一種低褐變絲瓜的雜交育種方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種低褐變絲瓜的雜交育種方法，以白玉霜絲瓜經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LWB-02為母本，以玉露絲瓜經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LJ-01為父本，進行雜交，獲得雜交種玉龍。通過本發(fā)明的方法獲得的新的雜交品種，瓜皮白色、有光澤、瓜肉緊實、單瓜重較大，解決了一般普通絲瓜在運輸和烹飪加工過程中瓜肉容易發(fā)生褐變的問題，提高了絲瓜的內(nèi)在品質(zhì)，滿足了消費者對絲瓜的高品質(zhì)要求。同時，將篩選的非褐變自交系LJ-01作為父本與其他褐變材料進行雜交后，其雜交后代的褐變程度可以明顯降低，由此自交系LJ-01可以作為一份選育低褐變品種的核心材料進行利用。
【專利說明】一種低褐變絲瓜的雜交育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于絲瓜雜交育種【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種低褐變普通絲瓜品種的雜交育種方法。
【背景技術(shù)】
[0002]絲瓜屬葫蘆科絲瓜屬一年生攀緣性草本植物，分為普通絲瓜和有棱絲瓜兩種栽培類型，雌雄同株異花，以主蔓結(jié)瓜為主。絲瓜不僅含有人體所需要的多種營養(yǎng)成分，而且含有多種藥用化學(xué)成分，具有抗應(yīng)急，增強免疫，鎮(zhèn)靜抗炎、抗氧化和抗病毒等功效，作為一種藥膳兼?zhèn)涞谋＝⌒褪卟耍z瓜需求量不斷增大，栽培面積呈擴大趨勢。
[0003]絲瓜的育種工作起步較晚，生產(chǎn)上栽培多以表現(xiàn)優(yōu)良的地方品種為主，由于長期自交，導(dǎo)致這些品種的整齊度下降、優(yōu)良性狀也逐漸退化。近幾年各地的育種工作者通過雜交育種方法培育了一批優(yōu)良新品種，其中也有少數(shù)絲瓜雜交育種方法申請了專利，如CN1526275、CN101496494、CN101502233、CN103004581A 等，他們多集中于絲瓜的早熟性、豐產(chǎn)性、抗性方面的研究，而有關(guān)絲瓜的品質(zhì)育種研究較少，內(nèi)在品質(zhì)育種還尚未展開。
[0004]絲瓜在運輸、烹飪加工過程中，由于組織受到機械損傷，其果肉容易發(fā)生褐變，導(dǎo)致產(chǎn)品的感官、味道和內(nèi)在的營養(yǎng)價值下降，難以滿足消費者對絲瓜高品質(zhì)的要求，這已成為絲瓜消費中的一個重要問題。近些年，我國臺灣地區(qū)開始重視低褐變或非褐變有棱絲瓜的選育和基礎(chǔ)研究工作，而有關(guān)低褐變的普通絲瓜品種選育在國內(nèi)外還鮮有報道。
[0005]通過篩選低褐變絲瓜種質(zhì)資源，利用雜種優(yōu)勢育種改善絲瓜的內(nèi)在品質(zhì)已成為絲瓜生產(chǎn)迫切需要解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】
`
[0006]本發(fā)明的目的是在于提供了一種低褐變絲瓜的雜交育種方法，方法易行，操作簡便，通過本方法選育的絲瓜品種瓜肉細膩緊致、褐變度低的優(yōu)點，可以改善絲瓜肉經(jīng)烹飪加工后容易發(fā)生褐變這一內(nèi)在品質(zhì)，滿足消費者對絲瓜的高品質(zhì)要求。
[0007]為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0008]一種低褐變絲瓜的雜交育種方法，其步驟是:
[0009]I)以湖北省武漢市地方品種“白玉霜”絲瓜為原始材料，根據(jù)“第一雌花節(jié)位低、瓜形長筒形、瓜皮黃白色、微皺、瓜肉低褐變”育種目標，經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LWB-02。自交系LWB-02葉形掌狀深裂，葉色深綠，生長勢強，第一雌花節(jié)位在11-13節(jié)，主側(cè)、蔓均可結(jié)瓜，中熟，連續(xù)結(jié)果力強，瓜形為長圓筒形、瓜皮黃白色、微皺，瓜肉白色、松軟、細嫩、烹飪后瓜肉褐變低。該自交系不足之處是，果肉松軟，在運輸途中不耐擠壓且果皮易褐化。
[0010]2)以浙江省義烏市地方品種“玉露”絲瓜為原始材料，根據(jù)“第一雌花節(jié)位低、瓜形相對順直、瓜皮白色、光滑、有光澤、瓜肉非褐變”育種目標，經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LJ-Ol。自交系LJ-Ol生長勢中等、葉片掌狀深裂、葉色深綠、表面有黃色斑點，第一雌花節(jié)位在9-11節(jié)，主側(cè)、蔓均可結(jié)瓜，連續(xù)掛果力強，商品瓜形狀為短棍棒形，瓜皮白色、近瓜蒂端深綠色，表面光滑、有光澤，瓜肉淡綠色、肉質(zhì)細膩、緊致、味微甜、烹飪后不褐變。該自交系不足之處是，果實商品性較差，上部細、中下部粗大，果皮極薄，容易裂果和受昆蟲危害，果皮碰撞后易褐變，不耐運輸。
[0011]3)以低褐變絲瓜“白玉霜”的高代自交系LWB-02為母本，以非褐變絲瓜“玉露”的自交系LJ-Ol為父本進行雜交，配制成普通絲瓜雜交種“玉龍”?！坝颀垺敝仓晟L勢強，葉片掌狀深裂、深綠色、表面有黃色斑點，第一雌花節(jié)位8-10節(jié)，連續(xù)結(jié)果力強，有雌花序，水肥管理好的情況下可以一節(jié)多瓜，瓜皮白色、近瓜蒂端深綠色、瓜面光亮、有微棱，瓜肉淺綠色、肉質(zhì)細膩微甜、烹飪后瓜肉低(非)褐變。建議采收后用泡沫網(wǎng)套包裝上市，以保持該果實原有的商品性。
[0012]4)繁殖本發(fā)明品種“玉龍”的步驟長江中下游地區(qū)按照下列步驟進行制種:①播種育苗，2月下旬-4月下旬在育苗，在大棚、溫室內(nèi)鋪電熱線或采用地膜覆蓋加小拱棚加草簾覆蓋進行育苗；②定植，幼苗3_4片真葉期即可定植,株距40-50cm,行距3-4m,米用木樁或水泥樁作支架，棚頂拉鐵絲和爬藤網(wǎng)，呈倒“U”性栽植，父母本比例為1:8-12 田間、水肥，去除過多的側(cè)蔓，整個生長期要保證田間通風(fēng)透光；前期按一般常規(guī)方法進行水肥管理，座果后追施復(fù)合肥和尿素，田間保持濕潤沒有積水；④授粉，開花和掛果期，及時去除不符合父母本品種特征特性的植株，然后用紅色的膨體紗將次日開放的母本的雌花和父本的雄花扎緊，次日早上集中采摘雄花，6:00-9:00對雌花進行授粉，授粉后再扎住雌花花冠并在花柄處系線做標記，一般一株坐穩(wěn)3-4個瓜即可停止授粉，授粉結(jié)束后及時摘掉母本未授粉雌花或果實；⑤病蟲害防治，蟲害主要有瓜食蠅、黃守瓜，病害主要是疫病，其中瓜食蠅和疫病是造成絲瓜爛果的主要原因，生產(chǎn)上可以通過噴硫酸銅制劑、敵敵畏和掛黃板防治，特別是雨水來臨前及時噴施硫酸銅制劑防治疫病，雨水后及時排除積水。每4-5天噴一次，雨水來臨前及時排除積水并噴藥預(yù)防；⑥采收，種瓜由重變輕且瓜皮變黑或發(fā)現(xiàn)瓜皮出現(xiàn)大面積黑色病斑時進行采收，剝?nèi)ス掀みM行晾曬，待種瓜變干后取種。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
[0014]I)本發(fā)明選育了一個低褐變絲瓜品種“玉龍”，解決了一般普通絲瓜在運輸和烹飪加工過程中瓜肉容易發(fā)生褐變的問題，提高了絲瓜的內(nèi)在品質(zhì)，滿足了消費者對絲瓜的高品質(zhì)要求。
[0015]2)本發(fā)明選育的絲瓜品種“玉龍”瓜皮白色、有光澤、瓜肉緊實、單瓜重較大，其外觀品質(zhì)、產(chǎn)量和運輸抗擠壓能力遠高于湖北省武漢地區(qū)的當(dāng)家品種“白玉霜”，由此可以改善該地區(qū)的絲瓜品種結(jié)構(gòu)、豐富絲瓜的消費類型。
[0016]3)通過本發(fā)明雜交方法，將篩選的非褐變自交系LJ-Ol作為父本與其他褐變材料進行雜交后，其雜交后代的褐變程度可以明顯降低，由此自交系LJ-Ol可以作為一份選育低褐變品種的核心材料進行利用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0017]圖1A為一種選育品種玉龍的田間表現(xiàn)示意圖。
[0018]圖1B為一種選育品種玉龍的商品果示意圖。
[0019]圖2為一種選育品種玉龍的父本、玉龍、母本、鄂絲瓜I號研磨后的褐變情況示意圖。
[0020]圖3A為一種一份普通絲瓜品種炒熟后的表現(xiàn)示意圖。
[0021]圖3B為一種選育品種玉龍炒熟后的表現(xiàn)不意圖。
[0022]圖3C為一種選育品種玉龍做湯后的表現(xiàn)不意圖。
[0023]圖4A為不同絲瓜的褐變度比較示意圖。
[0024]圖4B為不同絲瓜研磨后的褐變比較示意圖。
【具體實施方式】
[0025]實施例1:低褐變材料LWB-02的獲得
[0026]“白玉霜”系湖北省武漢市的地方品種，該品種夏季耐高溫、瓜皮黃白色，最大的優(yōu)點是瓜肉經(jīng)烹飪后不褐變或褐變較低。2000年3月，從湖北省武漢市大東門種子市場購買“白玉霜”絲瓜為原始材料，同年4月20日定植于武漢市洪山區(qū)九峰鄉(xiāng)，其田間表現(xiàn)為生長勢強、第一雌花節(jié)位在15節(jié)左右、果實長筒形，耐高溫、褐變低等特點。此外，還表現(xiàn)為瓜皮顏色泛綠、瓜長和瓜皮表面特征不整齊、商品性差的缺點。根據(jù)“第一雌花節(jié)位低、瓜形長筒形、瓜皮黃白色、微皺、瓜肉低褐變”育種目標，篩選優(yōu)良單株進行自交，經(jīng)過6代單株選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LWB-02。自交系LWB-02葉形掌狀深裂，葉色深綠，生長勢強，第一雌花節(jié)位在11-13節(jié)，主側(cè)、蔓均可結(jié)瓜，中熟，連續(xù)結(jié)果力強，瓜形為長圓筒形、瓜皮黃白色、微皺，瓜肉白色、松軟、細嫩、烹飪后瓜肉褐變低。
[0027]田間栽培方法: 3月9日在武漢市蔬菜科學(xué)研究所張家灣基地播種，采用地膜覆蓋加小拱棚外加草簾覆蓋保溫的方式進行育苗。播種前種子在55°C左右的溫水中浸泡l_2h，再在清水中浸泡12h，期間揉搓種子數(shù)次并換水1-2次，然后在光照培養(yǎng)箱中進行催芽1-2天，設(shè)定溫度為30°C，待種子露白后播種在塑料缽中，苗期管理方法同于一般大田生產(chǎn)。4月14日定植到大田中，采用高畦地膜覆蓋栽培，株距40-50cm，行距3-4m，以樁或水泥樁作支架，棚頂拉鐵絲和爬藤網(wǎng)，呈倒“U”性栽植。定植前延大棚走向在兩邊深翻整地施入底肥，每667 m2施菜餅肥60kg，獅馬復(fù)合肥(21-8-11)40kg，中化尿素40Kg。采用單蔓整枝方式，以主蔓結(jié)瓜為主。
[0028]實施例2:低褐變材料LJ-Ol的獲得
[0029]“玉露”系浙江省義烏地區(qū)的地方品種，該品種生長勢中等、果實果頂至中部較粗、尾部較細，呈短棍棒形，果皮薄、光滑、光澤度好、呈蠟質(zhì)狀，果肉淡綠色、緊致、水分足、非褐變。2000年3月份，自浙江金華市通濟街120號購得“玉露”絲瓜為原始材料，同年4月20日定植于武漢市洪山區(qū)九峰鄉(xiāng)，選擇果頂至中部與尾部粗細相對協(xié)調(diào)的單株，根據(jù)“第一雌花節(jié)位低、瓜形相對順直、瓜皮白色、光滑、有光澤、瓜肉非褐變”育種目標，經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LJ-OI。自交系LJ-OI生長勢中等、葉片掌狀深裂、葉色深綠、表面有黃色斑點，第一雌花節(jié)位在9-11節(jié)，主側(cè)、蔓均可結(jié)瓜，連續(xù)掛果力強，商品瓜形狀為短棍棒形，瓜皮白色、近瓜蒂端深綠色，瓜面平滑、有光澤，瓜肉淡綠色、肉質(zhì)細膩、緊致、味微甜、烹飪后不褐變。
[0030]田間栽培方法:3月9日在武漢市蔬菜科學(xué)研究所張家灣基地播種，采用小拱棚加地膜覆蓋的方式進行育苗。播種前種子在55°C左右的溫水中浸泡l_2h，再在清水中浸泡12h，期間揉搓種子數(shù)次并換水1-2次，然后在光照培養(yǎng)箱中進行催芽1-2天，設(shè)定溫度為30°C，待種子露白后播種在塑料缽中，苗期管理方法同于一般大田生產(chǎn)。4月14日定植到大田中，采用高畦地膜覆蓋栽培，株距40-50cm，行距3-4m，以木樁或水泥樁作支架，棚頂拉鐵絲和爬藤網(wǎng)，呈倒“U”性栽植。定植前延大棚走向在兩邊深翻整地施入底肥，每667 Hf施菜餅肥60kg，獅馬復(fù)合肥(21-8-11) 40kg，尿素40Kg。采用單蔓整枝方式，以主蔓結(jié)瓜為主。
[0031]實施例3:
[0032]低褐變雜交一代的配制
[0033]2007年，以低褐變絲瓜“白玉霜”的高代自交系LWB-02為母本，以非褐變絲瓜“玉露”的自交系LJ-Ol為父本進行雜交，配制成普通絲瓜雜交種“玉龍”。
[0034]繁殖品種“玉龍”的步驟
[0035]①播種育苗，3月10日播種，一般母本應(yīng)比父本早播5天；②定植，幼苗3-4片真葉期即可定植，株距40-50cm，行距3-4m，采用木樁或水泥樁作支架，棚頂拉鐵絲和爬藤網(wǎng)，呈倒“U”性栽植，父母本比例為1:12 ;③田間、水肥管理，植株爬頂棚以前去除主蔓上所有的側(cè)蔓，整個生長期要保證田間通風(fēng)透光；前期按一般常規(guī)方法進行水肥管理，座果后追施獅馬復(fù)合肥(21-8-11)20敁/6671112和中化尿素40Kg/667m2，田間保持濕潤沒有積水；④授粉，開花和掛果期，及時去除不符合父母本品種特征特性的植株，然后用紅色的膨體紗將次日開放的母本的雌花和父本的雄花扎緊，次日早上集中采摘雄花，6:00-9:00對雌花進行授粉，授粉后再扎住雌花花冠并在花柄處系線做標記，一般一株坐穩(wěn)3-4個瓜即可停止授粉，授粉結(jié)束后及時摘掉母本未授粉雌花或果實；?病蟲害防治，蟲害主要有瓜食蠅、黃守瓜，病害主要是疫病，其中瓜食蠅和疫病是造成絲瓜爛果的主要原因，生產(chǎn)上可以通過噴硫酸銅制劑、敵敵畏和掛黃板防治，特別是雨水來臨前及時噴施硫酸銅制劑防治疫病，雨水后及時排除積水。每4-5天噴一次，雨水來臨前及時排除積水并噴藥預(yù)防；⑥采收，種瓜由重變輕且瓜皮變黑或發(fā)現(xiàn)瓜皮出現(xiàn)大面積黑色病斑時進行采收，剝?nèi)ス掀みM行晾曬，待種瓜變干后取種。.
[0036]“玉龍”植株生長勢強，葉片掌狀深裂、深綠色、表面有黃色斑點，第一雌花節(jié)位8-10節(jié)，連續(xù)結(jié)果力強，有雌花序，水肥管理好的情況下可以一節(jié)多瓜，果實商品性好，較耐老，與其他品種相比晚采收2-3天仍能保持較好的商品性。瓜條長圓筒形，瓜長33.76cm,瓜徑4.70cm,單瓜重果347.33g。瓜皮白色、近瓜蒂端綠色、表面光亮、有微棱，瓜肉淺綠色、肉質(zhì)細膩微甜、烹飪后瓜肉低(非)褐變。
[0037]此外，以LJ-Ol為父本，以其他易褐變的綠皮絲瓜育種材料為母本，獲得的Fl代瓜皮為白色，其褐變度也明顯低于其母本。
[0038]實施例5:配制的雜交一代的褐變度比較
[0039]褐變可分酶促褐變和非酶促褐變，其中酶促褐變的發(fā)生主要是組織中的多酚氧化酶(PPO)與多酚類物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生褐色物質(zhì)所致。所以，多酚的含量及多酚氧化酶的活性與褐變度大小具有很大的關(guān)系。
[0040]利用本發(fā)明技術(shù)，以LJ-Ol為父本，分別以湖南地方品種湘潭肉絲瓜和江蘇省農(nóng)科院選育的“清香麗人”分離的高代自交系“LLR-02”為母本配制新組合，獲得白皮絲瓜白
1、白2 ;以LJ-Ol為母本，以LWB-02為父本配制新組合，獲得白皮絲瓜白4。
[0041]選擇白皮絲瓜LJ-01、玉龍、LWB-02、白4、白1、白2和綠皮絲瓜品種鄂絲瓜I號、江蔬I號、早冠為參試材料進行褐變度測定并比較。鄂絲瓜I號(武漢漢龍種苗有限責(zé)任公司提供)由武漢市蔬菜科學(xué)研究所選育、江蔬I號(購自湖北省武漢市大東門種子市場)由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院選育、早冠(購自湖北省武漢市大東門種子市場)由湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院選育。
[0042]田間設(shè)計:2009年6月26日上午，選擇正常、開放的雌花掛牌，記錄開花日期和材料編號，每份材料選5朵雌花，7月4上午采收，測定其褐變度及、多酚含量及多酚氧化酶活性。
[0043]褐變度的測定是采用改進張百剛(張百剛，2006)的方法，稱取2g絲瓜中部果肉，加入5ml95%乙醇提取,研磨稱勻衆(zhòng),在4000r/min下離心20min,取上清液在410nm下測其OD值，根據(jù)吸光度的大小直接確定褐變程度；另外通過研磨果肉，在室溫下放置20min，觀察其褐變情況。
[0044]多酚的提取和測定及多酚氧化酶的提取和活性測定是采用黃樹蘋的試驗方法(黃樹蘋等，2010 ;黃樹蘋等，2009)。
[0045]結(jié)果分析:
[0046]通過分光光度計測得各參試材料的褐變度，發(fā)現(xiàn)利用本發(fā)明配制的雜交一代白皮絲瓜其褐變度均低于綠皮絲瓜，鄂絲瓜I號的褐變度最高，BJ-Ol的褐變度最低；白皮絲瓜中，雜交一代的褐變度均其高于父本BJ-01，玉龍的褐變度高于其父本和母本；配制的雜交一代白皮絲瓜的多酚含量均低于綠皮絲瓜；綠皮絲瓜江蔬I號的多酚氧化酶的活性最高，早冠最低，玉龍的多酚氧化酶活性為中等水平。
[0047]基于配置新組合的果肉褐變度低、果實商品性好、豐產(chǎn)性高及耐高溫性等特點，故以玉龍作為本發(fā)明的選育品種。
[0048]表I參試材料的果實性狀及褐變度比較
[0049]
【權(quán)利要求】
1.一種低褐變絲瓜的雜交育種方法，其步驟如下: 1)以湖北省武漢市地方品種白玉霜絲瓜為原始材料，以第一雌花節(jié)位低、瓜形長筒形、瓜皮黃白色、微皺、瓜肉低褐變?yōu)橛N目標，經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LWB-02 ； 2)以浙江省義烏市地方品種玉露絲瓜為原始材料，以第一雌花節(jié)位低、瓜形相對順直、瓜皮白色、光滑、有光澤、瓜肉非褐變?yōu)橛N目標，經(jīng)過6代單株自交選育，獲得遺傳穩(wěn)定的高代自交系LJ-Ol ； 3)以LWB-02為母本，LJ-Ol為父本進行雜交，獲得一種低褐變絲瓜，具體為: 長江中下游地區(qū)按照下列步驟進行制種:①播種育苗，2月下旬-4月下旬育苗，在大棚、溫室內(nèi)鋪電熱線或采用地膜覆蓋加小拱棚外加草簾覆蓋進行育苗；②定植，幼苗3-4片真葉期即可定植，株距40-50cm，行距3-4m，采用木樁或水泥樁作支架，棚頂拉鐵絲和爬藤網(wǎng)，呈倒U形栽植，父母本比例為1: 8-12 ;③田間、水肥，去除過多的側(cè)蔓，整個生長期要保證田間通風(fēng)透光；前期按一般常規(guī)方法進行水肥管理，座果后追施復(fù)合肥和尿素，田間保持濕潤沒有積水；④授粉，開花和掛果期，及時去除不符合父母本品種特征特性的植株，然后用紅色的膨體紗將次日開放的母本的雌花和父本的雄花扎緊，次日早上集中采摘雄花，6:00-9:00對雌花進行授粉，授粉后再扎住雌花花冠并在花柄處系線做標記，一般一株坐穩(wěn)3-4個瓜即可停止授粉，授粉結(jié)束后及時摘掉母本未授粉雌花或果實病蟲害防治，蟲害主要有瓜食蠅、黃守瓜，病害主要是疫病，其中瓜食蠅和疫病是造成絲瓜爛果的主要原因，生產(chǎn)上可以通過噴硫酸銅制劑、敵敵畏和掛黃板防治，雨水來臨前及時噴施硫酸銅制劑防治疫病，雨水后及時排除積水，每4-5天噴一次，雨水來臨前及時排除積水并噴藥預(yù)防；⑥采收，種瓜由重變輕且瓜皮變黑或發(fā)現(xiàn)瓜皮出現(xiàn)大面積黑色病斑時進行采收，剝?nèi)ス掀みM行晾曬，待種瓜變干后取種。`
【文檔編號】A01H1/02GK103430834SQ201310406256
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月9日
【發(fā)明者】黃樹蘋, 徐長城, 談杰, 談太明, 張敏, 王春麗, 陳霞 申請人:武漢市蔬菜科學(xué)研究所