專(zhuān)利名稱(chēng):一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于一種食品和醫(yī)療產(chǎn)品重要的中間體鳥(niǎo)嘌呤核苷的生產(chǎn)方法。 背景技術(shù):
鳥(niǎo)嘌呤核苷(商品名稱(chēng)GR)又名9-i3_D-呋喃核糖基鳥(niǎo)嘌呤,簡(jiǎn)稱(chēng)鳥(niǎo)嘌呤核苷, 英文名稱(chēng)Guanosine。鳥(niǎo)嘌呤核苷為白色結(jié)晶性粉末或類(lèi)白色結(jié)晶性粉末,溶于水、嘧啶,不溶于醇。分子式為CltlH13H5O5,相對(duì)分子量為283. 24?;瘜W(xué)結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法,其特征如下所述(1)搖瓶液體菌種培養(yǎng)①選用枯草芽孢菌GDGR-1006為保藏菌種,②將葡萄糖、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、蘋(píng)果酸、酵母粉、瓊脂、水按比例配制成初級(jí)菌種培養(yǎng)基裝入茄瓶,③在步驟②所述的初級(jí)菌種培養(yǎng)基中接入保藏菌種,靜置培養(yǎng)后獲得初級(jí)菌種,④將所述的初級(jí)菌種放入搖瓶培養(yǎng)基中,在往復(fù)式搖床上培養(yǎng),獲得搖瓶液體菌種;(2)高產(chǎn)率鳥(niǎo)苷發(fā)酵液制?、賹⑵咸烟且?、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、蘋(píng)果酸、酵母粉、水按比例配制成二級(jí)菌種培養(yǎng)基,經(jīng)蒸汽滅菌一段時(shí)間泵入二級(jí)種子罐,降溫后再接入步驟(1)④所述的搖瓶菌種,并將經(jīng)壓縮、過(guò)濾后的無(wú)菌空氣輸入二級(jí)種子罐,培養(yǎng)后獲得二級(jí)菌種,②將葡萄糖液、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、蘋(píng)果酸、酵母粉、水按比例配制成發(fā)酵培養(yǎng)基,蒸汽滅菌一段時(shí)間泵入發(fā)酵罐,降溫后接入步驟( ①所述的二級(jí)菌種,同時(shí)在步驟(2)① 的保壓、無(wú)菌空氣輸入的條件下,將經(jīng)蒸汽滅菌、降溫后葡萄糖液與蘋(píng)果酸同時(shí)進(jìn)行連續(xù)流加,發(fā)酵培養(yǎng)后獲得鳥(niǎo)嘌呤核苷發(fā)酵液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法,其特征是初級(jí)菌種培養(yǎng)基原料的重量百分比為葡萄糖磷酸氫二鉀硫酸鎂蘋(píng)果酸酵母粉瓊脂水=1% 士0. 5% 0. 2% 士0. 2% 0. 1% 士0. 1% 0. 1% 士0. 1% 2% 士 2% 2% 士 2% 94. 6% 士 4.9%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法, 其特征是搖瓶菌種培養(yǎng)基原料的重量百分比為葡萄糖磷酸氫二鉀硫酸鎂蘋(píng)果酸 酵母粉水=3% 士0. 5% 0. 2% 士0. 2% 0. 士0. 0. 士0. 1. 5% 士 1. 5% 95. 1% 士2. 4%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法, 其特征是二級(jí)菌種培養(yǎng)基原料的重量百分比為葡萄糖磷酸氫二鉀硫酸鎂蘋(píng)果酸 酵母粉水=5% 士0. 5% 0. 2% 士0. 2% 0. 士0. 0. 士0. 1. 5% 士 1. 5% 93. 1% 士2. 9%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法,其特征是發(fā)酵培養(yǎng)基原料的重量百分比為葡萄糖磷酸氫二鉀硫酸鎂蘋(píng)果酸 酵母粉水=15% 士3% 0.2% 士0.2% 0. 士0. 0. 士0. 1.0% 士 83. 6% 士4. 4%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法,其特征是采用50 70g/dL葡萄糖液與重量百分比為0. 1% 士0. 02%蘋(píng)果酸的方式進(jìn)行連續(xù)流加。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提高枯草芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率的方法,它由搖瓶液體菌種培養(yǎng)、鳥(niǎo)嘌呤核苷發(fā)酵液制取兩大工藝過(guò)程組成。選用了遺傳穩(wěn)定的保藏菌種GDGR-1006,在發(fā)酵過(guò)程中采用添加蘋(píng)果酸和流加葡萄糖液、蘋(píng)果酸的新工藝,克服了傳統(tǒng)工藝育種技術(shù)落后、發(fā)酵培養(yǎng)基C∶N比例失調(diào)、菌種產(chǎn)苷不高、發(fā)酵周期長(zhǎng)、轉(zhuǎn)化率低等不足,菌種同步生產(chǎn)率和產(chǎn)苷水平高,發(fā)酵產(chǎn)苷水平高,鳥(niǎo)嘌呤核苷產(chǎn)率可達(dá)45g/L以上,轉(zhuǎn)化率28%以上。
文檔編號(hào)C12R1/125GK102154415SQ20111006389
公開(kāi)日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2011年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月17日
發(fā)明者王健, 蔡傳康, 閆汝?yáng)| 申請(qǐng)人:許昌瑞達(dá)生物科技有限公司