專(zhuān)利名稱(chēng)：多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物中利用三種病毒復(fù)配制得殺蟲(chóng)劑。
在世界范圍內(nèi)，農(nóng)作物上的害蟲(chóng)始終嚴(yán)重而普遍地給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的損失。化學(xué)農(nóng)藥在防蟲(chóng)增產(chǎn)過(guò)程中雖然起到了顯著作用，但也造成了環(huán)境污染和人畜中毒以及殺滅了天敵造成生態(tài)不平衡，并使害蟲(chóng)的抗性增強(qiáng)等弊端。因此近年來(lái)世界各國(guó)對(duì)微生物農(nóng)藥的發(fā)展及應(yīng)用引起了廣泛的重視，并取得了較好的成效。
昆蟲(chóng)病毒多以單價(jià)病毒制劑控制特定的一種害蟲(chóng)，當(dāng)這種害蟲(chóng)作為優(yōu)勢(shì)種群對(duì)作物產(chǎn)生嚴(yán)重危害，甚至毀滅性災(zāi)害時(shí)，應(yīng)用這種單價(jià)病毒制劑是十分有效的。然而在一種作物中通常有多種害蟲(chóng)同時(shí)危害，采用單價(jià)病毒制劑就難以達(dá)到植物保護(hù)的目的。在自然界中本身就存在病毒混合感染的情形。近年來(lái)，大部分棉區(qū)第二代棉鈴蟲(chóng)空前發(fā)生，面積之大，范圍之廣，蛾卵量之高為歷史所罕見(jiàn)，致使大片區(qū)棉花遭受重大損失，其結(jié)果是由于長(zhǎng)期單一使用化學(xué)農(nóng)藥導(dǎo)致棉鈴蟲(chóng)抗性增強(qiáng)，天敵的控制作用下降是一個(gè)重要原因。因此，研究多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，有利于充分保護(hù)植物的生長(zhǎng)，同時(shí)在生物防治中可起到極大的效果。
本發(fā)明目的在于，經(jīng)過(guò)多年的研究試驗(yàn)，研制出一種多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，充分利用三種昆蟲(chóng)病毒資源優(yōu)勢(shì)將分離出的三種昆蟲(chóng)桿狀病毒復(fù)合成一種劑型，適用于對(duì)實(shí)夜蛾屬及切根夜蛾屬等六種害蟲(chóng)的防治，并可起到兼防蚜蟲(chóng)的作用。
本發(fā)明所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其主要是由棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)(Baculovirus armigera)(CCTCC.NO.V93001)苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒(Baculovirus dipsacea“A”)(CCTCC.NO.V93001)驚紋地老虎顆粒體病毒(Baculovirus exclamations“B”)(CCTCC.NO.V93001)復(fù)配而成，在制做過(guò)程中，首先分別在棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒、驚紋地老虎顆粒體病毒幼蟲(chóng)中通過(guò)活體增殖，得到蟲(chóng)尸，然后按常規(guī)方法獲得純病毒，再以棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)為主毒株，其比率為55.56-76.91%，苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒為輔毒株，其比率為2.65-11.49%，驚紋地老虎顆粒體病毒為輔毒株，其比率為20.44-37.03%，按常規(guī)方法加以復(fù)配制成可濕性粉劑。
本發(fā)明所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，采用了現(xiàn)代病毒研究的方法和手段，分別對(duì)三種毒株進(jìn)行了離心提純，掃描電鏡，透射電鏡，病毒粒子堿釋?zhuān)文へ?fù)染，超薄切片DMA內(nèi)切酶分析等從而進(jìn)行了毒株生物學(xué)特性的研究得出棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)即為多角包涵體(PIB)為不規(guī)則的4-6邊形多角體，大小為1143×978nm；病毒粒子桿狀、兩端平截大小為327×68nm，超薄切片病毒粒子呈單粒包埋，核酸為雙鏈DNA，分子量為68.53×106道爾頓。
苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒，為多角包涵體(PIB)為4-6邊形、棱形、椎形等不規(guī)則多角體，大小為887×834nm；病毒粒子桿狀、兩端鈍圓一般不彎曲，大小為259.2×67.6nm，單粒包埋型，核酸為雙鏈DNA，分子量為65.9×106道爾頓，超薄切片中多角體蛋白質(zhì)晶體，大多呈方陣排列，有時(shí)也有平行排列，晶格距約50A。
驚紋地老虎顆粒體病毒，為顆粒包涵體(GIB)為卵圓形顆粒，包膜內(nèi)有1-2個(gè)病毒粒子，顆粒大小為578×412nm；病毒粒子桿狀，兩端鈍圓，不彎曲或稍彎曲，大小為390×50nm，核酸為雙鏈DNA，分子量為67.85±3.97×106道爾頓。
本發(fā)明所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，在其生長(zhǎng)過(guò)程中，該三種病毒均屬桿狀病毒科，系屬A、B亞組，對(duì)宿主特異性強(qiáng)，亦即是宿主范圍一般較窄，棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒及苜蓿夜蛾核多角體病毒能感染實(shí)夜蛾屬(包括棉鈴蟲(chóng)、苜蓿夜蛾、煙草夜蛾)驚紋地老虎顆粒體病毒能感染切根夜蛾屬(包括驚紋地老虎、黃地老虎、小地老虎)。同時(shí)采用活體增殖方法，在活細(xì)飽以病毒粒子侵入宿主細(xì)飽后，細(xì)飽核為侵染部位，如腸道、血淋巴、脂肪囊等部位，隨后細(xì)飽明顯發(fā)生病變，細(xì)飽逐漸膨大、核仁消失，直至蟲(chóng)體內(nèi)臟液化胞漿內(nèi)核糖體顯著增加，核內(nèi)出現(xiàn)病毒發(fā)生基質(zhì)，其周?chē)L(zhǎng)大量核衣殼，細(xì)胞核的核膜依然完好，因此該三種昆蟲(chóng)病毒有它生長(zhǎng)的共性特征。
在培養(yǎng)中將三種昆蟲(chóng)病毒均采用活體飼養(yǎng)增殖病毒的方法，飼養(yǎng)條件為室溫，飼養(yǎng)方法分別以天然飼料、半合成飼料及合成飼料，保證昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育所必需的碳水化合物，維生素等營(yíng)養(yǎng)，病毒的代謝產(chǎn)物為核酸及病毒蛋白，核酸為DNA雙鏈。
本發(fā)明所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，經(jīng)過(guò)微生物學(xué)檢驗(yàn)，衛(wèi)生指標(biāo)和安全性檢測(cè)其制劑不含大腸桿菌，沙門(mén)氏菌、痢疾菌等致病菌，在動(dòng)物試驗(yàn)中，對(duì)小白鼠進(jìn)行試驗(yàn)，其結(jié)果口服無(wú)毒，腹腔注射致死中量LD50＞2.5mg/g體重，毒性輕微。表明對(duì)人畜無(wú)毒，是安全的生態(tài)-生物農(nóng)藥。
對(duì)農(nóng)田無(wú)敵昆蟲(chóng)安全，噴灑該殺蟲(chóng)劑16天后表明百株草蛉、蜘蛛、食蚜癭蚊等與空白對(duì)照無(wú)異，表明對(duì)維護(hù)天敵居留，保護(hù)益蟲(chóng)資源與生態(tài)環(huán)境，具有良好的效益。
本發(fā)明所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，經(jīng)過(guò)多年的大面積對(duì)棉花、罐藏番茄使用，其棉鈴蟲(chóng)，蛀果率控制在5%以下，以棉花34萬(wàn)畝使用計(jì)算，提高產(chǎn)量達(dá)138萬(wàn)kg；罐番茄2萬(wàn)畝使用后提高產(chǎn)量11萬(wàn)kg。
實(shí)施例以棉花、罐藏番茄、辣椒及煙草為例以棉鈴蟲(chóng)等實(shí)夜蛾害蟲(chóng)為防治對(duì)象時(shí)，棉花掌握在第二或第三代蟲(chóng)蛾羽化盛期或百株卵粒達(dá)12-16粒至初孵期，罐藏番茄、辣椒、豇豆、四季豆、玉米及煙草，掌握在第二代或第三代蟲(chóng)蛾羽化盛期或百株卵粒達(dá)20-24粒至初孵期采用噴霧的形式，每畝噴一次時(shí)取多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑可溫粉劑為40克，(含包涵體20億/g)稀釋水量為40升，噴二次時(shí)，取多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑可溫粉劑為80克(包涵體20億/g)，稀釋水量80升。微量噴霧按每畝次1∶30加水稀釋。飛機(jī)噴霧按每次稀釋水一次為6升，二次為12升，噴后遇雨得進(jìn)行復(fù)噴。該殺蟲(chóng)劑不可加入堿性物或殺菌劑，配藥用水PH為7左右。
權(quán)利要求
1.一種用于多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于它是棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)(Baculovirus araigera)(CCTCC，NO，V93001)。
2.一種用于多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于它是苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒(Baculovirus dipsacea“A”)(CCTCC.NO.V93001)。
3.一種用于多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于它是驚紋地老虎顆粒體病毒(Baculovirus exclamations“B”)(CCTCC.NO.V93001)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、所述的多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其特征在于首先分別在棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒、驚紋地老虎顆粒體病毒幼蟲(chóng)中通過(guò)活體增殖，得到蟲(chóng)尸，然后按常規(guī)方法獲得純病毒，再以棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)為主毒株，其比率為55.56-76.91%，苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒為輔毒株，其比率為2.65-11.49%，驚紋地老虎顆粒體病毒為輔毒株，其比率為20.44-37.03%，按常規(guī)方法加以復(fù)配制成可濕性粉劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及微生物中利用三種病毒復(fù)配制得多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑，其主要是采用棉鈴蟲(chóng)核多角體病毒(新疆株)、苜蓿夜蛾(亞麻夜蛾)核多角體病毒、驚紋地老虎顆粒體病毒三種昆蟲(chóng)病毒復(fù)配制成多價(jià)體昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑可濕粉劑，該殺蟲(chóng)劑適用于實(shí)夜蛾屬及切根夜蛾屬等六種害蟲(chóng)的殺蟲(chóng)及防治，并可起到兼治蚜蟲(chóng)的作用，經(jīng)過(guò)大面積的試驗(yàn)證明，對(duì)棉花、罐藏番茄、辣椒、豇豆、四季豆、玉米等使用后其棉鈴蟲(chóng)、蛀果率控制在5％以下。
文檔編號(hào)A01N63/04GK1102054SQ9311967
公開(kāi)日1995年5月3日 申請(qǐng)日期1993年10月26日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月26日
發(fā)明者陳譽(yù), 任德新, 王琳娜, 張春竹, 黃偉 申請(qǐng)人:新疆巴音郭蒙古自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所