本發(fā)明涉及植物繁殖技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法。

背景技術(shù)：

白芨是蘭科白芨屬的一種，也稱白及。多年生草本，高20～50厘米，葉4～5枚，基部互相套疊成莖狀，中央抽出花葶?？偁罨ㄐ蚓邤?shù)朵花；花紫色或淡紅色，直徑約5厘米，由3枚萼片、2枚花瓣和1枚特化的唇瓣組成；唇瓣3裂，上面有縱褶片；雄蕊與花柱合生而成合蕊柱，合蕊柱頂端有一個(gè)花藥，前上方有一個(gè)柱頭凹穴。地下有粗厚的根狀莖，如雞頭狀，富粘性，含白及膠質(zhì)，即白及甘露聚糖，可供藥用，有止血補(bǔ)肺、生肌止痛之效，也可供作糊料。

目前，公告號為cn106416972a的中國專利公開了一種快速培養(yǎng)白芨種苗的方法，它包括將白芨的種子經(jīng)萌發(fā)培養(yǎng)、原球莖分化培養(yǎng)、鱗莖誘導(dǎo)培養(yǎng)和馴化后，得到白芨幼苗的方法。

這種快速培養(yǎng)白芨種苗的方法雖然整齊性較好，變異幾率小，但是其主要通過剖開白芨無菌塑果，從而取出種子直接在萌發(fā)液體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)從而得到白芨原球莖，但是這種種植方式是通過將種子放置在培養(yǎng)基內(nèi)從而進(jìn)行繁殖培育，但是很難進(jìn)行大規(guī)模種植，對于工廠化、商業(yè)化繁育培植來說較為困難。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，其具有可以滿足白芨大規(guī)模種植對商業(yè)種苗繁育需要，通過使用上述育苗方式，可以使得白芨育苗繁殖工廠化、規(guī)模化的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的上述技術(shù)目的是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：

一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選取：選用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，在培養(yǎng)4～8周后，休眠腋芽萌發(fā)，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)4～10周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)的裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)2～7天，然后給予光照，培養(yǎng)8～16周后，裸胚進(jìn)一步發(fā)育并長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，將經(jīng)過壯苗培養(yǎng)的無根組培苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，暗培養(yǎng)2～7天，給予光照，培養(yǎng)8～16周，完成生根。

通過采用上述技術(shù)方案，常規(guī)育苗方式是靠低下根狀莖分株繁殖，繁殖系數(shù)低，繁殖速度緩慢，無法滿足大規(guī)模種植需求；其種子為不具胚乳的裸胚，自然條件下不具有存活力，因此現(xiàn)有技術(shù)將種子直接放置在培養(yǎng)基上，從而提供種子營養(yǎng)使得種子生長成白芨原球莖，通過種子進(jìn)行培養(yǎng)，本發(fā)明通過將種子剖開，從而使得裸胚直接與啟動(dòng)培養(yǎng)基接觸，從而通過對裸胚的培育，使得裸胚萌芽，啟動(dòng)培養(yǎng)基可以快速打破裸胚休眠，促進(jìn)裸胚萌發(fā)，同時(shí)能夠有效促使愈傷組織的產(chǎn)生，在培養(yǎng)一段時(shí)間后將萌芽的裸胚放入壯苗培養(yǎng)基中，使得萌芽的裸胚長出真葉，壯苗培養(yǎng)基可以保障萌芽裸胚的生長人為可控，在苗長高，長出真葉的同時(shí)抑制根系生長，便于后續(xù)轉(zhuǎn)瓶分株操作，由于白芨的種子去除后容易失水干癟，從而使得種子散失生命力，通過裸胚與啟動(dòng)培養(yǎng)基的直接接觸，從而使得出苗率達(dá)到100％，同時(shí)可以使得萌芽快速生長出苗，出苗越快，苗越壯大，因此使用該方法可以快速大規(guī)模的培養(yǎng)白芨，從而使得培育白芨可以工廠化，規(guī)?；谂嘤^程中，首先外植體的選擇應(yīng)當(dāng)選擇當(dāng)年春末夏初人工授粉并成功結(jié)實(shí)的果莢，在9月中下旬果莢成熟開裂前采收，選取果莢個(gè)大，下垂，沒開裂的果莢為外植體，避免開裂的外植體被細(xì)菌等入侵到內(nèi)部，其次對外植體進(jìn)行消毒，保證在培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基等不會(huì)被外植體所攜帶的病菌侵蝕，從而再進(jìn)行進(jìn)一步的啟動(dòng)、壯苗及生根培養(yǎng)。

進(jìn)一步設(shè)置：所述消毒液包括如下組份：漂白水1份及4份無菌水。

通過采用上述技術(shù)方案，需要對外植體進(jìn)行有效的消毒，將外植體表面攜帶的病菌深層次的去除，使得后期培育時(shí)減少出現(xiàn)因?yàn)楸徊【治g而出現(xiàn)失敗的可能。

進(jìn)一步設(shè)置：所述啟動(dòng)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)6周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)8周，完成啟動(dòng)培養(yǎng)。

通過采用上述技術(shù)方案，在啟動(dòng)培養(yǎng)階段，需要將通過合適的環(huán)境打破裸胚休眠，促進(jìn)裸胚萌發(fā)，通過光照作用使得裸胚進(jìn)行光合作用，而暗培養(yǎng)則是胚芽進(jìn)行呼吸作用，從而通過控制光周期的時(shí)間以及光照強(qiáng)度，選擇最為合適裸胚生長萌芽的光周期，從而使得裸胚萌芽，直至從黃色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色膨大個(gè)體。

進(jìn)一步設(shè)置：所述s5中培養(yǎng)環(huán)境為溫度25℃，暗培養(yǎng)5天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)12周。

通過采用上述技術(shù)方案，當(dāng)萌芽的裸胚需要進(jìn)行壯苗時(shí)，放入壯苗培養(yǎng)基內(nèi)，給予光照，使其快速生長，呼吸作用和光合作用的不斷交替，從而使得長出的苗較為高大，同時(shí)整體生長良好。

進(jìn)一步設(shè)置：所述無根組培苗為高度1～1.5cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天16小時(shí)光照，8小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)12周，完成生根通過采用上述技術(shù)方案，對無根組培苗進(jìn)行培養(yǎng)后將其移到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根。

進(jìn)一步設(shè)置：所述啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.0～3.5mg/l；蔗糖：15～45g/l；瓊脂：5.5～7.0g/l。

通過采用上述技術(shù)方案，ms培養(yǎng)基其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適，能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，用其主要作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基，6-芐氨基腺嘌呤具有高效、穩(wěn)定、廉價(jià)和易于使用等特點(diǎn)，6-芐氨基腺嘌呤的主要作用是促進(jìn)芽的形成，也可以誘導(dǎo)愈傷組織發(fā)生，而加入瓊脂的固體培養(yǎng)基與液體培養(yǎng)基相比優(yōu)點(diǎn)在于操作簡便，通氣問題易于解決，便于經(jīng)常觀察研究，而蔗糖則作為培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)碳源，供給細(xì)胞生長所需要的養(yǎng)分。

進(jìn)一步設(shè)置：所述壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：0.5～1.5mg/l；蔗糖：20～30g/l；瓊脂：5.0～7.0g/l。

通過采用上述技術(shù)方案，該配方能夠保障萌芽裸胚的生長人為可控，在苗長高，并長出真葉的同時(shí)抑制根系生長，便于后續(xù)轉(zhuǎn)瓶分株操作，通過分株的操作使其可以大規(guī)模生產(chǎn)。

進(jìn)一步設(shè)置：所述生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：1～3.0mg/l；活性炭：0.5～1.0g/l；蔗糖：15～30g/l；瓊脂：5.0～7.0g/l。

通過采用上述技術(shù)方案，配方和操作方式能夠保障種苗充分生根，并且根系都位于培養(yǎng)基表面，便于在移栽時(shí)取苗，降低損傷，促進(jìn)快速成活，活性炭由于其本身為吸附性較強(qiáng)的吸附劑，可以更好的減輕外植體的褐變現(xiàn)象。

綜上所述，本發(fā)明具有以下有益效果：通過上述種植方式可以滿足白芨大規(guī)模種植對商業(yè)種苗繁育的需要，并通過裸胚培育使得生根率達(dá)到100％，遠(yuǎn)高于現(xiàn)有技術(shù)，有效滿足白芨工廠化、規(guī)模化的培育。

具體實(shí)施方式

以下對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

實(shí)施例1：一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選?。哼x用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次，取出放無菌濾紙上吸干明水備用；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：3.0mg/l；蔗糖：30g/l；瓊脂：6.0g/l；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)6周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)8周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)的裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.0mg/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，溫度25℃，暗培養(yǎng)5天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)12周，使壯苗長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，選取無根組培苗為高度1cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：2.0mg/l；活性炭：0.8g/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天16小時(shí)光照，8小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)12周完成生根。

實(shí)施例2：一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選取：選用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次，取出放無菌濾紙上吸干明水備用；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：3.5mg/l；蔗糖：45g/l；瓊脂：7.0g/l；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)6周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)8周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.5mg/l；蔗糖：30g/l；瓊脂：7.0g/l，溫度25℃，暗培養(yǎng)5天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)12周，使壯苗長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，選取無根組培苗為高度1cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：1～3.0mg/l；活性炭：1.0g/l；蔗糖：30g/l；瓊脂：7.0g/l，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天16小時(shí)光照，8小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)12周完成生根。

實(shí)施例3：一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選?。哼x用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次，取出放無菌濾紙上吸干明水備用；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.0mg/l；蔗糖：15g/l；瓊脂：5.5g/l；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)6周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)8周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)的裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：0.50mg/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：5.0g/l，溫度25℃，暗培養(yǎng)5天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)12周，使壯苗長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，選取無根組培苗為高度1cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：1.0mg/l；活性炭：0.5g/l；蔗糖：15g/l；瓊脂：5.0g/l，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天16小時(shí)光照，8小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)12周完成生根。

實(shí)施例4：一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選?。哼x用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次，取出放無菌濾紙上吸干明水備用；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：3.0mg/l；蔗糖：30g/l；瓊脂：6.0g/l；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照16小時(shí)，暗培養(yǎng)8小時(shí)，培養(yǎng)4周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)4周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)的裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.0mg/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，溫度25℃，暗培養(yǎng)2天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照12小時(shí)，暗培養(yǎng)12小時(shí)，培養(yǎng)8周，使壯苗長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，選取組培苗為高度1cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：2.0mg/l；活性炭：0.8g/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天12小時(shí)光照，12小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)8周完成生根。

實(shí)施例5：一種藥用白芨無菌播種快速育苗方法，包括如下培養(yǎng)步驟：

s1：外植體選取：選用結(jié)實(shí)的白芨果莢，在果莢成熟開裂前采收，選用表面無裂縫的果莢作為外植體；

s2：外植體消毒，使用酒精棉擦拭外植體表面的灰塵，使用消毒水對外植體進(jìn)行浸泡，浸泡30～60分鐘，浸泡消毒完成后使用無菌水對外植體進(jìn)行沖洗，沖洗3～4次，取出放無菌濾紙上吸干明水備用；

s3：啟動(dòng)培養(yǎng)，將消毒后的外植體沿中間部位切開，切成1cm～2cm的節(jié)段，用鑷子夾住外植體在培養(yǎng)基瓶口上方輕輕抖動(dòng)數(shù)下，將果莢內(nèi)成黃色的粉末狀裸胚接種到芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，啟動(dòng)培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：3.0mg/l；蔗糖：30g/l；瓊脂：6.0g/l；對培養(yǎng)室進(jìn)行光照，培養(yǎng)室內(nèi)溫度為25℃，光照強(qiáng)度2000lux，光照20小時(shí)，暗培養(yǎng)4小時(shí)，培養(yǎng)8周，裸胚由黃色轉(zhuǎn)為綠色膨大個(gè)體時(shí)，繼續(xù)培養(yǎng)10周，使得萌芽裸胚繼續(xù)增大，完成啟動(dòng)培養(yǎng)；

s4：壯苗培養(yǎng)，將萌發(fā)的裸胚接種于固體壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；6-芐氨基腺嘌呤：1.0mg/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，溫度25℃，暗培養(yǎng)7天，給予光照，光照強(qiáng)度1500lux，光照周期為每天光照20小時(shí)，暗培養(yǎng)4小時(shí)，培養(yǎng)16周，使壯苗長出真葉；

s5：生根培養(yǎng)，選取組培苗為高度1.5cm的壯苗，用勺子舀出，平鋪于生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，

生根培養(yǎng)基主要包括以下組份：每升水中添加ms培養(yǎng)基：4.7g/l；萘乙酸：2.0mg/l；活性炭：0.8g/l；蔗糖：20g/l；瓊脂：6.0g/l，暗培養(yǎng)5天，然后給予光照，光照強(qiáng)度2000lux，光照周期為每天20小時(shí)光照，4小時(shí)暗培養(yǎng)，環(huán)境溫度控制在25℃，培養(yǎng)16周完成生根。

將上述實(shí)施例1至實(shí)施例5在對外植體消毒后進(jìn)行病毒檢測，同時(shí)觀察裸胚放入啟動(dòng)培養(yǎng)基后觀察萌芽裸胚的生長情況，放入壯苗培養(yǎng)基內(nèi)的真葉生長情況，放入生根培養(yǎng)基后的苗高情況及生根系數(shù)進(jìn)行分析對比，結(jié)果如下表所示：

從上表可以得出，通過上述繁殖方式以及運(yùn)用合適啟動(dòng)培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基，可以快速繁殖白芨，生根率達(dá)到100％，同時(shí)有效健壯根1～3條，根長20～40mm，根粗1～2mm，苗高3～5cm，完全適合白芨的工廠化生產(chǎn)，有利于大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)椴樹種苗。

上述的實(shí)施例僅僅是對本發(fā)明的解釋，其并不是對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員在閱讀完本說明書后可以根據(jù)需要對本實(shí)施例做出沒有創(chuàng)造性貢獻(xiàn)的修改，但只要在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)都受到專利法的保護(hù)。