)桿菌菌株LBA4404，遺傳轉(zhuǎn)化采用常規(guī)的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。3、提取轉(zhuǎn)基因陽性植株的葉片總DNA，經(jīng)過PCR鑒定轉(zhuǎn)化植株，PCR采用20ul的反應(yīng)體系，具體為20ngDNA 模板，IOmM Tris-Hcl, 50mM Kcl, 0. 1% Triton X-100,1. 8 mM MgCl2,0. 1 mMdNTP,0. 2 uM 引物，以及 IU Taq DNA polymerase ；PCR 的擴(kuò)增條件為94。C預(yù)變性 5 min ;94。C lmin，60。C lmin，72。C lmin，；35 循環(huán)；72。C lOmin，16。C IOmin ;PCR產(chǎn)物用
1%瓊脂糖凝膠電泳檢測，確定哪些為陽性轉(zhuǎn)基因植株。4、經(jīng)檢測確定為陽性植株的材料開花期肉眼觀察育性，收集其花粉以醋酸洋紅染液染色，觀察花粉粒飽滿程度，經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)全表現(xiàn)為不育單株的陽性植株花粉育性徹底。對表現(xiàn)不育材料的單株觀察其恢復(fù)基因的育性恢復(fù)情況不育單株苗期通過噴施蛻皮激素類似物殺蟲劑，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子啟動(dòng)表達(dá)，同時(shí)進(jìn)行花期育性觀察，將可育單株的花粉以醋酸洋紅染液染色，觀察花粉粒形狀，判斷花粉育性，經(jīng)證實(shí)在化學(xué)試劑誘導(dǎo)的條件下，恢復(fù)基因可以表達(dá)，自交得到種子。5、將成功表達(dá)各基因的轉(zhuǎn)基因植株做母本，進(jìn)行不育系的轉(zhuǎn)育。挑選綜合性狀優(yōu)良的甘藍(lán)型油菜作為父本雜交，F(xiàn)l全表現(xiàn)可育，與優(yōu)良單株回交，AA =Aa =1 1的分離比， 以除草劑噴施處理，殺死純合的可育單株，留下的雜合可育株與綜合性狀優(yōu)良的材料繼續(xù)回交，重復(fù)若干代直至雜合可育株綜合性狀與輪回親本相似，再將雜合不育株自交，將其中的不育單株作為大規(guī)模配制雜交組合的母本。6、不育系繁殖不育單株苗期通過噴施蛻皮激素類似物殺蟲劑，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，花期出現(xiàn)的可育株上套袋自交，保留不育系種子，第二年將收獲的種子種植，在不噴施噴施蛻皮激素類似物殺蟲劑情況下不育單株仍然表現(xiàn)為不育，作為配制雜交組合的母本。
7、大面積規(guī)范化種植不育株作為母本，以適應(yīng)本地條件、綜合性狀優(yōu)良、配合力高的材料作為父本，在通風(fēng)，光照條件優(yōu)良的地域隔離其余甘藍(lán)型油菜材料種植，收獲母本不育株的種子作為生產(chǎn)用雜交種。
權(quán)利要求
1.一種利用基因工程培育新型不育系的方法，其特征在于，依次通過如下步驟實(shí)現(xiàn)1)采用植物表達(dá)載體PCAMB1301作為甘藍(lán)型油菜轉(zhuǎn)基因載體，將35S啟動(dòng)子連接隱性核不育基因以及抗除草劑基因，再以誘導(dǎo)型啟動(dòng)子與等位恢復(fù)基因連接，構(gòu)建三類組合基因的表達(dá)載體pCAMB 1301 ；2)連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株DH10B，在含有卡拉霉素的LB培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)化子，挑選單菌落提取質(zhì)粒，陽性的重組質(zhì)粒通過凍融法導(dǎo)入農(nóng)桿菌菌株LBA4404，得到陽性工程菌株；3)采用常規(guī)的農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行甘藍(lán)型油菜遺傳轉(zhuǎn)化；4)TO代植株檢測為陽性的單株觀察育性表現(xiàn)，通過RT-PCR和Southern雜交檢測，確定陽性轉(zhuǎn)基因隱性核不育單株；將成功導(dǎo)入不育基因的不育單株根據(jù)啟動(dòng)子類型苗期噴施化學(xué)試劑或光照處理，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，恢復(fù)基因表達(dá)，使不育變成可育單株，然后收獲種子；5)不育系的轉(zhuǎn)育以成功導(dǎo)入目的基因的不育單株為母本、以甘藍(lán)型油菜為父本雜交， 回交出現(xiàn)育性分離，AA:Aa= 1 :1的分離比，以除草劑噴施處理，殺死純合的可育單株，留下雜合的可育株繼續(xù)回交，重復(fù)若干代直至雜合可育株綜合性狀與輪回親本相似，再將雜合不育株自交，將其中的不育單株作為大規(guī)模配制雜交組合的母本；6)將不育系轉(zhuǎn)化為自身保持系不育單株通過噴施化學(xué)誘導(dǎo)劑或光照處理，調(diào)節(jié)誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，使不育株育性恢復(fù)，自交保留種子，第二年繼續(xù)種植，在無誘導(dǎo)處理的情況下仍然表現(xiàn)不育；7)將不育株做母本，以具有恢復(fù)基因的材料做恢復(fù)系，按規(guī)常規(guī)制種流程配制雜交組合
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述的誘導(dǎo)型啟動(dòng)子是指化學(xué)試劑誘導(dǎo)型啟動(dòng)子或光照誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，化學(xué)誘導(dǎo)是指殺蟲劑誘導(dǎo)系統(tǒng)EcR， 化學(xué)試劑是指含有蛻皮激素的殺蟲劑。
全文摘要
一種利用基因工程培育新型細(xì)胞核雄性不育系的方法，屬于作物分子育種技術(shù)領(lǐng)域。該方法利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將35S啟動(dòng)子與隱性核不育基因以及抗除草劑基因連接，同時(shí)將誘導(dǎo)型啟動(dòng)子與恢復(fù)基因連接，將三類基因一并轉(zhuǎn)入作物中。轉(zhuǎn)基因的陽性株系在沒有誘導(dǎo)條件下，表現(xiàn)為100%不育，通過調(diào)節(jié)誘導(dǎo)啟動(dòng)子的表達(dá)調(diào)節(jié)恢復(fù)基因活性變成可育。收獲種子下代種植時(shí)，在沒有誘導(dǎo)條件下，為全不育系，這樣可以繁殖100%的隱性核不育系。不育系可與大量的其它材料(恢復(fù)系)雜交，配制雜交組合。本發(fā)明轉(zhuǎn)化的陽性株系能夠抗除草劑，在不育系轉(zhuǎn)育過程中可以有效的去除純合可育株，省時(shí)省力。應(yīng)用本發(fā)明方法可以提高雜交種純度、簡化保持系的選育和傳統(tǒng)不育系的培育程序，突破核不育系在作物雜種優(yōu)勢利用中的瓶頸。隱性核不育株在誘導(dǎo)下自交可育，后代全不育，繁殖不育系和制種均可。
文檔編號A01H3/04GK102172212SQ20111005007
公開日2011年9月7日 申請日期2011年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月2日
發(fā)明者付東輝, 付鷹, 呂俊, 李加納, 肖美麗, 錢偉 申請人:西南大學(xué)