專利名稱：里氏木霉菌株及其用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種里氏木霉菌株(Trichoderma reesei)及其用途。
背景技術：
隨著人們生活水平的提高，畜牧業(yè)也迅速發(fā)展。飼料成本是畜牧業(yè)生產(chǎn)的主要投入，占總成本的60-80％。目前，市場上銷售飼料的能量原料主要是玉米。在眾多的谷物類中，飼料廠家選用玉米的理由是玉米的能值和消化率較高，而相比之下，其它谷物如大麥、小麥、稻谷等及它們的副產(chǎn)品由于含有較高的抗營養(yǎng)物質(zhì)，這就降低了他們的飼用價值。當然，這些谷物類飼料和它們的副產(chǎn)品也有自身的優(yōu)點，首先粗蛋白含量較高，通常比玉米要高出1-6％，其次價格相對較低，再有，在制粒中適當添加小麥、次粉等可增加飼料粘結(jié)力，有利于顆粒成型等。此外，近年來，能量資源日益緊缺，預計到2020年將達到0.83億噸左右，且玉米的生產(chǎn)受到地理條件的影響，因此這種單一的能量飼料勢必影響畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
由于大麥、小麥、稻谷等及它們的副產(chǎn)品富含β-葡聚糖和木聚糖等抗營養(yǎng)因子，從而限制了其在飼料中的廣泛應用。為此，國外在50年代末期就開始努力，研究酶制劑消除或抑制大麥、小麥、稻谷等抗營養(yǎng)因子的效果。許多國家已開發(fā)出了針對這些飼糧的NSP酶制劑，這類酶主要包括β-葡聚糖酶、木聚糖酶和纖維素酶。
β-葡聚糖酶特指β-1，3-1，4-葡聚糖酶(EC.3.2.1.73)，其底物為β-1，3和β-1，4混合鍵連接的β-D-葡聚糖，主要分解大麥中的β-葡聚糖和細菌地衣多糖，所以又叫地衣多糖酶。其分解產(chǎn)物主要為3-O-β-纖維二糖-D-葡萄糖和3-O-β-纖維三糖-D-葡萄糖。
β-1，3-1，4-葡聚糖酶主要由植物(大麥、燕麥、小麥、稻谷)和微生物(木霉、芽孢桿菌和瘤胃中的一些微生物)產(chǎn)生。在籽實發(fā)芽過程中，糊粉層和盾片分泌β-1，3-1，4-葡聚糖酶以分解胚乳細胞壁中的β葡聚糖，使胚乳中的營養(yǎng)物質(zhì)能被其他水解酶分解，從而保證種子正常發(fā)芽。
木聚糖酶可水解木糖苷鍵，分為β-1，4木聚糖酶與β-1，3木聚糖酶二類，陸上植物均屬β-1，4木聚糖酶，而β-1，3木聚糖酶存在于海藻及海洋微生物中。木聚糖酶(1，4-β-xylanase，Ec.3，2，1，8)以內(nèi)切方式水解木聚糖分子中β-1，4-木糖苷鍵，其水解產(chǎn)物主要為木二糖與木二糖以上的寡聚木糖，也有少量的木糖和阿拉伯糖。能產(chǎn)生木聚糖酶的微生物有細菌、黑曲霉、海棗曲霉、棒曲霉和木霉等，大多數(shù)木聚糖酶的最適pH和最適溫度分別為4.0-7.0和50-60℃。
纖維素酶是一個多組分的酶系，至少包括三類不同性質(zhì)的酶(1)C1酶在天然纖維素的降解過程中起主導作用；(2)Cx酶是作用于經(jīng)C1酶消化的纖維素，分解其β-1，4鏈，又稱β-1，4-葡聚糖酶；(3)β-葡萄糖苷酶可將纖維二糖，纖維三糖等短鏈低聚糖類分解生成葡萄糖。這些酶協(xié)調(diào)作用可將纖維降解為可被畜禽機體消化吸收的還原糖，從而提高飼料利用率。通常，木霉、鐮刀霉產(chǎn)生的酶有很高的C1活性，黑曲霉纖維素酶主要是Cx酶和β-葡萄糖苷酶，C1的活性較低。纖維素酶的最適pH和最適溫度為3.5-6.0和40-50℃(楊生武，1997)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種里氏木霉菌株(Trichoderma reesei)及其用途。
該菌株在PDA固體培養(yǎng)基上生長，形成的菌落特征為菌落呈棉絮狀，菌落呈淡綠色，菌落扁平，高0.1～0.75mm，菌落邊緣白色，整齊；生長速度快，48h菌落直徑達1.0～8.5mm，72h達30～50mm；菌絲白色，有隔膜，菌絲壁光滑，直徑在2.0～5.0μm。分生孢子梗從菌絲的短側(cè)枝發(fā)生，側(cè)枝上對生。分生孢子梗呈瓶狀，直立，無色，孢子呈球形，綠色，直徑20～100μm。
該菌株可在麥麩上生長，其主要代謝產(chǎn)物為β-葡聚糖酶和木聚糖酶，因此，它可用于生產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶。
本發(fā)明的優(yōu)點1)培養(yǎng)方便，生長速度快，能在廉價的原料上生長；2)能同時產(chǎn)兩種飼用酶制劑，β-葡聚糖酶和木聚糖酶；3)所產(chǎn)的β-葡聚糖酶和木聚糖酶活性高；4)所產(chǎn)的β-葡聚糖酶和木聚糖酶為胞外酶，易于提??；5)該菌不產(chǎn)生有害物質(zhì)，以它制備的β-葡聚糖酶和木聚糖酶是動物飼料的綠色添加劑。
具體實施例方式
1菌種篩選和誘變從土壤腐殖質(zhì)中篩選到能在麥麩上生長的菌株41株，分別測定β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性，同時具有這兩種酶活性的菌株有12株，將純化菌株點種在剛果紅地衣多糖平板上，得到5株透明圈較大的菌株。
將這5株菌培養(yǎng)并制成單孢子懸浮液，分別進行紫外(30W紫外燈下30cm處照射60s)和輻射(Co60輻照10s)和化學試劑(亞硝基胍終濃度1mg/ml，28靜置60min)誘變，經(jīng)誘變后將孢子涂布于初篩平皿，挑取形成清晰透明圈的菌株。然后再分別測定β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性，發(fā)現(xiàn)有一株酶活性特別高，是原菌株的50倍。本發(fā)明的里氏木霉GXC已于2002年4月17日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，登記入冊編號為CCTCC No M202017。2菌種鑒定(1)形態(tài)特征產(chǎn)生菌該菌株在PDA固體培養(yǎng)基上生長。形成的菌落特征為菌落呈棉絮狀，菌落呈淡綠色，菌落扁平，高0.1～0.75mm，菌落邊緣白色，整齊；生長速度快，48h菌落直徑達1.0～8.5mm，72h達30～50mm；菌絲白色，有隔膜，菌絲壁光滑，直徑在2.0～5.0μm。分生孢子梗從菌絲的短側(cè)枝發(fā)生，側(cè)枝上對生。分生孢子梗呈瓶狀，直立，無色，孢子呈球形，綠色，直徑20～100μm。該菌株可在麥麩上生長，主要代謝產(chǎn)物為β-葡聚糖酶和木聚糖酶。根據(jù)《AnIntroduction industrial mycology》(George Smith 1954)、《真菌鑒定手冊》(魏景超1982)、《常見與常用真菌》(中科院微生物研究所1973)，鑒定該菌株為里氏木霉(Trichoderma reesei)。(2)培養(yǎng)特征該菌株產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶的最適pH分別為3.5～6.0和3.0～6.0；最適溫度均為15～35℃。3液體發(fā)酵產(chǎn)酶條件生產(chǎn)β-葡聚糖酶的液體發(fā)酵方法為(1)產(chǎn)β-葡聚糖酶的碳源為麩皮和木聚糖，氮源為硫酸銨、氯化銨、硝酸銨和酵母膏；(2)產(chǎn)酶促進劑加入0.1～5.0％吐溫80、吐溫20和甜菜堿使β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性提高0.5～5.0倍。
(3)產(chǎn)酶時間發(fā)酵20～30h后，微生物開始分泌β-葡聚糖酶，至40～50h酶活性達到高峰，pH維持在2.5～4.5。
生產(chǎn)木聚糖酶的液體發(fā)酵方法為(1)產(chǎn)木聚糖酶的碳源為乳糖、棉子糖、甘露糖和木糖、麩皮浸出液和木聚糖，氮源為酵母膏和牛肉膏。
(2)產(chǎn)酶促進劑加入0.1～5.0％吐溫80、吐溫20和甜菜堿使β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性提高0.5～5.0倍。
(3)產(chǎn)酶時間發(fā)酵20～30h后，微生物開始分泌木聚糖酶，至40～50h達到高峰，pH維持在2.5～4.5。4固體發(fā)酵生產(chǎn)工藝以麩皮為主要原料生產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶的固體發(fā)酵方法為(1)一級種子(試管斜面種子)從原始菌種接種至試管PDA固體培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)20～40hr(2)二級種子(試管液體種子)從一級種子接種至試管PDA液體培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)20～40hr(3)三級種子(三角瓶液體種子)從二級種子接種至含50～150ml 5～20％麩皮浸出液培養(yǎng)基的三角瓶中，28～32℃培養(yǎng)20～34hr(4)培養(yǎng)基配制麩皮和稻殼混合原料經(jīng)粉碎后加入等比例水，0.11Mpa滅菌50min，冷卻。
(5)發(fā)酵培養(yǎng)基按1～10％的比例接入三級種子，培養(yǎng)基含水量控制在45～55％，發(fā)酵室內(nèi)相對濕度保持在85％以上，pH范圍為4.5～5.0，溫度維持在28～35℃，通風發(fā)酵32～50hr。
(6)培養(yǎng)物在35～45℃干燥，粉碎，加入配料，混合后包裝。5實施例(1)液體發(fā)酵斜面培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基和10％麩皮浸出液，2％瓊脂，自然pH，121℃高壓滅菌30min。
營養(yǎng)鹽組成(％)KH2PO4，0.1；MgSO4.7H2O，0.5；CaCl2，0.01；NaCl，0.01；FeSO4.7H2O，0.005；MnSO4.H2O，0.0016；ZnSO4.7H2O，0.0014；CoCl2，0.002。
培養(yǎng)基在營養(yǎng)鹽溶液中加入5％麩皮浸出液、1％酵母膏和0.1％P8(吐溫80)、0.1％P2(吐溫20)和0.1％PB(甜菜堿)，調(diào)pH5.0。
培養(yǎng)條件250ml三角瓶裝入培養(yǎng)基100ml，用孢子懸液接種1.0ml，100r/min旋轉(zhuǎn)式振搖，在32℃下培養(yǎng)40h。
酶活性β-葡聚糖酶和木聚糖酶活性達500U/ml和400U/ml。(2)固體發(fā)酵a一級種子(試管斜面種子)從原菌種接種至PDA固體培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24hrb二級種子(試管液體種子)從一級種子接種至PDA液體培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24hrc三級種子(三角瓶液體種子)從二級種子接種至5％麩皮浸出液培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)24hrd培養(yǎng)基配制原料(麩皮∶稻殼＝9∶1)經(jīng)粉碎后加入等比例水，0.11Mpa滅菌50min，冷卻至30℃。
e發(fā)酵培養(yǎng)基按5％的比例接入三級種子，32℃通風發(fā)酵32hr。
f酶活測定β-葡聚糖酶25000u/g，木聚糖酶20000 u/g(3)液體發(fā)酵斜面培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基和10％麩皮浸出液，2％瓊脂，自然pH，121℃高壓滅菌30min。
營養(yǎng)鹽組成(％)KH2PO4，0.1；MgSO4.7H2O，0.5；CaCl2，0.01；NaCl，0.01；FeSO4.7H2O，0.005；MnSO4.H2O，0.0016；ZnSO4.7H2O，0.0014；CoCl2，0.002。
培養(yǎng)基在營養(yǎng)鹽溶液中加入1％木聚糖、1％牛肉膏和5％P8(吐溫80)、5％P2(吐溫20)和5％PB(甜菜堿)，調(diào)pH5.0。
培養(yǎng)條件250ml三角瓶裝入培養(yǎng)基100ml，用孢子懸液接種1.0ml，100r/min旋轉(zhuǎn)式振搖，在32℃下培養(yǎng)40h。
酶活性β-葡聚糖酶和木聚糖酶活性達610U/ml和480U/ml。(4)固體發(fā)酵a一級種子(試管斜面種子)從原菌種接種至PDA固體培養(yǎng)基，32℃培養(yǎng)40hrb二級種子(試管液體種子)從一級種子接種至PDA液體培養(yǎng)基，32℃培養(yǎng)40hrc三級種子(三角瓶液體種子)從二級種子接種至20％麩皮浸出液培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)40hrd培養(yǎng)基配制原料(麩皮∶稻殼＝8∶2)經(jīng)粉碎后加入等比例水，0.11Mpa滅菌50min，冷卻。
e發(fā)酵培養(yǎng)基按5％的比例接入三級種子，32℃通風發(fā)酵50hr。
f酶活測定β-葡聚糖酶35000u/g，木聚糖酶30000 u/g6木聚糖酶活性測定(1)定義活力單位(BU)每秒鐘產(chǎn)生1納摩爾木糖。酶量定義為1單位木聚糖酶活(1BU＝1nkut)。(2)原理木聚糖酶能水解木聚糖，并產(chǎn)生木糖。木糖和3.5-二硝基水楊酸反應顯色后可用比色法測定。(3試劑和溶液檸檬酸緩沖液(0.05mol/L，pH5.3)稱取10.5g檸檬酸(C6H8O7·H2O)溶解于約800ml蒸餾水中，用1mol/L的NaOH將pH調(diào)至5.3(約需110ml NaOH)，再用蒸餾水定容至1升。
底物稱取1.00g木聚糖加入80mL預熱至60℃的檸檬酸溶液，再加熱至沸點，同時磁力攪拌直至溶解，然后邊冷卻邊攪拌，室溫放至過夜，最后用檸檬酸緩沖液定容至100mL。
DNS試劑稱取50.00g 3.5-二硝基水楊酸溶解于4.0L水。一邊不斷地攪拌一邊逐漸加入80.0g NaOH，讓其溶解。然后逐漸加入1500g酒石酸鉀鈉，可加熱至45℃，冷卻后在5.0L的容量瓶中定容。室溫存放在棕色瓶中。(4)儀器設備水浴鍋，旋鍋振蕩器，分光光度計，磁力攪拌器(5)分析步驟a稱樣稱量為200-600mg，樣品用檸檬酸緩沖液溶解。應適當稀釋使吸光值在0.10-0.70(540nm)之間為佳。
b酶活測定在試驗管和空白中各加入1.8ml底物，50℃水浴中預熱5min。在試驗管中加200μl已稀釋的樣品搖勻。精確反應5分鐘后，兩個管中都加入3.0ml DNS試劑。在空白管中再加入200μl樣品。將兩個試管同時放入沸水浴。沸水浴5分鐘取出試管，冷卻至室溫。然后以空白為對照在540nm處測定樣品的吸光值。從標準曲線上讀出酶活，并乘上稀釋因子。
c標準曲線配制好10μmol/mL木糖母液(150mg木糖溶解于檸檬酸緩沖液中，定容至100ml)。用檸檬酸緩沖液稀釋母液，稀釋倍數(shù)如下稀釋倍數(shù) 木糖濃度(μmol/ml) 木聚糖酶活力(BU/ml)1∶1 10.0 33.301∶2 5.00 16.701∶3 3.33 11.001∶5 2.00 6.70
每個標準液做三個重復，各試管中加入1.8ml底物，再加200μl標準稀釋液，后面操作步驟和樣品測定相同。空白為加入200μl檸檬酸緩沖液而代替加入200μl標準液。(6)酶活計算方法=X×1000·n300·W]]>U酶活力(U/g)，X樣品吸光度在標準曲線上所查得的木糖濃度(μmol/ml)1000μmol轉(zhuǎn)化成nmol，n稀釋倍數(shù)，300反應時間(s)，W樣品重量(g)7 β-葡聚糖酶活性測定(1)定義活力單位(BU)每秒鐘產(chǎn)生1納摩爾還原糖(葡萄糖)的酶量定義為1單位β-葡聚糖酶活(1BU＝1nkut)。(2)原理β-葡聚糖酶(1，3-1，4-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶)能水解從大麥中提取的葡聚糖，并產(chǎn)生還原糖。還原糖和3.5-二硝基水楊酸反應顯色后可用比色法測定。(3)試劑和溶液醋酸緩沖液(0.1mol/L，pH4.8)用0.10mol/L的醋酸將醋酸鈉溶液(13.6g/L的CH3COONa·3H2O)的pH調(diào)至4.8(每L溶液約需700mL醋酸)。
底物稱取1.00gβ-葡聚糖(大麥β-葡聚糖)溶解于6ml的乙醇中，加90ml醋酸緩沖液。邊加熱邊磁力攪拌直至溶解(約10分鐘，冷卻后用陶質(zhì)過濾器G2過濾)。底物在+4℃下可保存一周。
DNS試劑稱取50.00g 3.5-二硝基水楊酸溶解于4.0升水。一邊不斷地攪拌一邊逐漸加入80.0g NaOH，讓其溶解。然后逐漸加入1500g酒石酸鉀鈉，可加熱至45℃，冷卻后在5.0升的容量瓶中定容。室溫存放在棕色瓶中。(4)儀器設備水浴鍋，旋鍋振蕩器，分光光度計，磁力攪拌器(5)分析步驟a取樣樣品用醋酸緩沖液溶解。稱量為200-600mg。應適當稀釋使吸光值在0.10-0.70(540nm)之間為佳。b酶活測定在試驗管和空白中各加入1.8ml底物，50℃水溶中預熱5min。在試驗管中加200μl已稀釋的樣品搖勻。精確反應10分鐘后，兩個管中都加入3.0ml DNS試制。在空白管中再加入200μl樣品。將兩個試管同時放入沸水浴。沸水浴5分鐘取出試管，冷卻至室溫，加20mL水混勻，然后以空白為對照在540nm處測定樣品的吸光值。從標準曲線上讀出酶活，并乘上稀釋因子。c 標準曲線配制好0.078mmol/mL葡萄糖母液(1.405g葡萄糖溶解于醋酸緩沖液中，定容至100ml)。用醋酸緩沖液稀釋母液，稀釋倍數(shù)如下稀釋倍數(shù) 葡葡萄糖濃度 β-葡聚糖酶活力(μmol/ml)(BU/ml)1∶2 3965.001∶3 2643.331∶6 1321.67每個標準液做三個重復，各試管中加入1.8ml底物，再加200μl標準稀釋液，后面操作步驟和樣品測定相同?？瞻诪榧尤?00μl醋酸緩沖液而代替加入200μl標準液。(6)酶活計算方法=X×1000·n600·W]]>U酶活力(U/g)，X樣品吸光度在標準曲線上所查得的葡萄糖濃度(μmol/ml)1000μmol轉(zhuǎn)化成nmol，n稀釋倍數(shù)，600反應時間(s)，W樣品重量(g)
權(quán)利要求
1.一種里氏木霉菌株(Trichoderma reesei)，其特征在于該菌株在PDA固體培養(yǎng)基上生長，形成的菌落特征為菌落呈棉絮狀，菌落呈淡綠色，菌落扁平，高0.1～0.75mm，菌落邊緣白色，整齊；生長速度快，48h菌落直徑達1.0～8.5mm，72h達30～50mm；菌絲白色，有隔膜，菌絲壁光滑，直徑在2.0～5.0μm。分生孢子梗從菌絲的短側(cè)枝發(fā)生，側(cè)枝上對生。分生孢子梗呈瓶狀，直立，無色，孢子呈球形，綠色，直徑20～100μm。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的一種里氏木霉菌株，其特征在于該菌株在麥麩上生長，其主要代謝產(chǎn)物為β-葡聚糖酶和木聚糖酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的一種里氏木霉菌株，其特征在于該菌株生長溫度為15～35℃，pH為3.0～7.0。
4.一種里氏木霉菌株的用途，其特征在于該菌株用于生產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的一種里氏木霉菌株的用途，其特征在于所說生產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶的pH分別為3.5～6.0和3.0～6.0；溫度均為15～35℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的一種里氏木霉菌株的用途，其特征在于所說生產(chǎn)β-葡聚糖酶的液體發(fā)酵方法為1)產(chǎn)β-葡聚糖酶的碳源為麩皮和木聚糖，氮源為硫酸銨、氯化銨、硝酸銨和酵母膏；2)產(chǎn)酶促進劑加入0.1～5.0％吐溫80、吐溫20和甜菜堿使β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性提高0.5～5.0倍。3)產(chǎn)酶時間發(fā)酵20～30h后，微生物開始分泌β-葡聚糖酶，至40～50h酶活性達到高峰，pH維持在2.5～4.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的一種里氏木霉菌株的用途，其特征在于所說生產(chǎn)木聚糖酶的液體發(fā)酵方法為1)產(chǎn)木聚糖酶的碳源為乳糖、棉子糖、甘露糖和木糖、麩皮浸出液和木聚糖，氮源為酵母膏和牛肉膏。2)產(chǎn)酶促進劑加入0.1～5.0％吐溫80、吐溫20和甜菜堿使β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶活性提高0.5～5.0倍。3)產(chǎn)酶時間發(fā)酵20～30h后，微生物開始分泌木聚糖酶，至40～50h達到高峰，pH維持在2.5～4.5。
8.根據(jù)權(quán)利要求書4所述的一種里氏木霉菌株的用途，其特征在于以麩皮為主要原料生產(chǎn)β-葡聚糖酶和木聚糖酶的固體發(fā)酵方法為1)一級種子從原始菌種接種至試管PDA固體培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)20～40hr2)二級種子從一級種子接種至試管PDA液體培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)20～40hr3)三級種子從二級種子接種至三角瓶含50～150ml 5～20％麩皮浸出液培養(yǎng)基，28～32℃培養(yǎng)20～40hr4)培養(yǎng)基配制麩皮和稻殼混合原料經(jīng)粉碎后加入等比例水，0.11Mpa滅菌30～50min，冷卻。5)發(fā)酵培養(yǎng)基按1～10％的比例接入三級種子，培養(yǎng)基含水量控制在45～55％，發(fā)酵室內(nèi)相對濕度保持在85％以上，pH范圍為4.5～5.0，溫度維持在28～35℃，通風發(fā)酵32～50hr。6)培養(yǎng)物在35～45℃干燥，粉碎，加入配料，混合后包裝。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種里氏木霉菌株及其用途。該菌株在PDA固體培養(yǎng)基上生長,形成的菌落特征為菌落呈棉絮狀,菌落呈淡綠色,菌落邊緣白色,整齊;生長速度快,菌絲白色,有隔膜,菌絲壁光滑,直徑在2.0～5.0μm。分生孢子梗從菌絲的短側(cè)枝發(fā)生,側(cè)枝上對生。分生孢子梗呈瓶狀,直立,無色,孢子呈球形,綠色,直徑20～100μm。本發(fā)明的優(yōu)點:1)培養(yǎng)方便,生長速度快,能在廉價的原料上生長;2)能同時產(chǎn)兩種飼用酶制劑,β－葡聚糖酶和木聚糖酶;3)所產(chǎn)的β－葡聚糖酶和木聚糖酶活性高;4)所產(chǎn)的β－葡聚糖酶和木聚糖酶為胞外酶,易于提取;5)該菌不產(chǎn)生有害物質(zhì),以它制備的β－葡聚糖酶和木聚糖酶是動物飼料的綠色添加劑。
文檔編號C12N9/46GK1385519SQ0211142
公開日2002年12月18日 申請日期2002年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月19日
發(fā)明者許梓榮, 孫建義, 李衛(wèi)芬 申請人:浙江大學