促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸b積累的誘導(dǎo)法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法，包括以下步驟：1)、丹參毛狀根的初培養(yǎng)：在每100mL的6,7-V培養(yǎng)基中接種0.3～0.4g丹參毛狀根，于100～150rpm、24～26℃的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)17～19天；2)、丹參毛狀根的繼續(xù)培養(yǎng)：然后添加5-氮雜胞苷溶液，使6,7-V培養(yǎng)基中5-氮雜胞苷的終濃度為9～11μM；于100～150rpm、24～26℃的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)5～7天。本發(fā)明通過使用5-氮雜胞苷處理丹參毛狀根，從而促進(jìn)丹參毛狀根中次生代謝產(chǎn)物迷迭香酸和丹酚酸B的積累。
【專利說明】促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法。

【背景技術(shù)】
[0002] 丹參（Salviamiltiorrhiza)為唇形科植物丹參的根及根莖，有活血祛瘀，清熱安 神、養(yǎng)血益氣之功效。丹酚酸是丹參有效成分之一，主要包括迷迭香酸和丹酚酸B等。由于 在治療心血管系統(tǒng)疾病中的突出表現(xiàn)和無毒負(fù)作用的特點，丹參的應(yīng)用和研宄也越來越廣 泛。
[0003] 目前現(xiàn)有的丹參毛狀根可采用6, 7-V培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。一般稱取新鮮丹參毛狀根 0. 15?0. 2g接種于50mL的6, 7-V培養(yǎng)基中進(jìn)黑暗培養(yǎng)。丹參毛狀根在生產(chǎn)丹參有效成分 方面有著巨大潛力，但活性成分含量較低已成為制約丹參毛狀根應(yīng)用的瓶頸。
[0004] 含30g/L蔗糖的6, 7-V培養(yǎng)基的配方如表1所示，pH值為5. 8,121°C滅菌20min。
[0005] 表1、6, 7-V培養(yǎng)基的配方
[0006]

【權(quán)利要求】
1. 促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法，其特征是包括以下步驟： 1) 、丹參毛狀根的初培養(yǎng)： 在每lOOmL的6, 7-V培養(yǎng)基中接種0. 3?0. 4g丹參毛狀根，于100?150rpm、24? 26°C的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)17?19天； 2) 、丹參毛狀根的繼續(xù)培養(yǎng)： 然后添加5-氮雜胞苷溶液，使6, 7-V培養(yǎng)基中5-氮雜胞苷的終濃度為9?11 yM ;于 100?150rpm、24?26°C的培養(yǎng)條件下黑暗培養(yǎng)5?7天。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法，其特 征是： 5_氮雜胞苷溶液的配制方法為： 將0. 1221g的5-氮雜胞苷溶于5ml無菌水中，用0. 22 ym無菌濾頭過濾除菌，得5-氮 雜胞苷溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法， 其特征是： 步驟2)中5-氮雜胞苷的終濃度為10 y M。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的促進(jìn)丹參毛狀根中迷迭香酸和丹酚酸B積累的誘導(dǎo)法，其特 征是： 所述步驟1)和步驟2)的培養(yǎng)條件均為：110rpm，25°C ; 步驟1)的黑暗培養(yǎng)時間為18天，步驟2)的黑暗培養(yǎng)時間為6天。
【文檔編號】A01H4/00GK104472363SQ201410735636
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月5日
【發(fā)明者】梁宗鎖, 楊東風(fēng), 黃志成, 郭萬里, 祁哲晨, 張曉丹 申請人:浙江理工大學(xué)