專利名稱：一種微生物餌料添加劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物餌料添加劑及其制備方法。
技術(shù)背景
近些年來，我國的南美白對蝦養(yǎng)殖業(yè)在不斷的發(fā)展，但隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大導(dǎo)致 養(yǎng)殖環(huán)境的日益惡化，出現(xiàn)了成蝦免疫力下降、幼蝦生長慢、成活率低等一些問題，嚴(yán)重制 約了南美白對蝦養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。南美白對蝦微生物餌料添加劑作為一種綠色添加劑近些年 來發(fā)展非常迅速，它不僅能改善動物體腸道微生態(tài)環(huán)境和分泌消化酶，提高餌料轉(zhuǎn)化率，預(yù) 防疾病，促進(jìn)生長；而且可以降低水中氨氮、亞硝酸鹽和H2S等含量，對改善水質(zhì)也起到了非 常關(guān)鍵的作用。南美白對蝦微生物餌料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用非常廣泛，但其對南美白 對蝦生長和消化酶活性的影響還很少見報道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問題是針對以上問題，提供一種微生物餌料添加劑及其制備方 法，該微生物餌料添加劑具有提高南美白對蝦的抗逆性，增加幼蝦產(chǎn)量和改善養(yǎng)殖水體狀 況的功能。
為解決以上問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種微生物餌料添加劑，其特征在 于所述添加劑包括以下重量比的成分
蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物10 40%、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物10 40%、凝結(jié)芽孢桿菌 5 20%、植物乳桿菌培養(yǎng)物10 40%、嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物10 40%和沼澤紅假單胞菌 培養(yǎng)物5 20%。
作為上述技術(shù)方案的進(jìn)一步改進(jìn)
所述添加劑包括以下重量比的成分
蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物30%、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物10%、植 物乳桿菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物50%和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物10%。
所述蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌的混合比以重量計是1 1。
所述植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌的混合比以重量計是1 1。
所述制備方法包括如下步驟
a、制備蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為5-10 %的豆芽汁、0. 2-0. 5 %的葡萄糖和0. 5-1. 5 %的蛋白胨，余 量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度為32-36°C、PH值7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵 16-28小時后，放罐，制得蠟樣芽胞菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
b、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物枯草芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng) 基含有重量比為5-10%的豆芽汁、0. 2-0. 5%的葡萄糖和0. 5-1. 5%的蛋白胨、余量為作為 溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度32-36°C、PH值7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵16-28小時 后，放罐，制得枯草芽胞菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
C、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為0. 05-1%的蔗糖、0. 01-0. 5%的MgS047H20、0. 005-0. 5%的FeCl3、 0. 05-0. 5%的CaCO3和0. 01-0. 的NaCl，pH值為7. 0-8. 5，余量為作為溶劑的水，接種量 為0. 3%，在30-35°C、pH值為7. 2-8. 5下培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng) 物；
d、制備植物乳桿菌培養(yǎng)物將植物乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培 養(yǎng)基含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨和0. 5-1%的酵母浸膏，余量為作 為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度32-36°C下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得植物乳桿菌發(fā)酵培 養(yǎng)物；
e、制備嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物將嗜酸乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培 養(yǎng)基含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨和0. 5-1%的酵母浸膏，余量為作 為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度32-36°C下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得嗜酸乳桿菌發(fā)酵培 養(yǎng)物；
f、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng) 基中，培養(yǎng)基含有重量比5-10%的豆芽汁和0. 1-0. 5%的氯化鈉，余量為作為溶劑的水，接 種量為0. 3%，在溫度25-35°C、光照恒溫培養(yǎng)36-96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物。
所述制備方法包括如下步驟
取蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽胞桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌和沼澤 紅假單胞菌培養(yǎng)物，按照所述重量比混合、分裝，制成微生物餌料添加劑。
所述制備方法包括如下步驟
將蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽胞桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌和沼澤 紅假單胞菌培養(yǎng)物按照所述重量比混合，得到混合液，混合液離心后與碳酸鈣混合，混合液 與碳酸鈣的重量比為1 3，在45°c-75°c條件下干燥，得到固體微生物餌料添加劑。
所述制備方法包括如下步驟
a、制備芽胞桿菌混合培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌和枯草芽胞桿菌1 1比例的種 子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為5-10%的豆芽汁、0. 2-0. 5%的葡 萄糖和0. 5-1. 5%的蛋白胨、余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度32-36°C、PH值 7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵16- 小時后，放罐，制得芽胞菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；
b、制備乳桿菌混合培養(yǎng)物將植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌1 1比例的種子液接 入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨合 0. 5-1 %的酵母浸膏，余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3 %，在溫度32-36°C下厭氧發(fā)酵 后，放罐，獲得乳桿菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；
C、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為0. 05-1%的蔗糖、0. 01-0. 5%的MgS047H20、0. 005-0. 5%的FeCl3、 0. 05-0. 5%的CaCO3和0. 01-0. 的NaCl，pH值為7. 0-8. 5，余量為作為溶劑的水，接種量 為0. 3%，在30-35°C、pH值為7. 2-8. 5下培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng) 物；
d、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng) 基中，培養(yǎng)基含有重量比5-10%的豆芽汁和0. 1-0. 5%的氯化鈉，余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度25-35°C、光照恒溫培養(yǎng)36-96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物。
所述制備方法包括如下步驟
取蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物、植物乳桿 菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物，按以上重量比混合、分裝，制成微生 物餌料添加劑。
所述制備方法包括如下步驟
將蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物、植物乳桿 菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物按照所述重量比混合，得到混合液， 混合液離心后與碳酸鈣混合，混合液與碳酸鈣的重量比為1 3，在45°C-75°C條件下干燥， 得到固體微生物餌料添加劑。
所述各菌培養(yǎng)物其菌種名稱是蠟樣芽胞桿菌CMCC63305(B.CereuS)、枯草芽 胞桿菌 K-M(B. subtilis)、植物乳桿菌 ASl. 557 (L. phantarum)、嗜酸乳桿菌 ATCC5221 (L. acidophilus)、凝結(jié)芽孢桿菌 AS 1. 152 (B. coagulans)、沼澤紅假單胞菌 981. 982 (Rhodo eudomona alustris),這些菌株均為市售菌株。
上述微生物餌料添加劑在南美白對蝦養(yǎng)殖中的用法如下
(1)餌料添加在干餌料中添加比例為1000 1;在濕餌料中添加比例為 3000 1。
(2)水面噴灑南美白對蝦育苗室水體水面噴灑，每立方水體用量5ml ；蝦圈養(yǎng)殖 水體噴灑，每畝米水體用量1000ml。
用于海參、鮑魚育苗養(yǎng)殖
(1)餌料添加在干餌料中添加比例為1000 1;在濕餌料中添加比例為 3000 1。
(2)水面噴灑鮑魚育苗室水體水面噴灑，每立方水體用量5ml。
用于扇貝育苗養(yǎng)殖水面噴灑扇貝育苗室水體水面噴灑，每立方水體用量ani。
本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，具有以下優(yōu)點
(1)采用蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、 沼澤紅假單胞菌進(jìn)行復(fù)合，通過餌料添加和水中噴灑方法使用，可提高南美白對蝦的抗逆 性，增加幼蝦產(chǎn)量和改善養(yǎng)殖水體質(zhì)量的作用。
(2)采用單一菌種分批發(fā)酵和多菌種混合發(fā)酵技術(shù)可充分利用各菌種的生長特點 減少發(fā)酵次數(shù)獲得最大數(shù)量的有益微生物，降低生產(chǎn)成本。
(3)采用固體形式制備的南美白對蝦微生物餌料添加劑便于長期儲存和運輸，其 使用效果穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。
(4)本菌劑主要利用多種具有益生作用芽孢菌作為主要生產(chǎn)菌種，可保障產(chǎn)品的 有效活菌數(shù)量，延長產(chǎn)品的質(zhì)保期和貨架期。
(5)本菌劑中的活菌數(shù)達(dá)到10 30億/毫升，固體菌劑活菌數(shù)達(dá)到50 100億/克。
(6)本發(fā)明生物制劑的原材料是來源廣泛、成本低廉，并可進(jìn)行大規(guī)模的生產(chǎn)，產(chǎn) 品成本低，效果好，生物安全性高，發(fā)酵周期短，菌劑制備工藝簡單，具有工業(yè)化生產(chǎn)的可能 性，宜于普及和推廣。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
具體實施方式
實施例1，微生物餌料添加劑，包括蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物15%、枯草芽胞桿菌培養(yǎng) 物15%、凝結(jié)芽孢桿菌10%、植物乳桿菌培養(yǎng)物25%、嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物25%和沼澤紅假 單胞菌培養(yǎng)物10%。
按照以下方法制備
a、制備蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為5%的豆芽汁、0. 2%的葡萄糖和1 %的蛋白胨，余量為作為溶劑的 水，接種量為0. 3%，在溫度為32 °C、PH值7. 2的條件下有氧發(fā)酵M小時后，放罐，制得蠟 樣芽胞菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
b、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物枯草芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng) 基含有重量比為5%的豆芽汁、0.2%的葡萄糖和的蛋白胨、余量為作為溶劑的水，接種 量為0. 3%，在溫度32°C、PH值7. 2的條件下有氧發(fā)酵20小時后，放罐，制得枯草芽胞菌發(fā) 酵培養(yǎng)物；
C、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為1 %的蔗糖、0. 01 %的MgS047H20、0. 005 %的FeCl3、0. 2%的CaCO3 和0. 1 %的NaCl, pH值為7. 0，余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在35°C、pH值為7. 2 下培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
d、制備植物乳桿菌培養(yǎng)物將植物乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培 養(yǎng)基含有重量比為2%的葡萄糖、的蛋白胨和0.5%的酵母浸膏，余量為作為溶劑的水， 接種量為0. 3%，在溫度36°C下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
e、制備嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物將嗜酸乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培 養(yǎng)基含有重量比為2%的葡萄糖、的蛋白胨合0.5%的酵母浸膏，余量為作為溶劑的水， 接種量為0. 3%，在溫度36°C下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得嗜酸乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；
f、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng) 基中，培養(yǎng)基含有重量比5 %的豆芽汁和0. 1 %的氯化鈉，余量為作為溶劑的水，接種量為 0. 3%，在溫度25°C、光照恒溫培養(yǎng)96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物。
將蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽胞桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌和沼澤 紅假單胞菌培養(yǎng)物，按照所述重量比混合、分裝，制成微生物餌料添加劑。
實施例2，將實施例1的各菌種培養(yǎng)物經(jīng)離心后按重量比為1 3與碳酸鈣載體 混合、并在45°C _75°C條件下干燥的方法來制備上述菌體培養(yǎng)物的固體菌粉，最終產(chǎn)品中 各種固體菌粉的混合和比例為蠟樣芽胞菌1 %、枯草桿菌1 %、植物乳桿菌2 %、嗜酸乳桿 菌2 %、凝結(jié)芽胞桿菌1 %、沼澤紅假單胞菌1 %，載體為海藻粉，經(jīng)混合，分裝，制成固體微 生物餌料添加劑。
實施例3，微生物餌料添加劑，包括蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物 30%、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物10%、植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物50%和沼澤紅假單 胞菌培養(yǎng)物10%。
按下述方法制備各混合菌種發(fā)酵液
a、制備蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌和枯草芽胞 桿菌重量計1 1比例的種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為5%的豆 芽汁、0. 5%的葡萄糖和的蛋白胨、余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度32°C、 PH值7. 2的條件下有氧發(fā)酵M小時后，放罐，制得芽胞菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；
b、制備植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物將植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌1 1 比例的種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為2%的葡萄糖、的蛋白 胨和0. 5%的酵母浸膏，余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在溫度36°C下厭氧發(fā)酵后， 放罐，獲得乳桿菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；
C、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培 養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比5 %的豆芽汁和0. 1 %的氯化鈉，余量為作為溶劑的水，在溫度 25°C、光照恒溫培養(yǎng)96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物；
d、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比為1 %的蔗糖、0. 01 %的MgS047H20、0. 005 %的FeCl3、0. 2%的CaCO3 和0. 1 %的NaCl, pH值為7. 0，余量為作為溶劑的水，接種量為0. 3%，在35°C、pH值為7. 2 培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物。
取蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物、植物乳桿 菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物，按以上重量比混合、分裝，制成微生 物餌料添加劑。
實施例4，將實施例3的各菌種培養(yǎng)物經(jīng)離心后按重量比為1 3與碳酸鈣載體 混合、并在45°C _75°C條件下干燥的方法來制備上述菌體培養(yǎng)物的固體菌粉，最終產(chǎn)品中 各種固體菌粉的混合和比例為蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物菌粉3%、凝 結(jié)芽胞桿菌菌粉1%、植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物菌粉4%、沼澤紅假單胞菌菌粉 1 %，載體為海藻粉或其他對南美白對蝦無害固體粉末，經(jīng)混合，分裝，制成固體微生物餌料 添加劑。
微生物餌料添加劑的用法如下
1、餌料添加在干餌料中添加比例為1000 1 ；在濕餌料中添加比例為3000 1.
2、水面噴灑南美白對蝦育苗室水體水面噴灑，每立方水體用量5ml ；蝦圈養(yǎng)殖水 體噴灑，每畝米水體用量1000ml。
將以上制備的微生物餌料添加劑應(yīng)用于進(jìn)行南美白對蝦進(jìn)行試驗，得到以下結(jié) 果
1、采用微生物餌料添加劑對南美白對蝦進(jìn)行靜水式的耗氧率和排氨率實驗。 在30天實驗結(jié)束后，投喂微生物餌料添加劑實驗組的耗氧率和排氨率分別為0. 2249, 0. 52^ang(g*h)-l，而對照組的耗氧率和排氨率分別為0. 16,0. 20mg(g*h)-1o實驗組耗氧 率和排氨率高于對照組，表明實驗組的南美白對蝦生理代謝能力最強。
2、采用微生物餌料添加劑對南美白對蝦進(jìn)行特定生長率的實驗。實驗組和對照組 的南美白對蝦的特定生長率分別時是0. 95和0. 30。從特定生長率的均值可以看出投喂微 生物南美白對蝦微生物餌料添加劑對促進(jìn)南美白對蝦生長具有明顯的作用。
3、采用微生物餌料添加劑可提高南美白對蝦消化酶活性，酶活性高可以提高刺蝦 對餌料中營養(yǎng)成分的吸收，從而促進(jìn)其生長。
4、本發(fā)明微生物南美白對蝦微生物餌料添加劑能可提高南美白對蝦的抗逆性，增 加幼蝦產(chǎn)量和改善養(yǎng)殖水體質(zhì)量的作用。
微生物餌料添加劑用海參、鮑魚育苗養(yǎng)殖用法如下
1、餌料添加在于餌料中添加比例為1000 1 ；在濕餌料中添加比例為3000 1。
2、水面噴灑海參、鮑魚育苗室水體水面噴灑，每立方水體用量5ml。
微生物餌料添加劑用于海參、鮑魚育苗實施效果
1、本發(fā)明微生物餌料添加劑能可提高海參、鮑魚的抗逆性，增加幼體產(chǎn)量和改善 養(yǎng)殖水體質(zhì)量的作用。
2、本發(fā)明微生物餌料添加劑能可提高海參、鮑魚幼苗的附著性，減少滑板和死亡。
權(quán)利要求
1.一種微生物餌料添加劑，其特征在于所述添加劑包括以下重量比的成分蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物10 40%、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物10 40%、凝結(jié)芽孢桿菌5 20%、植物乳桿菌培養(yǎng)物10 40%、嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物10 40%和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng) 物5 20%。
2.如權(quán)利要求1所述的一種微生物餌料添加劑，其特征在于所述添加劑包括以下重 量比的成分蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物30%、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物10%、植物乳 桿菌和嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物50%和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物10%。
3.如權(quán)利要求2所述的一種微生物餌料添加劑，其特征在于所述蠟樣芽胞桿菌株和 枯草芽胞桿菌的混合比是1 1。
4.如權(quán)利要求2所述的一種微生物餌料添加劑，其特征在于所述植物乳桿菌和嗜酸 乳桿菌的混合比是1 1。
5.按照權(quán)利要求1所述微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制備方法包 括如下步驟a、制備蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培 養(yǎng)基含有重量比為5-10%的豆芽汁、0. 2-0. 5%的葡萄糖和0. 5-1. 5%的蛋白胨，溶劑為 水，在溫度為32-36°C、PH值7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵16- 小時后，放罐，制得蠟樣芽胞 菌發(fā)酵培養(yǎng)物；b、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物枯草芽胞桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含 有重量比為5-10%的豆芽汁、0. 2-0. 5%的葡萄糖和0. 5-1. 5%的蛋白胨、溶劑為水，在溫 度32-36°C、PH值7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵16- 小時后，放罐，制得枯草芽胞菌發(fā)酵培 養(yǎng)物；C、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中， 培養(yǎng)基含有重量比為 0. 05-1 % 的蔗糖、0. 01-0. 5 % 的 MgS047H20、0. 005-0. 5 % 的 FeCl3、 0. 05-0. 5% 的 CaCO3 和 0. 01-0. 的 NaCl，pH 值為 7. 0-8. 5，溶劑為水，在 30-35°C、pH 值 為7. 2-8. 5下培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；d、制備植物乳桿菌培養(yǎng)物將植物乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基 含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨和0. 5-1%的酵母浸膏，在溫度32-36°C 下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得植物乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；e、制備嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物將嗜酸乳桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基 含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨和0. 5-1%的酵母浸膏，在溫度32-36°C 下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得嗜酸乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；f、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比5-10%的豆芽汁和0. 1-0. 5%的氯化鈉，在溫度25-35°C、光照恒溫 培養(yǎng)36-96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物。
6.按照權(quán)利要求5所述的微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制備方法 包括如下步驟取蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽胞桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌和沼澤紅假 單胞菌培養(yǎng)物，按照所述重量比混合、分裝，制成微生物餌料添加劑。
7.按照權(quán)利要求5所述的微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制備方法 包括如下步驟將蠟樣芽胞桿菌、枯草芽胞桿菌、凝結(jié)芽胞桿菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌和沼澤紅假 單胞菌培養(yǎng)物按照所述重量比混合，得到混合液，混合液離心后與碳酸鈣混合，混合液與碳 酸鈣的重量比為1 3，在45°C-75°C條件下干燥，得到固體微生物餌料添加劑。8.如權(quán)利要求2-4其中之一所述微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制 備方法包括如下步驟a、制備芽胞桿菌混合培養(yǎng)物將蠟樣芽胞桿菌和枯草芽胞桿菌1 1比例的種子液接 入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為5-10%的豆芽汁、0. 2-0. 5%的葡萄糖和 0. 5-1. 5%的蛋白胨、溶劑為水，在溫度32-36°C、PH值7. 2-8. 5的條件下有氧發(fā)酵16- 小 時后，放罐，制得芽胞菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；b、制備乳桿菌混合培養(yǎng)物將植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌1 1比例的種子液接入已經(jīng) 滅菌后的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基含有重量比為1-3%的葡萄糖、0. 5-1. 5%的蛋白胨合0. 5-1% 的酵母浸膏，在溫度32-36°C下厭氧發(fā)酵后，放罐，獲得乳桿菌混合發(fā)酵培養(yǎng)物；C、制備凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)物將凝結(jié)芽孢桿菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基中， 培養(yǎng)基含有重量比為 0. 05-1 % 的蔗糖、0. 01-0. 5% 的 MgS047H20、0. 005-0· 5 % 的 FeCl3、 0. 05-0. 5% 的 CaCO3 和 0. 01-0. 的 NaCl，pH 值為 7. 0-8. 5，溶劑為水，在 30-35°C、pH 值
8. 2-8. 5下培養(yǎng)48小時，放罐，獲得凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)物；d、制備沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物將沼澤紅假單胞菌種子液接入已經(jīng)滅菌后的培養(yǎng)基 中，培養(yǎng)基含有重量比5-10%的豆芽汁和0. 1-0. 5%的氯化鈉，在溫度25-35 °C、光照恒溫 培養(yǎng)36-96小時，得到沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物。
9.如權(quán)利要求8所述微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制備方法包括 如下步驟取蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物、植物乳桿菌和 嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物，按以上重量比混合、分裝，制成微生物餌 料添加劑。
10.如權(quán)利要求8所述微生物餌料添加劑的制備方法，其特征在于所述制備方法包括 如下步驟將蠟樣芽胞桿菌株和枯草芽胞桿菌混合培養(yǎng)物、凝結(jié)芽胞桿菌培養(yǎng)物、植物乳桿菌和 嗜酸乳桿菌混合培養(yǎng)物和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物按照所述重量比混合，得到混合液，混合 液離心后與碳酸鈣混合，混合液與碳酸鈣的重量比為1 3，在45°C-75°C條件下干燥，得到 固體微生物餌料添加劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種微生物餌料添加劑，包括蠟樣芽胞桿菌培養(yǎng)物10～40％、枯草芽胞桿菌培養(yǎng)物10～40％、凝結(jié)芽孢桿菌5～20％、植物乳桿菌培養(yǎng)物10～40％、嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物10～40％和沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物5～20％，可提高南美白對蝦的抗逆性，增加幼蝦產(chǎn)量和改善養(yǎng)殖水體質(zhì)量的作用，采用單一菌種分批發(fā)酵和多菌種混合發(fā)酵技術(shù)可充分利用各菌種的生長特點減少發(fā)酵次數(shù)獲得最大數(shù)量的有益微生物，降低生產(chǎn)成本。
文檔編號C12R1/085GK102028103SQ201010590799
公開日2011年4月27日 申請日期2010年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月12日
發(fā)明者唐玉光, 夏學(xué)德, 姜成斌, 曲嫣紅, 袁杰利 申請人:夏學(xué)德, 姜成斌, 曲嫣紅