專利名稱：一種羊血紅蛋白多肽粉及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于功能食品原料、功能食品、食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑，具體涉及一種羊血紅蛋白
多肽粉及其制備方法。
背景技術(shù)：
血液蛋白質(zhì)具有極高的生物效價，含有人體所需的8種必需氨基酸，其組成平衡， 為優(yōu)質(zhì)蛋白源。但是目前動物血液，特別是羊血大部分被以污水的形式排放或丟棄，導(dǎo)致 大量寶貴營養(yǎng)資源流失，并且給環(huán)境造成了嚴(yán)重污染。在羊血液中，血紅蛋白占其總蛋白 質(zhì)含量的60 70%。血紅蛋白生物活性肽具有很多極為重要的功能活性，如阿片樣活性 (Brantl， 1986 ;Piot， 1992 ;Zhao， 1996 ;Zhao， 1997 ;Nyberg， 1997 ;Lignot， 1999) 、 ACE抑制 活性(Hyun&Shin，2000)、增強(qiáng)血管舒緩激肽活性(Piot， 1992)、剌激細(xì)菌生長活性(Zhao， 1997)、鎮(zhèn)痛活性(Takagi，1979 ;Zhao， 1997)、抗菌活性(Daoud，2005 ;Froidevaux， 2001 ; Li印ke， 2003 ;Parish， 2001)等。加工血紅蛋白不但有助于環(huán)境的保護(hù)，而且可以充分利 用血液中大量寶貴的蛋白質(zhì)，開發(fā)為高附加值的功能產(chǎn)品。蛋白多肽能夠保護(hù)機(jī)體心腦血 管健康，能加速白細(xì)胞的恢復(fù)及增強(qiáng)體力，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，能夠安全、有效地達(dá)到預(yù)防、抑 制、緩解和輔助治療心血管疾病及高血壓的目的。目前有關(guān)血紅蛋白產(chǎn)物的專利主要有《一 種血紅蛋白多肽粉及其制備方法》(申請?zhí)枮?00810222237. 9)、《一種血紅蛋白多肽氨基 酸營養(yǎng)物及其制備方法》(申請?zhí)枮?00810222240. 0)、《一種抗氧化活性肽及其制備方法》 (申請?zhí)枮?00810103445. 7)，但是沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)羊血紅蛋白多肽粉的報道，原因之一是 羊血帶有膻味，難以作為食品成分應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種無膻味的羊血紅蛋白多肽粉，本發(fā)明方法血紅蛋白多 肽粉的得率達(dá)到85%以上。 本發(fā)明的另一 目的是提供上述羊血紅蛋白多肽粉的制備方法 實現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案如下 —種羊血紅蛋白多肽粉，按照如下方法制備 (1)、按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均勻， 然后在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊 血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液； (2)、將所得羊血紅蛋白溶液置于密封容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到 0. 07 0. 09兆帕?xí)r，加熱到60 7(TC抽氣3 5min，得到無膻味的羊血紅蛋白溶液；
(3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為10 15%，調(diào)節(jié)pH為 6. 3 7.0，按照木瓜蛋白酶與羊血紅蛋白之間質(zhì)量比為1 : 100 200的比例向羊血紅蛋 白溶液中加入木瓜蛋白酶，然后在35 4(TC、pH 6. 3 7. 0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)3 5h， 再在85 90。C保溫3 5min，接著冷卻至20°C ， 4000 6000g離心6 10min，取上清液，得水解產(chǎn)物； (4)、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3 5ku的過濾膜超濾2 3次，
收集過濾液；過濾液經(jīng)過濃縮、干燥，得到羊血紅蛋白多肽粉。 上述羊血紅蛋白多肽粉步驟(1)中所述的羊血優(yōu)選為新鮮羊血。 上述羊血紅蛋白多肽粉步驟(1)中所述的相對離心力優(yōu)選為5000g。 上述羊血紅蛋白多肽粉步驟(2)中所述的真空度優(yōu)選為0. 08兆帕。 上述羊血紅蛋白多肽粉步驟(3)中所述的相對離心力優(yōu)選為5000g。 上述羊血紅蛋白多肽粉步驟(3)中所述的調(diào)節(jié)pH是利用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)。 所述的木瓜蛋白酶可于市場上購買。如廣西南寧杰沃利生物制品有限公司生產(chǎn)的 木瓜蛋白酶。 上述羊血蛋白多肽粉的制備方法，按照如下步驟進(jìn)行 (1)、按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均勻， 然后在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊 血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液； (2)、將所得羊血紅蛋白溶液置于密封容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到 0. 07 0. 09兆帕?xí)r，加熱到60 7(TC抽氣3 5min，制備得到無膻味的羊血紅蛋白溶液；
(3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為10 15%，調(diào)節(jié)pH為 6. 3 7.0，按照木瓜蛋白酶與羊血紅蛋白之間質(zhì)量比為1 : 100 200的比例向羊血紅蛋 白溶液中加入木瓜蛋白酶，然后在35 40°C、 pH6. 3 7. 0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)3 5h， 再在85 90。C保溫3 5min，接著冷卻至20°C ， 4000 6000g離心6 10min，取上清液， 得水解產(chǎn)物； (4)、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3 5ku的過濾膜超濾2 3次，
收集過濾液；過濾液經(jīng)過濃縮、干燥，得到羊血紅蛋白多肽粉。 上述制備方法步驟(1)中所述的羊血優(yōu)選為新鮮羊血。 上述制備方法步驟(1)中所述的相對離心力優(yōu)選為5000g。 上述制備方法步驟(2)中所述的真空度優(yōu)選為0. 08兆帕。 上述制備方法步驟(3)中所述的相對離心力優(yōu)選為5000g。 上述制備方法步驟(3)中所述的調(diào)節(jié)pH是利用鹽酸或氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。
本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉的應(yīng)用，可作為功能食品原料、功能食品、食品營養(yǎng)強(qiáng)化 劑。 本發(fā)明具有的優(yōu)點(1)本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉營養(yǎng)價值高，具有抗氧化、免疫調(diào) 節(jié)、降血壓等作用。(2)本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉無膻味，采用真空泵抽氣法，能脫除羊血蛋 白多肽粉中80 90%的膻味，使其風(fēng)味能被消費者所接受。(3)、本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉安 全性高，無副作用，因是采用食品級蛋白酶(木瓜蛋白酶)經(jīng)在溫和條件下酶解獲得的。(4)、 本發(fā)明制備方法簡便易行，成本低。(5)本發(fā)明減少了羊血的排放，減少了環(huán)境污染。
具體實施例方式
實施例1羊血紅蛋白多肽粉的制備
按照如下步驟進(jìn)行 (1)、向500g羊血液中加入濃度為20%的檸檬酸三鈉溶液10g，攪拌均勻，然后在 5000g離心(TGL-16A離心機(jī)，長沙平凡儀器儀表有限公司)6min，分離得到兩層溶液，下層 為羊血紅蛋白溶液(325g)，上層為羊血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液(325g)。
(2)、將羊血紅蛋白溶液置于密閉容器中，然后用真空泵抽氣，在真空度達(dá)到0. 085 兆帕?xí)r，升溫到65t:抽氣3分鐘，得到無膻味的羊血紅蛋白溶液。 (3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為12%，調(diào)節(jié)pH為6. 5， 加入木瓜蛋白酶(廣西南寧杰沃利生物制品有限公司生產(chǎn))0.5g，在37t:、pH 6.5條件下 進(jìn)行水解反應(yīng)3h，然后在85t:下保溫5min，再冷卻到2(TC，在4000g離心6min，取上清液，
得水解產(chǎn)物。 (4)、將步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3ku的過濾膜超濾2次，取過濾液； 過濾液經(jīng)過濃縮、冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)12小時，得到羊血紅 蛋白多肽粉52克。 實施例2羊血紅蛋白多肽粉的制備
按照如下步驟進(jìn)行 (1)、向1000g羊血中加入濃度為20X的檸檬酸三鈉溶液22g，攪拌均勻，然后在 5500g離心(TGL-16A離心機(jī)，長沙平凡儀器儀表有限公司)6min，分離得到兩層溶液，下層 為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液(655g)。
(2)、將羊血紅蛋白溶液置于密閉容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到0. 086 兆帕?xí)r，升溫到65t:抽氣4分鐘，得到無膻味的羊血紅蛋白溶液。 (3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為13%，調(diào)節(jié)pH為6. 5， 加入木瓜蛋白酶0. 9g，在37°C 、pH6. 5條件下進(jìn)行水解反應(yīng)4h，然后在85。C下保溫5min，再 冷卻到20°C ，在4000g離心6min，取上清液，得水解產(chǎn)物； (4)、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3ku的過濾膜超濾2次，取過濾液。 過濾液經(jīng)過濃縮、冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)14小時，得到羊血紅 蛋白多肽粉103克。 實施例3羊血紅蛋白多肽粉的制備
按照如下步驟進(jìn)行 (1)、向1000g羊血中加入濃度為20%的檸檬酸三鈉溶液18g，攪拌均勻，然后在
5000g離心(TGL-16A離心機(jī)，長沙平凡儀器儀表有限公司)8分鐘，分離得到兩層溶液，下層
為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液(648g)。 (2)、將所得羊血紅蛋白溶液置于密閉容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到
0. 087兆帕?xí)r，升溫到64t:抽氣4分鐘，得到無膻味的羊血紅蛋白溶液。 (3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為13%，調(diào)節(jié)pH為6. 6，
加入木瓜蛋白酶1. Og，在37°C、pH 6. 6條件下進(jìn)行水解反應(yīng)3. 5h，然后在88。C下保溫5分
鐘，再冷卻到20°C ，在4500g離心7min，取上清液，得水解產(chǎn)物； (4)、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3ku的過濾膜超濾2次，取過濾液。 過濾液經(jīng)過濃縮、冷凍干燥(FD-1PF，北京德天佑科技發(fā)展有限公司)13小時，得到羊血紅 蛋白多肽粉101克。
權(quán)利要求
一種羊血紅蛋白多肽粉，按照如下方法制備(1)、按照重量百分比為0.3～0.5％的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均勻，然后在4000～6000g離心6～10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液；(2)、將所得羊血紅蛋白溶液置于密封容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到0.07～0.09兆帕?xí)r，加熱到60～70℃抽氣3～5min，制備得到無膻味的羊血紅蛋白溶液；(3)、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為10～15％，調(diào)節(jié)pH為6.3～7.0，按照木瓜蛋白酶與羊血紅蛋白之間質(zhì)量比為1∶100～200的比例向羊血紅蛋白溶液中加入木瓜蛋白酶，然后在35～40℃、pH 6.3～7.0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)3～5h，再在85～90℃保溫3～5min，接著冷卻至20℃，4000～6000g離心6～10min，取上清液，得水解產(chǎn)物；(4)、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3～5ku的過濾膜超濾2～3次，收集過濾液；過濾液經(jīng)過濃縮、干燥，得到羊血紅蛋白多肽粉。
2. 按照權(quán)利要求l所述的羊血紅蛋白多肽粉，其特征在于其步驟(1)中所述的羊血為 新鮮羊血。
3. 按照權(quán)利要求1或2所述的羊血紅蛋白多肽粉，其特征在于其步驟(1)中所述的相 對離心力為5000g。
4. 按照權(quán)利要求3所述的羊血紅蛋白多肽粉，其特征在于其步驟(2)中所述的真空度 為0. 08兆帕。
5. 按照權(quán)利要求4所述的羊血紅蛋白多肽粉，其特征在于其步驟(3)中所述的相對離 心力為5000g。
6. 權(quán)利要求1所述的羊血蛋白多肽粉的制備方法，按照如下步驟進(jìn)行(1) 、按照重量百分比為0. 3 0. 5%的比例向羊血中加入檸檬酸三鈉，攪拌均勻，然后 在4000 6000g離心6 10min，分離為兩層溶液，下層為羊血紅蛋白溶液，上層為羊血漿 蛋白溶液，收集下層的羊血紅蛋白溶液；(2) 、將所得羊血紅蛋白溶液置于密封容器中，然后用真空泵抽氣，當(dāng)真空度達(dá)到 0. 07 0. 09兆帕?xí)r，加熱到60 7(TC抽氣3 5min，制備得到無膻味的羊血紅蛋白溶液；(3) 、用水將步驟(2)所得的羊血紅蛋白溶液稀釋至濃度為10 15% ，調(diào)節(jié)pH為6. 3 7.0，按照木瓜蛋白酶與羊血紅蛋白之間質(zhì)量比為1 : 100 200的比例向羊血紅蛋白溶 液中加入木瓜蛋白酶，然后在35 4(TC、pH 6. 3 7. 0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)3 5h，再在 85 90。C保溫3 5min，接著冷卻至20°C ， 4000 6000g離心6 10min，取上清液，得水 解產(chǎn)物；(4) 、對步驟(3)所得的水解產(chǎn)物經(jīng)過分子量為3 5ku的過濾膜超濾2 3次，收集 過濾液；過濾液經(jīng)過濃縮、干燥，得到羊血紅蛋白多肽粉。
7. 按照權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于其步驟(1)中所述的羊血為新鮮羊血。
8. 按照權(quán)利要求6或7所述的制備方法，其特征在于其步驟(1)中所述的相對離心力 為5000g。
9. 按照權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于其步驟(2)中所述的真空度為0.08兆帕。
10.按照權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于其步驟(3)中所述的相對離心力為 5Q00g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羊血紅蛋白多肽粉及其制備方法，屬于食品添加劑領(lǐng)域。本發(fā)明主要是向羊血中加入檸檬酸三鈉，然后離心分離得到羊血紅蛋白溶液，再將羊血紅蛋白溶液置于密閉容器中用真空泵抽氣，將其中的膻味去掉；接著用水稀釋羊血紅蛋白溶液，加入木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng)，離心收集酶解產(chǎn)物；再用超濾膜超濾、濃縮、干燥即得羊血紅蛋白多肽粉。本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉營養(yǎng)價值高，具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、降血壓等作用；其次，本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉無膻味，消費者易于接受；本發(fā)明羊血紅蛋白多肽粉安全性高，無副作用；本發(fā)明制備方法簡便易行，成本低；本發(fā)明減少了羊血的排放，減少了環(huán)境污染。
文檔編號A23J3/34GK101744092SQ20101000093
公開日2010年6月23日 申請日期2010年1月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月21日
發(fā)明者伏圣興, 楊蘇揚, 蘇東明, 蘇巖, 薛可 申請人:遼源市麒鳴生物技術(shù)綜合開發(fā)有限公司