專利名稱：適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽。
背景技術(shù)：
細(xì)胞記錄槽是為了配合膜片鉗技術(shù)的開展而設(shè)計制造，其用途是提供給 急性分離的活細(xì)胞、培養(yǎng)細(xì)胞、活體瞬時組織切片等置于其中之后，能繼續(xù) 保持一個長時間存活的場所，使膜片鉗鉗制細(xì)胞過程得以順利完成。而且， 細(xì)胞記錄槽還是提供為維持活體細(xì)胞長時間存活而加于細(xì)胞外液進(jìn)行交換的 場所，這種交換是由附屬加藥裝置向細(xì)胞記錄槽中的活體細(xì)胞或切片注入合 符不同要求的、經(jīng)氧飽和的細(xì)胞外液，或者注入混有不同濃度的藥物成分的 細(xì)胞外液，經(jīng)充分作用細(xì)胞后，由附屬的真空泵把細(xì)胞記錄槽中過多的細(xì)胞 外液吸出，但又要保留一定量細(xì)胞外液在記錄槽中，讓細(xì)胞或切片沉附在細(xì) 胞記錄槽底部不被灌流液沖走，便于實驗者對細(xì)胞或切片進(jìn)行膜片鉗實驗。 細(xì)胞記錄槽還應(yīng)成為適合附屬的加熱系統(tǒng)對記錄槽進(jìn)行加熱保纟顯，維持細(xì)胞 記錄槽中活體細(xì)胞的生理需求的傳溫導(dǎo)體。目前市面上銷售的細(xì)胞記錄槽， 盡管看似簡單，但多為進(jìn)口產(chǎn)品，價格昂貴， 一個細(xì)胞記錄槽加上相配的適 配器需要幾百美金；另一方面，這些進(jìn)口細(xì)胞記錄槽存在著如噪音干擾大、 液體的流動和交換不方便、不易清洗等各自不同的缺陷，不能完全達(dá)到上述 提到的各種要求。為克服目前市售細(xì)胞記錄槽存在的缺陷和不足，需要研發(fā) 一種新的適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽。 發(fā)明內(nèi)容
本實用新型的目的是提供一種設(shè)計簡單，用材隨意，容積大小適宜、能 顯著降低噪音千擾、透光度和保溫效果好、液體的流動和交換方便、易除雜 質(zhì)、易于清洗的價廉物美的適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽。
為了實現(xiàn)本實用新型的目的，提供一種適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記 錄槽，包括槽體(l)、細(xì)胞槽(2)和加藥槽(W)，在槽體的中央有細(xì)胞槽，細(xì)胞槽 以載玻片(3)為槽底，在細(xì)胞槽上部四周拓展有一堰圍槽(4)，堰圍槽的一端槽底有引流孔道(8)，在堰圍槽的另一端有一進(jìn)藥通道(9)，進(jìn)藥通道與加藥槽(IO) 連通，灌流液注入到加藥槽經(jīng)進(jìn)藥通道沿堰圍槽壁流到細(xì)胞槽中；在堰圍槽 內(nèi)與細(xì)胞槽外的一角有一鹽橋置放孔(5)，在堰圍槽外槽體邊還有一個貫穿槽 體的鹽橋置放孔(5)，銀板(7)為L形黏貼在槽體的側(cè)面和底面，并封閉堰圍槽 外槽體邊的鹽橋置放孔下端口。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，所述的槽體(l)采用聚 乙烯透明塑膠板制成。為了與倒置顯微鏡載物臺上夾持適配器配套，便于夾 持器對細(xì)胞記錄槽的夾持、固定，并且記錄槽的大小要求與細(xì)胞恒溫控制器 的加熱適配器一致，因此選擇槽體長70mm、寬50mm、厚7mm;如果記錄槽太 深，就會阻擋膜片鉗記錄電極的移動，因為膜片鉗記錄電極的移動距離是在 三維微操作器的控制下進(jìn)行移動，三維微操縱器的上下、左右、前后移動距 離各僅為20um左右調(diào)控范圍非常小，不管是前后、左右、上下移動電極， 移動距離非常有限。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，所述的細(xì)胞槽(2)是以 槽體(l)中央為中心點，挖去長20ram、寬15mm、深7mm的長方體形成槽壁，再 以載玻片(3)為槽底圍成的槽。在槽體的底面挖出一個淺槽，淺槽打磨成磨砂 面，載玻片通過密封膠或醫(yī)用凡士林黏貼在淺槽里；淺槽的長度和寬度超出 細(xì)胞槽底長度和寬度，淺槽長邊延伸到槽體的邊部，使細(xì)胞槽既不會滲漏液 體，載玻片又不會突出于槽體底面，有利于記錄槽平放在顯微鏡載物臺上。 采用載玻片作細(xì)胞槽的槽底，每次做完實驗后，去掉載玻片，對記錄槽進(jìn)行 清洗，下次作實驗時再更換一塊新的載玻片即可，這樣的設(shè)計既方便記錄槽 清洗又有利于對記錄槽加熱保溫，還能保證透光度。本實用新型所用載玻片 為市售醫(yī)用載玻片。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，所述的堰圍槽(4)是在 細(xì)胞槽上部向四周拓展出一個長30mm、寬25mm、距離槽體表面深3. 5mm的 槽。在堰圍槽一端槽底，鉆一個直徑為2mm的引流孔道(8)，引流孔道直徑剛 好能插進(jìn)臨床上使用的用于輸液排氣管針頭，目的是排出堰圍槽中的灌流液; 在堰圍槽的另一端，有一進(jìn)藥通道(9)，進(jìn)藥通道最低點離堰圍槽底lmra，進(jìn) 藥通道與加藥槽卿連通，加藥槽長10腿、寬5mm深2mm，灌流液通過附屬加 藥裝置注入到加藥槽，進(jìn)藥通道是一條狹窄溝渠，把加藥槽的灌流液引到堰
4圍槽沿槽壁流到細(xì)胞槽中。這樣讓灌流液能很緩慢流入到細(xì)胞槽中，可以避 免灌流液直接注入細(xì)胞槽造成把貼附在細(xì)胞槽底部的活細(xì)胞沖走的弊病。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，所述的鹽橋置放孔(5) 是置放鹽橋的孔洞，在細(xì)胞槽外和堰圍槽內(nèi)的拐角處鉆有一個直徑為5mra的 圓孔，另一個在其同一側(cè)的堰圍槽外、離槽體邊緣2mm處， 一個直徑5mm、 貫穿槽體上下的孔洞，兩孔洞為鹽橋置放孔，鹽橋騎跨在這兩個孔洞中。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，所述的銀板(7)為L形， 在銀板上焊接有一個銀柱(6);在槽體底面的鹽橋置放孔四周打磨出一個小淺 槽，經(jīng)磨砂，并黏貼上薄銀板(7)，銀板大小完全覆蓋過鹽橋置放孔的下端口， 銀板既起到接地作用，又不讓鹽橋置放孔滲漏液體。使用細(xì)胞記錄槽時，銀 柱與膜片鉗電極夾持器上接地柱通過金屬銀絲相連，倒U形鹽橋騎跨在兩個 鹽橋置放孔中，組成一條由電極夾持器的地線、銀板、鹽橋、細(xì)胞記錄槽中 鹽溶液串聯(lián)在一起的良好傳導(dǎo)系統(tǒng)，能顯著降低記錄槽中鹽溶液產(chǎn)生的噪音 對膜片鉗記錄結(jié)果的干擾。
本實用新型由堰圍槽壁、細(xì)胞槽壁和載玻片合圍成可接納溶液的浴槽， 浴槽下層容積為有效記錄槽，上層為堰圍槽，在上層有進(jìn)藥通道(9)和引流孔 道(8)，當(dāng)含有活細(xì)胞懸液加入到浴槽并作短暫靜止后，用附屬的加藥裝置把 細(xì)胞外液通過加藥槽柳、經(jīng)進(jìn)藥通道注入到堰圍槽，沿堰圍槽壁緩緩流到有 效記錄槽，等液體注滿有效記錄槽及堰圍槽后，由于活的心肌細(xì)胞特性是容 易附壁吸底，靜止一會等活細(xì)胞貼附到下層有效記錄槽底部后，用恒流泵或 真空泵從堰圍槽的引流孔道把堰圍槽中混合液抽吸走，直到保留下層有效溶 液量，這個過程經(jīng)反復(fù)進(jìn)行，由注入細(xì)胞外液，到抽吸細(xì)胞外液一進(jìn)一出的 過程，就可沖走浴槽中溶液所含雜質(zhì)，保持浴槽中溶液的干凈度，有利于對 細(xì)胞或切片進(jìn)行膜片鉗鉗制。
本實用新型設(shè)計的細(xì)胞記錄槽浴槽容積為1. 0 1. 5ml，容積大小適宜。 浴槽容積如果太大，盛裝在細(xì)胞記錄槽中的電解質(zhì)溶液就會產(chǎn)生很大的電容 電阻，電容電阻過大，就會產(chǎn)生噪音干擾，從而影響了膜片鉗的鉗制電位。 因為當(dāng)對細(xì)胞或切片進(jìn)行膜片鉗鉗制時，浴槽中電解質(zhì)溶液與記錄電極間產(chǎn) 生很大液接電位，這種大的液接電位往往超過了膜片鉗放大器的補(bǔ)償范圍， 以致膜片鉗無法進(jìn)行。當(dāng)然，浴槽的容積也不能太小，否則，浴槽中的液體非常容易被蒸發(fā)掉，使沉附在有效記錄槽底部的細(xì)胞或切片因缺乏營養(yǎng)和氧 氣而死亡。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽具有如下的優(yōu)點
1、 本實用新型設(shè)計簡單，用材隨意，與目前市場上銷售的進(jìn)口細(xì)胞記錄 槽相比，價格非常低。
2、 本實用新型設(shè)計的槽體厚薄適宜，容積大小嚴(yán)格按實驗要求設(shè)計為
1.0 1.5ml的規(guī)格，大大增加了膜片鉗記錄電極的可操作性，以及減少液接
電位產(chǎn)生的噪音干擾。
3、 本實用新型鹽橋置放孔的設(shè)計巧妙，及鹽橋置放孔下端口黏貼一塊薄
的銀板，接地效果非常好，產(chǎn)生的噪音干擾特別小。
4、 本實用新型在細(xì)胞槽上部拓展堰圍槽是非常合理和必要的，既能交換 浴槽中流動的灌流液，吸走浴槽中過多的液體雜質(zhì)，又不會因交換灌液體而 影響貼附在有效記錄槽底部的活細(xì)胞。
5、 本實用新型采用載玻片黏貼在細(xì)胞槽背面作為槽底，這樣可非常方便 清洗細(xì)胞記錄槽，每次只需對槽體進(jìn)行徹底清洗，然后更換干凈的載玻片即 可，并且載玻片的透光和溫度傳導(dǎo)效果很好。


本實用新型用附圖作進(jìn)一步說明
圖1為本實用新型細(xì)胞記錄槽總體結(jié)構(gòu)的俯視示意圖。
圖中，(l)槽體、(2)細(xì)胞槽、(3)載玻片、(4)堰圍槽、(5)鹽橋置放孔、(6)銀 柱、(7)銀板、(8)引流孔道、(9)進(jìn)藥通道、(IO)加藥槽。
圖2為本實用新型細(xì)胞記錄槽結(jié)構(gòu)的主視剖面示意圖。
圖3為本實用新型細(xì)胞記錄槽后側(cè)視示意圖。
具體實施方式
實施例1:本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽的結(jié)構(gòu)如圖1 所示。包括有槽體(l)、載玻片(3)、銀柱(6)和銀板(7)，槽體上有細(xì)胞槽(2)、堰 圍槽(4)、兩個鹽橋置放孔(5)、引流孔道(8)、進(jìn)藥通道(9)和加藥槽(10)。
本實用新型細(xì)胞記錄槽可接納溶液的容積為1.5ml，制作步驟如下
① 槽體選用聚乙烯透明塑膠板，制成長70隱、寬50咖、厚7ram的槽體；
② 先在槽體中央挖去長20mmX 15mmX7mm的長方體，在挖去長方體的槽
6體上部，從中央向四周拓展出一個長30腿、寬25mm、離槽體表面深3. 5mm的堰圍槽；
③ 在堰圍槽一端槽底邊的中點，鉆一個直徑為2mm的引流孔道(8);在堰圍槽的另一端挖一個長10mm、寬5腿、深2mm的加藥槽卿，再從槽體表面開一條從加藥槽通向堰圍槽的進(jìn)藥通道(9)，進(jìn)藥通道最低點離堰圍槽槽底lmm;是一條狹窄明溝渠，可以把進(jìn)藥槽的液體引到堰圍槽中。
④ 在槽體背面，挖一個與市售的醫(yī)用載玻片一樣厚和寬的淺槽，淺槽長度和寬度超出挖去的長方體的長度和寬度，淺槽長邊一直延伸到槽體邊，淺槽打磨成磨砂面；
⑤ 鉆兩個鹽橋置放孔(5):在細(xì)胞槽外和堰圍槽內(nèi)的一角鉆一個5 ■圓孔，在堰圍槽外同一側(cè)，離槽體邊緣2mm處也鉆一個5腿孔洞，孔洞貫穿槽體上下；
⑥ 在槽體背面、堰圍槽外的鹽橋置放孔四周挖一個20mmX 12mm的淺槽，淺槽打磨成磨砂面，用L形銀板黏貼在槽體的側(cè)面和底面淺槽中，使銀板全面封閉槽體底面鹽橋置放孔，保證鹽橋置放孔不滲漏液體；在銀板上焊一銀柱(6);
⑦ 將市售醫(yī)用載玻片(3)用密封膠黏貼在的槽體背面的淺槽中，并保證細(xì)胞槽不滲漏液體。本實用新型細(xì)胞記錄槽就制作完成了。
實施例2:制作本實用新型適合于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，其基本結(jié)構(gòu)如實施例l，不同之處在于容積為1.0ml。其二引流孔道(8)不設(shè)在堰圍槽底邊中心，而設(shè)在堰圍槽底邊近角落處；其三載玻片(3)用醫(yī)用凡士林直接黏貼在的槽體背面的淺槽中。
上述實施例1和實施例2制作的本實用新型細(xì)胞記錄槽，價廉物美、容積大小適宜，透光度和保溫性好、使用時液體的流動和交換方便、易除雜質(zhì)、易于清洗，能顯著降低噪音干擾，大大增加了膜片鉗記錄電極的可操作性。
本實用新型適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽具有設(shè)計科學(xué)、結(jié)構(gòu)簡單，使用方便和價廉物美等優(yōu)點，適于在膜片鉗技術(shù)的研究領(lǐng)域推廣和應(yīng)用。
權(quán)利要求1、一種適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，包括槽體、細(xì)胞槽和加藥槽，其特征在于在槽體的中央有細(xì)胞槽，細(xì)胞槽以載玻片為槽底，在細(xì)胞槽上部四周拓展有一堰圍槽，堰圍槽的一端槽底有引流孔道，在堰圍槽的另一端有一進(jìn)藥通道，進(jìn)藥通道與加藥槽連通，灌流液注入到加藥槽經(jīng)進(jìn)藥通道沿堰圍槽壁流到細(xì)胞槽中；在堰圍槽內(nèi)與細(xì)胞槽外的一角有一鹽橋置放孔，在堰圍槽外槽體邊還有一個貫穿槽體的鹽橋置放孔，銀板為L形黏貼在槽體的側(cè)面和底面，并封閉堰圍槽外槽體邊的鹽橋置放孔下端口。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，其特征 在于在槽體的底面挖一個淺槽，淺槽打磨成磨砂面，載玻片通過密封膠或醫(yī) 用凡士林黏貼在淺槽里。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，其特征 在于銀板為L形，在銀板上焊接有一個銀柱。
4、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，其特征 在于浴槽的容積為1. 0 1. 5ml。
專利摘要本實用新型涉及一種適用于膜片鉗記錄技術(shù)的細(xì)胞記錄槽，包括槽體、細(xì)胞槽、載玻片、堰圍槽、鹽橋置放孔、銀柱、銀板、引流孔道、進(jìn)藥通道和加藥槽，細(xì)胞槽在槽體中央，以載玻片為槽底，細(xì)胞槽上部四周拓展有堰圍槽，堰圍槽一端槽底有引流孔道，另一端有加藥槽和進(jìn)藥通道，灌流液從加藥槽注入經(jīng)進(jìn)藥通道沿堰圍槽壁流到細(xì)胞槽中；在堰圍槽內(nèi)、外各有一鹽橋置放孔，堰圍槽外的鹽橋置放孔貫穿槽體上下，L形的銀板黏貼在槽體側(cè)面和底面，并封閉堰圍槽外的鹽橋置放孔下端口。本實用新型設(shè)計科學(xué)、結(jié)構(gòu)簡單，噪音干擾小，透光度和保溫性好，具有液體流動和交換方便、易除雜質(zhì)、易清洗、價廉物美等優(yōu)點，適于在膜片鉗技術(shù)的研究領(lǐng)域推廣和應(yīng)用。
文檔編號C12M3/00GK201276574SQ20082019140
公開日2009年7月22日 申請日期2008年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月13日
發(fā)明者唐其柱, 汪晶晶, 騰 王, 王清秀, 甘文云 申請人:武漢大學(xué)