一種制備耐鹽嫁接苗的方法
【專利摘要】一種制備耐鹽嫁接苗的方法,屬于農(nóng)林生物【技術(shù)領(lǐng)域】。選育耐鹽植物可以開發(fā)利用低產(chǎn)鹽堿地,具有良好的經(jīng)濟(jì)效益與生態(tài)效益。通過功能基因組比對,克隆耐鹽相關(guān)基因;構(gòu)建耐鹽基因的植物表達(dá)載體;選擇農(nóng)藝性狀表現(xiàn)良好、適應(yīng)性強(qiáng)、對接穗性狀有良好主要的物種做砧木種源;通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)或其他手段轉(zhuǎn)化該砧木種子;篩選與鑒定耐鹽砧木幼苗;培育非轉(zhuǎn)基因幼苗;耐鹽轉(zhuǎn)基因幼苗為砧木靠接、芽接或劈接非轉(zhuǎn)基因接穗;培育嫁接苗,獲得耐鹽轉(zhuǎn)基因種苗。
【專利說明】一種制備耐鹽嫁接苗的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]一種制備耐鹽嫁接苗的方法,屬于農(nóng)林生物【技術(shù)領(lǐng)域】??梢詮V泛應(yīng)用于農(nóng)林、園藝等方面。
【背景技術(shù)】
[0002]我國擁有大量的鹽堿地有待開發(fā)。選育耐鹽堿植物新品種與改良土壤等是利用鹽堿地的主要手段。有些生物具有天然的抗鹽特性,它們擁有大量的耐鹽基因,通過轉(zhuǎn)基因手段可以獲得轉(zhuǎn)基因耐鹽新品種。但由于公眾對轉(zhuǎn)基因食品安全、轉(zhuǎn)基因植物花粉對環(huán)境的可能影響等擔(dān)憂,轉(zhuǎn)基因品種的推廣受到了一定的限制。僅利用轉(zhuǎn)基因耐鹽材料作為砧木,非轉(zhuǎn)基因材料作為接穗,從接穗上收獲農(nóng)產(chǎn)品等,就可以避免人們對這方面的擔(dān)憂。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]通過功能基因組比對,克隆耐鹽相關(guān)基因;構(gòu)建耐鹽基因的植物表達(dá)載體;選擇農(nóng)藝性狀表現(xiàn)良好、適應(yīng)性強(qiáng)、對接穗性狀有良好主要的物種做砧木種源;通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)或其他手段轉(zhuǎn)化該砧木種子;篩選與鑒定耐鹽砧木幼苗;培育非轉(zhuǎn)基因幼苗;耐鹽轉(zhuǎn)基因幼苗為砧木靠接、芽接或劈接非轉(zhuǎn)基因接穗;培育嫁接苗,獲得耐鹽轉(zhuǎn)基因種苗。
【具體實(shí)施方式】
[0004]1.通過功能基因組比對,克隆耐鹽基因。
[0005]甜菜堿醛脫氫酶基因(BADH)來自于耐鹽植物。該酶催化形成的小分子能改善細(xì)胞膜的耐鹽能力。依據(jù)GenBank提供的核苷酸序列,兩端引入各引入一個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別學(xué)列,設(shè)計(jì)相關(guān)引物,從該耐鹽植物基因組中PCR基因BADH片段;鏈接、測序比對正確,獲得完整BADH基因。
[0006]2.構(gòu)建耐鹽基因的植物表達(dá)載體。
[0007]采用植物表達(dá)載體pCAMBIA1301,在其多克隆位點(diǎn)引入:35S啟動(dòng)子-BADH基因-Nos終止子外源DNA片段。T-DNA左右邊界內(nèi)含潮霉素抗性基因的完整表達(dá)框。表達(dá)載體通過熱激法轉(zhuǎn)入LB4404根瘤農(nóng)桿菌中。
[0008]3.選擇農(nóng)藝性狀表現(xiàn)良好、適應(yīng)性強(qiáng)、對接穗性狀有良好主要的物種做砧木種源。
[0009]購買了國內(nèi)6個(gè)西瓜的主栽品種,在天津種植,觀察它們的耐鹽耐旱、抗病等性狀,結(jié)果見表1 由此表1科長,2號作為砧木種源較好。
[0010]表1六個(gè)西瓜品種的農(nóng)藝性狀比較
[0011]
【權(quán)利要求】
1.選擇農(nóng)藝性狀優(yōu)良、適應(yīng)性強(qiáng)的物種作為砧木種源,通過轉(zhuǎn)基因手段,獲得并鑒定轉(zhuǎn)基因耐鹽種子,經(jīng)培育后,其幼苗和成體均可作為耐鹽砧木。
2.采用非轉(zhuǎn)基因種子培育的幼苗或 芽體作為接穗,通過靠接、芽接或劈接等方式與轉(zhuǎn)基因耐鹽砧木進(jìn)行嫁接,培育耐鹽嫁接苗。
【文檔編號】A01G1/06GK103757051SQ201410058433
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年2月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月20日
【發(fā)明者】李興林 申請人:天津科技大學(xué)