專利名稱：桑氏鏈霉菌kj40菌株及其液體制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的是桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株及其液體制劑。
背景技術：
紫紋羽病又稱紫色根腐病，寄主范圍廣泛，達45科，76屬，100多種，主要危害松、柏、杉、刺槐、楊、榆、桑、柳、蘋果等。病原菌為擔子菌亞門層菌綱、木耳目、木耳科、卷擔子屬的紫卷擔子菌 Helicobasidium purpureum(tul. )Pat.異名 Helicobasidium inompaTanaka. Jacz.稱桑卷擔菌，是一類重要的土傳病害。目前對林木紫紋羽病的防治措施主要有，對苗木嚴格檢疫，避免栽植帶病苗木；加強栽培管理，增強樹勢；采用波爾多液、硫酸銅、硫酸亞鐵、代森銨、福爾馬林、福美砷藥液進行灌根。但由于長時期的施用化學農(nóng)藥不僅會造成病原菌抗藥性的增強，也會給人們的身體健康和生態(tài)環(huán)境帶來嚴重傷害，因此針對 土傳根病有必要探索生物防治等新的防治途徑，生物防治是生態(tài)學領域的一個應用學科分支，是基于生態(tài)平衡的原理，引進有益生物基因或基因產(chǎn)物，達到穩(wěn)定、有效地防治靶標病(蟲)，生物農(nóng)藥(biopesticides)是利用生物活體或者其代謝產(chǎn)物對有害生物進行防治的一類制劑，是生物防治的物質(zhì)基礎和重要手段。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種具有防病、促生多重功能的桑氏鏈霉菌(Streptomycessampsonii)KJ40 菌株。該菌株于2010年7月10日分離自四川雅安市雨城區(qū)老板山楊樹根際。該菌株已于2012年4月13日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址中國北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCCNO. 5996,分類命名為桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)。所述的桑氏鏈霉菌KJ40菌株的液體制劑，其制備方法為①一級斜面種子常規(guī)方法制作改良高氏一號斜面培養(yǎng)基，接種桑氏鏈霉菌KJ40后在26-280C下培養(yǎng)48小時制成一級斜面種子；②二級液體種子改良高氏一號培養(yǎng)液經(jīng)高壓滅菌后，按IOOmL液體盛于300mL三角瓶比例裝瓶，在無菌狀態(tài)接種KJ40斜面種子，每瓶接種2支斜面種子，溫度26-28°C，初始PH值7. 0,120r/min振蕩培養(yǎng)36h，制成桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子；③液體發(fā)酵改良高氏一號培養(yǎng)液，經(jīng)高壓滅菌后，按200mL液體盛于500mL三角瓶比例裝瓶，在無菌狀態(tài)接種上述桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子，接種量10 %，溫度26-28°C，初始pH值7. 0,120r/min振蕩培養(yǎng)72h，制成桑氏鏈霉菌KJ40液體制劑。桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株，不僅能有效控制楊樹紫根病，且能改善根際微生物環(huán)境，促進植物生長，具有防病促生優(yōu)化根系微生態(tài)環(huán)境三重功倉泛。
本發(fā)明篩選出的的桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株為一種具有防病、促生多重功能的新菌株?？深A防紫紋羽病的發(fā)生，顯著提高楊樹生長能力，大幅提升生產(chǎn)效益。桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40新菌株對紫紋羽病有治療作用，能改善土壤生物活性，且施用一次可長期有效、能持續(xù)控病，大幅降低成本。
具體實施例方式以下結合具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。(I)桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40液體制劑的發(fā)酵①一級斜面種子常規(guī)方法制作改良高氏一號斜面培養(yǎng)基(KN03lg，KH2PO4O. 5g，MgSO4. 7H20 0. 5g，NaC10. 5g，F(xiàn)e2 (S04) 3. 7H20 0. 01g，可溶性淀粉 20g，瓊脂 17g，水 1000ml)，接種桑氏鏈霉菌KJ40后在26-28°C下培養(yǎng)48小時制成一級斜面種子。 ②二級液體種子改良高氏一號培養(yǎng)液(KNO3Ig,KH2PO4O. 5g，MgSO4. 7H20 0. 5g，NaClO. 5g，F(xiàn)e2(S04)3. 7H20 0. 01g，可溶性淀粉20g，楊樹根浸潰液1000ml)經(jīng)高壓滅菌后，按IOOmL液體盛于300mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態(tài)接種KJ40斜面種子，每瓶接種2支斜面種子，溫度26-28°C，初始pH值7. 0，120r/min振蕩培養(yǎng)36h，制成桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子。③液體發(fā)酵改良高氏一號培養(yǎng)液(KNO3Ig,KH2PO4O. 5g，MgSO4. 7H20 0. 5g，NaClO. 5g，F(xiàn)e2(S04)3. 7H20 0. 01g，可溶性淀粉20g，楊樹根浸潰液1000ml)經(jīng)高壓滅菌后，按200mL液體盛于500mL三角瓶比例(通氧控制)裝瓶，在無菌狀態(tài)接種上述桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子，接種量10 % (體積比)，溫度26-28°C，初始pH值7. 0，120r/min振蕩培養(yǎng)72h，制成桑氏鏈霉菌KJ40液體制劑。平板法測定KJ40對楊樹紫根病菌(Helicobasidiumpurpureum(Tul.) Pat 抑菌率達到 100% 以上。(2)制劑保存瓶裝制劑常溫保存半年或低溫(4度)I年半不影響防治和促生效果。(3)田間施用①預防處理未發(fā)病楊樹用上述液體制劑100-200倍(體積比)稀釋度沿根系幅面灌根，每株100毫升，每年春季施用一次，可防病促生、改善土壤微生物區(qū)系。②防治處理發(fā)病楊樹按50-100倍(體積比)稀釋度沿根系幅面灌根及附近土壤淋灌，每株200毫升，春、夏各一次，連續(xù)三年，可治病促生、改善土壤微生物區(qū)系。表I桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)KJ40預防和促生功能參數(shù)未發(fā)病楊樹林地(I年生)
權利要求
1.一種桑氏鏈霉菌KJ40菌株，該菌株保藏在中國北京市朝陽區(qū)中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC NO. 5996，分類命名為桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)。
2.權利要求I所述的桑氏鏈霉菌KJ40菌株的液體制劑，其特征在于，其制備方法為①一級斜面種子常規(guī)方法制作改良高氏一號斜面培養(yǎng)基，接種桑氏鏈霉菌KJ40后在26-28°C下培養(yǎng)48小時制成一級斜面種子； ②二級液體種子改良高氏一號培養(yǎng)液經(jīng)高壓滅菌后，按IOOmL液體盛于300mL三角瓶比例裝瓶，在無菌狀態(tài)接種KJ40斜面種子，每瓶接種2支斜面種子，溫度26-28°C，初始pH值7. 0,120r/min振蕩培養(yǎng)36h，制成桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子； ③液體發(fā)酵改良高氏一號培養(yǎng)液，經(jīng)高壓滅菌后，按200mL液體盛于500mL三角瓶比例裝瓶，在無菌狀態(tài)接種上述桑氏鏈霉菌KJ40 二級液體種子，接種量10%，溫度26-28°C，初始PH值7. 0,120r/min振蕩培養(yǎng)72h，制成桑氏鏈霉菌KJ40液體制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種桑氏鏈霉菌KJ40菌株，該菌株于2010年7月10日分離自四川雅安市雨城區(qū)老板山楊樹根際。該菌株已于2012年4月13日保藏在中國北京市朝陽區(qū)中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCC NO.5996，分類命名為桑氏鏈霉菌(Streptomyces sampsonii)。本發(fā)明篩選出的的桑氏鏈霉菌KJ40新菌株為一種具有防病、促生多重功能的新菌株?？深A防紫紋羽病的發(fā)生，顯著提高楊樹生長能力，大幅提升生產(chǎn)效益。桑氏鏈霉菌KJ40新菌株對紫紋羽病有治療作用，能改善土壤生物活性，且施用一次可長期有效、能持續(xù)控病，大幅降低成本。
文檔編號A01P21/00GK102703343SQ20121012269
公開日2012年10月3日 申請日期2012年4月25日 優(yōu)先權日2012年4月25日
發(fā)明者朱天輝, 李姝江, 雷美艷, 韓珊 申請人:四川農(nóng)業(yè)大學