專(zhuān)利名稱(chēng)：：紅色萵苣的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種紅色萵苣植物，從其得到的萵苣球和引起萵苣著紅色的基因復(fù)合體。
背景技術(shù)：
：生活方式的改變，以及來(lái)自飯店、食品公司對(duì)多彩有趣裝飾的需求、甚至于家庭主婦對(duì)現(xiàn)成的已加工好的沙拉的需求不斷上升。因此，育種公司正在尋找各種帶有艷麗顏色，更佳風(fēng)味和多種質(zhì)地的品種。萵苣市場(chǎng)可分成三組，即完整的葉球，預(yù)切過(guò)的整葉球和鮮嫩葉片?，F(xiàn)在，有吸引力的紅色的已預(yù)切過(guò)的萵苣配料常常由目前可得到的“紅色”萵苣(Lactucasativa)、或菊苣rosso(Cichoriumintybus)、紅球甘藍(lán)或紅色甜菜提供。到目前為止，已知的“紅色”萵苣并不是真正的遍布葉片的紅色。特別是成球類(lèi)型或是僅僅在葉邊緣紅色，或是斑點(diǎn)狀紅色。葉心內(nèi)決不會(huì)完全紅色。原因就在于事實(shí)上紅色僅在葉球上那些暴露在日光、尤其是紫外線(xiàn)下的部分中表達(dá)。因此所謂的“紅色”萵苣的葉片主要是綠色，其紅色很難讓人對(duì)預(yù)切過(guò)的萵苣配料留下紅色的印象。通常，葉片紅色部分和綠色部分的過(guò)渡狀態(tài)是褐色。這種褐色視覺(jué)上認(rèn)為是不美的。紅色斑點(diǎn)萵苣會(huì)使人聯(lián)想到植物病害或血跡。目前植物育種人員反對(duì)選擇褐色和紅色斑點(diǎn)。另外，甚至發(fā)現(xiàn)萵苣包裝產(chǎn)業(yè)中和消費(fèi)者經(jīng)常丟棄斑點(diǎn)或褐色萵苣葉片。使用萵苣以外的其它蔬菜的葉片的缺點(diǎn)在于這些其它蔬菜的不同味道常常在體驗(yàn)后認(rèn)為不好吃。例如菊苣ros8o就是帶有些苦味的Cichoriumintybus。紅球甘藍(lán)的質(zhì)地完全不同于萵苣的較軟質(zhì)地。萵苣中花青素合成由紫外線(xiàn)誘導(dǎo)(參見(jiàn)例如Voipio和Autio,1995年，Responsesofred-leavedlettucetolightintensity,UV-Aradiationandrootzonetemperature.在ActaHorticuIturae399.Greenhouseenvironmentalcontrolandautomation.Eds.BJBailey,TTakakura.Kyoto,Japan.第183-187頁(yè)；Benoit等，1998年，EffectoofaphotoselectivegreenhousefilmonafewvegetablecropsintheBelgianNorthSeaclimate.在14thInternationalcongressonplasticsinagriculture，TelAviv，以色列，1997年3月，LaserPagesPublishing，Jerusalem，以色列，第81-92頁(yè)；Krizek等，1998年，InhibitoryeffectsofambientlevelsofsolarUV-AandUV-Bradiationongrowthofcv.NewRedFirelettuce,physiologiaPlantaruml03(I)，第1-7頁(yè)；Kleinhenz等，2003年，Variety,shading，andgrowthstageeffectsonpigmentconcentrationsinlettucegrownundercontrastingtemperatureregiment.Hortechnologyl3(4)，第677-683頁(yè))。許多植物種類(lèi)中紅色的顯示取決于花青素的產(chǎn)生。許多不同種類(lèi)的萵苣通常分成三種類(lèi)型。最通常的就是具有脆球(或卷心(iceberg))和黃油(butter)球的結(jié)球萬(wàn)苣。長(zhǎng)葉萬(wàn)苣(romaine)(或直立萬(wàn)苣(coslettuce))形成松散的直立球?！叭~片”萵苣類(lèi)型不結(jié)球,并且葉片松散。結(jié)球萵苣類(lèi)型中球心將或多或少不同程度緊閉，因此陽(yáng)光無(wú)法照射到。這樣在比如卷心萵苣(iceberglettuce)和黃油萵苣(butterlettuce)閉合球體中或在具有松散的閉合球體的長(zhǎng)葉萵苣(romainelettuce)中不可能產(chǎn)生花青素。相關(guān)問(wèn)題是在玻璃溫室、塑料拱棚或密閉容器中生長(zhǎng)的紅萵苣缺乏紅色著色作用。由于缺少紫外線(xiàn)輻射，由于紫外線(xiàn)被玻璃或塑料覆蓋物反射或者在人造吸收光譜中缺少紫外線(xiàn)，花青素的表達(dá)比室外條件下少得多。這樣在室內(nèi)條件下降低了生產(chǎn)紅色萵苣的可能性，因此降低了生產(chǎn)免于受到如冷、熱以及各種降水的惡劣天氣影響的紅色萵苣的可能性。
發(fā)明內(nèi)容現(xiàn)在，本發(fā)明提供了一種紅萵苣，其中包括心的整個(gè)球具有紅色葉片。本發(fā)明紅萵苣的心葉片大體上完全紅色，意味著其含有極高的花青素/葉綠素比值。這是令人驚奇的，因?yàn)檎J(rèn)為花青素合成必須要的光尤其是紫外光不能進(jìn)入球心。這證明本發(fā)明中萵苣中光-獨(dú)立機(jī)制是產(chǎn)生花青素的原因。這種光-獨(dú)立性還允許結(jié)球或不結(jié)球紅萵苣在玻璃溫室或塑料拱棚或密閉容器中栽培。后者使用通常在紅萵苣發(fā)育中帶來(lái)問(wèn)題的人造吸收光。這是因?yàn)榛ㄇ嗨睾铣傻恼T導(dǎo)通常必須要紫外波長(zhǎng)(280-400納米)，而在光譜中或多或少缺乏該紫外波長(zhǎng)。在玻璃或塑料下，紫外輻射的類(lèi)似缺乏通常是由遮蓋物強(qiáng)烈的紫外阻截引起的。然而，由于本發(fā)明紅萵苣的紫外光-獨(dú)立花青素表達(dá)，所以其適合于玻璃溫室，塑料大棚和密閉容器栽培。這是因?yàn)楸景l(fā)明的光-獨(dú)立機(jī)制，所述光-獨(dú)立機(jī)制還可表示為“紫外光-獨(dú)立花青素表達(dá)”或“紫外光-獨(dú)立紅色著色作用”。本發(fā)明的具體實(shí)施例中，花青素和葉綠素之間的吸光率比值A(chǔ)523/A665在4和50之間，優(yōu)選9和27之間。還沒(méi)有完全了解本發(fā)明花青素表達(dá)是否完全獨(dú)立于紫外輻射，或者其被比常規(guī)紅萵苣植株中花青素表達(dá)通常所需的低的多的紫外輻射水平激發(fā)。但是，對(duì)于本發(fā)明實(shí)際有用性來(lái)說(shuō)，這個(gè)差異不要緊。盡管本發(fā)明在結(jié)球型萵苣中特別有效，但是本發(fā)明的光-獨(dú)立紅色著色也能用在其它類(lèi)型萵苣，比如散葉萵苣和用于采收又小又鮮嫩葉片的幼小萵苣植株培養(yǎng)的小葉栽培中。本發(fā)明紅萵苣的譜系在實(shí)施例1中給出。本發(fā)明涉及親本的所有后代，其球心內(nèi)具有紅色葉片，并且符合本發(fā)明一個(gè)或多個(gè)其它要求，比如心葉片的花青素和葉綠素之間的比值。另外，具有本發(fā)明紫外獨(dú)立的紅色著色作用的不結(jié)球、散葉或小葉萵苣植株也認(rèn)為是完全紅色結(jié)球萵苣植株的后代，因此是本發(fā)明的一部分。選擇已經(jīng)是或者可能會(huì)向本發(fā)明萵苣植株發(fā)展的萵苣植株可能要根據(jù)視覺(jué)上的紅色幼小植株的選擇(步驟I)。在玻璃或塑料下培育它們可能隨后在紫外-依靠花青素表達(dá)即少量的著紅色，和紫外-獨(dú)立花青素表達(dá)即相當(dāng)強(qiáng)烈的著紅色之間產(chǎn)生區(qū)別。種植培育后者，直到結(jié)球。接著，具有紅色內(nèi)心葉片的植株視覺(jué)上的選擇是通過(guò)切掉每個(gè)植株的頂部進(jìn)行。隨后選擇紅心植株去繁殖后代種子。選擇雜交后代來(lái)提高著紅色水平，和/或者得到所需要的成熟植株結(jié)球水平。正如在此使用的，當(dāng)萵苣植株得到“開(kāi)放式球”或“閉合式球”時(shí)，根據(jù)UPOV對(duì)于特征“結(jié)球形成”的指導(dǎo)方針(“TG/13/9.Lettuce(LactucasativaL.)Guidelinesfortheconductoftestsfordistinctness,uniformityandstability，，，InternationalUnionfortheProtectionofNewVarietiesofPlants，日內(nèi)瓦，2004)來(lái)定義結(jié)球。本發(fā)明萵苣心在花青素和葉綠素之間具有吸光率比值A(chǔ)523/A665，其優(yōu)選高于9，更優(yōu)選高于13或更高。在通常的紅萵苣中這一比值從沒(méi)發(fā)現(xiàn)超過(guò)3。用于確定本發(fā)明比值的葉綠素和花青素濃度是借助于分光光度測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定。樣本制備和分析在實(shí)施例2中全A屮口EDο應(yīng)當(dāng)注意到，本發(fā)明心葉片中花青素水平可能和在其它不結(jié)球的萵苣品種中發(fā)現(xiàn)的水平一樣高。這種不結(jié)球品種的一些例子為40-0203103-B(KnerrLD,2005,Lettucecultivar40-0203103-Bo美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朥S2005/0144672A1)，Galactic,NewRedFire,Rolina(Kleinhenz等，2003,Variety,shadingandgrowthstageeffectsonpigmentconcentrationsinlettucegrownundercontrastingtemperatureregimens.Horttechnologyl3(4)，第677-683頁(yè))RedSaladBowl,和Sesam(Voipio1.andAutioJ.，1995.Responsesofred-leavedlettucetolightintensity,UV-Aradiationandrootzonetemperature.Actahorticulturae399.第183-187頁(yè))。但是，與本·發(fā)明心葉片相比，這些品種具有非常高的葉綠素水平的心葉片，這是不結(jié)球的特性導(dǎo)致的高曝光量的結(jié)果。另一方面，可能發(fā)現(xiàn)本發(fā)明心葉片中和結(jié)球品種心葉片中具有類(lèi)似的低葉綠素水平。然而，這些結(jié)球品種心葉片與本發(fā)明心葉片相比，沒(méi)有顯示高的花青素水平。由于心葉片的低曝光量，所以通常少量地誘導(dǎo)花青素合成。本發(fā)明中，花青素的產(chǎn)生是紫外-獨(dú)立。這就解釋了為什么本發(fā)明花青素/葉綠素比值是無(wú)先例的高水平。這種紫外-獨(dú)立的紅色著色新形式在結(jié)球萵苣植株中發(fā)現(xiàn)并發(fā)展，且不同于現(xiàn)有技術(shù)中紅色著色作用。但是，本發(fā)明也涉及具有本發(fā)明的“紫外-獨(dú)立紅色著色作用”特征的不結(jié)球萵苣植株，比如松散葉片或幼小葉片萵苣植株，或生長(zhǎng)在玻璃溫室或塑料大棚內(nèi)的萵苣植株，在那里紫外光的量更低。心葉片紅色著色作用也記在RHS顏色記錄表(TheRoyalHorticulturalSociety,London,UK)。本發(fā)明心葉片薄層顏色(特別是葉片頂部)被評(píng)為183A,184A或187B,它們都在紫灰色記錄組內(nèi)。其它葉片薄層顏色被評(píng)為180B，180C,180D或181C，它們都在紅灰色記錄組內(nèi)。也可能對(duì)在溫室或塑料下生長(zhǎng)的植株的紅色著色作用和花青素表達(dá)進(jìn)行評(píng)定，所述在溫室或塑料下即為和室外條件相比具有減少的紫外輻射水平的條件。此處本發(fā)明植株比常規(guī)紅萵苣還能顯示更高的花青素水平和更深的紅色。尤其是本發(fā)明植株新長(zhǎng)出的葉片比通常紅萵苣植株新長(zhǎng)出的葉片紅得更多。本發(fā)明紅萵苣遺傳分析在實(shí)施例2中描述。在此發(fā)現(xiàn)至少三個(gè)基因涉及球心著紅色。本發(fā)明涉及能表達(dá)花青素和具有另外至少三個(gè)涉及球心著紅色基因的萵苣植株。優(yōu)選地，本發(fā)明植株包括實(shí)施例2描述的完整基因復(fù)合體。通過(guò)緊密連鎖的DNA標(biāo)記，比如AFLP，RFLP,RAPD,SCAR,CAPS,SSR或SNP，確定涉及本發(fā)明著紅色的基因座的存在是可能的。例如，在上述種群和其后代中進(jìn)行標(biāo)記-性狀連鎖分析能提供這種緊密連鎖的DNA標(biāo)記。萵苣植株內(nèi)是否存在與本發(fā)明內(nèi)部葉片著紅色類(lèi)似的基因組成即確定萵苣植株是否是根據(jù)本發(fā)明的植株能通過(guò)比較本發(fā)明這種可能植株的表型和本發(fā)明已知植株的表型來(lái)容易地確定。表型可以通過(guò)幾個(gè)方面確定，例如內(nèi)部葉片著紅色情況，心葉片花青素/葉綠素比值，和/或者在玻璃或塑料下生長(zhǎng)植株的著紅色情況。確定本發(fā)明的可能植株和本發(fā)明的已知植株之間基因組成相似性的另一方式是通過(guò)比較可能植株的標(biāo)記基因型和本發(fā)明的已知植株標(biāo)記基因型。標(biāo)記基因型通過(guò)一套基于DNA標(biāo)記進(jìn)行定義，比如AFLP，RFLP,RAPD,SCAR,CAPS,SSR或SNP，它們與涉及本發(fā)明紅色表達(dá)的基因座緊密連鎖。確定基因組成相似之處的另一方式是比較本發(fā)明可能植株的基因型和本發(fā)明已知植株的基因型。該基因型比較在F2-種群上進(jìn)行，F(xiàn)2種群是由本發(fā)明可能植株和已知植株之間雜交得到的Fl-代自花授粉而衍生的。F2-種群能用于調(diào)查表型即，內(nèi)部葉片著紅色分離的不存在。所有比較的表型也能通過(guò)幾個(gè)方面確定，例如心葉片花青素/葉綠素比值，或者在玻璃或塑料下生長(zhǎng)的植株中著紅色情況。根據(jù)本發(fā)明的紅萵苣植株的種子在2005年7月18日保藏到NCMB，登記號(hào)是NCIMB41337,NCIMB41338和NCMB41339。本發(fā)明還涉及這些種子的后代，以及涉及通過(guò)雜交或分子生物技術(shù)的方式而獲得引起本發(fā)明著紅色的植株基因組成或基因復(fù)合體的植株。本發(fā)明還涉及這些保持或者獲得本發(fā)明著紅色性狀的植株的后代。為了將對(duì)紅色起作用的基因轉(zhuǎn)到另一植株，可以使用回交育種。為此，期望的純合栽培品種或自交種(inbred)作為回交親本。待轉(zhuǎn)的性狀源稱(chēng)為供方親本。最終得到的植株期望具有回交親本的屬性(例如，栽培品種)和轉(zhuǎn)自供方親本的所期望性狀。初始雜交后，擁有供方親本表型(心內(nèi)葉片著紅色)的個(gè)體被篩選出來(lái)并且和親本重復(fù)雜交(回交)。最終得到的植株期望具有回交親本的屬性(例如，栽培品種)和轉(zhuǎn)自供方親本的所期望性狀。倘若著紅色遺傳比其它期望性狀或性狀組合更加復(fù)雜，帶有紅色心葉片的親本可用作回交親本，而帶有其它期望性狀或性狀組合的親本可用作供方親本。其它通常用于不同性狀和作物的育種方法的描述可見(jiàn)幾本參考書(shū)(例如，“PrinciplesofPlantBreeding”JohnWileyandSon,第115-161頁(yè)，1960；Allard,1960;Simmonds,1979；Sneep等，1979；Fehr,1987)。本發(fā)明進(jìn)一步在下述實(shí)施例描述，并且所述實(shí)施例僅僅是描述的目的，而在任何情況下不用于限制本發(fā)明。圖1出示了對(duì)于來(lái)自“99P.30637”Xcv.“SharpShooter”雜交的212F3-系種群而言，外部和內(nèi)部葉片著紅色的系內(nèi)分離分布。紅色著色的三個(gè)分類(lèi)應(yīng)用于如下種群:“紅色外部”，即具有紅色外部葉片植株的系內(nèi)頻率，而不考慮內(nèi)部葉片顏色；“紅色外和紅色內(nèi)”，即具有紅色外部和紅色內(nèi)部葉片植株的系內(nèi)頻率；“紅色內(nèi)/紅色外”，即在具有紅色外部葉片的所有種系植株中具有紅色內(nèi)部葉片植株的頻率。根據(jù)遺傳模式，O=觀察的；E=期望的。圖2出示了基于“99P.30637”Xcv.“SharpShooter”雜交分離的花青素表達(dá)的遺傳模式。圖3a出示了本發(fā)明植株。該幼小植株是從03P82421系種子得到的植株，03P82421系是植株99P38154的三代自花授粉25的后得到的。圖3b，3c和3d分別出示了親本Pierrot,Pippo和Gringo的幼小植株。圖3e和3f分別出示了對(duì)照品種Apache和Bijou的幼小植株。所有這些幼小植株都生長(zhǎng)在溫度16°C下光照14小時(shí)和溫度12°C下黑暗10小時(shí)的生長(zhǎng)室中的泥炭塊中。光通過(guò)PhilipsTLD36W840REFLEX管產(chǎn)生，每0.24平方米I管，距離上述植物之上0.6米。圖4出示了與商業(yè)品種Pippo,Pierrot和Gringo的幼小葉片相比較的本發(fā)明植株的幼小葉片，用“NEW”表示。這些幼小植株都生長(zhǎng)在溫度16°C光照14小時(shí)和溫度12°C黑暗10小時(shí)的生長(zhǎng)室中的泥炭塊中。光通過(guò)PhilipsTLD36W840REFLEX管產(chǎn)生，每0.24平方米I管，距離上述植物之上0.6米。圖5-8出示了本發(fā)明植株(01P80146)分別和商業(yè)品種Darkland(用“99R10044”表示；圖5a-5d),Pierrot(用“95G2237”表示；圖6a_6d)，Roxy(用“99R10283”表示；圖7a-7d)和Sierra(用“95G1986”表示，圖8a-8d)之間的比較。a-圖(5a,6a,7a,8a)出示了完整采收的葉球，b-圖(5b，6b，7b，8b)出示了無(wú)外部葉片的心，c-圖(5c，6c，7c，8c)出示了心的縱向切面。d-圖(5d，6d，7d，8d)出示了切開(kāi)的心葉片。本發(fā)明萵苣植株在葉球心里是完全紅色，而其它萵苣植株并不是這樣。所有植株于2002年都生長(zhǎng)在法國(guó)Aramon:2002年I月10日播種，2002年2月15日移栽到可信任的露地，2002年4月25日采收。實(shí)施例實(shí)施例1本發(fā)明紅萵苣譜系本發(fā)明萵苣根據(jù)下面譜系得到:1986年在cv.Pippo(RijkZwaan;著紅色)植株和cv.BlondeMaraichere(Caillard;著綠色)植株之間雜交。1988年，從上述雜交得到的紅色后狀植株用作和cv.Gringo(RijkZwaan;著紅色)植株雜交的父本。同年，在cv.Pierrot(RijkZwaan;著紅色)植株和cv.Roxette(RijkZwaan;著綠色)植株進(jìn)行雜交。1989年，從上述雜交得到的紅色后代植株用作和cv.Krizet(RijkZwaan;著綠色)植株雜交的父本。1992年，從上述KrizetX(PierrotXRoxette)雜交選出紅色F3-后代植株，并且用它作為和父本植株雜交中的母本，父本是從上述GringoX(PippoXBlondeMaraichere)雜交選出的紅色后代植株。1995年從新得到的1992雜交種中選出紅色F4-植株，并且用它作為和cv.Roxette(RijkZwaan;著綠色)植株雜交中的母本。類(lèi)型、成球和顏色的選擇從雜交開(kāi)始的F2-，F(xiàn)3-和F4-代進(jìn)行，最終在1998年得到紅色F4-植株(98P.31582)A5-系從顏色(紅色對(duì)比綠色)上出現(xiàn)分離，但是在下一代中的篩選得到具有完全紅色心葉片的三個(gè)球F5-植株(99P.38152；99P.38154；99P.30637)，接下來(lái)幾年繁殖這些植株。顯示了不分離綠色植株的后代和種子以編號(hào)02R.2413，01R.1439，02R.2418保藏。這些F5-植株和其后代已用作進(jìn)一步育種具有光-獨(dú)立紅色著色作用的萵苣的親本源?？傊?，可以說(shuō)在使用的親本品種當(dāng)中，也就是Pippo,BlondeMaraichere,Gringo,Pierrot,Roxette和Krizet在球心中都不具有特有的紅色葉片。本發(fā)明包括來(lái)自這些紅色和綠色親本品種的獨(dú)特的并且新的基因組合，其在球心內(nèi)提供完全紅色葉片。實(shí)施例2本發(fā)明紅萵苣的遺傳分析正如在此使用的，基因座定義為染色體上基因所在的特定位置。(GriffithsAJF,MillerJH,Suzuki,DT,LewontinRC,Gelbart,WM.‘Anintroductiontogeneticanalysis.，6thedition.1996.WHFreemanandCompany,NewYork.)給定植株中引起著紅色的基因座數(shù)目可通過(guò)對(duì)該植株與著綠色cv“SharpShooter”雜交后代的遺傳分析確定。本發(fā)明紅萵苣的遺傳分析通過(guò)以下步驟進(jìn)行:在編號(hào)99P.30637的F5-植株的后代植株，即本發(fā)明植株和色彩不鮮艷的著綠色的cv.SharpShooter卷心萵苣植株(SVS,Waycott等，1999:美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，973，232)之間雜交。將源自該雜交后代的212個(gè)隨機(jī)F2-植株繁殖成F3-系。對(duì)上述212個(gè)F3-系在荷蘭Fijnaart的可信任的室外試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)定。2002年6月17日在泥炭塊上播種，幼苗在玻璃溫室中生長(zhǎng)，2002年7月5日移栽到田間。采收日期(觀察時(shí)間)從2002年8月19日到8月23日。試驗(yàn)田大小是每一F3-系24棵植株，即4行，其中每行6棵植株。沒(méi)有重復(fù)種系，因?yàn)橐粋€(gè)試驗(yàn)中顏色特征的表達(dá)是非常穩(wěn)定的。觀察在每一F3-植株中進(jìn)行。·觀察特征是:a)顏色，并且如果是紅色，其外部葉片上強(qiáng)度和表達(dá)圖案，b)顏色，并且如果是紅色，其內(nèi)部葉片上強(qiáng)度和表達(dá)圖案，c)結(jié)球程度，d)如果是綠色外部葉片:在如下2組中評(píng)定:鮮艷或不鮮艷。以如下的遞增順序評(píng)定著紅色強(qiáng)度和表達(dá)圖案，所述遞增順序?yàn)?1)淡色或紅色，即外部和內(nèi)部葉片邊緣，或內(nèi)部葉片底部著淡紅色，2)紅斑，3)綠斑，即紅葉片表面上的綠斑，4)完全紅色，即外部葉片的曝光部分上無(wú)斑點(diǎn)的強(qiáng)烈紅色，并且在內(nèi)部葉片發(fā)生整體內(nèi)部葉片上無(wú)斑點(diǎn)的強(qiáng)烈紅色。用I)稍微打開(kāi)的葉球,象長(zhǎng)葉萵苣(romaine)或直立萵苣(coslettuce),和2)帶有清晰重疊葉片的強(qiáng)硬葉球、(象卷心萵苣(iceberglettuce))兩者記錄結(jié)球。試驗(yàn)中一些植株在采收前死亡。其中預(yù)期5088棵植株中，即212X24，有總數(shù)5007棵F3-植株到達(dá)采收期，并且對(duì)其進(jìn)行了評(píng)定(見(jiàn)表I)。所有植株出示了結(jié)球水平，該結(jié)球水平至少與長(zhǎng)葉萵苣(!"omaine)或直立萵苣具有可比性。數(shù)據(jù)顯示從總數(shù)212列里面有55列完全綠色分離。從具有至少一棵著紅色植株的157列里面，有28列是包括外部葉片上全部顯示花青素表達(dá)的植株。從上述28列里面，有8列是包括心葉片上全部顯示花青素表達(dá)的植株。具有至少一棵著紅色植株的157列中，33列中的著紅色植株僅僅在外部葉片而不是在心葉片顯示花青素表達(dá)。157列中著紅色植株的另外33列中的著紅色植株在外部葉片和心葉片上都顯示了花青素表達(dá)。剩下的91列著紅色植株里面都在外部葉片顯示了花青素表達(dá)。然而，上述植株顯示了在心葉片內(nèi)花青素表達(dá)的種系內(nèi)分離。5007棵植株里面沒(méi)有一棵植株顯示心葉片花青素表達(dá)與外部葉片著綠色表達(dá)結(jié)合。因此，推導(dǎo)出在外部葉片中造成花青素表達(dá)的一個(gè)或多個(gè)基因?qū)τ谛娜~片中花青素表達(dá)是必要的。紅色和綠色之間分離時(shí)，外部葉片著色中紅色和綠色之間的分離比值范圍從23:1到1:22。對(duì)于內(nèi)部葉片，紅色和綠色著色之間分離比值范圍從18:I到1:23，其中排除了所有具有綠色外部葉片的植株。表I出示了對(duì)于隨機(jī)來(lái)自“99P.30637"Xcv.“SharpShooter”雜交的212個(gè)F3-系，其外側(cè)和內(nèi)側(cè)葉片的紅色和綠色著色植株的種系內(nèi)分布。表I權(quán)利要求1.萵苣物種中的結(jié)球萵苣植株，其中包括心的整個(gè)球具有紅色葉片。2.即使在缺少短于400nm波長(zhǎng)的輻射下仍在心中具有紅色葉片的的萵苣植株。3.如權(quán)利要求2所述的萵苣植株，其中從播種到觀測(cè)的整個(gè)時(shí)期，生長(zhǎng)環(huán)境中缺少短于400nm波長(zhǎng)的輻射。4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的萵苣植株，其中心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在4和50之間。5.如權(quán)利要求4所述的萵苣植株，其中心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在9和27之間。6.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的萵苣植株，其中十片超過(guò)I厘米的最年輕心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在4和50之間。7.如權(quán)利要求6所述的萵苣植株，其中十片超過(guò)I厘米的最年輕心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在9和27之間。8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的萵苣植株，其具有引起心中心葉片著紅色的基因組成，該基因組成包括用于花青素表達(dá)的基因座，至少兩個(gè)涉及球心內(nèi)著紅色的基因座，以及任選的至少兩個(gè)涉及著紅色強(qiáng)度的基因座。9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的萵苣植株，其是從2005年7月18日保藏到NCIMB的種子得到的，所述種子的登記號(hào)是NCMB41337，NCIMB41338和NCMB41339。10.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的萵苣植株，其具有2005年7月18日保藏到NCIMB，登記號(hào)是NCMB41337，NCMB41338和NCMB41339的種子的的基因組成，該基因組成引起心中葉片著紅色。11.萵苣物種的萵苣植株，即使從播種到觀測(cè)的整個(gè)時(shí)期，生長(zhǎng)環(huán)境中缺少短于400nm波長(zhǎng)的輻射，其還具有紅色葉片。12.如權(quán)利要求11所述的萵苣植株,其中花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在4和50之間。13.如權(quán)利要求11所述的萵苣植株,其中花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在9和27之間。14.如權(quán)利要求11或12所述的萵苣植株，其中十片超過(guò)I厘米的最年輕心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在4和50之間。15.如權(quán)利要求14所述的萵苣植株，其中十片超過(guò)I厘米的最年輕心葉片的花青素和葉綠素之間吸光率比值A(chǔ)523/A665在9和27之間。16.權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的萵苣植株的后代。17.權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)所述的萵苣植株的種子。18.如權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)所述的萵苣植株葉球。19.在萵苣物種的萵苣植株中引起包括心的整個(gè)球的葉片都著紅色的基因復(fù)合體，其包括用于花青素表達(dá)的基因座，至少兩個(gè)涉及球心內(nèi)著紅色的基因座，以及任選的至少兩個(gè)涉及著紅色強(qiáng)度的基因座。20.如權(quán)利要求19所述的基因復(fù)合體，其存在于2005年7月18日保藏到NCMB，登記號(hào)是NCMB41337，NCIMB41338和NCMB41339的種子中。全文摘要本發(fā)明涉及一鐘包括心的整個(gè)球具有紅色葉片的萵苣物種的結(jié)球萵苣。心內(nèi)的紅色葉片即使在缺少短于400nm波長(zhǎng)的輻射下還是紅色，其中從播種到觀測(cè)的整個(gè)時(shí)期，其生長(zhǎng)環(huán)境中缺少短于400nm的波長(zhǎng)輻射?；ㄇ嗨睾腿~綠素之間的比值在4和50之間，優(yōu)選9和27之間。本發(fā)明還涉及植物的后代。文檔編號(hào)A01H1/04GK103250625SQ20131005222公開(kāi)日2013年8月21日申請(qǐng)日期2006年9月20日優(yōu)先權(quán)日2005年9月20日發(fā)明者C·M·莫爾,E·C·J·斯密特斯,A·M·J·阿莫蘭,J·W·舒爾特,K·雷尼恩克申請(qǐng)人:瑞克斯旺種苗集團(tuán)公司