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一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基的制作方法

文檔序號:11391096閱讀:564來源:國知局
本發(fā)明涉及栽培技術(shù),尤其涉及白芨組織育苗培養(yǎng)。
背景技術(shù)
:白芨(bletillastriata(thunb.)reichb.f.)為蘭科(orchidaceae)植物白芨屬多年生草本植物,以干燥塊莖入藥。具有收斂止血,消腫生肌的功效。對咯血、吐血、便血及外傷止血、瘡瘍腫毒、手足跋裂等有較好療效,廣泛用于治療肺結(jié)核及支氣管擴張咯血、胃潰瘍出血等癥,其白芨膠廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和日用化學(xué)品等領(lǐng)域,市場需求量大增,帶動大面積的白芨種植。在白芨育苗階段,如何增加出芽量,提高育苗數(shù)量是本發(fā)明的研究主體,其常規(guī)解決辦法是采用組織培養(yǎng),如專利號為cn201110175931.1的發(fā)明專利“一種快速繁殖白芨苗的方法”,能夠獲得大量的白芨幼苗,對原球莖進行切碎后用培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng),由于其對切碎的原球莖的愈合能力有限,故此在進行培育前需要用中毒性的洗衣粉和高毒性的升汞溶液對假鱗莖進行消毒,不僅對白芨造成污染,而且還會影響育苗的成活率。技術(shù)實現(xiàn)要素:為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,具體方案為:一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20~30g、氨基酸50~75mg、維生素1~4mg、瓊脂10~25g、左旋龍腦20~40mg;溶劑為水。進一步的,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種。進一步的,所述氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶(1~3)∶(3~5)∶(1~3)∶(2~5)。進一步的,所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,進一步的,所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶(1~4)∶(4~7)∶(1~3)。進一步的,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有激動素10~15mg。進一步的,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有生長素0.1~0.3mg。進一步的,所述的生長素為5-羥-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的組合,其組合比例為10∶(1~4)∶(2~5)。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供的愈合培養(yǎng)基能夠快速愈合白芨原球莖的切割面,其愈傷組織誘導(dǎo)率高于80%,愈傷指標(biāo)數(shù)在3以上,生長率高于70%。具體實施方式下面進一步描述本發(fā)明的技術(shù)方案,但要求保護的范圍并不局限于所述。實施例一本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20g、氨基酸50mg、維生素1mg、瓊脂10g、左旋龍腦20mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實施例選擇等量的甘氨酸和異亮氨酸所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實施例選擇等量的維生素b1、維生素b2與肌醇的組合。實施例二本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖30g、氨基酸75mg、維生素4mg、瓊脂25g、左旋龍腦40mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實施例選擇等量的異亮氨酸和蘇氨酸;所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實施例選擇等量的、維生素b2、維生素b12與肌醇的組合。實施例三本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖25g、氨基酸60mg、維生素3mg、瓊脂15g、左旋龍腦30mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少兩種;本實施例選擇等量的蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸;維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12中的至少兩種與肌醇的組合,本實施例選擇等量的維生素b1、維生素b12與肌醇的組合。實施例四本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖20g、氨基酸50mg、維生素1mg、瓊脂10g、左旋龍腦20mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶1∶3∶1∶2。維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶1∶4∶1。實施例五本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖30g、氨基酸75mg、維生素4mg、瓊脂25g、左旋龍腦40mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶3∶5∶3∶5。所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶4∶7∶3。實施例六本實施例提供了一種白芨組織育苗培養(yǎng)的愈傷組織培養(yǎng)基,該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為含有蔗糖25g、氨基酸60mg、維生素3mg、瓊脂15g、左旋龍腦30mg;溶劑為水。上述中,所述的氨基酸為甘氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、色氨酸、半胱氨酸的組合,其比例為10∶2∶4∶2∶4。所述的維生素為維生素b1、維生素b2、維生素b12、肌醇的組合,其比例為7∶3∶5∶2。實施例七本實施例與實施例六不同的地方在于:該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有激動素10~15mg。實施例八本實施例與實施例七不同的地方在于:該愈傷組織培養(yǎng)基的每升溶液為還含有生長素0.1~0.3mg,生長素為5-羥-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的組合,其組合比例為10∶(1~4)∶(2~5)。同時,為了證明本發(fā)明的有益效果,本發(fā)明還提供了以下試驗例:取白芨的原球莖切成小塊,用該培養(yǎng)基進行愈合培養(yǎng),分別選擇用實施例一~實施例八的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),標(biāo)號為s1~s8,,利用spss統(tǒng)計分析如啊年對實驗結(jié)果做回歸系數(shù)的季涮和統(tǒng)計檢驗。、培養(yǎng)條件:原球莖先進行消毒,然后在進行切成碎塊,培養(yǎng)溫度24±1℃700勒克斯下進行培養(yǎng),測試指標(biāo)包括最早出現(xiàn)愈傷組織的時間、原球莖的愈傷率和愈傷組織的生長率;根據(jù)原球莖的傷化程度,將愈傷指數(shù)分成5級,無愈傷化為0級,愈傷化在0~25%的為1級,在26%~50%的為2級,在51%~75%的為3級,76%~100%為4級。愈合組織生長率=((收獲量-接種量)/接種量)/培養(yǎng)時間白芨的原球莖切成小碎塊后再培養(yǎng)基中培養(yǎng)30d,調(diào)查愈傷數(shù)、誘導(dǎo)率、平均愈傷指數(shù)、生長率。表1編號接種數(shù)愈傷數(shù)誘導(dǎo)率平均愈傷指數(shù)生長率s130250.833.150.75s230260.863.211.01s330240.83.210.84s430250.833.180.94s530270.93.191.21s630280.933.171.2s730270.93.191.18s830270.93.231.14通過上表可以看出,本實施例提供的愈合培養(yǎng)基的愈傷組織誘導(dǎo)率均較高,達到80%~100%,平均愈傷數(shù)達到3以上。當(dāng)前第1頁12
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